Name: Mini Liposuction Tekniği ile İnsan Subkutan Yağ Dokusu Örneklemesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: Öğrenin mini liposuction tekniği ile insandan subkutan yağ dokusu örnekleme yöntemini. Bu düşük riskli, maliyet etkin ve neredeyse ağrısız prosedür, metabolik hastalıklar ve adipoz doku fizyolojisi araştırmaları için güvenilir bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarların beyan edecek bir fonu yoktur.

NOT: Stirling Üniversitesi NHS, İnvaziv veya Klinik Araştırma Komitesi, aşağıda açıklanan biyopsi prosedürünü onayladı. Bu prosedürü kullanan tüm araştırma çalışmaları uygun bağımsız etik kurul tarafından onaylanmalıdır. Biyopsi alıcısı, kurumunun gereksinimlerine uygun olarak tarif edilen teknikte resmi eğitimi tamamlamış olmalıdır. Tipik olarak, bu, tarif edilen yağ dokusu biyopsi tekniğinin kurul sertifikalı bir doktor tarafından gösterilmesini ve ardından denetimli uygulamayı gözlemlemeyi içerir. Stajyer, gözetim altında gönüllü denekler üzerinde 10 pratik yağ dokusu biyopsisi gerçekleştirdikten sonra, prosedürün iyi bilinmesini ve uygulanmasını sağlamak için kurul sertifikalı bir doktor tarafından incelenecektir. Kurul onaylı hekim daha sonra bireye imzalı bir muayene formu sağlar.
1. Laboratuvar odası hazırlığı
<ol><li>Laboratuvarın temiz, silinebilir gözeneksiz yüzeylere ve katılımcının sırtüstü yatabileceği temiz, konforlu (tercihen gözeneksiz) bir yatağa sahip uygun şekilde özel bir odaya sahip olduğundan emin olun. Biyopsi prosedürü için gerekli tüm yüzeyleri% 70 etanol sprey ve temiz kağıt havlu kullanarak temizleyin. Gerekirse katılımcıyı desteklemek için temiz yastıklar veya minderler sağlayın.</li>
	<li>Uygun kesici uç imha kutularını ve biyolojik tehlike atık torbalarını, biyopsi yapılan alanın kolayca erişebileceği ve biyopsi alan kişinin kolayca erişebileceği bir yerde tutun.</li>
	<li>Prosedür için gerekli ekipmanı hazırlar ve katılımcı laboratuvara gelmeden önce yeni temizlenmiş genel tıbbi bir arabaya kurar (Şekil 1). Gerekli sarf malzemelerinin tam listesi için Malzeme Tablosu'na bakın.</li>
</ol>2. Katılımcı hazırlığı
<ol><li>Tüm katılımcıların, kurumun bağımsız etik komitesi tarafından istenen protokollere uygun olarak prosedürden geçmeden önce yazılı bilgilendirilmiş onam vermelerini sağlayın. Ek olarak, katılımcılardan prosedürde kullanılan herhangi bir malzemeye (yani nikel, krom, lokal anestezik, iyot, kabuklu deniz ürünleri ve sıvalar) alerjileri olmadığından emin olmak için yazılı bir anket doldurmalarını isteyin.</li>
	<li>Katılımcının kimliğini onaylayın. Katılımcının gerçekleştirilecek prosedürü ve morarma, ağrı ve enfeksiyon dahil olmak üzere potansiyel ikincil etkileri anladığından emin olun (Tablo 1). Daha önce alınmış yazılı bilgilendirilmiş onamlara ek olarak sözlü onay alın.</li>
	<li>Katılımcıya, anestezik ve biyopsi uygulamasının kendisinin nasıl hissedileceğine vurgu yaparak, prosedürün nasıl gerçekleştirileceğini açıklayın. Katılımcının devam etme konusunda rahat olduğundan emin olun. NOT: Lokal subkutan anestezik, kısa süreli bir arı sokmasına benzer şekilde acı hissi yaratacaktır. Birçok katılımcı, anestezik uygulamayı tekniğin en rahatsız edici kısmı olarak bildirmektedir. Anestezi etkili olduktan sonra, katılımcı biyopsi sırasında hafif bir çekme hissinden daha fazlasını hissetmemelidir.</li>
	<li>Katılımcının lokal anesteziye (özellikle lidokain veya benzeri kullanılıyorsa amino-amid türünden), bazı metallere (nikel ve krom) ve kabuklu deniz hayvanlarına (iyot bazlı çözeltiler kullanılıyorsa) alerjisi olmadığından emin olun. Ek olarak, katılımcıların herhangi bir antikoagülan ilaç almadığından emin olun.</li>
	<li>Katılımcıya, gerekirse mesanesini boşaltma ve boşaltma fırsatı verin, prosedürü kesmek zorunda kalmamalarını veya adım 4.1'de aşırı rahatsızlık yaşamamalarını sağlayın.</li>
</ol>3. Biyopsi prosedürü - biyopsi alıcısı için talimatlar
<ol><li>Katılımcı sırtüstü pozisyonda yattıktan sonra, biyopsi bölgesini göbek kemiğine yaklaşık 5-10 cm lateral olarak tanımlayın. NOT: Katılımcı aynı gün içinde birden fazla biyopsi yapacaksa, her biyopsi için göbeğin zıt taraflarındaki biyopsi bölgelerini tanımlayın. Bu, her biyopsi bölgesi arasında maksimum mesafeyi sağlayacaktır.</li>
	<li>Ellerinizi standart tıbbi kılavuzlara göre sabun ve ılık suyla yıkayın4.</li>
	<li>Steril tabakayı temizlenmiş arabaya veya çalışma alanına yerleştirin, sadece tabakanın dış kenarlarına dokunmaya özen gösterin.</li>
	<li>Uygun aseptik tekniği kullanarak steril cerrahi eldivenler giyin. Asistanın, ekipmanın geri kalanını, ekipmana dokunmadan/kirletmeden hazırlanan steril tabakanın üzerine düşecek şekilde açmasını sağlayın. Asistanın, aletleri steril ambalajlarından çıkarırken öğelere dokunmamaya özen gösterdiğinden emin olun.</li>
	<li>Asistana, çalışma yüzeyindeki bazı steril gazlı bezlere (gazlı bezi aşırı doyurmadan) az miktarda iyot bazlı çözelti dağıtmasını söyleyin.</li>
	<li>Steril gazlı bez ve iyot bazlı çözelti kullanarak seçilen biyopsi bölgesinin etrafında yaklaşık 5-10cm2 sterilize edin. Cildin, önerilen biyopsi bölgesinden dışarı doğru hareket eden spiral bir hareketle temizlendiğinden emin olun. Cilt temizleme prosedürünü iki kez tekrarlayın. Taze steril gazlı bezle silerek fazla sıvıyı (örneğin, steril alandan akarak) çıkarın.</li>
	<li>Asistanla birlikte, lokal anestezik şişenin içeriğini (bu protokolde% 2 lidokain) ve bunun son kullanma tarihi içinde olduğunu sözlü olarak onaylayın. Asistana açılan şişeyi baş aşağı tutmasını ve 21 G'lik bir iğne kullanarak 5 mL lokal anesteziyi bir şırıngaya çekmesini söyleyin. İğneyi keskin kutuya atın ve şırınganın hava kabarcıklarından arındırılmış olduğundan emin olun.</li>
	<li>Şırıngaya 26 G'lık bir iğne uygulayın ve hava kabarcıklarını dışarı atın. Karın derisini ve yağ dokusunu hafifçe sıkıştırarak karın duvarından uzaklaştırın. Daha sonra, iğneyi deri altı dokusuna yatay olarak, cildin yüzeyine göre 10 ° 'den daha büyük olmayan bir açıyla yerleştirin.<ol><li>Şırınganın pistonunu 0,5 mL daha geri çekin (iğnenin kan damarında olmadığından emin olmak için). Şırıngada kan görünüyorsa, iğneyi farklı bir açıyla çekin ve tekrar takın.</li>
