26 Ekim 2021
Bu çalışma, köpeklerde somatosensoriyel sistemi değerlendirmek için mekanik ve sıcak termal kantitatif duyusal testler için standart bir protokolü açıklamaktadır. Duyusal eşikler elektronik von Frey anestezi ölçer, basınç algometresi ve sıcak temas termodu kullanılarak ölçülür.
Kantitatif duyusal test veya QST kullanarak köpeklerde duyusal eşikleri değerlendirmek için kullanılan bu protokol, farklı çalışmalar arasında değerli karşılaştırmalara izin veren çalışmaların standartlaştırılmasına yardımcı olacaktır. Bu teknik, köpeklerde duyusal eşikleri ölçmek için invaziv olmayan bir yöntem sağlar. Protokolümüz, araştırmacılara doğru ve tutarlı veriler elde etmek için en iyi uygulamalar konusunda rehberlik etmeye yardımcı olur.
Bu protokol, ameliyatları takip etmek ve kronik ağrı durumlarıyla ilişkili hastalıklar da dahil olmak üzere köpeklerde ağrı hissi mekanizmaları hakkında bilgi sağlayabilir. Bu tekniğin en önemli yönü, köpek davranışlarının farkında olmaktır. Güvenli ve doğru bir test sağlamak için, ilgili herkes köpeğin davranışlarına ve kaygı düzeylerine dikkat etmelidir.
Yük hücresine sert bir 0,9 milimetre Von Frey ucu nazikçe uygulayarak ve yük hücresinin el aletine güvenli bir şekilde vidalandığından emin olarak cihaz kurulumunu düzenlemeye başlayın. Ardından el aletinden gelen kabloyu M0 kanalı üzerinden kayıt cihazına bağlayın. Ardından, kayıt cihazını açın ve köpek uygulanan uyarana yanıt verdiğinde elde edilen maksimum kuvveti kaydetmek ve görüntülemek için max düğmesine basın.
CLR düğmesine basarak cihazı sıfırlayın. Verileri toplamak ve eşikleri ölçmek için köpeğe uzanmasını söyleyin ve ardından köpeğe yanal yaslanma pozisyonuna gelmesine yardımcı olun. Köpeği pozisyonda ve nispeten hareketsiz tutmak için minimum ila orta derecede kısıtlama uygulayın.
Uzvu yerden uzak tutmak için test edilen köpeğin uzvuna nazik bir manuel destek sağlayın ve köpeğin uzvunu geri çekmesini engellemeden kuvvet uygulamak için sabit bir destek sağlayın. Köpek sakinleşip rahatladığında, uzuv %70 uzamada test edilirken, uyaranı bir kez uygulayın. Von Frey ucunu test edilen alanın cildine dik olarak yerleştirin.
Köpek, Von Frey ucunun derideki hissinden dolayı refleks hareketleri sergiliyorsa, Von Frey ucunu tekrar uygulamadan önce köpeğin uzvunu tekrar gevşetmesine izin verin. Cilt refleks hareketlere neden olmadığında Von Frey ucunu uygulayarak ölçüm yapın. Köpek uzvunu çekene, ses çıkarana kadar Von Frey ucu ile saniyede 20 gram hızla sürekli artan bir kuvvet uygulayın.
uyarana bakmak için döner veya uyaranın bilinçli algısını gösteren başka hareketler veya davranışsal tepkiler sergiler. Köpek uzvu geri çektiğinde veya maksimum kuvvete ulaşıldığında uyaranı kaldırın ve kayıt cihazında görüntülenen uygulanan maksimum kuvveti kaydedin. Ölçümleri beş deneme için tekrarlayın, köpek nispeten sakin ve rahat kalırsa, kısıtlama olmadan veya minimum kısıtlama ile yanal yaslanma ile her ölçüm arasında bir dakika izin verin.
CLR düğmesine basarak her adım arasında cihazı sıfırlayın. Ardından, veri toplamanın kolaylığını belirtmek için sıfır ile beş arasında bir fizibilite puanı kaydedin. Künt problu basınç algometresi ile ölçümlere başlamadan önce köpeğe beş dakika ara verin.
Cihazı kurarken, küçük kör probun cihaza güvenli bir şekilde vidalandığından emin olun. Ardından kayıt cihazını açın ve ekranda istendiğinde devam etmek için max düğmesine basın. Birim ekranın üst kısmında gram olarak görüntülenene kadar birim düğmesine basın ve cihazı sıfırlamak için sıfır düğmesine basın.
Daha sonra, daha önce belirtildiği gibi eşikleri ölçmek için köpeği yanal yaslanma pozisyonuna yerleştirin ve hazırlayın. Köpek uyaranın bilinçli algısını gösteren davranışsal tepkiler sergileyene kadar prob ile saniyede 20 gram hızla sürekli artan bir kuvvet uygulamak için test edilen alanın derisine dik olarak künt probu uygulayın. Köpek uzvu geri çektiğinde veya maksimum kuvvete ulaşıldığında uyaranı çıkarın.
