Name: Optik Olarak Buharlaştırılmış Perflorokarbon Nanodamlacıkların Formülasyonu ve Akustik Modülasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-16T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Öğrenin, optik buharlaştırılmış perflorokarbon nanodamlacıkların formülasyonunu ve akustik modülasyonunu. Bu yöntem, programlanabilir ultrason sistemlerinde görüntüleme kontrastını artırır ve ek ekipman gerektirmez.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışma kısmen BCRF-20-043 hibesi altında Meme Kanseri Araştırma Vakfı tarafından desteklenmiştir.

1. Perflorokarbon nanodamlacık formülasyonu
<ol><li>10 mL'lik yuvarlak tabanlı bir şişeyi kloroform ile durulayın ve 10 μL ve 1 mL gaz geçirmez cam şırıngayı kloroform ile yıkayın, tam şırınga hacmini tekrar tekrar aspire ederek ve toplam üç kez dışarı atarak. DİKKAT: Kloroform uçucudur ve solunması halinde toksik olabilir. Bu çözücü ile yapılan tüm çalışmalar bir duman davlumbazında yapılmalıdır.</li>
	<li>Şırıngaları kullanarak, yuvarlak tabanlı şişeye 200 μL DSPE-mPEG2000 (25 mg / mL), 6.3 μL 1,2-distearoil-sn-glisero-3-fosfokolin (DSPC, 25 mg / mL) ve 1 mL IR 1048 (kloroformda 1 mg / mL) ekleyin. Stokun kirlenmesini önlemek için lipitler / boya arasındaki şırıngaları temizlemeyi unutmayın. NOT: Kızılötesi boyalar ışığa duyarlıdır ve loş koşullarda çalışma yapılmalı veya şişeler alüminyum folyo ile kaplanmalıdır.</li>
	<li>Döner bir evaporatör kullanarak çözücüyü çıkarın. Çarpmayı önlemek için vakumun yavaşça 332 mbar'a ayarlandığından emin olun. 5 dakika sonra, çözeltiye girmiş olabilecek suyu çıkarmak için basıncı 42 mbar'a düşürün. NOT: Lipit kek, 4 ° C'de parafilm ile kaplı yuvarlak tabanlı bir şişede gece boyunca saklanabilir.</li>
	<li>Lipid kekini 1 mL fosfat tamponlu salin (PBS) ve sonikat veya vorteks içinde oda sıcaklığında 5 dakika boyunca veya lipit kekinin tamamı askıya alınıp çözelti içinde çözülene kadar askıya alın. Çözeltiyi homojenize etmek için 2 dakika daha sonikat yapın.</li>
	<li>Çözeltiyi 7 mL'lik bir cam şişeye aktarın ve gaz geçirmez bir cam şırınga kullanarak 50 μL perfloroheksan eklemeden önce çözeltinin 5 dakika soğumasını sağlamak için şişeyi buzla dolu bir cam kaba yerleştirin. Şırıngayı şişeye dağıtmadan önce perfloroheksan ile durulamayı unutmayın.</li>
	<li>Lipitleri ve buz banyosunu içeren cam şişeyi prob sonicator muhafazasına yerleştirin ve prob ucunu miniscusun altına batırın. Sonikatör probunun kenarlarının cam şişenin dudağına temas etmediğinden emin olun.</li>
	<li>Prob, karışımı aşağıdaki ayarlarla sonikleştirin: Genlik 1, İşlem süresi: 20 s, Darbe-Açık: 1s, Darbe kapalı: 5s. Daha sonra aşağıdaki ayarlarda sonikat: Genlik: 50, İşlem süresi: 5 s, Darbe açma: 1 s, Darbe kapalı: 10 s.</li>
	<li>Nanodamlacık çözeltisini 1,5 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın ve daha büyük damlacıkları (>1 μm) daha küçük damlacıklardan ayırmak için 3 dakika boyunca 300 x g'de santrifüj yapın.</li>
	<li>Peleti atın ve süpernatantı başka bir 1,5 mL santrifüj tüpüne aktarın. Süpernatantı 3000 x g'da santrifüjleyerek 5 dakika boyunca yıkayarak çözeltideki tüm damlacıkları toplayın. Pelet yukarı ve aşağı pipetleyerek PFCnD'leri 1 mL PBS'de yeniden askıya alın ve ardından 1 dakika boyunca bir banyo sonikatöründe sonikasyon yapın.</li>
	<li>Dinamik ışık saçılımı (DLS) kullanarak damlacıkların boyutunu ölçün. Stok PFCnD'leri 100 kat seyreltin (990 μL PBS'de 10 μL PFCnD stoğu) ve ölçmeden önce PFCnD'leri dağıtmak için banyo sonikat. Temsili sonuçlar Şekil 1'de gösterilmiştir.</li>
	<li>Nanopartikül izleme analizörünü kullanarak PFCnD'lerin konsantrasyonunu belirleyin (bkz. Konsantrasyonun doğru ölçümünü sağlamak için PFCnD'leri 100-1000 kat seyreltin. Protokol tipik olarak 1010 parçacık / mL mertebesinde bir konsantrasyonda damlacıklar verir.</li>
	<li>50 mL'lik bir santrifüj tüpünde 10 mL ultrason kaplin jeli hazırlayın ve ~ 108 parçacık / mL çözeltisi yapmak için% 1 (v / v) veya 100 μL PFCnD ekleyin. Vorteks karıştırmak için çözüm. Kabarcıkları gidermek için karışımı 4000 x g'de 3 dakika boyunca santrifüj yapın.</li>
</ol>2. Poliakrilamid hayalet preparat
<ol><li>500 mL'lik bir vakum şişesini 400 mL deiyonize suyla doldurarak suyu degazdan arındırın, kauçuk bir mantarla kapatın ve şişeyi vakum hattına bağlayın. Vakum hattını açın ve şişenin altını banyo sonikatörüne batırın. 5 dakika boyunca veya hiçbir gaz kabarcığı oluşumu görünmeyene kadar sonikat.</li>
	<li>5 mL gazdan arındırılmış suda 500 mg eriterek% 10 amonyum persülfat (APS) çözeltisi hazırlayın. Amonyum persülfat tamamen çözünmezse çözeltiyi yavaşça döndürün.</li>
	<li>Bir karıştırma plakası üzerinde karıştırma çubuğu bulunan 400 mL'lik bir beherde, 200 mL% 10 akrilamid çözeltisi oluşturmak için 150 mL gazdan arındırılmış su ve 50 mL% 40 (w / v) akrilamid çözeltisi ekleyin. Kabarcıklar sokmadan uygun karıştırmaya izin vermek için karışımı 200 rpm'de karıştırın. DİKKAT: Akrilamid bir kanserojendir ve tüm çalışmalar, özellikle toz halinde akrilamid ile çalışıyorsanız, eldivenli bir duman başlığında yapılmalıdır.</li>
	<li>400 mg silika tartın ve% 0.2 (w / v) silika ve akrilamid çözeltisi oluşturmak için adım 2.3'ten% 10 akrilamid-bisakrilamid çözeltisine ekleyin. DİKKAT: Solunduğunda silika kanserojen olabilir. Tartım da dahil olmak üzere tüm işler bir duman davlumbazında yapılmalıdır.</li>
	<li>Plastik transfer pipetinin uçlarını keserek ve laboratuvar bandı ile kalıpta destekleyerek silindirik bir kapanıma sahip 58 mm x 58 mm x 78 mm kare bir kalıp hazırlayın. Bkz. Şekil 2.</li>
	<li>%0,1'lik son konsantrasyonda APS yapmak için beherin içine 2 mL'lik %10 APS çözeltisi ekleyin ve fantom çözeltisine 250 μL Tetrametilenidiamin (TEMED) ekleyin. Çözeltinin kısaca karıştırılmasına izin verin (bir dakikadan az).</li>
	<li>Çözeltiye hava kabarcıkları sokmamaya dikkat ederken, çözeltiyi kalıba hızlı bir şekilde dökün. Çözelti 10 dakika içinde polimerize olmalıdır. Bir laboratuvar spatulasının düz ucunu kalıbın kenarı etrafında çalıştırarak ve kalıbı ters çevirerek hayaleti çıkarın. NOT: Bu hayaletler birden çok kez tekrar kullanılabilir ve suya batırılmalı ve 4 ° C'de saklanmalıdır.</li>
</ol>3. Perflorokarbon nanodamlacık görüntüleme
<ol><li>Darbeli lazer sistemini üretici talimatlarını izleyerek ~ 20 dakika boyunca açın ve ısıtın. Fiber optik demetinin lazer çıkışına düzgün bir şekilde bağlandığından ve iki bacağın fiber demet tutucusuna düzgün bir şekilde yerleştirildiğinden emin olun.</li>
	<li>Ultrason görüntüleme sistemini açın, dizi görüntüleme dönüştürücüsünü (L11-4v) sisteme bağlayın ve görüntüleme düzlemini lazer kesiti ile hizalamak için dönüştürücüyü tutucu içinde sabitleyin.</li>
	<li>Lazer sisteminin darbe tekrarlama frekansını 10Hz'e ayarlayın ve enerjiyi ölçmek için fiber demetinin sonuna bir güç ölçer yerleştirin. Q-switch gecikmesini tahmini akıcılık 70 mJ/cm2 olana kadar ayarlayın. DİKKAT: Lazer ateşlenirken uygun gözlükler giyilmeli ve lazer perdeler alanı kapatmalıdır.</li>
	<li>Poliakrilamid fantomdaki kanallardan birini, 1 mL plastik kayma ucu şırıngası kullanarak ultrason jeli / PFCnD karışımı ile doldurun. Kanalın üst kısmını ultrason jeli ile serbestçe örtün ve 1 mL plastik kayma ucu şırıngası ile kabarcıkları çıkarın. Poliakrilamid fantomu Şekil 3'te gösterildiği gibi dönüştürücü ve fiber demeti altına yerleştirin.</li>
	<li>PFCnD'yi optik aktivasyonla senkronize olarak görüntülemek için20 yazılımına dayanan kombine lazer ultrason ve elastikiyet (CLUE) görüntüleme platformunu kullanın. Görüntüleme için Param yapısındaki genel kullanıcı tanımlı parametreleri değiştirin: başlangıç/bitiş derinliğini 0/40 mm, merkez frekansını 6,9 MHz ve dönüştürücü adını 'L11-4v' olarak ayarlayın.</li>
	<li>Yeni bir RunCase tanımlayın ve PFHnD'lerin tekrarlanan optik aktivasyonu/yoğuşması ve ABD görüntülemesi için bir modül dizisi tasarlayın. Bu, ultra hızlı görüntüleme (mUF), harici lazer (mExtLaser) ve boşta (mIdle) gibi önceden tanımlanmış modülleri listeleyerek yapılır.<ol><li>Hem n-pulse hem de p-pulse görüntüleme verilerini almak için mExtLaser-mIdle-mUF-mExtLaser-mUF sıra kümesini iki kez tekrarlayın. NOT: Her dizideki ilk mExtLaser modül, ExtLaser.Enable değeri 0 olarak ayarlanarak sahte lazer olarak ayarlanır ve lazer aktivasyonundan sonra arka plan ABD görüntüleri ile n/p-pulse US görüntüleri arasındaki süreyi en aza indirmek için 'mIdle' dahil edilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Geçerli çalıştırma durumunun modül sırasına yerleştirilen her modül için modül parametrelerini ayarlayın. Her modül parametresine, modül sırasındaki sırasına karşılık gelen dizine göre erişin. Modüller, burada ayarlanan modül parametreleri kullanıcı tarafından önceden tanımlanmış işlemleri yürütür.<ol><li>Harici lazer modüllerinde ExtLaser.QSdelay'i adım 3.3'te ayarlanan lazer Q-switch gecikme değerinin mikrosaniyeler cinsinden değerine ayarlayın. Bu modül, lazer sisteminin el feneri tetiğinin sönmesini bekler ve QSdelay'de belirtilen gecikmeden sonra Q-switch tetikleyicisi oluşturur.</li>
