Name: NAFLD/NASHin Sıçan Modelinde Ultrason ve Kesme Dalgası ElastografiSi Görüntüleme Uygulaması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: Keşfedin: Ultrason ve Kesme Dalgası Elastografi kullanarak sıçan modellerinde NASH ilerlemesini izleyin. Bu invaziv olmayan yöntem, karaciğer yağlanması ve fibrozisini uzunlamasına değerlendirir, histolojik biyopsi ihtiyacını azaltır ve ilaç keşfi çalışmaları için yüksek verimli bir protokol sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Pfizer Karşılaştırmalı Tıp Operasyonları Ekibi'ne, çalışma hayvanlarının sağlığını önemsemek ve sağlamak ve bazı tekniklere yardımcı olmak için sıkı çalışmaları için teşekkür eder. Ayrıca, histolojik analizler için doku işleme konusundaki yardımları için Danielle Crowell, Gary Seitis ve Jennifer Ashley Olson'a teşekkür eder. Buna ek olarak, yazarlar julita Ramirez'e bu makalenin hazırlanması sırasında gözden geçirdiği ve değerli geri bildirim sağladığı için teşekkür eder.

Hayvanlarla ilgili tüm prosedürler Pfizer'in Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından gözden geçirilip onaylandı ve AAALAC (Laboratuvar Hayvan Bakımının Değerlendirilmesi ve Akreditasyonu) Uluslararası akredite bir tesiste gerçekleştirildi.
1. Hastalık indüksiyonu
<ol><li>Bilinen sıçan macera patojenlerinden arınmıştır erkek Wister Han sıçanları (150-175 g; ~ 6-7 haftalık; toplam 40 sıçan) kullanın. Sıçanları kağıt yataklarla ayrı ayrı havalandırılan kafeslerde çiftler halinde barındırın (Malzeme Masasınabakın) ve 1 °C'± 22'de, 12:12 saat açık-karanlık bir döngü ile% 40-70 bağıl nemde muhafaza edin.</li>
	<li>150-175 g (~6-7 haftalık) ağırlığındaki sıçanları, çalışma tasarımına bağlı olarak% 1 kolesterol (n = 20) veya standart bir laboratuvar kemirgen chow (n = 20) ile kolin eksikliği olan, yüksek yağlı bir diyete yerleştirin. NOT: Bu çalışmada grup başına 20 hayvan ile toplam 40 sıçan kayıt edilmiştir. 6. haftanın sonunda, her gruptan kohortun yarısı karaciğer örneklerinin orta çalışma histolojik analizi için nekropsi edildi. Böylece, örneklem büyüklüğü 9 ve12. </li>
</ol>2. Enstrüman kurulumu
<ol><li>Görüntüleme alanını aşağıdaki gibi ayarlayın: görüntüleme sırasında hayvanı sıcak tutmak için ısıtılmış bir yüzey (Şekil 1'dec) ve işlem boyunca bir anestezi düzlemini korumak için inhalan anestezi sağlamak için güvenli bir anestezi burun konisi ekleyin (b Şekil 1'de).</li>
	<li>Ultrason probun istenen yere taşınmasını kolaylaştırmak ve probun hayvan üzerinde dinlenmesini önlemek için bir ultrason prob tutucusu kullanın.<ol>
<li>Ultrason görüntüsünün elde edildiği ciltte ısıtılmış ultrason jeli kullanın.</li>
		<li>Dokunmatik ekranda ayarlanabilen prosedür boyunca aşağıdaki ayarları koruyun: Akustik Güç 0.0 dB; Doku Tuner 1540 m/s; Dinamik Aralık 60 dB; Esneklik aralığı (SWE modu için) < 30 kPa.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ultrason probını özel tutucudaki raylı sisteme takın (Şekil 1'de).</li>
	<li>Cihazı aç ve önyüklenebilmesine izin ver. Monitör açıldıktan sonra, bağlı dönüştürücü ayrıntılarına sahip B Modu görüntüsünü not alın.</li>
</ol>3. Konu hazırlığı
<ol><li>Bağırsak içeriğinin görüntü alımını engellemesini önlemek için görüntüleme işleminden önce hayvanların en az 4 saat oruçlu olduğundan emin olun.<ol>
<li>En az 4 saat oruç tuttuktan sonra, uygun bir anestezi seviyesine ulaşılana kadar bir sıçanı izofluran anestezik indüksiyon odasına yerleştirin, ayak parmağı sıkışmasına yanıt yok. Anesteziyi teşvik etmek için hayvanları 3-5 dakika boyunca% 3-5 izofluran'a maruz bırakın.</li>
		<li>Bakım anestezisi için, görüntü alımı sırasında hayvanları% 2-3 izofluran altında tutun. Anestezi sırasında gözün kurumasını korumak için oftalmik merhem uygulayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Anestezi elde edildikten sonra, bir hayvanı indüksiyon odasından çıkarın ve sıcak sıcak su sirkülasyon battaniyesine yerleştirin. Burnun üzerine anestezik bir burun konisi yerleştirin ve hayvanı göğüs kafesinden pelvise kadar sağ tarafında tıraş edin. Bu bölgedeki kalan tüm saçları çıkarmak için kimyasal epilasyon kremi kullanın.</li>
	<li>Saçlar çıkarıldıktan sonra, bir hayvanı başın üstüne bantlanmış üst pençeleri olan sol yanal reumbency'ye sıcak bir görüntüleme platformuna yerleştirin(Şekil 3A).</li>
	<li>Cihaz kontrol panelinde Hasta tuşuna basın ve konuyu çalışma tasarımına göre tanımlayın.<ol>
<li>Dokunmatik ekrandaki simgeye dokunarak enstrümandaki Klavye işlevini açın. Adları istediğiniz gibi yazın.</li>
		<li>Hasta adı ekranından çıkmak için Çıkış'a dokunun. Monitörde B modunun yeniden açıldığını gözlemleyin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. Hepato-renal (İk) indeks ölçümü için görüntü alımı
