Name: Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: Öğrenin, filament tekniğiyle farelerde geçici orta serebral arter tıkanıklığı modelini. Bu yöntem, insan inmesindeki reperfüzyonu taklit ederek kan akışını tamamen geri kazandırır ve deneysel inme araştırmalarında tekrarlanabilirliği artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ImmunoStroke Konsorsiyumu'nun (FOR 2879, For immune cells to stroke recovery) tüm işbirliği ortaklarımıza öneriler ve tartışmalar için teşekkür ederiz. Bu çalışma Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Alman Araştırma Vakfı), Münih Sistem Nörolojisi Kümesi (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) çerçevesinde ve LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ve LL-112/1-1 hibeleri kapsamında Almanya'nın Mükemmellik Stratejisi kapsamındadır.

Bu videoda bildirilen deneyler, deney hayvanlarının kullanımına ilişkin ulusal yönergeleri izleyerek yapıldı ve protokoller Alman hükümet komiteleri (Regierung von Oberbayern, Münih, Almanya) tarafından onaylandı. On haftalık erkek C57Bl/6J fareler kullanıldı ve kontrollü sıcaklık (22 ± 2 °C) altında, 12 saat açık-karanlık döngü süresi ve peletlenmiş yiyecek ve su reklam libitum erişimi ile yerleştirildi.
1. Malzeme ve aletlerin hazırlanması
<ol><li>37 °C'de anestezi sırasında çalışma bölgesinin sıcaklığını ve fare gövdesi sıcaklığını korumak için ısı battaniyesini bağlayın.</li>
	<li>Otoklav makası ve forseps, % 70 etanol çözeltisi hazırlayın ve mevcut dekpanthenol göz merhemini, birkaç parça pamuğu ve 5-0 kaplamalı örgülü polyester dikişi kullanıma hazır tutun. Hayvanın kesi bölgesini nemli tutmak için% 0,9 tuzlu su çözeltisi (iğnesiz) ile 1 mL şırınga hazırlayın. Anestezi gazını hazırlayın (%100 O2 + izofluran).</li>
	<li>10 μL pipet ucunun (3-5 mm uzunluk) ucunu keserek lazer Doppler probu için bir tutucu hazırlayın. NOT: Tüm aletler sıcak boncuk sterilizatörü kullanılarak sterilize edilir. Yüzeyler de mikrobiyal dezenfektan spreyi ile ameliyat öncesi ve sonrası dezenfekte edilir. Ameliyattan önce, farelerin başını ve göğsünü çevreleyen alanlar yara dezenfeksiyon spreyi ile dezenfekte edilir.</li>
</ol>2. Lazer Doppler hazırlanması
<ol><li>Ameliyattan 30 dakika önce fareye analjezi enjekte edin (intraperitoneal olarak 4 mg/kg Carprofen ve 0,1 mg/kg Buprenorfin).</li>
	<li>Fareyi, spontan vücut hareketi ve vibrissae'nin kesilmesine kadar% 4'lük bir izofluran akış hızı ile indüksiyon odasına yerleştirerek uyuşturun.</li>
	<li>Fareyi anestezi maskesinde burnu ile operasyon bölgesinde eğilimli bir konuma getirin. bir dakika daha izofluran konsantrasyonu% 4'te tutun, sonra azaltın ve% 2'de tutun.</li>
	<li>Fare gövdesi sıcaklığını 37 °C'de tutmak için ilgili geri bildirim kontrollü ısıtma yastığını ayarlayın ve cerrahi prosedürler boyunca sıcaklığı izlemek için rektal probu hafifçe takın.</li>
	<li>Her iki göze dekpanthenol göz merhem uygulayın.</li>
	<li>Sol gözü ve kulağı çevreleyen cilt ve saçları %70 etanol ile dezenfekte edin.</li>
	<li>Kafatası kemiğini ortaya çıkarmak için kafa derisini sol kulak ile göz (1 cm uzunluğunda) arasında kesin.</li>
	<li>Kafatasının altındaki MCA'yı görselleştirmek için zamansal kası kesin ve emekli edin.</li>
	<li>Lazer Doppler probunu/lifini sol MCA'nın üstünde tutkalla sabitle. Daha sonra, ucu tutucunun etrafındaki yarayı kapatmak için cildi yapıştırın. İşlemi hızlandırmak için 2-3 damla sertleştirici tutkal uygulayın. Lazer Doppler lifinin yapıştırılmadığını ve uç tutucudan herhangi bir zamanda kolayca çıkarılabildiğinden emin olun.</li>
</ol>3. Geçici MCAo modeli (tıkanma)
<ol><li>Fareyi sırtüstü konumuna getirin. Somurtma anestezi konisine koyun ve pençeleri bantla sabitleyin.</li>
	<li>Göğsü çevreleyen deriyi ve saçları dezenfekte edin ve boyunda 2 cm uzunluğunda bir orta çizgi kesisi yapın.</li>
	<li>Deriyi ve altdbüler bezleri ayırmak için tokalar kullanın. Sternomastoid kası tutmak, cerrahi alanı ortaya çıkarmak ve sol ortak karotis arteri (CCA) bulmak için retraktörler kullanın. CCA'yı bağ dokusundan ve çevresindeki sinirlerden (vagal sinire zarar vermeden) arındırın ve çatallanmadan önce geçici bir ligasyon gerçekleştirin.</li>
	<li>Dış şahdamarını (ECA) parçalara ayırın ve en distal görünür kısımda kalıcı bir düğüm bağlayın. ECA'nın altına çatallamaya yakın bir dikiş daha yerleştirin ve daha sonra kullanılmak üzere gevşek bir düğüm hazırlayın.</li>
	<li>İç şahdamarını (ICA) parçalara ayırın ve üzerine çatallanmanın 5 mm üzerine bir mikrovasküler klips yerleştirin. Vagal sinirine zarar vermediklerden emin olun.</li>
	<li>Sıkı ve gevşek ligasyonlar arasında ECA'ya küçük bir delik açın; tüm ECA'yı kesmemeye dikkat edin.</li>
	<li>Filamenti tanıtın ve CCA'ya doğru ilerletin. Filamenti bu pozisyonda kısa bir süre sabitlemek ve mikrovasküler klipsi çıkarırken kanamayı önlemek için ECA'daki gevşek ligasyonu lümen etrafında sıkın.</li>
	<li>Mikrovasküler klipsi çıkarın ve lazer Doppler tarafından ölçülen beyin kan akışında keskin bir azalma (%>80) tespit ederek MCA'nın kökenine ulaşılana kadar filamenti ICA'dan geçirin. ECA etrafındaki düğümü daha da sıkılaştırarak filamenti bu konumda sabitlayın. NOT: Filament uygun yöne doğru gittiğinde, sorunsuz bir şekilde ilerler ve direnç gözlenmemelidir.</li>
