Name: Farelerde Preklinik Bir Eforel Isıl Vuruş Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-01T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Öğrenin farelerde eforl ısı vuruşu modelini geliştirmeyi ve soğutma hızının iyileşme üzerindeki etkilerini incelemeyi. Bu yöntem, insan patofizyolojisini taklit ederek uzun vadeli sonuçları araştırmaya olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Savunma Bakanlığı W81XWH-15-2-0038 (TLC) ve BA180078 (TLC) ve BK ve Betty Stevens Bağışı (TLC) tarafından finanse edildi. JMA, Suudi Arabistan Krallığı'ndan gelen mali yardımla desteklendi. Michelle King, bu çalışma yürütüldüğü sırada Florida Üniversitesi'ndeydi. Şu anda PepsiCo Ar-Ge'nin bir bölümü olan Gatorade Spor Bilimleri Enstitüsü'nde çalışıyor.

Tüm prosedürler Florida Üniversitesi IACUC tarafından incelenmiş ve onaylanmıştır. Çalışma için sırasıyla 27-34 g ve 20-25 g aralığında ağırlıkta ~ 4 aylık C57BL / 6J erkek veya dişi fareler kullanılmaktadır.
1. Telemetrik sıcaklık izleme sisteminin cerrahi implantasyonu
<ol><li>Satıcıdan varışta, hayvanların nakliye stresini en aza indirmek için ameliyattan önce en az 1 hafta vivaryumda dinlenmelerine izin verin.</li>
	<li>Grup, fareleri (yerel IACUC yönergeleri uyarır göre kafes başına en fazla 5) sıcaklık telemetrik cihaz implantasyonu için ameliyat gününe kadar barındırır. Bunları mısır koçanı yatakları içeren standart 7,25" (W) x 11,75" (L) x 5" (H) kafeslerde barındırın. Işık döngüsünü 12 x 12 ışık döngüsünde koruyun (açık: 07:00; kapalı: 19:00). Gövde sıcaklığını 20-22 °C'de ve bağıl nemi (RH) %30-%60'ta koruyun. EHS protokolüne kadar standart yemek diyetini ve su ad libitum'una sahip olmak. NOT: Bireysel konut için gerekçe, erkek C57bl / 6J farelerde sık sık kavga yaralanmasını önlemek ve her fare için spontan tekerlek çalışması için geniş bir fırsat sağlamaktır.</li>
	<li>Telemetri cihazlarının yerleştirilmesi için, fareyi bir indüksiyon odasında izofluran (%4, 0,4-0,6 L/dk O2 akışı) ile uyuşturun. Ardından, fareyi bir burun konisi (%1,5, 0,6 L/dk) yoluyla sürekli anestezi altına yerleştirin.</li>
	<li>Ameliyat sırasında hayvanın gözlerini hasar veya yaralanmadan korumak için veteriner merhem gibi göz yağlama kullanın.</li>
	<li>Cerrahi bölgeyi hazırlamak için, alt karnı küçük hayvan saç kesme makası ile tıraş edin veya piyasada bulunan bir saç çıkarıcı kullanın. Bu süre zarfında ilk deri altı buprenorfin dozunu (0.1 mg/ kg) uygulayın.</li>
	<li>Bölgeyi üç yıkama povidon-iyot (veya benzeri mikrop öldürücü scrub) ile yıkayın ve ardından% 70 izopropil alkol durulayın (veya yerel veteriner gereksinimlerine bağlı olarak steril salin). Ardından, fareyi cerrahi bölgeye aktarın.</li>
	<li>Faredeki cerrahi bölgeyi izole etmek için yapışkan bir örtü kullanın. Steril aletler ve aseptik teknik kullanarak, linea alba boyunca orta hatta, maliyet marjından yaklaşık 0,5 cm uzaklıkta ~ 1 cm'lik bir kesi yapın. Daha sonra, cildi kas tabakasından ayırın ve linea alba üzerinde biraz daha küçük bir kesi yapın, bağırsaklara veya iç organlara zarar vermemeye dikkat edin.</li>
	<li>Kas tabakası açıldıktan sonra steril telemetreyi (minyatür yeniden kullanılabilir pilsiz radyotemetri cihazı; 16,5 x 6,5 mm) kaudal arterlerin ve damarların önündeki intraperitoneal boşluğa yerleştirin ve sindirim organlarına sırt yaparak serbestçe yüzmesini sağlamak için. NOT: Tüm telemetreler sabun ve su ile temizlenir, iyice durulanır ve kullanımlar arasında etilen oksit ile gaz sterilize edilir. Gaz sterilizasyonu mevcut değilse, telemetreleri dezenfekte etmek ve sterilize etmek için sterilizasyon çözeltilerine daldırma (üreticinin seyreltme ve daldırma süresi tavsiyesine uyarak) kabul edilir.</li>
