Name: Tek Taraflı Siyatik Sinir Ezilme Yaralanması Sonrası Sıçanlarda Motor Davranışın Multifaktöriyel Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-31T14:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 50 s
Description: Öğrenin sıçanlarda siyatik sinir ezilme yaralanması sonrası motor davranışın multifaktöriyel değerlendirilmesi için açık alan testi, CatWalk yürüyüş analizi ve kiriş yürüyüş görevi gibi davranışsal test bataryası kullanımını.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Almanya Federal Eğitim ve Araştırma Bakanlığı (BMBF DysTract to C.W.I.) ve Würzburg Üniversitesi Disiplinlerarası Klinik Araştırmalar Merkezi (IZKF) (N-362 ila C.W.I.; Z2-CSP3'den L.R.'ye). Buna ek olarak, bu proje Avrupa Birliği'nin Horizon 2020 araştırma ve inovasyon programından EJP RD COFUND-EJP N° 825575 (EurDyscover'dan J.V.'ye) ve VERUM Vakfı'ndan fon almıştır. Ayrıca C.W.I., Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Alman Reseach Foundation) Project-ID 424778381-TRR 295, Deutsche Stiftung Neurologie ve ParkinsonFonds tarafından finanse edilmektedir. L.R. ayrıca Dystonia Medical Reseach Foundation tarafından desteklenmektedir.
Yazarlar Keali Röhm, Veronika Senger, Heike Menzel ve Louisa Frieß'e teknik yardımları için ve hayvan bakımı için Helga Brünner'e teşekkür ediyorlar.