		<li>Ultra hızlı görüntüleme modülünde, Resource.numFrame'i 100'e, SeqControl.PRI'yi 200 (μs) olarak ayarlayın ve P-darbesi için TW.polarite'yi 1'e ve N-darbesi için -1'e ayarlayın (karşılık gelen darbe şekli için bkz . Bu modül, TW.polaritesinde belirtilen darbe tipi ile ultra hızlı 0 derecelik düzlemsel dalga iletecektir.<ol><li>Resource.numFrame'deki kare sayısı, SeqControl.PRI'nin darbe tekrarlama aralığı için 38,8 mm genişliğinde tam diyaframlı görüntüleme penceresi elde edin, ardından çevrimdışı işleme için verileri kaydedin.</li>
		</ol></li>
		<li>Boştayken modüldeki SeqControl.lastPRI_Module, Q-anahtarı gecikmesi, görüntüleme veri toplama süresi (20 ms) ve sinyalin hareket etmesi için 20 μs kenar boşluğu ile çıkarılan lazer darbeleri arasındaki süreye (100 ms) ayarlayın. Bu modül, görüntüleme verilerinin toplanmasının sonu ile bir sonraki lazer darbe uyarımı arasındaki zaman boşluğunu doldurmak için SeqControl.lastPRI_Module sistemi 'çalışma yok' durumunda tutar.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Schutt, E. G., Klein, D. H., Mattrey, R. M., Riess, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+microbubbles+as+contrast+agents+for+diagnostic+ultrasound+imaging%3A+the+key+role+of+perfluorochemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">Injectable microbubbles as contrast agents for diagnostic ultrasound imaging: the key role of perfluorochemicals.</a> Angewandte Chemie International Edition. 42 (28), 3218-3235 (2003).</li>
<li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbubbles+used+for+contrast+enhanced+ultrasound+and+theragnosis%3A+a+review+of+principles+to+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Engineering+Letters%22%5BJournal%5D)">Microbubbles used for contrast enhanced ultrasound and theragnosis: a review of principles to applications.</a> Biomedical Engineering Letters. 7 (2), 59-69 (2017).</li>
<li>Hobbs, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+transport+pathways+in+tumor+vessels%3A+Role+of+tumor+type+and+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Regulation of transport pathways in tumor vessels: Role of tumor type and microenvironment.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 95 (8), 4607-4612 (1998).</li>
<li>Ishida, O., Maruyama, K., Sasaki, K., Iwatsuru, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-dependent+extravasation+and+interstitial+localization+of+polyethyleneglycol+liposomes+in+solid+tumor-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Size-dependent extravasation and interstitial localization of polyethyleneglycol liposomes in solid tumor-bearing mice.</a> International Journal of Pharmaceutics. 190 (1), 49-56 (1999).</li>
<li>Wong, Z. Z., Kripfgans, O. D., Qamar, A., Fowlkes, J. B., Bull, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+evolution+in+acoustic+droplet+vaporization+at+physiological+temperature+via+ultra-high+speed+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">Bubble evolution in acoustic droplet vaporization at physiological temperature via ultra-high speed imaging.</a> Soft Matter. 7 (8), 4009(2011).</li>
<li>Yu, J., Chen, X., Villanueva, F. S., Kim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vaporization+and+recondensation+dynamics+of+indocyanine+green-loaded+perfluoropentane+droplets+irradiated+by+a+short+pulse+laser%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Physics+Letters%22%5BJournal%5D)">Vaporization and recondensation dynamics of indocyanine green-loaded perfluoropentane droplets irradiated by a short pulse laser.</a> Applied Physics Letters. 109 (24), 243701(2016).</li>
<li>Kripfgans, O. D., Fowlkes, J. B., Miller, D. L., Eldevik, O. P., Carson, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acoustic+droplet+vaporization+for+therapeutic+and+diagnostic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Acoustic droplet vaporization for therapeutic and diagnostic applications.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 26 (7), 1177-1189 (2000).</li>
<li>Aliabouzar, M., Kumar, K. N., Sarkar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acoustic+vaporization+threshold+of+lipid-coated+perfluoropentane+droplets%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Acoustic vaporization threshold of lipid-coated perfluoropentane droplets.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 143 (4), 2001-2012 (2018).</li>
<li>Sheeran, P. S., Luois, S., Dayton, P. A., Matsunaga, T. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formulation+and+acoustic+studies+of+a+new+phase-shift+agent+for+diagnostic+and+therapeutic+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Formulation and acoustic studies of a new phase-shift agent for diagnostic and therapeutic ultrasound.</a> Langmuir. 27 (17), 10412-10420 (2011).</li>
<li>Sheeran, P. S., Luois, S. H., Mullin, L. B., Matsunaga, T. O., Dayton, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+of+ultrasonically-activatable+nanoparticles+using+low+boiling+point+perfluorocarbons%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Design of ultrasonically-activatable nanoparticles using low boiling point perfluorocarbons.</a> Biomaterials. 33 (11), 3262-3269 (2012).</li>
<li>Wilson, K., Homan, K., Emelianov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomedical+photoacoustics+beyond+thermal+expansion+using+triggered+nanodroplet+vaporization+for+contrast-enhanced+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Biomedical photoacoustics beyond thermal expansion using triggered nanodroplet vaporization for contrast-enhanced imaging.</a> Nature Communications. 3 (1), 618(2012).</li>
<li>Strohm, E., Rui, M., Gorelikov, I., Matsuura, N., Kolios, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vaporization+of+perfluorocarbon+droplets+using+optical+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Vaporization of perfluorocarbon droplets using optical irradiation.</a> Biomedical Optics Express. 2 (6), 1432(2011).</li>
<li>Wei, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+cavitation+in+nanoemulsion+with+gold+nanospheres+for+blood+clot+disruption%3A+in+vitro+results%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Letters%22%5BJournal%5D)">Laser-induced cavitation in nanoemulsion with gold nanospheres for blood clot disruption: in vitro results.</a> Optics Letters. 39 (9), 2599(2014).</li>
<li>Hannah, A., Luke, G., Wilson, K., Homan, K., Emelianov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+green-loaded+photoacoustic+nanodroplets%3A+Dual+contrast+nanoconstructs+for+enhanced+photoacoustic+and+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Indocyanine green-loaded photoacoustic nanodroplets: Dual contrast nanoconstructs for enhanced photoacoustic and ultrasound imaging.</a> ACS Nano. 8 (1), 250-259 (2014).</li>
<li>Lajoinie, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrafast+vapourization+dynamics+of+laser-activated+polymeric+microcapsules%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Ultrafast vapourization dynamics of laser-activated polymeric microcapsules.</a> Nature Communications. 5 (1), 3671(2014).</li>
<li>Hannah, A. S., Luke, G. P., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blinking+phase-change+nanocapsules+enable+background-free+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Blinking phase-change nanocapsules enable background-free ultrasound imaging.</a> Theranostics. 6 (11), 1866-1876 (2016).</li>
<li>Santiesteban, D. Y., Hallam, K. A., Yarmoska, S. K., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Color-coded+perfluorocarbon+nanodroplets+for+multiplexed+ultrasound+and+photoacoustic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Research%22%5BJournal%5D)">Color-coded perfluorocarbon nanodroplets for multiplexed ultrasound and photoacoustic imaging.</a> Nano Research. 12 (4), 741-747 (2019).</li>
<li>Luke, G. P., Hannah, A. S., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+ultrasound+imaging+in+vivo+with+transient+laser-activated+nanodroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Super-resolution ultrasound imaging in vivo with transient laser-activated nanodroplets.</a> Nano Letters. 16 (4), 2556-2559 (2016).</li>
<li>Zhu, Y. I., Yoon, H., Zhao, A. X., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leveraging+the+imaging+transmit+pulse+to+manipulate+phase-change+nanodroplets+for+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Ultrasonics%2C+Ferroelectrics%2C+and+Frequency+Control%22%5BJournal%5D)">Leveraging the imaging transmit pulse to manipulate phase-change nanodroplets for contrast-enhanced ultrasound.</a> IEEE Transactions on Ultrasonics, Ferroelectrics, and Frequency Control. 66 (4), 692-700 (2019).</li>
<li>Yoon, H., Zhu, Y. I., Yarmoska, S. K., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+demonstration+of+a+configurable+imaging+platform+for+combined+laser%2C+ultrasound%2C+and+elasticity+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Medical+Imaging%22%5BJournal%5D)">Design and demonstration of a configurable imaging platform for combined laser, ultrasound, and elasticity imaging.</a> IEEE Transactions on Medical Imaging. 38 (7), 1622-1632 (2019).</li>
<li>Taylor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ostwald+ripening+in+emulsions%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Ostwald ripening in emulsions.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 75 (2), 107-163 (1998).</li>