<ol><li>Hayvan üzerindeki aldatılmış cilt bölgesine az miktarda ısıtılmış ultrason jeli uygulayın.</li>
	<li>Konunun jel kaplı bölgesine dokunmak için ultrason probunu hareket ettinin (Şekil 3B). Monitörde öznenin iç organlarının canlı B modu görüntüsü göründüğünde, ultrason probunu bel omurlarına (sagittal düzlem) paralel olarak kalçanın biraz üstündeki bölgeye taşıyın.</li>
	<li>Monitördeki B modu ekranını kullanarak, büyük böbrek arterini ve korteks / medulla ayrımını tanımlayarak sağ böbreği bulun (Şekil 4A). Ek olarak, karaciğerin bir kısmını görüntünün tek bir düzleminde gözlemleyin.<ol>
<li>Gölgeler ve hava kabarcıkları gibi çok az veya hiç görüntü yapıtı olmadığından emin olun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>İk indeksini elde etmek için bir B Modu oranı ölçün.<ol>
<li>Hem renal korteksin hem de karaciğer parenkiminin aynı odak düzleminde olduğundan emin olun. Gerekirse, net bir görüntü elde etmek için odağı ayarlayın ve kontrolü elde edin.<ol>
<li>Kontrol panelinde Odak düğmesini çevirerek odağı ayarlayın. Otomatik TGC düğmesine bir kez basarak kazancı ayarlayın.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Kontrol panelinde Dondur tuşuna basın. Bulanık görüntüleri önlemek için ekranı dondurırken hayvanın nefesler arasında olduğundan emin olun.</li>
		<li>Ekran dondurulduktan sonra dokunmatik ekranda Ölçüm Araçları'na dokunun. Seçili ilgi çekici bir bölgeden bir dokunun göreli parlaklığını ölçen yerleşik bir araç olan B modu Oranı'nı seçin. İlgi çekici bir bölge (yatırım getirisi) seçmek için 2 mm'lik bir daire oluşturun. Kontrol panelinde bir parmağınızı izleme topunun dış kenarı boyunca hareket ettirerek daire boyutunu ayarlayın.</li>
		<li>2 mm'lik daireyi, böbreğin sağında bulunması gereken karaciğer görüntü yatırım getirisine yerleştirin. Karaciğer dokusunu homojen ekojenikliğine ve pürüzsüz konturuna göre tanımlayın.</li>
		<li>Daire yerleştirildikten sonra, kontrol panelinde Seç düğmesine basın ve görünen yeni daireyi gözlemleyin.</li>
		<li>Yeni dairenin boyutunu 2 mm'ye ayarlayın ve böbrek korteksinin görüntüsüne yerleştirin. Karaciğer ve böbrek korteks üzerindeki dairelerin derinliğini aynı tuttuğunuzdan emin olun. Yerine yerleştirildikten sonra, kontrol panelinde Seç düğmesine basın. Yerleşik sistem aracının İk indeksini B modu oranı olarak görüntülediğine dikkat edin.</li>
		<li>Görüntüyü kaydetmek için Görüntüyü Kaydet'e basın ve monitörün sağ tarafında küçük resim olarak görünen kaydedilmiş görüntüleri gözlemleyin.</li>
		<li>Görüntüyü çözme ve canlı B modu görüntüsüne dönme için kontrol panelinde Dondur düğmesine basın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>B Modu oranı ölçümünü farklı derinliklerde ve doku düzlemlerinde 3 kez tekrarlayın. Her hayvan ve zaman noktası için bu üç B modu oranının ortalamasını hesaplayın.</li>
</ol>5. Shear Wave Elastografi için görüntü alımı
<ol><li>B Modu'nu kullanarak karaciğeri bulmak için probu sağ altkostal alanda enine şekilde hareket ettirin. Karaciğerin çoğunlukla parankim olan ve portal damar ve hepatik arter gibi büyük kan damarlarından arındırılmış bir bölgesini bulun. Karaciğerin net bir alanı bulunduktan sonra, kontrol panelinde SWE düğmesine basarak dokunun bir kesme elastikiyet haritasını oluşturun.</li>
	<li>Gölgelerden arındırılmış bir alanda karaciğer kapsülünün altındaki SWE kutusunun boyutunu ve konumunu ayarlayın. Kapsülü karaciğerin tepesine yakın parlak bir ekojenik çizgi olarak tanımlayın.</li>
	<li>SWE kutusunun 5-10 s içinde bir renk haritasına geçiş yaptığını gözlemleyin. Kutu dolduktan ve sabitlendiğinde, hayvan nefesler arasındayken kontrol panelinde Dondur düğmesine basın. NOT: Karaciğerin elastikiyetini doğru bir şekilde değerlendirmek için minimum kutu kapsama alanı% 60-80 olmalıdır.</li>
	<li>Dokunmatik ekranda, kesme dalgası elastikiyet haritasındaki bir yatırım getirisinden esnekliği hesaplayan yerleşik bir sistem aracı olan QBox'adokunun. Monitörde görünen daireyi ve veri kutusunu gözlemleyin. Dokunmatik ekrandaki konum simgesine istediğiniz kuruluma dokunarak QBox'ın konumunu ayarlayın.</li>
	<li>Kontrol panelinde bir parmağınızı trackball'un dış kenarı boyunca hareket ettirerek dairenin boyutunu 3 mm'ye ayarlayın. İzleme topunu kullanarak, daireyi tekdüze renklendirme ile gölgeden arındırılmış bir alana yerleştirin (Şekil 5A, B). Kan damarları veya karaciğer kapsülü gibi bilinen sertlik bölgelerinden ve bu yapılardan kanamadan kaçınmaya özen edin.</li>
	<li>Yeterli bir alan bulunduğunda, görüntüyü kaydetmek için kontrol panelinde Görüntüyü Kaydet'e basın. Bu işlemi karaciğerin farklı bölgelerinde 3 kez tekrarlayın. Karaciğerin farklı bölgelerinden SWE haritalı görüntüler toplamak için probu karın üzerinde yukarı ve aşağı veya yana doğru hareket ettirin.</li>
