Name: Farelerde Stresi Azaltmak için Elleçleme Teknikleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-25T14:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: Öğrenin farelerde 3D elleçleme tekniği ile anksiyete benzeri davranışları azaltma yöntemini. Bu teknik, tünel ve kuyruk elleçlemesiyle karşılaştırılarak hayvan refahını ve veri tekrarlanabilirliğini artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, camh hayvan bakım komitesine bu çalışmayı desteklenerek teşekkür ederek, prosedürün yararlılığı hakkında kapsamlı geri bildirimde bulunan CAMH hayvan bakıcılarına, açıklanan deneylerin yürütülmesini motive eden ve diğer kullanıcılar için ayrıntılı protokolün sunulmasını sağlayan camh hayvan bakıcılarına teşekkür ediyor. Bu çalışma kısmen CAMH BreakThrough Challenge tarafından finanse edildi, TP'ye verildi ve CAMH'ın iç fonları tarafından finanse edildi.

<ol><li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Housing%2C+husbandry+and+handling+of+rodents+for+behavioral+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments.</a> Nature Protocols. 1 (2), 936(2006).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Mighty+Mouse%3A+the+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Missouri+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Mighty Mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Martic-Kehl, M., Ametamey, S., Alf, M., Schubiger, P., Honer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+inherent+variability+and+experimental+parameters+on+the+reliability+of+small+animal+PET+data%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Research%22%5BJournal%5D)">Impact of inherent variability and experimental parameters on the reliability of small animal PET data.</a> EJNMMI Research. 2 (1), 26(2012).</li>
<li>Howard, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Variability%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Control of Variability.</a> ILAR Journal. 43 (4), 194-201 (2002).</li>
<li>Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+the+cage+environment+on+rodent+physiology+and+behavior%3A+Implications+for+reproducibility+of+pre-clinical+rodent+research%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The influence of the cage environment on rodent physiology and behavior: Implications for reproducibility of pre-clinical rodent research.</a> Experimental Neurology. 270, 72-77 (2015).</li>
<li>Golini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Non-invasive+Digital+Biomarker+for+the+Detection+of+Rest+Disturbances+in+the+SOD1G93A+Mouse+Model+of+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Non-invasive Digital Biomarker for the Detection of Rest Disturbances in the SOD1G93A Mouse Model of ALS.</a> Frontiers in Neuroscience. 14 (896), (2020).</li>
<li>Singh, S., Bermudez-Contreras, E., Nazari, M., Sutherland, R. J., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-cost+solution+for+rodent+home-cage+behaviour+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Low-cost solution for rodent home-cage behaviour monitoring.</a> PLoS One. 14 (8), 0220751(2019).</li>
<li>Stewart, K., Schroeder, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Handling+and+Restraint+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Rodent Handling and Restraint Techniques.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2021).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taming+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7 (10), 825-826 (2010).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+the+practicality+of+using+non-aversive+handling+methods+to+reduce+background+stress+and+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Improving the practicality of using non-aversive handling methods to reduce background stress and anxiety in laboratory mice.</a> Scientific Reports. 9 (1), 20305(2019).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+reliability+of+mouse+performance+in+behavioural+testing%3A+the+major+role+of+non-aversive+handling%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Optimising reliability of mouse performance in behavioural testing: the major role of non-aversive handling.</a> Scientific Reports. 7, 44999(2017).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Wahlsten, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+data+from+different+labs%3A+lessons+from+studies+of+gene-environment+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Different data from different labs: lessons from studies of gene-environment interaction.</a> Journal of Neurobiology. 54 (1), 283-311 (2003).</li>
<li>Nature Neuroscience. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Troublesome+variability+in+mouse+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Troublesome variability in mouse studies.</a> Nature Neuroscience. 12 (9), 1075(2009).</li>