<li>Freire, M. G., Dias, A. M. A., Coelho, M. A. Z., Coutinho, J. A. P., Marrucho, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+mechanisms+of+perfluorocarbon+emulsions+using+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Aging mechanisms of perfluorocarbon emulsions using image analysis.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 286 (1), 224-232 (2005).</li>
<li>Yarmoska, S. K., Yoon, H., Emelianov, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+shell+composition+plays+a+critical+role+in+the+stable+size+reduction+of+perfluorocarbon+nanodroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Lipid shell composition plays a critical role in the stable size reduction of perfluorocarbon nanodroplets.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 45 (6), 1489-1499 (2019).</li>
<li>Sheeran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decafluorobutane+as+a+phase-change+contrast+agent+for+low-energy+extravascular+ultrasonic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Decafluorobutane as a phase-change contrast agent for low-energy extravascular ultrasonic imaging.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 37 (9), 1518-1530 (2011).</li>
<li>Lin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optically+and+acoustically+triggerable+sub-micron+phase-change+contrast+agents+for+enhanced+photoacoustic+and+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Photoacoustics%22%5BJournal%5D)">Optically and acoustically triggerable sub-micron phase-change contrast agents for enhanced photoacoustic and ultrasound imaging.</a> Photoacoustics. 6, 26-36 (2017).</li>
<li>Sheeran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+generating+submicrometer+phase-shift+perfluorocarbon+droplets+for+applications+in+medical+ultrasonography%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Ultrasonics%2C+Ferroelectrics%2C+and+Frequency+Control%22%5BJournal%5D)">Methods of generating submicrometer phase-shift perfluorocarbon droplets for applications in medical ultrasonography.</a> IEEE Transactions on Ultrasonics, Ferroelectrics, and Frequency Control. 64 (1), 252-263 (2017).</li>
<li>Shui, L., vanden Berg, A., Eijkel, J. C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+attoliter+monodisperse+droplet+formation+using+multiphase+nano-microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluidics+and+Nanofluidics%22%5BJournal%5D)">Scalable attoliter monodisperse droplet formation using multiphase nano-microfluidics.</a> Microfluidics and Nanofluidics. 11 (1), 87-92 (2011).</li>
<li>Jeong, W. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+generation+of+submicron+emulsion+droplets+via+highly+stable+tip-streaming+mode+in+microfluidic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Controlled generation of submicron emulsion droplets via highly stable tip-streaming mode in microfluidic devices.</a> Lab on a Chip. 12 (8), 1446(2012).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+production+of+nanoscale+perfluorocarbon+droplets+as+liquid+contrast+agents+for+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Microfluidic production of nanoscale perfluorocarbon droplets as liquid contrast agents for ultrasound imaging.</a> Lab on a Chip. 17 (20), 3504-3513 (2017).</li>
<li>Song, R., Peng, C., Xu, X., Zou, R., Yao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facile+fabrication+of+uniform+nanoscale+perfluorocarbon+droplets+as+ultrasound+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluidics+and+Nanofluidics%22%5BJournal%5D)">Facile fabrication of uniform nanoscale perfluorocarbon droplets as ultrasound contrast agents.</a> Microfluidics and Nanofluidics. 23 (1), 12(2019).</li>
<li>Liedtke, S., Wissing, S., Müller, R. H., Mäder, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+high-pressure+homogenisation+equipment+on+nanodispersions+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Influence of high-pressure homogenisation equipment on nanodispersions characteristics.</a> International Journal of Pharmaceutics. 196 (2), 183-185 (2000).</li>
<li>Reznik, N., Williams, R., Burns, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+vaporized+submicron+perfluorocarbon+droplets+as+an+ultrasound+contrast+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Investigation of vaporized submicron perfluorocarbon droplets as an ultrasound contrast agent.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 37 (8), 1271-1279 (2011).</li>
<li>Grapentin, C., Barnert, S., Schubert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+stability+of+perfluorocarbon+nanoemulsions+by+cryo-TEM+image+analysis+and+dynamic+light+scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Monitoring the stability of perfluorocarbon nanoemulsions by cryo-TEM image analysis and dynamic light scattering.</a> Plos One. 10 (6), 0130674(2015).</li>
<li>de Gracia Lux, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+method+for+the+formation+of+monodisperse+superheated+perfluorocarbon+nanodroplets+as+activatable+ultrasound+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Advances%22%5BJournal%5D)">Novel method for the formation of monodisperse superheated perfluorocarbon nanodroplets as activatable ultrasound contrast agents.</a> RSC Advances. 7 (77), 48561-48568 (2017).</li>
<li>Zell, K., Sperl, J. I., Vogel, M. W., Niessner, R., Haisch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acoustical+properties+of+selected+tissue+phantom+materials+for+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Acoustical properties of selected tissue phantom materials for ultrasound imaging.</a> Physics in Medicine and Biology. 52 (20), 475-484 (2007).</li>
<li>Hariri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyacrylamide+hydrogel+phantoms+for+performance+evaluation+of+multispectral+photoacoustic+imaging+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Photoacoustics%22%5BJournal%5D)">Polyacrylamide hydrogel phantoms for performance evaluation of multispectral photoacoustic imaging systems.</a> Photoacoustics. 22, 100245(2021).</li>
<li>Denisin, A. K., Pruitt, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+the+range+of+polyacrylamide+gel+stiffness+for+mechanobiology+applications%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Applied+Materials+%26+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Tuning the range of polyacrylamide gel stiffness for mechanobiology applications.</a> ACS Applied Materials & Interfaces. 8 (34), 21893-21902 (2016).</li>
<li>Rajagopal, S., Sadhoo, N., Zeqiri, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+characterisation+of+sound+speed+and+attenuation+of+the+iec+agar-based+tissue-mimicking+material+up+to+a+frequency+of+60+MHz%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Reference characterisation of sound speed and attenuation of the iec agar-based tissue-mimicking material up to a frequency of 60 MHz.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 41 (1), 317-333 (2015).</li>
<li>Madsen, E. L., Zagzebski, J. A., Banjavie, R. A., Jutila, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+mimicking+materials+for+ultrasound+phantoms%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Physics%22%5BJournal%5D)">Tissue mimicking materials for ultrasound phantoms.</a> Medical Physics. 5 (5), 391-394 (1978).</li>
<li>Kharine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28vinyl+alcohol%29+gels+for+use+as+tissue+phantoms+in+photoacoustic+mammography%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Poly(vinyl alcohol) gels for use as tissue phantoms in photoacoustic mammography.</a> Physics in Medicine and Biology. 48 (3), 357-370 (2003).</li>
<li>Kim, H., Chang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+photoacoustic+imaging+as+a+tool+for+sentinel+lymph+node+identification+and+biopsy+guidance%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Engineering+Letters%22%5BJournal%5D)">Multimodal photoacoustic imaging as a tool for sentinel lymph node identification and biopsy guidance.</a> Biomedical Engineering Letters. 8 (2), 183-191 (2018).</li>
<li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+nanoparticle-promoted+droplet+vaporization+for+in+vivo+stimuli-responsive+cancer+theranostics%5BTitle%5D)+AND+%22NPG+Asia+Materials%22%5BJournal%5D)">Magnetic nanoparticle-promoted droplet vaporization for in vivo stimuli-responsive cancer theranostics.</a> NPG Asia Materials. 8 (9), 313(2016).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Prob sonikasyonu, PFCnD'leri imal etmek için nispeten basit ve öğrenmesi kolay bir yöntemdir. Dikkat edilmesi gereken birkaç adım vardır. Kloroform kullanıldığında, uçucu olduğu ve standart hava yer değiştirmeli pipetlerden "sızacağı" için pozitif yer değiştirmeli pipet veya cam şırıngaların kullanılması zorunludur. Ayrıca, pozitif bir yer değiştirme kullanılıyorsa, kloroform olarak uygun bir ucun kullanıldığından emin olun, bu da kirleticileri çözeltiye sokabilecek çoğu plastik ucu çözecektir. Perfloroheksan için poziti...

