Dejeneratif Retina Hastalıkları için İnsan Dışı Primat Modelinde Retina Pigment Epitel Transplantasyonu

Retina pigment epitel greft nakli sırasında foveal travma görme sonuçlarının kötü çıkmasına neden olabilir. Önerilen bu yöntem, geleneksel tekniklerle karşılaştırıldığında foveal gözyaşı olasılığını azaltabilir. Önerilen yöntem, subretinal yapışıklıkların salınması, retina katmanlarının daha iyi görselleştirilmesi ve bleb oluşumu sırasında teğetsel kesme kuvvetleri de dahil olmak üzere foveal travmaya katkıda bulunan birden fazla faktörü ele alınmaktadır.

İntravitreal plazminojen ön işlem, mikroskop entegre OCT güdümlü retina bleb oluşumu ve çift delikli kanül kullanan perflorokarbon sıvı vitreus tamponatı içeren bu teknik, daha nazik bir işlemle foveal travma olasılığını üretir. Prosedürü gösterenler, kıdemli bir araştırma görevlisi olan Dr. Zenping Liu ve her ikisi de bir laboratuvardan araştırma asistanı olan Bay Daniel Sou Lin Wong olacak. Kıdemli danışman Profesör Gopal Lingam da operasyon prosedürlerini gösterecek.

Başlamak için, 360 derece konjonktival peritomi için limbus yakınındaki konjonktivayı yakmak için Vannas makasını kullanın ve peritomiyi büyütmek için künt bir diseksiyon gerçekleştirin. Sklera'da saat sekizde sağ gözünde veya sol gözde saat dörtte üç milimetrelik bir kesi yapmak için 25 kalibrelik bir mikro vitreoretinal bıçak kullanın. 7-0 Vicryl dikiş kullanarak 25 gauge özel yan bağlantı noktası infüzyon kanül ve dikiş takın.

İntravitreal yeri doğruladıktan sonra, dengeli tuz çözeltisi infüzyonunu başlatın ve sistemi 20 mililitre cıvanın göz içi basıncını koruyacak şekilde ayarlayın. Sklerayı sağ gözde saat ikide veya sol gözde saat 10'da inzivaya çekmek için 25 kalibrelik düz başlı trokar kullanın. Düzbaş trokara içine 25 kalibre avize ışığı yerleştirin ve ışığı yapışkan bantla sabitleyin.

Işık kaynağını yaklaşık %60'a ayarlayın Sağ göz için saat 10'da veya sol göz için saat ikide gösterildiği gibi başka bir sklerotomi yapın. Düğümleri takmadan sklerotomi etrafına U şeklinde bir Vicryl 7-0 dikişi yerleştirin. Vitrektomi trokarını sklerotomiden geçirin.

Giriş portu çevresinde vitrektomiyi gerçekleştirin, ardından dakikada maksimum 5.000 kesik ve 400 milimetre cıvada maksimum aspirasyon ile kısa bir çekirdek vitrektomisi gerçekleştirin. Daha iyi vitreus görselleştirme için 20 ila 50 mikrolitre triamsinolon enjekte edin. Arka vitreus bir kopuşa neden olmak için vitreus gövdesini retinadan ayırın.

Arka vitreus müfrezesinin yumuşak indüksiyonunu sağlamak için vitrektörü optik diskin üzerine yerleştirin. Vitrekörü herhangi bir kesme olmadan sadece en fazla 400 milimetre cıvada aspirasyonda tutun. Gerekirse, dekupsifikasyonu kolaylaştırmak için vitreus korteksini yırtmak için 25 gösterge göz içi forseps kullanın.

Arka hyaloid zarı kesici ile açın ve kopuk vitreus eteğini vitreus tabanına kadar çıkarın. Retina yüzeyinde kalan triamsinolonları aspire edin. Arka direği ön ve orta periferik retinaya kadar örtmek için bir ila iki mililitre perflorokarbon sıvı enjekte edin.

Subretinal enjeksiyonlu bir canül ile göze girin. Subretinal enjeksiyon için 250 mikroliter şırıngaya bağlı 25'e 41 gauge özelleştirilmiş çift delikli subretinal enjeksiyon cannula veya 25'e 38 ölçer alt enjeksiyon cannula kullanın. Göz içi basıncını sıfırdan dört milimetreye kadar cıvaya ayarlayın.

Lokalize retina dekolmanını indük etmek için BSS'nin subretinal enjeksiyonu hafifçe gerçekleştirilir. Bleb foveayı geçtikten sonra BSS enjekte etmeyi bırakın. Ayrı bir yönden ikinci bir bleb oluşturun.