<li>Sensini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+handling+technique+and+handling+frequency+on+laboratory+mouse+welfare+is+sex-specific%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The impact of handling technique and handling frequency on laboratory mouse welfare is sex-specific.</a> Scientific Reports. 10 (1), 17281(2020).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Novak, J., Bailoo, J. D., Melotti, L., Rommen, J., Würbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Exploration+Based+Cognitive+Bias+Test+for+Mice%3A+Effects+of+Handling+Method+and+Stereotypic+Behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">An Exploration Based Cognitive Bias Test for Mice: Effects of Handling Method and Stereotypic Behaviour.</a> PLoS One. 10 (7), 0130718(2015).</li>
<li>Gouveia, K., Waters, J., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Handling+Tutorial%5BTitle%5D)+AND+%22NC3Rs%22%5BJournal%5D)">Mouse Handling Tutorial.</a> NC3Rs. , (2016).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+Mouse+Anxiety+during+Handling%3A+Effect+of+Experience+with+Handling+Tunnels%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reducing Mouse Anxiety during Handling: Effect of Experience with Handling Tunnels.</a> PLoS One. 8 (6), 66401(2013).</li>
<li>Henderson, L. J., Smulders, T. V., Roughan, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+obstacles+preventing+the+uptake+of+tunnel+handling+methods+for+laboratory+mice%3A+An+international+thematic+survey%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Identifying obstacles preventing the uptake of tunnel handling methods for laboratory mice: An international thematic survey.</a> PLoS One. 15 (4), 0231454(2020).</li>
<li>Percie Du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+Updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biology%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research.</a> PLOS Biology. 18 (7), 3000410(2020).</li>
<li>Golde, W. T., Gollobin, P., Rodriguez, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid%2C+simple%2C+and+humane+method+for+submandibular+bleeding+of+mice+using+a+lancet%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">A rapid, simple, and humane method for submandibular bleeding of mice using a lancet.</a> Lab Animal. 34 (9), 39-43 (2005).</li>
<li>Guilloux, J. P., Seney, M., Edgar, N., Sibille, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+behavioral+z-scoring+increases+the+sensitivity+and+reliability+of+behavioral+phenotyping+in+mice%3A+relevance+to+emotionality+and+sex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Integrated behavioral z-scoring increases the sensitivity and reliability of behavioral phenotyping in mice: relevance to emotionality and sex.</a> Journal of Neuroscience Methods. 197 (1), 21-31 (2011).</li>
<li>LaFollette, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+Animal+Welfare+Meets+Human+Welfare%3A+A+Cross-Sectional+Study+of+Professional+Quality+of+Life%2C+Including+Compassion+Fatigue+in+Laboratory+Animal+Personnel%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Laboratory Animal Welfare Meets Human Welfare: A Cross-Sectional Study of Professional Quality of Life, Including Compassion Fatigue in Laboratory Animal Personnel.</a> Frontiers in Veterinary Science. 7 (114), (2020).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).</li>
<li>Bailoo, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Cage+Enrichment+on+Behavior%2C+Welfare+and+Outcome+Variability+in+Female+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effects of Cage Enrichment on Behavior, Welfare and Outcome Variability in Female Mice.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 12, (2018).</li>
<li>Spangenberg, E. M., Keeling, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+welfare+of+laboratory+mice+in+their+home+environment+using+animal-based+measures+-+a+benchmarking+tool%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Assessing the welfare of laboratory mice in their home environment using animal-based measures - a benchmarking tool.</a> Laboratory Animals. 50 (1), 30-38 (2016).</li>
<li>Theil, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+fighting+in+group-housed+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of fighting in group-housed laboratory mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16649(2020).</li>
<li>Weber, E. M., Dallaire, J. A., Gaskill, B. N., Pritchett-Corning, K. R., Garner, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aggression+in+group-housed+laboratory+mice%3A+why+can%27t+we+solve+the+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Aggression in group-housed laboratory mice: why can't we solve the problem.</a> Lab Animal. 46 (4), 157-161 (2017).</li>
<li>Cloutier, S., Baker, C., Wahl, K., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Playful+handling+as+social+enrichment+for+individually-+and+group-housed+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">Playful handling as social enrichment for individually- and group-housed laboratory rats.</a> Applied Animal Behaviour Science. 143 (2), 85-95 (2013).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((50-kHz+chirping+%28laughter%3F%29+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats%3A+effects+of+social+housing+and+genetic+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: effects of social housing and genetic variables.</a> Behavioural Brain Research. 115 (1), 25-38 (2000).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir çıkar çatışması yoktur.