Mikrokabarcıklar, yumuşak dokulara kıyasla biyouyumluluğu ve mükemmel ekojenitesi nedeniyle en yaygın ultrason kontrast maddesidir. Bu, onları kan akışını, organ tanımlamasını ve diğer uygulamaları görselleştirmek için değerli araçlar haline getirir1. Bununla birlikte, rezonans frekanslarına göre görüntüleme için onları istisnai kılan boyutları (1-10 μm), uygulamalarını vaskülatür2 ile sınırlar.
Bu sınırlama, sıvı bir perflorokarbon çekirdeğin etrafına yerleştirilmiş bir yüzey aktif maddeden oluşan nano-emülsiyonlar olan PFCnD'lerin gelişmesine yol açmıştır. Bu nanopartiküller 200 nm kadar küçük boyutlarda sentezlenebilir ve tümör vaskülatüründe bulunan "sızdıran" vaskülatür veya gözeneklerden ve açık fenestrasyonlardan yararlanmak için tasarlanmıştır. Bu bozulmalar tümöre bağımlı olsa da, bu geçirgenlik, tümör 3,4'e bağlı olarak nanopartiküllerin ~ 200 nm - 1.2 μm'den ekstravazasyonuna izin verir. İlk formlarında, bu parçacıklar ultrason kontrastı çok az üretir veya hiç üretmez. Buharlaşma üzerine - akustik veya optik olarak indüklenir - çekirdek faz sıvıdan gaza değişir, 5,6,7 çapında iki buçuk ila beş kat artışa neden olur ve fotoakustik ve ultrason kontrastı üretir. Akustik buharlaştırma en yaygın aktivasyon yöntemi olsa da, bu yaklaşım buharlaşmanın görüntülenmesini sınırlayan akustik eserler yaratır. Ek olarak, çoğu perflorokarbon,8'i buharlaştırmak için güvenlik eşiğinin ötesinde mekanik bir indekse sahip odaklanmış ultrason gerektirir. Bu, mikrokabarcıkların nanodamlacıklara yoğunlaştırılmasıyla sentezlenebilen daha düşük kaynama noktası PFCnD'lerin gelişmesine yol açmıştır9. Bununla birlikte, bu damlacıklar daha uçucudur ve kendiliğinden buharlaşmaya maruz kalır10.
Öte yandan, optik damlacık buharlaşması (ODV), nanopartiküller 11,12,13 veya boya 6,14,15 gibi bir optik tetikleyicinin eklenmesini gerektirir ve ANSI güvenlik sınırı 11 içindeki akıcılıkları kullanarak daha yüksek kaynama noktası perflorokarbonlarını buharlaştırabilir. Daha yüksek kaynama noktası çekirdekleriyle sentezlenen PFCnD'ler daha kararlıdır ve buharlaşmadan sonra yeniden yoğunlaşır, arka planda olmayan görüntüleme16, çoklama17 ve süper çözünürlüklü18'e izin verir. Bu tekniklerin en büyük sınırlamalarından biri, yüksek kaynama noktası PFCnD'lerin buharlaşmadan sonra sadece kısa bir zaman diliminde, milisaniye19 ölçeğinde ekojenik olması ve nispeten soluk olmasıdır. Bu sorun, tekrarlanan buharlaşmalar ve ortalamalar yoluyla hafifletilebilirken, damlacık sinyalinin algılanması ve ayrılması bir zorluk olmaya devam etmektedir.
Nabız inversiyonundan ilham alarak, ultrason görüntüleme nabzının fazını değiştirerek süre ve kontrast arttırılabilir19. Ultrason görüntüleme nabzını nadir faz (n-pulse) ile başlatarak, buharlaştırılmış PFCnD'lerin hem süresi hem de kontrastı artar. Buna karşılık, ultrason görüntüleme darbesini bir sıkıştırma fazı (p-darbesi) ile başlatmak, kontrastın azalmasına ve sürenin kısalmasına neden olur. Bu makalede, optik olarak tetiklenebilir perflorokarbon nanodamlacıkların, görüntülemede yaygın olarak kullanılan poliakrilamid hayaletlerin nasıl sentezleneceği açıklanacak ve akustik modülasyon yoluyla kontrast artışı ve gelişmiş sinyal ömrünün nasıl gösterileceği anlatılacaktır.