		<li>Yerleştirme bölgesini uyuşturmak için 2-4 mm çapında bir bleb kaldırın.</li>
		<li>İğneyi deri altı dokusuna ilerletin ve fan şeklinde bir desende ~ 1 mL lidokain uygulayın (Şekil 2), anesteziyi enjekte etmeden önce her seferinde pistonu çekmeye özen gösterin.</li>
		<li>26 G iğneyi çıkarın ve atın, şırıngaya 21 G'lik bir iğne uygulayın, herhangi bir hava kabarcığını dışarı atın ve kalan ~ 4 mL lidokaini fan şeklinde bir desende uygulayın (Şekil 2), anesteziyi enjekte etmeden önce her seferinde pistonu çekmeye özen gösterin.</li>
	</ol></li>
	<li>Lokal anestezinin etkili olması için yaklaşık 5 dakika bekleyin. Biyopsi alanını nazikçe prod etmek için steril bir neşter kullanın i) lokal anestezinin etkili olduğundan emin olun ve ii) anestezi yapılan alanın sınırlarını belirleyin. Gerekirse, bir veya iki dakika daha bekleyin ve yeniden değerlendirin.</li>
	<li>Lokal anestezinin çalıştığından emin olduktan sonra, cildi ve yağ dokusunu hafifçe sıkıştırın (adım 3.8'de olduğu gibi) ve ciltte 1-2 mm'lik küçük bir delinme yapmak için steril bir neşter kullanın. NOT: Bunun sadece 14 G iğnenin girişini kolaylaştıracak kadar büyük olması ve kapatmak için dikiş gerektirmeyecek kadar küçük olması gerekir. Bu noktadan itibaren bir parça steril gazlı bezle kontrol edilebilen bazı kanamaların meydana gelmesi yaygındır.</li>
	<li>İlk önce, 5 veya 10 mL'lik bir şırıngaya 14 G'lik bir iğne uygulayın. Daha sonra, cildi ve yağ dokusunu nazikçe sıkıştırırken, iğneyi delinme yoluyla yavaş yavaş anestezi yapılan bölgede yaklaşık olarak merkezi olarak ve cildin yüzeyine göre 10 ° 'den daha büyük olmayan bir açıyla yağ dokusuna yerleştirin. NOT: Adım 3.11'deki tüm iğne ilerlemesi durumları için, 10°'den büyük olmayan bir şırınga açısı korunmalıdır.<ol><li>Pistonu yaklaşık 2,5 mL işaretine çekerek emme uygulayın. İğneyi hızlı bir şekilde ileri ve geri hareket ettirerek biyopsi yapın ve yağ dokusunun parçalarını dilimleyin. Yaklaşık 30 sn sonra, iğneyi ve şırıngayı 90 ° 'den döndürün ve daha sonra emme ile şırıngaya aspire edilen yağ dokusu parçalarını parçalamak için bu prosedürü tekrarlayın. NOT: Diğer şırınga boyutları kullanılabilir. Araştırmacının, hem şırınga üzerinde iyi bir tutuşa hem de vakumun bakımı için piston geri çekilmesini rahatça sürdürmeye izin veren bir şırınga boyutu seçmesi önemlidir. Vakumu koruyan, iğne kontrolünü iyileştirebilen ve biyopsi alan 5 için algılanan zorluğu azaltabilen kilitleme şırıngaları mevcuttur.</li>
		<li>Adım 3.11.1'in yaklaşık 45-60 s'sinden sonra, iğneyi çıkarın ve şırınga içeriğini bir tartım teknesini kaplayan bir gazlı bez tabakasına boşaltın. Potansiyel kan sıçramasını önlemek için iğnenin lümeninin aşağı baktığından emin olun.</li>
		<li>3.11.1 ve 3.11.2 adımlarını en fazla 3 kez yineleyin. Yukarıdaki prosedürün her tekrarından önce katılımcının devam etmekten memnun olup olmadığını kontrol edin.</li>
		<li>3.11.1 ve 3.11.2 adımlarını uygularken, asistana numuneleri analiz/depolama için işlemesi ve hazırlaması talimatını verin (bkz. bölüm 5).</li>
	</ol></li>
</ol>4. Biyopsi sonrası prosedür
<ol><li>Tatmin edici bir yağ dokusu örneği (yani ~ 200 mg) elde edildikten sonra, delinme yarasının üzerine 1-2 kat steril gazlı bez yerleştirin, ardından bunların üzerine bir buz torbası yerleştirin ve hemostazı indüklemek için yaklaşık 10 dakika boyunca sert basınç uygulayın.</li>
	<li>Hemostaz meydana geldiğinde, iyot bazlı herhangi bir çözeltiyi / kurutulmuş kanı steril gazlı bezle silin ve bölgeye emici ped ile yapışkan bir yara örtüsü uygulayın. Katılımcının kendini iyi hissedip hissetmediğini kontrol edin ve biyopsi sitesi sonrası bakım konusunda sözlü ve yazılı talimatlar verin.<ol><li>Katılımcıların önümüzdeki birkaç gün boyunca muhtemelen biraz morarma sergileyeceğini vurgulayın. Onlara, adım 4.1'deki buz paketi tarafından en aza indirilmesine ve kalıcı etkiler olmadan çözülmesine rağmen, bunun önemli olabileceğini bildirin.</li>
		<li>Katılımcıların, anestezi yıprandıktan sonra herhangi bir rahatsızlık / ağrı hissetmeleri durumunda, paket üzerindeki talimatları izleyerek parasetamol gibi analjezikler almalarını, ancak antikoagülan aktiviteleri olan analjezikleri (örneğin, ibuprofen veya aspirin) almaktan kaçınmalarını tavsiye edin.</li>
		<li>Şişlik, kızarıklık veya biyopsi bölgesinden akıntının enfeksiyon belirtileri olduğunu açıklayın. Bu belirtilerin veya semptomların ortaya çıkması durumunda, katılımcıya acilen bir doktordan veya yerel Kaza ve Acil Durum biriminden tıbbi yardım almasını söyleyin. Katılımcıya, tıbbi tavsiye almaları durumunda, araştırma ekibini de bilgilendirmeleri gerektiğini bildirin. NOT: Araştırma personeli olarak, ne biyopsi alıcısı ne de asistan tıbbi tavsiye veya tedavi sağlayamaz; Bununla birlikte, araştırma ekibinin biyopsi prosedüründen kaynaklanan tüm komplikasyon vakalarının farkında olması ve kaydetmesi önemlidir.</li>
		<li>Katılımcıların, insizyon bölgesi kapanana kadar 48 saat boyunca yüzmeyi veya aşırı yorucu aktiviteyi önlemelerini tavsiye edin.</li>
	</ol></li>
	<li>Kullanılmış kesici uçları ve kontamine olmuş malzemeleri belirlenmiş kesici uçlara ve/veya klinik atık konteynerlerine temizleyin.</li>
	<li>Biyopsi işleminde kullanılan tüm yüzeyleri% 70 etanol sprey ve temiz kağıt havlu kullanarak temizleyin. Tek kullanımlık ve tek kullanımlık olmayan yatak takımlarını sırasıyla bertaraf veya temizlik için uygun klinik torbalara yerleştirin.</li>
</ol>5. Örnek işleme - asistan için talimatlar
<ol><li>Görünür kirleticileri (yani kan, vaskülatür) gidermek için yağ dokusu örneğini durulamak için steril cımbız ve% 0.9 salin kullanın. Ardından, dijital terazileri kullanarak yağ dokusu örneklerini tartın. Dokuyu aşağı akış analizi için uygun boyutta parçalara bölün ve steril cımbız kullanarak uygun depolama tüplerine yerleştirin. Yağ dokusu biyopsilerini içeren tüpleri -190 °C'de sıvı azota batırın ve numuneler -80 °C'de saklanana kadar dondurun. NOT: Asistan, olası numune bozulmasını en aza indirmek için numune işlemeyi mümkün olduğunca çabuk, tipik olarak numune aspirasyonundan sonraki 3 dakika içinde tamamlamalıdır.</li>
</ol>