Bu çalışma ve yöntem geliştirme, farelerde elleçleme tekniklerinin bilim topluluğu tarafından hala göz ardı edildiği ve bazı laboratuvarların deneylerden önce hayvanlarının stresini ve reaktivitesini azaltmak için alışkanlık veya kullanım tekniklerini uygulamakta hala isteksiz olduğu gözlemine dayanmaktadır. Bir zaman taahhüdünü temsil ederken, hayvan kullanımı hayvanlara yapılacak deneylerin başarısına katkıda bulunabilecek faydalı etkiler sağlar ve veri değişkenliği veya hayvan aşırı reaktivitesi nedeniyle deneylerin b...

Fareler ve sıçanlar preklinik çalışmalar için temel varlıklardır1,2 endokrinal, fizyolojik, farmakolojik veya davranışsal çalışmalar dahil olmak üzere birden fazla amaç için2. Hayvanlarla ilgili artan sayıda çalışmadan, insan etkileşimi de dahil olmak üzere kontrolsüz çevresel değişkenlerin biyomedikal araştırma3, 4,5'teçeşitli sonuçları etkilediği ortaya çıktı. Bu, deneyler ve araştırma laboratuvarları4,5, hayvan araştırmalarında büyük bir uyarı oluşturan önemli değişkenliklerden sorumludur.
Çevresel stresörlerin etkisini sınırlamak ve reaktiviteyi insan etkileşimine indirgemek amacıyla çeşitli yaklaşımlar uygulanmıştır. Örneğin, çevresel stresörlerin etkisini sınırlamak için laboratuvarlarda konut koşullarının standardizasyonu ve otomatik konut sistemleri6,7 uygulanmıştır. İnsanlarla etkileşimle ilgili olarak, hayvanları işlemek ve taşımak için yaygın olarak kullanılan yaklaşımlar, hayvan rahatsızlığı ve stresine çok az saygı duyardı. Örneğin, hayvanları kuyruklarından almak veya forseps8 kullanmak temel kaygıyı arttırır9,10,11, keşif 9,12'yi azaltır ve çalışmalar içinde ve genelinde bireyler arası değişkenliğe büyük katkıda bulunur13,14. Sonuç olarak, fareler ve sıçanlar için geçerli olan bardak elleçleme tekniği gibi başka yaklaşımlar geliştirilmiştir. Bu yaklaşımda, hayvanlar kafeslerinden "fincanlanır" ve deneyciler tarafından elleri bir fincan oluşturan9, 10,11. Kuyruk işlemeye bir başka yararlı alternatif, fareleri aktarmak için bir polikarbonat tünelin kullanılmasını içerir9,10,15. Bu yaklaşım, fare ve deneyci arasındaki doğrudan etkileşimi ortadan kaldırır. Hem fincan hem de tünel yaklaşımları, kuyruk alma / kuyruk taşıma9,10gibi aversive elleçleme teknikleri ile abartılabilecek anksiyete benzeri davranışları ve deneycinin korkusunu azaltmada etkinlik gösterdi.
Bu nedenle, artan kanıtlar, bireyler arasındaki değişkenliği azaltmak için uygun fare kullanımı9,11ve hayvan refahını artırmak için yararlı olduğunu göstermektedir10. Bununla birlikte, yukarıda belirtilen teknikler hala sınırlamalarla karşı karşıyadır. Fincan elleçleme tekniği, tesis personeli ve deneyciler için önemli bir zaman dilimi olan 10 gün (2 hafta16'da10 seans)ile 15 hafta 17arasında değişen programlarla uygulanmıştır. Ek olarak, fincan elleçlemenin etkinliği, açık ellerde zorlanma9 ve geleneksel fincan kullanımına göre değişir, naif farelere veya özellikle gergin suşların elden atlasına neden olabilir9,18. Tünel işleme, daha tutarlı ve genellikle daha hızlı sonuçlarla sonuçlanır ve19'uhafife alıp verdirür. Tüneller ev kafesi zenginleştirme olarak da kullanılır. Hayvanların hızlı bir şekilde idare etmelerine yardımcı olmak ve zenginleştirmenin ek faydalarını sağlamak. Bununla birlikte, tünel işleme, hayvanları aparatlar arasında aktarırken sınırlamalara sahiptir. İlginçtir ki, Hurst ve West9ve Henderson ve ark.20, hayvanları tünelden aparatlara aktarmak için nazik ve kısa manuel elle elleçleme kullanmanın fenotiplerini etkilemediğini gösterdi.
Mevcut yöntemlere bir alternatif sağlamak için, kısa bir süre içinde ulaşılabilir alışkanlıkla, bu makalede fincan işleme tekniğini genişleten ve bu nedenle belirli bir ekipman gerektirmeyen yeni bir teknik açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, farelerin elleçleme işlemiyle sahip olduğu konfor seviyesini ölçmek için kilometre taşlarını kullanır. Fare reaktivitesini ve stresini azaltmada (davranışsal ve hormonal seviyelerde) etkinliği gösterir, rutin kullanımı kolaylaştırır ve hayvanlar arasındaki değişkenliği azaltmaya katkıda bulunur. Bu tekniğin ayrıntıları burada verilmiştir ve anksiyete benzeri davranışları azaltma, deneycilerle etkileşimi geliştirme ve periferik stres hormonu (kortikosteron) salınımını sınırlamadaki etkinliği, tünel işleme (pozitif kontrol) ve kuyruk elleçleme teknikleri (negatif kontrol) ile karşılaştırıldığında iki ayrı çalışmada gösterilmiştir.