<table><tbody><tr><td>Amonyum Persülfat (APS)</td><td>VWR</td><td>97064-592</td><td></td></tr><tr><td>1,2-distearoil-sn-glisero-3-fosfokolin (DSPC)</td><td>Avanti Polar Lipidler</td><td>850365C</td><td>Lipitler, bunlar kloroformda veya toz halinde süspansiyon halinde satın alınabilir. Uzun süreli depolama için toz form en iyisidir ancak kloroform daha pratiktir.</td></tr><tr><td>1,2-distearoil-sn-glisero-3-fosfoetanolamin-N-[metoksi (polietilen glikol)-2000] (amonyum tuzu) (DSPE-PEG)</td> <td>Avanti Polar Lipidler</td><td>880120C</td><td>Lipitler, bunlar kloroformda veya toz halinde süspansiyon halinde satın alınabilir. Uzun süreli depolama için toz form en iyisidir ancak kloroform daha pratiktir.</td></tr><tr><td>Akrilamid: Bisakrilamid çözeltisi (19:1) %40 (a/h), OmniPur&reg;</td><td>VWR</td><td>EM-1300</td><td>akrilamid çözeltisi, düşük konsantrasyon / toz</td></tr><tr><td>IR-1048</td><td>Sigma</td><td>405175</td><td>Kızılötesi boya</td></tr><tr><td>L11-4v</td><td>Verasonics-ultrason</td><td></td> <td>doğrusal dizi dönüştürücü</td></tr><tr><td>Prob sonikatörü</td>için<td>Microtip 1/8 "</td><td>Qsonica LLC</td><td>4418</td> mikrotip</tr><tr><td>N, N, N & prime;, N&prime; -Tetrametiletilendiamin (TEMED)</td> <td>VWR</td><td>97064-902</td><td>Amonyum persülfat varlığında serbest radikaller oluşturarak poliakrilamidin polimerize edilmesinde kullanılır</td></tr><tr><td>Nova II</td><td>Ophir-Spiricon</td><td>7Z01550</td><td>lazer güç ölçer</td></tr><tr><td>Perfloroheksan</td><td>Floromlu</td><td>APF-60M</td><td>perflorokarbon sıvı</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin (PBS) tabletleri</td><td>VWR</td><td>97062-732</td> PBS <td></td></tr><tr><td>Q500</td><td>Qsonica LLC</td> <td>yapmak için kullanılan tabletlerQ500-110</td><td>Prob sonikatörü</td></tr><tr><td>Silika jel</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>288500</td><td>2-25 & m parçacık boyutu</td></tr><tr><td>Tempest 30</td><td>Yeni dalga</td> <td>araştırma-Darbeli</td> <td>lazer sistemi</td></tr><tr><td>Vantage 128</td><td>Verasonics-araştırma</td><td></td> <td>ultrason görüntüleme sistemi</td></tr><tr><td>Zetasizer Nano ZS</td><td>Malvern Instruments Ltd-Dinamik</td><td></td> <td>ışık saçılımına dayalı boyut ölçümleri yapar</td></tr></tbody></table>