<ol><li>Iannaccone, P. M., Jacob, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Rats.</a> Disease Models & Mechanisms. 2 (5-6), 206-210 (2009).</li>
<li>Phifer-Rixey, M., Nachman, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+mammalian+biology+from+the+wild+house+mouse+Mus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Insights into mammalian biology from the wild house mouse Mus musculus.</a> Elife. 4, (2015).</li>
<li>Musacchio, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subthalamic+nucleus+deep+brain+stimulation+is+neuroprotective+in+the+A53T+alpha-synuclein+Parkinson%27s+disease+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Subthalamic nucleus deep brain stimulation is neuroprotective in the A53T alpha-synuclein Parkinson's disease rat model.</a> Annals of Neurology. 81 (6), 825-836 (2017).</li>
<li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tor1a%2B%2F-+mice+develop+dystonia-like+movements+via+a+striatal+dopaminergic+dysregulation+triggered+by+peripheral+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Tor1a+/- mice develop dystonia-like movements via a striatal dopaminergic dysregulation triggered by peripheral nerve injury.</a> Acta Neuropathologica Communications. 4 (1), 108(2016).</li>
<li>Rauschenberger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Striatal+dopaminergic+dysregulation+and+dystonia-like+movements+induced+by+sensorimotor+stress+in+a+pharmacological+mouse+model+of+rapid-onset+dystonia-parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Striatal dopaminergic dysregulation and dystonia-like movements induced by sensorimotor stress in a pharmacological mouse model of rapid-onset dystonia-parkinsonism.</a> Experimental Neurology. 323, 113109(2020).</li>
<li>Klein, A., Wessolleck, J., Papazoglou, A., Metz, G. A., Nikkhah, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Walking+pattern+analysis+after+unilateral+6-OHDA+lesion+and+transplantation+of+foetal+dopaminergic+progenitor+cells+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Walking pattern analysis after unilateral 6-OHDA lesion and transplantation of foetal dopaminergic progenitor cells in rats.</a> Behavioural Brain Research. 199 (2), 317-325 (2009).</li>
<li>Kim, D. H., Murovic, J. A., Tiel, R., Kline, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+and+outcomes+in+353+surgically+treated+sciatic+nerve+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Management and outcomes in 353 surgically treated sciatic nerve lesions.</a> Journal of Neurosurgery. 101 (1), 8-17 (2004).</li>
<li>Kline, D. G., Kim, D., Midha, R., Harsh, C., Tiel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+and+results+of+sciatic+nerve+injuries%3A+a+24-year+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Management and results of sciatic nerve injuries: a 24-year experience.</a> Journal of Neurosurgery. 89 (1), 13-23 (1998).</li>
<li>Kaplan, H. M., Mishra, P., Kohn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+overwhelming+use+of+rat+models+in+nerve+regeneration+research+may+compromise+designs+of+nerve+guidance+conduits+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Science%3A+Materials+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">The overwhelming use of rat models in nerve regeneration research may compromise designs of nerve guidance conduits for humans.</a> Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (8), 226(2015).</li>
<li>Bauder, A. R., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+mouse+sciatic+nerve+crush+and+subsequent+assessment+of+regeneration+by+whole+mount+muscle+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (60), e3606(2012).</li>
<li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sciatic+nerve+injury%3A+a+simple+and+subtle+model+for+investigating+many+aspects+of+nervous+system+damage+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Sciatic nerve injury: a simple and subtle model for investigating many aspects of nervous system damage and recovery.</a> Journal of Neuroscience Methods. 227, 166-180 (2014).</li>
<li>Menorca, R. M., Fussell, T. S., Elfar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+physiology%3A+mechanisms+of+injury+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Hand+Clinics%22%5BJournal%5D)">Nerve physiology: mechanisms of injury and recovery.</a> Hand Clinics. 29 (3), 317-330 (2013).</li>
<li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+cell+transplantation+effects+on+sciatic+nerve+regeneration+after+a+standardized+crush+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Neural cell transplantation effects on sciatic nerve regeneration after a standardized crush injury in the rat.</a> Microsurgery. 28 (6), 458-470 (2008).</li>
<li>Knorr, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+dystonia-like+movements+in+TOR1A+rats+after+transient+nerve+injury+is+accompanied+by+dopaminergic+dysregulation+and+abnormal+oscillatory+activity+of+a+central+motor+network%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">The evolution of dystonia-like movements in TOR1A rats after transient nerve injury is accompanied by dopaminergic dysregulation and abnormal oscillatory activity of a central motor network.</a> Neurobiology of Disease. , 105337(2021).</li>
<li>Quartarone, A., Hallett, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+concepts+in+the+physiological+basis+of+dystonia%5BTitle%5D)+AND+%22Movement+Disorders%22%5BJournal%5D)">Emerging concepts in the physiological basis of dystonia.</a> Movement Disorders. 28 (7), 958-967 (2013).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ladder+rung+walking+task%3A+a+scoring+system+and+its+practical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">The ladder rung walking task: a scoring system and its practical application.</a> Journal of Visualized Experiments. (28), e1204(2009).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test%3A+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping%2C+placing%2C+and+co-ordination%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> Journal of Neuroscience Methods. 115 (2), 169-179 (2002).</li>
<li>Johansson, B. B., Ohlsson, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environment%2C+social+interaction%2C+and+physical+activity+as+determinants+of+functional+outcome+after+cerebral+infarction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Environment, social interaction, and physical activity as determinants of functional outcome after cerebral infarction in the rat.</a> Experimental Neurology. 139 (2), 322-327 (1996).</li>
<li>Ohwatashi, A., Ikeda, S., Harada, K., Kamikawa, Y., Yoshida, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+enhanced+functional+recovery+and+expression+of+GDNF+after+photochemically+induced+cerebral+infarction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22EXCLI+Journal%22%5BJournal%5D)">Exercise enhanced functional recovery and expression of GDNF after photochemically induced cerebral infarction in the rat.</a> EXCLI Journal. 12, 693-700 (2013).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu davranışsal değerlendirme protokolü, siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonra kemirgen modelinde seçilen davranışsal test pilinin olası okumalarının yanı sıra avantajlara ve dezavantajlara genel bir bakış sağlar. 