	<li>Karın açıklığı steril 5-0 emilebilir dikiş ile kapatın ve 5-0 proline dikiş ile basit bir kesilmiş dikiş kullanarak cildi kapatın. NOT: Telemetrenin karın duvarına bağlamadan karın bölmesinde yüzmesine izin verilmesi (üretici firma tarafından önerilen bir yöntem) başarılı olduğu ve iyileşme sırasında karın duvarındaki fazla gerginliği gidermek için yazarlar tarafından tercih edildiği gösterilmiştir. Ayrıca, bunun alıcının sinyali yayıcıdan alma yeteneği üzerinde hiçbir etkisi yoktur.</li>
	<li>Fareyi kafesinin altına taşınabilir bir ısıtma yastığı ile temiz kafesine yerleştirin. Anesteziden iyileşmenin ilk saatinde fareyi her 15 dakikada bir izleyin ve ardından hayvan barınma tesisine geri dönün.</li>
	<li>Farelere iyileşme sırasında 48 saat boyunca her 12 saat deri altı buprenorfin enjeksiyonları sağlayın ve sıkıntı belirtilerini izlemeye devam edin. Varsa, yavaş salınımlı buprenorfin deri altından her 24 saat (1 mg / kg) 48 saat verin. Gönüllü bir tekerlek çalıştırmadan önce farelerin ameliyattan sonra ~ 2 hafta boyunca iyileşmesine izin verin.</li>
</ol>2. Aşinalık: Gönüllü ve zorla tekerlek çalışması
<ol><li>Ameliyattan çıktıktan sonra, tekerleğe ücretsiz erişim için gönüllü koşu tekerleklerini kafese yerleştirin. Diğer koşu tekerleği seçimleri eşit derecede etkili olabilir, ancak mevcut sınırlı kafes boyutlarına uyduğundan emin olun. NOT: Çalışan tekerleklerin standart bir kafese sığacak şekilde boyut olarak biraz azaltılması gerekiyordu.</li>
	<li>Fareyi 2 hafta boyunca kafesteki gönüllü tekerleğe alıştırın. Alıştıktan sonra, fare zorlanmış koşu tekerlekleri için alışma prosedürleri ile eğitime hazırdır.</li>
	<li>Çevre odasındaki dört eğitim seansını (bir/gün) oda sıcaklığında (~25 °C, %30 bağıl nem) gerçekleştirin. NOT: Bu ideal olmasına rağmen, fareler odanın dışındaki aynı zorla çalıştırma tekerleklerinde de başarıyla eğitildi. Daha sonra birkaç fare, odanın kullanımına müdahale etmeden aynı anda eğitilebilir.</li>
	<li>İlk eğitim oturumuna başlamak için, farenin tekerleğin hızını belirlemesine ve stresli olmayan bir şekilde alışmasına izin vermek için motor tahrik kemerini çıkararak veya gevşeterek farenin değiştirilmiş koşu tekerleğinde 15 dakika serbest çalışmasına izin verin. NOT: Protokoller, çalışan tekerlek üreticisi tarafından sağlanan yazılım ve donanımla çalıştırılabilir veya artımlı egzersiz protokolünün otomasyonuna izin veren doğrudan tekerlek motoruna bağlı harici bir programlanabilir güç kaynağı ile değiştirilebilir.</li>
	<li>Her tekerleğin güç kaynağı voltajı ile metre/dakika (m/dk) arasındaki ilişkiyi belirlemek için sistemi her çalışan tekerlek için kalibre edin. NOT: Zorunlu çalışan tekerlekler ayrıca motoru 15 cm yükseltecek, tekerleği telemetri alıcı platformunun 5 cm üzerine indiren kasnağı ters çevirecek ve hareket ettirecek şekilde değiştirildi. Bu, alıcı platformunun çalışma protokolü sırasında motordan parazit olmadan doğru telemetri verileri eldemasını sağladı.</li>
	<li>Kısa bir dinlenme süresinden (<5 dk) sonra, zorla çalışan tekerlek protokolünü başlatın. Tekerleği 2,5 m/dak'ta çalıştırın ve gerçek EHS denemesinin ilk saatini taklit etmek için toplam 1 saat boyunca her 10 dakikada bir 0,3 m/dk artırın, ancak oda sıcaklığında. Fareyi ev kafesine geri koyun ve 24 saat iyileşmeye izin verin. Sonraki üç zorunlu koşu oturumunu ardışık günlerde aynı şekilde gerçekleştirin. 1. günden sonra, serbest tekerlekli alışma kısmı gereksizdir.</li>
	<li>Fareye 2-3 gün yıkama veya zorla çalıştırma tekerleği uygulamasının stresinden kurtulma izni verin, ancak farenin ev kafesine gönüllü tekerleğe ücretsiz erişmesine izin verin. Fare artık EHS protokolünden geçmeye hazır.</li>
</ol>3. EHS protokolü
<ol><li>EHS protokolünden bir gece önce, fareyi odaya alışmak için oda sıcaklığında (~25 °C, ≈30% bağıl nem) çevre odasına yerleştirin.</li>
	<li>Bir gecede ortalama 30 s aralıklarla sürekli Tc toplamak için bir veri toplama sistemi kullanın.</li>