<ol><li>Beynen, A. C., Katan, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+sampling+and+long-term+storage+of+subcutaneous+adipose-tissue+biopsies+for+determination+of+fatty+acid+composition%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 42 (2), 317-322 (1985).</li>
<li>Moran, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+diabetes+family+history+and+exercise+training+on+the+expression+of+adiponectin+and+leptin+and+their+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Effects of diabetes family history and exercise training on the expression of adiponectin and leptin and their receptors.</a> Metabolism. 60 (2), 206-214 (2011).</li>
<li>Jialal, I., Devaraj, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+adipose+tissue+biology+in+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Hormone+Molecular+Biology+and+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous adipose tissue biology in metabolic syndrome.</a> Hormone Molecular Biology and Clinical Investigation. 33 (1), (2018).</li>
<li>WHO Guidelines on hand hygiene in health care: a summary. World Health Organization. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.who.int/gpsc/5may/tools/who_guidelines-handhygiene_summary.pdf">https://www.who.int/gpsc/5may/tools/who_guidelines-handhygiene_summary.pdf</a> (2009).</li>
<li>Kettwich, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+device+technologies+for+subcutaneous+fat+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">New device technologies for subcutaneous fat biopsy.</a> Amyloid. 19 (2), 66-73 (2012).</li>
<li>Preston, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aseptic+technique%3A+evidence-based+approach+for+patient+safety%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Nursing%22%5BJournal%5D)">Aseptic technique: evidence-based approach for patient safety.</a> British Journal of Nursing. 14 (10), 540-546 (2005).</li>
<li>Handiyani, H., Meily Kurniawidjaja, L., Irawaty, D., Damayanti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effective+needle+stick+injury+prevention+strategies+for+nursing+students+in+the+clinical+settings%3A+a+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Enfermeria+Clinica%22%5BJournal%5D)">The effective needle stick injury prevention strategies for nursing students in the clinical settings: a literature review.</a> Enfermeria Clinica. 28, Suppl 1 167-171 (2018).</li>
<li>Raggio, B. S., Barton, B. M., Kandil, E., Friedlander, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+continued+preoperative+aspirin+use+and+bleeding+complications+in+patients+undergoing+thyroid+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Otolaryngology-Head+%26+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Association of continued preoperative aspirin use and bleeding complications in patients undergoing thyroid surgery.</a> JAMA Otolaryngology-Head & Neck Surgery. 144, 335(2018).</li>
<li>Cartwright, I. J., Pockley, A. G., Galloway, J. H., Greaves, M., Preston, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega-3+polyunsaturated+fatty+acids+on+erythrocyte+membrane+phospholipids%2C+erythrocyte+deformability+and+blood+viscosity+in+healthy+volunteers%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega-3 polyunsaturated fatty acids on erythrocyte membrane phospholipids, erythrocyte deformability and blood viscosity in healthy volunteers.</a> Atherosclerosis. 55 (3), 267-281 (1985).</li>
<li>Hemmrich, K., Denecke, B., Paul, N. E., Hoffmeister, D., Pallua, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+isolation+from+adipose+tissue%3A+an+optimized+procedure+for+high+RNA+yield+and+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Medicine%22%5BJournal%5D)">RNA isolation from adipose tissue: an optimized procedure for high RNA yield and integrity.</a> Laboratory Medicine. 41 (2), 104-106 (2010).</li>
<li>Chachopoulos, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+subcutaneous+abdominal+adipose+tissue+biopsy+via+a+non-diathermy+method%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visual+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">A technique for subcutaneous abdominal adipose tissue biopsy via a non-diathermy method.</a> Journal of Visual Experiments: JoVE. (127), e55593(2017).</li>
<li>Civelek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+regulation+of+human+adipose+microRNA+expression+and+its+consequences+for+metabolic+traits%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic regulation of human adipose microRNA expression and its consequences for metabolic traits.</a> Human Molecular Genetics. 22 (15), 3023-3037 (2013).</li>
<li>Chen, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+influences+adipose+tissue+responses+to+exercise+in+overweight+men%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Feeding influences adipose tissue responses to exercise in overweight men.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 313 (1), 84-93 (2017).</li>
<li>Mendham, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+training+results+in+depot-specific+adaptations+to+adipose+tissue+mitochondrial+function%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Exercise training results in depot-specific adaptations to adipose tissue mitochondrial function.</a> Scientific Reports. 10 (1), 3785(2020).</li>
<li>Carswell, K. A., Lee, M. J., Fried, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+of+isolated+human+adipocytes+and+isolated+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Culture of isolated human adipocytes and isolated adipose tissue.</a> Methods in Molecular Biology. 806, 203-214 (2012).</li>
<li>Arner, P., Andersson, D. P., Backdahl, J., Dahlman, I., Ryden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+gain+and+impaired+glucose+metabolism+in+women+are+predicted+by+inefficient+subcutaneous+fat+cell+lipolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Weight gain and impaired glucose metabolism in women are predicted by inefficient subcutaneous fat cell lipolysis.</a> Cell Metabolism. 28 (1), 45-54 (2018).</li>
<li>Mutter, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+frozen+and+RNALater+solid+tissue+storage+methods+for+use+in+RNA+expression+microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+genomics%22%5BJournal%5D)">Comparison of frozen and RNALater solid tissue storage methods for use in RNA expression microarrays.</a> BMC genomics. 5, 88(2004).</li>
<li>Coleman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+fat+grafting%3A+more+than+a+permanent+filler%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Structural fat grafting: more than a permanent filler.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 118, Suppl 3 108-120 (2018).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Tarif edilen protokol ve ilişkili video, karın bölgesinden deri altı yağ dokusu örnekleri elde etmek için mini liposuction tekniğine adım adım genel bir bakış sunmaktadır. Bu araştırma grubu, katılımcılarda herhangi bir yan etkisi olmadan 19 ay boyunca toplam 124 biyopsi gerçekleştirmiştir. Prosedür güvenlidir ve açıklanan güvenlik önlemlerine uyulması koşuluyla katılımcılar veya biyopsi ekibi için minimum risk ile ilişkilidir. Aseptik teknik (steril ekipmanın kirletilmeden açılması ve dağıtılması, steril eldivenlerin uy...