Siyatik sinir ezilme yaralanmasının karşılaştırmalı bir sonucunu elde etmek için tutarlı bir ezme tekniği zorunludur. Tırtıksız kelepçe (Ultra İnce Hemostat) yerine uzun tırtıklı kelepçe kullanılması ezilmenin kıvamını artırabilir. Eşit sinir sıkışmasını garanti etmek için aynı kelepçeyi ve aynı ezilme pozisyonunu kullanın. Kelepçenin ezilme yaralanması ve kelepçenin özenle işlenmesi için özel kullanımı tutarlılığı artırır. Ayrıca, ezilme yaralanması prosedürünü dikkatli bir şekilde gerçekleştirin. Ameliyat sırasında sinirin istenmeyen çekişi gibi ek hasarlar otomutilasyon gibi istenmeyen yan etkilere yol açabilir. Bu nedenle, dikkatli bir sinir hazırlığının yanı sıra en az iki gün boyunca bir ağrı kesicinin kullanılması önerilir. 
Motor davranışın multifaktöriyel değerlendirmesi, çeşitli seviyelerdeki sıçanlarda sinir ezilme yaralanmasından sonra fenotipi karakterize edebilir. OFT, CatWalk XT yürüyüş analizi, ışın yürüyüşü görevi ve merdiven basamak yürüyüş görevini kullandık. Bu deneyler için kör bir deneysel prosedür ve deneysel gruplara veri analizi şarttır. Davranış değerlendirmesinden önce, hayvanlar test odasında en az 30 dakika boyunca test koşulları altında alıştırıldı. Burada uygulanan tüm davranış testleri, yiyecek veya su yoksunluğunun gerekli olmadığı avantajına sahiptir. Açıklanan tüm davranış testlerinde aynı hayvan grubu kullanılmıştır. Her hayvan için günde en fazla iki farklı davranış testi yapıldı. Davranış testleri düzenli aralıklarla yapılırsa, testin aynı hayvan düzeninde ve günün aynı saatinde yapılması gibi karşılaştırılabilir bir prosedüre dikkat edin. Davranış analizi için bir diğer önemli husus da sıçanların gece-gündüz döngüsüdür. Gün döngüsünde (karanlık döngü) daha doğal ve daha yüksek aktivite seviyeleri elde etmek için ters bir gündüz-gece döngüsü düşünün. Bu, özellikle OFT gibi spontan davranışların ölçümü için düşünülmalıdır. Bu deneyde, tersine çevrilmiş bir gündüz-gece döngüsü uygulanamadı, ancak test koşullarına yeterli bir iklimlendirme sağlandı. Kiriş yürüyüşü görevi ve merdiven basamak yürüyüş görevi için yüksek çözünürlüklü videolar için mükemmel bir aydınlatma gereklidir. Karanlıkta deneyler yapılırken bu yüksek video kalitesine ulaşılamıyor. 
Yürüyüşün değerlendirilmesi sürekli bir görev performansı gerektirir. Sürekli bir görev performansının ilk önemli yönü, hayvanları kurulumu geçmeye ikna etmektir. Motivasyonunu artırmak için, kurulumun sonuna küçük gıda peletleri (45 mg) yerleştirin. Hayvanların yiyecek peletlerine aşina olmaları için, peletler testten önce onlara beslenmelidir. Ayrıca, kurulumun sonundaki bir gol kutusu yardımcı olabilir. CatWalk'un kurulumu zaten bir gol kutusu içeriyor, ancak sıçanlar bazen gol kutusuna girmekte tereddüt ediyor. Alternatif olarak, kale kutusuna küçük bir kafes ekleyebilirsiniz, ancak sıçanlardan gelen ev kafesi kale kutusuna sığmaz. Sıçanın elde etmeden önce birkaç dakika kafeste alışkanlık haline getirin. Ayrıca, aynı ev kafesinden başka bir sıçan kale kutusuna veya gol kutusunun içindeki kafese yerlenebilir. İkinci sıçanın kutuda kaldığından ve kale kutusuna girişi engellemediğinden emin olun. Ayrıca, gol kutusunu CatWalk sisteminden çıkarmak ve sıçanın her koşudan sonra "ev bölgelerine" girmesini sağlayan sıçan ev kafesini yürüyüş yolunun sonuna yerleştirmek de mümkündür. Kiriş yürüyüş görevinin kurulumu ve merdiven basamak yürüyüş görevi için, kurulumun sonuna bir gol kutusu veya ev kafesi eklemenizi öneririz. Tutarlılık sağlamak için, CatWalk, kiriş yürüyüş görevi ve merdiven basamak yürüyüş görevi haftada en az bir kez altı ila on koşu ile yapılmalıdır.
Her analiz bu çalışmada önemli farklılıklar yaratmasa da, genetiği değiştirilmiş hayvanların veya tedavi gruplarının dahil edilmesinin, grupları aynı davranış testlerinden ayırt edebilecek değerli veriler üretebileceğini düşünün. 
Sinir ezilme yaralanmasının, beş dakikalık bir OFT ile ölçülen sıçanın lokomotor aktivitesi üzerinde hiçbir etkisi olmadı. Catwalk XT yürüyüş analizi, yürüyüş, pençe ve burun yerleşimini analiz etmek için daha objektif ve hassas bir araçtır. Yoğun bir eğitimden sonra, sıçanlar CatWalk XT cihazının yürüyüş yolundan varsayılan ayarlara geçmeyi öğrenirler. Sinir hasarı, sıçanların geçiti geçme yeteneğini azaltmaz. Çeşitli parametrelerin otomatik hesaplanması verileri objektif olarak sunar. "İnteraktif Ayak İzi Ölçümleri" modülü kullanılarak ek bilgiler elde edilebilir ve gerçekten de bu analizler, sinir hasarı olan ve olmayan sıçanları karşılaştırarak vücut eksenine ayak izi yayılımı, baskı uzunluğu ve pençe açısının çeşitli parametrelerinde önemli farklılıklar sağladı.
Sıçanlar ışın yürüyüşü görevi için kolayca eğitilebilir. Işını geçmek için gecikme süresindeki ve sinir yaralı hindlimb'in adım başına ayak kayması sayısındaki farklılıklar, naif ile ezilmiş sıçanlar karşılaştırılarak tespit edildi. Işın yürüme görevi ile sinir yaralı sıçanları analiz etmenin bir dezavantajı kirişin büyüklüğüdür. Siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonraki ilk iki hafta içinde, sıçanların dengeleri bozuldukça kirişi geçmek için yardıma ihtiyaçları vardır. Bazı sıçanlar kirişi geçebilse de, düşmenin neden olduğu yaralanma riski yüksektir. Bu nedenle sinir ezilmiş hayvanlar, siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonraki ilk iki hafta veya gerekirse daha uzun süre kirişi geçmelerine yardımcı olmalıdır. Ancak, yardımlı ve yardımsız çalıştırmaları karşılaştırmak zordur. Ayrıca, motor dengesi ışın yürüme görevi tarafından değerlendirilen önemli bir parametredir. Bu parametrenin sinir ezilme sıçanı modelimizle ilgili olmadığını düşündük. Bu nedenle, Ohwatashi ve arkadaşları tarafından açıklanan puanlar kullanılamadı ve tamamlanmamış bir ışın geçişi ile çalıştırmalar veri analizi için hariç tutuldu18,19.
Metz ve ark.'dan 7 kategorili ölçek, hem ön hem de arka ayakları analiz edebilir ve merdiven basamak yürüyüş görevi16 , 17sırasında tüm uzuvların hatalarının farklı önem düzeylerini ayırt edebilir. 0'dan 2'ye kategorileri içeren en belirgin hataları analiz ederek, sinirden yaralanan wt sıçanlarını naif wt sıçanlarla karşılaştırırken arka planda adım başına hata farkı tespit edilemedi. Ayrıca, merdiven basamak aparatını geçmenin gecikme süresi sinirden yaralanmış wt sıçanları ve wt naif sıçanlar arasında farklılık göstermedi. Derin öğrenme modelleri, otomatik bir yaklaşımla merdiven basamak yürüyüş görevinin veri analizini geliştirebilir ve hızlandırabilir.
Sinir ezilme yaralanmasının yanı sıra açıklanan tüm davranış testlerinin, kurulumların ayarlarını ve boyutlarını uyarlayarak farelere kolayca çevrilebileceğini belirtmek önemlidir. Farelerin model organizma olarak kullanılması, birçok insan hastalığı için transgenik modellerin var olduğu yararlı etkiye sahiptir.

