Name: Spinal Nosiseptif Devrelerde Ağ Aktivitesini Mikroelektrot Dizileri Kullanarak Kaydetme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 28 s
Description: Öğrenin, mikroelektrot dizileri kullanarak fare omurilik dorsal boynuz kesitlerinde ağ düzeyinde elektriksel aktiviteyi kaydetme ve analiz etme yöntemini. Bu protokol, ağ dinamiklerini incelemek ve antinosiseptif bileşikleri taramak için sağlam bir platform sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Avustralya Ulusal Sağlık ve Tıbbi Araştırma Konseyi (NHMRC) (B.A.G. ve R.J.C.'ye 631000, 1043933, 1144638 ve 1184974 hibe) ve Hunter Tıbbi Araştırma Enstitüsü (B.A.G. ve R.J.C.'ye hibe) tarafından finanse edilmiştir.

<ol><li>Smith, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calretinin+positive+neurons+form+an+excitatory+amplifier+network+in+the+spinal+cord+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Calretinin positive neurons form an excitatory amplifier network in the spinal cord dorsal horn.</a> eLife. 8, 49190(2019).</li>
<li>Smith, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+calretinin-expressing+neurons+in+the+mouse+superficial+dorsal+horn%3A+implications+for+spinal+pain+processing%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+physiology%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of calretinin-expressing neurons in the mouse superficial dorsal horn: implications for spinal pain processing.</a> The Journal of physiology. 593 (19), 4319-4339 (2015).</li>
<li>Boyle, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+a+spinal+microcircuit+that+gates+myelinated+afferent+input%3A+Implications+for+tactile+allodynia%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Defining a spinal microcircuit that gates myelinated afferent input: Implications for tactile allodynia.</a> Cell Reports. 28 (2), 526-540 (2019).</li>
<li>Browne, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+cross-referencing+of+inhibitory+and+excitatory+interneuron+populations+to+dissect+neuronal+heterogeneity+in+the+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Molecular+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Transgenic cross-referencing of inhibitory and excitatory interneuron populations to dissect neuronal heterogeneity in the dorsal horn.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 13, 32(2020).</li>
<li>Graham, B. A., Hughes, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rewards%2C+perils+and+pitfalls+of+untangling+spinal+pain+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Rewards, perils and pitfalls of untangling spinal pain circuits.</a> Current Opinion in Physiology. 11, 35-41 (2019).</li>
<li>Todd, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+circuitry+for+pain+processing+in+the+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neuronal circuitry for pain processing in the dorsal horn.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (12), 823-836 (2010).</li>
<li>Hughes, D. I., Todd, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+targets%3A+inhibitory+interneurons+in+the+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Central nervous system targets: inhibitory interneurons in the spinal cord.</a> Neurotherapeutics. 17 (3), 874-885 (2020).</li>
<li>Duan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+spinal+circuits+transmitting+and+gating+mechanical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification of spinal circuits transmitting and gating mechanical pain.</a> Cell. 159 (6), 1417-1432 (2014).</li>
<li>Hachisuka, J., Chiang, M. C., Ross, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Itch+and+neuropathis+itch%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Itch and neuropathis itch.</a> Pain. 159 (3), 603(2018).</li>
<li>Foster, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+ablation%2C+silencing%2C+and+activation+establish+glycinergic+dorsal+horn+neurons+as+key+components+of+a+spinal+gate+for+pain+and+itch%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Targeted ablation, silencing, and activation establish glycinergic dorsal horn neurons as key components of a spinal gate for pain and itch.</a> Neuron. 85 (6), 1289-1304 (2015).</li>
<li>Bourane, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+spinal+circuit+for+light+touch+and+fine+motor+control%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification of a spinal circuit for light touch and fine motor control.</a> Cell. 160 (3), 503-515 (2015).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+spinal+circuits+involved+in+touch-evoked+dynamic+mechanical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification of spinal circuits involved in touch-evoked dynamic mechanical pain.</a> Nature neuroscience. 20 (6), 804-814 (2017).</li>
<li>Peirs, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+allodynia+circuitry+in+the+dorsal+horn+is+defined+by+the+nature+of+the+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Mechanical allodynia circuitry in the dorsal horn is defined by the nature of the injury.</a> Neuron. 109 (1), 73-90 (2021).</li>
<li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circuit+dissection+of+the+role+of+somatostatin+in+itch+and+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Circuit dissection of the role of somatostatin in itch and pain.</a> Nature Neuroscience. 21 (5), 707-716 (2018).</li>
<li>Obien, M. E. J., Deligkaris, K., Bullmann, T., Bakkum, D. J., Frey, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revealing+neuronal+function+through+microelectrode+array+recordings%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Revealing neuronal function through microelectrode array recordings.</a> Frontiers in Neuroscience. 8, 423(2015).</li>
<li>Nam, Y., Wheeler, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+microelectrode+array+technology+and+neural+recordings%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">In vitro microelectrode array technology and neural recordings.</a> Critical Reviews in Biomedical Engineering. 39 (1), 45-61 (2011).</li>
<li>Johnstone, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microelectrode+arrays%3A+a+physiologically+based+neurotoxicity+testing+platform+for+the+21st+century%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicology%22%5BJournal%5D)">Microelectrode arrays: a physiologically based neurotoxicity testing platform for the 21st century.</a> Neurotoxicology. 31 (4), 331-350 (2010).</li>
<li>Stett, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+application+of+microelectrode+arrays+in+drug+discovery+and+basic+research%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Biological application of microelectrode arrays in drug discovery and basic research.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 377 (3), 486-495 (2003).</li>
<li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+and+recent+development+of+the+microelectrode+arrays+%28MEAs%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors+and+Bioelectronics%22%5BJournal%5D)">Trends and recent development of the microelectrode arrays (MEAs).</a> Biosensors and Bioelectronics. 175 (1), 112854(2020).</li>
<li>Chapman, R. J., Cilia La Corte, P. F., Asghar, A. U. R., King, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network-based+activity+induced+by+4-aminopyridine+in+rat+dorsal+horn+in+vitro+is+mediated+by+both+chemical+and+electrical+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Network-based activity induced by 4-aminopyridine in rat dorsal horn in vitro is mediated by both chemical and electrical synapses.</a> The Journal of Physiology. 587, Pt 11 2499-2510 (2009).</li>
<li>Ruscheweyh, R., Sandkühler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epileptiform+activity+in+rat+spinal+dorsal+horn+in+vitro+has+common+features+with+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Epileptiform activity in rat spinal dorsal horn in vitro has common features with neuropathic pain.</a> Pain. 105 (1-2), 327-338 (2003).</li>