	<li>EHS protokolü sabahında, oda sıcaklığını (yani 36-37,5 °C) artırmadan önce farenin normal bir günlük sıcaklık aralığında veya altında olduğundan emin olun. Bu, farenin ateşi olmamasını ve bu süre zarfında yersiz stres yaşamamasını sağlar.</li>
	<li>Fare stabil ve normal dinlenme çekirdeği sıcaklığı aralığında olduğunda, yiyecek ve suyu çıkarın ve hayvanı tartın. Oda kapısını kapatın ve oda sıcaklığını 37,5 °C ve% 40-% 50 bağıl nem hedefine veya istenen çevresel sıcaklık ve nemeyükseltin 19. Oda sıcaklığını ve nemini kalibre edilmiş bir sıcaklık ve nem monitörü ile doğrulayın.</li>
	<li>Protokol sırasında ışığı ve rahatsızlıkları minimumda tutmak için odayı karartma perdesi ile çevreleyin. Uzaktan IR aydınlatmalı kameralar aracılığıyla fareyi protokol sırasında sürekli izleyin. İkinci bir kamerayı, çalışan tekerleğin yakınına yerleştirilmiş sıcaklık ve nem monitörüne odaklayın. Hayvanın yakınında doğru sıcaklık okumaları sağlamak için çevre odası ayar noktası için kontrol ünitesinde herhangi bir ayarlama yapın.</li>
	<li>Oda, sıcaklık monitöründeki ikinci kamera tarafından ölçülen hedef sıcaklığına ulaştığında (bu ~ 30 dakika sürebilir), oda kapısını hızla açın ve fareyi zorla çalıştırma tekerleğine yerleştirin.</li>
	<li>Zorla çalıştırma tekerleği protokolünü 2,5 m/dk hızında başlatın ve fare 41 °C'lik bir Tc'ye ulaşana kadar her 10 dakikada bir hızı 0,3 m/dk artırın. Fare bu çekirdek sıcaklığa ulaştıktan sonra, belirgin bir bilinç kaybı, geriye doğru düşme veya bayılma ve tekerleğe çalışmaya veya tutunmaya devam edememe ile karakterize edilen semptom sınırlamasına kadar hızın sabit kalmasına izin verin. Farenin tekerlekte fiziksel bir tepki belirtisi olmadan üç geri dönüş olduğunda bu zaman noktasını onaylayın. Alternatif olarak, protokolün ne zaman durdurulacasını belirlemek için yerel IACUC kurallarını izleyerek insancıl bir uç nokta tanımlayın (örneğin, Tc ~43 °C). Bu uç nokta, esasen tüm farelerde semptom sınırlamanın biraz üzerindedir.</li>
	<li>Hızlı Soğutma protokolünü (R) gerçekleştirmek için, fare semptom sınırlamasına ulaştığında tekerleği durdurun ve zorlamalı koşu tekerleğinden hemen çıkarın. Fareyi tartın ve oda sıcaklığında iyileşmek için ev kafesine geri yerleştirin. Bu süre zarfında, odanın kapısını açık bırakın ve haznenin hızla soğumasını sağlamak için inkübatör setini oda sıcaklığına geri döndürün. Bu prosedür % 99 uzun süreli sağkalım > sonuçlanır.</li>
	<li>Daha Şiddetli (S) EHS maruziyeti gerçekleştirmek için, EHS protokolü sırasında hayvanın ev kafesini 37,5 °C haznede tutun. Hayvan semptom sınırlamasına ulaştığında, uzak kamera tarafından gözlemlendiği gibi bilince dönene kadar koşu tekerleğinde kalmalarına izin verin (~5-9 dk).</li>
	<li>Daha sonra fareyi koşu tekerleğinden hızlı bir şekilde çıkarın ve çok daha yavaş bir soğutma profiline(Şekil 1A, kırmızı kesik çizgi) neden olmak için doğrudan önceden ısıtılmış kafesine geri döndürün, esasen EHS hipotermik fazını ortadan kaldırın. Oda ile dengeyi iyileştirmek için bu süre zarfında filtre üstlerini kafesten çıkarın.</li>
	<li>Bastırılmış bir hipotermik fazla sonuç vermek için daha az şiddetli bir alternatif prosedür gerçekleştirmek için oda sıcaklığına önceden solumuş bir geri kazanım kafesi kullanın, ancak% 100 sağkalım oranı20.</li>
	<li>S protokolü için, kurtarma sırasında fareyi dikkatlice izleyin ve insancıl uç noktaları sürekli olarak kontrol edin. Yaygın olarak kullanılan insancıl uç noktaları (örneğin, sağ refleks) uzaktan test etmek zor olsa da, tımar, normal nefes alma, yalama vb. Bu süre zarfında Tc'i izleyin.</li>
	<li>Farelerin, çekirdek sıcaklıkları iyileşme aşamasında yönü tersine çevirirse, sonunda 40 ° C'yi aşarsa iyileşme olasılığı düşüktür; şu anda, denemeyi sonlandırın ve fareyi standart insancıl uç noktalar için değerlendirin.</li>
</ol>

