Name: Arabidopsis thalianadaki Kloroplast Hareketini Araştırmak için Yaprak İletiminde Değişiklikleri Kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: Öğrenin, Arabidopsis thaliana yapraklarında kloroplast hareketini ölçmek için yaprak iletimindeki değişiklikleri kullanmayı. Bu yarı otomatik yöntem, bitki fizyolojisi ve ışık adaptasyon mekanizmalarını araştırmak için uygun maliyetli bir çözüm sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Finansman Bir Fiske Ödülü ve Bir Wellesley Koleji Fakülte Ödülü ile sağlandı.

1. Yaprakları koşuya hazırlama
<ol><li>Kloroplastların karanlık konumlarına geçmesini sağlamak için 8 A. thaliana bitkilerini bir gecede karanlıkta yerleştirin (> 6 saat çoğu tür için çalışır). Tüm yinelemeler karşılaştırılabilir iletim değerleriyle başlar.</li>
	<li>Alternatif olarak, 8 tam yaprağı altta nemli bir filtre kağıdı olan bir Petri kabına yerleştirin, Petri kabını kapatın ve alüminyum folyo ile sarın.</li>
</ol>2. İletim cihazının çalışıp çalışmadığını test etme
<ol><li>İletim cihazını kararlı bir güç kaynağına bağlayın ve cihazı sıfırlamak için cihazın güç anahtarına (KAPA/KAPA DÜĞMESI) basın (Şekil 1A,B).</li>
	<li>iPad'i kararlı bir güç kaynağına bağlayın, ekranı etkinleştirmek için Ana Ekran düğmesine basın ve giriş yapmak için şifreyi girin.</li>
	<li>Ayarlar simgesine basın, Ekran ve Parlaklık simgesine basın, Otomatik Kilitle'ye basın ve ekranın kalıcı olarak açık kalmasını sağlamak için bu seçeneğe basarak Hiçbir zaman'ı seçin. Aksi takdirde, ekran uyku moduna geçtiğinde program çalışmayı durdurur. Ana ekrana dönmek için Ana Ekran düğmesine basın.</li>
	<li>Hangi uygulamaların açık olduğunu görmek için Ana Ekran düğmesine çift basın ve hepsini ekranın üst kısmına doğru kaydırarak kapatın. Ana ekrana dönmek için Ana Ekran düğmesine basın.<ol>
<li>LeafSensor uygulamasını ana ekranda veya sola veya sağa kaydırarak bulun. Açmak için uygulamanın simgesine basın (bkz. Ek Dosya). Bilgileri girmek için metin ve beyaz alanları içeren yeşil bir ekran görünecektir.</li>
		<li>Uygulamanın iletim cihazıyla iletişim kurduğunu gösterdiğinden Bağlı kelimesinin ekranın alt kısmında görüldüğünden emin olun. 'Adafruit BULUNAMADı' mesajı görüntülenirse, cihazın takılı olup olmadığını kontrol edin ve cihazdaki başlat düğmesine tekrar basın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Denemeyi adlandırmak ve yapraksız ve yaprak klipleri açık kısa bir test çalışması için koşulları ayarlamak için uygulama sayfasındaki ilk 4 alanı doldurun:<ol>
<li>Denemeyi adlandırın (örneğin, Expt Name adlı alana TEST yazarak 8 veya daha az büyük harf veya sayı kullanın).</li>
		<li>Deneyde kaç farklı mavi ışık yoğunluğu kullanılacağını seçin, örneğin # Işık Yoğunlukları adlı alana 3 yazarak.</li>
		<li>Bu çalıştırma için mavi ışık yoğunluklarını seçin (0 ile 3000 arasında bir tamsayı seçin ve her sayıyı virgülle bir sonrakinden ayırın; örneğin Mavi Yoğunluklar adlı alana 0.100.1000 yazarak bu sayıların LED'lerin gerçek mavi ışık yoğunluklarına nasıl dönüştürüleceğine ilişkin Ek Dosya'ya bakın.</li>
		<li>Her mavi ışık yoğunluğunun yaprak üzerinde parlayacağı süreyi seçin (her sayıyı virgülle bir sonrakinden ayırın), örneğin Mavi Süre (dakika) adlı alana 2,2,2 yazarak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ekranın orta bölümünde Denemeyi Başlat'a basın. Ekranın alt kısmında 8 tire ve Başlangıç Deneyi mesajı görünecektir.<ol>
<li>İlk iki dakika LED'lerden ışık yayılmadığından, daha sonra zayıf mavi ışık yayıldığından ve 2 dakika sonra mavi ışık yoğunluğunun arttığından emin olun.</li>
		<li>Ölçümler için dakikada bir kez LED'lerden yoğun kırmızı ışık yayıldığından emin olun. NOT: Deneme çalışırken, sekiz sensörün her biri için uygulama sayfasında sayılar görünecek ve veriler dakikada bir kez güncellenecektir. Fotodiyotlardan çıkış numaralarının 1000-1023 civarında olduğundan emin olun (oda karanlıksa). Sol alttaki bir güncelleme, şimdiye kadar kaç ölçüm yapıldığını gösterir, örneğin, 6 ölçümden 1'ini yaptı (her dakika bir ölçüm).</li>
		<li>Deneme tamamlandığında, uygulama sayfasının sol alt tarafında tamamlanan Denemenin görünümünü kontrol edin. Şimdi enstrüman yapraklarla koşmaya hazır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ana Ekran düğmesine iki kez basın, uygulamadan çekin ve tekrar açın. Sıfırlamak için cihazın açık/KAPA düğmesini basılın.</li>
</ol>3. Yaprak klipslerinde yaprakların ayarlanması
NOT: Bu adım, kloroplast hareketinin teşvikini önlemek için karanlıkta yeşil bir ışık kaynağıyla (örneğin, bir ampulun önüne yeşil bir filtre yerleştirin) yapılmalıdır. Alternatif olarak, yaprak klipslerinde çok düşük beyaz ışık ve uzun bir karanlık dönem kullanın. Unutmayın, yaprak klibinin bir kısmı LED'i (daha büyük açıklık) tutarken, diğeri fototransistörü tutar (Şekil 1C).
<ol><li>Bitkiler tamamen koyuya uyarlanmışsa, LED'leri kaplayacak kadar geniş 8 yaprak seçin. Aksi takdirde, yaprakları Petri kabından çıkarın. Bir yaprak klipsinin uzunluğu hakkında ve LED'i örtmemek için üstte bir delik açarak 8 şerit filtre kağıdı hazırlayın.<ol>
<li>Filtre kağıdını nemlendirin ve LED'i tutan yaprak klipsi kısmına yerleştirin. Sekiz yaprak klipsinin her biri için bunu tekrarlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Her yaprağı yaprak klibinin ıslak filtre kağıdının üstüne yerleştirin. Doğru yaprak tarafının LED'e doğru dönük olduğundan emin olun (genellikle deneyler LED'e bakan adaxial yaprak yüzeyi ile yapılır).<ol>
<li>Yaprağın ortalarını LED'lerin üzerine yerleştirmekten kaçının ve daha tutarlı sonuçlar için, her yaprağın benzer kısımlarını (örneğin, yaprağın en geniş bölümü) LED'in üzerine yerleştirin.</li>
		<li>Diğer yaprak klipsi kısmını fototransistörün üzerine yerleştirin. Gerekirse iki yaprak klipsi parçasını bir arada tutmak için bir lastik bant kullanın (Şekil 1C,D).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Her yaprak klipsini 'teknesine' yerleştirin ve rezervuarları bir pipet kullanarak suyla doldurun. Çalışma sırasında yaprakların susuz kalmasını önlemek için yaprağın veya en azından filtre kağıdının suya değmesini sağlayın (Şekil 1D).</li>
</ol>4. Bir koşunun yürütülmesi
NOT: Standart bir keşif çalışması için, 4 saat karanlıkla başlayın (0 μmol foton m-2 s-1), ardından 7 saat düşük mavi ışık (2 μmol foton m-2 s-1), ardından 5, 10, 30, 40, 50, 60, 90, 100 μmol foton m-2 s-1 mavi ışığın her biri 60 dk. Bu, yaprakların koyu iletimlerini sergilemeye, kloroplast hareketini maksimum birikime teşvik etmeye ve farklı derecelerde kaçınma tepkisi göstermeye teşvik edecektir.
<ol><li>Aşağıda açıklanan adımları kullanarak iPad'de LeafSensor uygulamasını ayarlayın.<ol>
<li>Expt Adı adlı alana EXPLORA1 yazın.</li>
		<li># Işık Yoğunlukları adlı alana 10 yazın.</li>
		<li>Mavi yoğunluklar adlı alana 0,1,60,160,550,750,950,1150,1350,1950 yazın.</li>
		<li>Mavi Süre adlı alana 240.420.60.60.60.60.60.60.60.60 yazın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Denemeyi Başlat'a basın. İlk dakikadan sonra, çıkış değerleri (genellikle 990 ile 820 arasında) ekranda görünecektir. Değerler uzaksa, yaprakların yaprak klipslerine doğru yerleştirilmiş olup olmadığını kontrol edin.</li>
	<li>Çalıştırma tamamlandığında, Deneme Tamamlandı iletisinin ekranın sol alt kısmında göründüğünden emin olun. Veriler otomatik olarak kaydedilecektir.<ol>
<li>Ekranı dik konuma getirin (yatay değil). Ekranda Kaydet ve Yardımcı Programlar olmak üzere iki yeni seçenek görünecektir.</li>
		<li>Yardımcı Programlar'a basın ve kaydedilen dosyaların listesi görüntülenir. İlgi çekici dosyayı seçin, bu durumda EXPLORA1.</li>
		<li>Dosya listesinin altında , Selected Expt: EXPLORA1'i arayın. E-posta'ya basın, bir e-posta adresi girin ve veri dosyası otomatik olarak iletiye eklenir. Gönder'e basın. NOT: Dosyalar gelene kadar uzun bir gecikme olursa, uygulamayı yeniden başlatın ve dosyayı yeniden gönderin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir çalıştırma iptal edildiyse, ancak bu noktaya kadar olan veriler ilgi çekiciyse, Yardımcı Programlar'ı seçmeden önce Kaydet'e basın. Birkaç çalıştırmadan sonra bellek alanını temizleyin: Yardımcı Programlar'a basın, her seferinde bir dosya seçin, dosyanın yanında sola kaydırın ve dosyayı kaldırmak için Delete tuşuna basın.</li>
	<li>Başka bir deneme çalıştırmak için Geri tuşuna basın veya yapılırsa, Ana Ekran düğmesine basın, ana ekrana kaydırın, Ayarlar'a basın, Ekran ve Parlaklık'a basın, Otomatik Kilitle'ye basın ve 2 Dakika'ya basın.</li>
</ol>5. Veri analizi
<ol><li>EXPLORA1 dosyasını e-postadan indirin, dosyaya uzantı .csv ekleyin, dosyayı çift tıklatın. Veriler, sekiz farklı sensörün verileri ayrı sütunlara ayrı olarak sıralanmış bir elektronik tabloya sıralanır. Son sütun, verilerin toplandığı zamanı (saniye olarak) gösterir. Anlamsız veriler içeriyorsa, başlıklar altındaki ilk satırı (Sensor1-8) silin.</li>
	<li>Her sensörün sonuçlarını ayrı bir sayfada içerecek ve her yaprak klibinin ve sensörün kalibrasyonundan elde edilen denklemleri kullanarak çıkış değerlerini % iletim değerlerine dönüştüren bir ana veri sayfası ayarlayın (bkz.<ol>
<li>Her veri kümesini ayrı bir veri sayfasına kopyalayın (örneğin, A sütunu saati içerir; C sütunu Sensor1 verilerini içerir).</li>
		<li>B sütununu, zamanı saniyelerden dakikalara dönüştürecek şekilde ayarlayın. D sütununu, kalibrasyondaki denklemi kullanarak voltajı % iletimine dönüştürmek için formülü içeren şekilde ayarlayın.</li>
		<li>Her sensör için benzer bir veri sayfası kurun ve voltaj çıkışını % iletim değerlerine dönüştürmek için kullanılan formülün her sensör için farklı olabileceğini unutmayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Arsa % iletim (T) zamana karşı, min (Şekil 2).</li>
	<li>Ana veri sayfasının yeniden kullanılabilmesi için veri sayfasını yeni bir adla kaydedin.</li>
	<li>Verileri daha fazla analiz etmek için (Şekil 2), ΔT (%) birikimini (örneğin, karanlıkta T'ye kıyasla maksimum birikimde T değişimi), ΔT (%) kaçınmayı (örneğin, karanlıkta T'ye kıyasla maksimum kaçınmada T değişimi) veya dT/dt (%/h) (örneğin, birikimin veya kaçınma reaksiyonunun en hızlı kısmı sırasında T'deki değişim) hesaplayın. Daha fazla ayrıntı için bkz.</li>
</ol>

<ol><li>Senn, G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSenn%2C+G+%22Die+Gestalts-+und+Lagever%C3%A4nderung+der+Pflanzenchromatophoren%22">Die Gestalts- und Lageveränderung der Pflanzenchromatophoren</a>. , Wilhelm Engelmann. Leipzig, Germany. (1908).</li>
<li>Zurzycki, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+chloroplast+displacements+on+the+optical+properties+of+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Societatis+Botanicorum+Poloniae%22%5BJournal%5D)">The influence of chloroplast displacements on the optical properties of leaves.</a> Acta Societatis Botanicorum Poloniae. 30, 503-527 (1961).</li>
<li>Wada, M., Kagawa, T., Sato, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Chloroplast movement.</a> Annual Review of Plant Biology. 54, 455-468 (2003).</li>
<li>Wada, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Chloroplast movement.</a> Plant Science. 210, 177-182 (2013).</li>
<li>Kasahara, M., Kagawa, T., Oikawa, K., Suetsugu, N., Miyao, M., Wada, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+avoidance+movement+reduces+photodamage+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Chloroplast avoidance movement reduces photodamage in plants.</a> Nature. 420, 829-832 (2002).</li>
<li>Davis, P. A., Hangarter, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+movement+provides+photoprotection+to+plants+by+redistributing+PSII+damage+within+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Photosynthesis+Research%22%5BJournal%5D)">Chloroplast movement provides photoprotection to plants by redistributing PSII damage within leaves.</a> Photosynthesis Research. 112, 153-161 (2012).</li>
<li>Howard, M. M., Bae, A., Königer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+chloroplast+movement%2C+nonphotochemical+quenching%2C+and+electron+transport+rates+in+light+acclimation+and+tolerance+to+high+light+in+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Botany%22%5BJournal%5D)">The importance of chloroplast movement, nonphotochemical quenching, and electron transport rates in light acclimation and tolerance to high light in Arabidopsis thaliana.</a> American Journal of Botany. 106 (11), 1-10 (2019).</li>
<li>Gotoh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+accumulation+response+enhances+leaf+photosynthesis+and+plant+biomass+production%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chloroplast accumulation response enhances leaf photosynthesis and plant biomass production.</a> Plant Physiology. 178, 1358-1369 (2018).</li>
<li>Howard, M. M., Bae, A., Pirani, Z., Van, N., Königer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+chloroplast+movement+reduces+growth+and+delays+reproduction+of+Arabidopsis+thaliana+in+natural+and+controlled+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Botany%22%5BJournal%5D)">Impairment of chloroplast movement reduces growth and delays reproduction of Arabidopsis thaliana in natural and controlled conditions.</a> American Journal of Botany. 107 (9), 1309-1318 (2020).</li>
<li>Trojan, A., Gabryś, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+distribution+in+Arabidopsis+thaliana+%28L.%29+depends+on+light+conditions+during+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chloroplast distribution in Arabidopsis thaliana (L.) depends on light conditions during growth.</a> Plant Physiology. 111, 419-425 (1996).</li>
<li>Oikawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+unusual+positioning+is+essential+for+proper+chloroplast+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">Chloroplast unusual positioning is essential for proper chloroplast positioning.</a> The Plant Cell. 15, 2805-2815 (2003).</li>
<li>Königer, M., Bollinger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+movement+behavior+varies+widely+among+species+and+does+not+correlate+with+high+light+stress+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Chloroplast movement behavior varies widely among species and does not correlate with high light stress tolerance.</a> Planta. 236, 411-426 (2012).</li>
<li>Kagawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arabidopsis+NPL1%3A+a+phototropin+homolog+controlling+the+chloroplast+high-light+avoidance+response%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Arabidopsis NPL1: a phototropin homolog controlling the chloroplast high-light avoidance response.</a> Science. 291, 2138-2141 (2001).</li>
<li>Berg, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+low-cost+microcontroller-based+photometric+instrument+for+monitoring+chloroplast+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Photosynthesis+Research%22%5BJournal%5D)">A simple low-cost microcontroller-based photometric instrument for monitoring chloroplast movement.</a> Photosynthesis Research. 87, 303-311 (2006).</li>
<li>Johansson, H., Zeidler, M. Automatic chloroplast movement analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJohansson%2C+H+%22Molecular+Biology%22">Molecular Biology</a>. 1398, Springer. Germany. 29-35 (2016).</li>
<li>Briggs, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+phototropin+family+of+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">The phototropin family of photoreceptors.</a> Plant Cell. 13, 993-997 (2001).</li>
<li>Jarillo, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phototropin-related+NPL1+controls+chloroplast+relocation+induced+by+blue+light%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Phototropin-related NPL1 controls chloroplast relocation induced by blue light.</a> Nature. 410, 952-954 (2001).</li>
<li>Sakai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arabidopsis+nph1+and+npl1%3A+blue+light+receptors+that+mediate+both+phototropism+and+chloroplast+relocation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%2C+USA%22%5BJournal%5D)">Arabidopsis nph1 and npl1: blue light receptors that mediate both phototropism and chloroplast relocation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences, USA. 98 (12), 6969-6974 (2001).</li>
<li>Wada, M., Kong, S. -G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin-mediated+movement+of+chloroplasts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Actin-mediated movement of chloroplasts.</a> Journal of Cell Science. 131, 1-8 (2018).</li>
<li>Wen, F., Xing, D., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogen+peroxide+is+involved+in+high+blue+light-induced+chloroplast+avoidance+movements+in+Arabidopsis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">Hydrogen peroxide is involved in high blue light-induced chloroplast avoidance movements in Arabidopsis.</a> Journal of Experimental Botany. 59 (10), 2891-2901 (2008).</li>
<li>Tlalka, M., Fricker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+calcium+in+blue-light+dependent+chloroplast+movement+in+Lemna+trisulca+L%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%22%5BJournal%5D)">The role of calcium in blue-light dependent chloroplast movement in Lemna trisulca L.</a> The Plant Journal. 20, 461-473 (1999).</li>
<li>Königer, M., Bollinger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+movement+behavior+varies+widely+among+species+and+does+not+correlate+with+high+light+stress+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Chloroplast movement behavior varies widely among species and does not correlate with high light stress tolerance.</a> Planta. 236, 411-426 (2012).</li>
<li>Higa, T., Wada, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloroplast+avoidance+movement+is+not+functional+in+plants+grown+under+strong+sunlight%5BTitle%5D)+AND+%22Plant%2C+Cell+and+Environment%22%5BJournal%5D)">Chloroplast avoidance movement is not functional in plants grown under strong sunlight.</a> Plant, Cell and Environment. 39, 871-882 (2016).</li>
<li>Arduino. Arduino.cc. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.arduino.cc">https://www.arduino.cc</a> (2021).</li>
<li>Königer, M., Delamaide, J. A., Marlow, E. D., Harris, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+thaliana+leaves+with+altered+chloroplast+numbers+and+chloroplast+movement+exhibit+impaired+adjustments+to+both+low+and+high+light%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">C. thaliana leaves with altered chloroplast numbers and chloroplast movement exhibit impaired adjustments to both low and high light.</a> Journal of Experimental Botany. 59, 2285-2297 (2008).</li>
</ol>

Yazarların çıkar çatışması yoktur.

Cihazın kullanımı son derece kolaydır, ancak LED'lerin ve fototransistörlerin konumlandırılması yaprak klipsinden yaprak klipsine biraz değişebileceğinden, iletim cihazının her yaprak klipsi kurulumunu bağımsız olarak kalibre etmek çok önemlidir. LED'lerin ve fototransistörlerin saptanarak yerleştirildiğinden emin olun ve veriler kapalı görünüyorsa kalibrasyonu yeniden kontrol edin. Cihaza su almaktan kaçının. Yaprak klipslerindeki yapraklar, su stresini önlemek için su dolu 'teknelere' yerleştirilir. Bu tekneleri örneği...

Işık fotosentez, bitki büyümesi ve gelişme için gereklidir. Işık yoğunlukları sadece bir mevsim veya gün boyunca değil, aynı zamanda bulut örtüsüne bağlı olarak hızlı ve öngörülemeyen şekillerde değiştiği için en dinamik abiyotik faktörlerden biridir. Yaprak seviyesinde, ışık yoğunlukları da çevredeki bitki örtüsünün ve bitkinin kendi gölgeliğinin yoğunluğundan ve doğasından etkilenir. Bitkilerin değişken ışık koşullarında ışık kesmeyi optimize etmelerini sağlayan önemli bir mekanizma, kloroplastların mavi ışık uyaranlarına yanıt olarak hareket edebilmesidir1,2. Düşük ışık koşullarında, kloroplastlar ışığa (periclinal hücre duvarları boyunca) dik olarak, sözde bir biriktirme tepkisiyle yayılır, ışık kesmeyi ve dolayısıyla fotosentezi en üst düzeye çıkarır. Yüksek ışık koşullarında, kloroplastlar anticlinal hücre duvarına doğru kaçınma tepkisi olarak hareket eder ve ışık kesmeyi ve fotoinhibisyon tehlikesini en aza indirir. Birçok türde, kloroplastlar ayrıca birikim ve kaçınma pozisyonlarından farklı ve genellikle bu ikisi arasında aracı olan belirli bir karanlık pozisyon üstlenir. Çeşitli çalışmalar kloroplast hareketinin sadece yaprakların kısa süreli stres toleransı için değil, aynı zamanda bitkilerin büyümesi ve üreme başarısı için, özellikle değişken ışık koşullarında önemli olduğunu göstermiştir8,9.
Kloroplast hareketi, hafif mikroskopi1 kullanılarak bazı canlı örneklerde (örneğin, algler veya Elodea gibi ince yapraklı bitkiler) gerçek zamanlı olarak kolayca gözlenir. Bununla birlikte, çoğu yapraktaki kloroplast hareketini incelemek, örnekleri hafif bir mikroskop altında görüntülemeden önce kloroplast hareketini, kimyasal fiksasyonu ve kesitlerin hazırlanmasını teşvik etmek için bir ön işlem gerektirir10. Konfokal lazer mikroskopinin devreye girmesiyle kloroplastların 3D düzenini sağlam veya sabit yapraklarda görüntüleyebilmiştir4,11,12. Bu görüntüleme teknikleri önemli nitel bilgiler sağlayarak kloroplast hareketinin anlaşılmasına büyük ölçüde yardımcı olmaktır. Kloroplast konumlandırmasının ölçülmesi (örneğin, bu görüntülerdeki periklinal veya anticlinal pozisyonlardaki kloroplastların yüzdesi veya toplam hücre yüzeyi başına kloroplastların kapladığı alan yüzdesi olarak) da mümkündür, ancak özellikle konumlandırmada hızlı değişiklikleri yakalamak için gerekli aralıklarla yapılırsa oldukça zaman alıcıdır10,8 . Belirli bir türün veya mutantların koyu adapte olmuş yapraklarının kaçınma tepkisine kloroplast hareketi yapıp yapamayacağını göstermenin en basit yolu, yaprağın bir şeridini yüksek ışığa maruz bırakırken kloroplastları karanlıkta tutmak için bir yaprağın alanının çoğunu örtmektir. En az 20 dakikalık yüksek ışığa maruz kaldıktan sonra, maruz kalan bölgedeki kloroplastlar kaçınma pozisyonuna taşınmış olacak ve açık şerit yaprağın geri kalanından gözle görülür şekilde daha açık renkte olacaktır. Bu, vahşi A tipi A. thaliana için geçerlidir, ancak daha sonra 13'te daha ayrıntılı olarak açıklanan bazı kloroplast hareketi mutantları için geçerli değildir. Bu yöntem ve modifikasyonları (örneğin, yaprağın hangi kısımlarının açığa çıktığı, ışık yoğunluklarını değiştirmek) çok sayıda mutantın taranması ve kaçınma veya biriktirme yanıtı veya her ikisi de sergilenebilme yeteneğinden yoksun boş mutantları tanımlamak için yararlıdır. Ancak kloroplast hareketlerindeki dinamik değişiklikler hakkında bilgi vermez.
Buna karşılık, burada açıklanan yöntem, genel kloroplast hareketi için bir proxy olarak bir yaprak aracılığıyla ışık iletiminde değişiklikler kullanarak bozulmamış yapraklarda kloroplast hareketinin nicelleştirilmesine izin verir: kloroplastların birikim yanıtındaki mezofil hücrelerinde yayıldığı koşullarda, yaprak yoluyla birçok kloroplastın kaçınma tepkisinde olduğundan daha az ışık iletilir, kendilerini anticlinal hücre duvarları boyunca konumlandırmak. Bu nedenle, iletimdeki değişiklikler leaves14'teki genel kloroplast hareketi için bir proxy olarak kullanılabilir. Cihazın ayrıntıları başka bir yerde açıklanmıştır (bkz. Tamamlayıcı Dosya), ancak temel olarak, cihaz kloroplast hareketini tetiklemek için mavi ışık kullanır ve belirli aralıklarla bu yapraktan ne kadar kırmızı ışık geçtiğini ölçer. Daha yakın zamanda, değiştirilmiş bir 96 kuyu mikro plaka okuyucusu, mavi bir LED, bir bilgisayar ve sıcaklık kontrollü bir inkübatör15 kullanan bu sistemin bir modifikasyonu tanımlanmıştır.
Tarama için yaprakların optik değerlendirmesi, ardından iletimdeki dinamik değişikliklerin ölçülmesi ve mikroskopi kullanımı da dahil olmak üzere yöntemlerin bir kombinasyonunu kullanma seçeneği, hem alttaki mekanizmaları hem de kloroplast hareketinin fizyolojik / ekolojik önemini anlamamıza büyük ölçüde yardımcı olmuştur. Örneğin, hareketlerinin belirli yönlerinde bozulan çeşitli mutantların keşfedilmesine ve karakterizasyonuna yol açtı. Örneğin, A. thaliana phot 1 mutantları kloroplastlarını düşük ışıkta biriktirme yeteneğinden yoksunken, phot 2 mutantları kaçınma reaksiyonu gerçekleştirme yeteneğinden yoksundir. Bu fenotipler, ilgili iki mavi ışık reseptöründeki bir bozulmadan kaynaklanmaktadır16,17,18. Buna karşılık, chup1 mutantları, kloroplastları bir hücre içinde istenen konuma taşımak için gerekli olan kloroplastların etrafında uygun aktivasyon filamentleri oluşturma yeteneğinden yoksundur11,19. Mutant çalışmalara ek olarak, araştırmacılar sürecin mekanistik yönlerini aydınlatmak için çeşitli inhibitörlerin kloroplast hareketi üzerindeki etkilerini değerlendirmişlerdir. Örneğin, bu sinyal molekülünün kloroplast hareketi üzerindeki etkilerini araştırmak için H2O2 ve çeşitli antioksidanlar gibi kimyasallar kullanılmıştır20. Kloroplast hareketinde kalsiyumun rolünü aydınlatmak için çeşitli inhibitörler kullanılmıştır21. Kloroplast hareketinin mekanizmalarını ortaya çıkarmaya yardımcı olup, bu yöntemler, bu davranışın ekolojik ve evrimsel bağlamını anlamak amacıyla çeşitli türlerde veya farklı koşullarda yetişen mutantlardaki kloroplast hareketini karşılaştırmak için kullanılabilir. Örneğin, kloroplast hareket yolundaki çeşitli mutasyonların etkilerinin boyutunun büyüme koşullarına bağlı olduğu gösterilmiştir7,9 ve güneşe uyarlanmış bitkilerin kloroplastlarını çok fazla hareket ettirmiyor gibi görünmektedir. Buna karşılık, gölge bitkileri için hareket çok önemlidir10,22,23.
Bu yöntemler kağıt, model bitki A. thaliana odaklanmış, daha önce geliştirilmiş bir enstrümanın güncellenmiş bir sürümü olan bir iletim cihazının nasıl kullanılacağını açıklar9. Bu cihaz ticari olarak mevcut olmasa da, temel bir elektronik anlayışına veya mühendislik veya fizik meslektaşlarının ve öğrencilerin yardımına sahip kişiler, uygun fiyatlı parçalar kullanarak ve ayrıntılı talimatları izleyerek cihazı inşa edebilecektir (bkz. Enstrümanı oluşturmak için kullanılan açık kaynaklı platform, kapsamlı bir web desteğine ve sorunlar ortaya çıktığında yardım sunan bir topluluk forumuna sahiptir24.
Protokol, bir yaprağı çok çeşitli ışık koşullarına maruz bırakan ve A. thaliana'nın karanlık, birikim ve kaçınma reaksiyonlarını yakalayan standart bir keşif çalışmasında yaprak iletimindeki değişiklikleri belirlemek için aletin nasıl kullanılacağına odaklanır. Bu çalıştırmalar deneyin amacına bağlı olarak değiştirilebilir ve çoğu bitki türüyle kullanılabilir. Makale, A. thaliana wildtype ve birkaç mutantın iletim verilerine örnekler sunar ve verilerin nasıl daha fazla analizılacağını gösterir.

<table><tbody><tr><td>Alüminyum folyo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Koyu uyarlanmış yapraklar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>LeafSensor app yüklü iPad filtre</td> kağıdı (Ek Bilgilere bakın)<td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Herhangi</td><td>bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petri kabını</td><td>pipetleyin Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td> İletim cihazı (bkz.<td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ek bilgi)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Su</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

arabidopsis thaliana'daki kloroplast hareketini araştırmak için yaprak İletiminde değişiklikleri kullanma

Using Changes in Leaf Transmission to Investigate Chloroplast Movement in Arabidopsis thaliana

Yapraklardaki kloroplast hareketinin fotoinhibisyasyonu en aza indirmeye ve belirli koşullar altında büyümeyi artırmaya yardımcı olduğu gösterilmiştir. Kloroplast hareketi hakkında, örneğin konfokal floresan mikroskopisi kullanılarak yapraklardaki kloroplast konumlandırması incelenerek çok şey öğrenilebilir, ancak bu tür mikroskopiye erişim sınırlıdır. Bu protokol, yaprak iletimi değişikliklerini kloroplast hareketi için proxy olarak kullanan bir yöntemi açıklar. Kloroplastlar ışık kesmeyi en üst düzeye çıkarmak için yayılırsa, iletim düşük olacaktır. Kloroplastlar ışıktan kaçınmak için anticlinal hücre duvarlarına doğru hareket ederse, iletim daha yüksek olacaktır. Bu protokol, yaprakları farklı mavi ışık yoğunluklarına maruz bırakmak ve yaprak iletimindeki dinamik değişiklikleri ölçmek için basit, ev yapımı bir cihazın nasıl kullanılacağını açıklar. Bu yaklaşım, araştırmacıların farklı türlerde ve mutantlarda kloroplast hareketini nicel olarak tanımlamalarına, kimyasalların ve çevresel faktörlerin üzerindeki etkilerini incelemelerine veya örneğin ışık algısından kloroplastların hareketine yol açan süreçte eksik bileşenleri belirlemek için yeni mutantları taramalarına olanak tanır.

İletim cihazının farklı parçaları Şekil 1'de gösterilmiştir. Mikrodenetleyici cihazın kontrol ünitesidir ve siyah yaprak klipsleriyle sabitlenerek yaprakların yaşadığı ışık koşullarını kontrol eder ve aldığı ışık iletim verilerini saklar (Şekil 1A,B). Cihazın kontrol ünitesinin yakın çekiminde AÇMA/KAPALI düğmesi, veri depolama özelliği için SD kart, Bluetooth kalkanı (verileri LeafSensor uygulamasına gönderen) ve LED'lere (Işık Yayan D...

Birçok bitki türü, ışık emilimini optimize etmek için kloroplastların konumunu değiştirir. Bu protokol, Arabidopsis thaliana yapraklarındaki kloroplast hareketini araştırmak için basit, ev yapımı bir aletin, ışığın bir yapraktan vekaleten iletilmesindeki değişiklikleri kullanarak nasıl kullanılacağını açıklar.

Arabidopsis thaliana'daki Kloroplast Hareketini Araştırmak için Yaprak İletiminde Değişiklikleri Kullanma

Chloroplast movement in leaves has been shown to help minimize photoinhibition and increase growth under certain conditions. Much can be learned about ...

Bu yöntem, türlere, çevreye ve mutasyonlara bağlı olarak yaprakların farklı derecelerde ışık emilimini etkileyen kloroplast hareketi için bir proxy olarak yaprakların ışık iletimindeki değişiklikleri ölçer. Bu uygun fiyatlı ev yapımı cihaz, kloroplast hareketlerindeki dinamik değişiklikleri basit ve yarı otomatik bir şekilde ölçmeyi mümkün kılar. Veriler mikroskopi çalışmalarını tamamlar.Talimatları yakından takip etmek ve cihazı dikkatli bir şekilde tedavi etmek önemlidir. Başlamak için, iletim cihazını kararlı bir güç kaynağına bağlayın ve cihazı sıfırlamak için cihazın güç anahtarına basın. Ardından, iPad'i kararlı bir güç kaynağına bağlayın.Ekranı etkinleştirmek için ana ekran düğmesine basın ve giriş yapmak için şifreyi girin. Ayarlar simgesine ve ardından ekran ve parlaklık simgesine basın. Ardından, otomatik kilite basın ve programın herhangi bir kesinti olmadan çalışması için ekranın kalıcı olarak açık kalmasını sağlamak için asla seçmeyin.Ardından ana ekrana dönmek için ana ekran düğmesine basın. Tüm uygulamaları kapattıktan sonra LeafSensor uygulamasını bulup açın ve metin ve beyaz alanları gösteren bilgileri yeşil ekrana girin. Bağlı sözcük ekranın alt kısmında, uygulamanın iletim cihazıyla iletişim kurduğunu gösteren bir şekilde görüldüğünden emin olun.Adafruit NOT Found iletisi görüntülenirse, cihazın takılı olup olmadığını kontrol edin ve cihazdaki başlat düğmesine tekrar basın. Herhangi bir yaprak olmadan açık yaprak klipsleriyle kısa bir test çalışmasının koşullarını ayarlamak için uygulama sayfasındaki ilk dört alanı doldurun. Deneme adının verildiği alana deneme adını vererek başlayın, ardından ışık yoğunluğu sayısı adlı alana sayıyı yazarak denemede kaç farklı mavi ışık yoğunluğu kullanılacağını seçin, ardından 0 ile 3.000 arasında bir tamsayı seçerek kullanılacak mavi ışık yoğunluklarını yazın ve her yoğunluğu virgülle bir sonrakinden mavi yoğunluklar adlı alana ayırın.Mavi süre adlı alana her mavi ışık yoğunluğu için süreyi yazın. Ekranın orta bölümünde Denemeyi Başlat'a basın. Ekranın alt kısmında, Denemeyi Başlat iletisine sahip sekiz tire görünecektir.İlk veriler görünene kadar denemenin çalışmasına izin verin. İlk iki dakika BOYUNCA LED'den ışık yayılmamasını sağladıktan sonra, iki dakika boyunca zayıf mavi ışığın emisyonu ve ardından iki dakika daha güçlü mavi ışık salınımını gözlemleyin. Ayrıca, bu sıra boyunca dakikada bir kez LED'den kısa bir süre yayılan yoğun kırmızı ışığı gözlemleyin.Uygulama sayfasının sol alt tarafında Deneme Tamamlandı mesajıyla belirtilen Bitmiş Deneme durumunu kontrol edin, ardından ana ekran düğmesine iki kez basın. Uygulamadan çekin ve tekrar açın. Cihazı yapraklarla çalıştırmaya hazırlamak için açma/kapa düğmesine basarak cihazı sıfırlayın.Karanlıkta, sadece çok düşük beyaz veya yeşil ışık kullanarak, LED'i örtmek için koyu renkli bitkiden bir geniş yaprak seçin. Bir yaprak klipsinin uzunluğuna sahip filtre ataç şeridini hazırlayın. Ardından LED'in kaplanmasını önlemek için filtre kağıt şeridinin üst kısmında bir delik açın.LED'i tutan yaprak klipsi kısmına nemlendirilmiş bir filtre kağıdı yerleştirin. Koyu renkli yaprak klipsini Petri kabından çıkarın ve ardından yaprağı yaprak klipsinin ıslak filtre kağıdının üstüne yerleştirin ve adaxial yaprak yüzeyinin LED'e dönük olduğundan emin olun. Ardından diğer yaprak klipsi kısmını üstüne bir fotoğraf transistörü ile yerleştirin.Gerekirse, iki yaprak klipsi parçasını bir arada tutmak için bir lastik bant kullanın. Yaprak klipsini ilgili tekneye yerleştirin ve bir pipet kullanarak rezervuarları suyla doldurun, yaprak veya en azından filtre kağıdının çalışma sırasında yaprakların susuz kalmasını önlemek için suya dokunmasını sağlayın. iPad'de LeafSensor uygulamasını ayarlayın ve deneme adı adlı alana EXPLORA1 yazın.Işık yoğunluğu sayısı adlı alana 10 yazın. Ardından numaraları mavi yoğunluklar ve mavi süre adlı alana girin. Denemeyi Başlat'a basın.İlk dakikadan sonra, görünen çıktı değerlerini gözlemleyin. Değerler uzaksa, yaprakların yaprak klipslerine doğru yerleştirilmiş olup olmadığını kontrol edin. Çalıştırma tamamlandığında, veriler otomatik olarak kaydedilir.Ekranı dik konumda döndürdükten sonra, ekranda kaydetme ve yardımcı programlar olmak üzere iki seçenek görünecektir. Yardımcı Programlar'a basın ve kaydedilen dosyalar listesinden EXPLORA1 dosyasını seçin. Dosya listesinin altında, EXPLORA1 artık seçili denemede görünecektir.Ardından, E-posta'ya basın. Bir e-posta adresi girin, EXPLORA1 dosyası iletiye otomatik olarak eklenir ve Gönder'e basın. Yüzde iletim verileri, Arabidopsis thaliana iletiminin düşük ışık yoğunluklarında azaldığını gösteren zamana göre çizilirken, ışık yoğunlukları daha da arttığında kaçınma tepkisi tetiklendi.19 saatlik uzun koşular sırasında vahşi tip ve mutant Arabidopsis thaliana yapraklarının ortalama yüzde iletim değerleri gösterilmiştir. Yapraklar hem vahşi tip hem de phot2 mutantlarında düşük mavi ışığa maruz kaldığında, iletimdeki ilk hızlı düşüşü yavaş bir azalma izledi ve bu da kloroplastların birikim yanıtına geçtiğini gösteriyordu. Vahşi tip ile karşılaştırıldığında, phot1 daha az bir birikim yanıtı gösterdi.Mavi ışık yoğunluğu 11 saat sonra adım adım arttığında, bulaşma yüzdesi artar ve kloroplastlar kaçınma tepkisine geçer. Delta T olarak da adlandırılan koyu değere göre yüzde iletimdeki değişim dereceleri tam mavi ışık yoğunluklarına bağlıydı. Negatif değerler yaprakların bir birikim yanıtı gösterdiğini gösterirken, pozitif değerler kaçınma yanıtını gösterir.İletimdeki değişim hızı, ışık arttığında iletimdeki değişimin eğimi olarak hesaplanır. Temsili örnekte, mavi ışık yoğunluğu arttıkça kaçınma tetiklendiğinde ilk yanıtlar sırasında iletim hızı değişti. Karakteristik olmayan bir mutant veya türdeki iletim değişikliklerini araştırırken, iletim değerlerinin ve kloroplast pozisyonlarının bir mikroskopi çalışmasıyla nasıl ilişkili olduğunu doğrulayın.

using-changes-leaf-transmission-to-investigate-chloroplast-movement

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Mekansal özel Fitokrom yanıtlar moleküler temeli, doku ve organ spesifik Fitokrom eksiklikleri gösteren transgenik bitkiler kullanılarak araştırılmaktadır. Belirli hücrelerin izolasyonu mikroarray analizleri takip Sıralama mekansal özel Fitokrom yanıtları yer genleri tanımlamak için kullanılmaktadır Floresan-Aktif Hücre tarafından uyarılan Fitokrom kromofor tükenmesi sergiliyor.

Hücre tipi Özgül gösterilmeden FACS yardımlı kullanarak Doku ve Organ spesifik Fitokrom Yanıtları incelenmesi Arabidopsis thaliana</em

Biz canlı bakteri stoma yanıt erişmek için basit ve tekrarlanabilir bir protokol geliştirmiştir. Bu yöntem daha önce bildirdiği epidermal peeling kullanımı ile karşılaştırıldığında yaprak yaralama ve manipülasyona en aza indirir.

Tüm Yaprak Görüntüleme kullanarak Bakteriyel Hücreler Live Stoma Tepki Değerlendirilmesi

Biz perfluorodecalin infiltratif montaj aracı olarak kullanımı açıklanmaktadır. Bu görüntüleme derinliğini artırmak için basit bir yöntem.

Görüntüleme için Basit Bir Yöntem Arabidopsis Infiltratif Görüntüleme Orta Perfluorodecalin kullanarak bırakır.

Hücre Özgül Analizi<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Floresans Aktif Hücre Ayırma kullanma Leaves

Ca 2 + sinyalizasyon tesislerinde çeşitli biyolojik süreçleri düzenler. Burada mekansal ve zamansal Ca kaynaklı abiyotik stres izlemek için yaklaşımlar sunmak Arabidopsis hücre ve genetik olarak kodlanmış Ca 2 + göstergeleri Aequorin veya Case12 kullanarak dokularda 2+ sinyaller.

Ölçme Mekansal ve zamansal Ca 2+ Sinyalleri

Bu protokolün amacı stoma kompleksinin hücre korteks içinde, GFP etiketli PATROL1, bir membran kaçakçılığı protein noktalar yanıp sönen gösteren değişken açılı Epifloresans mikroskobu ile bitki hücre yüzeylerinde floresan etiketli protein dinamikleri izlemek için nasıl göstermek için Arabidopsis thaliana.

Değişken açılı Epifloresans Mikroskopi ile Bitki Hücre Yüzey Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme

Floresan canlı görüntüleme Arabidopsis thaliana yaprakların uzun bir zaman aralığı içinde gerçekleştirmek için basit ve çok yönlü bir yöntemi bildirin. Biz bir transgenik Arabidopsis bitki bitki bağışıklık yanıtı kronolojik zamanmekansal anlayış kazanıyor için bir örnek olarak bir bağışıklık ile ilgili düzenleyici denetimi altındaki bir floresan muhabir gen ifade kullanın.

Arabidopsis montaj için çok yönlü bir yöntem Intravital zaman hata görüntüleme için yaprakları

Bu protokol amacı nasıl Arabidopsisalt kısımlarında farklı sitelere CFDA yüklemek için göstermek için. Daha sonra çekim içinde CF ortaya çıkan dağıtım deseni sunuyoruz.

Arabidopsis 'In alt lavabo dokularında yüklü CFDA Tracer Shootward hareketi

Daha yüksek tesislerde fotosentetik tepkileri incelemek için yeni bir teknik  yaklaşım tanımlıyoruz. Arabidopsis'te aynı yaprak alanı.

Yaprak Reflektasyonu ve Klorofil Floresan Analizlerinin Eşzamanlı Ölçümleri ile Fotosentetik Davranışların Değerlendirilmesi

Bir plazma membran reseptörü kinazının membran kaçakçılığı olaylarını incelemek için burada yaygın olarak kullanılan birkaç yöntem tanıtılmaktadır. Bu yazıda bitki materyali hazırlama, farmakolojik tedavi ve konfokal görüntüleme kurulumu dahil olmak üzere ayrıntılı protokoller açıklanmaktadır.

Stoma Soy Hücrelerinde Membran Kaçakçılığı Olaylarını İncelemek için Görüntü Tabanlı Yöntemler

Bu süreç, Arabidopsis thaliana'da floresan etiketlenmiş çekirdek ve kromatin işaretleyici çizgisi ile birlikte konfokal mikroskopi kullanarak Arabidopsis köklerinde çekirdek ve kromatin dinamiklerini aynı anda kaydeder ve gelişimsel ile çevresel ipuçlarına yanıt olarak bu dinamiklerdeki değişiklikleri araştırır.

Arabidopsis thaliana Kökünde Gelişim Sırasında Nükleer Şekil ve Kromatin Dinamiklerinin Nicel Canlı Hücre Görüntülemesi ve Çevresel Stres

Öğrenin, Arabidopsis thaliana yapraklarında kloroplast hareketini ölçmek için yaprak iletimindeki değişiklikleri kullanmayı. Bu yarı otomatik yöntem, bitki fizyolojisi ve ışık adaptasyon mekanizmalarını araştırmak için uygun maliyetli bir çözüm sunar.

Arabidopsis thaliana'daki Kloroplast Hareketini Araştırmak için Yaprak İletiminde Değişiklikleri Kullanma

Daha fazla video keşfet