Yağ dokusu, insanların metabolik fonksiyonları hakkında yararlı bilgiler sağlayabilir. İnsan deri altı yağ dokusuna kolayca erişilebilir. Subkutan yağ dokusu ekstraksiyonu için bir teknik ilk olarak 80'li yılların ortalarında tanımlanmıştır1; O zamandan beri, verimi artırmak ve çalışma katılımcısının tolere edilebilirliğini artırmak için ilk protokol geliştirilmiştir. Subkutan yağ dokusu çok sayıda bölgeden, en sık glutei1 ve abdominal bölge2'den elde edilebilir. İkincisinden alınan örnekler, metabolik hastalıkla ilgili bağlamlarda daha değerli bilgiler sağladıkları için daha arzu edilebilir3.
Mini liposuction yöntemi kullanılarak deri altı yağ dokusu biyopsisi, klinik olmayan bir ortamda güvenli ve verimli bir şekilde gerçekleştirilebilir. Kurul sertifikalı bir doktor tarafından uygun eğitimi takiben ve sıkı aseptik teknik kullanarak, araştırmacılar bu biyopsileri hem katılımcı hem de araştırmacılar için minimum riskle rutin olarak gerçekleştirebilirler. Biyopsi ekibi en az 2 kişiden oluşmalıdır: biyopsiyi yapacak kişi ve bir asistan.
Biyopsiden sorumlu kişi, katılımcının kimliğini doğrulamak, katılımcının prosedürden güvenli bir şekilde geçebileceğini kontrol etmek (aşağıdaki protokol adımları 2.1-2.4'e bakınız), katılımcının prosedür boyunca rahat etmesini sağlamak, prosedür boyunca steril tekniğin korunmasını sağlamak, prosedürü uygulamak ve katılımcıya sözlü ve yazılı bakım sonrası prosedürler sağlamakla görevlidir. Asistanın rolü, daha sonra analiz ve / veya depolama için elde edilen yağ dokusunu işlemek ve hızlı bir şekilde işlemektir. Asistan ayrıca "steril olmayan eller" olarak ve katılımcının prosedür boyunca rahat etmesini sağlayarak yardımcı olur. Bu video ve makalenin amacı, karın bölgesinden deri altı yağ dokusunu güvenli bir şekilde elde etmek için adım adım biyopsi prosedürünü tanımlamaktır.