Kemirgenler, birden fazla biyolojik düzeyde hipotezleri test ederek insan hastalıkları1,2'nin anlaşılmasını derinleştirmek için mükemmel model organizmalardır. Kemirgen modellerinin karakterizasyonu için temel biyolojik düzeylerden biri, davranışsal değerlendirmelerle ölçülen fenotip seviyesidir. Hayvan modeline ve bilimsel araştırma sorusuna bağlı olarak, güçlü ve güvenilir bir davranışsal test pilinin seçimi, Parkinson hastalığı ve distoni 3 ,4,5,6hayvan modelleri gibi çok çeşitli davranışsal yönleri kapsamak için gereklidir.
Siyatik sinir, duyusal liflerin yanı sıra motor ile insan vücudundaki en büyük sinirdir. Siyatik sinirinin yaralanmaları trafik kazaları ve ameliyatlar gibi çeşitli olaylardan kolayca sonuçlanabilir7,8. Bu nedenle, siyatik sinir yaralanmaları olan kemirgen modellerini kullanan araştırma faaliyetleri, çevirisel olarak ilgili değerdedir. Sinir yenilenmesinin sıçandan insana çevirisel yönü eleştirel olarak ele alınması gerekse de9Kemirgen modellerinde siyatik sinir ezilme yaralanması (axonotmesis), periferik sinirlerin dejenerasyon ve rejenerasyon süreçlerini analiz etmek için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir10,11. Ezilme yaralanması durumunda sinir tamamen transected değildir. Aksona zarar verir, ezilme yaralanmasından hemen sonra iletim bloğuna neden olur ve ardından rejeneratif süreçler 4,12,13.
Ayrıca, distoni araştırmalarında, tek taraflı siyatik sinir ezilme yaralanması, genetik olarak yatkın distoni kemirgen modellerinde distoni benzeri hareketleri (DLM) tetiklemek için yerleşik bir yöntemdir, bu da DLM'yi 4,14başına göstermez. Periferik sinir travmasının motor ve duyusal fonksiyonlardan sorumlu siyatik sinir liflerini etkileyerek sensorimotor entegrasyonunu bozduğ varsayılıyor15.
Burada, siyatik sinirin standartlaştırılmış bir ezilme yaralanması ve açık alan testi (OFT), CatWalk XT yürüyüş analizi, ışın yürüyüş görevi ve naif vahşi tip (wt) sıçanlarda (n= 8-9) ve wt sıçanlarında tek taraflı siyatik sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra (n= 10) oluşan bir motor davranış değerlendirmesi pili için ayrıntılı bir açıklama sunuyoruz. OFT, genel lokomotor aktivitesi hakkında bilgi sağlarken, otomatik yürüyüş analiz sistemi CatWalk XT tarafından ayrıntılı bir yürüyüş analizi elde edilir. Kiriş yürüme görevi, kirişi geçme süresini ve ayak yerleştirme hatalarının sayısını değerlendirerek motor koordinasyonunu değerlendirmek için kullanılır. Yürüyüş performans analizi için merdiven basamak yürüyüş görevi, ayak veya pençe yerleşimi ve sabit ama düzensiz bir basamak desenli yatay merdiven basamak aparatındaki hatalar hakkında bilgi verir.

