Farelerde Stresi Azaltmak için Elleçleme Teknikleri

Benim adım Dr. Thomas Prevot. Bağımlılık ve Ruh Sağlığı Merkezi'nde veya CAMH'de bir bilim adamıyım ve Toronto Üniversitesi Psikiyatri Bölümü'nde yardımcı doçentim. Grubum, veri değişkenliğini azaltmak ve hayvan refahını artırmak için farelerde temel kaygıyı ve reaktiviteyi azaltmaya özel bir ilgiye sahiptir.

Fareler, temel bilim ve preklinik araştırmalarda paha biçilmez varlıklar olduğunu kanıtlamıştır, ancak dünya çapında çok az laboratuvar temel kaygı ve laboratuvar hayvanlarının reaktivitesini kontrol eder, bu nedenle laboratuvarlar arasındaki verilerin tekrarlanabilirliğini zorlaştırır. Temel kaygıya önemli bir katkıda bulunan faktör, konut koşulları, çevresel zenginleştirme ve strese maruz kalma gibi kontrolsüz çevresel değişkenlertir. Konut koşullarının standardizasyonu ve zenginleştirme bu sorunun iyileştirilmesine yardımcı olsa da, deneycilerle etkileşim sırasında strese maruz kalmak farelerde hala büyük ölçüde unaddressed.

Kuyruk işleme, fareyi kuyruktan kaldırma işlemi, özellikle stresli olmasına rağmen, farenin yaygın olarak kullanılan fare işleme tekniğidir. Tünel işleme ve bardak elleçleme dahil olmak üzere kuyruk elleçleme alternatifleri ortaya çıkmıştır. Bu tekniklerin benimsenmesi yavaş olmuştur.

Burada, üç günlük alışkanlık veya 3D elleçleme ile uygulanabilen fincan işlemeye benzer yeni bir tekniği anlatıyoruz. Etkileşimin derecesini ve karmaşıklığını kademeli olarak artırarak ve farenin belirli kullanım kilometre taşlarına tepki olarak ilerleyerek stresi azaltabilir ve rutin kullanımı kolaylaştırabiliriz. Davranış testlerinde farelerde 3D kullanımın etkinliğini değerlendirir, anksiyete benzeri davranışları değerlendirir, deneycilerle etkileşim ve periferik stres hormonu, kortikosteron, seviyeler ve tünel işleme ve kuyruk elleçleme teknikleri ile karşılaştırma sağlarız.

Kafesi yavaşça açın ve kapağı yan tarafa yerleştirin. Fareyi almaya çalışmadan önce eldivenli elinizi ev kafesine tanıtın. Farenin yaklaşık 30 saniye boyunca elin varlığına alışmasına izin verin.

Sonra fareyi fincanlı ellerde almaya çalış. Fare kolayca toplanamazsa, iki ellerinizi birbirine kaplayın ve fareyi kafesin köşesine yönlendirmek için kullanın. Sonra fareyi almak için iki elini de kullan.

Fare kafesten çıkarıldıktan sonra ellerinizi mümkün olduğunca düz ve açık tutun. Farenin özgürce keşfetmesine izin verin. Bu, farenin üzerine basmasını sağlayan düz bir platform sağlar ve ısırma riskini sınırlar.

Avuç içi yukarıda, eli açık ve düz tutun. Diğer elinizi fareye bitişik olarak yerleştirin ve farenin herhangi bir kısıtlama olmadan elden ele serbestçe hareket etmesine izin verin. Düz ellerle bir dakika idare ettikten sonra, fareyi eller arasında hafifçe yuvarlamadan önce avucunuzu gevşetin ve fareyi hafifçe kafanıza koyun.

Eller arasında hafifçe yuvarlanma ve açık ellerinizi serbest keşif arasında değişen dört dakika devam edin. Son iki dakika içinde bir barınak testi yapın. Farenin elinizin kenarına hareket etmesine izin verin ve iki eli bir araya getirin.

Çok yavaşça, ellerinizi kaplar, böylece fare eller tarafından oluşturulan bir sığınağın içine sığar. Gerekirse farenin kaçabilmesi için bir açık bıraktığından emin olun. Fareyi hiçbir kısıtlama olmadan beş ila 10 saniye boyunca barınakta tutmaya çalışın.

Barınak testini son iki dakika içinde üç ila dört kez tekrarlayın. İşlemi aceleye getirmeyin. Fare elin içinde hapsedilerek stresli görünüyorsa, eller arasında yuvarlanmaya ve 30 saniye boyunca serbest keşifle devam edin ve ardından barınak testini yeniden deneyin.

30 saniye boyunca ellerde serbest keşiflere izin verin, ardından fareyi kafesinde hafifçe değiştirin. Herhangi bir dışkı ve idrarın tezgah üstünü% 70 etanol veya uygun bir temizleme çözeltisi ile temizleyin. Dışkı ve idrar eldivenlerini gerektiği gibi temizleyin ve yeni bir kafese geçerken eldivenleri% 70 etanol ile durulayın veya eldivenleri değiştirin.

İkinci güne kadar, fareyi kafesten fincanlı ellerle çıkarmak zaten mümkün olmalıdır. Fare reaktif görünüyorsa, düz eli gerçekleştirin ve açık kafaları 30 saniye ila bir dakika boyunca serbest olarak keşfedin. Aksi takdirde, eller ve barınak testi arasındaki ruloya devam edin.

Eller ve barınak adımları arasındaki rolü ilk günden itibaren iki ila üç dakika boyunca gerçekleştirin. Her adımı birkaç kez gerçekleştirin. Fare barınak testinde rahat görünüyorsa, fareyi sırtta ve kafada evcilmeye çalış.