<table><tbody><tr><td>Ürün: 14 G iğne 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm</td><td>B Braun</td><td>4665473</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: 21 G iğne 21 G x 1 1/2" 0,8 mm x 38 mm</td><td>Terumo</td><td>AN*2138R1</td><td>Biyopsi başına: 2</td></tr><tr><td>Ürün: 26 G&nbsp; iğne 26 G x 1/2" mikrolans iğne 0,45 mm x 13 mm</td><td>BD</td><td>303800</td><td>Biyopsi başına: 2</td></tr><tr><td>Ürün: 5 mL şırınga 5 mL luer</td><td>DB plastipak</td><td>302187</td><td>Biyopsi başına: 2</td></tr><tr><td>Ürün: Yapıştırıcı yara örtüsü Opsite Ameliyat Sonrası Pansuman 9.5 x 8.5</td><td>Smith & Yeğen</td><td>6600709</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: Tek kullanımlık steril neşter Tek kullanımlık Neşter Steril Bıçak no. 10</td><td>Swann Morton</td><td>/0501</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: Buz torbası BlueDot Yeniden Kullanılabilir Sıcak/Soğuk Paket 26,5 cm x 13,0 cm</td><td>NuCare</td><td>F711</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: İyot bazlı antiseptik Videne antiseptik solüsyon</td><td>Ecolab Videne</td><td>3030440</td><td>Başına biyopsi: q.s</td></tr><tr><td>Ürün: Lidokain %2 w / o epinefrin Lidokain% 2 enjeksiyon 5 mL</td><td>B Braun</td><td>3558553</td><td>Biyopsi başına: 5 mL</td></tr><tr><td>Ürün: Steril olmayan eldiven Starguard hassas pudrasız nitril eldiven</td><td>Starguard</td><td>SG-N-S</td><td>Biyopsi başına: çift</td></tr><tr><td>Madde: Sodyum klorür% 0.9 Sodyum kride% 0.9 w / v intravenöz infüzyon BP</td><td>BBraun</td><td>S8004-5384</td><td>Biyopsi başına: Öğr.</td></tr><tr><td>Madde: Stabilizasyon çözeltisi * RNAlater Stabilizasyon Çözeltisi</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>AM7020</td><td>Biyopsi başına: q.s</td></tr><tr><td>Ürün: Steril forseps Steril forseps</td><td>Rocialle</td><td>RML109-006</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: Steril gazlı bez çubukları Dokumasız swablar steril 7,5 x 7,5 cm</td><td>Prestige</td><td>1860</td><td>Biyopsi başına: 5</td></tr><tr><td>Ürün: Steril eldiven Prestige yumuşak vinil steril pudrasız tıbbi eldivenler</td><td>Prestige</td><td>S: P4301 M:P3302 L:P3301</td><td>Biyopsi başına: çift</td></tr><tr><td>Madde: Steril Mikrosantrifüj tüpleri 1.5 mL Steril Mikrosantrifüj Tüpleri</td><td>StarLab</td><td>I1415-5510</td><td>Biyopsi başına: q.s</td></tr><tr><td>Ürün: Steril çarşaf Kağıt düz beyaz 90 x 90 cm</td><td>Rocialle</td><td>RML 126-216</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr><tr><td>Ürün: Tartı teknesi Elmas şekli tartı tekneleri</td><td>Heathrow Scientific</td><td>HS1427C</td><td>Biyopsi başına: 1</td></tr> <tr><td>* isteğe bağlı malzemeleri</td><td></td><td></td><td></td> belirtir</tr></tbody></table>