	<li>Filament eklemeden önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin.</li>
	<li>Yarayı dikmeden önce retraktörü çıkarın ve sternomastoid kası ve submandibular bezleri yeniden konumlandırın. Lazer Doppler probını çıkarın ve hayvanı 1 saat boyunca (filament çıkarılana kadar) 37 °C'de bir kurtarma odasına yerleştirin.</li>
</ol>4. Geçici MCAo modeli (Reperfüzyon)
<ol><li>Fareyi, spontan vücut hareketi ve vibrissae'nin kesilmesine kadar% 4'lük bir izofluran akış hızı ile indüksiyon odasına yerleştirerek uyuşturun.</li>
	<li>Her iki göze dekpanthenol göz merhem uygulayın.</li>
	<li>Fareyi anestezi maskesinde snout ile operasyon bölgesinde eğilimli bir konuma getirin. bir dakika daha izofluran konsantrasyonu% 4'te tutun, sonra azaltın ve% 2'de tutun. Hayvanın pençelerini bantla sabitleyin.</li>
	<li>Lazer Doppler probını prob tutucusuna yerleştirin.</li>
	<li>Yara dikişini çıkarın, cildi ve altdbüler bezleri ayırmak için tokalar kullanın. Sternomastoid kası hafifçe çekmek ve cerrahi alanı açığa çıkarmak için retraktörler kullanın.</li>
	<li>Filamenti sıkılaştıran ECA dikişini gevşetin ve filamenti hafifçe çekin. Çıkarma sırasında filamentin silikon kauçuk kaplamasına zarar vermekten kaçının.</li>
	<li>ECA dikişini sıkıca bağlayın.</li>
	<li>Lazer Doppler cihazındaki serebral kan akışındaki artışı onaylayın (>en önceki başlangıç değerinin% 80'i).</li>
	<li>Filament kaldırmadan önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin.</li>
	<li>CCA'dan çatallanmadan önce geçici ligasyonu açın.</li>
	<li>Retraktörü çıkarın ve yarayı dikmeden önce sternomastoid kası ve submandibular bezleri yeniden konumlandırın. Hayvanı anesteziden kurtulmak için 1 saat boyunca 37 °C'de bir iyileşme odasına yerleştirin.</li>
	<li>İyileştikten sonra, fareleri sıcaklık kontrollü bir odada kafeslerine geri koyun.</li>
	<li>Ameliyattan sonraki 3 güne kadar kafes zemininde küçük Petri kaplarına ıslak yiyecek peletleri ve hidrojel ekleyerek hayvanlara iyi bakın.</li>
	<li>Ameliyattan sonra 3 d için her 12 saatte bir analjezi enjekte edin (4 mg/kg Carprofen ve 0.1 mg/kg Buprenorfin).</li>
</ol>5. Sham operasyonu
<ol><li>Arterlerin ligasyonu ve filamentin tanıtımı da dahil olmak üzere yukarıda açıklandığı gibi tüm prosedürleri gerçekleştirin (adım 1-3.7).</li>
	<li>Filamenti yerleştirildikten hemen sonra çıkarın. Daha sonra, hayvanı 1 saat boyunca kurtarma odasına yerleştirin.</li>
	<li>Hayvanı tekrar operasyon bölgesine yerleştirin ve tam beyin kanı akışı restorasyonu sağlamak için CCA'nın geçici ligasyonunu çıkarın.</li>
	<li>Yarayı dikin ve hayvanı anesteziden kurtulmak için 1 saat boyunca 37 ° C'de bir iyileşme odasına yerleştirin. İyileştikten sonra, fareleri sıcaklık kontrollü bir odada kafeslerine geri koyun.</li>
	<li>Ameliyattan sonraki 3 güne kadar kafes zemindeki küçük Petri kaplarına ıslak yiyecek topakları ve hidrojel ekleyerek hayvanlara iyi bakın.</li>
	<li>Ameliyattan sonra 3 d için her 12 saatte bir analjezi enjekte edin (4 mg/kg Carprofen ve 0.1 mg/kg Buprenorfin).</li>
</ol>6. Nöroscore
<ol><li>Neuroscore'u her zaman günün aynı saatinde gerçekleştirin ve bireysel cerrahlar arasında "nötr bir koku" sağlamak için cerrahi kıyafetler kullanın.</li>
	<li>Fareleri testden önce "açık" bir kafesle odada 30 dakika dinlendirin.</li>
	<li>Tablo 1 ve Tablo 2'deki her öğeyi 30 s için gözlemleyin.</li>
</ol>7. İntra kardiyak perfüzyon
<ol><li>Fosfat tamponlu salin (PBS)-heparin (2 U/mL) içeren 20 mL'lik bir şırınna hazırlayın ve yerçekimi tahrikli perfüzyonu kolaylaştırmak için tezgahın 1 m üstüne yerleştirin. (İsteğE BAĞLI: PBS, pH 7.4'te %4 PFA içeren 20 mL şırıng kullanarak %4 paraformaldehit (PFA) ile intra kardiyak perfüzyon gerçekleştirin).</li>
	<li>İntrperitoneally enjekte 100 μL ketamin ve ksilazin (sırasıyla 120 ve 16 mg/kg vücut ağırlığı). 5 dakika bekleyin ve spontan vücut hareketinin ve vibrissae'nin durmasını onaylayın.</li>
	<li>Hayvanı sırtüstü bir pozisyonda sabitlayın ve karın vücut yüzeyini% 70 etanol ile dezenfekte edin.</li>
	<li>Karın içine 3 cm uzunluğunda bir kesi yapın; kalbi tamamen görselleştirmek için diyaframı, kaburgaları ve sternumu kesin.</li>
	<li>Sağ kulakçıkta küçük bir kesi yapın ve perfüzyon kanüllerini sol ventrikül içine yerleştirin.</li>
	<li>20 mL PBS-heparin ile perfuse.</li>
	<li>Perfüzyondan sonra hayvanın kafasını koparın ve beyni çıkarın.</li>
	<li>Beyni toz kuru buz üzerinde dondurun ve daha fazla kullanıma kadar -80 °C'de saklayın.</li>
</ol>8. Enfarktüs hacmi
<ol><li>Kriyoeksiyon için, beyinleri her 400 μm'de bir 20-μm kalınlığında bölümlere kesmek için bir kriyostat kullanın. Bölümleri slaytlara yerleştirin ve kullanıma kadar slaytları −80 °C'de saklayın.</li>
	<li>Cresyl mor (CV) boyama<ol>
<li>Kristaller çözülene kadar 500 mL H2O'da (60 °C) 0,5 g CV asetat karıştırıp ısıtarak boyama solüsyonunun hazırlanmasını sağlar. Çözelti soğuduktan sonra koyu bir şişede saklayın. Her kullanımdan önce 60 °C'ye ısıtın ve filtreleyin.</li>