optik olarak buharlaştırılmış perflorokarbon nanodamlacıkların formülasyonu ve akustik modülasyonu

Formulation and Acoustic Modulation of Optically Vaporized Perfluorocarbon Nanodroplets

Mikrokabarcıklar ultrasonda en sık kullanılan görüntüleme kontrast maddesidir. Bununla birlikte, büyüklüklerinden dolayı, vasküler bölmelerle sınırlıdırlar. Bu mikro kabarcıklar, ekstravazasyon için yeterince küçük olan ve daha sonra hedef bölgede akustik olarak tetiklenen perflorokarbon nanodamlacıklar (PFCnD'ler) olarak yoğunlaştırılabilir veya formüle edilebilir. Bu nanopartiküller, yakın kızılötesi organik boya veya nanopartiküller (örneğin, bakır sülfür nanopartikülleri veya altın nanopartiküller / nanoçubuklar) gibi bir optik emici dahil edilerek daha da geliştirilebilir. Optik olarak etiketlenmiş PFCnD'ler, optik damlacık buharlaştırma (ODV) olarak bilinen bir işlemde lazer ışınlaması yoluyla buharlaştırılabilir. Bu aktivasyon işlemi, tanısal görüntüleme için maksimum mekanik indeks eşiği altında akustik olarak buharlaştırılamayan yüksek kaynama noktalı perflorokarbon çekirdeklerin kullanılmasını sağlar. Daha yüksek kaynama noktası çekirdekleri, buharlaşmadan sonra yeniden yoğunlaşacak damlacıklarla sonuçlanır, bu da nanodamlacık formuna geri yoğuşmadan önce buharlaşmadan sonra kısa bir süre kontrast üreten PFCnD'lerin "yanıp sönmesine" neden olur. Bu işlem, talep üzerine kontrast üretmek için tekrarlanabilir, böylece hem optik hem de akustik modülasyon yoluyla arka planda serbest görüntüleme, çoklama, süper çözünürlük ve kontrast iyileştirme sağlar. Bu makale, prob sonikasyonunu kullanarak optik olarak tetiklenebilir, lipit kabuğu PFCnD'lerin nasıl sentezleneceğini, nanodamlacıkları karakterize etmek için poliakrilamid hayaletlerinin nasıl oluşturulacağını ve kontrastı iyileştirmek için ODV'den sonra PFCnD'lerin akustik olarak nasıl modüle edileceğini gösterecektir.

PFCnD'lerin başarılı bir şekilde formüle edilmesi ve santrifüjlü olarak ayrılması, çapı 200-300 nm civarında damlacıklar vermelidir (Şekil 1A). Yanlış ayrılmış damlacıklar 1 μm civarında küçük zirveler gösterebilir. Bu çözeltiler, daha büyük damlacıkları parçalamak için daha fazla banyo sonikleştirilebilir. Ostwald olgunlaşması21,22 olarak bilinen bir süreçte birleşme ve / veya difüzyon nedeniyle damlacıkların boyutu zamanla artacaktır (</...

Optik olarak aktive edilmiş perflorokarbon nanodamlacıklar, vasküler sistem dışındaki görüntüleme uygulamalarında umut vaat etmektedir. Bu makale, bu parçacıkların nasıl sentezleneceğini, poliakrilamid hayaletlerinin çapraz bağlanacağını ve sinyallerini arttırmak için damlacıkların akustik olarak nasıl modüle edileceğini gösterecektir.

Optik Olarak Buharlaştırılmış Perflorokarbon Nanodamlacıkların Formülasyonu ve Akustik Modülasyonu

Microbubbles are the most commonly used imaging contrast agent in ultrasound. However, due to their size, they are limited to vascular compartments. These ...