<table><tbody><tr><td>Asetik asit, &ge; %99,8</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>33209-1L</td><td></td></tr><tr><td>ULC cilt zımba 35W</td><td>Covidien</td><td>8886803712</td><td></td></tr><tr><td>Beam</td><td>kendinden yapılmış</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen göz kremi Bayer</td><td>Vital GmbH</td><td>81552983</td><td></td></tr><tr><td>Kutusu OFT</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kamera GC-PX100</td><td>JVC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Catwalk XT</td><td>Noldus için</td><td></td><td>&nbsp; kurulum ve yazılım</td></tr><tr><td>isofluran</td><td>GT-Labortechnik</td><td></td> için oda <td>özel yapım</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık neşter No. 11</td><td>Tüy</td><td>20.001.30.011</td><td></td></tr><tr><td>Dr&auml; ger Buhar 19.3 izofluran sistemi</td><td>Dr. Wilfried M&uuml; ller GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #2 - laminektomi forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11223-20</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11251-30</td><td>süper ince</td></tr><tr><td>Tozsuz hassas peletler 45 mg</td><td>Bio-Serv</td><td>F0021</td><td></td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus</td><td></td><td>&nbsp; kurulum ve yazılım</td></tr><tr><td>Forseps 160 mm</td><td>Hartenstein</td><td>PZ09</td><td></td></tr><tr><td>Gaz anestezi maskesi, sıçan</td><td>Dr. Wilfried M&uuml; ller GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Merdiven basamağı yürüme görevi için hedef kutusu</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>saç kesme makinesi Magnum 5000</td><td>Wahl GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sertleştirilmiş ince makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14090-11</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma tablası</td><td>MEDAX</td><td>13801</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran CP 1ml/ml, 250 ml</td><td>CP-pharma</td><td>1214</td><td>reçete gereklidir</td></tr><tr><td>Kinovea</td><td>www.kinovea.org</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Merdiven basamağı yürüme görev aparatı</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İğne Tutucu</td><td>KLS Martin</td><td>20-526-14-07</td><td></td></tr><tr><td>Octeniderm</td><td>Sch&uuml; lke</td><td>118211</td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl 50 mg / ml, enjekte edilebilir</td><td>Zoetis</td><td></td><td>Carprofen, reçete gerekli</td></tr><tr><td>Lastik bant ekartörleri</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kiriş için ara parça</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Merdiven basamağı yürüme görevi aparatı için ara parça</td><td>kendi kendine yapılan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sütür Silkam 4/0 DS 19</td><td>B. Braun</td><td>C0762202</td><td></td></tr><tr><td>Ultra ince kanama durdurucular (tırtıksız kelepçe)</td><td>Fine Science Tools</td><td>13020-12</td><td></td></tr></tbody></table>

tek taraflı siyatik sinir ezilme yaralanması sonrası sıçanlarda motor davranışın multifaktöriyel değerlendirilmesi

Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury

Periferik sinir hasarının indüksiyonu, diğerleri arasında onarım ve ağrı mekanizmalarının değerlendirilmesi için nörobilimde yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Ek olarak, hareket bozuklukları araştırma alanında, siyatik ezilme yaralanması, distoninin genetik olarak yatkın DYT-TOR1A kemirgen modellerinde distoni benzeri bir fenotipi tetiklemek için almıştır. Siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonra tutarlı, tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir sonuçlar elde etmek için, standartlaştırılmış fenotipik karakterizasyona ek olarak, sinir ezilmesini teşvik etmek için standartlaştırılmış bir yöntem gereklidir. Sadece belirli davranışsal test çeşitlerine değil, aynı zamanda teknik gereksinimlere, doğru yürütmeye ve ardışık veri analizine de dikkat edilmelidir. Bu protokol, siyatik sinir ezilme yaralanmasının nasıl gerçekleştirildiğini ayrıntılı olarak açıklar ve sıçanlarda motor açıklarının değerlendirilmesi için açık alan testi, CatWalk XT yürüyüş analizi, ışın yürüme görevi ve merdiven basamak yürüyüş görevini içeren bir davranışsal test pili sağlar.