<li>Kay, C. W., Ursu, D., Sher, E., King, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+Cx36+and+Cx43+in+4-aminopyridine-induced+rhythmic+activity+in+the+spinal+nociceptive+dorsal+horn%3A+an+electrophysiological+study+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">The role of Cx36 and Cx43 in 4-aminopyridine-induced rhythmic activity in the spinal nociceptive dorsal horn: an electrophysiological study in vitro.</a> Physiological Reports. 4 (14), 12852(2016).</li>
<li>Jankowska, E., Lundberg, A., Rudomin, P., Sykova, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+4-aminopyridine+on+synaptic+transmission+in+the+cat+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of 4-aminopyridine on synaptic transmission in the cat spinal cord.</a> Brain Research. 240 (1), 117-129 (1982).</li>
<li>Semba, K., Geller, H. M., Egger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4-Aminopyridine+induces+expansion+of+cutaneous+receptive+fields+of+dorsal+horn+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">4-Aminopyridine induces expansion of cutaneous receptive fields of dorsal horn cells.</a> Brain Research. 343 (2), 398-402 (1985).</li>
<li>Ruscheweyh, R., Sandkühler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-range+oscillatory+Ca2%2B+waves+in+rat+spinal+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Long-range oscillatory Ca2+ waves in rat spinal dorsal horn.</a> European Journal of Neuroscience. 22 (8), 1967-1976 (2005).</li>
<li>Egert, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+organotypic+long-term+culture+of+the+rat+hippocampus+on+substrate-integrated+multielectrode+arrays%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Protocols%22%5BJournal%5D)">A novel organotypic long-term culture of the rat hippocampus on substrate-integrated multielectrode arrays.</a> Brain Research Protocols. 2 (4), 229-242 (1998).</li>
<li>Thiebaud, P., De Rooij, N., Koudelka-Hep, M., Stoppini, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microelectrode+arrays+for+electrophysiological+monitoring+of+hippocampal+organotypic+slice+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Microelectrode arrays for electrophysiological monitoring of hippocampal organotypic slice cultures.</a> IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 44 (11), 1159-1163 (1997).</li>
<li>Rey, H. G., Pedreira, C., Quiroga, R. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+spike+sorting+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of spike sorting techniques.</a> Brain Research Bulletin. 119, 106-117 (2015).</li>
<li>Satuvuori, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+of+spike+train+synchrony+for+data+with+multiple+time+scales%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Measures of spike train synchrony for data with multiple time scales.</a> Journal of Neuroscience Methods. 287, 25-38 (2017).</li>
<li>Mendis, G. D. C., Morrisroe, E., Reid, C. A., Halgamuge, S. K., Petrou, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+local+field+potentials+of+dissociated+cultures+grown+on+multi-electrode+arrays+for+pharmacological+assays%5BTitle%5D)+AND+%2238th+Annual+International+Conference+of+the+IEEE+Engineering+in+Medicine+and+Biology+Society%22%5BJournal%5D)">Use of local field potentials of dissociated cultures grown on multi-electrode arrays for pharmacological assays.</a> 38th Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society. , 952-956 (2016).</li>
<li>Hughes, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological%2C+neurochemical+and+electrophysiological+features+of+parvalbumin-expressing+cells%3A+a+likely+source+of+axo-axonic+inputs+in+the+mouse+spinal+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Morphological, neurochemical and electrophysiological features of parvalbumin-expressing cells: a likely source of axo-axonic inputs in the mouse spinal dorsal horn.</a> The Journal of Physiology. 590 (16), 3927-3951 (2012).</li>
<li>Peirs, C., Seal, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+circuits+for+pain%3A+recent+advances+and+current+views%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Neural circuits for pain: recent advances and current views.</a> Science. 354 (6312), 578-584 (2016).</li>
<li>Li, J., Baccei, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+regulation+of+membrane+excitability+in+rat+spinal+lamina+I+projection+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Developmental regulation of membrane excitability in rat spinal lamina I projection neurons.</a> Journal of Neurophysiology. 107 (10), 2604-2614 (2012).</li>
<li>Li, J., Baccei, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pacemaker+neurons+within+newborn+spinal+pain+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Pacemaker neurons within newborn spinal pain circuits.</a> Journal of Neuroscience. 31 (24), 9010-9022 (2011).</li>
<li>Sandkühler, J., Eblen-Zajjur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+rhythmic+nociceptive+and+non-nociceptive+spinal+dorsal+horn+neurons+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of rhythmic nociceptive and non-nociceptive spinal dorsal horn neurons in the rat.</a> Neuroscience. 61 (4), 991-1006 (1994).</li>
<li>Lucas-Romero, J., Rivera-Arconada, I., Roza, C., Lopez-Garcia, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+and+classification+of+spontaneous+discharges+in+mouse+superficial+dorsal+horn+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Origin and classification of spontaneous discharges in mouse superficial dorsal horn neurons.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9735-9735 (2018).</li>
<li>Antonio, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((L.+al.+In+vitro+seizure+like+events+and+changes+in+ionic+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">L. al. In vitro seizure like events and changes in ionic concentration.</a> Journal of Neuroscience Methods. 260, 33-44 (2016).</li>
<li>Avoli, M., Jefferys, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+drug-induced+epileptiform+synchronization+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Models of drug-induced epileptiform synchronization in vitro.</a> Journal of Neuroscience Methods. 260, 26-32 (2016).</li>
<li>Taccola, G., Nistri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+micromolar+concentrations+of+4-aminopyridine+facilitate+fictive+locomotion+expressed+by+the+rat+spinal+cord+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Low micromolar concentrations of 4-aminopyridine facilitate fictive locomotion expressed by the rat spinal cord in vitro.</a> Neuroscience. 126 (2), 511-520 (2004).</li>
<li>Mitra, P., Brownstone, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vitro+spinal+cord+slice+preparation+for+recording+from+lumbar+motoneurons+of+the+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">An in vitro spinal cord slice preparation for recording from lumbar motoneurons of the adult mouse.</a> Journal of Neurophysiology. 107 (2), 728-741 (2012).</li>
<li>Egert, U., Heck, D., Aertsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-dimensional+monitoring+of+spiking+networks+in+acute+brain+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Two-dimensional monitoring of spiking networks in acute brain slices.</a> Experimental Brain Research. 142 (2), 268-274 (2002).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Spinal DH'nin nosiseptif sinyalleme, işleme ve bunun sonucunda ağrıyı karakterize eden davranışsal ve duygusal tepkilerdeki önemine rağmen, bu bölgedeki devreler tam olarak anlaşılamamıştır. Bu konunun araştırılmasında önemli bir zorluk, bu devreleri oluşturan nöron popülasyonlarının çeşitliliği olmuştur 6,31,32. Optogenetik ve kemogenetik tarafından yönetilen transgenik teknolojilerdeki son gelişmeler, bu önemli bağlantıları çö...