	<li>Tüm görüntüler toplandıktan sonra, kontrol panelinde Sınavı Sonlandır'a basın ve monitörde görünen hasta bilgi ekranını not edin.</li>
	<li>Bandı hayvanın pençelerinden çıkarın, fazla jeli silin ve hayvanı görüntüleme aşamasından çıkarın. Tamamen iyileşene kadar sıcak ve kuru bir kafeste anesteziden kurtulmasına izin verin. Sternal rekumbensi koruma yeteneği ile belirtilen anesteziden tam iyileşme sağlamak için her hayvanı izleyin</li>
	<li>Görüntülenecek kohorttaki her hayvan için 4-5 bölümlerindeki adımları tekrarlayın.</li>
</ol>6. Görüntü veri alma ve analizi
<ol><li>Tüm hayvanlar için görüntüler toplandığında anesteziyi kapatın.</li>
	<li>Görüntü verilerini makineden çekmek için kontrol panelinde gözden geçir düğmesine basın ve monitörde görünen bu cihaz üzerinde gerçekleştirilen tüm taramaları gözlemleyin. Ekranın üst köşesindeki arama penceresini kullanarak istediğiniz taramaları arayın.</li>
	<li>İzleme topu ve Seç düğmesi aracılığıyla hastanın adının yanındaki kutuyu işaretleyerek veri analizi için gerekli tüm taramaları seçin. Gerekli tüm taramalar vurgulandıktan sonra dokunmatik ekranda JPEG'leri dışa aktar'ı seçin. Verileri bir ağ sürücüsüne veya taşınabilir bir Evrensel Seri Veri Yolu (USB) sürücüsüne verin. Cihazın arkadaki USB bağlantı noktalarını bulun.</li>
	<li>Dosyalar dışa verildikten sonra, bir iş istasyonu bilgisayarındaki her taramanın tek tek jpg dosyalarını açın. Görüntünün sağ tarafındaki tüm verileri gözlemleyin: B Modu Oranı-B Oranı numarasını toplayın; Q Ortalama esneklik (kPa) değerini kutulayın.</li>
	<li>Tüm verileri bir elektronik tabloya veya başka bir veritabanı yönetim yazılımına girin ve istediğiniz istatistiksel analizleri yapın.</li>
</ol>7. Karaciğer örneklerinin histolojik analizi
<ol><li>6. haftanın sonunda, karaciğer örneklerinin orta çalışma histolojik analizi için her gruptan kohortların yarısına nekropsi yapın. Benzer şekilde, hayvanların kohortunun geri kalanını ötenazi yapın ve12.</li>
	<li>ORO boyama için, karaciğer bölümlerini% 10 nötr tamponlu formalin içinde sabitlayın ve en azından bir gecede soğutulmuş% 30 sakkaroz çözeltisi kullanarak sakkaroz ile kriyoprezer. Bölümleri en uygun kesme sıcaklığı bileşiğine kriyo-gömün ve ORO boyamaya hazırlanmak için kriyo-bölümlenmiş slaytlara ekleyin.</li>
	<li>Kriyo bölümlerini 2 dakika boyunca% 100 propilen glikol içine yerleştirin ve ardından% 0.5 ORO çözeltisinde bir gecelik inkübasyon yapın. ORO çözeltisinden çıkarıldıktan sonra, bölümleri 1 dakika boyunca% 85 propilen glikolde ayırt edin, deiyonize suda durulayın ve Mayer'in Hematoxylin-Lillie modifikasyonu ile 1 dakika boyunca karşıt çizgi yapın.<ol>
<li>Kapakları sulu bir montaj ortamı kullanarak slaytlara yerleştirin ve oda sıcaklığında kurutun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>PSR için, deparaffinize formalin-fixed, parafin gömülü karaciğer bölümü slaytlar, bouin sıvı bir gecede yerleştirin ve sonra bazı optimize adımları ile üretici protokolüne göre otomatik bir slayt lekeleyici kullanarak lekeleyin (5 dakika için% 1 fosfogipidik asit; 90 dakika doymuş picrik asit% 0.1 Sirius Kırmızı; 2 x 30 s yıkama 0.5% asetik asit). Slaytları otomatik olarak susuz bırak ve ardından kalıcı bir montaj ortamıyla monte edin.</li>
	<li>20x büyütmede dijital mikroskopi tarayıcısını kullanarak ORO ve PSR lekeli slaytların görüntülerini yakalayın, .svs biçiminde kaydedin ve slayt yöneticisi görüntü veritabanında depolayın.</li>
	<li>Dijital patoloji yazılımında oluşturulan özel algoritmaları kullanarak görüntüleri analiz edin. Karaciğer bölümleri alanının yanı sıra ORO ve PSR lekeli alanları tanımlamak ve ölçmek için eşik parametrelerine sahip dijital patoloji yazılım uygulamalarını düzgün bir şekilde uygulayın. Alan yüzdesi hesaplamaları için ölçümleri bir elektronik tabloya dışa aktar.</li>
</ol>8. İstatistiksel analiz
<ol><li>Farklı zaman noktalarındaki gruplar arasındaki farkı değerlendirmek için Sidak'ın çoklu karşılaştırma testini kullanarak görüntüleme verilerinin istatistiksel analizini iki yönlü ANOVA ile gerçekleştirin. P ≤ 0.001 olasılık değerleri için gruplar arasında önemli farklar varsayalım. Ayrıca görüntüleme okumalarının histolojik analizlerle korelasyonunu gerçekleştirin.</li>
	<li>Bu çalışmanın histolojik analiz sonuçlarını analiz etmek için parametrik olmayan istatistikler kullanın. Grup değerlerini ortanca ± yarı interquartile aralığı (sIQR) olarak bildirin. P ≤ 0.001 olasılık değerleri için gruplar arasında önemli farklar varsayalım. Farklı gruplar arasındaki PSR ve ORO histokimyasal leke miktarını karşılaştırmak için bir Mann-Whitney testi kullanın.</li>
</ol>