<table><tbody><tr><td>23 G x 1 inç BD PrecisionGlide genel kullanım steril hipodermik iğne. Düzenli duvar tipi ve düzenli eğim.</td><td>BD</td><td>2546-CABD305145</td><td>Kan alma iğneleri</td></tr><tr><td>BD Vacutainer&reg; Lavanta BD Hemogard & trade ile Venöz Kan Alma EDTA Tüpleri; kapatma, 2.0ml (13x75mm), 100/pk</td><td>BD</td><td>367841</td><td>Kan alma yatağı için EDTA Kaplı tüpler</td></tr><tr><td> o koçan ve frak14; &rdquo; Mısır koçanı laboratuvar hayvanı yatağı</td><td>Bed-O-Cobs</td><td>BEDO1/4</td><td>Yenilik bastırılmış besleme için yeni yatak takımı</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Eppendorf</td><td>Santrifüj 5424 R</td><td>Kanın santrifüjlenmesi için.</td></tr><tr><td>Kortikosteron ELISA Kiti</td><td>Ağaç Dikme Tahlilleri</td><td>K003-H1W</td><td></td></tr><tr><td>Dijital Fotoğraf Makinesi</td><td>Panasonic</td><td>HC-V770</td><td>EPM/Deneyci etkileşimlerini kaydetmek için kamera</td></tr><tr><td>Yükseltilmiş Artı Labirent</td><td>Ev Yapımı</td><td>n/a</td><td>Özel Labirent Dört siyah Pleksiglas koldan (iki açık kol (29 cm uzunluğunda ve 7 cm genişliğinde) ve iki kapalı koldan (29 cm uzunluğunda x7 cm genişliğinde ve 16 cm yüksekliğinde duvarlarla)) oluşur ve iki açık kol birbirine zıt olacak şekilde çapraz bir şekil oluşturur Yerden 55 cm yukarıda tutulur</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Medstore House Marka</td><td>39753-P016-EA95</td><td>Temizlemek için Damıtılmış su ile %70'e kadar seyreltin</td></tr><tr><td>Ethovision XT 15</td><td>Noldus</td><td>n/a</td><td>Otomatik hayvan izleme yazılımı</td></tr><tr><td>Laboratuvar Kemirgen Diyet LaboratuvarıDiyet</td><td></td><td>Kemirgen Diyeti 5001</td><td>Standart Kemirgen diyeti</td></tr><tr><td>Hafıza Kartı</td><td>Kingstone Teknolojisi</td><td>SDA3 / 64GB</td><td>Video kaydı için ve dosya aktarımı</td></tr><tr><td>Yenilik Bastırılmış Besleme Odası</td><td>Ev Yapımı</td><td>n/a</td><td>62 cm uzunluğunda, 31 cm genişliğinde ve 40 cm yüksekliğinde net zeminler ve duvarlar ile özel test pleksiglas test odası.</td></tr><tr><td>Parlykarbonat tüpler</td><td>Ev Yapımı</td><td>n/a</td><td>13 cm uzunluğunda ve 5 cm çapında</td></tr><tr><td>Purina Dün' s news geri dönüşümlü gazete yatağı</td><td>Purina</td><td>n/a</td><td>Standart Yatak</td></tr><tr><td>Spektrofotometresi</td><td>Biotek</td><td>Epoch Mikroplaka Okuyucu</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde stresi azaltmak için elleçleme teknikleri

Handling Techniques to Reduce Stress in Mice

Laboratuvar hayvanları bilim adamları veya hayvan bakım sağlayıcıları tarafından birden fazla manipülasyona maruz kalır. Bunun neden olduğu stres hayvan refahı üzerinde derin etkilere sahip olabilir ve ayrıca anksiyete önlemleri gibi deneysel değişkenler için şaşırtıcı bir faktör olabilir. Yıllar geçtikten sonra, elleçleme ile ilgili stresi en aza indiren elleçleme teknikleri, farelere özel bir odaklanma ve farelere çok az dikkat ile geliştirilmiştir. Bununla birlikte, farelerin işleme teknikleri kullanılarak manipülasyonlara alışabileceği gösterilmiştir. Fareleri elleçlemeyi alışkanlık haline getirmek stresi azaltır, rutin kullanımı kolaylaştırır, hayvan refahını artırır, veri değişkenliğini azaltır ve deneysel güvenilirliği artırır. Kullanımın yararlı etkilerine rağmen, özellikle stresli olan kuyruk toplama yaklaşımı hala yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu makale, insan etkileşimi sırasında hayvanın yaşadığı stresi en aza indirmeyi amaçlayan yeni geliştirilen bir fare işleme tekniğinin ayrıntılı bir açıklamasını ve gösterimini sunmaktadır. Bu manuel teknik 3 gün boyunca gerçekleştirilir (3D işleme tekniği) ve hayvanın deneyciye alışkanlık yapma kapasitesine odaklanır. Bu çalışma ayrıca daha önce kurulmuş tünel işleme tekniklerinin (polikarbonat tünel kullanarak) ve kuyruk toplama tekniğinin etkisini göstermektedir. Özellikle incelenenler, davranışsal testler (Elevated-Plus Maze ve Novelty Suppressed Feeding), deneycilerle gönüllü etkileşim ve fizyolojik ölçüm (kortikosteron seviyeleri) kullanarak anksiyete benzeri davranışlar üzerindeki etkileridir. 3D işleme tekniği ve tünel işleme tekniği anksiyete benzeri fenotipleri azalttı. İlk deneyde, 6 aylık erkek fareler kullanılarak, 3D işleme tekniği deneyci etkileşimini önemli ölçüde geliştirdi. İkinci deneyde, 2,5 aylık dişi kullanarak kortikosteron seviyelerini azalttı. Bu nedenle, 3D işleme, deneyciyle etkileşimin gerekli olduğu veya tercih edildiği veya deneme sırasında tünel işlemenin mümkün olmayabileceği senaryolarda yararlı bir yaklaşımdır.