Spinal kord DH içindeki spesifik inhibitör ve uyarıcı internöron tiplerinin rolleri 1,2,3,4 oranında hızlı bir şekilde ortaya çıkarılmaktadır. Birlikte, internöronlar DH'deki nöronların% 95'inden fazlasını oluşturur ve nosiseptif de dahil olmak üzere duyusal işlemede rol oynarlar. Ayrıca, bu internöron devreleri, periferik sinyallerin beyne ulaşmak için nöroaksiye yükselip yükselmediğini ve ağrı algısına katkıda bulunup bulunmadığını belirlemek için önemlidir 5,6,7. Bugüne kadar, çoğu çalışma, in vitro hücre içi elektrofizyoloji, nöroanatomik etiketleme ve in vivo davranışsal analiz 1,3,8,9,10,11,12,13,14 kombinasyonlarını kullanarak DH nöronlarının tek hücreli veya tüm organizma analiz düzeyindeki rolünü araştırmıştır. . Bu yaklaşımlar, spesifik nöron popülasyonlarının ağrı işlemedeki rolünün anlaşılmasını önemli ölçüde geliştirmiştir. Bununla birlikte, spesifik hücre tiplerinin ve küçük makro devrelerin, DH'nin çıktısını, davranışsal tepkileri ve ağrı deneyimini şekillendirmek için mikrodevre düzeyinde büyük nöron popülasyonlarını nasıl etkilediğini anlamada bir boşluk kalmaktadır.
Makro devre veya çok hücreli seviye fonksiyonunu araştırabilen bir teknoloji, mikroelektrot dizisidir (MEA)15,16. MEA'lar birkaç on yıldır sinir sistemi fonksiyonunu araştırmak için kullanılmıştır17,18. Beyinde, nöronal gelişim, sinaptik plastisite, farmakolojik tarama ve toksisite testi17,18 çalışmasını kolaylaştırmışlardır. MEA tipine bağlı olarak hem in vitro hem de in vivo uygulamalar için kullanılabilirler. Ayrıca, MEA'ların gelişimi hızla gelişti, farklı elektrot sayıları ve konfigürasyonları artık mevcut19. MEA'ların önemli bir avantajı, birçok nörondaki elektriksel aktiviteyi aynı anda çoklu elektrotlar aracılığıyla yüksek uzamsal ve zamansal doğrulukla değerlendirme kapasiteleridir15,16. Bu, nöronların devrelerde ve ağlarda, kontrol koşulları altında ve yerel olarak uygulanan bileşiklerin varlığında nasıl etkileşime girdiğine dair daha geniş bir okuma sağlar.
İn vitro DH preparatlarının bir zorluğu, devam eden aktivite seviyelerinin tipik olarak düşük olmasıdır. Burada, bu zorluk, DH devrelerini kimyasal olarak uyarmak için voltaj kapılı K + kanal blokeri, 4-aminopryidine (4-AP) kullanan omurilik DH devrelerinde ele alınmaktadır. Bu ilaç daha önce akut omurilik dilimlerinin DH'sinde ve akut in vivo koşullar altında ritmik senkron elektriksel aktivite oluşturmak için kullanılmıştır20,21,22,23,24. Bu deneyler, 4-AP ile indüklenen aktivite 20,21,22,23,24,25'i karakterize etmek için tek hücreli yama ve hücre dışı kayıt veya kalsiyum görüntüleme kullanmıştır. Birlikte, bu çalışma ritmik 4-AP kaynaklı aktivite için uyarıcı ve inhibitör sinaptik iletim ve elektriksel sinapsların gerekliliğini göstermiştir. Bu nedenle, 4-AP yanıtı, doğal polisinaptik DH devrelerini ilaca bağlı bir epifenomen olarak değil, biyolojik alaka düzeyi ile maskeleyen bir yaklaşım olarak görülmüştür. Ayrıca, 4-AP ile indüklenen aktivite, nöropatik ağrı koşulları olarak analjezik ve antiepileptik ilaçlara benzer bir yanıt profili sergiler ve konneksinler20,21,22 gibi yeni spinal bazlı analjezik ilaç hedefleri önermek için kullanılmıştır.
Burada, bu nosiseptif devreyi makro devrede veya ağ analiz düzeyinde incelemek için MEA'ları ve spinal DH'nin kimyasal aktivasyonunu 4-AP ile birleştiren bir preparat açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, naif ve nöropatik 'ağrı benzeri' koşullar altında nosiseptif devreleri araştırmak için kararlı ve tekrarlanabilir bir platform sağlar. Bu preparat aynı zamanda bilinen analjeziklerin devre seviyesindeki etkisini test etmek ve hiperaktif omurilikteki yeni analjezikleri taramak için de kolayca uygulanabilir.

