Travmatik Beyin Hasarından Sonra Yetişkin Sıçanlarda Mekansal Çalışma Belleğini Değerlendirmek için Bir Metrik Test

Travmatik beyin hasarı genellikle hafıza bozukluğu ile ilişkilidir. Burada, travmatik beyin hasarından sonra spacial çalışma hafızasını bir metrik görevle değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. Ölçüm görevlerinin başlıca avantajları arasında dinamik gözlem imkanı, düşük maliyetli tekrarlanabilirlik, göreceli uygulama kolaylığı ve düşük stres ortamı sayılabilir.

Paraziter sıvı perküsyon yaralanmasından sonra nörolojik şiddet skorunu değerlendirmek için, yetişkin Sprague Dawley sıçanını 50 santimetre çapında bir dairenin ortasına üç kez yerleştirin ve daireden çıkma yeteneğini izleyin. Sağ refleks kaybını test etmek için, hayvanı avucunun içine sırt üstüne yerleştirin ve sıçan kendini düzeltebiliyorsa bir puan verin. Hemipleji için test etmek için, sıçanın zorla konumlandırmaya karşı koyamamasını değerlendirin.

Arka uzvun refleks bükülmesini test etmek için hayvanı kuyruğundan kaldırın. Düz yürüme yeteneğini test etmek için sıçanı yere yerleştirin. Pinna refleksini test etmek için, kulak geri çekilmesini gözlemlemek için hafif, dokunsal stimülasyon gerçekleştirin.

Kornea refleksini test etmek için göze hafifçe yumuşak bir çubuk uygulayın ve yanıp sönme tepkisini ölçün. Ürkütme refleksini test etmek için, bir kalemi tel kafesin üst kısmına sürükleyin ve hayvanın tepkisini kaydedin. Secdede arama davranışının kaybına not vermek için, sıçanı yeni bir ortama yerleştirin ve sıçanın bıyıklarını hareket ettirip ettirmediğini, koklayıp koklamadığını veya koşup koşmadığını gözlemleyin.

Daha sonra uzuv reflekslerini sol ve sağ ön ayaklara ve ardından sol ve sağ arka uzuvlara yerleştirme için test edin. Dengeyi test etmek için, sıçanı bir 20, 40 ve ikinci seanstan büyük 1,5 santimetre genişliğinde bir kirişe yerleştirerek bir ışın dengeleme görevi gerçekleştirin. Daha sonra farklı genişliklerde üç kiriş kullanarak bir ışın yürüyüş testi çalıştırın.

Metrik görevi gerçekleştirmeden önce, 80 santimetre uzunluğundaki bir masaya 200 santimetre çapında, bir santimetre kalınlığında, siyah dairesel bir platform yerleştirin ve platformun ortasına 68 santimetre arayla iki nesne yerleştirin. Yerden 290 santimetre yükseklikte veri yakalamak, kaydetmek ve işlemek için gerekli bilgisayar yazılımına sahip bir kamera takın. Analizden bir gün önce sıçanı, hayvanı yeni ortama alışkanlık haline getirmek için 10 dakika boyunca platforma yerleştirin.

Görev gününde, sıçanı platformun sonuna yerleştirin, 15 dakikalık bir alışkanlık süresi boyunca nesnelerden eşitlikçi olun ve kayda başlayın. Deneysel alışkanlık süresinin sonunda, sıçanı beş dakika boyunca tek bir kafese aktarın ve platformu yüzde beş ila on alkolle temizleyin. Nesneler arasındaki mesafeyi 34 santimetreye düşürün, ardından keşif aktivitesini kaydederken sıçanı beş dakika boyunca platforma yerleştirin.

Bir sonraki hayvanla devam etmeden önce platformu tekrar temizleyin. Video dosyalarını analiz etmeden önce, yazılım donanım anahtarını takın, ardından video izleme yazılımını başlatın ve hazır ayar şablonını açın. Ana görüş alanındaki arena deneme denetimi ve algılama ayarlarını doğruladıktan, çoğalttıktan ve yeniden adlandırdıktan sonra, arka planı kapmak için fareyi sağ tıklatın.

Gözat menüsünde, arka plan görüntüsü olarak kullanılacak video dosyasının konumunu seçin. Görüntüyü yakalayın ve analiz için görüntüyü kalibre etmek için araştırılan alanları ve bölgeleri işaretleyin. Deneme denetimi ve algılama ayarları için aynı kurulumu gerçekleştirin.

Deneme listesinden analiz için video dosyalarının listesini indirdikten sonra, videoları ekleyin ve gerekli ayarlarla konumu belirtin. Ardından edinmeyi seçin ve denemeyi başlatın ve tüm verileri bir elektronik tabloya dışa aktarın. Kontrol grubu, sahte yaralanmadan 48 saat sonra herhangi bir nörolojik eksiklik göstermez.

TBI'dan sonra, hem erkek hem de dişi yaralı hayvanlarda nörolojik eksiklikler önemli ölçüde daha fazladır. Metrik görev sırasında, nesne keşif süresi erkek TBI sıçanları için erkek sham tarafından işletilen sıçanlara göre önemli ölçüde daha kısadır. Aynı model dişi TBI ve dişi sham tarafından işletilen sıçanlar için de gözlenir.

Metrik görevin ardından, Barnes labirenti ve topolojik ve su labirenti görevleri gibi bellek değerlendirmesi için diğer yöntemleri gerçekleştirebiliriz. Metrik görev ayrıca, dağınık aksonal beyin hasarı ve inme modelleri gibi benzer nörolojik hasar modellerinde hafıza bozukluğu hakkında daha fazla araştırma yapmanıza izin verir.