Beş dakikalık OFT'nin temsili sonuçları, ameliyattan beş hafta sonra sinir ezilme yaralanmasının lokomotor aktivitesi üzerinde hiçbir etkisi olmadığını göstermektedir(Şekil 1).
CatWalk XT sistemi ile yürüyüş analizi (Şekil 2) birçok farklı parametre oluşturur. Seçici parametreler, wt naif sıçanlar sinir ezilme işleminden beş hafta sonra sinirden yaralanmış wt sıçanlarla karşılaştırılarak istatistiksel olarak analiz edilmiştir (Şekil 2D). Koşu ortalama hızı, adım uzunluğu ve sinir yaralanması (sağ) arka pençenin baskı alanı için önemli değişiklikler tespit edilebilir. "İnteraktif Ayak İzi Ölçümleri" modülü ile sinirden yaralanan arka pençenin daha detaylı analizi yapıldı. Sinirden yaralanan wt sıçanlarında wt naif sıçanlara kıyasla parametrelerin ayak parmak yayılımı, orta ayak izi yayılımı ve baskı uzunluğunda önemli bir azalma gözlendi. Ek olarak, pençe açısı vücut ekseni ve pençe açısı hareket vektörü, sinirden yaralanan wt sıçanlarını wt naif sıçanlarla karşılaştırırken önemli ölçüde farklılık gösterir (Şekil 2E).
Şekil 3, ışın yürüme görev değerlendirmesi ile elde edilen motor koordinasyon verilerini sunar. Sinir yaralı wt sıçanlar, yaralanmadan beş hafta sonra wt naif sıçanlara kıyasla kirişi geçmek için önemli ölçüde artan bir gecikme süresi gösterdi (Şekil 3B). Işın yürüme görevinden ek bir okuma olarak, sinir yaralı hindlimb'in tam kaymaları ve yarım kaymaları sayıldı ve istatistiksel analiz için bir hata olarak kabul edildi. Sinirden yaralanan (sağ) hindlimb'in adım başına hata yüzdesi, sinirden yaralanan wt sıçanlarında wt naif sıçanlara kıyasla önemli ölçüde artmıştır.
Merdiven basamak yürüyüş görevinin temsili verileri (Şekil 4) merdiven basamak aparatının yürüyüş yolundan geçmek için gecikme süresinde (Şekil 4C) veya sinir yaralı (sağ) hindlimb adım başına hata yüzdesinde önemli değişiklikler göstermez (Şekil 4D). Sinir yaralanması olan hindlimb'in adım başına hata yüzdesinin analizi, Metz ve ark.'dan7 kategori ölçeğinin sadece 0'dan 2'ye kadar olan puanını dikkate aldı. Sinir yaralanması olan hindlimb ve sinir yaralanması olmayan (sol) arka sarmalın 7 kategori ölçeğinden adım başına tüm puan kategorilerinin dağılımı Şekil 4E'degösterilmiştir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig01.jpg"> Şekil 1: Açık alan testi sırasında lokomotor aktivitesinin değerlendirilmesi. (A) Açık alan testi kurulumunun resmi. Açık alan testi sırasında kaydedilen bir videodan çıkarılan ve açık alan arenasında (B) ve (C) izleme olmadan bir sıçanı gösteren seçili resim. (D) Beş dakikalık açık alan testi kaydı sırasındaki hız, sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanlarda ve wt sıçanlarında araştırıldı. Veriler ortalama ± SEM olarak gösterilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig02.jpg"> Şekil 2: CatWalk XT sistemi ile yürüyüş analizi. (A) CatWalk XT cihazının resmi. (B) Etiketli pençe baskılarını yanlış renk modunda gösteren baskı görünümü örnekleri ve sinir ezme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanların ve wt sıçanlarının zamana dayalı yürüyüş diyagramını gösteren zamanlama görünümü örnekleri. (C) Ayak izi yayılımını (TS), orta ayak toz yayılımını (ITS) ve baskı uzunluğunu (PL) gösteren ayak izi sınıflandırmasının yanı sıra, sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra vücut eksenini (beyaz çizgi) ve wt naif sıçanların ve wt sıçanlarının hareket vektörünü (kırmızı çizgi) gösteren vücut ekseni görünümünün örnekleri. (D) Sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanları ve wt sıçanlarını karşılaştıran "standart" sınıflandırmadan seçilen parametrelerin verileri. (E) Sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanları ve wt sıçanlarını karşılaştıran "İnteraktif Ayak İzi Ölçümleri modülünden" seçilen parametrelerin verileri. Veriler ortalama olarak SEM ± gösterilmiştir. İstatistiksel analiz, normalde dağıtılmış verilerin eşleşmeyen t testi, Welch'in normalde dağıtılmış verileri eşit olmayan varyansla düzeltmesi ve normal olmayan dağıtılmış verilerin Mann-Whitney U testi kullanılarak gerçekleşmiştir. P değeri &lt; 0,05 istatistiksel olarak anlamlı olarak *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,01, ***p &lt; 0,001, ****p &lt; 0,0001 olarak tanımlanmıştır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig03.jpg"> Şekil 3: Kiriş yürüyüş görevi ile yürüyüş analizi. (A) Kiriş yürüyüş görev kurulumunun resim ve şematik çizimleri. Işın yürüme görevi (C) sırasında ışın (B) ve sinir yaralanması arkalığının adım başına yüzde ayak kayması hatalarını geçme süresi, sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanlarda ve wt sıçanlarında analiz edildi. Kiriş yürüme görevinin başlangıç saati konumu (D) ve bitiş saati konumu (E) için temsili resim. Işın yürüme görevinin tam kayma hatası (F) ve yarım kayma hatasının (G) temsili görüntü sırası. Veriler SEM± ortalama olarak gösterilmektedir. İstatistiksel analiz, normal olmayan dağıtılmış verilerin Mann-Whitney U testi kullanılarak gerçek gerçekleştirildi. P değeri &lt; 0.05 istatistiksel olarak *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01 olarak tanımlandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig04.jpg"> Şekil 4: Merdiven basamak yürüyüş görevini kullanarak yürüyüş analizi. Merdiven basamak yürüyüş görev kurulumunun resmi (A) ve şematik çizimleri (B). Merdiven basamak aparatını (C) geçmenin gecikme süresi ve merdiven basamak yürüme görevi (D) sırasında sinir yaralanması olan hindlimb'in adım başına yüzde ayak kayması hataları, sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanlarda ve wt sıçanlarında değerlendirildi. (E) Metz ve ark.'dan 7 kategori ölçeğine göre adım başına puan kategorisinin yüzde dağılımı. sinir ezilme yaralanmasından beş hafta sonra wt naif sıçanların ve wt sıçanlarının sol ve sağ arka kısmı için. Veriler ortalama ± SEM olarak gösterilmektedir. İstatistiksel analiz, normal dağıtılmış verilerin eşleşmeyen t testi ve normal olmayan dağıtılmış verilerin Mann-Whitney U testi kullanılarak gerçekleşmiştir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig05.jpg"> Şekil 5: Metz ve ark.'dan 7 kategori ölçeğine göre her kategorinin örnek temsili. merdiven rung yürüyüş görevi sırasında. Kategori 0'ın sağ arka engelinden temsili görüntü dizisi - toplam ıskalama, kategori 1 - derin kayma, kategori 2 - hafif kayma, kategori 3 - değiştirme, kategori 4 - düzeltme, merdiven basamak yürüyüş görevi sırasında. Kategori 5 için temsili resimler - kısmi yerleştirme ve kategori 6 - doğru yerleştirme. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonra sıçanlarda davranışsal test pili ile motor davranışın değerlendirilmesi için bir protokol sunuyoruz.

Tek Taraflı Siyatik Sinir Ezilme Yaralanması Sonrası Sıçanlarda Motor Davranışın Multifaktöriyel Değerlendirilmesi

The induction of a peripheral nerve injury is a widely used method in neuroscience for the assessment of repair and pain mechanisms among others. In ...