<ol><li>Younossi, Z. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+epidemiology+of+nonalcoholic+fatty+liver+disease-Meta-analytic+assessment+of+prevalence%2C+incidence%2C+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease-Meta-analytic assessment of prevalence, incidence, and outcomes.</a> Hepatology. 64 (1), 73-84 (2016).</li>
<li>Boland, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+standard+diet-induced+and+biopsy-confirmed+mouse+model+of+non-alcoholic+steatohepatitis%3A+Impact+of+dietary+fat+source%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Towards a standard diet-induced and biopsy-confirmed mouse model of non-alcoholic steatohepatitis: Impact of dietary fat source.</a> World Journal of Gastroenterology. 25 (33), 4904-4920 (2019).</li>
<li>Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporation+of+a+survivable+liver+biopsy+procedure+in+mice+to+assess+non-alcoholic+steatohepatitis+%28NASH%29+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Incorporation of a survivable liver biopsy procedure in mice to assess non-alcoholic steatohepatitis (NASH) resolution.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59130(2019).</li>
<li>Bercoff, J., Tanter, M., Fink, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supersonic+shear+imaging%3A+a+new+technique+for+soft+tissue+elasticity+mapping%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Ultrasonics%2C+Ferroelectrics%2C+and+Frequency+Control%22%5BJournal%5D)">Supersonic shear imaging: a new technique for soft tissue elasticity mapping.</a> IEEE Transactions on Ultrasonics, Ferroelectrics, and Frequency Control. 51 (4), 396-409 (2004).</li>
<li>Bavu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+in+vivo+liver+fibrosis+evaluation+using+supersonic+shear+imaging%3A+a+clinical+study+on+113+hepatitis+C+virus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Noninvasive in vivo liver fibrosis evaluation using supersonic shear imaging: a clinical study on 113 hepatitis C virus patients.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 37 (9), 1361-1373 (2011).</li>
<li>Ferraioli, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+real-time+shear+wave+elastography+for+assessing+liver+fibrosis+in+chronic+hepatitis+C%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Accuracy of real-time shear wave elastography for assessing liver fibrosis in chronic hepatitis C: a pilot study.</a> Hepatology. 56 (6), 2125-2133 (2012).</li>
<li>Ross, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acetyl-CoA+carboxylase+inhibition+improves+multiple+dimensions+of+NASH+pathogenesis+in+model+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Gastroenterology+and+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Acetyl-CoA carboxylase inhibition improves multiple dimensions of NASH pathogenesis in model systems.</a> Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 10 (4), 829-851 (2020).</li>
<li>Gu, L. H., Gu, G. X., Wan, P., Li, F. H., Xia, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+two-dimensional+shear+wave+elastography+and+texture+analysis+for+monitoring+liver+fibrosis+in+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+%26+Pancreatic+Diseases+International%22%5BJournal%5D)">The utility of two-dimensional shear wave elastography and texture analysis for monitoring liver fibrosis in rat model.</a> Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 20 (1), 46-52 (2020).</li>
<li>Marshall, R. H., Eissa, M., Bluth, E. I., Gulotta, P. M., Davis, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatorenal+index+as+an+accurate%2C+simple%2C+and+effective+tool+in+screening+for+steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Hepatorenal index as an accurate, simple, and effective tool in screening for steatosis.</a> American Journal of Roentgenology. 199 (5), 997-1002 (2012).</li>
<li>Webb, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+value+of+a+computerized+hepatorenal+index+for+sonographic+quantification+of+liver+steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Diagnostic value of a computerized hepatorenal index for sonographic quantification of liver steatosis.</a> American Journal of Roentgenology. 192 (4), 909-914 (2009).</li>
<li>Tous, M., Ferre, N., Camps, J., Riu, F., Joven, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+apolipoprotein+E-knockout+mice+with+cholesterol+and+fat+enriched+diets+may+be+a+model+of+non-alcoholic+steatohepatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Feeding apolipoprotein E-knockout mice with cholesterol and fat enriched diets may be a model of non-alcoholic steatohepatitis.</a> Molecular and Cellular Biochemistry. 268 (1-2), 53-58 (2005).</li>
<li>Kirsch, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+nutritional+model+of+non-alcoholic+steatohepatitis%3A+species%2C+strain+and+sex+difference+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Gastroenterology+and+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Rodent nutritional model of non-alcoholic steatohepatitis: species, strain and sex difference studies.</a> Journal of Gastroenterology and Hepatology. 18 (11), 1272-1282 (2003).</li>
<li>Journal of Ultrasound in Medicine. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2018+Scientific+Program%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ultrasound+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">2018 Scientific Program.</a> Journal of Ultrasound in Medicine. 37 (1), 1(2018).</li>
<li>Engelmann, G., Quader, J., Teufel, U., Schenk, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+and+opportunities+of+non-invasive+liver+stiffness+measurement+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Limitations and opportunities of non-invasive liver stiffness measurement in children.</a> World Journal of Hepatology. 9 (8), 409-417 (2017).</li>
<li>Piscaglia, F., Salvatore, V., Mulazzani, L., Cantisani, V., Schiavone, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+shear+wave+elastography+for+liver+disease.+a+critical+appraisal+of+the+many+actors+on+the+stage%5BTitle%5D)+AND+%22Ultraschall+in+der+Medizin%22%5BJournal%5D)">Ultrasound shear wave elastography for liver disease. a critical appraisal of the many actors on the stage.</a> Ultraschall in der Medizin. 37 (1), 1-5 (2016).</li>
<li>Singh, S., Loomba, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+two-dimensional+shear+wave+elastography+in+the+assessment+of+chronic+liver+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Role of two-dimensional shear wave elastography in the assessment of chronic liver diseases.</a> Hepatology. 67 (1), 13-15 (2018).</li>
</ol>