		<li>Slaytları oda sıcaklığında 30 dakika kurutun. Onları 15 dakika boyunca% 95 etanol, 1 dakika boyunca% 70 etanol ve ardından 1 dakika boyunca% 50 etanol içine daldır.</li>
		<li>Slaytları damıtılmış suya 2 dakika daldırın; damıtılmış suyu yenileyin ve slaytları 1 dakika boyunca suya yerleştirin. Daha sonra, slaytları önceden ısıtılmış boyama çözeltisine 60 °C'de 10 dakika daldırın. Slaytları damıtılmış suda iki kez 1 dakika yıkayın.</li>
		<li>Slaytları 2 dakika boyunca% 95 etanol içine daldırın. Onları 5 dakika boyunca% 100 etanol içine yerleştirin; % 100 etanol tazeleyin ve slaytları tekrar etanol içine 2 dakika yerleştirin. Daha sonra, slaytları bir montaj ortamı ile örtün.</li>
		<li>Analiz (Şekil 4C)<ol>
<li>Slaytları tarayın ve aşağıdaki denklemi kullanarak ödemi düzeltmek için Swanson yöntemi12 ile dolaylı enfarktüs hacmini analiz edin: (İskemik alan) = (iskemik bölge)-((ipsilateral yarımküre)-(kontrallateral yarımküre))</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li>
<li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1%2C026+experimental+treatments+in+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">1,026 experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li>
<li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia%3A+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li>
<li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 17 (2), 123-135 (1997).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423(2011).</li>
<li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li>
<li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Journals+unite+for+reproducibility%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679(2014).</li>
<li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+%28pRCT%29%3A+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li>
<li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+next+step+in+translational+research%3A+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, Suppl 2 271-279 (2016).</li>
<li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit%2C+1978+to+1987%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li>
<li>Lourbopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inadequate+food+and+water+intake+determine+mortality+following+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Inadequate food and water intake determine mortality following stroke in mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (6), 2084-2097 (2017).</li>
<li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li>
<li>Jackman, K., Kunz, A., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+focal+cerebral+ischemia+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Modeling focal cerebral ischemia in vivo.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 195-209 (2011).</li>
<li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li>
<li>Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+intraluminal+MCAO%3A+cerebral+infarct+evaluation+by+cresyl+violet+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (69), e4038(2012).</li>
<li>Rha, J. H., Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+recanalization+on+ischemic+stroke+outcome%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The impact of recanalization on ischemic stroke outcome: a meta-analysis.</a> Stroke. 38 (3), 967-973 (2007).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+filament+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats%3A+does+the+reperfusion+method+matter+24+hours+after+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Transient filament occlusion of the middle cerebral artery in rats: does the reperfusion method matter 24 hours after perfusion.</a> BMC Neuroscience. 13, 154(2012).</li>
<li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+stroke%3A+experimental+models+and+reality%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Ischemic stroke: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn-Schmiedebergs+Archiv+f%C3%BCr+Experimentelle+Pathologie+und+Pharmakologie%22%5BJournal%5D)">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv für Experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 259 (2), 211(1968).</li>
<li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adhesive+removal+test%3A+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4 (10), 1560-1564 (2009).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> Journal of Neuroscience Methods. 117 (2), 207-214 (2002).</li>
<li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke%2C+cortical+ablation%2C+parkinsonism+and+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).</li>
<li>Roth, S., Yang, J., Cramer, J., Malik, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+cytokine-induced+sickness+behavior+after+ischemic+stroke+by+an+optimized+behavioral+assessment+battery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Detection of cytokine-induced sickness behavior after ischemic stroke by an optimized behavioral assessment battery.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 91, 668-672 (2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak rakip çıkarları yoktur.

