Name: Biyolüminesans Görüntüleme Kullanan Farelerde İdrar Yolu Enfeksiyonlarının Boyuna Takibi ve Tedavileri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-14T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: Öğrenin farelerde biyolüminesans görüntüleme ile idrar yolu enfeksiyonlarının boyuna takibini. Bu yöntem bakteri yükünü gerçek zamanlı izleyerek tekrarlayan enfeksiyonların patogenezini anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Araştırma Vakfı tarafından desteklendi - Flanders (FWO Vlaanderen; G0A6113N), KU Leuven Araştırma Konseyi (C1-TRPLe; T.V. ve W.E.) ve VIB (T.V.'ye). W.E., Flanders (FWO Vlaanderen) Araştırma Vakfı'nın kıdemli klinik araştırmacısıdır. UTI89-lux türü, Prof. Seed'in laboratuvarından cömert bir hediyeydi13.

Tüm hayvan deneyleri Avrupa Birliği Toplum Konseyi yönergelerine uygun olarak yapılmış ve KU Leuven Hayvan Etik Komitesi (P158/2018) tarafından onaylanmıştır.
1. Kült bakteriler(7,13,14'tenuyarlanmıştır)
<ol><li>Hazırlık<ol>
<li>Deneysel ihtiyaçlara en uygun parlak upec suşu seçin. NOT: Burada, klinik sistit izole, UTI89 (E. coli), hem insanlarda hem de kemirgenlerde üropatojenik kapasitesi ve murine UTI modellerinde yaygın kullanımı nedeniyle seçilmiştir5,7,15. Komple lüks operonu (luxCDABE) taşıyan biyolüminesan izojenik suş, UTI89-luxolarak da adlandırılır. Bu operon ayrıca kanamycin sülfat (Km) direnç genleri taşır. Bu nedenle, Km biyolüminesan kolonileri seçmek için kullanılabilir13.</li>
		<li>Seçilen bakteri suşu7için 600 nanometrede (OD 600 nm) CFU ve optik yoğunluk için bir korelasyon eğrisi yapın.<ol>
<li>Bunu yapmak için, kültür bakterileri (aşağıdaki protokolü kullanarak) ve fosfat tamponlu salin (PBS) içinde 8 farklı seyreltme yapın. Tüm bu seyreltmeler için OD'yi 600 nm olarak ölçün ve CFU'yı belirlemek için Luria-Bertani (LB) plakalarına plakalayın.</li>
			<li>Korelasyonu belirlemek ve standart bir eğri elde etmek için OD 600 nm değerlerini ve CFU değerlerini çizin. NOT: Gelecekteki deneyler için, OD'yi 600 nm olarak ölçün ve CFU'nun bakteriyel bir çözeltide anında tahminini elde etmek için bu standart eğriyi kullanın. DİkKAT: UPEC patojenik bakterilerdir, odaların uygun şekilde donatılmasına ve kişisel koruyucu ekipman kullanılmasına dikkat edin.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Aşılamadan üç gün önce<ol>
<li>50 μg/mL Km ile desteklenmiş LB plakaları ve 37 °C'de bir gecede kültür ile desteklenmiş bir aşılama döngüsü kullanarak bakteri gliserol stokunu çizerek tek koloniler elde edin. Bu plakaları 1 haftaya kadar 4 °C'de saklamak için bir parafin filmi ile kapatın.</li>
	</ol></li>
	<li>Aşılamadan iki gün önce<ol>
<li>Steril 14 mL polistiren yuvarlak alt tüpü 50 μg/mL Km ile desteklenmiş 5 mL LB suyu ile çift konumlu snap kapaklarla doldurun. Uygun karıştırmayı sağlamak için 10 sn için girdap.</li>
		<li>Bir gecede 37 °C'de açık konumda yapıştırı kapağıyla statik olarak kültüre yerleştirin. NOT: E. coli'nin statik büyümesi, idrar epitel hücrelerinin yapışma ve istilası için kritik olan tip 1-pili ifadesini teşvik eder.</li>
		<li>Steril bir Erlenmeyer veya kültür şişesi hazırlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Aşılamadan bir gün önce<ol>
<li>Kuluçkadan sonra, bakteri kültürünün uygun homojenizasyonunu sağlamak için tüpü 10 sn boyunca girdap. Antibiyotiksiz 25 mL taze LB ortamına 25 μL bakteri süspansiyonu ekleyerek Erlenmeyer'de bir alt kültür yapın.</li>
		<li>Erlenmeyer ve kültürü statik olarak 37 °C'de bir gecede kapatın.</li>
	</ol></li>
	<li>Aşılama gününde<ol>
<li>Uygun karıştırmayı sağlamak için 10 sn için Erlenmeyer Girdabı.</li>
		<li>Erlenmeyer'deki kültürü 50 mL'lik bir kültür tüpüne ve 3.000 x g ve 4 °C'de 5 dakika santrifüje dökün. Süpernatantı deklare edin ve bakteri peletini 10 mL steril PBS ve girdapta tekrar 10 sn.</li>
		<li>Inoculum 'un (CFU) deneysel konsantrasyonu seçin ve karşılık gelen OD 600 nm'yi belirlemek için 1.1.2 adımında elde edilen standart eğriyi kullanın.</li>
		<li>9 mL steril PBS'ye 1 mL resüspended bakteri kültürünü ekleyin ve OD'yi 600 nm'de kontrol edin. İstenen OD 600 nm'ye ulaşılana kadar steril PBS veya konsantre bakteri çözeltisi ekleyerek daha fazlaayarlayın. NOT: Örneğin, UTI89-lux için, OD 600 nm 0,45'e ulaşana kadar PBS ekleyerek kültürü ayarlayın, bu da 2 x 107 CFU/50 μL'ye karşılık gelir. Uygulanabilir CFO'ların sayısını doğrulamak için, 300'den az koloni elde etmek için üç taraflı olarak LB plakalarında beşinci ve altıncı 10 kat seyreltmelerin 10 kat seri seyreltmelerini ve plakasını 50 μL yapın. 37 °C'de gece kuluçkadan sonraki gün elde edilen kolonileri sayın, OD 600 nm anında okuma verir, ancak kalite kontrol olarak CFU kullanır.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Hayvanların aşıları(7,16'danuyarlanmıştır)
<ol><li>Hayvanların hazırlanması<ol>
<li>Araştırma sorusuna ve nakavt hatlarının mevcudiyetine, deneysel ayrıntılara ve UTI duyarlılığındaki farklılıklara bağlı olarak istediğiniz fare zorlanmasını seçin5,17. Transüretral kateterizasyonun dişi farelerde daha kolay olduğunu unutmayın. İmmünolojik olarak olgunlaşmamış oldukları için 8 haftadan küçük hayvanları kullanmayın. Burada 12 haftalık dişi C57Bl/6J fareler kullanıldı.</li>
		<li>Hayvanları önceden sipariş edin ve ideal olarak 7 gün boyunca alışmalarına izin verin. Ev hayvanlarını standart 12 saat açık/karanlık koşullar altında ayrı ayrı havalandırılan kafeslerde gruplandırın.</li>