C57BL/6 fareler ile iki ayrı çalışma yapıldı. Çalışma #1 6 aylık erkekleri ve Çalışma #2 Jackson Laboratuvarları'ndan (Cat #000664) 2,5 aylık dişileri (N=36 /study) içeriyordu. Fareler tesise 2 aylıkken geldi. Study #2 dişiler varıştan iki hafta sonra ele alınıp test edilirken, Study #1 erkekler sadece 6 aylıkken (küresel pandemi kapanması nedeniyle gecikme) ele alındı ve test edildi. Bu süre zarfında, Study #2'dan bir fare, deneyleri işlemeye başlamadan önce öldü. Çalışma, erkek farelerin hayvan tesisi personeli tarafın...

Bu makalede, farelerde anksiyete benzeri davranışları azaltarak rutin elleçlemeyi kolaylaştıran ve mevcut iki ilgili teknikle (tünel ve kuyruk elleçleme) ayrıntıları sunan 3D işleme tekniği açıklanmaktadır.

Farelerde Stresi Azaltmak için Elleçleme Teknikleri

Laboratory animals are subjected to multiple manipulations by scientists or animal care providers. The stress this causes can have profound effects ...

Benim adım Dr. Thomas Prevot. Bağımlılık ve Ruh Sağlığı Merkezi'nde veya CAMH'de bir bilim adamıyım ve Toronto Üniversitesi Psikiyatri Bölümü'nde yardımcı doçentim. Grubum, veri değişkenliğini azaltmak ve hayvan refahını artırmak için farelerde temel kaygıyı ve reaktiviteyi azaltmaya özel bir ilgiye sahiptir.Fareler, temel bilim ve preklinik araştırmalarda paha biçilmez varlıklar olduğunu kanıtlamıştır, ancak dünya çapında çok az laboratuvar temel kaygı ve laboratuvar hayvanlarının reaktivitesini kontrol eder, bu nedenle laboratuvarlar arasındaki verilerin tekrarlanabilirliğini zorlaştırır. Temel kaygıya önemli bir katkıda bulunan faktör, konut koşulları, çevresel zenginleştirme ve strese maruz kalma gibi kontrolsüz çevresel değişkenlertir. Konut koşullarının standardizasyonu ve zenginleştirme bu sorunun iyileştirilmesine yardımcı olsa da, deneycilerle etkileşim sırasında strese maruz kalmak farelerde hala büyük ölçüde unaddressed.Kuyruk işleme, fareyi kuyruktan kaldırma işlemi, özellikle stresli olmasına rağmen, farenin yaygın olarak kullanılan fare işleme tekniğidir. Tünel işleme ve bardak elleçleme dahil olmak üzere kuyruk elleçleme alternatifleri ortaya çıkmıştır. Bu tekniklerin benimsenmesi yavaş olmuştur.Burada, üç günlük alışkanlık veya 3D elleçleme ile uygulanabilen fincan işlemeye benzer yeni bir tekniği anlatıyoruz. Etkileşimin derecesini ve karmaşıklığını kademeli olarak artırarak ve farenin belirli kullanım kilometre taşlarına tepki olarak ilerleyerek stresi azaltabilir ve rutin kullanımı kolaylaştırabiliriz. Davranış testlerinde farelerde 3D kullanımın etkinliğini değerlendirir, anksiyete benzeri davranışları değerlendirir, deneycilerle etkileşim ve periferik stres hormonu, kortikosteron, seviyeler ve tünel işleme ve kuyruk elleçleme teknikleri ile karşılaştırma sağlarız.Kafesi yavaşça açın ve kapağı yan tarafa yerleştirin. Fareyi almaya çalışmadan önce eldivenli elinizi ev kafesine tanıtın. Farenin yaklaşık 30 saniye boyunca elin varlığına alışmasına izin verin.Sonra fareyi fincanlı ellerde almaya çalış. Fare kolayca toplanamazsa, iki ellerinizi birbirine kaplayın ve fareyi kafesin köşesine yönlendirmek için kullanın. Sonra fareyi almak için iki elini de kullan.Fare kafesten çıkarıldıktan sonra ellerinizi mümkün olduğunca düz ve açık tutun. Farenin özgürce keşfetmesine izin