NAFLD/NASH'in Sıçan Modelinde Ultrason ve Kesme Dalgası ElastografiSi Görüntüleme Uygulaması

Ultrason ve kesme dalgası elastografisi kullanımı, araştırmacıların alkolsüz steatohepatit modellerinde karaciğer yağlanması ve fibrozis örtük değişikliklerini ölçmelerini sağlar. Bu görüntüleme yöntemi non-invaziv, yüksek verimli ve klinik olarak çevrilebilir bir tekniktir ve ilaç keşfi sırasında alkolsüz steatohepatit modellerinde hastalık evresini ve etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir. Başlamak için, 150 ila 175 gram ağırlığındaki altı ila yedi haftalık erkek Wistar Han sıçanlarını, yaklaşık 22 santigrat derecede uygun yatak ve 12 ila 12 saatlik açık / karanlık döngü ile% 40 ila% 70 bağıl nem içeren ayrı ayrı havalandırılmış kafeslere yerleştirin.

20 sıçana kolin eksikliği, % 1 kolesterollü yüksek yağlı diyet ve standart laboratuvar kemirgen yemeği ile 20 sıçan daha sağlayın. Görüntüleme cihazını kurmak için, görüntüleme sırasında hayvanı sıcak tutmak için görüntüleme alanına ısıtılmış bir yüzey yerleştirin ve inhalant anesteziyi sağlamak için anestezi burun konisini sabitlayın. Ultrason probını istenen yere taşımak ve probun hayvan üzerinde dinlenmesini önlemek için ultrason prob tutucusuna kullanın.

Sıçan tamamen uyuşturulduktan sonra, indüksiyon odasından içinde dolaşan ılık sıcak su battaniyesine aktarın. Saçı göğüs kafesinden sıçanın sağ tarafındaki pelvise çıkarmak için kimyasal epilasyon kremi kullanın. Sıçanı sol yanal recumbent pozisyonuna yerleştirin ve üst pençeleri başın üzerine sıcak bir görüntüleme platformuna bantlayın.

Cihaz kontrol panelinde hasta tuşuna basın ve çalışma tasarımına göre konuyu tanımlayın. Sıçanın aldatılmış cilt bölgesine az miktarda ısıtılmış ultrason jeli uygulayın. Jel kaplı bölgeye dokunmak için ultrason probunu hareket ettirin.

İç organların canlı B modu görüntüsü ekranda göründüğünde, ultrason probunu bel omurlarına paralel olarak kalçanın biraz üstündeki bölgeye taşıyın. Büyük renal arter ve korteks medulla ayrımını tanımlayarak sağ böbreği bulmak için B modu ekran kullanın. Görüntünün tek bir düzleminde karaciğerin bir bölümünü gözlemleyin ve görüntüde hava kabarcıklarının veya gölgelerin bulunmadığından emin olun.

Net bir görüntü elde etmek için odağı ayarlayın ve böbrek korteksi ve karaciğer parenkiminin aynı düzlemde olduğundan emin olun. Bulanık görüntüler yakalamamak için ekranı dondurırken hayvanın nefesler arasında olduğundan emin olun. Seçilen ilgi çekici bölgeden dokunun göreli parlaklığını ölçmek için B modu oranını seçin.

İki milimetrelik bir daire oluşturun ve böbreğin sağında bulunan karaciğerin görüntüsünde ilgi alanına yerleştirin. Böbrek korteksinin görüntüsüne yeni bir daire yerleştirin, karaciğer ve böbrek korteks üzerindeki dairelerin derinliklerini aynı tutun. Hepato-renal indeksini B modu oranı olarak görüntülemek için kontrol panelinde seçme düğmesine basın ve ölçümü dokunun farklı derinliklerinde ve düzlemlerinde üç kez tekrarlayın, ardından ortalamayı hesaplayın.