Tüm yazarlar Pfizer, Inc.

SWE de dahil olmak üzere ultrason tabanlı görüntüleme, NAFLD / NASH'in preklinik modellerinde karaciğer steatozu ve sertliğinin boyuna değerlendirilmesi için paha biçilmez bir araç olabilir. Bu makalede, NASH'in CDAHFD diyet kaynaklı sıçan modeli kullanılarak İk indeksinin ve esnekliğinin ölçümü için karaciğerlerin SWE görüntülerinin yanı sıra yüksek kaliteli B modunun nasıl eldeılacağına dair ayrıntılı metodolojiler açıklanmaktadır. Ayrıca, sonuçlar İk indeksinin mükemmel korelasyonunu ve elastikiyetin karaciğer dokusun...

Alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD), karaciğerde aşırı yağ birikmesi ile karakterize metabolik bir durumdur ve yakın zamanda bildirilen küresel yaygınlığı ile dünya çapında önde gelen bir karaciğer rahatsızlığı haline gelmektedir% 251. Alkolsüz steatohepatit (NASH), ilerleyici hücresel hasar, inflamasyon ve fibrozis ile aşırı karaciğer yağlanması ile karakterize NAFLD spektrumunun daha ilerlemiş bir aşamasıdır. Bu rahatsızlıklar genellikle sessizdir, kan testleri veya rutin muayenelerle tespit edilemez, ta ki bir hastanın karaciğerine önemli hasarlar gelene kadar. Şu anda hastalarda NASH tanısı koymak için altın standart, hasta kaynaklı karaciğer biyopsi örneklerinin histolojik muayenesinden geçmektedir. Benzer şekilde, NASH / NAFLD patogenezini ve ilaç geliştirme endüstrisini anlamak için çalışan preklinik araştırmacılar, steatoz, inflamasyon ve fibrozisi ölçmek için karaciğer örneklerinin in vivo kama biyopsisine veya histoloji için uydu kohortlarının terminal ötanazisine güvenirler.
Örneğin, karaciğer kama biyopsisi GUBRA NASH model2kullanırken steatohepatit ve fibrozisi değerlendirmek için standart bir teknik olmuştur. Karaciğer kama biyopsisi yöntemi küçük hayvanlarda invaziv ve zahmetlidir3. Bir çalışmanın ortasında kama karaciğer biyopsisi kullanımı, genellikle ihtiyaç duyulan hayvan sayısını artıran bir hastalık modelinde eklenen deneysel bir değişkeni temsil eder. Bu faktörler göz önünde bulundurularak, nash/NAFLD hayvan modellerinde steatoz ve fibrozisi erken zaman noktalarında güvenilir bir şekilde değerlendirmek için kullanılabilecek non-invaziv görüntüleme teknikleri değerlidir. Kesme dalgası elastografisi (SWE), yumuşak dokuların elastikiyetini ölçmek için kullanılan ultrason tabanlı bir yöntemdir. Teknik, bir doku hedefine yönelik süpersonik ultrason darbeleri tarafından oluşturulan kesme dalgalarının yayılmasını ölçer ve daha sonra E modulus4adı verilen bir değeri hesaplar. Kesme dalgasının hızı doku sertliği derecesi ile orantılıdır.
Şekil 1 ve Şekil 2 görüntüleme alanı kurulumunu ve SWE cihazını göstermektedir. SWE cihazı, Şekil 2A'dagösterilen iki ekranlı ve bir kontrol paneline sahip tek tekerlekli bir ünitedir. Üst monitör (Şekil 2B) bilgisayar monitörü görevi görür ve görüntüleri ve hasta dizinlerini görüntüler. Kontrol paneli (Şekil 2C), görüntü yakalamanın genel yönlerini kontrol eden bir dizi düğme ve kadrandır: ekranı dondurma, görüntüleri kaydetme, bir moddan diğerine değiştirme. Alt ekran (Şekil 2D), ayarları değiştirmek için ek kontrollere sahip bir dokunmatik ekrandır ve gerektiğinde veri girmek için bir klavye görevi görür. Cihaz, istenirse dokunmatik ekranda kullanmak için bir ekran kalemi ile donatılmıştır. Ultrason probları cihazın alt ön paneline bağlanır. Kemirgenlerde B modu ve SWE görüntüleme için süper doğrusal 6 ila 20 MHz dönüştürücü kullanıldı. Doku sertliğini noninvaziv olarak ölçme yeteneği, SWE'yi NASH hastalarında karaciğer fibrozisi5'in tanımlanması ve evrelenmesi için değerli bir araç haline getirerek daha invaziv yöntemlere olan ihtiyacı azaltır. SWE, aslında hastalarda karaciğer fibrozisini ölçmek için kullanılmıştır ve klinikte fibrozis puanlamak için FDA onaylı bir yöntemdir6. Hastalığın hayvan modellerinde NASH ilerlemesini izlemek için SWE kullanmak, tedavilerin geliştirilmesi için çevirisel bir araç sağlayacak ve aynı zamanda hayvan konu sayılarının azaltılması ve ağrı ve sıkıntıyı en aza indirmek için in vivo prosedürlerin iyileştirilmesi yoluyla hayvan refahını artıracaktır.
İnsan hastalarda SWE görüntüleme, küçük hayvanlar için ideal olmayan düşük frekanslı ultrason dönüştürücü4kullanır. Özellikle, yüksek frekanslı SWE teknikleri, bir sıçan modelinde NASH patogenezinde asetil-CoA karboksilaz inhibisyonunun etkinliğini değerlendirmek için kullanılmıştır7ve bu tekniğin faydası, geleneksel METAVIR histolojik puanlama yöntemlerine kıyasla başarılı sonuçlarla karaciğer fibrozisinin karbon tetraklorür sıçan modellerinde tanımlanmıştır8. Bununla birlikte, mevcut literatürDE NASH'in preklinik modellerinde SWE görüntülemenin uygulanmasına ilişkin ayrıntılı teknik ve metodoloji bilgileri yoktur. Yukarıda açıklandığı gibi karaciğer steatozu NAFLD/NASH durumunun temel özelliklerinden biridir ve müdahalenin düşünülebileceği önemli bir aşamadır. Bu nedenle, karaciğer yağ birikiminin görüntüleme yöntemi kullanılarak değerlendirilmesi, NASH/NAFLD'nin preklinik modellerinde karaciğer fibrozisinin değerlendirilmesi kadar önemlidir.
İk indeksi olarak bilinen bir ultrason tekniği, karaciğerin doku parlaklığının renal korteks ile karşılaştırıldığında bir oranı, klinikte steatozun taşıyıcı belirteci olarak kullanılmıştır9,10. Ancak bu yaklaşım, NAFLD/NASH'in preklinik hayvan modellerinde yaygın olarak kullanılmamıştır. Bu makalede, NAFLD/NASH'in kolin eksikliği olan, yüksek yağlı diyet (CDAHFD) sıçan modelinde sırasıyla hepatik fibrozis ve steatozun taşıyıcı belirteci olarak hr indeksinin yanı sıra elastikiyeti ölçme yöntemi açıklanmaktadır. Bu model, farelerde 6 hafta içinde ölçülebilen hızlı steatoz, karaciğer iltihabı ve fibrozise neden olur11. Bu diyete kolesterolün (%1) eklenmesinin sıçanlarda fibrogenezini teşvik ettiği gösterilmiştir12Bu modeli kesme dalgası görüntülemeyi içeren doğrulama çalışmaları için uygun bir aday haline getirir. Genel olarak, bu görüntüleme teknolojisi steatoz ve / veya fibrozisin bir son nokta olduğu çok çeşitli NASH modellerine / diyetlerine de uygulanabilir.

<table><tbody><tr><td>Aixplorer</td><td>Süpersonik Kesme</td><td>Dalgası Elastografi Aleti Hayal</td><td></td> Edin</tr><tr><td>Aixplorer SuperLinear SLH20-6 Dönüştürücü</td><td>Süpersonik Kesme</td><td>Dalgası Elastografisi için</td>Dönüştürücü Hayal <td></td></tr> Edin <tr><td>Alfa-dri yatak takımı</td><td></td><td></td><td>sıçan kafesleri</td></tr><tr><td>Aperio AT2 tarayıcı</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>Dijital Patoloji Parlak Alan Tarayıcı</td></tr><tr><td>Compac 6 Anestezi Sistemi</td><td>VetEquip</td><td></td><td>Anestezi Buharlaştırıcı ve Dağıtım Sistemi. Bununla birlikte, herhangi bir anestezi dağıtım sistemi kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Görüntüleyici Veritabanını Yönetin</td><td>Leica Biosystems</td><td></td><td>Dijital Patoloji</td></tr><tr><td>Mayer'in Hematoksilinin</td><td>Dako/Agilent</td><td></td><td>H& E Boyama/Histoloji</td></tr><tr><td>Nair</td><td>Kilisesi & Dwight</td><td></td><td>Saç çıkarıcı</td></tr><tr><td>Yağ Kırmızı O çözeltisi</td><td>Poly Scientific</td><td></td><td>Lipid Boyama / Histoloji</td></tr><tr><td>Picrosirius Kırmızı Leke (PSR)</td> <td>Rowley Biyokimyasal</td><td>F-357-2</td><td>Kollajen Boyası / Histoloji</td></tr><tr><td>Puralube Oftalmik merhem</td><td>Dechra Veteriner Ürünü</td><td></td><td>Anestezi sırasında göz kuruluğunu önlemek için</td></tr> yağlama <tr><td>Tissue-Tek Prisma Plus</td><td>Sakura Finetek ABD</td><td></td><td>Otomatik slayt boyama</td></tr><tr><td>makinesi VISIOPHARM yazılımı</td><td>Visiopharm</td><td></td><td>Dijital patoloji yazılımı</td></tr><tr><td></td><td>Araştırma Diyetleri</td><td>A06071309i</td><td>NASH indükleyici diyet</td></tr><tr><td></td><td>Purina</td><td>5053</td><td>Kontrol hayvan yemi</td></tr><tr><td>Vevo görüntüleme istasyonu</td><td>Fujifilm VisualSonics</td><td></td><td>Vevo görüntüleme istasyonu, görüntüleme sırasında ultrason dönüştürücüsünü tutmak için kullanılır.</td></tr><tr><td>Wistar Han fareleri</td><td>Charles Nehri Laboratuvarları</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