verin. Bu, farenin üzerine basmasını sağlayan düz bir platform sağlar ve ısırma riskini sınırlar.Avuç içi yukarıda, eli açık ve düz tutun. Diğer elinizi fareye bitişik olarak yerleştirin ve farenin herhangi bir kısıtlama olmadan elden ele serbestçe hareket etmesine izin verin. Düz ellerle bir dakika idare ettikten sonra, fareyi eller arasında hafifçe yuvarlamadan önce avucunuzu gevşetin ve fareyi hafifçe kafanıza koyun.Eller arasında hafifçe yuvarlanma ve açık ellerinizi serbest keşif arasında değişen dört dakika devam edin. Son iki dakika içinde bir barınak testi yapın. Farenin elinizin kenarına hareket etmesine izin verin ve iki eli bir araya getirin.Çok yavaşça, ellerinizi kaplar, böylece fare eller tarafından oluşturulan bir sığınağın içine sığar. Gerekirse farenin kaçabilmesi için bir açık bıraktığından emin olun. Fareyi hiçbir kısıtlama olmadan beş ila 10 saniye boyunca barınakta tutmaya çalışın.Barınak testini son iki dakika içinde üç ila dört kez tekrarlayın. İşlemi aceleye getirmeyin. Fare elin içinde hapsedilerek stresli görünüyorsa, eller arasında yuvarlanmaya ve 30 saniye boyunca serbest keşifle devam edin ve ardından barınak testini yeniden deneyin.30 saniye boyunca ellerde serbest keşiflere izin verin, ardından fareyi kafesinde hafifçe değiştirin. Herhangi bir dışkı ve idrarın tezgah üstünü% 70 etanol veya uygun bir temizleme çözeltisi ile temizleyin. Dışkı ve idrar eldivenlerini gerektiği gibi temizleyin ve yeni bir kafese geçerken eldivenleri% 70 etanol ile durulayın veya eldivenleri değiştirin.İkinci güne kadar, fareyi kafesten fincanlı ellerle çıkarmak zaten mümkün olmalıdır. Fare reaktif görünüyorsa, düz eli gerçekleştirin ve açık kafaları 30 saniye ila bir dakika boyunca serbest olarak keşfedin. Aksi takdirde, eller ve barınak testi arasındaki ruloya devam edin.Eller ve barınak adımları arasındaki rolü ilk günden itibaren iki ila üç dakika boyunca gerçekleştirin. Her adımı birkaç kez gerçekleştirin. Fare barınak testinde rahat görünüyorsa, fareyi sırtta ve kafada evcilmeye çalış.Fare temastan kaçmaya çalışmazsa, burun dürtmeye devam edin. Snout'un ucundaki fareye hafifçe dokunun. Isırmazsa veya başını çevirmeye çalışmazsa, bu iyi bir alışkanlık işaretidir.Evcil hayvan ve burun dürtme testi için işlemi acele etmeyin. Fare ellerin içinde hapsedilerek stresli görünüyorsa veya dokunulmak istemiyorsa, birkaç dakika boyunca eller arasında yuvarlanmaya devam edin ve sonra yeniden deneyin. Hayvan barınağa, baş okşamaya ve burun dürtmeye iyi tepki verirse, yaklaşık üç dakikalık kullanımdan sonra bu seansı durdurun.Ve hayvan, kaçma girişimleri, ellerden atlama veya ellerle temastan kaçınma gibi herhangi bir stres belirtisi olmadan ellerinizi keşfetmeye istekli görünüyorsa. Fare stres belirtileri göstermeye devam ederse veya barınak testine veya burun dürtme testine iyi tepki vermiyorsa, ilk gün olduğu gibi beş dakikaya ulaşana kadar oturuma devam edin. Fareyi kafesinde değiştirin ve tezgah üstünü ve eldivenleri temizleyin.