Mevcut protokol, standartlaştırılmış geçici bir MCAo modeli oluşturmak için bir Alman çok merkezli araştırma konsorsiyumunun ("ImmunoStroke") konsensüs anlaşmasına dayanan deneysel bir inme modelini tanımlamaktadır. MCA'nın kökenine ECA üzerinden silikon kaplı bir filament getirilerek kurulan geçici MCAo modeli, sınırlandırılmış bir tıkanıklık döneminden sonra arteriyel reperfüzyon elde etmek için en yaygın kullanılan inme modellerinden biridir. Bu nedenle, bu yordam çeviriyle ilgili bir kontur modeli olarak kabul edileb...

İnme, dünya çapında en sık görülen ölüm ve sakatlık nedenlerinden biridir. Esas olarak iskemik ve hemorajik olmak üzere iki farklı inme şekli olmasına rağmen, tüm inme vakalarının% 80-85'i iskemik1' dir. Şu anda, iskemik inme hastaları için sadece iki tedavi mevcuttur: rekombinant doku plazminojen aktivatörü (rtPA) veya mekanik trombektomi ile farmakolojik tedavi. Ancak terapötik zaman penceresinin dar ve çoklu dışlama kriterleri nedeniyle bu özel tedavi seçeneklerinden sadece belirli sayıda hasta yararlanabiliyor. Son yirmi yılda preklinik ve çevirisel inme araştırmaları nöroprotektif yaklaşımların incelenmesine odaklanmıştır. Bununla birlikte, klinik çalışmalara ulaşan tüm bileşikler şimdiye kadar hasta için hiçbir iyileşme göstermedi2.
İn vitro modeller inmenin tüm beyin etkileşimlerini ve patofizyolojik mekanizmalarını doğru bir şekilde üretemediğinden, hayvan modelleri preklinik inme araştırmaları için çok önemlidir. Bununla birlikte, tek bir hayvan modelinde insan iskemik inmenin tüm yönlerini taklit etmek mümkün değildir, çünkü iskemik inme son derece karmaşık ve heterojen bir hastalıktır. Bu nedenle farklı türlerde zamanla farklı iskemik inme modelleri geliştirilmiştir. Serebral arterioles fototombozu veya orta serebral arterin (MCA) kalıcı distal tıkanıklığı, neokortekste küçük ve lokal olarak tanımlanmış lezyonlara neden olan yaygın olarak kullanılan modellerdir3,4. Bunların yanı sıra, en sık kullanılan inme modeli muhtemelen MCA'nın geçici bir tıkanıklığının elde edildiği "filament modeli" olarak adlandırılır. Bu model, MCA'nın kökenine geçici bir dikiş filamentinin girişinden oluşur, bu da serebral kan akışının aniden azalmasına ve ardından subkortikal ve kortikal beyin bölgelerinin büyük enfarktürüne yol5. Çoğu kontur modeli MCA oklüzyonlarını taklit etse de 6, "filament modeli" iskemik zamanın hassas bir şekilde sınırlandırılmasına izin verir. Filament giderme ile reperfüzyon, spontan veya terapötik (rtPA veya mekanik trombektomi) pıhtı lizizi sonrası beyin kan akışı restorasyonunun insan klinik senaryosunu taklit eder. Bugüne kadar, bu "filament modelinin" farklı modifikasyonları tanımlanmıştır. En yaygın yaklaşımda, ilk olarak Longa ve ark. 19895yılında, MCA7'ninkökenine ortak karotis arter (CCA) aracılığıyla silikon kaplı bir filament tanıtılır. Yaygın olarak kullanılan bir yaklaşım olmasına rağmen, bu model reperfüzyon sırasında kan akışının tamamen geri yüklenmesine izin vermez, çünkü CCA filamentin çıkarılmasından sonra kalıcı olarak bağlanır.
Son on yılda, giderek artan sayıda araştırma grubu, bu "filament modelini" kullanarak farelerde inme modellemeye ilgi duyuyor. Bununla birlikte, bu modelin önemli değişkenliği ve prosedürlerin standardizasyonunun olmaması, şimdiye kadar bildirilen deneysel sonuçların ve bilimsel bulguların yüksek değişkenliğinin ve zayıf tekrarlanabilirliğinin nedenlerinden bazılarıdır2,8. Araştırma laboratuvarları arasındaki düşük tekrarlanabilirlik oranına atıfta bulunan mevcut "çoğaltma krizinin" potansiyel bir nedeni, aynı deneysel metodolojiyi kullanan araştırma grupları arasındaki karşılaştırılamaz inme enfarktüs hacimleridir9. Aslında, ilk preklinik randomize kontrollü çok merkezli deneme çalışmasını yaptıktan sonra10, bu deneysel inme modelinin yeterli standardizasyonunun olmamasının ve sonraki sonuç parametrelerinin bağımsız laboratuvarlar arasındaki preklinik çalışmalarda tekrarlanabilirliğin başarısızlığının ana nedenleri olduğunu doğrulayabildik11 . Ortaya çıkan enfarktüs boyutlarındaki bu şiddetli farklılıklar, aynı inme modelini kullanmasına rağmen, sadece doğrulayıcı araştırmalar için değil, aynı zamanda sağlam ve tekrarlanabilir modellerin eksikliği nedeniyle bilimsel işbirlikleri için de haklı bir tehdit oluşturmaktadır.
Bu zorluklar ışığında, "ImmunoStroke" araştırma konsorsiyumu (https://immunostroke.de/) içindeki işbirlikçi araştırma çalışmalarında kullanılan standartlaştırılmış geçici BIR MCAo modeli prosedürünü ayrıntılı olarak geliştirmeyi ve tanımlamayı amaçladık. Bu konsorsiyum, inme iyileşmesinin mekanistik ilkelerinin altında kalan beyin-bağışıklık etkileşimlerini anlamayı amaçlamaktadır. Ayrıca inme sonuç analizi için histolojik ve ilgili fonksiyonel yöntemler sunulmaktadır. Tüm yöntemler, ImmunoStroke konsorsiyumunun tüm araştırma laboratuvarlarında kullanılan yerleşik standart işletim prosedürlerine dayanmaktadır.