<ol><li>Leon, L. R., Bouchama, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Heat stroke.</a> Comprehensive Physiology. 5 (2), 611-647 (2015).</li>
<li>Laitano, O., Leon, L. R., Roberts, W. O., Sawka, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controversies+in+exertional+heat+stroke+diagnosis%2C+prevention%2C+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Controversies in exertional heat stroke diagnosis, prevention, and treatment.</a> Journal of Applied Physiology. 127 (5), 1338-1348 (2019).</li>
<li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+prior+illness+on+exertional+heat+stroke+presentation+and+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Influence of prior illness on exertional heat stroke presentation and outcome.</a> PLOS One. 14 (8), 0221329(2019).</li>
<li>Carter, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+hospitalizations+and+deaths+from+heat+illness+in+soldiers%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+and+Science+in+Sports+and+Exercise%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of hospitalizations and deaths from heat illness in soldiers.</a> Medicine and Science in Sports and Exercise. 37 (8), 1338-1344 (2005).</li>
<li>Howe, A. S., Boden, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat-related+illness+in+athletes%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Heat-related illness in athletes.</a> The American Journal of Sports Medicine. 35 (8), 1384-1395 (2007).</li>
<li>Wallace, R. F., Kriebel, D., Punnett, L., Wegman, D. H., Amoroso, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prior+heat+illness+hospitalization+and+risk+of+early+death%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Research%22%5BJournal%5D)">Prior heat illness hospitalization and risk of early death.</a> Environmental Research. 104 (2), 290-295 (2007).</li>
<li>Wang, J. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+association+between+heat+stroke+and+subsequent+cardiovascular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">The association between heat stroke and subsequent cardiovascular diseases.</a> PLOS One. 14 (2), 0211386(2019).</li>
<li>Leon, L. R., Blaha, M. D., DuBose, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+cytokine%2C+corticosterone%2C+and+tissue+injury+responses+in+mice+during+heat+strain+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Time course of cytokine, corticosterone, and tissue injury responses in mice during heat strain recovery.</a> Journal of Applied Physiology. 100 (4), 1400-1409 (2006).</li>
<li>Leon, L. R., DuBose, D. A., Mason, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+stress+induces+a+biphasic+thermoregulatory+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Heat stress induces a biphasic thermoregulatory response in mice.</a> American Journal of Physiology. Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 288 (1), 197-204 (2005).</li>
<li>Leon, L. R., Gordon, C. J., Helwig, B. G., Rufolo, D. M., Blaha, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermoregulatory%2C+behavioral%2C+and+metabolic+responses+to+heatstroke+in+a+conscious+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Thermoregulatory, behavioral, and metabolic responses to heatstroke in a conscious mouse model.</a> American Journal of Physiology. Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 299 (1), 241-248 (2010).</li>
<li>King, M. A., Leon, L. R., Morse, D. A., Clanton, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+cytokine+and+chemokine+responses+to+exertional+heat+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Unique cytokine and chemokine responses to exertional heat stroke in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 122 (2), 296-306 (2016).</li>
<li>Costa, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((l-Arginine+supplementation+prevents+increases+in+intestinal+permeability+and+bacterial+translocation+in+Male+Swiss+mice+subjected+to+physical+exercise+under+environmental+heat+stress%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">l-Arginine supplementation prevents increases in intestinal permeability and bacterial translocation in Male Swiss mice subjected to physical exercise under environmental heat stress.</a> The Journal of Nutrition. 144 (2), 218-223 (2014).</li>
<li>Hubbard, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+exercise+in+the+heat+on+predisposition+to+heatstroke%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+and+Science+in+Sports%22%5BJournal%5D)">Effects of exercise in the heat on predisposition to heatstroke.</a> Medicine and Science in Sports. 11 (1), 66-71 (1979).</li>
<li>Hubbard, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+acute+heatstroke+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%3A+Respiratory%2C+Environmental+and+Exercise+Physiology%22%5BJournal%5D)">Rat model of acute heatstroke mortality.</a> Journal of Applied Physiology: Respiratory, Environmental and Exercise Physiology. 42 (6), 809-816 (1977).</li>