Üçüncü gün, ikinci gün aynı adımlarda ilerleyin. Fareyi avucunun içinden al. Fareyi eller arasında aktarın.Fareyi hafifçe fincanlanmış ellere hapset. Fare bu adımlara iyi yanıt verirse, fareyi okşamaya ve burun dürtme testini denemeyi deneyin. Üçüncü gün, fare hareket etmeden avucunun içine oturacak kadar rahat olmalı ve bu adımlarda yaklaşık iki ila üç dakika boyunca ilerleyebilmelisiniz.Fareyi kafesinde değiştirin ve tezgah üstünü ve eldivenleri temizleyin. Üçüncü gün. hayvan oral gavage veya intra periton enjeksiyonu gibi deneysel amaçlarla kısıtlanacaksa, fareler boyun çimdikleme testine tabi tutulabilir.Fareyi boynunuzun ensesine, başparmağınızla işaret parmağınıza tutun ve fareyi iki ila üç saniye boyunca elinizin beş santimetre yukarısına kaldırın. Bu normalde yetişkin fareler için rahatsız edici bir pozisyondur ve fareler hareketsiz kalırsa, elleçlemeye iyi alışırlar ve enjeksiyonlar için dizginlenmesi kolay olacaktır. Fareyi düz elinize geri yerleştirin ve bir dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verin.Hayvanlar, deneyciyle gönüllü olarak etkileşime girme istekleri ve deneysel bir bağlamda kullanım kolaylığı açısından test edildi. İlk çalışmada, bir deneyci bir fareyi almaya çalıştığında tüp elleçleme veya 3D elleçleme ile ele alınan farelerin kaçma olasılığı daha azdı. Ek olarak, 3D tekniği kullanılarak ele alan bir farenin deneycinin eliyle aynı çeyrekte daha fazla zaman harcadığını ve bu da deneyciyle etkileşime girme isteğinin arttığını gösterir.İkinci çalışmada, bir deneyci kuyruk saplı farelere kıyasla fareyi almaya çalıştığında tüp elleçleme veya 3D elleçleme ile ele alınan farelerin kaçma olasılığı daha azdı. Bununla birlikte, ikinci çalışmada, elleçleme tekniği deneycinin eliyle aynı çeyrekte harcanan zamanı önemli ölçüde etkilemedi. Anksiyete benzeri davranışların iki testinde 3D ve tünel elleçlemenin etkisi kuyruk kullanımı, yeni baskılanmış beslenme testi ve yükseltilmiş artı labirent ile karşılaştırıldı.Çalışmada, yeni bastırılmış beslenme testinde, tünel ele ve 3D ele farelerde azalmış anksiyete eğilimi vardı. Yükseltilmiş artı labirentte, elleçlemenin genel bir etkisi yoktu. Z skoru olarak özetlendiğinde, tünel saplı ve 3D ele alınan farelerde kuyruk saplı farelere kıyasla genel kaygıda önemli bir azalma oldu.İkinci çalışmada, yeni bastırılmış beslenme testinde veya yükseltilmiş artı labirentte anksiyete önlemleri üzerinde ele almanın genel bir etkisi yoktu. Z skoru olarak özetlendiğinde, elleçleme tekniğinin anksiyete üzerinde genel bir etkisi yoktu. Stresin fizyolojik bir ölçüsü olarak, kısa bir elleçleme seansından 15 dakika sonra kuyruk saplı, 3D elleçlenmiş ve tünel saplı farelerden serum topladık ve kortikosteron seviyelerini test ettik.Çalışma 1'de elleçlemenin genel bir etkisi yoktu. İkinci çalışmada, 3D elleçleme kuyruk kullanımına kıyasla kortikosteron seviyelerini önemli ölçüde azalttı. Farelerde elleçleme tekniklerinin bilim topluluğu tarafından yaygın olarak tanınmadığı gözlemlerine dayanarak, yeni bir elleçleme tekniğinin kullanımını tanımladık.Sunulan her iki çalışmada da, tünel ve 3D elleçleme, farelerin alındığında kaçma girişimlerini azalttı ve potansiyel olarak rutin kullanımı kolaylaştırdı. Ek olarak, yaşlı erkek farelerde, bu teknik anksiyete benzeri davranışları ve deneyci ile artan etkileşimi azalttı. Genç kadınlarda.bu teknik, elleçleme yanıt olarak gözlenen kortikosteron seviyelerini azalttı. Bu tekniğin uygulanması, veri değişkenliğini azaltma, hayvan refahını artırma ve rutin kullanımı kolaylaştırma potansiyeline sahiptir.