nafld/nash'in sıçan modelinde ultrason ve kesme dalgası elastografisi görüntüleme uygulaması

Application of Ultrasound and Shear Wave Elastography Imaging in a Rat Model of NAFLD/NASH

Alkolsüz Steatohepatit (NASH), karaciğer yağ birikimi (steatoz) ve fibrozise yol açan iltihaplanma ile karakterize Alkolsüz Yağlı Karaciğer Hastalığı (NAFLD) spektrumu içinde bir durumdur. İnsan NASH/NAFLD'ı yakından nükseden preklinik modeller ilaç geliştirmede esastır. Karaciğer biyopsisi şu anda klinikte NAFLD/NASH ilerlemesini ve tanısını ölçmek için altın standart olmakla birlikte, klinik öncesi alanda, bir çalışma sırasında tüm karaciğer örneklerinin birden fazla zaman noktasında toplanması veya hastalığın evresini değerlendirmek için histolojik analiz için karaciğer biyopsisi gereklidir.
Karaciğer biyopsisi çalışması yapmak invaziv ve emek yoğun bir prosedürdür ve hastalık seviyesini değerlendirmek için karaciğer örnekleri toplamak, bir çalışma için gereken araştırma hayvanlarının sayısını arttırır. Bu nedenle, bu preklinik modellerde NASH/NAFLD'yi tespit etmek için güvenilir, çevrilebilir, invaziv olmayan bir görüntüleme biyobelirteciye ihtiyaç vardır. İnvaziv olmayan ultrason tabanlı B-mode görüntüler ve Kesme Dalgası Elastografisi (SWE), karaciğer fibrozisi kadar steatozu ölçmek için de kullanılabilir. NASH'in preklinik kemirgen modellerinde SWE'nin yararını değerlendirmek için, hayvanlar NASH yanlısı bir diyete yerleştirildi ve hepatik (HR) indeksi ve karaciğer elastikiyetini ölçmek için non-invaziv ultrason B modu ve kesme dalgası elastografi görüntülemesi yapıldı, sırasıyla hem karaciğer yağ birikiminin hem de doku sertliğinin ilerlemesini ölçtü, belirli bir NAFLD / NASH çalışması boyunca birden fazla zaman noktasında.
İk indeksi ve elastikiyet sayıları steatoz ve fibrozisin histolojik belirteçleri ile karşılaştırıldı. Sonuçlar, İk indeksi ile Yağ Kırmızısı O (ORO) lekelenme yüzdesi arasında ve ayrıca elastikiyet ile karaciğerlerin Picro-Sirius Red (PSR) lekelenmesi arasında güçlü bir korelasyon olduğunu gösterdi. Klasik ex vivo yöntemleri ile in vivo görüntüleme sonuçları arasındaki güçlü korelasyon, nafld/NASH'in preklinik bir modelinde hastalık fenotipini ve ilerlemesini değerlendirmek için kesme dalgası elastografisi/ultrason tabanlı görüntülemenin kullanılabileceğinin kanıtını sağlar.

CDAHFD ile beslenen hayvanların ayırt edici özelliklerinden biri steatozdur. Karaciğerde yağ birikmesi, karaciğerin parlaklığını ölçerek ve aynı düzlemde çekilen B modunda bir görüntüden böbrek korteksinin parlaklığına normalleştirerek ölçülebilen dokunun ekojenik özelliklerini değiştirir. Nicel değer, dolaylı bir steatoz ölçüsü olan İk indeksi olarak ifade edilir. Şekil 4A'da, bir kontrol hayvanından gelen temsili bir karaciğer görüntüsü, böbrek korteksine kıyasla yaklaşık eşit veya daha az...

Bu protokol, alkolsüz yağlı karaciğer hastalığının kemirgen modellerinde karaciğer dokusu değişikliklerini invaziv olmayan bir şekilde gözlemlemek ve ölçmek için geliştirilmiş bir ultrason tekniğinin kullanımını açıklar.

NAFLD/NASH'in Sıçan Modelinde Ultrason ve Kesme Dalgası ElastografiSi Görüntüleme Uygulaması

Nonalcoholic Steatohepatitis (NASH) is a condition within the spectrum of Non-Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD), which is characterized by liver fat ...