Kayıt cihazından uygulanan maksimum kuvveti kaydettikten sonra, ölçümleri toplam beş deneme için tekrarlayın. Denemeler arası aralık sırasında konforu korumak için köpeğin oturmak, ayakta durmak veya QST odasında hareket etmek için yanal yaslanmada kalmasına izin verin. Ardından, bir sonraki ölçümden önce köpeği yanal yaslanma ile değiştirin.
Verilerin toplanma kolaylığını belirtmek için sıfır ile beş arasında bir fizibilite puanı kaydedin. Sıcak termal prob ile ölçümlere başlamadan önce köpeğe beş dakika ara verin. Deneye başlamadan önce, köpeği daha önce açıklandığı gibi hazırlayın.
Ardından termodu test edilen alanın cildine uygulayın ve testi başlatmak için test sekmesinin sol alt köşesindeki başlat düğmesine tıklayın. Köpek, uyaranın bilinçli algısını gösteren hareketler veya davranışsal tepkiler sergilediğinde veya maksimum gecikmeye ulaşıldığında, aynı anda kronometreyi durdururken termodu çıkarın. Para çekmek için gecikmeyi kaydedin.
Termodu ısıtmayı durdurmak için önce durdur düğmesine ve ardından her ölçüm arasında ön test düğmesine tıklayarak ölçümleri toplam beş deneme için tekrarlayın. Bu, yazılımın bir sonraki uygulamaya hazırlanmak için termodu yeniden kalibre etmesine izin verecektir. Verilerin toplanma kolaylığını belirtmek için sıfır ile beş arasında bir fizibilite puanı kaydedin.
Temsili analiz, bir grup sağlıklı ağrısız köpekten elde edilen mekanik ve sıcak termal QST verilerini özetler. Elektronik Von Frey anesteziyometresi duyusal eşik ölçümlerinden elde edilen veriler, vücut ağırlıklarının duyusal eşikler üzerinde anlamlı bir etkisi olmadığını göstermiştir. Vücut ağırlıklarının benzer bir etkisi, künt problu basınç algometresi, duyusal eşiklerden elde edilen verilerde fark edildi.
Öte yandan, sıcak termal prob duyusal gecikmesi için toplanan veriler, vücut ağırlığının duyusal gecikme üzerinde önemli bir etkisi olduğunu göstermiştir. Mekanik ve sıcak termal QST için genel ortalama, standart sapma ve duyusal eşik aralığı, aynı sağlıklı ağrısız köpek grubunda özetlenmiştir. Bu, bu teknikleri kullanan gelecekteki araştırmacılar için referans değerler sağlar: Köpeğin, farklı köpekler için farklı görünebilecek uyaranın bilinçli algısını gösteren davranışsal tepkisini güvenilir bir şekilde tanımlamak çok önemlidir.
Kantitatif duyusal testlere ek olarak, doğrulanmış sahip anketleri ve duygusal reaktivite testleri yoluyla davranışsal bilgi toplamak, köpeğin duygusal durumunun kapsamlı bir değerlendirmesini sağlamaya yardımcı olabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, mekanik ve sıcak termal yöntemler kullanarak somatosensör sistemi değerlendirmek amacıyla köpeklerde kantitatif duyusal test (QST) için standart bir protokol sunmaktadır. Elektronik von Frey anesteziometresi ve basınç algometresi gibi araçların kullanımıyla, bu protokol farklı çalışmalar arasında karşılaştırmalara olanak tanıyan değerlendirmeleri standartlaştırmayı hedeflemektedir.
Köpeklerde kantitatif duyusal testler (QST), somatosensoriyel fonksiyonu değerlendirmek için standartlaştırılmış, noninvaziv bir yaklaşım sunarak translasyonel ağrı araştırmalarını ve karşılaştırmalı model geliştirmeyi destekler. Referans duyusal eşiklerin ve davranışsal son noktaların belirlenmesi, analjezik adaylarının daha öngörülebilir preklinik değerlendirmesine ve veteriner ile karşılaştırmalı nörobilim süreçlerinde mekanistik risklerin azaltılmasına olanak tanır. Standartlaştırılmış QST protokolleri, çalışmalar ve merkezler arası veri karşılaştırılabilirliğini kolaylaştırarak erken keşif ve translasyonel araştırmalardaki portföy karar verme süreçlerini güçlendirir.
QST; ağrı ve duyusal bozukluk geliştirme süreçlerinde hedef doğrulama, öncü bileşik optimizasyonu ve translasyonel biyobelirteç geliştirme için fonksiyonel bir okuma yöntemi olarak, keşiften preklinik aşamaya kadar uzanan sürekliliğe entegre olur.