<table><tbody><tr><td>45 derece rampa</td><td>H & S Kunststofftechnik</td><td></td><td>yüksekliği: 18 cm</td></tr><tr><td>5/0 tehdit</td><td>Pearsalls</td><td>10C103000</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Şırınga</td><td>Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Asetik Asit</td><td>Sigma Life Science</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran için anestezi sistemi</td><td>Dräger</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen pomat</td><td>Bayer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6J fareler</td><td>Charles Nehir</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Kelepçesi</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>Klips</td><td>FST</td><td>18055-04</td><td></td></tr><tr><td>Klips tutucu</td><td>FST</td><td>18057-14</td><td></td></tr><tr><td>Kotonlar</td><td>NOBA Verbondmitel Danz</td><td>974116</td><td></td></tr><tr><td>Kresil menekşe</td><td>Sigma Yaşam Bilimleri</td><td>C5042-10G</td><td></td></tr><tr><td>Kriyostat</td><td>Termo Bilimsel CryoStarNX70</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etanol %70</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>521005</td><td></td></tr><tr><td>Etanol %96</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>522078</td><td></td></tr><tr><td>Etanol %99</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>ETO-5000-99-1</td><td></td></tr><tr><td>Filamentler</td><td>Doccol</td><td>602112PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>İnce 45 açılı forseps</td><td>FST</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>İnce forseps</td><td>FST</td><td>11252-23</td><td></td></tr><tr><td>İnce Makas</td><td>FST</td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>Tutkal</td><td>Orechseln</td><td>BSI-112</td><td></td></tr><tr><td>Sertleştirici Tutkal</td><td>Drechseln & Mehr</td><td>BSI-151</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma battaniyesi</td><td>FHC DC Sıcaklık Kontrol Cihazı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Abbot</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Isopentan</td><td>Fluka</td><td>59070</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Inresa Arzneimittel GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lazer Doppler</td><td>Perimed</td><td>PF 5010 LDPM, Periflux Sistemi 5000</td><td></td></tr><tr><td>Lazer Doppler probu</td><td>Perimed</td><td>91-00123</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Tuzlu Su pH: 7.4</td><td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td><td>P32799</td><td></td></tr><tr><td>Kurtarma odası</td><td>Mediheat</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Roti-Histokit montaj ortamı</td><td>Roth</td><td>6638.1</td><td></td></tr><tr><td>Tuzlu su çözeltisi</td><td>Braun</td><td>131321</td><td></td></tr><tr><td>Neşter</td><td>Tüyü</td><td>02.001.30.011</td><td></td></tr><tr><td>Silikon kaplı filamentler</td><td>Doccol</td><td>602112PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Leica</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Slaytlar</td><td>Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Yaylı Makas</td><td>FST</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Xylacine</td><td>Albrecht</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde modelleme İnme: dış karotid arter yoluyla geçici orta serebral arter tıkanıklığı