Bu protokol, optik olarak buharlaştırılmış perflorokarbon nanodamlacıklarının basit ve hızlı bir sentezine izin verir ve bu parçacıkların performansını artırmak için bir yöntem sağlar. Kişi versiyonu, önce ultrason görüntülemenin fazını manipüle ederek kontrastın arttırılmasına izin verir. Ek ekipman gerektirmez ve herhangi bir programlanabilir ultrason sisteminde gerçekleştirilebilir.10 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişeyi kloroformla durulayarak başlayın ve 10 mikrolitre ve bir mililitrelik gaz geçirmez cam şırıngayı kloroform ile yıkayın, tam şırınga hacmini tekrar tekrar aspire ederek ve toplam üç kez dışarı atarak. Şırıngaları kullanarak, yuvarlak tabanlı şişeye mililitre başına 200 mikrolitre 25 miligram DSPE-mPEG-2000, mililitre DSPC başına sekiz mikrolitre 10 miligram ve mililitre IR-1048 başına bir mililitre bir mililitre ekleyin. Stoktaki kontaminasyonu önlemek için lipitler veya boya arasındaki şırıngaları temizlemeyi unutmayın.Döner bir evaporatör kullanarak çözücüyü çıkarın. Çarpmayı önlemek için vakumun yavaşça 332 milibara ayarlandığından emin olun. Beş dakika sonra, çözeltiye girmiş olabilecek suyu çıkarmak için basıncı 42 milibara düşürün.Lipid kekini bir mililitre PBS içinde askıya alın ve oda sıcaklığında beş dakika boyunca veya tüm lipit keki askıya alınıp çözelti içinde çözülene kadar sonikat veya vorteks yapın. Çözeltiyi yedi mililitrelik bir cam şişeye aktarın ve çözeltinin beş dakika soğumasını sağlamak için şişeyi buzla dolu bir cam kaba yerleştirin. Perfloroheksan ile gaz geçirmez bir cam şırıngayı durulayın.Daha sonra şırıngayı kullanarak şişeye 50 mikrolitre perfloroheksan ekleyin. Prob, karışımı genlik bire ayarlanmış, işlem süresi 20 saniyeye ayarlanmış, bir saniyeye ayarlanmış darbeyle ve beş saniyeye ayarlanmış darbeyle sonikleştirin. Ardından, metin el yazmasında belirtildiği gibi ayarları değiştirin ve karışımı bir kez daha sonikleştirin.Nano damlacık çözeltisini 1,5 mililitrelik bir santrifüj tüpüne aktarın ve bir mikrometreden fazla olan daha büyük damlacıkları daha küçük damlacıklardan ayırmak için üç dakika boyunca 300 g'da santrifüj yapın. Peleti atın ve süpernatantı başka bir 1,5 mililitrelik santrifüj tüpüne aktarın. Çözeltideki tüm damlacıkları peletlemek için süpernatantı beş dakika boyunca 3.000 g'da santrifüj yaparak yıkayın.Pelet yukarı ve aşağı pipetleyerek PFCnD'leri bir mililitre PBS'de yeniden askıya alın ve ardından bir dakika boyunca bir banyo sonikatöründe sonikleştirin. Boyutlarını ölçmeden önce PFCnD'leri dağıtmak için 990 mikrolitre PBS'ye 10 mikrolitre PFCnD stoğu ve banyo sonikatına 100 mikrolitre PFCnD stoğu ekleyerek stok PFCnDs 100 kat seyreltin. Dinamik ışık saçılımını kullanarak damlacıkların boyutunu ölçün.500 mililitrelik bir vakum şişesini 400 mililitre deiyonize suyla doldurarak suyu degazdan arındırın, kauçuk bir mantarla kapatın ve şişeyi vakum hattına bağlayın. Vakum hattını açın ve şişenin tabanını banyo sonikatörüne batırın. Beş dakika boyunca veya gaz kabarcığı oluşumu görünmeyene kadar sonikatlayın.500 miligramı beş mililitre gazdan arındırılmış suda çözerek sülfat çözeltisi başına% 10 amonyum hazırlayın. Amonyum persülfat tamamen çözünmezse çözeltiyi yavaşça döndürün. Bir karıştırma plakası üzerinde bir karıştırma çubuğuna sahip 400 mililitrelik bir beherde, 200 mililitre% 10 akrilamid bisakrilamid çözeltisi oluşturmak için 150 mililitre gazdan arındırılmış su ve 50 mililitre 40 akrilamid bisakrilamid çözeltisi ekleyin.Kabarcıklar sokmadan uygun karıştırmaya izin vermek için karışımı 200 RPM'de karıştırın. 400 miligram silika tartın ve% 0.2'lik bir silika ve akrilamid çözeltisi oluşturmak için% 10 akrilamid bisakrilamid çözeltisine ekleyin. Plastik transfer pipetinden uçları keserek ve kalıpta laboratuvar bandı ile destekleyerek silindirik bir içerme ile kare bir kalıp hazırlayın.Son konsantrasyonu% 0.1 yapmak için beherin içine iki mililitre% 10 amonyum persülfat çözeltisi ekleyin ve fantom çözeltisine 250 mikrolitre TEMED ekleyin. Çözeltinin bir dakikadan az karıştırılmasına izin verin. Hava kabarcıklarını çözeltiye sokmamaya dikkat ederken çözeltiyi kalıba hızlı bir şekilde dökün.Çözelti 10 dakika içinde polimerize olmalıdır. Bir laboratuvar spatulasının düz ucunu kalıbın kenarı etrafında çalıştırarak ve kalıbı ters çevirerek hayaleti çıkarın. Darbeli lazer sistemini üretici talimatlarını izleyerek yaklaşık 20 dakika boyunca açın ve ısıtın.Fiber optik demetinin lazer çıkışına düzgün bir şekilde bağlandığından ve iki bacağın fiber demet tutucusuna düzgün bir şekilde yerleştirildiğinden emin olun. Ultrason görüntüleme sistemini açtıktan sonra, dizi görüntüleme dönüştürücüsünü sisteme bağlayın ve görüntüleme düzlemini lazer kesiti ile hizalamak için dönüştürücüyü tutucunun içine sabitleyin. Lazer sisteminin darbe tekrarlama frekansını 10 hertz'e ayarlayın ve enerjiyi ölçmek için fiber demetinin sonuna bir güç ölçer yerleştirin.Q anahtarı gecikmesini, tahmini akıcılık santimetre kare başına 70 milijoule olana kadar ayarlayın. Poli akrilamid fantomdaki kanallardan birini, bir mililitrelik plastik kayma ucu şırıngası kullanarak ultrason jeli ve PFCnD karışımı ile doldurun. Kanalın üstünü ultrason jeli ile serbestçe örtün ve bir mililitrelik plastik kayma ucu şırıngası ile kabarcıkları çıkarın.Son olarak, poli akrilamid fantomunu dönüştürücü ve fiber demetinin altına yerleştirin. PFCnD'lerin başarılı formülasyonu ve santrifüjlü separasyonu, çapı yaklaşık 200 ila 300 nanometre olan damlacıkları verir. Ostwald olgunlaşması olarak bilinen bir süreçte birleşme ve difüzyon nedeniyle damlacıkların boyutu zamanla artar.Son nabzın dahil edilmesinden kaynaklanan kontrastın yaklaşık 3.2 kat daha büyük olduğu, yani P-darbesinden% 220'lik bir iyileşme olduğu bulunmuştur. Hiperekoik alan her kare için hesaplandı ve ilk karenin hiperekoik alanı tarafından normalleştirildi ve daha sonra üstel bir bozunma modeline takıldı. Normalize hiperekoik alanın karakteristik bozunma süresi, N-pulse görüntülemede P-pulse ile karşılaştırıldığında 3.5 kat daha uzundu.B modu diferansiyel görüntü kareleri, her N-pulse ve P-pulse görüntüleme için zamanında kaydedildi. En önemli şeylerden biri, lipit kekine düzgün bir şekilde dahil edilmelerini sağlamak için şişenin altındaki lipitleri dışarı atmaktır.