Bu protokolün genel amacı, iftiraş syatik sinir ezilmenin gerçekleştirilmesinde rol oynayan prosedürleri tanımlamak ve periferik travma sonrası motor davranışların değerlendirilmesi için bir protokol sağlamaktır. Güçlü ve güvenilir bir davranışsal test pilinin seçimi, çok çeşitli davranışsal yönleri kapsamak için gereklidir ve kullanılan hayvan modeline ve bilimsel araştırma sorusuna bağlıdır. Bu protokol, siyatik sinir ezilme yaralanmasının nasıl gerçekleştirildiğini ayrıntılı olarak açıklar ve sıçanlardaki motor açıklarının değerlendirilmesi için açık alan testi, CatWalk yürüyüş analizi, ışın yürüme görevi ve merdiven basamak yürüyüş görevini içeren bir davranışsal test pili sağlar.Hayvan deneyleri, hayvanların bakımı ve kullanımı için geçerli ulusal ve kurumsal yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi. Tüm cerrahi işlem sırasında steril bir ortam sağlayın. Ameliyat masasını gerekli ekipmanlarla kurun.Sıçanı izofluran ile kapalı bir dolapta derinden uyuşturun ve sağ arka uzvun geniş bir alanını tıraş edin. Daha sonra, sıçanı anestezi maskesine yerleştirin ve izofluran ile derin anesteziye devam edin. Farenin gövdesini ve her iki arka uzuvlarını bantla sabitleyin.Her iki arka uzvunu simetrik ve uzanmış bir konuma yerleştirin ve her pençeyi ameliyat masasına düzleştirin. Tıraş edilen bölgenin cildini uygun bir antiseptikle dezenfekte edin. İleumun siyatik çentikini arayın.Siyatik çentiğinden neşterle pençe yönüne bir cilt kesisi yapın. Arka uzuvlar sabitlenirse ve deri kesisi doğru yapılırsa, gluteus maximus kası ile pazı femoris kası arasındaki fasyal düzlemde beyaz bir çizgiye benzeyen bir boşluk görülebilir. Kapalı süper ince hemostatik forsepsleri boşluğa yerleştirin ve forsepsleri yayın.Fasyal düzlem herhangi bir kas dokusunu yaralamadan açılmalıdır. Deri kesisini açık tutmak için lastik bant retraktörlerini kasların altına yerleştirin. Sinir tamamen açığa çıkarıncaya kadar çevredeki herhangi bir dokuyu ve kan damarlarını siyatik sinirden hafifçe çıkarın.Tüm işlem sırasında siniri germemek veya çekmemek önemlidir. Siyatik siniri tırtıksız bir kelepçe ile sabit ve hızlı kullanılabilir basınçla ezin. Bunun için kelepçeyi açın, siniri kelepçenin alt çenesine yerleştirin ve kelepçeyi ilk konuma 3 x 10 saniye kilitleyerek kapatın.Ezilme yaralanmasından sonra, kelepçeyi dikkatlice yeniden açın. siyatik sinirin ezilme bölgesi yarı saydam görünür. Lastik bant retraktörlerini çıkarın.Fasyal düzlem kesisini resorbable bir dikişle kapatın. Cilt kesisini vücut derisi zımbaları ile kapatın. Lokomotor aktivitesinin yanı sıra sıçanların davranışsal aktivitesi açık alan testi ile analiz edilebilir.Karanlık ve sessiz bir ortamda bulunması gereken açık alanın kurulumu, otomatik video takip sistemi EthoVision XT ve çizilmeye dayanıklı, temizlenebilir siyah yüzeye sahip bir arenadan oluşuyor. Arenayı ve kamerayı doğru konuma getirin ve EthoVision XT yazılımını kurun. Sıçanı test arenasının ortasına hafifçe yerleştirin.Kayıt sırasında, deneyci, farenin dikkatini dağıtmamak için açık alandan uzak durmalıdır. Açık alan testinin veri analizi için sol kenar çubuğundaki analiz bölümüne gidin ve Sonuçlar"sekmesinin altında Görselleştirmeyi İzle'yi seçin. Ardından, gerekli parametreleri XL.In the software'e dışa aktararak, veri analizi için farklı kategorilerden bir dizi değişken seçin.CatWalk XT sistemi tarafından yapılan bir yürüyüş analizi, hayvan modellerinin ayak izleri, duruşu ve yürüyüşü ile ilgili birçok farklı parametreyi değerlendirmeye yardımcı olabilir. Cam bir yürüyüş yolu yeşil ışıkla aydınlatılıyor ve hayvanların ayak izlerinin saçtığı ışık, yürüyüş yolunun altında bulunan yüksek hızlı bir video kamera ile yakalanıyor. Sinyaller CatWalk XT yazılımı ile analiz edilebilir.Deney karanlık koşullar altında yapılmalıdır. CatWalk XT sistemini kurarak başlayın. Deneysel ayarları seçin.Kamerayı yerine yerleştirin ve odağı ayarlayın. Algılama ayarlarını yapın. CatWalk sisteminin koridor duvarlarını kurun ve duvarların yürüyüş yoluna paralel kaldığından emin olun.Yürüyüş yolunun uzunluğunu tanımlayın ve yürüyüş yolunu kalibre edin. Ardından, bir arka plan görüntüsü kırarak. Arka plan görüntüsü için temiz ve boş bir yürüyüş yolu gereklidir.Sıçan herhangi bir kesinti olmadan geçit geçmeli. Tanımlanan çalışma kriterlerine göre, veri analizi için sıçan başına üç uyumlu çalıştırmaya ihtiyaç vardır. Gerçek deneye başlamadan önce hayvanları en az sekiz gün eğitin.CatWalk, sürekli bir görev performansı sağlamak için haftada en az bir kez, 6 ila 10 koşu ile gerçekleştirilmelidir. Veri çözümlemesi için yalnızca uyumlu çalıştırmaları değerlendirin. CatWalk XT yazılımıyla pençe baskılarını otomatik olarak sınıflandırın.Pençe baskı etiketlerini manuel olarak gözden geçirin. Yanlış pençe baskı etiketlerini düzeltin, algılanmayan pençe baskılarının etiketlerini ekleyin ve gürültüyü ve yanlış etiketleri silin. Bir XL sayfasında görüntülenen ve bir dizi temel parametreyi gösteren sayısal sonuçlar.Her ayak izi hakkında daha ayrıntılı bilgi için arka pençelerin ayak izlerini sınıflandırın. Bu analiz etkileşimli ayak izi ölçümleri modülünü gerektirir. Ayak izi analizi için işaretleyicileri manuel olarak ayarlayın.Üç uyumlu çalıştırmada da her arka pençe baskısını analiz edin. İlk başpenin ortasından beşinci başpenin ortasına bir çizgi çekerek ton yayılımını ölçün. Orta ton yayılımını ölçmek için ikinci tonun ortasından dördüncü tonun ortasına bir çizgi çekin.Manuel baskı uzunluğunu ölçmek için üçüncü ayak parmağından arka pençenin topuğuna bir çizgi çizin. Ayrı bir sayfada görüntülenen etkileşimli ayak izi ölçümlerinin sayısal sonuçlarını gözden geçirin. Yürüyüş açıkları kiriş yürüme görevi ile belirlenebilir.Bu özel araştırma başlığında ışın yürüme görevinin odak noktası motor dengesinin değerlendirilmesi değil, motor koordinasyonunun analizi olacaktır. Kiriş yürüyüşü görevi için kiriş, aralayıcı, masa, tekdüze arka plan ve video kamera gereklidir. 90 santimetre uzunluğunda, 1,7 santimetre genişliğinde ve 2 santimetre yüksekliğinde ahşap bir kiriş kullanın.Hayvanları yedi gün eğitin. Sıçanı kirişin başlangıç platformuna yerleştirin. Sıçan herhangi bir kesinti olmadan kirişi üç kez geçmelidir.Sıçan ilk üç koşu içinde üç uyumlu koşuya ulaşsa bile, sürekli görev performansı için en az 6 ila 10 çalışma yapılmalıdır. Kayıttan üç uyumlu çalıştırmanın video dizilerini seçin. Seçili üç uyumlu çalıştırmanın başlangıç zaman noktasını ve bitiş zaman noktasını tanımlayın.Burada, başlangıç zaman noktası kiriş üzerindeki siyah bir çizgi ile etiketlenmiştir ve ilk arka uzvun siyah çizginin arkasına yerleştirilmesi koşunun başlangıç zaman noktası olarak tanımlanır. Kirişin sonundaki platforma ilk arka uzvun yerleştirilmesi bitiş zaman noktasını tanımlar. Daha sonra, sıçanın ışından geçmesi için gereken süreyi hesaplayın.Yazılımın yakınlaştırma ve ağır çekim işlevini kullanarak, her iki arka uzuv için de ayrı ayrı üç uyumlu çalıştırmadan adım ve hata sayısını puanla. Hatalar toplam ayak kaymalarını ve yarım ayak kaymalarını içerir. Toplam ayak kayması, derin kayma ile takip edilen ve etkilenen pençenin ışınla temas kaybına neden olan bir ayak yerleşimi olarak tanımlanır.Yarım kayma, pençenin tam temasını kaybetmeden kirişin yan duvarından kayması olarak tanımlanır. Kirişi geçecek adım sayısına göre ayak kaymalarının yüzdesini hesaplayın. Merdiven basamak yürüyüş görevi motor fonksiyonu, hem ön uzuvların hem de arka uzuvların yerleştirilmesini ve uzuvlar arası koordinasyonu değerlendirebilir.Bu davranış testi için bir merdiven basamak aparatı, aralayıcı, tablo, tekdüze arka plan ve video kamera gereklidir. Yatay harfli basamak aparatı metal basamaklardan ve şeffaf polikarbonat yan duvarlardan oluşur. Hayvanları sekiz gün eğitin.Sıçanı merdiven basamak operatörlerinin başlangıç bölgesine yerleştirin. Sıçan, uyumlu bir koşu olarak nitelendirebilmesi için merdiven basamak aparatının 100 santimetrelik yürüyüş yolunu kesintisiz olarak üç kez geçmek zorundadır. Kayıttan üç uyumlu çalıştırmanın video dizilerini seçin.Seçili üç uyumlu çalıştırmanın başlangıç zaman noktasını ve bitiş zaman noktasını tanımlayın. Arka uzvun cihazın yan duvarındaki ilk siyah çizginin arkasına yerleştirilmesi, koşunun başlangıç zaman noktasını tanımlar. İlk ön uzvun cihazın yan duvarındaki ikinci siyah çizginin arkasına yerleştirilmesi, koşunun bitiş zaman noktasını tanımlar.Ardından, yürüyüş yolundaki koşunun süresini hesaplayın. Yazılımın ağır çekim veya kare kare işlevini kullanarak Mets ve iş arkadaşlarından 7 kategori ölçeğiyle uyumlu üç çalıştırmayı puanla. Her uzuv için ölçek kategorilerine göre adım sayısını ve hata sayısını ayrı ayrı belirleyin.Ölçek aşağıdaki kategoriler arasında ayrımlar. Tam bir ıska. Derin kayma.Hafif bir kayma. Replacement.Correction. Kısmi yerleştirme. Ve doğru yerleştirme.Ardından, adım başına hataları hesaplayın. Beş dakikalık açık alan testinin temsili sonuçları, ameliyattan beş hafta sonra sinir ezilme yaralanmasının lokomotor aktivite üzerinde hiçbir etkisi olmadığını göstermektedir. CatWalk XT sistemi ile yürüyüş analizi birçok farklı parametre oluşturur.Koşu ortalama hızı, adım uzunluğu ve sinirden yaralanan sağ arka pençenin baskı alanı için önemli değişiklikler tespit edilebilir. Sinirden yaralanan yabani tip sıçanlar, yaralanmadan beş hafta sonra vahşi tip naif sıçanlara kıyasla kirişi geçmek için önemli ölçüde artan bir gecikme süresi gösterdi. Işın yürüme görevinin ek bir okuması olarak, sinirden yaralanan arka uzvun tam kaymaları ve yarım kaymaları sayıldı ve istatistiksel analiz için bir hata olarak kabul edildi.Sinirden yaralanan sağ arka uzvun adım başına hata yüzdesi, sinirden yaralanan yabani tip sıçanlarda, vahşi tip naif sıçanlara kıyasla önemli ölçüde artmıştır. Merdiven basamak yürüyüş görevinin temsili verileri, merdiven basamak aparatının yürüyüş yolunu geçmek için gecikme süresinde veya sinir yaralı sağ arka uzvun adım başına hata yüzdesinde önemli değişiklikler göstermez. Sinir yaralanması olan arka uzvun adım başına hata yüzdesinin analizi, Mets ve meslektaşlarından 7 kategori ölçeğinin sadece 0'dan 2'ye kadar olan puanını dikkate aldı.Bu videoyu izledikten sonra, siyatik sinir ezilme yaralanmasının nasıl gerçekleştirildiğini ve tek taraflı siyatik sinir ezilme sonrası sıçanlarda motor davranışın çok faktörlü bir değerlendirmesinin nasıl uygulanılacağını iyi anlamalısınız. Siyatik sinir ezilme yaralanmasından sonra tutarlı, tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir sonuçlar elde etmek için, sinir ezilme indükleme için standartlaştırılmış bir yöntemin yanı sıra standartlaştırılmış bir fenotipik karakterizasyon gereklidir. Belirli davranış testi için uygun eğitim, deney değerlendirmesi sırasında zamandan tasarruf etmenin ve daha iyi sonuçlar elde etmenin avantajlarını sağlar.