Karaciğeri B modunu kullanarak bulmak için probu sağ altkostal alanda enine şekilde hareket ettirin. Karaciğerin çoğunlukla parankim olan ve portal damar ve hepatik arter gibi büyük kan damarlarından arındırılmış net bir alanını bulun, ardından dokunun kesme elastikiyet haritasını oluşturmak için kontrol panelinde SWE düğmesine basın. Gölgelerden arındırılmış bir alanda karaciğer kapsülünün altındaki SWE kutusunun boyutunu ve konumunu ayarlayın.

Kutu dolu ve stabil olduğunda, sıçan nefesler arasındayken kontrol panelinde dondur düğmesine basın. Kesme dalgası elastikiyeti haritasındaki ilgi çekici bölgeden esnekliği hesaplamak için cihazın dokunmatik ekranındaki Q-Box'a dokunun. Bir daire ve veri kutusu görünecektir.

Daireyi gölgesiz alana düzgün renklendirme ile yerleştirin, sertlik alanlarından kaçının. Karaciğerin farklı bölgelerinden SWE haritalı görüntüler toplamak için probu yukarı ve aşağı veya karın üzerinde yanlara doğru hareket ettirerek prosedürü üç kez tekrarlayın. Bittiğinde, bandı pençelerden çıkarın ve fazla jeli silin.

Sıçanı tekrar sıcak ve kuru bir kafese yerleştirin ve tamamen iyileşmesine izin verin. İzleme topını ve Seç düğmesini kullanarak hastanın adının yanındaki kutuyu işaretleyerek veri analizi için gerekli tüm taramaları seçin. Dosyaları dışa aktarmadan sonra, her taramanın ayrı bir JPG dosyasını açın ve görüntünün sağ tarafındaki verileri gözlemleyin.

Tüm verileri bir elektronik tabloya veya başka bir veritabanı yönetim yazılımına kopyalayın ve istediğiniz istatistiksel analizleri yapın. Kontrol ve kolin eksikliği olan, yüksek yağlı diyet gruplarından hepato-renal indekslerin temsili görüntüleri, böbrek korteksindeki karaciğer parlaklığının hemen hemen aynı olduğunu ve hepato-renal indeksinin kontrol grubunda birden az olduğunu göstermektedir. Yüksek yağlı diyet grubunda karaciğerin parlaklığı arttı ve hepato-renal indeksi altı haftada 1.91'e, 12 haftalık zaman noktalarında ise 1.79'a yükseldi.

Yüksek yağlı diyet grubunun hepato-renal indeks değerleri, bir platoya ulaşmadan önce ilk üç ila altı hafta boyunca hızlı bir şekilde yükseldi. Yağ kırmızısı O boyası ile lekelenmiş karaciğer bölümlerinde, yüksek yağlı diyet grubunda kontrol grubuna göre önemli ölçüde artan bir lekeli bölge görüldü. Yüzdelik lekeli bölge ile hepato-renal indeksi arasında da korelasyon bulundu.

Yüksek yağlı diyet grubunda doku sertliği 12 hafta içinde giderek artmış ve fibrozis nedeniyle 23,1 kilopaskal sayısına ulaşmıştır. Karaciğer örnekleri fibrozisin bir göstergesi olarak kollajeni lokalize etmek için picrosirius kırmızısı ile boyandı. Yüksek yağlı diyet grubunda kontrol grubuna göre yüzde lekeli bölgede belirgin bir artış gözlenmiştir.

Ayrıca yüzde lekeli alan ile kesme dalgası E modülü sayıları arasında güçlü bir korelasyon bulundu. Dönüştürücü ve ölçüm dairelerini veya kutularını düzgün bir şekilde yerleştirmek önemlidir. Görüntülerdeki eserlerden kaçınmak, tekrarlanabilir ve tutarlı ölçümlere izin verecektir.

İşlemden sonra görüntülemede görülen sonuçları doğrulamak için nekropsi dokusunda karaciğer trigliseritlerinin ex vivo ölçümleri ve kollajen gen ekspresyonları da yapılabilir.