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

İnme, gelişmiş ülkelerde üçüncü en sık mortalite nedeni ve edinilmiş erişkin sakatlığının önde gelen nedenidir. Bugüne kadar terapötik seçenekler inmeden sonraki ilk saatlerde inme hastalarının küçük bir oranı ile sınırlıdır. Özellikle terapötik zaman penceresini uzatmak için yeni terapötik stratejiler kapsamlı bir şekilde araştırılmaktadır. Bu güncel araştırmalar, inme sonrası inme sonrası inflamasyon, anjiogenez, nöronal plastisite ve rejenerasyon gibi önemli patofizyolojik yolların incelenmesini içerir. Son on yılda, bağımsız araştırma grupları arasında deneysel sonuçların ve bilimsel bulguların zayıf tekrarlanabilirliği konusunda artan bir endişe vardır. "Çoğaltma krizi" olarak adlandırılan krizin üstesinden gelmek için, tüm prosedürler için ayrıntılı standartlaştırılmış modellere acilen ihtiyaç vardır. "ImmunoStroke" araştırma konsorsiyumu (https://immunostroke.de/) içinde bir çaba olarak, geçici orta serebral arter tıkanıklığının (MCAo) standartlaştırılmış bir fare modeli önerildi. Bu model, filamentin çıkarılmasından sonra kan akışının tamamen restorasyonuna izin verir, insan felçlerinin büyük bir kısmında meydana gelen terapötik veya spontan pıhtı lizizini simüle eder. Bu "filament" inme modelinin cerrahi prosedürü ve fonksiyonel analizi için araçlar eşlik eden videoda gösterilmiştir.

Burada açıklanan model, MCA'nın kökenini geçici olarak engellemek için ECA aracılığıyla silikon kaplı bir filamentin tanıtılmasından oluşan yaygın olarak kullanılan "filament" inme modelinin bir modifikasyonudur (Şekil 1). Filament çıkarıldıktan sonra, sadece ECA'daki kan akışı kalıcı olarak durdurulur ve CCA ve ICA'nın tamamen yeniden dengelenmesine izin verir. Bu, insan hastalarında başarılı farmakolojik tromboliz veya mekanik trombektomi sonrası gözlenen duruma benzer şekilde beynin yeter...

Deneysel inme araştırmalarında orta serebral arter tıkanma (MCAo) farklı modelleri kullanılmaktadır. Burada, serebrovasküler trombüsin spontan pıhtı lizisi veya tedavisi nedeniyle çıkarıldığı insan inmesini taklit etmeyi amaçlayan dış karotis arter (ECA) yoluyla geçici MCAo'nun deneysel bir inme modeli tanımlanmıştır.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