<li>Hubbard, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+significance+of+selected+serum+enzymes+in+a+rat+heatstroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%3A+Respiratory%2C+Environmental+and+Exercise+Physiology%22%5BJournal%5D)">Diagnostic significance of selected serum enzymes in a rat heatstroke model.</a> Journal of Applied Physiology: Respiratory, Environmental and Exercise Physiology. 46 (2), 334-339 (1979).</li>
<li>Hubbard, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+physical+effort+in+the+etiology+of+rat+heatstroke+injury+and+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%3A+Respiratory%2C+Environmental+and+Exercise+Physiology%22%5BJournal%5D)">Role of physical effort in the etiology of rat heatstroke injury and mortality.</a> Journal of Applied Physiology: Respiratory, Environmental and Exercise Physiology. 45 (3), 463-468 (1978).</li>
<li>Garcia, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-dependent+responses+to+exertional+heat+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sex-dependent responses to exertional heat stroke in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 125 (3), Bethesda, Md. 841-849 (2018).</li>
<li>Garcia, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Ibuprofen+during+Exertional+Heat+Stroke+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+and+Science+in+Sports+and+Exercise%22%5BJournal%5D)">Effects of Ibuprofen during Exertional Heat Stroke in Mice.</a> Medicine and Science in Sports and Exercise. 52 (9), 1870-1878 (2020).</li>
<li>King, M. A., Leon, L. R., Mustico, D. L., Haines, J. M., Clanton, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+multi-organ+injury+in+a+pre-clinical+model+of+exertional+heat+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of multi-organ injury in a pre-clinical model of exertional heat stroke.</a> Journal of Applied Physiology. 118 (10), Bethesda, Md. (2015).</li>
<li>Murray, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exertional+heat+stroke+leads+to+concurrent+long-term+epigenetic+memory%2C+immunosuppression+and+altered+heat+shock+response+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Exertional heat stroke leads to concurrent long-term epigenetic memory, immunosuppression and altered heat shock response in female mice.</a> The Journal of Physiology. 599 (1), 119-141 (2021).</li>
<li>Leon, L. R., DuBose, D. A., Mason, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+stress+induces+a+biphasic+thermoregulatory+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Heat stress induces a biphasic thermoregulatory response in mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 288, 197-204 (2005).</li>
<li>Laitano, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+metabolic+dysfunction+in+myocardium+following+exertional+heat+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Delayed metabolic dysfunction in myocardium following exertional heat stroke in mice.</a> The Journal of Physiology. 598 (5), 967-985 (2020).</li>
<li>Iwaniec, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+phase+response+to+exertional+heat+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acute phase response to exertional heat stroke in mice.</a> Experimental Physiology. 106 (1), 222-232 (2020).</li>
<li>He, S. -X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+a+rhabdomyolysis+model+in+mice+with+exertional+heat+stroke+mouse+model+of+EHS-rhabdomyolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Optimization of a rhabdomyolysis model in mice with exertional heat stroke mouse model of EHS-rhabdomyolysis.</a> Frontiers in Physiology. 11, (2020).</li>
<li>Lopez, J. R., Kaura, V., Diggle, C. P., Hopkins, P. M., Allen, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malignant+hyperthermia%2C+environmental+heat+stress%2C+and+intracellular+calcium+dysregulation+in+a+mouse+model+expressing+the+p.G2435R+variant+of+RYR1%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Malignant hyperthermia, environmental heat stress, and intracellular calcium dysregulation in a mouse model expressing the p.G2435R variant of RYR1.</a> British Journal of Anaesthesia. 121 (4), 953-961 (2018).</li>
<li>Laitano, O., Murray, K. O., Leon, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlapping+mechanisms+of+exertional+heat+stroke+and+malignant+hyperthermia%3A+evidence+vs.+conjecture%5BTitle%5D)+AND+%22Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Overlapping mechanisms of exertional heat stroke and malignant hyperthermia: evidence vs. conjecture.</a> Sports Medicine. 50 (9), Auckland, N.Z. 115-123 (2020).</li>
<li>Casa, D. J., Armstrong, L. E., Kenny, G. P., O'Connor, F. G., Huggins, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exertional+heat+stroke%3A+new+concepts+regarding+cause+and+care%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Sports+Medicine+Reports%22%5BJournal%5D)">Exertional heat stroke: new concepts regarding cause and care.</a> Current Sports Medicine Reports. 11 (3), 115-123 (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak çıkar çatışmaları yoktur. Bu proje için yapılan tüm çalışmalar ve tüm destek Florida Üniversitesi'nde oluşturuldu.