mini liposuction tekniği ile İnsan subkutan yağ dokusu Örneklemesi

Human Subcutaneous Adipose Tissue Sampling Using a Mini-Liposuction Technique

Yağ dokusu üzerine yapılan çalışmalar metabolik ve diğer durumların anlaşılmasında yararlıdır. İnsan deri altı yağ dokusuna erişilebilir. Uygun eğitim ve aseptik tekniğe sıkı sıkıya bağlılık ile, deri altı yağ örnekleri araştırmacılar tarafından klinik olmayan bir ortamda güvenli ve verimli bir şekilde elde edilebilir. Lokal anestezik lateral göbek içine verildikten sonra, 5 veya 10 mL'lik bir şırıngaya tutturulmuş 14 G'lik bir iğne deriden deri altı dokusuna yerleştirilir. Emme altında, şırınga yağ dokusunun parçalarını izole etmek için pistonlu, dilimleme hareketinde hareket ettirilir. Pistonun geri çekilmesi, yağ dokusu parçalarının iğneden şırıngaya aspire edilmesini sağlamak için yeterlidir. Tek bir biyopsi yaklaşık 200 mg doku toplayabilir. Bu biyopsi tekniği hem katılımcılar hem de araştırma personeli için çok güvenlidir. Biyopsiyi takiben, katılımcılar çoğu günlük aktiviteye devam edebilirler, ancak aşırı kanamayı önlemek için 48 saat boyunca yüzmeden ve aşırı yorucu aktivitelerden kaçınmaları gerekir. Katılımcılar tek bir gün içinde güvenli bir şekilde 2 biyopsi alabilirler, bu da tekniğin akut müdahale öncesi ve sonrası çalışmalarda uygulanabileceği anlamına gelir.

Tarif edilen yağ dokusu biyopsisi prosedürü, araştırmacıların insan gönüllülerden deri altı yağ dokusu örnekleri almaları için etkili ve düşük riskli bir tekniktir. Tanımlanan prosedürü kullanarak 11 sağlıklı, normal kilolu kadında (yaş, 27.4 ± 3.3 yıl; vücut kitle indeksi (VKİ), 22.6 ± 1.5 kg.m2) tanımlanan prosedürü kullanarak 39 adet deri altı yağ dokusu biyopsisi gerçekleştirdik. Tüm katılımcılar 8-12 saatlik oruç dönemini takiben 07:00-10:00 saatleri arasında laboratuvara katılmışlardır. Bu yağ dokusu biy...

Makale ve ilgili video, umbilikusu çevreleyen bölgelerden deri altı yağ dokusu örnekleri elde etmek için perkütan bir biyopsi tekniğini göstermektedir. Bu yöntem, yağ dokusundaki bir dizi parametreyi (örneğin, gen veya protein ekspresyonu, enzim aktivitesi, lipit içeriği) araştırmak için düşük riskli ve etkili bir yoldur.

Mini Liposuction Tekniği ile İnsan Subkutan Yağ Dokusu Örneklemesi

Studies on adipose tissue are useful in understanding metabolic and other conditions. Human subcutaneous adipose tissue is accessible. With appropriate ...