Burada açıklanan filament modelinde, kan akışının tamamen restorasyonu ve kayıtta olması, özellikle çevirisel inme çalışmalarında fareler arasında üretilebilir bir akını sağlamak için gerekliliklerdir. Bu model, daha önce açıklanan diğer kontur modellerine kıyasla iki ana avantaja sahiptir. Kraniyotomi gerekmez ve kan damarının tamamen yeniden perfüzyonu elde edilir.Filament modeli, farklı arterlerin proses manipülasyonu içeren karmaşık bir cerrahi müdahaledir. Tüm bunların görselleştirilmesi ve açıklanması küçük ama önemli adımlardır, beyin cerrahlarının öğrenme süresini hızlandırabilir. Operasyon bölgesinin sıcaklığını ve anestezi sırasında fare gövdesi sıcaklığını 37 santigrat derecede korumak için ısı battaniyesini bağlayın.Otoklav makası ve forseps, %70 etanol çözeltisi ve dekpanthenol göz merhemini hazırlayın ve birkaç parça pamuk ve Beş O kaplamalı örgülü polyester dikişi kullanıma hazır tutun. Kesi bölgesini nemli tutmak için iğnesiz bir mililitre şırıngada% 0,9 tuzlu su çözeltisi hazırlayın. 10 mikroliter pipet ucunun ucunu keserek lazer Doppler probu için bir tutucu hazırlayın.Fare tamamen uyuşturuldıktan sonra, çalışma alanında eğilimli bir konuma yerleştirin. Cerrahi prosedürler boyunca sıcaklığı izlemek için rektal probu hafifçe yerleştirin. Cerrahi bölgeyi dezenfekte ettikten sonra, kafatası kemiğini ortaya çıkarmak için bu kafa derisini sol kulak ve göz arasında kesin.Daha sonra, kafatasının altındaki çoklu serebral arterleri veya MCA'yı görselleştirmek için zamansal kası kesin ve emekli edin. Lazer Doppler probunu veya lifini sol MCA'nın üstünde tutkalla tutarak ucun dış kısmını sabitlayın ve cildi de yapıştıracak şekilde kapatın. İşlemi hızlandırmak için iki ila üç damla sertleştirici tutkal uygulayın.Lazer Doppler lifinin yapıştırılmadığını ve uç tutucudan herhangi bir zamanda kolayca çıkarılabildiğinden emin olun. Fareyi sırtüstü konumuna getirin, ardından somurtma anestezi konisine koyun ve pençeleri bantla sabitleyin. Göğsü çevreleyen cildi ve saçları dezenfekte edin ve boyunda iki santimetre uzunluğunda bir orta çizgi kesiği yapın.Deri submandibular bezi ve sternomastoid kası ayırmak için tokalar kullanın. Cerrahi alanı açığa çıkarmak ve sol ortak karotis arteri veya CCA'yı bulmak için retraktörleri kullanın. CCA'yı vagal sinire zarar vermeden bağ dokusundan ve çevresindeki sinirlerden arındırın ve çatallanmadan önce geçici bir ligasyon gerçekleştirin.Dış şahdamarını veya ECA'yı parçalara ayırın ve en distal görünür kısımda kalıcı bir düğüm bağlayın. ECA'nın altına ve çatallamaya yakın başka bir dikiş yerleştirin, daha sonra kullanılacak gevşek bir düğüm hazırlayın. İç şahdamarını veya ICA'yı parçalara ayırın ve çatallanmanın üzerine yaklaşık beş milimetrelik bir mikrovasküler klips yerleştirin.Vagal sinirine zarar vermediklerden emin olun. Daha sonra sıkı ve gevşek ligasyonlar arasında ECA'ya küçük bir delik açın ve tüm ECA'yı kesmemeyi sağlayın. Filamenti tanıtın ve CCA'ya doğru ilerletin.Filamenti bu konumda bir an için sabitlemek için lümen etrafındaki ECA'daki gevşek ligasyonu sıkın. Mikrovasküler klips çıkarılır ve kanamayı önler. Mikrovasküler klipsi çıkardıktan sonra, MCA'nın kaynağına ulaşılana kadar filamenti ICA'dan geçirin.ECA etrafındaki düğümü daha da sıkılaştırarak filamenti bu konumda sabitlayın. Filament eklemeden önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin. Yarayı dikmeden önce retraktörü çıkarın ve sternomastoid kası submandibular bezinde yeniden konumlandırın.Lazer Doppler probını çıkarın ve hayvanı bir saat boyunca 37 santigrat derecede bir kurtarma odasına yerleştirin. Fareyi anestezi maskesinde snout ile operasyon bölgesinde eğilimli bir konuma yerleştirin, ardından hayvanın pençelerini bantla sabitleyin. Lazer Doppler probını prob tutucusuna yerleştirin.Yara dikişini çıkarın ve cildi, submandibular bezi ve sternomastoid kası ayırmak için tokalar kullanın. Cerrahi alanı açığa çıkarmak için retraktörleri kullanın. Filamenti sıkılaştıran ECA dikişini gevşetin ve filamenti hafifçe çekin.Çıkarma sırasında filamentin silikon kauçuk kaplamasına zarar vermekten kaçının. Filament çıkarılmasından önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin. ECA dikişini sıkıca bağlayın ve lazer Doppler cihazındaki serebral kan akışındaki artışı onaylayın.Tam kan akışını geri yüklemek için CCA'dan çatallanmadan önce geçici ligasyonu açın. Yarayı dikmeden önce retraktörü çıkarın ve sternomastoid kası submandibular bezinde yeniden konumlandırın. Daha sonra, hayvanı anesteziden kurtulmak için bir saat boyunca 37 santigrat derecede bir iyileşme odasına yerleştirin.İyileştikten sonra fareleri sıcaklık kontrollü bir odada kafeslerine geri koyun ve kafes zemindeki küçük Petri kaplarına ıslak yiyecek topakları ve hidrojel ekleyerek hayvanlarla ilgilenin ve ameliyattan sonraki üçüncü güne kadar her 12 saatte bir analjezi enjekte edin. Filament çıkarıldıktan sonra CCA'daki kan akışı geri geldikten sonra, insan hastalarında başarılı mekanik trombektomi sonrası gözlenen duruma benzer şekilde beynin tamamen yeniden perfüzyonu meydana gelir. İnme hayvanları kompozit ve fokal nöro skorda önemli bir değişiklik gösterdi, ancak sham hayvanlarla karşılaştırıldığında genel nöro skorda değil.Alınan enfarktüs hacmi de inme indüksiyondan 24 saat sonra koronal seri beyin bölümlerinin cresol violet boyanma kullanılarak gerçekleştirildi. Lezyon alanı somatosensör ve motor korteksin yanı sıra striatum gibi sub-kortikal yapıları içerir. Enfarktüs hacmi ortalaması 61 ila 62 milimetre kareydi ve etkilenen beyin yarımküresinin% 48'ini temsil ediyordu.Tüm yapıların iyi bir görselleştirilmesine sahip olmak ve FILAMENT'i takabilmek ve MCA kökenini tıkayabilmek için bitişik dokuya, özellikle vagus sinirine zarar vermeden CCA, ECA ve RCA'nın yeterli bir diseksiyonunun yapılması önemlidir.