Foveayı tamamen ayırmak için her iki lekeyi de birleştirin. Bleb oluşumunu görselleştirmek için intraoperatif optik tutarlılık tomografi işlevini etkinleştirin, fovea'da bir görüntü elde etmek için çizgi ve küp taramalarının yüksek tanımlı modda olmasını sağlayın. Retinanın kesisini bir çift dikey 25 gauge vitreoretinal makasla 1,5 milimetreye büyüterek transplantasyon için alt alana erişime izin verin.

Göz içi basıncını 50 milimetre cıvaya ayarlayın. Perflorokarbon sıvısını çıkarmak için fırçalanmış bir silikon uçlu kanonül kullanın. Sklerotomiyi uzatmak için 1,4 milimetrelik bir kesi bıçağı kullanın.

20 ölçer genişletilebilir bir döngü cihazı girin ve kazıyarak submaküler konak retina pigment epitelini çıkarın. Atıcı cihazının ucunu sklerotomiden geçirin ve 20 milimetrelik cıva göz içi basıncında vitreus boşluğundan geçirin. Hücre taşıyıcı tarafı Brooks membran ve ksinograft fotoreceptörlere bakacak şekilde retina yüzeyinden oluşturulan retinotomi kenarı aracılığıyla implantı subretinal boşluğa doğru enjekte edin.

İntraoperatif optik koherens tomografi fonksiyonunu etkinleştirerek implantın yerini görselleştirin. İmplantın alt enjeksiyonlu kanonla veya 25 ölçer kavisli göz içi makasıyla implantın sağlam bir aşırı retina ile alt alandaki Brooks zarı üzerinde düz bir şekilde dinlendiğini ve oluşturulan retinotomiden uzakta ve retinotomi bölgesine engel olmadığını sağlamak için implant pozisyonunu ayarlayın. Sıvı-hava değişimi için fırçalanmış bir silikon uç kanülü kullanın ve retina implantın üzerine yeniden takılana kadar bleb retina dekolmanı ve retinotomi kenar apsasyonundan subretinal sıvıyı hafifçe epire edin.

Daha sonra ameliyatı bitirmek için, önceden yerleştirilmiş 7-0 Vicryl dikişini kullanarak çalışma limanı sklerotomisini kapatın. Saat sekiz sklerotomisinde iki miligram intravitreal koruyucu içermeyen triamsinolon başına 0.05 mililitre ver. Avize ve infüzyon kanüllerini çıkarın.

Bu sklerotomileri Vicryl dikişleriyle kapatın. Göz içi basıncının kabul edilebilir aralıkta olduğundan emin olmak için gözü palpe edin. Gerekirse filtrelenmiş havayı veya BSS'i 30 kalibrelik bir iğne ile enjekte edin.

Sol göz submaküler retina pigment epitel greft naklinin çeşitli görüntüleme yöntemleri üzerinde in vivo görüntülemesi üç aya kadar yapıldı. Fundus fotoğrafçılığı, foveadaki nakledilen greftin zamanla göç etmediğini gösteriyordu. Fundus otomatik floresan görüntüleme retina pigment epitel grefti ile örtüşen hiper otomatik floresan minimum değişiklik gösterdi.

Erken ve geç faz fundus floresan anjiyografisinde grefti çevreleyen herhangi bir sızıntı görülmedi. Maküler optik tutarlılık tomografi görüntüleri, zaman ilerledikçe greft üzerindeki dış retina katmanlarının korunmasını göstererek retina pigment epitel hücrelerinin işlevselliğini düşündürdü. HE lekesi, mikro yırtıklara dair hiçbir kanıt olmadan bozulmamış retina katmanları gösterdi.

İntraoperatif optik koherens tomografisi, foveal kopma sırasında bleb boyutlarının ve potansiyel foveal yırtığın intraoperatif olarak görselleştirilmesini sağlar. Gözyaşının varlığı bleb oluşumuna müdahale edebilir. Doğru bleb oluşumunun başarısı gözyaşının olmaması ile endikedir.

Retinanın fonksiyonel değerlendirmesi için retina pigment epitel ksinografted gözün tam alan elektroretinogram değerlendirmeleri yapıldı. Elektroretinogram dalga formlarında önemli bozulma olmaması, hem çubuk hem de koni fotoreceptörlerinin işlevinin ksinograftlarla korunduğunu göstermektedir. Lokalize retina bleb'in oluşturulması sırasında, jet hızındaki herhangi bir ani değişiklik foveal yırtıklara yol açabileceğinden çok nazikçe yapın.

Bu adımı yavaşça gerçekleştirmek, foveal yaralanmayı azaltmanın anahtarıdır. Fundus oto-floresan, floresan anjiyografi ve optik koherens tomografisi ile elektrofizyoloji çalışmaları dahil olmak üzere multimodal görüntüleme, greftin hayatta kalabileceği ve onu etkileyen faktörler hakkında daha fazla fikir verebilir.