Fare temastan kaçmaya çalışmazsa, burun dürtmeye devam edin. Snout'un ucundaki fareye hafifçe dokunun. Isırmazsa veya başını çevirmeye çalışmazsa, bu iyi bir alışkanlık işaretidir.

Evcil hayvan ve burun dürtme testi için işlemi acele etmeyin. Fare ellerin içinde hapsedilerek stresli görünüyorsa veya dokunulmak istemiyorsa, birkaç dakika boyunca eller arasında yuvarlanmaya devam edin ve sonra yeniden deneyin. Hayvan barınağa, baş okşamaya ve burun dürtmeye iyi tepki verirse, yaklaşık üç dakikalık kullanımdan sonra bu seansı durdurun.

Ve hayvan, kaçma girişimleri, ellerden atlama veya ellerle temastan kaçınma gibi herhangi bir stres belirtisi olmadan ellerinizi keşfetmeye istekli görünüyorsa. Fare stres belirtileri göstermeye devam ederse veya barınak testine veya burun dürtme testine iyi tepki vermiyorsa, ilk gün olduğu gibi beş dakikaya ulaşana kadar oturuma devam edin. Fareyi kafesinde değiştirin ve tezgah üstünü ve eldivenleri temizleyin.

Üçüncü gün, ikinci gün aynı adımlarda ilerleyin. Fareyi avucunun içinden al. Fareyi eller arasında aktarın.

Fareyi hafifçe fincanlanmış ellere hapset. Fare bu adımlara iyi yanıt verirse, fareyi okşamaya ve burun dürtme testini denemeyi deneyin. Üçüncü gün, fare hareket etmeden avucunun içine oturacak kadar rahat olmalı ve bu adımlarda yaklaşık iki ila üç dakika boyunca ilerleyebilmelisiniz.

Fareyi kafesinde değiştirin ve tezgah üstünü ve eldivenleri temizleyin. Üçüncü gün. hayvan oral gavage veya intra periton enjeksiyonu gibi deneysel amaçlarla kısıtlanacaksa, fareler boyun çimdikleme testine tabi tutulabilir.

Fareyi boynunuzun ensesine, başparmağınızla işaret parmağınıza tutun ve fareyi iki ila üç saniye boyunca elinizin beş santimetre yukarısına kaldırın. Bu normalde yetişkin fareler için rahatsız edici bir pozisyondur ve fareler hareketsiz kalırsa, elleçlemeye iyi alışırlar ve enjeksiyonlar için dizginlenmesi kolay olacaktır. Fareyi düz elinize geri yerleştirin ve bir dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verin.

Hayvanlar, deneyciyle gönüllü olarak etkileşime girme istekleri ve deneysel bir bağlamda kullanım kolaylığı açısından test edildi. İlk çalışmada, bir deneyci bir fareyi almaya çalıştığında tüp elleçleme veya 3D elleçleme ile ele alınan farelerin kaçma olasılığı daha azdı. Ek olarak, 3D tekniği kullanılarak ele alan bir farenin deneycinin eliyle aynı çeyrekte daha fazla zaman harcadığını ve bu da deneyciyle etkileşime girme isteğinin arttığını gösterir.

İkinci çalışmada, bir deneyci kuyruk saplı farelere kıyasla fareyi almaya çalıştığında tüp elleçleme veya 3D elleçleme ile ele alınan farelerin kaçma olasılığı daha azdı. Bununla birlikte, ikinci çalışmada, elleçleme tekniği deneycinin eliyle aynı çeyrekte harcanan zamanı önemli ölçüde etkilemedi. Anksiyete benzeri davranışların iki testinde 3D ve tünel elleçlemenin etkisi kuyruk kullanımı, yeni baskılanmış beslenme testi ve yükseltilmiş artı labirent ile karşılaştırıldı.

Çalışmada, yeni bastırılmış beslenme testinde, tünel ele ve 3D ele farelerde azalmış anksiyete eğilimi vardı. Yükseltilmiş artı labirentte, elleçlemenin genel bir etkisi yoktu. Z skoru olarak özetlendiğinde, tünel saplı ve 3D ele alınan farelerde kuyruk saplı farelere kıyasla genel kaygıda önemli bir azalma oldu.

İkinci çalışmada, yeni bastırılmış beslenme testinde veya yükseltilmiş artı labirentte anksiyete önlemleri üzerinde ele almanın genel bir etkisi yoktu. Z skoru olarak özetlendiğinde, elleçleme tekniğinin anksiyete üzerinde genel bir etkisi yoktu. Stresin fizyolojik bir ölçüsü olarak, kısa bir elleçleme seansından 15 dakika sonra kuyruk saplı, 3D elleçlenmiş ve tünel saplı farelerden serum topladık ve kortikosteron seviyelerini test ettik.

Çalışma 1'de elleçlemenin genel bir etkisi yoktu. İkinci çalışmada, 3D elleçleme kuyruk kullanımına kıyasla kortikosteron seviyelerini önemli ölçüde azalttı. Farelerde elleçleme tekniklerinin bilim topluluğu tarafından yaygın olarak tanınmadığı gözlemlerine dayanarak, yeni bir elleçleme tekniğinin kullanımını tanımladık.

Sunulan her iki çalışmada da, tünel ve 3D elleçleme, farelerin alındığında kaçma girişimlerini azalttı ve potansiyel olarak rutin kullanımı kolaylaştırdı. Ek olarak, yaşlı erkek farelerde, bu teknik anksiyete benzeri davranışları ve deneyci ile artan etkileşimi azalttı. Genç kadınlarda.

bu teknik, elleçleme yanıt olarak gözlenen kortikosteron seviyelerini azalttı. Bu tekniğin uygulanması, veri değişkenliğini azaltma, hayvan refahını artırma ve rutin kullanımı kolaylaştırma potansiyeline sahiptir.