Bu teknik, çalışma öncesi ve sonrası tasarımını uygulayan veya belirli bir popülasyonu karakterize etmek isteyen ve aşırı miktarda vücut sonrası doku gerektirmeyen herhangi bir çalışma için özellikle uygundur. Başlıca avantajları, tekniğin nispeten uygun maliyetli ve neredeyse ağrısız olmasıdır. Aynı gün aynı katılımcıya birden fazla biyopsi yapabilirsiniz.Bu teknik, yağ dokusu fizyolojisinin, özellikle de hastalık ve metabolik fonksiyonun anlaşılmasına yardımcı olabilir. Başlamak için, laboratuvarın temiz silinebilir, gözeneksiz yüzeylere ve katılımcının sırtüstü pozisyonda uzanabileceği temiz, konforlu bir yatağa sahip uygun şekilde özel bir odaya sahip olduğundan emin olun. Daha sonra% 70 etanol sprey ve temiz kağıt havlular kullanarak biyopsi prosedürü için gerekli tüm yüzeyleri temizleyin.Daha sonra uygun keskinlikler tek kullanımlık kutular ve biyolojik tehlike bel torbaları, biyopsi yapılacak alanın ve biyopsi alan kişinin kolayca ulaşabileceği bir yere yerleştirin. Katılımcı laboratuvara gelmeden önce, prosedür için gerekli ekipmanı yeni temizlenmiş bir genel tıbbi arabaya kurun. Yazılı bilgilendirilmiş onam alındıktan sonra, katılımcıdan bu prosedürde kullanılan herhangi bir materyale alerjisi olmadığından emin olmak için yazılı bir anket doldurmasını isteyin.Katılımcının kimliğini sözlü olarak doğruladıktan sonra, katılımcının gerçekleştirilecek prosedürü ve morarma, ağrı ve enfeksiyon gibi potansiyel ikincil yan etkileri anladığından emin olun. Yazılı bilgilendirilmiş onamın yanı sıra katılımcıdan sözlü onam da alınır. Daha sonra, anestezik ve biyopsi uygulamasının nasıl hissedilebileceğini vurgulayarak katılımcıya prosedürü açıklayın.Ayrıca, katılımcının devam etme konusunda rahat olduğundan emin olun. Yine, katılımcının lokal anesteziye, bazı metallere ve kabuklu deniz hayvanlarına alerjisi olmadığından ve katılımcının herhangi bir antikoagülan ilaç almadığından emin olun. Katılımcı sırtüstü pozisyonda yattıktan sonra, biyopsi bölgesini göbek kemiğine yaklaşık beş ila 10 santimetre yanal olarak tanımlayın.Daha sonra, standart tıbbi kılavuzlara göre ellerinizi sabun ve ılık suyla yıkayın. Ve temiz arabaya veya çalışma alanına steril bir tabaka yerleştirin ve tabakanın sadece dış kenarlarına dokunmaya özen gösterin. Uygun aseptik tekniği kullanarak steril cerrahi eldivenler giyin.Ardından, asistanın ekipmanın geri kalanını, herhangi bir dokunma veya kirlenme olmadan hazırlanan steril tabakaya düşecek şekilde açmasını sağlayın. Steril ambalajlarından çıkarırken asistanın öğelere dokunmadığından emin olun. Daha sonra, asistana bazı steril gazlı bezler üzerine az miktarda iyot bazlı çözelti dağıtmasını söyleyin.Daha sonra cildi önerilen biyopsi bölgesinden dışarı doğru hareket eden spiral bir hareketle dezenfekte edin. Varsa taze steril gazlı bezle silerek fazla sıvıyı çıkarın. Lokal anestezik şişenin içeriğini ve son kullanma tarihini asistanla sözlü olarak onaylayın.Ardından asistana açık şişeyi baş aşağı tutmasını söyleyin. Ve 21 gauge iğne kullanarak beş mililitre lokal anesteziyi bir şırıngaya çekin. İğneyi keskin bir dönüşe atın ve şırınganın hava kabarcıklarından arındırılmış olduğundan emin olun.Ardından, şırıngaya 26 gauge iğne uygulayın ve hava kabarcıklarını dışarı atın. Daha sonra karın derisini ve yağ dokusunu karın duvarından uzaklaştırarak hafifçe sıkıştırın ve iğneyi cildin yüzeyine göre 10 dereceden daha büyük olmayan bir açıyla deri altı dokusuna yatay olarak yerleştirin. Ardından, şırınganın pistonunu ve ilave 0,5 mililitreyi geri çekin.Şırıngada kan belirirse, iğneyi farklı bir açıyla çekin ve yeniden yerleştirin, ardından yerleştirme alanını anestezik hale getirmek için iki ila dört milimetre çapında bir bleb kaldırın. İğneyi deri altı dokusuna ilerletin ve fan şeklinde bir desende bir mililitre lidokain uygulayın. 26 gauge iğneyi çıkarın ve atın.Daha sonra şırıngaya 21 gauge iğne uygulayın ve kalan dört mililitre lidokaini fan şeklinde bir desende uygulayın. Steril bir neşter kullanarak beş dakika sonra, lokal anestezinin etkili olduğundan emin olmak ve anestezi yapılan alanın sınırlarını belirlemek için biyopsi alanını nazikçe teşvik edin. Sonra bir veya iki dakika daha bekleyin ve yeniden değerlendirin.Anestezinin çalıştığından emin olduktan sonra, cildi ve yağ dokusunu hafifçe sıkıştırın ve ciltte küçük bir ila iki milimetre delinme yapın. Ardından, beş veya 10 mililitrelik bir şırıngaya 14 gauge iğne uygulayın. Daha sonra cildi ve yağ dokusunu nazikçe sıkıştırırken, iğneyi delinme yoluyla yağ dokusuna, anestezi yapılan bölgede yaklaşık olarak merkezi olarak, cildin yüzeyine göre 10 dereceden daha büyük olmayan bir açıyla yavaşça yerleştirin.Pistonu yaklaşık 2,5 mililitre işaretine çekerek emme uygulayın. Daha sonra yağ dokusunun parçalarını dilimlemek için iğneyi hızlı, geri ve ileri doğru hareket ettirerek biyopsiyi toplayın. 30 saniye sonra, iğneyi ve şırıngayı 90 derece döndürün ve daha sonra emme ile şırıngaya aspire edilen yağ dokusu parçalarını parçalamak için bu prosedürü tekrarlayın.Yaklaşık bir dakika sonra, iğneyi çıkarın ve şırınga içeriğini, potansiyel kan sıçramasını önlemek için iğnenin lümeninin aşağı bakmasını sağlayan bir gazlı bez tabakasına boşaltın. Biyopsi toplama prosedürünü gösterildiği gibi en fazla üç kez tekrarlayın ve prosedürü her seferinde tekrarlamadan önce katılımcının devam etmekten memnun olup olmadığını kontrol edin. Ek numuneleri toplarken, asistana daha önce toplanan numuneleri analiz veya depolama için işlemesi ve hazırlaması talimatını verin.Tatmin edici örneklerin toplanması üzerine, delinme yarasının üzerine bir ila iki kat steril gazlı bez yerleştirin. Daha sonra bir buz torbası yerleştirin ve homeostazı indüklemek için yaklaşık 10 dakika boyunca sıkıca basınç uygulayın. Homeostaz meydana geldikten sonra, iyot bazlı herhangi bir çözeltiyi veya steril gazlı bezle kurutulmuş kanı silin, bölgeye emici bir ped ile yapışkan bir yara örtüsü uygulayın.Katılımcının kendini iyi hissettiğini kontrol ettikten sonra, biyopsi sitesi sonrası bakım konusunda sözlü ve yazılı talimatlar vererek, katılımcıların önümüzdeki birkaç gün boyunca muhtemelen bazı morarmalar sergileyeceğini vurgulayarak. Kullanılmış kesici maddeleri ve kontamine olmuş malzemeleri belirlenmiş kesici uçlara veya klinik atık kaplarına temizleyin, ardından biyopsi prosedüründe kullanılan tüm yüzeyleri% 70 etanol kullanarak temizleyin ve tek kullanımlık ve tek kullanımlık olmayan yatak parçalarını uygun klinik torbalara veya sırasıyla bertaraf veya temizliğe koyun. Bu çalışmada normal kilolu 11 sağlıklı kadına 39 deri altı yağ dokusu biyopsisi yapıldı.Bu prosedür kullanılarak ortalama 192 miligram numune elde edildi. Göbek kemiğine çok yakın bir biyopsi bölgesi seçmek, gereksiz yere geniş morarmalara yol açabilir. Yağ dokusu biyopsilerini takiben katılımcıların yaşadığı komplikasyonların bir listesi burada özetlenmiştir.İğnenin daha derin kas tabakasına nüfuz etmesini veya cildin diğer tarafından delinmesini önlemek için cildin her zaman sıkıştığından emin olun. Uygulama, eğitimin gerçek katılımcılar üzerinde denemeden önce eğitimli bir doktor tarafından gerçekleştirilmesini mükemmel hale getirir. Yağ dokusunu parçalamak için iğneyi yerleştirirken, biyopsi yapan kişinin numuneyi parçalayacak kadar emin olduğundan emin olun.