handling-techniques-to-reduce-stress-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Bu video, tekrarlanan immobilizasyon yoluyla bir farede kronik stresi indükleme yöntemini göstermektedir, bu da kortikosteron salınımına ve nöronlarda glutamat reseptör aktivitesinin azalmasına yol açar, bu da depresyon benzeri davranışa neden olur.

İmmobilizasyon Stresi ile Bir Farede Depresyon Benzeri Davranışa Etki Etmek

Öngörülemeyen kronik hafif stres (UCMS) protokolü, kronik stres ve depresif belirtilerle ilişkili davranışsal ve fizyolojik değişiklikleri incelemek için doğrulanmış bir yöntemdir. UCMS protokolünün sekiz haftalık uygulanması, her iki cinsiyetteki kemirgenlerde davranış değişikliklerine ve kötü sağlık sonuçlarına neden olur.

Tahrik Depresif Belirtiler, Davranış Değişiklikleri ve Kemirgenler Negatif Sağlık Kazanımları için Öngörülemeyen Kronik Hafif Stres Protokolü

Burada fareler öngörülemeyen kronik hafif stres iletişim kuralı mevcut. Bu iletişim kuralı uzun vadeli bir depresif benzeri fenotip indükler ve davranışsal ve neuromolecular depresif benzeri açıkları ters içinde sözde antidepresanlar etkinliğini değerlendirmek için sağlar.

Anhedonia farelerde Inducing için öngörülemeyen kronik hafif stres Protokolü

Bu makalede, bir kısıtlamacı kullanarak kronik immobilize fareler depresif benzeri davranış indüksiyon için Basitleştirilmiş ve standartlaştırılmış bir protokol sağlar. Buna ek olarak, depresyon indüksiyonu doğrulamak için davranış ve fizyolojik teknikler açıklanmıştır.

Farelerde depresyon benzeri davranışlar Inducing için kronik Immobilizasyon Stres Protokolü

Y-labirent bariyer görevi ödül için çaba harcamak için motivasyon inceleyen bir davranış testidir. Burada, kronik kortikosteron ve bu davranış ile sosyal yenilgi stres idestmesi de dahil olmak üzere birden fazla iyi doğrulanmış kronik stres test tartışmak, yanı sıra yeni kronik non-ayrımcı sosyal yenilgi stres (CNSDS), hangi kadınlarda etkilidir.

Kronik Stres Shifts Çabalar-İlgili Seçim Davranış Farelerde Bir Y-Labirent Bariyer Görev

Hem erkeklerde hem de kadınlarda çalışan ve ayrı ergenlik dönemlerinde maruz kalmaya izin veren ergen C57BL / 6 fareleri için hızlandırılmış bir sosyal yenilgi stres modeli geliştirdik. Bu modele maruz kalmak, sosyal kaçınmaya neden olur, ancak yalnızca mağlup erkek ve dişi farelerin bir alt kümesinde.

Ergen C57BL/6 Erkek ve Dişi Fareler için Sosyal Yenilgi Stres Modeli

Kemirgenler için yapılan davranış deneylerinin çoğu başlangıçta fareler için tasarlanmıştır. Sıçanlar ve fareler arasındaki davranışsal farklılıklar nedeniyle, bazen fareler için modifikasyonlar gerekebilir. Farelerde uzamsal çalışma belleğini test etmek için bir yöntem sunuyoruz ve çalışma belleği görevi sırasındaki stresi en aza indiriyoruz.

Yarı otomatik 8 kollu radyal labirentte fareler için iştah açıcı bir uzamsal çalışma belleği görevi, labirentteki korkulu hafıza ilişkisini azaltır

Bu çalışma, dört günlük sosyal stresörleri entegre ederek, dişi C57BL / 6J farelerinde psikiyatrik bozukluklar için çoklu entegre bir sosyal stres (MISS) modelini tanımlamaktadır. On günlük tekrarlanan MISS maruziyetinden sonra, fareler depresif ve anksiyete benzeri fenotipler geliştirdi, böylece kadın deneklerde psikiyatrik bozuklukları incelemek için doğal, etiyolojiye dayalı bir hayvan modeli sağladı.

Dişi C57BL/6J Farelerde Psikiyatrik Bozukluklar için Çoklu Entegre Sosyal Stres Modeli

Bu makale, farelerde ve sıçanlarda fiziksel kısıtlama stresi kullanarak stres tepkilerini indükleme prosedürlerini kapsar. Kemirgen modellerinde kısıtlama stresi seçerken ve kullanırken dikkat edilmesi gereken ek hususlar tartışılmaktadır.

Farelerde ve sıçanlarda stresi indüklemek için kısıtlama

Bu makale modeli doğum sonrası depresyon ve kemirgenler laktasyondaki anksiyete bir ethologically ilgili paradigma gibi kronik ikamet saldırgan sosyal stres kullanımı anlatılmaktadır.

Kemirgenler Emziren yılında Model Doğum Sonrası Depresyon Kronik Sosyal Stres Kullanımı

Öğrenin farelerde 3D elleçleme tekniği ile anksiyete benzeri davranışları azaltma yöntemini. Bu teknik, tünel ve kuyruk elleçlemesiyle karşılaştırılarak hayvan refahını ve veri tekrarlanabilirliğini artırır.

Farelerde Stresi Azaltmak için Elleçleme Teknikleri

Daha fazla video keşfet