Ultrason ve kesme dalgası elastografisi kullanımı, araştırmacıların alkolsüz steatohepatit modellerinde karaciğer yağlanması ve fibrozis örtük değişikliklerini ölçmelerini sağlar. Bu görüntüleme yöntemi non-invaziv, yüksek verimli ve klinik olarak çevrilebilir bir tekniktir ve ilaç keşfi sırasında alkolsüz steatohepatit modellerinde hastalık evresini ve etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir. Başlamak için, 150 ila 175 gram ağırlığındaki altı ila yedi haftalık erkek Wistar Han sıçanlarını, yaklaşık 22 santigrat derecede uygun yatak ve 12 ila 12 saatlik açık / karanlık döngü ile% 40 ila% 70 bağıl nem içeren ayrı ayrı havalandırılmış kafeslere yerleştirin.20 sıçana kolin eksikliği, % 1 kolesterollü yüksek yağlı diyet ve standart laboratuvar kemirgen yemeği ile 20 sıçan daha sağlayın. Görüntüleme cihazını kurmak için, görüntüleme sırasında hayvanı sıcak tutmak için görüntüleme alanına ısıtılmış bir yüzey yerleştirin ve inhalant anesteziyi sağlamak için anestezi burun konisini sabitlayın. Ultrason probını istenen yere taşımak ve probun hayvan üzerinde dinlenmesini önlemek için ultrason prob tutucusuna kullanın.Sıçan tamamen uyuşturulduktan sonra, indüksiyon odasından içinde dolaşan ılık sıcak su battaniyesine aktarın. Saçı göğüs kafesinden sıçanın sağ tarafındaki pelvise çıkarmak için kimyasal epilasyon kremi kullanın. Sıçanı sol yanal recumbent pozisyonuna yerleştirin ve üst pençeleri başın üzerine sıcak bir görüntüleme platformuna bantlayın.Cihaz kontrol panelinde hasta tuşuna basın ve çalışma tasarımına göre konuyu tanımlayın. Sıçanın aldatılmış cilt bölgesine az miktarda ısıtılmış ultrason jeli uygulayın. Jel kaplı bölgeye dokunmak için ultrason probunu hareket ettirin.İç organların canlı B modu görüntüsü ekranda göründüğünde, ultrason probunu bel omurlarına paralel olarak kalçanın biraz üstündeki bölgeye taşıyın. Büyük renal arter ve korteks medulla ayrımını tanımlayarak sağ böbreği bulmak için B modu ekran kullanın. Görüntünün tek bir düzleminde karaciğerin bir bölümünü gözlemleyin ve görüntüde hava kabarcıklarının veya gölgelerin bulunmadığından emin olun.Net bir görüntü elde etmek için odağı ayarlayın ve böbrek korteksi ve karaciğer parenkiminin aynı düzlemde olduğundan emin olun. Bulanık görüntüler yakalamamak için ekranı dondurırken hayvanın nefesler arasında olduğundan emin olun. Seçilen ilgi çekici bölgeden dokunun göreli parlaklığını ölçmek için B modu oranını seçin.İki milimetrelik bir daire oluşturun ve böbreğin sağında bulunan karaciğerin görüntüsünde ilgi alanına yerleştirin. Böbrek korteksinin görüntüsüne yeni bir daire yerleştirin, karaciğer ve böbrek korteks üzerindeki dairelerin derinliklerini aynı tutun. Hepato-renal indeksini B modu oranı olarak görüntülemek için kontrol panelinde seçme düğmesine basın ve ölçümü dokunun farklı derinliklerinde ve düzlemlerinde üç kez tekrarlayın, ardından ortalamayı hesaplayın.Karaciğeri B modunu kullanarak bulmak için probu sağ altkostal alanda enine şekilde hareket ettirin. Karaciğerin çoğunlukla parankim olan ve portal damar ve hepatik arter gibi büyük kan damarlarından arındırılmış net bir alanını bulun, ardından dokunun kesme elastikiyet haritasını oluşturmak için kontrol panelinde SWE düğmesine basın. Gölgelerden arındırılmış bir alanda karaciğer kapsülünün altındaki SWE kutusunun boyutunu ve konumunu ayarlayın.Kutu dolu ve stabil olduğunda, sıçan nefesler arasındayken kontrol panelinde dondur düğmesine basın. Kesme dalgası elastikiyeti haritasındaki ilgi çekici bölgeden esnekliği hesaplamak için cihazın dokunmatik ekranındaki Q-Box'a dokunun. Bir daire ve veri kutusu görünecektir.Daireyi gölgesiz alana düzgün renklendirme ile yerleştirin, sertlik alanlarından kaçının. Karaciğerin farklı bölgelerinden SWE haritalı görüntüler toplamak için probu yukarı ve aşağı veya karın üzerinde yanlara doğru hareket ettirerek prosedürü üç kez tekrarlayın. Bittiğinde, bandı pençelerden çıkarın ve fazla jeli silin.Sıçanı tekrar sıcak ve kuru bir kafese yerleştirin ve tamamen iyileşmesine izin verin. İzleme topını ve Seç düğmesini kullanarak hastanın adının yanındaki kutuyu işaretleyerek veri analizi için gerekli tüm taramaları seçin. Dosyaları dışa aktarmadan sonra, her taramanın ayrı bir JPG dosyasını açın ve görüntünün sağ tarafındaki verileri gözlemleyin.Tüm verileri bir elektronik tabloya veya başka bir veritabanı yönetim yazılımına kopyalayın ve istediğiniz istatistiksel analizleri yapın. Kontrol ve kolin eksikliği olan, yüksek yağlı diyet gruplarından hepato-renal indekslerin temsili görüntüleri, böbrek korteksindeki karaciğer parlaklığının hemen hemen aynı olduğunu ve hepato-renal indeksinin kontrol grubunda birden az olduğunu göstermektedir. Yüksek yağlı diyet grubunda karaciğerin parlaklığı arttı ve hepato-renal indeksi altı haftada 1.91'e, 12 haftalık zaman noktalarında ise 1.79'a yükseldi.Yüksek yağlı diyet grubunun hepato-renal indeks değerleri, bir platoya ulaşmadan önce ilk üç ila altı hafta boyunca hızlı bir şekilde yükseldi. Yağ kırmızısı O boyası ile lekelenmiş karaciğer bölümlerinde, yüksek yağlı diyet grubunda kontrol grubuna göre önemli ölçüde artan bir lekeli bölge görüldü. Yüzdelik lekeli bölge ile hepato-renal indeksi arasında da korelasyon bulundu.Yüksek yağlı diyet grubunda doku sertliği 12 hafta içinde giderek artmış ve fibrozis nedeniyle 23,1 kilopaskal sayısına ulaşmıştır. Karaciğer örnekleri fibrozisin bir göstergesi olarak kollajeni lokalize etmek için picrosirius kırmızısı ile boyandı. Yüksek yağlı diyet grubunda kontrol grubuna göre yüzde lekeli bölgede belirgin bir artış gözlenmiştir.Ayrıca yüzde lekeli alan ile kesme dalgası E modülü sayıları arasında güçlü bir korelasyon bulundu. Dönüştürücü ve ölçüm dairelerini veya kutularını düzgün bir şekilde yerleştirmek önemlidir. Görüntülerdeki eserlerden kaçınmak, tekrarlanabilir ve tutarlı ölçümlere izin verecektir.İşlemden sonra görüntülemede görülen sonuçları doğrulamak için nekropsi dokusunda karaciğer trigliseritlerinin ex vivo ölçümleri ve kollajen gen ekspresyonları da yapılabilir.

application-ultrasound-shear-wave-elastography-imaging-rat-model

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kaynak: Giustetto, P., et. al., Non-invaziv Parankimal, Vasküler ve Metabolik Yüksek Frekanslı Ultrason ve Fotoakustik Sıçan Derin Beyin Görüntüleme. J. Vis. Uzm. (2015)Bu videoda, sıçan beynindeki damar sistemini ve hemoglobin içeriğini incelemek için yüksek frekanslı ultrason ve fotoakustik görüntülemenin kullanımını gösteriyoruz. Bu yöntem, beyin perfüzyonu ve kan oksijenasyonu hakkında ayrıntılı bilgiler sağlayarak beyin vasküler yapılarının ve oksijen dağılımının invaziv olmayan analizini...