human-subcutaneous-adipose-tissue-sampling-using-mini-liposuction

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Nedeniyle obezite ve diğer yandaş arasındaki şiddetli ve negatif bağlantı, rol adipoz araştırma hastalığında oynadığı ve genel sağlık garantilidir. Biz izolasyon ve yerinde kullanarak adipoz çalışması için izin yağ depolarında eksizyonu ve in vitro yöntemler bir protokol mevcut.

Yerelleştirme, Kimlik ve Eksizyon Kemirgen Yağ depolarının

Gen ekspresyonlarını ve kollajenolitik aktivitelerini değerlendirmek için stromal vasküler fraksiyonu (SVF) fare inguinal (subkütan) ve perigonadal (viseral) yağ dokusu depolarından izole etmek için gerekli teknikleri sunuyoruz. Bu yöntem, immünomanyetik hücre ayrımı kullanılarak Sca1yüksek yağ kaynaklı kök hücrelerin (ASC'ler) zenginleştirilmesini içerir.

Yağ Deposu özgü SCA1 ve İmmunomanyetik Ayırma<sup&gt; yüksek</sup&gt; Yağ türetilmiş Kök Hücreler (TSK)

Lokal anestezi altında yapılan bir sigara diyatermi yöntemiyle bir karın yağ doku biyopsisi standart. Üç kasa 115 işlemleri (%2,61) dışında kanama aşırı sonrası işlem oluştu. Biz bir sigara diyatermi yöntemiyle bir karın yağ dokuları cerrahi biyopsi güvenle sağlıklı erkek için uygulanması sonucuna.

Bir teknik subkutan karın yağ doku biyopsisi diyatermi sigara yöntemi ile için

Bu kağıt amacı farklı beyaz yağ dokuları fareler toplamak, yağ örnekleri işlemek ve RNA ayıklamak için bir adım adım yordam sunmaktır.

Fare yağ dokusu toplama ve işleme RNA analizi için

Yağ dokusu vasküler ataları gelen beyaz ve bej adiposit farklılaşma obezite metabolik iyileştirme için potansiyel taşımaktadır. CD34 + CD31 + insan yağı endotel hücre izolasyon ve bir sonraki vitro genişleme ve farklılaşma beyaz ve bej adiposit içine iletişim kurallarını açıklar. Birkaç aşağı akım uygulamaları ele alınmıştır.

Yalıtım, genişleme ve Adipojenik indüksiyon CD34 + CD31 + insan Omental ve deri altı yağ dokusu endotel hücrelerden

Burada, kapalı bir sistem cihazı kullanarak insan yağ dokusu enzimsiz mikro-parçalanma sıyoruz. Bu yeni yöntem, in vivo transplantasyon, in vitro kültür ve daha fazla hücre izolasyonu ve karakterizasyonu için uygun yağ dokusunun milimetre altı kümelerinin elde edilmesine olanak sağlar.

Hücre Fenotimi ve Sekretom Karakterizasyonu için İnsan Yağ Dokusu Mikro-parçalanma

Mevcut protokol, literatüre kıyasla zaman kazanımı ile muazzam bir hücresel verim ile sonuçlanan ADSC izolasyonu için geliştirilmiş bir metodolojiyi açıklamaktadır. Bu çalışma aynı zamanda uzun süreli kriyoprezervasyondan sonra nispeten çok sayıda canlı hücre elde etmek için basit bir yöntem sunmaktadır.

Uzun Süreli Kriyoprezervasyonda Yağ Dokusundan Mezenkimal Kök Hücre Elde Etme Tekniği ve Stromal Vasküler Fraksiyon Karakterizasyonu

Burada, kemirgen veya insan yağ dokusundan izole edilen mikrovasküler fragmanların işlevsel, vaskülarize bej yağ dokusunun mühendisliğine basit bir yaklaşım olarak kullanımını özetleyen ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

Mikrovasküler Fragmanlardan Vaskülarize Termojenik Yağ Dokusunun Üç Boyutlu Kültürü

Burada, otolog yağ dokusunu farklı fizikokimyasal özelliklere ve fonksiyonlara sahip çeşitli yağ bileşeni maddelere dönüştürebilen bir protokol sunuyoruz.

Yağları Özel Bileşenlere Dönüştürmek için Yenilikçi Yağ Dokusu Fraksiyonasyonu

Bu video raporunda, aktive edilmiş ve depresif koşullar altında farelerde interskapular kahverengi yağ dokusu için Cerenkov Lüminesans Görüntüleme (CLI) uygulamasını gösteriyoruz.

Interskapular kahverengi adipoz dokuda arasında Çerenkov Lüminesans Görüntüleme

Öğrenin mini liposuction tekniği ile insandan subkutan yağ dokusu örnekleme yöntemini. Bu düşük riskli, maliyet etkin ve neredeyse ağrısız prosedür, metabolik hastalıklar ve adipoz doku fizyolojisi araştırmaları için güvenilir bir araçtır.

Mini Liposuction Tekniği ile İnsan Subkutan Yağ Dokusu Örneklemesi

Daha fazla video keşfet