Bu teknik inceleme, farelerde klinik öncesi bir EHS modelinin performansı için yönergeler sağlamayı amaçlamaktadır. Değişken öneme sahip tekrarlanabilir bir EHS bölümünün yürütülmesi için gereken ayrıntılı adımlar ve malzemeler sağlanmaktadır. Daha da önemlisi, model büyük ölçüde insan EHS kurbanlarında gözlenen belirtileri, semptomları ve çoklu organ disfonksiyonlarını taklit eder11,19. Ayrıca, bu model kısa ve uzun süreli EHS gerikazanımı 19</...

Sıcak çarpması, hipertermik deneklerde merkezi sinir sistemi disfonksiyonu ve sonraki organ hasarı ile karakterizedir1. Sıcak çarpmasının iki tezahürü vardır. Klasik sıcak çarpması (CHS), sıcak hava dalgaları sırasında çoğunlukla yaşlı popülasyonları veya sıcak yaz günlerinde güneşe maruz kalan araçlarda bırakılan çocukları etkiler1. Eforlu sıcak çarpması (EHS), fiziksel efor sırasında, tipik olarak, ancak her zaman değil, nörolojik semptomlar, hipertermi ve daha sonra çok organ disfonksiyonu ve hasarı ile sonuçlanan yüksek ortam sıcaklıkları altında yeterince termoregüle edilememesi durumunda ortaya çıkar2. EHS, eğlence ve elit sporcuların yanı sıra askeri personelde ve eşlik eden dehidrasyonlu ve susuz işçilerde meydana gelir3,4. Gerçekten de EHS, fiziksel aktivite sırasında sporcularda üçüncü önde gelen ölüm nedenidir5. Bölüm ölümcül olabileceği veya uzun vadeli olumsuz sağlık sonuçlarına yol açabileceği için ehs'yi insanlarda incelemek son derece zordur6,7. Bu nedenle, EHS'nin güvenilir bir preklinik modeli, insan EHS kurbanlarında retrospektif ve ilişkisel klinik gözlemlerin sınırlamalarını aşmak için değerli bir araç olarak hizmet edebilir. Kemirgenlerde ve domuzlarda CHS'nin preklinik modelleri iyi karakterize edilmiştir8,9,10. Bununla birlikte, CHS'nin preklinik modelleri, fiziksel egzersizin temoregülatör profil ve doğuştan gelen immün yanıt üzerindeki benzersiz etkileri nedeniyle ehs patofizyolojisine doğrudan çevrilmez11. Buna ek olarak, kemirgenlerde preklinik EHS modelleri geliştirmeye yönelik önceki girişimler, elektrik çarpmasının neden olduğu üst üste bindirilmiş stres uyaranları, rektal probun yerleştirilmesi ve yüksek ölüm oranları 12 ,13 , 14,15, 16 ile önceden tanımlanmış maksimum çekirdek vücut sıcaklıkları dahil olmak üzere önemli kısıtlamalar oluşturmuştur. mevcut epidemiyolojik verilerle eşleşmez. Bunlar, veri yorumlamayı şaşırtabilecek ve güvenilmez biyobelirteç dizinleri sağlayabilecek önemli sınırlamaları temsil eder. Bu nedenle, protokol, yukarıda belirtilen sınırlamalardan büyük ölçüde arındırılmış farelerde standartlaştırılmış, son derece tekrarlanabilir ve çevrilebilir bir EHS preklinik modelinin adımlarını karakterize etmeyi ve tanımlamayı amaçlamaktadır. Modelde orta dereceden ölümcül sıcak çarpmasına kadar dereceli fizyolojik sonuçlarla sonuçlanabilecek ayarlamalar açıklanmıştır. Yazarların bilgisine göre, bu tür özelliklere sahip ehs'nin tek preklinik modelidir, bu da ilgili EHS araştırmalarını hipotez odaklı bir şekilde takip etmeyi mümkün hale getirir11,17,18.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 1080P HD 4 Güvenlik Kameraları 4CH Ev Video Güvenlik Kamera Sistemi, 1 TB HDD ile 2MP Gece Görüş Kameraları CCTV Gözetim Kiti</td><td>LaView</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Kaplamalı Vicryl Menekşe Örgülü</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Ethilon Naylon sütür Siyah Monofilament</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yapıştırıcı Povidone ile Cerrahi Örtü 12x18</td><td>Jorgensen Labset al.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BK Hassas Çok Aralıklı Programlanabilir DC Güç Kaynakları Model 9201</td><td>BK Hassas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DR Aletleri&nbsp; Tıp Öğrencisi Kapsamlı Anatomi Diseksiyon Kiti</td><td>&nbsp; DR Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Enerji Verici Güç Kaynağı</td><td>Starr Yaşam Bilimleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>G2 Yayıcı ve ark.</td><td>Starr Yaşam Bilimleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Layfayette Motorlu Tekerlek Modeli #80840B</td><td>Layfayette</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Patterson Veteriner İzofluran</td><td>Patterson Veteriner Platformu</td><td></td><td></td></tr><tr><td>alıcısı ve ark.</td><td>Starr Yaşam Bilimleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bilimsel Çevre Odası Model 3911</td><td>ThermoForma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eğitim Tekerlekleri</td><td>&nbsp; Columbus Öğr.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde preklinik bir eforel isıl vuruş modeli