		<li>Sinyal kaybını sınırlamak için hayvanların karın bölgesini tıraş edin. Hayvanların cildini hızlı bir şekilde yakabileceğinden epilasyon kremi kullanmayın. Baskın elle tıraş olurken scruff ve arka uzuvları baskın olmayan el ile sıkıca tutarak hayvanı zapt edin. Alternatif olarak, izofluran anestezisi altında tıraş edin. NOT: Hayvanlar, tıraş edilen bölgeyi daha da tımar edecekleri düşünüldüğünde, görüntülemeden 2 gün önce tıraş edildi.</li>
		<li>Deney boyunca su ve standart gıda reklam libitum sağlayın. Bununla birlikte, aşılama sırasında mesane hacmini en aza indirmek için aşılamadan önce hayvanları sudan 2 saat mahrum edin.</li>
		<li>Steril 24 G anjiyokateter ucunu 100 μL şırındıya monte edin ve şırınnayı 1.5.3 adımında hazırlanan bakteri çözeltisi ile doldurun. NOT: Arka plan parlaklığını belirlemek için, aşılamadan önce temel bir görüntü elde edin (aşağıdaki adım 3'e bakın).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Hayvanların aşılanması<ol>
<li>Hayvanları bir indüksiyon odasına yerleştirin ve taşıyıcı gaz olarak saf oksijenle izofluran soluma kullanarak uyuşturun (% 3'te indüksiyon ve% 1.5'te bakım).</li>
		<li>Bir hayvanı supine pozisyonunda çalışan bir yüzeye yerleştirin ve aşılama sırasında burun konisi kullanarak kararlı bir izofluran anestezisi sağlayın. Göz merhemini uygulayın.</li>
		<li>Hafif kompresyon uygulayarak ve suprapubik bölgeye dairesel hareketler yaparak artık idrarı dışarı atın. Aşılamadan önce alt karnı% 70 etanol ile temizleyin.</li>
		<li>Kateter ucunu normal salin ile yağlayın. Baskın olmayan elin işaret parmağını karın üzerine koyun ve hafifçe yukarı doğru itin. Üretranın kateterizasyonunu 90° açıyla (dikey olarak) başlatın ve dirençle karşılaşıldığında, daha fazla yerleştirmeden önce yatay olarak eğin (0,5 cm). NOT: Kateteri asla zorla itmeyin, çünkü bu üretraya zarar verecektir. Nazik tornalama hareketleri kateter takılmasında yardımcı olabilir. Öte yandan, direnç eksikliği genellikle vajinaya hatalı yerleştirmeyi gösterir.</li>
		<li>Bakteriyel inoculum'un (2 x 107 CFU) 50 μL'lik yavaş (5 μL/s) aşısını gerçekleştirin. NOT: Daha yüksek hacimlerde veya daha hızlı aşılama böbreklerde reflüye neden olabilir. Tekniğin uygulanması sırasında, reflü değerlendirmek için mavi mürekkep kullanılabilir.</li>
		<li>Aşılamadan sonra, şırınna ve kateteri birkaç saniye daha yerinde tutun ve ardından sızıntıyı önlemek için yavaşça geri çek. Yüksek miktarda sızıntı veya kanlı bir meatus gibi düzensizlikleri kaydedin ve gerekirse hayvanları hariç tutun.</li>
		<li>Hayvanı görüntüleme odasının burun konisinde supine pozisyonda konumlandırın ve kalan tüm hayvanlar için önceki 2.1.1-2.1.6 adımlarını tekrarlayın. Deney grubu başına bir kateter kullanın. Anesteziye devam edilip ilk ve son hayvan arasındaki süreyi en aza indirdiğinizi sağlayın.</li>
		<li>Gerekirse, görüntülemeden önce veya sonra antibiyotik veya deneysel ilaçlar sanın (adım 3). Örneğin, enrofloksasin uygulamak için, 1/100 seyreltme elde etmek için 3,96 mL fizyolojik saline 40 μL enrofloksasin (100 mg/mL) çözeltisi ekleyin. 3 gün boyunca günde iki kez 10 mg/kg enrofloksasin uygulamak için 100 μL/10 g deri altından 09:00 ve 17:00'de enjekte edin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Biyolüminesans görüntüleme
<ol><li>Görüntüleme parametrelerinin hazırlanması ve seçimi<ol>
<li>BLI alma yazılımını açın (bkz. Malzeme Tablosu)ve kamera ve sahne kontrol sistemini test etmek ve CCD kamerayı -90 °C'ye soğutmak için görüntüleme cihazında Başlat'a tıklayın (bkz. Malzeme Tablosu). NOT: Bu işlem sırasında kapı kilitlenir ve başlatmanın ilerlemesi kontrol panelinde takip edilebilir. Yeşil ışık -90 °C sıcaklığa ulaşılmasını gösterir. Başlatma tamamlanmadan önce görüntüleme deneniyorsa bir uyarı görüntülenir.</li>
		<li>Verilerin otomatik olarak kaydedildik mi: Edinme Otomatik kaydetme'ye tıklayın ve doğru klasörü seçin.</li>
		<li>Lüminesans ve Fotoğraf'ı seçin. Varsayılan lüminesans ayarlarını denetleme: Heyecan filtresini Engelle ve emisyon filtresini Açolarak ayarlayın.</li>
		<li>İlk görüntüyü çekerken, özellikle de yeterli sayıda foton sayımı sağlamak için loş bir sinyal beklerken pozlama süresini Otomatik olarak ayarlayın. In vivo ölçümler ve parlak sinyaller için Pozlama Süresini ~30 s olarak ayarlayın. Görüntü doymuşsa, bir uyarı görüntülenir. Bu durumda, pozlama süresini azaltın.</li>
		<li>Orta Binning, F/stop 1'i seçin ve doğru görüş alanını (FOV) (5 hayvan için D) seçin.</li>
		<li>Fareleri görüntülerken konu yüksekliğini 1 cm olarak ayarlayın.</li>
		<li>Teknik çoğaltma olarak üç görüntüden oluşan bir dizi elde etmek için Edinme Denetim Masası'nda Üç kez ekle'ye tıklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Görüntüleme<ol>
<li>Fareleri supine pozisyonunda görüntüleme odasına yerleştirin ve deney boyunca anesteziyi (%1,5) korumak için manifold burun konisini kullanın. Aynı anda 5 fareye kadar görüntü ve yansımayı önlemek için ışık şaşkınlıklarını kullanarak hayvanları ayırın.</li>
		<li>Kapıyı kapatın ve görüntüleme sırasını başlatmak için Edin'e tıklayın.</li>
		<li>Deney hakkında ayrıntılı bilgi (vahşi tip ve nakavt hayvanları, tedaviler, görüntüleme günü vb.) doldurun. Pozlama süresi gibi görüntüleme ayarları otomatik olarak kaydedilir.</li>