multifactorial-assessment-motor-behavior-rats-after-unilateral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu yazıda fare siyatik sinir ezmek için bir metodu tanımlar. Bu yöntem, hazır hemostatik forseps kullanır ve kolay ve tekrarlanabilir tam siyatik sinir üretir. Buna ek olarak, siyatik sinir sonra rejenerasyon analizi için uygun kas bütün bağlar hazırlamak için bir yöntem açıklanmaktadır.

Tüm Dağı Muscle Analizi ile tekrarlanabilir Fare Siyatik Sinir Ezilme ve Rejenerasyon daha sonraki Değerlendirme

Kaynak: Li, Q., et al. Memeli Akson Rejenerasyonunun Araştırılması: Yetişkin Fare Dorsal Kök Ganglionunun İn Vivo Elektroporasyonu. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, bir ezilme yaralanmasını takiben bir fare siyatik sinirinde aksonal rejenerasyon sürecini göstermektedir. İzole edilen sinir sabitlenir ve akson büyümesini görselleştirmek için nöronlarda eksprese edilen floresan proteinler ile görüntüleme için hazırlanır. Bir epifloresan mikroskobu kullanılarak, yeniden büyümenin derecesini...

Ezilme yaralanmasını takiben bir farenin siyatik sinirinde aksonal rejenerasyon

Kemirgenlerde servikal spinal kord yaralanması sonrası ön ayakları fonksiyonu değerlendirmek için üç yeni davranış testleri (ön ayakları adım münavebe, postural instabilite testi, makarna işleme testi) tarif edilmiştir.

Roman Görevleri kullanılarak tek taraflı Servikal SKY sonra ön ayakları Fonksiyon değerlendirilmesi: Ekstremite Adım münavebe, postural İstikrarsızlık ve Pasta Taşıma

kortikospinal sistem, büyük duyusal yollarının biri, merkezi sinir sistemi için nöroplastisite indükleyici tedavilerin test etmek için kemirgen beyin sapı, tek taraflı olarak lezyonlu edilebilir. Bu cerrahi işlem ("pyramidotomy") ve postoperatif değerlendirmeler bu protokol açıklanmıştır.

Nöroplastisite uyaran Tedaviler Değerlendirme Sıçanlarda Kortikospinal Yolu Tek Taraflı Pyramidotomy

Burada erişkin sıçanlarda9'uncu torasik düzeyde güvenilir bir spinal kord lateral hemiksiyon (HX) üretmek için yapılan cerrahi prosedürleri ve böyle bir tek taraflı yaralanma sonrası asimetrik açıkları tespit etmek için tasarlanmış nörodavranışsal değerlendirmeleri açıklıyoruz.

Erişkin Sıçanlarda Spinal Kord Lateral Hemisite ve Asimetrik Davranış Değerlendirmeleri

Sıçan torasik spinal hemiseksiyon lokomotor kurtarma ve tedavi etkinliğini nöral mekanizmaları araştırmak için tek taraflı omurilik hasarı değerli ve tekrarlanabilir bir modeldir. Bu makalede, hemiseksiyon prosedürü gerçekleştirmek ve bir açık alan arenada lokomotor performansını değerlendirmek için ayrıntılı bir adım adım kılavuz içerir.

Sıçan içinde torasik omurilik Hemiseksiyon cerrahisi ve açık saha lokomotor değerlendirmesi

Kemirgen modellerini içeren temel araştırmalar sırasında fonksiyonel değerlendirmeler yapmak için dört kamera ve veri işleme yazılımı içeren üç boyutlu hareket yakalama cihazı kullanan bir kinematik analiz yöntemi salıyoruz.

Siyatik Sinir Ezilme Hasarının Sıçan Modelinde Fonksiyonel Değerlendirme için 3D Kinematik Analiz

Otomatik yürüyüş analizi periferik sinir yaralanması ve omurilik kontüzyonu yaralanması kemirgen modellerinde fonksiyonel iyileşme değerlendirmek için uygun bir araçtır. Çeşitli deneysel modellerde lokomotor fonksiyonu değerlendirmek için tek bir kurulum gerektirmesine gerek kalırken, hayvanların titiz sert ve yumuşak gereç lerin ayarlanmave eğitimi son derece önemlidir.

Periferik Sinir veya Spinal Kord Kontüzyonu Yaralanması olan Kemirgenlerde Fonksiyonel İyileşmeyi Değerlendirmek için Otomatik Yürüyüş Analizi

Motor geri kazanımın değerlendirilmesi deneysel periferik sinir çalışmalarında kıyaslama sonucu ölçüsü olmaya devam etmektedir. Sıçandaki tibialis ön kasının izometrik tetanik kuvvet ölçümü, siyatik sinir kusurlarının yeniden yapılandırılmasından sonra fonksiyonel sonuçları değerlendirmek için paha biçilmez bir araçtır. Yöntemler ve nüanslar bu makalede ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Sıçandaki Tibialis Ön Kasının Maksimum İzometrik Tetanik Kuvvet Ölçümü

MouseWalker (MW) araç kutusunu kullanarak serbestçe yürüyen farelerin lokomotor modelini nicel olarak tanımlamak için ilk video kayıtlarından ve izlemeden niceleme sonrası analize kadar uzanan deneysel bir boru hattı sağlanmıştır. MW sisteminin yararlılığını göstermek için farelerde omurilik kontüzyon yaralanması modeli kullanılmıştır.

Omurilik Yaralanmasının Bir Fare Modelinde Lokomotor Disfonksiyonu Ölçmek için MouseWalker'ı Kullanma

Öğrenin sıçanlarda siyatik sinir ezilme yaralanması sonrası motor davranışın multifaktöriyel değerlendirilmesi için açık alan testi, CatWalk yürüyüş analizi ve kiriş yürüyüş görevi gibi davranışsal test bataryası kullanımını.

Tek Taraflı Siyatik Sinir Ezilme Yaralanması Sonrası Sıçanlarda Motor Davranışın Multifaktöriyel Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet