Name: In Vivo Büyük Hayvanlarda Retina Ganglion Hücre ve Optik Sinir Fonksiyonu ve Yapısını Değerlendirme Yöntemleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 18 s
Description: Keşfedin büyük hayvanlarda retina ganglion hücreleri ve optik sinir fonksiyonunu değerlendiren FVEP, PERG ve OCT yöntemlerini. Keçi ve rhesus makaklarında görsel sinyal iletimini inceleyen bu protokol, nörolojik tedavilerin klinik uygulamalara aktarılmasına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma aşağıdaki hibelerle finanse edildi: Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2021YFA1101200); Wenzhou Tıbbi Araştırma Projesi (Y20170188), Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2016YFC1101200); Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81770926;81800842); Zhejiang Eyaleti Anahtar Ar-Ge Programı (2018C03G2090634); ve Wenzhou Göz Hastanesi (YNZD1201902) Anahtar Ar-Ge Programı. Sponsor veya finansman kuruluşunun bu araştırmanın tasarımında veya yürütülmesinde hiçbir rolü yoktu.

<ol><li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rewiring+the+injured+CNS%3A+lessons+from+the+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li>
<li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN%2FmTOR+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li>
<li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy%3A+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li>
<li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li>
<li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+control+of+axon+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li>
<li>Yang, S. -G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cellular+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119(2020).</li>
<li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurologic+Clinics%22%5BJournal%5D)">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li>
<li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indirect+traumatic+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Military+Medical+Research%22%5BJournal%5D)">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2(2016).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve%27s+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117(2020).</li>
<li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+Rhesus+macaque+to+human%3A+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses%5BTitle%5D)+AND+%22mAbs%22%5BJournal%5D)">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li>
<li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPreuss%2C+T+%22Specializations+of+the+human+visual+system%3A+the+monkey+model+meets+human+reality%22">Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality</a>. , CRC Press. Boca Raton, FL. 231-259 (2004).</li>
<li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li>
<li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li>
<li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+retinal+ganglion+cell+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Eye%22%5BJournal%5D)">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li>
<li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li>
<li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats%3A+electrodes%2C+stimulus+source+and+peak+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials%3A+%282016+update%29%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881(2019).</li>
<li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical%2C+horizontal%2C+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li>
<li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+pattern+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak herhangi bir çıkar çatışması yok.

Bu çalışmada keçi ve rhesus makaklarında VEP, PERG ve OCT protokolünü sunuyoruz. Bu in vivo yöntemler glokom, iskemik veya travmatik optik nöropati ve optik nörit9 gibi çeşitli optik nöropatilerin büyük hayvan modellerinde uygulanabilir9.
PVEP, FVEP17'den daha kararlı ve hassastır; ancak, goat9'da ortaya çıkaramaz. Bu nedenle FVEP keçide, PVEP ise retino-genikülo-kortikal yolun bütünlüğünü değerlendirmek için labo...

Retina ganglion hücrelerinden (RGC) gelen aksonlardan oluşan optik sinir (ON), retinadan beyne görsel sinyal iletir. Glokom, travmatik veya iskemik optik nöropati gibi ON hastalıkları genellikle geri dönüşü olmayan ON / RGC dejenerasyonuna ve yıkıcı görme kaybına neden oldu. Kemirgen modellerinde ON rejenerasyon ve RGC korumasında şu anda birçok atılım olmasına rağmen1,2,3,4,5,6, ON hastalıklarının çoğu için klinik tedaviler son yarım yüzyılda tatmin edici olmayan sonuçlarla temelde aynı kaldı7,8 . Temel araştırma ve klinik uygulama arasındaki boşluğu doldurmak için, ON hastalıklarının büyük hayvan modelini kullanan çeviri çalışmaları, insanlara kemirgen modellerinden daha yakın anatomik benzerlikleri nedeniyle genellikle gerekli ve faydalıdır.
Keçi ve rhesus makaklar, laboratuvarımızda insanın ON hastalığını modellemek için kullanılan iki büyük hayvan türüdür. Bir keçinin göz küresi, ON ve bitişik yapının büyüklüğü (orbital ve burun boşluğu, kafatası tabanı, vb.) kafatası CT taramasına dayanan bir insanınkine benzer9. Bu nedenle, keçi modeli insanlarda kullanılmadan önce terapötik cihazları veya cerrahi prosedürleri değerlendirmek ve iyileştirmek için bir fırsat sağlar. Rhesus makak, insan olmayan primat (NHP) olarak, diğer türlerde bulunmayan insan benzeri benzersiz bir görsel sisteme sahiptir10,11. Ek olarak, NHP'deki yaralanmalara ve tedavilere verilen patofizyolojik yanıtlar insanlardakine çok benzer12.
ON ve RGC'nin yapısını ve işlevini uzunlamasına değerlendirmek için in vivo testler büyük hayvan çalışmalarında önemlidir. RGC fonksiyonunu değerlendirmek için desen elektroretinogramı (PERG) kullanılmıştır. Flash görsel uyarılmış potansiyel (FVEP), retino-geniculo-kortikal yolun görsel sistemdeki bütünlüğünü yansıtır. Böylece, PERG FVEP ile birlikte ON işlevini yansıtabilir9,13,14 . Retina optik koherens tomografisi (OCT) görüntülemesi, retina ganglion kompleksinin (GCC)9,15 kalınlığının ölçülmesine olanak sağlayan yüksek zamansal ve mekansal çözünürlüğe sahip retina yapısını gösterebilir. Bu çalışmadaki elektrofizyolojik incelemeler için, testten önce hayati belirtilerin (ısı oranı, ihlal oranı, kan basıncı) ve oksijen doygunluk seviyesinin (SpO2) izlenmesi çok önemlidir, çünkü bu parametrelerin oküler kan akışı ve dolayısıyla görsel sistemin işlevi üzerinde güçlü etkileri vardır. Ancak, basitlik adına OCT retina görüntüleme yaparken hayati belirtileri izlemedik. Önceki çalışmamıza göre9, OCT retina görüntüleme ile ölçülen GCC kalınlığı oldukça kararlıdır ve seanslar arası değişim katsayısı% 3'e yakındır. Keçi ve rhesus makaklarındaki bu in vivo testler önceki çalışmamızda ayrıntılı olarak açıklanmıştır9. Burada deneysel şeffaflığı ve tekrarlanabilirliği artırmaya yardımcı olmak için bu yöntemleri sunuyoruz.

<table><tbody><tr><td>47,6 x 26,8 cm monitörler</td><td>DELL Inc.</td><td>E2216HV</td><td>Kontrast ters siyah-beyaz dama tahtalarının görsel uyaranları ekranlarda görüntülendi</td></tr><tr><td>6.0 mm trakeal tüp</td><td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td><td>PVC 6.0</td><td>hava yolu</td></tr><tr><td>timsah klipsi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>atropin</td><td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co., Ltd.</td><td></td><td>bronş salgısını azaltmak ve kalbi vagal sinir aktivasyonundan korumak</td></tr><tr><td>Karbomer Göz Jeli</td><td>Fabrik GmbH Bausch & Lomb</td><td></td><td>korneayı nemlendirin ve kayıt elektrotlarını stabilize</td></tr> edin <tr><td>ERG-Jet kayıt elektrotları</td><td>Roland Consult Stasche& Finger GmbH</td><td>2300 La Chaux-De-Fonds</td><td>ERG kayıt</td></tr><tr><td>göz spekulumu</td><td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td><td>ZYD020</td><td>açık palpebral fissür</td></tr><tr><td>Heidelberg Spectralis OCT sistemi</td><td>Heidelberg Mühendislik</td><td></td><td>OCT sistemi</td></tr><tr><td>Görüntüleme</td><td></td><td></td> <td>( https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td></tr> <tr><td>izofluran</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R510-22</td><td>izofluran anestezi</td></tr><tr><td>erkek Saanen keçileri</td><td>Caimu Hayvancılık Şirketi, ülke (Hangzhou, Çin)</td><td></td> <td>4 ila 6 aylık erkek Saanen keçileri, 19 &ndash ağırlığında; 23 kg</td></tr><tr><td>iğne elektrot</td><td>Roland Consult Stasche& Finger GmbH</td><td>U51-426-GD</td>, <td>FVEP toprak elektrodu ve PERG referans elektrotları için</td></tr><tr><td>intravenöz perifer venöz kateter kullanımı</td><td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd,</td><td>atropin ve propofol propofol için intravenöz erişim</td><td>383019</td></tr><tr><td></td><td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co., Ltd.</td><td></td><td>keçi</td></tr><tr><td>Tropikalamid Fenilefrin Göz Damlasında</td> İzofluran anestezisini indükleyin <td>SANTEN OY, Japonya</td><td></td><td>% 5 tropikamid ve% 5 fenilefrin hidroklorür</td></tr><tr><td>görsel elektrofizyoloji cihazı</td><td>Gotec Co., Ltd</td> FVEP & için <td>GT-2008V-III</td><td>kullanımı PERG</td></tr><tr><td>ksilazin</td><td>Huamu Hayvan Sağlığı Ürünleri Co., Ltd.</td><td></td><td>ksilazin anestezisi: ksilazin 3mg / kg</td></tr><tr><td>zoletil50</td><td>Virbac'ın</td><td></td> kas içi enjeksiyonu, <td>maymunda İzofluran anestezisini indükledi</td></tr></tbody></table>

in vivo büyük hayvanlarda retina ganglion hücre ve optik sinir fonksiyonu ve yapısını değerlendirme yöntemleri

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Optik sinir, retina ganglion hücrelerinden akson sinyallerini toplar ve beyne görsel sinyal iletir. Optik sinir hasarının büyük hayvan modelleri, boyut ve anatomi olarak insanlara daha yakın benzerlikleri nedeniyle kemirgen modellerinden klinik uygulamaya yeni terapötik stratejilerin çevrilmesi için gereklidir. Burada, görsel uyarılmış potansiyel (VEP), desen elektroretinogram (PERG) ve optik koherens tomografi (OCT) dahil olmak üzere büyük hayvanlarda retina ganglion hücrelerinin (RGC'ler) ve optik sinirin (ON) işlevini ve yapısını değerlendirmek için bazı in vivo yöntemleri açıklıyoruz. Bu çalışmada hem keçi hem de insan dışı primat istihdam edilmiştir. Bu in vivo yöntemleri adım adım sunarak, farklı laboratuvarlar arasında deneysel tekrarlanabilirliği artırmayı ve optik nöropatilerin büyük hayvan modellerinin kullanımını kolaylaştırmayı umuyoruz.

Şekil 1A keçide FVEP'nin temsili sonuçlarını göstermektedir. Aynı flaş yoğunluğundaki dalga formları göreceli benzerliğe sahip olsa da, dalga formlarını iki kez incelemenizi öneririz. Elektronik cihazlar tarafından oluşturulan elektromanyetik dalgalar toplanan elektrik sinyallerini bozarak yüksek taban çizgisi gürültüsüne ve dalga biçiminin zayıf tekrarlanabilirliğine neden olur. Bu nedenle, bu tür girişimlerden kaçınmak için elektrofizyolojik inceleme sırasında çevreye takılı gereksiz elekt...

Burada, optik sinirin ve nöronlarının yapısını ve işlevini anlamak için keçi ve rhesus makakında birkaç in vivo testi (flaş görsel uyarılmış potansiyel, desen elektroretinogramı ve optik koherens tomografisi) demostrate ediyoruz.

In Vivo Büyük Hayvanlarda Retina Ganglion Hücre ve Optik Sinir Fonksiyonu ve Yapısını Değerlendirme Yöntemleri

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

Herkese merhabalar. Ben Wenzhou Göz Hastanesi'nden Yikui Zhang. Üst sinirde orexin ganglion hücrelerinden Exxons yok ve sonra görsel sinyali beyne ilet.Yeni tedaviyi robot modelden lenf uygulamasına çevirmek için daha büyük bir üst sinir yaralanması modeli gereklidir. Burada, büyük hayvanlarda üst sinirdeki orexin ganglion hücrelerinin yapısını ve işlevini değerlendirmek için bazı in vivo yöntemleri açıklıyoruz. Bu yöntemi adım adım sunarak, deneysel üreme engellerini artırmayı ve daha büyük optik nevroz modellerinin kullanımını kolaylaştırmayı umuyoruz.Elektronik jiletle tıraş edin. Ve cildi temizlemek ve deri altı damarını açığa çıkarmak için üç kez% 70 alkolle hazırlayın. İntravenöz olarak periferik venöz bir hintkenar yerleştirin.Sonra atropin ve propofol damlatın. Keçiyi altı milimetre trakeal tüple entübe edin ve suni bir solunum cihazına bağlayın. Anestezi, oksijende %3,5 izofluran ile sabit iki litre yönetilen debide korundu.Sıcaklık sensörini keçi dilinin altına yerleştirin. Oksijen doygunluğu bölünmesini keçi kulağının proksimal ucuna kırpın. Kan basıncı manşetini uyluğun tabanına bağlayın.EKG yarıklarını sırayla uzuvlara sıkıştırın. Daha sonra, keçinin hayati göstergelerini izleyebiliriz. Saçı tıraş edin ve ön kemiğin merkezinde üç kez betadin ve% 70 alkol ile cildi dezenfekte edin.Makas ve tırnak içeren sterilizatör torbasını açın. Kafatasını makasla ortaya çıkarmak için deri kesileri yapın. Ön kemiğin ortasına implante için çelik vidalar.Saçları tıraş edin ve oksipital kemikte iki kulağın orta noktasında cildi betadin ve% 70 alkol ile üç kez dezenfekte edin. Deri kesileri yapın. Oksipital kemikte iki kulağın orta noktasına implante için çelik vidalar.Zemin iğnesi elektrodu, ön kafatası vidasının altına deri altından yerleştirilir. Aktif elektrot ve referans elektrot, elektrot iktidarsızlığını azaltmak için sırasıyla timsah klipsleri ile ön ve oksipital vidalara bağlanır. Bir gözünü yama.Oküler yüzeye topikal anestezi göz damlaları uygulayın. Her iki taraftaki gözbebekleri midriazis göz damlaları ile genişler. Keçinin kafasını gaz dolu bir uyarıcıya yerleştirin.Siyah battaniyeyi beş dakikalık adaptasyon için uyarıcı ve keçi kafasının üzerine yerleştirin. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Elektrot dokusu teması iktidarsızlığını kontrol edin.Aynı odadaki diğer elektrikli cihazlardan elektromanyetik paraziti önlemek için iktidarsızlığın her biri için 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü kontrol edin. FVEP kaydını başlatın.Her ışık yoğunluğunda FVEP kaydının iki kez gerçekleştirildiğini unutmayın. Korneayı kuru görünüyorsa yapay yırtıkla nemlendirmeyi unutmayın. Kontralteral göz için adımlar hakkında tekrarlayın.FVEP kaydını art arda farklı ışık yoğunluklarında başlatın. Her kayıt için, bir dalga formu vermek için ortalama 64 iz vardır. FVEP dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirve P1 ve N1 olarak belirlenmişti. Sterilize edilmiş yer elektrotu kulak memesi içine yerleştirilmiştir.Sterilize edilmiş aktif ve referans elektrotlar sırasıyla orta hat ve frontal ve oksipital kemik boyunca deri altı olarak yerleştirilir. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Bir gözünü yama.Diğer gözün desen VEP yanıtlarını ardışık olarak farklı uzamsal frekanslarda kaydedin. Bir timsah klipsi ile yer elektrodlarına bağlanın. İki sterilize iğne referans elektrodu, her iki taraftaki yanal kantusun bir santimetre gerisinde derinin altına yerleştirilir.Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. İki adet dezenfekte edilmiş ERG kayıt elektrotları, yapay yırtılmanın topikal uygulamasından sonra her iki korneayı da ortalar. Her gözün önüne 50 santimetre görüş mesafesine sahip iki uyarıcı yerleştirilir.İktidarsızlığın 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü izleyin. Ambulant ışığı hedef al.Her iki gözden de art arda farklı uzamsal frekanslarda desen ERG kaydını başlatın. Son olarak, ekranın görsel uyarıcılar ve etkin bir kontrol olmadan desen ERG'yi kaydetmek için geri dönüşü. Bandpass filtresi, üç CPD desen ERG için bir ila 75 Hertz arasında değişecek şekilde ayarlanmıştır.Bandpass filtresi, genliğini etkilemeden şekli yumuşatmak için bir ila 50 Hertz arasındadır. Dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirveler P1 ve N1 olarak belirlenmiştir. N1'den elektrot iktidarsızlığını azaltmak P1.To için ölçülen ERG genliği deseni, ön cildin altına sterilize edilmiş bir iğne referansı yerleştirilir. Ve sterilize edilmiş bir iğne referans elektrotu, bir taraftaki yanal kantusun bir santimetre arkasına deri altına yerleştirilir.Yapay gözyaşının topikal bir uygulaması üzerine kornea üzerine dezenfekte edilmiş bir ERG kayıt elektrot yerleştirilir. Bir gözünü yama. 50 santimetre görüş mesafesine bir ekran yerleştirilir.Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Daha sonra, keçi çene istirahatinin üzerine yerleştirilir. Keçiyi kamera ile hizalayarak optik sinir kafasını konfokal tarama lazer oftalmoskopi görüntüsüne baş pozisyonunu değiştirerek gönderin.Algılama bitiş aşamasına girmek için başlat düğmesini tıklatın. Makinenin yüklenmesini bekleyin. Resmi görüntülemeyi başlatmak için sarı başlat düğmesine basın.Görüntü kalitesini artırmak için kızılötesi görüntüyü eşit şekilde aydınlatmak için oyun çubuğunu ayarlayın. Sağ üst ekranda dik retinal OCT görüntüsü gösterilene kadar kamerayı öne kaydırın. Joystick'i yatay retinaL OCT görüntüde eşit şekilde dans edecek şekilde değiştirin.Görüntünüzü otomatik olarak yakalamak için oyun çubuğundaki düğmeye basın. Görüntü yürütme tamamlanana kadar canlı görüntü ekranında görüntü kalitesini korumak için bu oyun çubuğunu basılı tutun. O zaman acquire tuşuna bas.Yüksek kaliteli bir başlangıç fotoğrafı seçin. Sağ tıklatın ve başvuru ayarla'yı seçin. Programın geçerli taramayı temel taramayla otomatik olarak eşleştirmesine izin vermek için izleme düğmesine basın.Eşleştirildikten sonra, otomatik gerçek zamanlı izlemeyi etkinleştirmek için oyun çubuğundaki düğmeye bastı. Ölçüm platformuna girmek için ölçüm düğmesini tıklatın. Silgiyi bir araç seçin ve makine tarafından otomatik olarak etiketlenen RFL hattını silin.IPL ve INL arasındaki sınırı el ile anahat oluşturmak için çizgi çizim aracını seçin. Kırmızı ve mavi çizgiler arasında GCC kompleksi vardır. Rhesus makaktaki retina altered görüntüleme, keçide kullanılanlarla aynı ekipman ve prosedür kullanılarak gerçekleştirilir.Şekil A keçide temsili FVEP gösterir. Şekil B keçide temsili desen ERG dalga formunu gösterir. Şekil C, rhesus makakında temsili desen FVEP'i gösterir.Ve şekil D rhesus makak temsili desen ERG dalga formu gösterir. Şekil iki, optik sinir kafasının etrafındaki temsili retinal OCT görüntülerini ve keçi ve rhesus makaktaki farklı periferik bölgelerde GCC kompleksinin kalınlığını göstermektedir. Büyük hayvan modeli çeviri araştırmalarında önemli bir rol oynar.Birçok durumda, küçük hayvan modellerinde umut verici terapötik etkiler insan hastalara çevrilemedi. Bu çalışmada keçi ve rhesus makaklarında FVEP, PERG ve OCT video protokolünü sunduk. Bu in vivo yöntem, glokom iskemik veya travmatik optik nöropati ve optik nörit gibi çeşitli optik nevrozların daha büyük modelinde uygulanabilir.

in-vivo-methods-to-assess-retinal-ganglion-cell-optic-nerve-function

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Göz retina ganglion hücrelerinin aksiyon potansiyellerinin beyin dizileri ile görsel bilgi iletir. Burada, tek ganglion hücrelerinin aksiyon potansiyelleri kayıt nasıl...

Tek birim In vivo</emSıçan, optik kiazma> Kayıtlar

Bu video naif fare görsel projeksiyon kontrastlı MR görüntüleme ve akut optik sinir ezilme yaralanma ve kronik optik sinir dejenerasyonu ile ilişkili optik sinir dejenerasyonu tekrarlayan ve uzunlamasına in vivo çalışmalar için, bir klinik 3 T tarayıcı kullanarak, bir yöntemi göstermektedir knock-out fareler (p50 KO).

Farelerde kontrastlı MR ile optik sinir lifi Dürüstlük İn vivo

Mikroglia aktivasyonu ve mikroglioz kronik nörodejenerasyona önemli tepkilerdir. Burada, in vivo, konfokal oftalmoskopi retinal CX3CR1-GFP + mikroglial hücreleri uzun süreli görselleştirme için yöntemler sunmak ve eşik ve morfometrik için belirlemek ve aktivasyonunu ölçmek için analiz eder. Biz yaşa bağlı glokomun erken evrelerinde mikrogliyal değişiklikleri takip.

Fare Glokomda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre morfometrisi: Nörodejenerasyonda sırasında Retina Mikroglial Aktivasyonu Vivo Dynamics

Ex vivo ERG, hayvanların veya insanların izole edilmiş sağlam retinalarından doğrudan retina hücrelerinin elektriksel aktivitesini kaydetmek için kullanılabilir. Burada, retina hücrelerinin elektriksel aktivitesini incelemek için in vivo ERG sistemlerinin ex vivo ERG kayıtlarına ne kadar yaygın olarak uyarlanabileceğini gösteriyoruz.

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

Glokom, retinal ganglion hücrelerinin hasar görmesi ile karakterizedir. Hayvan modellerinde glokomu indüklemek, bu hastalığın incelenmesi hakkında fikir verebilir. Burada, bir in vivo sıçan modelinde RGC kaybını indükleyen ve analiz için tam montajlı retinaların hazırlanmasını gösteren bir prosedürü özetliyoruz.

Glokom uyaran bir de Prosedürü<em&gt; İn Vivo</em&gt; Rat Modeli ve Tüm montaj Retina Hazırlık

Bu el yazması ile yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi (SD-Ekim) fare retinanın vivo içinde görüntüleme için bir protokol açıklar. Retina ganglion hücrelerinin (RGC) peripapillary bölgede çeşitli tarama ve açıklanan yaklaşımlar miktarının üzerinde duruluyor.

Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Bu protokolü nasıl yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi gibi görüntüleme teknikleri açıklar ve lazer ophthalmoscopy tarama bir oftalmik görüntüleme platformu üzerinde bilgi edinme sistemiyle küçük Rodents yararlı olabilir dağıtım, hücre sırasıyla retina kalınlığı ve mikroglial.

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Burada, retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için spektral-alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını açıklamaktayız.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

İn vivo görüntüleme, sağlık ve hastalıkta biyoloji çalışmaları için güçlü bir araçtır. Bu protokol, standart iki foton mikroskobu ile fare retinasının transpupiller görüntülemesini tanımlar. Ayrıca, retinanın birden fazla hücresel kohortunu floresan olarak etiketlemek için farklı in vivoimaging yöntemleri göstermektedir.

Transpupiller İki Foton Fare Retinasının In vivo Görüntülenmesi

Bu protokol, yetişkin bir fareden elde edilen retinal eksplantların izolasyonu, diseksiyonu, kültürlenmesi ve boyanması için adımları sunar ve açıklar. Bu yöntem, diyabetik retinopati gibi farklı retinal nörovasküler hastalıkları incelemek için ex vivo bir model olarak faydalıdır.

Retinal Nörovasküler Hastalıkları İncelemek için Ex Vivo Modeli Olarak Yetişkin Fare Retinasının Retinal Eksplantı

Keşfedin büyük hayvanlarda retina ganglion hücreleri ve optik sinir fonksiyonunu değerlendiren FVEP, PERG ve OCT yöntemlerini. Keçi ve rhesus makaklarında görsel sinyal iletimini inceleyen bu protokol, nörolojik tedavilerin klinik uygulamalara aktarılmasına katkı sağlar.

In Vivo Büyük Hayvanlarda Retina Ganglion Hücre ve Optik Sinir Fonksiyonu ve Yapısını Değerlendirme Yöntemleri

Daha fazla video keşfet