		<li>Fareleri görüntüleme odasından çıkarın ve kafeslerine geri verin. Anesteziden sonra tam iyileşme olup olmadığını kontrol edin. Birkaç dakika içinde, hayvanlar tamamen uyanık ve araştırmacı olmalıdır. UTI kursuna müdahale edebileceğinden analjezi sağlamayın18.</li>
		<li>Kafesleri bir sonraki görüntüleme döngüsüne kadar havalandırılan raflara geri verin. Deney tamamlandıktan sonra, hayvanları CO2 boğulma veya servikal çıkık ile ötenazi yapın. Sıkıntıyı en aza indirmek için izofluran anestezisinin iyileşmesinden önce bunu yapın.</li>
	</ol></li>
	<li>Görüntülerin analizi<ol>
<li>Görüntüleme yazılımını başlatın ve Gözat 'ı tıklatarak deneysel dosyayı yükleyin.</li>
		<li>Görüntünün renk ölçeğini ayarlamak için Araç Paleti'ni kullanın. Tüm görüntüler için aynı ayarları kullanarak sonuçların görsel yönünü standartlaştırın, yani en az 104 ila en fazla 107 foton içeren logaritmik bir ölçek kullanın. Bu ayarlamalar ham verileri değil, yalnızca grafiksel sunuyu etkiler.</li>
		<li>Görüntüye ilgi çekici bir bölge (YATıRıMGK) çizmek için yatırım getirisi araçlarını kullanın. Yatırım getirisinin tüm alanı kaplayacak kadar büyük olduğundan emin olun ve tüm görüntüler için aynı boyutları kullanın. Burada alt karın bölgesi üzerine 3,5 cm x 4,5 cm kare YÇ yerleştirildi.</li>
		<li>Işık yoğunluğunu (sayımlar veya toplam foton akısı) ölçmek için yatırım getirisi ölçümüne tıklayın. Bu verileri dışa aktar ve teknik çoğaltmaların ortalamasını kullan. NOT: Sayımlar kamera tarafından algılanan foton sayısını temsil eder ve yalnızca görüntü kalitesi kontrolü için kullanılmalıdır. Verileri raporlamak için toplam foton akısını kullanın. Toplam foton akısı, yüzeyden yayılan ışığı temsil ettiği için fizyolojik olarak daha alakalıdır ve maruz kalma süresi (saniyede) için düzeltilen kalibre edilmiş bir ünitedir.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Foxman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+urinary+tract+infections%3A+incidence%2C+morbidity%2C+and+economic+costs%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of urinary tract infections: incidence, morbidity, and economic costs.</a> American Journal of Medicine. 113 (1), 5-13 (2002).</li>
<li>O'Brien, V. P., Hannan, T. J., Nielsen, H. V., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+and+vaccine+development+for+the+treatment+and+prevention+of+urinary+tract+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+Spectrum%22%5BJournal%5D)">Drug and vaccine development for the treatment and prevention of urinary tract infections.</a> Microbiology Spectrum. 4 (1), 1128(2016).</li>
<li>Nielubowicz, G. R., Mobley, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host-pathogen+interactions+in+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Urology%22%5BJournal%5D)">Host-pathogen interactions in urinary tract infection.</a> Nature Reviews Urology. 7 (8), 430-441 (2010).</li>
<li>Foxman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Urology%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of urinary tract infection.</a> Nature Reviews Urology. 7 (12), 653-660 (2010).</li>
<li>Carey, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+tract+infection+of+mice+to+model+human+disease%3A+Practicalities%2C+implications+and+limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Crititical+Reviews+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Urinary tract infection of mice to model human disease: Practicalities, implications and limitations.</a> Crititical Reviews in Microbiology. 42 (5), 780-799 (2016).</li>
<li>Barber, A. E., Norton, J. P., Wiles, T. J., Mulvey, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+model+systems+for+the+study+of+urinary+tract+infections+and+related+pathologies%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+and+Molecular+Biology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of model systems for the study of urinary tract infections and related pathologies.</a> Microbiology and Molecular Biology Reviews. 80 (2), 351-367 (2016).</li>
<li>Hung, C. S., Dodson, K. W., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">A murine model of urinary tract infection.</a> Nature Protocols. 4 (8), 1230-1243 (2009).</li>
<li>Contag, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photonic+detection+of+bacterial+pathogens+in+living+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Photonic detection of bacterial pathogens in living hosts.</a> Molecular Microbiology. 18 (4), 593-603 (1995).</li>
<li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescent+indicators+in+living+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nature Medicine. 4 (2), 245-247 (1998).</li>
<li>Doyle, T. C., Burns, S. M., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+integrated+studies+of+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for integrated studies of infection.</a> Cellular Microbiology. 6 (4), 303-317 (2004).</li>
<li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cellular Microbiology. 9 (10), 2315-2322 (2007).</li>
<li>Avci, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-vivo+monitoring+of+infectious+diseases+in+living+animals+using+bioluminescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Virulence%22%5BJournal%5D)">In-vivo monitoring of infectious diseases in living animals using bioluminescence imaging.</a> Virulence. 9 (1), 28-63 (2018).</li>
<li>Balsara, Z. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+susceptibility+to+urinary+tract+infection+in+the+spinal+cord-injured+host+with+neurogenic+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Enhanced susceptibility to urinary tract infection in the spinal cord-injured host with neurogenic bladder.</a> Infection and Immunity. 81 (8), 3018-3026 (2013).</li>
<li>Huang, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+therapy+mediated+by+methylene+blue+and+potassium+iodide+to+treat+urinary+tract+infection+in+a+female+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic therapy mediated by methylene blue and potassium iodide to treat urinary tract infection in a female rat model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7257(2018).</li>
<li>Mulvey, M. A., Schilling, J. D., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+persistent+Escherichia+coli+reservoir+during+the+acute+phase+of+a+bladder+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Establishment of a persistent Escherichia coli reservoir during the acute phase of a bladder infection.</a> Infection and Immunity. 69 (7), 4572-4579 (2001).</li>
<li>Hannan, T. J., Hunstad, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+for+E.+coli+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A murine model for E. coli urinary tract infection.</a> Methods in Molecular Biology. 1333, 83-100 (2016).</li>
<li>Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+and+host+responses+to+Escherichia+coli+urinary+tract+infection+in+genetically+distinct+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22American+Society+for+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains.</a> American Society for Microbiology. 66 (6), 2798(1998).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+Nonsteroidal+Anti-inflammatory+Drugs+for+Treatment+of+Uncomplicated+Lower+Urinary+Tract+Infections+in+Women%3A+A+Meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Microbes+%26+Diseases%22%5BJournal%5D)">Efficacy of Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs for Treatment of Uncomplicated Lower Urinary Tract Infections in Women: A Meta-analysis.</a> Infectious Microbes & Diseases. 2 (2), 77-82 (2020).</li>
<li>Vanherp, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+bioluminescence+imaging+of+fungal+dissemination+to+the+brain+in+mouse+models+of+cryptococcosis%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Sensitive bioluminescence imaging of fungal dissemination to the brain in mouse models of cryptococcosis.</a> Disease Models & Mechanisms. 12 (6), 039123(2019).</li>
<li>Keyaerts, M., Caveliers, V., Lahoutte, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging%3A+looking+beyond+the+light%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging: looking beyond the light.</a> Trends in Molecular Medicine. 18 (3), 164-172 (2012).</li>
<li>Marques, C. N., Salisbury, V. C., Greenman, J., Bowker, K. E., Nelson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrepancy+between+viable+counts+and+light+output+as+viability+measurements%2C+following+ciprofloxacin+challenge+of+self-bioluminescent+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Discrepancy between viable counts and light output as viability measurements, following ciprofloxacin challenge of self-bioluminescent Pseudomonas aeruginosa biofilms.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 56 (4), 665-671 (2005).</li>
<li>Vande Velde, G., Kucharikova, S., Van Dijck, P., Himmelreich, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging+increases+in+vivo+screening+efficiency+for+antifungal+activity+against+device-associated+Candida+albicans+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Antimicrobial+Agents%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging increases in vivo screening efficiency for antifungal activity against device-associated Candida albicans biofilms.</a> International Journal of Antimicrobial Agents. 52 (1), 42-51 (2018).</li>
<li>Oliver, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+findings+on+the+viable+but+nonculturable+state+in+pathogenic+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Recent findings on the viable but nonculturable state in pathogenic bacteria.</a> FEMS Microbiology Reviews. 34 (4), 415-425 (2010).</li>
<li>Kucharikova, S., Van de Velde, G., Himmelreich, U., Van Dijck, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candida+albicans+biofilm+development+on+medically-relevant+foreign+bodies+in+a+mouse+subcutaneous+model+followed+by+bioluminescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Candida albicans biofilm development on medically-relevant foreign bodies in a mouse subcutaneous model followed by bioluminescence imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (95), e52239(2015).</li>
<li>Van de Velde, G., Kucharikova, S., Schrevens, S., Himmelreich, U., Van Dijck, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+non-invasive+monitoring+of+pathogen-host+interactions+during+Candida+albicans+biofilm+formation+using+in+vivo+bioluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Towards non-invasive monitoring of pathogen-host interactions during Candida albicans biofilm formation using in vivo bioluminescence.</a> Cellular Microbiology. 16 (1), 115-130 (2014).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan eder.

BLI'nin CFU sayılarına göre avantajları Boyuna veriler Mikrobiyal yükü ölçmek için geleneksel CFU sayma yönteminin en büyük dezavantajı, hayvan başına sadece bir kesitsel veri noktası sağlayan ölüm sonrası organ homojenatlarının gereksinimidir. Tersine, BLI enfekte hayvanların invaziv olmayan boyuna takibini sağlar. Hayvanlar günde 2 ila 3 kez görüntülenebilir ve enfeksiyonun kinetiği hakkında ayrıntılı bilgi sağlar. Ek olarak, aynı hayvanın tekrarlanan önlemleri, yeterli güçlendirilmiş de...

İdrar yolu enfeksiyonları (UTI) insanlarda en sık görülen bakteriyel enfeksiyonlar arasındadır. Tüm kadınların neredeyse yarısı yaşamları boyunca semptomatik bir UTI yaşayacaktır1. Mesane ile sınırlı enfeksiyonlar idrar sıklığında artış, aciliyet, hematüri, idrar kaçırma ve ağrı gibi idrar semptomlarına yol açabilir. Enfeksiyon üst idrar yoluna yükseldiğinde, hastalar halsizlik, ateş, titreme ve sırt ağrısı ile pyelonenfrit geliştirir. Ayrıca, UTI'li hastaların% 20'sine kadarı tekrarlayan enfeksiyonlardan muzdariptir ve antibiyotik duyarlılığında dramatik bir azalmaya neden olan2,3,4. Son yıllarda, tekrarlayan UTI'nin tedavisi ve önlenmesi için yeni tedavilere ilgi artmaktadır. Alt idrar yollarının doğuştan gelen ve uyarlanabilir bağışıklığının ve istila ve kolonileşme için gerekli bakteriyel virülans faktörlerinin daha iyi anlaşılmasına rağmen, tedavi rejiminde radikal bir değişiklik günlük ürolojik uygulamaya çevrilmemiştir2. UTI patogenezini ve duyarlılığını vivoincelemek için tekrarlanabilir ve invaziv olmayan bir test vazgeçilmezdir.
Nematodlardan primatlara kadar birçok hayvan UTI modeli tanımlanmıştır, ancak murine modeli ağırlıklı olarak5,6. Bu model, (dişi) farelerin transüretral kateterizasyonu ve daha sonra bakteriyel süspansiyonun, en yaygın olarak üropatojenik Escherichia coli'nin (UPEC), doğrudan mesane lümenine7. Aşılamadan sonra, bakteri yükü geleneksel olarak koloni şekillendirme üniteleri (CFU) belirlenerek ölçülmüştir. Bu teknik, hayvanların ölüm sonrası organ homojenatları ve seri seyreltmeler elde etmesini, veri çıkışını ve tekrarlanabilirliğini sınırlamasını gerektirir. Ayrıca, bireysel hayvanlarda bakteri yükünün boyuna takibi bu teknik kullanılarak mümkün değildir.
1995 yılında Contag ve arkadaşları, canlı hayvanlarda hastalık süreçlerini izlemek için biyolüminesan etiketli patojenlerin kullanılmasınıönerdi 8,9. O zamandan beri, biyolüminesans görüntüleme (BLI) menenjit, endokardit, osteomiyelit, cilt ve yumuşak doku enfeksiyonları gibi çok sayıda enfeksiyon modeline uygulanmıştır10,11,12. Murine UTI modelinde, Photorhabdus lüminesanslarından tam lüks operon (luxCDABE) ile bir UPEC suşukullanılabilir 13. Enzymatic reaksiyon, oksijen varlığında azaltılmış flavin mononükleotid ile reaksiyona giren uzun zincirli aldehitlerin oksidasyonuna bağlı olan bakteriyel luciferaz tarafından katalize edilir, oksitlenmiş flavin, uzun zincirli bir yağ asidi ve ışık12verir. Lüks operon, luciferaz ve substratların sentezi için gerekli diğer enzimler için kodlar. Bu nedenle, metabolik olarak aktif olan tüm bakteriler, eksojen bir substratın enjeksiyonuna gerek kalmadan sürekli olarak mavi yeşil (490 nm) ışık yayar12. Lüksetiketli bakterilerin yaydığı fotonlar, son derece hassas, soğutulmuş şarj bağlantılı cihaz (CCD) kameralar kullanılarak yakalanabilir.
Biyolüminesan bakterilerin UTI için bir modelde kullanılması, bakteri yükünün boyuna, invaziv olmayan niceliğine izin verir ve CFU tayini için takip sırasında sabit zaman noktalarında hayvanları kurban etme ihtiyacını atlar. Bu BLI tekniğinin diğer alanlardaki sağlamlığı ve klasik UTI modellerine göre avantajları için kanıt biriktiren çok çeşitli olanaklara rağmen, UTI araştırmasında yaygın olarak uygulanmamıştır. Burada sunulan protokol, ayrıntılı bir adım adım kılavuz sağlar ve BLI'nin gelecekteki tüm UTI araştırmaları için avantajlarını vurgular.

<table><tbody><tr><td>96 oyuklu Siyah Düz Tabanlı Polistiren Plaka</td><td>Corning</td><td>3925</td><td>in vitro görüntüleme için</td></tr><tr><td>Aesculap ISIS</td><td>Aesculap</td><td>GT421</td><td>saç düzeltici, GT608 kapaklı</td></tr><tr><td>Anestezi buharlaştırıcı</td><td>Harvard aparatı sınırlı</td><td>N/A</td><td>https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html</td></tr><tr><td>Baytril 100 mg/mL</td><td>Bayer</td><td>N / A</td><td>Enrofloksasin</td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard 24 GA</td><td>BD</td><td>382912</td><td>Sarı anjiyokateter, damlatma için steril plastik uç kullanın</td></tr><tr><td>C57Bl / 6J fareler</td><td>Janvier</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj 5804R</td><td>Eppendorf</td><td>EP022628146</td><td></td></tr><tr><td>Dropsense 16</td><td>Unchained Labs</td> OD <td>600nm ölçmek için</td><td>Trinean</td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Tuzlu su, Gibco</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>REF 14040-083</td><td></td></tr><tr><td>Etanol %70 denatüre 5L</td><td>VWR uluslararası</td><td>85825360</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 14ml Yuvarlak Alt Polistiren Tüp, Geçmeli Kapaklı</td><td>Corning</td><td>352057</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 50ml cellstart</td><td>Greiner</td><td>227285</td><td></td></tr><tr><td>Hamilton GASTIGHT şırınga, PTFE luer kilidi, 100 & L</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>26203</td>, <td>50 & mikro'nun yavaş bakteri damlatmasını sağlamak için; L</td></tr><tr><td>Aşılama döngüsü</td><td>Roth</td><td>6174.1</td><td>sahibi: Art. 6189.1</td></tr><tr><td>Iso-Vet 1000mg/g</td><td>Dechra Veterinerlik ürünleri</td><td>N/A</td><td>Isofluran</td></tr><tr><td>IVIS Spektrumu In Vivo Görüntüleme Sistemi</td><td>PerkinElmer</td><td>REF 124262</td><td>görüntüleme cihazı</td></tr><tr><td>Kanamisin çözeltisi 50 mg/mL</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CAS 25389-94-0</td><td></td></tr><tr><td>Canlı Görüntüleme Yazılımı</td><td>PerkinElmer</td><td>N/A</td><td>BLI edinim yazılımı, sürüm 4.7.3</td></tr><tr><td>Luria Bertani Et</td><td>Suyu Sigma-Aldrich</td><td>REF L3022</td><td>alternatif olarak</td></tr><tr><td>yapılabilir Luria Bertani Suyu agar</td><td>ile Sigma-Aldrich</td><td>REF L2897</td><td>alternatif olarak</td></tr><tr><td>Petri kabı Sterilin 90mm</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>101VR20</td><td>LB agar ile doldurmak için Km</td></tr><tr><td>Pyrex Kültür şişesi 250 mL</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SLW1141/08-20EA</td><td></td></tr><tr><td>Slide 200 yapılabilir Trinean</td><td>Unchained Labs</td><td>701-2007</td>, <td>OD 600nm</td></tr><tr><td>UTI89-lux</td><td>ölçmek için N/A</td><td>N/A</td> Prof. Seed Vortex VWR international 444-1372'den <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>cömert hediye</tbody></table>

biyolüminesans görüntüleme kullanan farelerde İdrar yolu enfeksiyonlarının boyuna takibi ve tedavileri

Longitudinal Follow-Up of Urinary Tract Infections and Their Treatment in Mice using Bioluminescence Imaging

İdrar yolu enfeksiyonları (UTI) insanlarda en sık görülen bakteriyel enfeksiyonlar arasında yer almaktadır ve rutin olarak ampirik antibiyotiklerle tedavi edilmektedir. Bununla birlikte, artan mikrobiyal direnç nedeniyle, en çok kullanılan antibiyotiklerin etkinliği azaldı. Alternatif tedavi seçenekleri bulmak için, UTI patogenezinin ve UTI duyarlılığını belirleyen mekanizmaların daha iyi anlaşılmasına büyük ihtiyaç vardır. Bunu bir hayvan modelinde araştırmak için, UTI'nin seyrini incelemek için tekrarlanabilir, invaziv olmayan bir test vazgeçilmezdir.
Yıllardır, bakteri yükünün numaralandırması için altın standart, belirli bir numune hacmi için Koloni Şekillendirme Birimlerinin (CFU) belirlenmesi olmuştur. Bu teknik, ölüm sonrası organ homojenasyonları ve seri seyreltmeler gerektirir, veri çıkışını ve tekrarlanabilirliği sınırlar. Alternatif olarak, biyolüminesans görüntüleme (BLI) bakteri yükünü belirlemek için popülerlik kazanıyor. Patojenlerin lüks bir operon ile etiketlenmesi, hassas algılama ve nicelemenin invaziv olmayan bir şekilde sağlanmasına izin verir, böylece boyuna takip sağlar. Şimdiye kadar, UTI araştırmalarında BLI'nin benimsenmesi sınırlı olmaya devam ediyor.
Bu makalede fare idrar yolu enfeksiyon modelinde BLI'nin pratik uygulaması açıklanmaktadır. Burada bakterileri kültleme, intravesik aşılama ve görüntüleme için adım adım bir rehber sağlanmaktadır. CFU ile in vivo korelasyon incelenir ve tedavi edilmemiş enfekte hayvanların bakteri yükünün antibiyotikle tedavi edilen hayvanlarla karşılaştırılmasıyla bir kavram kanıtı sağlanır. Ayrıca, bir in vivo UTI modelinde BLI uygulamasına özgü avantajlar, sınırlamalar ve hususlar tartışılmıştır. BLI'nin UTI araştırma alanında uygulanması, UTI patogenezinin araştırılmasını ve UTI'yi önlemenin ve tedavi etmenin yeni yollarının keşfedilmesini büyük ölçüde kolaylaştıracaktır.

In vivo BLI, aşılama anında inoculumun CFU'su ile ilişkilidir. Vivo BLI'nin algılama sınırını ve inoculumun CFU ile korelasyonunu değerlendirmek için, farelere negatif kontrol olarak farklı UTI89-lux ve PBS konsantrasyonları bulaştı. Aşılamadan önce, enfekte olmayan hayvanlar arka plan lüminesansını belirlemek için tarandı. Sonraki görüntüler aşılamadan hemen sonra elde edildi (Şekil 1A). UTI89-lux'unaşılanmasından son...

Bu makalede, farelerde idrar yolu enfeksiyonuna neden olacak lüks bir operon ile üropatojenik bakterilerin intravesik yönetimi ve daha sonra biyolüminesans görüntüleme kullanılarak bakteri yükünün uzunlamasına in vivo analizi açıklanmaktadır.

Biyolüminesans Görüntüleme Kullanan Farelerde İdrar Yolu Enfeksiyonlarının Boyuna Takibi ve Tedavileri

Urinary tract infections (UTI) rank among the most common bacterial infections in humans and are routinely treated with empirical antibiotics. However, ...

Koloni oluşturan birimlerin numaralandırılması, UTI alanındaki araştırmaların tekrarlanabilirliğini sınırlıyordu. Biyolüminesans görüntüleme mesane fizyolojisi, UTI patogenez ve duyarlılık üzerine vivo UTI araştırmalarında ilerleyecektir. Biyolüminesans görüntüleme, enfeksiyonun evrimi hakkında gerçek zamanlı içgörü ile boyuna takip sağlar.Ayrıca, ihtiyaç duyulan hayvan sayısını büyük ölçüde azaltır. Biyolüminesans görüntüleme, insanlarda sık görülen tekrarlayan veya kronik enfeksiyonlar üzerine araştırmaları kolaylaştırır. Ek olarak, araştırmacılar biyolüminesans görüntüleme kullanarak artan enfeksiyonları veya kana yayılmayı tanımlayabilirler.Kanamycin sülfat ile desteklenmiş LB plakalarında bir aşılama döngüsü ile bakteri gliserol stokunu çizgileyarak ve bir gecede 37 santigrat derecede kültleme yaparak tek koloniler elde edin. Steril 14 mililitrelik polistiren yuvarlak alt tüpü, kanamycin sülfat ile desteklenmiş beş mililitre LB suyu ile çift konumlu snap kapaklarla doldurun. Aşı döngüsü olan tek bir bakteri kolonisi seçin ve bunu LB suyuna ekleyin.Uygun karıştırmayı sağlamak için 10 saniye boyunca girdap. Bir gecede 37 santigrat derecede açık konumda yapıştırı kapağı ile stati

longitudinal-follow-up-urinary-tract-infections-their-treatment-mice

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu video transüretral fare idrar yolu enfeksiyonlarına neden ve enfeksiyonların sonucunda dereceye ölçmek için yöntemler gösterecektir.

Transüretral İndüksiyon Fare İdrar Yolu Enfeksiyonu

Yaşayan hayvanların bakteriyel enfeksiyonlar biyoparlaklık görüntüleme yöntemleri açıklanmıştır. Patojenler, canlı hayvanlarda enfeksiyon optik tüm vücut görüntüleme sağlayan lusiferaz ifade etmek için modifiye edilmiştir. Hayvan modelleri lusiferaz ifade patojenler ile enfekte olan ve hastalık ortaya çıkan ders biyoparlaklık görüntüleme ile gerçek zamanlı olarak görüntülenebilmekte.