<table><tbody><tr><td>4-aminopiridin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>275875-5G</td><td></td></tr><tr><td>% 100 etanol</td><td>Thermo Fisher</td><td>AJA214-2.5LPL</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 1M</td><td>Banksia Scientific</td><td>0430 / 1L</td><td></td></tr><tr><td>Carbonox (Karbojen -% 95 O2,% 5 CO2)</td><td>Coregas</td><td>219122</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli uzun saplı yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15015-11</td><td></td></tr><tr><td>Özel yapım hava arayüzü kuluçka odası</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Thermo Fisher</td><td>10091130</td><td></td></tr><tr><td>Forseps Dumont #5</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11251-30</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz</td><td>Thermo Fisher</td><td>AJA783-500G</td><td></td></tr><tr><td>At serumu</td><td>Thermo Fisher</td><td>16050130</td><td></td></tr><tr><td>Ters mikroskop</td><td>Zeiss</td><td>Axiovert10</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Thermo Fisher</td><td>AJA383-500G</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Ceva</td><td>KETALAB04</td><td></td></tr><tr><td>Büyük cerrahi makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14007-14</td><td></td></tr><tr><td>Loctite 454 Anında Yapışkanlı</td><td>Cıvatalar ve Endüstriyel Malzemeler</td><td>L4543G</td><td></td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks</td><td></td><td>R2018b</td></tr><tr><td>MEA'lar, 3 Boyutlu</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>60-3DMEA100/12/40iR-Ti, 60-3DMEA200/12/50iR-Ti</td><td>60 titanyum nitrür (TiN) elektrotlar, 1 dahili referans elektrotlu, 8x8 kare ızgarada düzenlenmiş. Elektrotlar 12 & m çapında, 40 & m (100/12/40) veya 50 &mikro; m (200/12/50) yüksek ve eşit aralıklı 100 &mikro; m (100/12/40) veya 200 &mikro; m (200/12/50) aralıklı.</td></tr><tr><td>MEA ana sahne</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>MEA2100-HS60</td><td></td></tr><tr><td>MEA arayüz kartı</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>MCS-IFB 3.0 Çoklu Önyükleme</td><td></td></tr><tr><td>MEA net</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>ALA HSG-MEA-5BD</td><td></td></tr><tr><td>MEA perfüzyon sistemi</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>PPS2</td><td></td></tr><tr><td>MEA'lar, Düzlemsel</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td>60MEA200/30iR-Ti, 60MEA500/30iR-Ti</td><td>60 titanyum nitrür (TiN) elektrot ve 1 dahili referans elektrot, 8x8 kare ızgara (200/30) veya 6x10 dikdörtgen ızgara (500/30) şeklinde düzenlenmiştir. Elektrotlar 30 & m çapında ve eşit aralıklı 200 & m (200/30) veya 500 &mikro; m (500/30) aralıklı.</td></tr><tr><td>MgCl2</td> <td>Thermo Fisher</td><td>AJA296-500G</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop kamerası</td><td></td><td>Motic Moticam X Wi-Fi</td><td></td></tr><tr><td>Çok Kanallı Analiz yazılımı</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td></td><td>V 2.17.4</td></tr><tr><td>Çok Kanallı Deneyci yazılımı</td><td>Çok Kanallı Sistemler</td><td></td><td>V 2.17.4</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Termo Balıkçı</td><td>AJA465-500G</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Thermo Fisher</td><td>AJA475-500G</td><td></td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>Thermo Fisher</td><td>ACR207805000</td><td></td></tr><tr><td>Rongeurs</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>16021-14</td><td></td></tr><tr><td>Küçük yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>91500-09</td><td></td></tr><tr><td>Küçük cerrahi makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>Thermo Fisher</td><td>AJA530-500G</td><td></td></tr><tr><td>Süper yapıştırıcı</td><td></td><td></td><td>siyanoakrilat yapıştırıcı</td></tr><tr><td>Tetrodotoksin</td><td>Abcam</td><td>AB120055</td><td></td></tr><tr><td>Titreşim izolasyon tablosu</td><td>Newport</td><td>VH3048W-OPT</td><td></td></tr><tr><td>Titreşimli mikrotom</td><td>Leica</td><td>VT1200 S</td><td></td></tr></tbody></table>

spinal nosiseptif devrelerde ağ aktivitesini mikroelektrot dizileri kullanarak kaydetme

Recording Network Activity in Spinal Nociceptive Circuits Using Microelectrode Arrays

Omurilik dorsal boynuzundaki (DH) spesifik nöron tiplerinin rolleri ve bağlanabilirliği, spinal ağrı işlemeyi destekleyen devrelerin giderek daha ayrıntılı bir görünümünü sağlamak için hızlı bir şekilde tanımlanmaktadır. Bununla birlikte, bu bağlantıların DH'deki daha geniş ağ aktivitesi için etkileri daha az anlaşılmıştır, çünkü çoğu çalışma tek nöronların ve küçük mikro devrelerin aktivitesine odaklanmaktadır. Alternatif olarak, birçok hücredeki elektriksel aktiviteyi izleyebilen mikroelektrot dizilerinin (MEA'lar) kullanılması, nöral aktivitenin yüksek uzamsal ve zamansal çözünürlüğünü sağlar. Burada, 4-aminopiridin (4-AP) ile kimyasal olarak uyarılan DH devrelerinin indüklediği DH aktivitesini incelemek için fare omurilik dilimleri ile MEA'ların kullanımı açıklanmaktadır. Ortaya çıkan ritmik aktivite, zamanla stabil, tetrodotoksin tarafından bloke edilen yüzeysel DH ile sınırlıdır ve farklı dilim oryantasyonlarında araştırılabilir. Birlikte, bu preparat, naif hayvanlardan, kronik ağrının hayvan modellerinden ve genetik olarak değiştirilmiş nosiseptif fonksiyona sahip farelerden dokudaki DH devre aktivitesini araştırmak için bir platform sağlar. Ayrıca, 4-AP ile uyarılmış omurilik dilimlerindeki MEA kayıtları, yeni antinosiseptif bileşiklerin omurilik DH'deki aktiviteyi bozma kapasitesini değerlendirmek için hızlı bir tarama aracı olarak kullanılabilir.

Omurilik dorsal boynuzunda ağ aktivitesi modeli 4-AP uygulaması, omurilik DH'sinde senkron ritmik aktiviteyi güvenilir bir şekilde indükler. Bu tür faaliyetler artan EAP'ler ve LFP'ler olarak ortaya çıkar. Daha sonraki sinyal, daha önce MEA kayıtları30'da açıklanan düşük frekanslı bir dalga şeklidir. İlaç uygulamasından sonra EAP ve/veya LFP aktivitesindeki değişiklikler değişmiş nöral aktiviteyi yansıtır. EAP ve LFP örnekleri Şekil 3B ve <strong c...

Omurilik dorsal boynuzunda ağ düzeyinde nosiseptif aktiviteyi araştırmak için mikroelektrot dizisi teknolojisinin ve 4-aminopiridin kaynaklı kimyasal stimülasyonun kombine kullanımı özetlenmiştir.

Spinal Nosiseptif Devrelerde Ağ Aktivitesini Mikroelektrot Dizileri Kullanarak Kaydetme

The roles and connectivity of specific types of neurons within the spinal cord dorsal horn (DH) are being delineated at a rapid rate to provide an ...

Size açıklanan MEA 4-AP spinal dilim preparatı, dorsal boynuz devrelerinin bağlantısını ve bu ağların spinal duyusal işlem sırasında nasıl etkileşime girdiğini incelemek için bir platform sağlar. Sunulan metodoloji, dorsal boynuz devresi aktivitesinin makroskopik bölgesel çözünürlük düzeyinde araştırılmasını sağlar. Bu preparat, bileşiklerin spinal duyusal devrelerde sinyalleşmeyi bozma yeteneğini değerlendirmek için hızlı bir tarama aracı olarak kullanılabilir.Bu yöntem, belirli hücre tiplerinin ve küçük mikro devrelerin aktivitesinin, dorsal boynuz davranış tepkilerinin çıktısını ve nihayetinde ağrı deneyimini şekillendirmek için büyük nöron popülasyonlarını nasıl etkilediğine dair anlayışımızdaki boşluğu kapatmaya yardımcı olur. Başlamak için, MEA'yı 30 dakika boyunca at serumu ile iyice doldurun. Serumu çıkardıktan sonra, damıtılmış su köpüksüz hale gelene kadar MEA'yı damıtılmış suyla beş kez iyice durulayın.Ardından, kuyuyu yapay BOS ile doldurun. Anestezi uygulanan farenin kafasını kestikten sonra, kalça seviyesinde deride küçük bir kesi yaparak karın bölgesi üzerindeki cildi çıkarın. Daha sonra, tüm cilt göğüs kafesinin üstünden pelvisin tepesine hem ventralal hem de dorsal olarak çıkarılana kadar kesimin her iki tarafındaki cildi rostral olarak çekin.Vücudu buzun üzerine yerleştirdikten sonra, visserayı çıkararak ve kaburgaları yanal olarak sternuma keserek vertebral kolonu açığa çıkarmak için ventral bir yaklaşım kullanın. Ventral göğüs kafesini, hem kürek kemiğini hem de alt ekstremiteleri ve pelvisi çıkarın. Vertebral kolon ve kaburga preparatını, buz gibi soğuk sakkaroz yapay BOS içeren bir diseksiyon banyosuna aktarın.Pimleri alt sırt kaslarından ve bağlı üst kaburgalardan geçirerek preparatın dört köşesini de sabitleyin. Omurların ventral yüzeyini kaplayan tüm kas ve bağ dokusunu rongeurlarla çıkarın ve yaklaşık olarak T12-L2 vertebral gövdelerinin altında yatan lumbo-sakral genişleme üzerindeki vertebral bölgeyi tanımlayın. Vertebral kanalda oturan omuriliğe erişmek için lumbo-sakral genişleme bölgesine bir vertebral vücut kaudalini çıkarın.Kavisli yay makası kullanarak, omurların ventral ve dorsal yönlerini ayırmak ve omuriliği açığa çıkarmak için vertebral gövdeyi rostral olarak kaldırırken ve çekerken vertebral pedikülleri iki taraflı olarak kesin. Lumbo-sakral genişlemeyi ortaya çıkarmak için vertebral cisimler çıkarıldıktan sonra, kordon serbest yüzene kadar omuriliği yaylı makasla sabitleyen kalan kökleri dikkatlice temizleyin. Kordonun hedef bölgesini serbest yüzer hale getirmek için omuriliği lumbo-sakral genişlemenin üstünde ve altında rostral ve kaudal kesiklerle izole edin.Enine dilimler için, lumbo-sakral segmenti, merkezinde sığ bir kanal kesimi olan önceden kesilmiş bir polistiren blok üzerine bağlı bir rota ile kaldırın ve yerleştirin. Daha sonra, bloğu ve kordonu kesit platformuna bağlamak için siyanoakrilat yapıştırıcı kullanın ve buz gibi soğuk sakkaroz yapay BOS bulamacı içeren kesme banyosuna yerleştirin. 300 mikrometre kalınlığındaki dilimler elde edildikten sonra, dilimleri oksijenli yapay BOS içeren bir hava arayüzü inkübasyon odasına aktarın ve dilimlerin oda sıcaklığında bir saat boyunca dengelenmesine izin verin.Dorsal boynuz aktivitesini kaydetmeye başlamak için, yapay BOS ile doldurulmuş büyük uçlu bir pastör pipeti kullanarak dilimi inkübatörden MEA kuyusuna aktarın ve ek yapay BOS ekleyin. Dilimi 60 elektrot kayıt dizisinin üzerine yerleştirmek için ince bir kısa saç boya fırçası kullanın. Ardından, yerinde tutmak ve MEA elektrotlarıyla iyi teması teşvik etmek için dokunun üzerine ağırlıklı bir boyun yerleştirin.MEA'yı kayıt merkezi sahnesine yerleştirin. Yüzeysel DH'nin altında mümkün olduğunca çok elektrotun olduğunu doğrulamak için ters çevrilmiş bir mikroskop kullanarak dokunun elektrotlar üzerindeki konumunu kontrol edin. En az iki ila altı elektrotun dilimle temas etmediğinden emin olun. Fotoğraf makinesini cihaza bağladıktan sonra, analiz sırasında kullanmak üzere MEA'ya göre dilimin referans görüntüsünü alın.Ardından, kayıt yazılımında DAQ'yı başlat'a basın ve tüm elektrotların net bir sinyal aldığını onaylayın. Daha sonra, perfüzyon giriş ve çıkış hatlarını yapay BOS ile doldurulmuş MEA'ya takın ve perfüzyon sistemini açın. Akış hızını kontrol edin ve çıkışın süperfüzyonun taşmasını önlemek için yeterli olduğundan emin olun.Dokuyu beş dakika boyunca dengeledikten sonra, ham temel verileri beş dakika boyunca kaydedin. Perfüzyon giriş hattını yapay BOS'tan 4-aminopiridin çözeltisine taşıyın ve 4-aminopiridin kaynaklı ritmik aktivitenin kararlı duruma ulaşması için 12 dakika bekleyin. Daha sonra, beş dakikalık 4-aminopiridin kaynaklı aktivite kaydedin ve ilaçları test etmek veya 4-aminopiridin stabilitesini kontrol etmek için sonraki kayıtlara hazırlanın.Her kayıt oturumunu takiben, çizgileri yapay BOS ile durulayın. MEA'yı baş evresinden çıkardıktan ve ağı ve dokuyu MEA'dan iyice çıkardıktan sonra, MEA'yı ve ağı yapay BOS ile durulayın ve tüm işlemi yeni bir dilimle tekrarlayın. Analiz yazılımını açın ve önceden hazırlanmış analiz düzenini yükleyin.İlgilenilen dosyayı açın ve referans elektrodunun ve aşırı gürültülü olduğu düşünülen elektrotların seçimini kaldırın. Analiz için zaman penceresini ayarlayın. Ardından, kanallar arası filtre sekmesine gidin.Deney sırasında alınan görüntüye ve notlara göre karmaşık referans ve referans elektrotlarını seçin ve devam etmeden önce Keşfet'e basın. EAP filtresi sekmesine gidin ve LFP etkinliğini kaldırmak için ikinci dereceden yüksek geçişli bir Butterworth filtresi uygulayın. LFP filtresi sekmesine gidin ve EAP etkinliğini kaldırmak için ikinci dereceden bir bant geçişi Butterworth filtresi uygulayın.EAP algılayıcısı sekmesinde, otomatik eşiği seçtiğinizden emin olun, yükselen ve alçalan kenar kutularını işaretleyin ve ölü süreyi üç milisaniye olarak ayarlayın. Pozitif ve negatif eşikler ayarlamak için, ham veri çözümleyicisi ekranına dönerek, zaman işaretçisini hareket ettirerek, EAP algılayıcısı sekmesine dönerek ve araştır düğmesine basarak verileri inceleyin. Ayarlanan algılama eşiği EAP'leri gürültü veya fizyolojik olmayan etkinlik yakalamadan yakalayana kadar işlemi tekrarlayın.LFP dedektörü sekmesinde, manuel eşiği seçtiğinizden, yükselen ve alçalan kenar kutularını işaretlediğinizden ve ölü süreyi üç milisaniyeye ayarladığınızdan emin olun. Bir elektrot için eşik değerini ayarlayın ve tatmin olduktan sonra tümüne uygula'yı seçin ve ardından analizi başlat'a basın. Voltaj kapılı sodyum kanal antagonisti tetrodotoksinin banyo uygulaması, hem EAP hem de LFP aktivitesini ortadan kaldırdı ve bu sinyallerin ani bağımlılığını doğruladı.4-aminopiridin ile indüklenen aktivite parametrelerinin stabilitesi EAP veya LFP için karakterize edildi. Tüm aktivite özellikleri artı LFP'ler için aktivitenin tesadüfü, 4-aminopiridin uygulamasından 12 dakika sonra ve 15 dakika sonra 4-aminopiridin kaynaklı aktivitenin benzerliğine dayanarak kararlıydı. Özelliğin EAP'leri veya LFP'leri, çoklu elektrotlarda tespit edilen tesadüfi olayların sayısındaki artışla karakterize edildi.Bağlı bitişik elektrotların sayısı ve 4-aminopiridin stimülasyonunu ve daha sonra göreceli stabiliteyi takiben bitişik elektrotlar ve LFP'ler arasındaki bağlantıların gücü. Dilim oryantasyonu, in vitro preparatlar için önemli bir husustur. 4-aminopiridin stimülasyonu, dilim oryantasyonundan bağımsız olarak SDH'de benzer bir ritmik aktiviteye neden oldu.Son olarak, DH ağlarının 4-aminopiridin aktivasyonunun önemine daha fazla ışık tutmak için, yüksek bir potasyum yapay BOS çözeltisi banyo uygulandı ve 4-aminopiridin stimülasyonuna benzer bir DH yanıtı uyandırdığı gösterildi. Protokoldeki kilit adımlar, doku hazırlama ve bölümlerin yerleştirilmesinde, dikkatli ancak zamanında diseksiyon yoluyla dokunun sağlıklı olmasını sağlamak ve dokunun MEA üzerinde hassas optimal konumlandırılması, kaliteli sonuçların elde edilmesine yardımcı olacaktır.