formulation-acoustic-modulation-optically-vaporized-perfluorocarbon

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Damlacık tabanlı mikroakışkan platformları kHz oranları ucuza pikolitrelik, kendi kendine bölümlere damarları oluşturmak mümkün olduğundan yüksek kapasiteli deney için umut vaat eden adaylardır. Hızlı, hassas ve yüksek çözünürlüklü floresans spektroskopik yöntemleri ile entegrasyon sayesinde, bu sistemler içinde üretilen bilgilerin büyük miktarda verimli, ayıklanır, harnessed ve kullanılan olabilir.

Mikroakışkan damlacık platformları için Floresan algılama yöntemleri

Faz kaydırmalı nanoemulsions (PSNE) lokalize ısıtma geliştirmenize ve tümörlerde termal ablasyon geliştirmek için yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason kullanarak buharlaşmış olabilir. Bu yazıda, dar bir boyut dağılımı ile kararlı PSNE hazırlanması tarif edilmektedir. Ayrıca, ultrason aracılı ablasyonu konusunda buharlaşmış PSNE etkisini doku taklidi hayaletleri gösterilmiştir.

Akustik Damlacık buharlaşması ve Bubble-gelişmiş Ultrason aracılı Ablasyon için dar Boyut Dağılımları ile Faz-shift Nanoemulsions sentezi

Burada bu tür bunların kararlılığını ve hidrofobikliğini geliştirmek için metal-organik çerçeveler gibi mikro gözenekli malzemeler üzerinde perfluorobütanlar plazma geliştirilmiş kimyasal buhar biriktirme için işlemler açıklanmaktadır. Ayrıca, numune miligram miktarları atılım test ayrıntılı olarak anlatılmıştır.

Plazma ile Hidrofobik Metal-Organik Altyapıları hazırlanması Amonyak Kaldırma için perfluorobütanlar Kimyasal Buhar Kaplama Geliştirilmiş

İçi boş polimer parçacıkları ve radikal polimerizasyon stiren, Perfloro -noluşan emülsiyonlar kullanarak tarafından microcapsules imalatı için bir protokol-oktan ve sulu SDS (sodyum dodecylsulfate) çözüm sunulmaktadır.

İçi boş polistren parçacıklar ve Microcapsules oluşan hidrokarbon ve florokarbon yağlar Janus damlacıkları radikal polimerizasyon tarafından hazırlanması

Burada, imalat süreçleri ve bir semi-three-dimensional (yarı-3D) akışı odaklanarak mikrosıvısal çip damlacık oluşumu için doğrulama deneyler göstermek için bir iletişim kuralı mevcut.

Poli (etilen glikol) Diacrylate damlacıklar yoluyla yarı-3 boyutlu akış odaklanarak mikrosıvısal cihazlar boyutu kontrol nesil

Biz burada bir koku görüntülemek için uygulama için gerekli atomizasyon etkinliğini artırmak için amorf Teflon film ile yüzey akustik dalga (SAW) Cihazın yüzeyi kaplama için bir yöntem kurmak.

Koku görüntü için yüzey akustik dalga-Atomizer verimlilik geliştirme yöntemi

Protokolün genel amacı, hücre içermeyen protein sentezi için kullanılabilecek 1 cm2 düzlemsel substrat üzerinde bir milyondan fazla sipariş, üniforma, kararlı ve biyouyumlu femtolitre damlacıkları hazırlamaktır.

Tek DNA Moleküllerinden Kitlesel Paralel Protein Sentezi için Femtolitre Damlacık Dizisi

Lityum niyobat üzerindeki plaka elektrotlarının doğru akım püskürtmesi ile piezoelektrik kalınlık modu transdüserlerinin imalatı anlatılmaktadır. Ayrıca transdüser tutucu ve sıvı besleme sistemi ile güvenilir bir çalışma sağlanır ve epitendans analizi, lazer doppler vibrometri, yüksek hızlı görüntüleme ve lazer saçılma kullanılarak damlacık boyutu dağılımı ile karakterizasyon gösterilmiştir.

Atomizasyon ve Acoustofluidics için Kalınlık Modu Piezoelektrik Cihazların İmalatı ve Karakterizasyonu

Bu protokol, prob ucu sonikasyonu kullanarak büyük hacimlerde lipid kapsüllenmiş decafluorobutane mikrobubbles üretme ve daha sonra yüksek basınçlı ekstrüzyon ve mekanik filtrasyon kullanarak faz kaydırma nanodropletlerine yoğuşma yöntemini açıklar.

Önceden Biçimlendirilmiş Mikrobubbles'tan Membran Filtreli Faz KaydırmaLı Decafluorobutane Nanodroplets Üretimi

Bu protokolde, çok modlu faz değişikliği porfirin damlacıklarını sentezleme ve karakterize etme yöntemleri özetlenmiştir.

Çok Modlu Faz Değiştirme Porfirin Damlacıklarının Sentezi ve Karakterizasyonu

Burada, kontrollü damla boyutuna sahip yüksek monodispers emülsiyonlar üretmek için kullanılan cam bazlı mikroakışkan cihazların üretilmesine yönelik bir protokol sunulmaktadır.

Damla ve Emülsiyon Üretmek için Cam Bazlı Cihazlar

Öğrenin, optik buharlaştırılmış perflorokarbon nanodamlacıkların formülasyonunu ve akustik modülasyonunu. Bu yöntem, programlanabilir ultrason sistemlerinde görüntüleme kontrastını artırır ve ek ekipman gerektirmez.

Optik Olarak Buharlaştırılmış Perflorokarbon Nanodamlacıkların Formülasyonu ve Akustik Modülasyonu

Daha fazla video keşfet