Farelerde Görüntü Bakteriyel Enfeksiyonlar Lusiferaz Kullanımı

Bioluminescent Bakteriyel Görüntüleme<em&gt; In Vivo</em

Kaynak: Valentine, M. E., ve diğerleri. Pseudomonas aeruginosa'da Çerçeve İçi Gen Silme Mutantlarının Üretilmesi ve Basit Bir Fare Enfeksiyon Modelinde Virülans Zayıflaması Testi. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, farelerde öldürücü ve zayıflatılmış bakteri suşlarının in vivo davranışını görselleştirmek ve karşılaştırmak için biyolüminesans kullanımını göstermektedir. Biyolüminesans bakteri süspansiyonlarının hazırlanmasını ve bunların farelere intraperitoneal enjeksiyonunu özetlemektedir. Öldürücü...

Biyolüminesans Kullanarak Farede Bakteriyel Enfeksiyon Dinamiklerini İzleme

Kaynak: de Vries, C. R. ve ark., Kronik Pseudomonas aeruginosa Yara Enfeksiyonunun Gecikmiş Aşılama Modeli. J. Vis. Exp. (2020).Bu video, canlı bir fare modelinde bakteriyel enfeksiyon ilerlemesini izlemek için biyolüminesans görüntüleme tekniğini gösteriyor. LuxABCDE raporlayıcı sistemiyle tasarlanmış patojenik bakteriler, enfeksiyon bölgesinde ışık yayarak metabolik olarak aktif bakterilerin görselleştirilmesini sağlar. Araştırmacılar, fareyi zamanla görüntülemekle, enfeksiyon dinamiklerini...

Farelerde Bakteriyel Enfeksiyonların Biyolüminesans Görüntülemesi

Kaynak: Valentine, M. E. ve diğerleri, Pseudomonas aeruginosa'da Çerçeve İçi Gen Silinme Mutantlarının Üretimi ve Basit Fare Enfeksiyon Modelinde Virulans Zayıflamasının Testi. J. Vis. Exp. (2020)Bu video, canlı bir fare modelinde bakteriyel enfeksiyonu izlemek için biyolüminesans tabanlı görüntüleme yaklaşımının kullanıldığını göstermektedir. Ardışık biyolüminesans ve X-ışını görüntüleme, konak genelinde yayılan enfeksiyonun gerçek zamanlı görselleştirmesi ve anatomik lokalizasyonu mümkün...

Biyolüminesans kullanarak fare modelinde bakteriyel enfeksiyonun gerçek zamanlı görüntülemesi

Kaynak: Luyts, N. ve diğerleri. Biyolüminesans görüntüleme ile farelerde idrar yolu enfeksiyonlarının uzunlamasına takibi ve tedavisi. J. Vis. Exp. (2021).Bu video, bakteriyel yapışma, invaziya ve hücre içi çoğaltmanın gerçekleştiği mesane içine enjekte edilen biyolüminesan E. coli kullanılarak fare modelinde idrar yolu enfeksiyonunun indüksiyonu ve izini göstermektedir. Biyolüminesans operondan yayılan ışık, enfeksiyon ilerlemesi sırasında bakteri yükünün gerçek zamanlı göstergesi olarak...

Biyolüminesans kullanarak fare modelinde idrar yolu enfeksiyonunun görselleştirilmesi

Source: Hunt, A. M. A., et al. Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model. J. Vis. Exp.(2017).This video demonstrates the procedure for assessing infection clearance and healing progression in a wounded diabetic mouse using bioluminescent and microscopic images.

Bioluminescence Imaging to Track Bacterial Infection and Wound Healing in a Mouse Model

Bu videoda, farelerde idrar yolu enfeksiyonu modeli oluşturmak için üropatojenik bakterilerin intravezikal uygulama tekniğini açıklıyoruz. Bu model, üropatojenik bakteriyel enfeksiyonun üriner sistem içindeki yayılımını ve İYE duyarlılığını belirleyen mekanizmaları anlamak için kullanılabilir.

İdrar Yolu Enfeksiyonu Modelinin Oluşturulması: İdrar Yolu Enfeksiyonu Modeli Geliştirmek İçin Farede Üropatojenik Bakterilerin Uygulanması İçin Bir Teknik

Çok yöntemi görüntüleme küçük hayvan modellerinde bakteri kolonizasyonu eğitim için değerli bir yaklaşımdır. Bu protokol bioluminescent ile farelerin enfeksiyonu...

4D modelli Görüntüleme<em&gt; Citrobacter rodentium</emFarelerde&gt; Enfeksiyonlar

Farelerin transüretral Kateterizasyon kurulan modeli mesane patolojiler, idrar yolu enfeksiyonu, dahil olmak üzere çalışma sağlar ancak yalnızca dişi içinde gerçekleştirilebilir. Burada anlatılan erkek transüretral korumak yeni bir model araştırma cinsiyetler arasında güçlü klinik ve epidemiyolojik farklarına iaretlenmi bir alanı sağlayacaktır.

İdrar yolu enfeksiyonu küçük bir hayvan modeli: erkek ve dişi farelerin transüretral Kateterizasyon

Öğrenin farelerde biyolüminesans görüntüleme ile idrar yolu enfeksiyonlarının boyuna takibini. Bu yöntem bakteri yükünü gerçek zamanlı izleyerek tekrarlayan enfeksiyonların patogenezini anlamaya yardımcı olur.

Biyolüminesans Görüntüleme Kullanan Farelerde İdrar Yolu Enfeksiyonlarının Boyuna Takibi ve Tedavileri

Daha fazla video keşfet