modeling-stroke-mice-transient-middle-cerebral-artery-occlusion-via

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Biz video intraluminal monofilament kullanarak yetişkin farelerde orta serebral arter oklüzyonu üretmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Ayrıca beyin enfarktüsü ölçüde 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür (TTC) ile boyanarak tarafından nasıl değerlendirileceğini gösterir.

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Intraluminal orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli deneysel iskemik inme modelleri arasında en sık kullanılan model. Burada Lazer Doppler flowmetre kılavuzu ile ayrıntılı olarak tüm model ve onun temsilcisi sonuçları gösterecektir.

Fare lazer Doppler flowmetre Rehberlik İskemik İnme intraluminal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO) Model

Farelerde intraluminal orta serebral oklüzyon modeli sunuldu. Serebral infarkt ölçüde bir nörolojik skoru ve cresyl violet boyama, TTC alternatif boyama, paralel birçok ilgi belirteçleri test etmek büyük avantajı sunarak değerlendirilir.

Intraluminar MCAO Mouse Model: kresil Violet Boyama tarafından Serebral İnfarktı Değerlendirilmesi

Bu videoda, orta serebral arterin silikon kaplı filament bazlı oklüzyonu kullanılarak bir fare modelinde geçici inme geliştirme prosedürü açıklanmaktadır. Geliştirilen model, insan felcini taklit ederek inme tedavisi için yeni terapötik stratejilerin araştırılmasına yardımcı olur.

Filament Yerleştirmeye Dayalı Geçici İnme Modeli: Murin Beyninde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Yapmak İçin Cerrahi Bir İşlem

Orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) çeşitli kemirgen modelleri yaygın deneysel beyin araştırmalarda kullanılır. Burada, insan iskemik strok çoğunluğu tarafından uygulanan zarar tekabül eden bir boyutta tutarlı bir kortikal enfarktüs üreten transkraniyal sürekli uzak MCAO modelini göstermektedir.

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

Intraluminal filaman tıkanıklığı orta serebral arter deneysel kontur rodents en sık kullanılan vivo içinde modeldir. Ortak karotid arter onarım izin vermek için başka bir cerrahi yaklaşım burada, reperfüzyon ortak karotid arter ve orta serebral arter bölge tam bir reperfüzyon veren gerçekleştirilir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Bu protokol, orta büyüklükte bir enfarktüse ve mükemmel bir hayatta kalma oranına sahip benzersiz bir fare vuruşu modeli gösterir. Bu model, klinik öncesi inme araştırmacılarının iskemi süresini uzatmasına, yaşlı fareleri kullanmasına ve uzun vadeli fonksiyonel sonuçları değerlendirmesine olanak tanır.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Bu protokol, orta serebral arterin intraluminal oklüzyonu yoluyla farelerde geçici fokal serebral iskemi modelini açıklar. Ek olarak, manyetik rezonans görüntüleme ve davranış testleri kullanılarak sonuç değerlendirme örnekleri gösterilmiştir.

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Burada, C57BL/6J farelerde transkraniyal elektrokoagülasyon yoluyla distal orta serebral arter tıkanıklığı (dMCAO) modeli oluşturmak ve sonraki nörolojik davranışları ve histopatolojik özellikleri değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Mevcut protokol, serebral damarların anatomik yapısını hasara neden olmadan koruyan bir orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu sıçan modelini tanımlar.

Serebral damarların anatomik yapısına zarar vermeden orta serebral arter tıkanıklığı/reperfüzyonunun bir sıçan modeli

Öğrenin, filament tekniğiyle farelerde geçici orta serebral arter tıkanıklığı modelini. Bu yöntem, insan inmesindeki reperfüzyonu taklit ederek kan akışını tamamen geri kazandırır ve deneysel inme araştırmalarında tekrarlanabilirliği artırır.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Daha fazla video keşfet