Sıçan Beyin Hemodinamiğinin Non-İnvaziv Yüksek Frekanslı Ultrason ve Doppler Görüntülemesi

Erken evre hemodinamik disfonksiyon böbrek hastalığının gelişimi için kritik öneme sahiptir. Ancak, tespit metodolojileri sınırlıdır. Sonografideki son gelişmeler, böbrek hasarının erken tespiti için invaziv olmayan, doğru bir seçenek sunmaktadır. Bu çalışma, ilaca bağlı nefrotoksisite sıçan modeli kullanarak böbrek fonksiyon bozukluğunu tespit etmek için adım adım sonografik bir metodolojiyi özetlemektedir.

Sıçanlarda sonografik Teknoloji Kullanımı İlaç Kaynaklı Böbrek Hemodinamik Bozukluğu Erken Tespiti

İnsanlarda endotel fonksiyonu Non-invaziv değerlendirme akım aracılı dilatasyon tekniği ile tespit edilebilir. çalışmaların binlerce bu tekniği kullanmış olmasına rağmen, hiçbir çalışma sıçanlarda non-invaziv bu tekniği yürüttü. aşağıdaki makale brakiyal akım aracılı dilatasyon ve sıçanların yüzeyel femoral arterlerin non-invaziv ölçümü açıklanır.

Flow-Aracılı brakiyal dilatasyonu ve Sıçanlarda Yüzeyel Femoral Arter Ultrason Değerlendirmesi

Klinik ayarları'nda, karaciğer biyopsisi alkolsüz steatohepatitis (yağlanma, inflamasyon, balon Hepatosit ve fibrozis) aşamaları değerlendirmek için kullanılır. Burada, biz hayatta kalınabilir karaciğer biyopsisi histolojik analizler için klinik ile uyumlu bir şekilde daha fazla terapötik ajanlar değerlendirilmesi etkinleştirmek için kullanılabilecek farelerde göstermektedir.

-Alkolsüz Steatohepatitis (NASH) çözünürlük değerlendirmek farelerde hayatta kalınabilir karaciğer biyopsisi yordam eklenmesi

Mevcut protokol, alkolsüz steatohepatit (NASH) sırasında hücre dışı matriks (ECM) yeniden şekillenmesinin dinamiklerini görselleştirmek için güvenilir bir platform oluşturmak üzere karaciğer in situ perfüzyon / desellülarizasyon ve iki foton mikroskopi yöntemlerini optimize etmektedir.

Alkolsüz Steatohepatitin Bir Fare Modelinde Karaciğer Hücre Dışı Matriksin 3D Görüntülenmesi

Diyete bağlı alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD) fare modeli kullanarak, NAFLD'nin progresyon aşamalarını değerlendirmek için non-invaziv bir yöntem olarak yeni in vivo mikro-bilgisayarlı tomografi görüntüleme tekniklerinin kullanımını, ağırlıklı olarak hepatik vasküler ağa odaklanarak tanımladık.

Alkole Bağlı Olmayan Yağlı Karaciğer Hastalığının Progresyonunu Değerlendirmek İçin Yeni In Vivo Mikrobilgisayarlı Tomografi Görüntüleme Teknikleri

Bu çalışmanın amacı, hepatik fibrozisin erken teşhisi için, hastanın karaciğerindeki her bir vokselin sertliğini içeren ve böylece hastanın karaciğerinin farklı fibroz evrelerindeki dağılım oranını hesaplamak için kullanılabilecek yeni bir üç boyutlu dijital model geliştirmekti.

Hepatik fibrozisin erken tanısı için manyetik rezonans elastografiye dayalı üç boyutlu dijital model

Yüksek uzamsal çözünürlüğe (100 μm) ve duyarlılığa sahip ultra hızlı Doppler ultrason (UFUS), hepatik vaskülatür hakkında kapsamlı bir kalitatif genel bakış elde etmek için uygun bir noninvaziv görüntüleme modalitesini temsil eder. UFUS ayrıca vasküler hastalık mekanizmaları hakkındaki anlayışımızı geliştirmeyi amaçlayan mikrovasküler sistemin kantitatif ölçümlerini de kolaylaştırır.

Ultrafast Doppler Ultrason Kullanılarak Farelerin Hepatik Vaskülatürünün Görüntülenmesi ve Miktarının Belirlenmesi

Bu çalışma, kan-beyin bariyeri (BBB) açıklığını izlemek için juguler ven kateterizasyonu ile canlı sıçanları kullanan kombine manyetik rezonans görüntüleme (MRI) ve düşük yoğunluklu darbeli odaklanmış ultrason (FUS) protokolünü açıklamaktadır.

Klinik Öncesi Odaklanmış Ultrason Sistemi ile Sıçanlarda Kan-Beyin Bariyeri Açıklığının İzlenmesi

Bu protokolün amacı, kistik fibrozisli kişilerde hepatobiliyer tutulumu ve ileri kistik fibrozis, karaciğer hastalığını izleyen pediatrik gastroenterologlar için bakım noktası geçici elastografinin tekniğini ve kullanımını göstermektir.

Kistik Fibrozisli Pediatrik Popülasyonlarda Karaciğer Hastalığının Değerlendirilmesi için Non-İnvaziv Bakım Noktası Geçici Elastografisinin Uygulanması

Keşfedin: Ultrason ve Kesme Dalgası Elastografi kullanarak sıçan modellerinde NASH ilerlemesini izleyin. Bu invaziv olmayan yöntem, karaciğer yağlanması ve fibrozisini uzunlamasına değerlendirir, histolojik biyopsi ihtiyacını azaltır ve ilaç keşfi çalışmaları için yüksek verimli bir protokol sunar.

NAFLD/NASH'in Sıçan Modelinde Ultrason ve Kesme Dalgası ElastografiSi Görüntüleme Uygulaması

Daha fazla video keşfet