A Preclinical Model of Exertional Heat Stroke in Mice

Sıcak çarpması, ısıya bağlı hastalıkların en şiddetli tezahürüdür. Pasif sıcak çarpması olarak da bilinen klasik sıcak çarpması (CHS) istirahatte gerçekleşirken, fiziksel aktivite sırasında eforlü sıcak çarpması (EHS) meydana gelir. EHS, etiyoloji, klinik sunum ve çoklu organ disfonksiyonunun sekellerinde CHS'den farklıdır. Yakın zamana kadar, sadece CHS modelleri iyi belirlenmiştir. Bu protokol, anestezi, kısıtlama, rektal problar veya elektrik çarpması gibi başlıca sınırlayıcı faktörlerden arındırılmış rafine bir preklinik fare modeli için yönergeler sağlamayı amaçlamaktadır. Bu modelde çekirdek sıcaklığı (Tc) telemetrik problarla alet edilmiş erkek ve dişi C57Bl/6 fareler kullanılmıştır. Çalışma moduna aşina olmak için, fareler hem gönüllü hem de zorla çalışan tekerlekleri kullanarak 3 haftalık eğitimden geçer. Bundan sonra, fareler semptom sınırlaması (örneğin, bilinç kaybı) Tc'de 42.1-42.5 °C, ancak 34.5-39.5 °C arasındaki oda sıcaklıklarında ve % 30-90 arasında nemde uygun sonuçlar elde edilebilir. İstenilen şiddete bağlı olarak, fareler ortam sıcaklığında iyileşme için hemen odadan çıkarılır veya ısıtılmış odada daha uzun süre kalır, bu da daha şiddetli bir maruziyete ve daha yüksek bir ölüm insidansına neden olarak. Sonuçlar, sahte uyumlu egzersiz kontrolleri (EXC) ve/veya naif kontrollerle (NC) karşılaştırılır. Model, bilinç kaybı, şiddetli hipertermi, çoklu organ hasarının yanı sıra enflamatuar sitokin salınımı ve bağışıklık sisteminin akut faz yanıtları da dahil olmak üzere insan EHS'sinde gözlenen patofizyolojik sonuçların çoğunu yansıtmaktadır. Bu model, EHS'nin başlangıcını geciktirebilecek veya bu tezahürü karakterize eden çoklu organ hasarını azaltabilecek önleyici ve terapötik stratejileri test etmek için hipotez odaklı araştırmalar için idealdir.

EHS protokolünün tamamı ve bir farenin erken kurtarılması sırasında tipik thermoregulatory profilleri Şekil 1A'da gösterilmiştir. Bu profil, oda ısıtma aşaması, artımlı egzersiz aşaması, sabit durum egzersiz aşaması ve hızlı soğutma (R) veya şiddetli (S) yöntemi17ile bir iyileşme aşaması olarak tanımlanabilecek dört farklı aşamadan oluşur. Ana thermoregulatory sonuçları, elde edilen maksimum Tc (Tc,max) ve Tc,max'e ulaşmak için gereken süreyi içerir. Artan termal alan...

Protokol, elektrik çarpması gibi olumsuz dış uyaranlardan arındırılmış farelerde standartlaştırılmış, tekrarlanabilir, preklinik bir eforlu sıcak çarpması (EHS) modelinin geliştirilmesini açıklar. Model mekanistik, önleyici ve terapötik çalışmalar için bir platform sağlar.

Farelerde Preklinik Bir Eforel Isıl Vuruş Modeli

Heat stroke is the most severe manifestation of heat-related illnesses. Classic heat stroke (CHS), also known as passive heat stroke, occurs at rest, ...

Daha önce, sadece pasif ısı çarpması modelleri iyi kurulmuştur. Bu eforlü sıcak çarpması modeli büyük sınırlamalardan arındırılmıştır ve insan patofizyolojisini daha yakından taklit eder. hayatı tehdit eden bir durum olduğu için insanlarda sıcak çarpmasını etkili bir şekilde incelemek mümkün değildir.Bu preklinik model, insan eforel sıcak çarpmasının klinik özelliklerini korur. Bu teknik, soğutma hızının eforlu sıcak çarpmasından geri kazanım üzerindeki etkilerini, ilaç yutulmasından kaynaklanan komorbiditeleri ve sıcak çarpması maruziyetinin uzun vadeli sonuçlarını test etmeye yardımcı olur. Prosedürü gösteren jamal Alzahrani, Dr. Clanton'ın laboratuvarından son sınıf doktora öğrencisi.Fareyi uyuşturdıktan sonra, hayvanın gözlerini ameliyat sırasında hasar veya yaralanmadan korumak için Veteriner Merhem gibi göz yağlama kullanın. Cerrahi bölgeyi hazırlamak için, alt karnı küçük hayvan saç makası veya piyasada bulunan bir saç çıkarıcı ile tıraş edin. Kilogram buprenorfin başına 0.1 miligram deri altı ilk dozunu uygulamak.Bölgeyi üç yıkama povidone-iyot veya Klorheksidin ile yıkayın, ardından% 70 izopropil alkol durulayın, ardından fareyi cerrahi bölgeye aktarın, cerrahi bölgeyi far

