In Vivo Büyük Hayvanlarda Retina Ganglion Hücre ve Optik Sinir Fonksiyonu ve Yapısını Değerlendirme Yöntemleri

Herkese merhabalar. Ben Wenzhou Göz Hastanesi'nden Yikui Zhang. Üst sinirde orexin ganglion hücrelerinden Exxons yok ve sonra görsel sinyali beyne ilet.

Yeni tedaviyi robot modelden lenf uygulamasına çevirmek için daha büyük bir üst sinir yaralanması modeli gereklidir. Burada, büyük hayvanlarda üst sinirdeki orexin ganglion hücrelerinin yapısını ve işlevini değerlendirmek için bazı in vivo yöntemleri açıklıyoruz. Bu yöntemi adım adım sunarak, deneysel üreme engellerini artırmayı ve daha büyük optik nevroz modellerinin kullanımını kolaylaştırmayı umuyoruz.

Elektronik jiletle tıraş edin. Ve cildi temizlemek ve deri altı damarını açığa çıkarmak için üç kez% 70 alkolle hazırlayın. İntravenöz olarak periferik venöz bir hintkenar yerleştirin.

Sonra atropin ve propofol damlatın. Keçiyi altı milimetre trakeal tüple entübe edin ve suni bir solunum cihazına bağlayın. Anestezi, oksijende %3,5 izofluran ile sabit iki litre yönetilen debide korundu.

Sıcaklık sensörini keçi dilinin altına yerleştirin. Oksijen doygunluğu bölünmesini keçi kulağının proksimal ucuna kırpın. Kan basıncı manşetini uyluğun tabanına bağlayın.

EKG yarıklarını sırayla uzuvlara sıkıştırın. Daha sonra, keçinin hayati göstergelerini izleyebiliriz. Saçı tıraş edin ve ön kemiğin merkezinde üç kez betadin ve% 70 alkol ile cildi dezenfekte edin.

Makas ve tırnak içeren sterilizatör torbasını açın. Kafatasını makasla ortaya çıkarmak için deri kesileri yapın. Ön kemiğin ortasına implante için çelik vidalar.

Saçları tıraş edin ve oksipital kemikte iki kulağın orta noktasında cildi betadin ve% 70 alkol ile üç kez dezenfekte edin. Deri kesileri yapın. Oksipital kemikte iki kulağın orta noktasına implante için çelik vidalar.

Zemin iğnesi elektrodu, ön kafatası vidasının altına deri altından yerleştirilir. Aktif elektrot ve referans elektrot, elektrot iktidarsızlığını azaltmak için sırasıyla timsah klipsleri ile ön ve oksipital vidalara bağlanır. Bir gözünü yama.

Oküler yüzeye topikal anestezi göz damlaları uygulayın. Her iki taraftaki gözbebekleri midriazis göz damlaları ile genişler. Keçinin kafasını gaz dolu bir uyarıcıya yerleştirin.

Siyah battaniyeyi beş dakikalık adaptasyon için uyarıcı ve keçi kafasının üzerine yerleştirin. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Elektrot dokusu teması iktidarsızlığını kontrol edin.

Aynı odadaki diğer elektrikli cihazlardan elektromanyetik paraziti önlemek için iktidarsızlığın her biri için 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü kontrol edin. FVEP kaydını başlatın.

Her ışık yoğunluğunda FVEP kaydının iki kez gerçekleştirildiğini unutmayın. Korneayı kuru görünüyorsa yapay yırtıkla nemlendirmeyi unutmayın. Kontralteral göz için adımlar hakkında tekrarlayın.

FVEP kaydını art arda farklı ışık yoğunluklarında başlatın. Her kayıt için, bir dalga formu vermek için ortalama 64 iz vardır. FVEP dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirve P1 ve N1 olarak belirlenmişti. Sterilize edilmiş yer elektrotu kulak memesi içine yerleştirilmiştir.

Sterilize edilmiş aktif ve referans elektrotlar sırasıyla orta hat ve frontal ve oksipital kemik boyunca deri altı olarak yerleştirilir. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Bir gözünü yama.

Diğer gözün desen VEP yanıtlarını ardışık olarak farklı uzamsal frekanslarda kaydedin. Bir timsah klipsi ile yer elektrodlarına bağlanın. İki sterilize iğne referans elektrodu, her iki taraftaki yanal kantusun bir santimetre gerisinde derinin altına yerleştirilir.

Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. İki adet dezenfekte edilmiş ERG kayıt elektrotları, yapay yırtılmanın topikal uygulamasından sonra her iki korneayı da ortalar. Her gözün önüne 50 santimetre görüş mesafesine sahip iki uyarıcı yerleştirilir.

İktidarsızlığın 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü izleyin. Ambulant ışığı hedef al.

Her iki gözden de art arda farklı uzamsal frekanslarda desen ERG kaydını başlatın. Son olarak, ekranın görsel uyarıcılar ve etkin bir kontrol olmadan desen ERG'yi kaydetmek için geri dönüşü. Bandpass filtresi, üç CPD desen ERG için bir ila 75 Hertz arasında değişecek şekilde ayarlanmıştır.

Bandpass filtresi, genliğini etkilemeden şekli yumuşatmak için bir ila 50 Hertz arasındadır. Dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirveler P1 ve N1 olarak belirlenmiştir. N1'den elektrot iktidarsızlığını azaltmak P1.To için ölçülen ERG genliği deseni, ön cildin altına sterilize edilmiş bir iğne referansı yerleştirilir. Ve sterilize edilmiş bir iğne referans elektrotu, bir taraftaki yanal kantusun bir santimetre arkasına deri altına yerleştirilir.

Yapay gözyaşının topikal bir uygulaması üzerine kornea üzerine dezenfekte edilmiş bir ERG kayıt elektrot yerleştirilir. Bir gözünü yama. 50 santimetre görüş mesafesine bir ekran yerleştirilir.

Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Daha sonra, keçi çene istirahatinin üzerine yerleştirilir. Keçiyi kamera ile hizalayarak optik sinir kafasını konfokal tarama lazer oftalmoskopi görüntüsüne baş pozisyonunu değiştirerek gönderin.

Algılama bitiş aşamasına girmek için başlat düğmesini tıklatın. Makinenin yüklenmesini bekleyin. Resmi görüntülemeyi başlatmak için sarı başlat düğmesine basın.

Görüntü kalitesini artırmak için kızılötesi görüntüyü eşit şekilde aydınlatmak için oyun çubuğunu ayarlayın. Sağ üst ekranda dik retinal OCT görüntüsü gösterilene kadar kamerayı öne kaydırın. Joystick'i yatay retinaL OCT görüntüde eşit şekilde dans edecek şekilde değiştirin.

Görüntünüzü otomatik olarak yakalamak için oyun çubuğundaki düğmeye basın. Görüntü yürütme tamamlanana kadar canlı görüntü ekranında görüntü kalitesini korumak için bu oyun çubuğunu basılı tutun. O zaman acquire tuşuna bas.

Yüksek kaliteli bir başlangıç fotoğrafı seçin. Sağ tıklatın ve başvuru ayarla'yı seçin. Programın geçerli taramayı temel taramayla otomatik olarak eşleştirmesine izin vermek için izleme düğmesine basın.

Eşleştirildikten sonra, otomatik gerçek zamanlı izlemeyi etkinleştirmek için oyun çubuğundaki düğmeye bastı. Ölçüm platformuna girmek için ölçüm düğmesini tıklatın. Silgiyi bir araç seçin ve makine tarafından otomatik olarak etiketlenen RFL hattını silin.

IPL ve INL arasındaki sınırı el ile anahat oluşturmak için çizgi çizim aracını seçin. Kırmızı ve mavi çizgiler arasında GCC kompleksi vardır. Rhesus makaktaki retina altered görüntüleme, keçide kullanılanlarla aynı ekipman ve prosedür kullanılarak gerçekleştirilir.

Şekil A keçide temsili FVEP gösterir. Şekil B keçide temsili desen ERG dalga formunu gösterir. Şekil C, rhesus makakında temsili desen FVEP'i gösterir.

Ve şekil D rhesus makak temsili desen ERG dalga formu gösterir. Şekil iki, optik sinir kafasının etrafındaki temsili retinal OCT görüntülerini ve keçi ve rhesus makaktaki farklı periferik bölgelerde GCC kompleksinin kalınlığını göstermektedir. Büyük hayvan modeli çeviri araştırmalarında önemli bir rol oynar.

Birçok durumda, küçük hayvan modellerinde umut verici terapötik etkiler insan hastalara çevrilemedi. Bu çalışmada keçi ve rhesus makaklarında FVEP, PERG ve OCT video protokolünü sunduk. Bu in vivo yöntem, glokom iskemik veya travmatik optik nöropati ve optik nörit gibi çeşitli optik nevrozların daha büyük modelinde uygulanabilir.