Vektörlü Gen Teslimatı için İnsan Olmayan Bir Primatta Stensen Kanalı aracılığıyla Retrograd Parotid Bezi İnfüzyonu

Bu protokol önemlidir, çünkü retrograd tükürük bezi infüzyonu prosedürünü ayrıntılı olarak gösterir. Prosedür vektörlü immünoprophylaxis veya gen tedavisi gibi çeşitli tıbbi nedenlerle kullanılabilir. Bu tekniğin öğrenilir ve çoğaltılır.

Yazarlar, ağız cerrahı olmamalarına veya böyle bir geçmişe sahip olmamalarına rağmen bu prosedürü birçok kez başarıyla gerçekleştirmeyi başarmışlardır. Anesteziden sonra büyütme için diş loupes kullanın ve parotis papillayı veya üst ikinci azı dişine bitişik arka yanakta Stenson kanalının açılmasını tanımlayın. Konik bir dilatörün noktasını papillanın ortasına veya açıklığına yerleştirerek parotis papillayı hafifçe genişletin ve dilatörü yaklaşık 20 ila 30 saniye ileri geri döndürün.

Daha sonra, cımbız kullanarak, şırınna içeren infüzyona bağlı polietilen tüpün işaretli ucunu distal uçtan yaklaşık 0,5 santimetre tutun ve tüpün ucunu genişlemiş papillaya hafifçe yerleştirin. Tüplerin kaymasına yardımcı olmak için tüpü küçük dönen hareketlerle hafifçe ilerletin, ardından cımbızın önceki kavramaya 0,5 santimetre proksimal olarak yeniden doğrulanması. İki santimetre işareti parotis papillaya ulaşana kadar bu işlemi tekrarlayın.

Daha sonra, parotis papillayı kapatmak ve infüzenin ağız boşluğuna dökülmesini azaltmak için, papillanın etrafındaki yanağa ve eklenen tüpe bir siyanoakrilat uygulayın. Siyanoakrilat kuruduktan sonra, infüzyonu dakikada 100 mikrolitre hızında beş dakikadan fazla yavaşça enjekte edin. infüzyon tamamlandıktan sonra, tüpü en az beş dakika yerinde bırakın, böylece kanalı kapalı tutun ve infüzyonun parotis bezinde kalmasına izin verin.

Son olarak, tüpü hafif çekişle çıkarın ve siyanoakrilat tüple serbest kalacaktır. Radyo kontrast infüzyonu kullanılarak yapılan floroskopi, çözeltinin Stenson kanalı üzerinden parotis bezine dallanarak girdiğini gösterdi. Parotis bezinin kimyasal analizinde immün, her iki hücre tipinde de başarılı transdüksiyon ve transkripsiyon gösteren hem dütal hem de acinar hücrelerde EGFP için pozitif lekelenmeye işaret etti.

Bu prosedürdeki ana zorluk muhtemelen polietilen tüpün papillaya sokulmasıdır, bu da çok nazikçe ve yavaşça yapılmalıdır.