a-preclinical-model-of-exertional-heat-stroke-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Perioperatif ve yoğun bakım ile ilgili akut böbrek hasarı için güçlü bir model sundu. Neredeyse, klinik AKI, histolojik ve fonksiyonel değişiklikleri çoğaltmak mümkündür kardiyak arrest ile indüklenen tüm vücut hipoperfüzyon kullanma.

Normotermik Kardiyak Arrest ve Kardiyopulmoner Resusitasyon: İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Bu kağıt kadar 12-24 hr koşulları gibi ateş uyarabilir farelerde tüm vücut ısısı için bir protokol açıklar.

Farelerde Uzun Süre Whole Body Hipertermi için protokol

Bu videoda, çekirdek vücut sıcaklığını sürekli olarak ölçmek için bir fare modeline bir sıcaklık telemetrik cihazı yerleştirmek için kullanılan cerrahi bir prosedürü açıklıyoruz.

Fare Modelinde Sıcaklık Telemetrik İzleme Sisteminin Cerrahi İmplantasyonu: Fare Çekirdeği Vücut Sıcaklığını Ölçmek için Sıcaklık Telemetrik Cihazını İmplante Etmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Bu videoda, bir fare modelinde eforlu sıcak çarpmasını (EHS) incelemek için adım adım bir protokol açıklıyoruz.

Eforlu Sıcak Çarpması Fare Modeli: Eforlu Sıcak Çarpmasının Altında Yatan Mekanizmaları İncelemek İçin Bir Protokol

Bu video, epilepsi ile ilişkili gen mutasyonlarına sahip transgenik bir farede, kontrollü bir odada vücut ısısını kademeli olarak artırarak ısıya bağlı nöbetleri indükleme prosedürünü göstermektedir. Bu protokol, epilepsi için nöbet mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri incelemek için kullanılır.

Transgenik Bir Fare Modelinde Isıya Bağlı Nöbetlerin Tetiklenmesi ve İzlenmesi

Laboratuvar farelerinde şok ızgarası kullanılmadan egzersiz dayanıklılığını değerlendirmek için bir yöntem gösterilmiştir. Bu yöntem, stresin deneysel parametreler üzerindeki kafa karıştırıcı etkilerini azaltabilen insancıl bir iyileştirmedir.

Bir Şok Grid Kullanımı olmadan Kemirgen Egzersiz Endurance Değerlendirilmesi: Zorla Egzersiz Alternatif Bir

Hipoksi yoğun eğitim sprint yeteneği tekrarlanan vasküler uyarlamalar potansiyel olarak bazı hastalarda yararlı ikna etmek ve sporcuların geliştirmek için kanıtlanmış bir protokoldür. Burada, protokol ve ex vivo vasküler işlevi değerlendirme sistemini kullanarak bu vasküler uyarlamalar tanımlamak fizibilite eğitim fare kullanarak sınayın.

Supramaximal yoğunluğu hipoksik egzersiz ve farelerde vasküler işlevi değerlendirme

Yöntemin amacı, fare modellerinde hipertermi veya ısıya bağlı nöbetleri taramaktır. Protokol, yüksek vücut sıcaklığının nöbetlere yol açıp açmadığını belirlemek için vücut sıcaklığının sürekli izlenmesi ile özel olarak inşa edilmiş bir odanın kullanımını açıklar.

Epilepsinin Fare Modellerinde Isıya Bağlı Nöbetler İçin Davranışsal Bir Ekran

Bu murin modeli, tipik septik hastanın yatalak özelliğini özetlemek için septik bir hakareti arka bacak kaslarının kullanılmaması ile birleştirir. Model, sepsiste kas disfonksiyonunu incelemek için önceki modellerden önemli bir ayrılmayı temsil eder ve bu durumu tedavi etmek için terapötik stratejileri ele almak için tekrarlanabilir bir yaklaşımdır.

Farelerde Kullanılmayan Sepsis ile İndüklenen Miyopatinin Preklinik Modeli

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Öğrenin farelerde eforl ısı vuruşu modelini geliştirmeyi ve soğutma hızının iyileşme üzerindeki etkilerini incelemeyi. Bu yöntem, insan patofizyolojisini taklit ederek uzun vadeli sonuçları araştırmaya olanak tanır.

Farelerde Preklinik Bir Eforel Isıl Vuruş Modeli

Daha fazla video keşfet