recording-network-activity-spinal-nociceptive-circuits-using

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Video, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerden (hiPSC'ler) türetilen nöronların elektrofizyolojik aktivitesini kaydetmek için bir mikroelektrot dizisinin (MEA) nasıl kullanılacağını gösterir. Bir nöron-astrosit ko-kültürü içeren çok kuyulu bir MEA'dan elde edilen elektrofizyolojik aktivite, ağdaki birden fazla nörondan gelen aksiyon potansiyellerini tespit etmek için kaydedilir ve hiPSC'lerin nöronlara başarılı bir şekilde farklılaştığını doğrular.

Mikro-elektrot dizileri kullanılarak nöronal ağların elektrofizyolojik aktivitesinin ölçülmesi

Bu video, bir çoklu elektrot dizisi (MEA) üzerinde primer murin spiral ganglion nöron (SGN) kültürlerinden spontan ve stimülasyona bağlı nöral aktivitenin kaydını göstermektedir. MEA'nın yıkanmasını ve hazırlanmasını, spontan nöral aktivitenin kaydedilmesini ve stimülasyona bağlı nöronal aktiviteyi tanımlamak için kontrollü elektriksel uyaranların uygulanmasını içerir.

Primer Murin Spiral Ganglion Nöronlarında Nöral Aktivitenin Multielektrot Dizileri Kullanılarak Analiz Edilmesi

Bu video, trans-spinal doğru akım stimülasyonu altında sıçan motonöronlarının in vivo hücre içi kaydını açıklar. Protokol, omuriliğin anodal veya katodal polarizasyonu öncesinde, sırasında ve sonrasında membran özelliklerinin nasıl ölçüleceğini ve motonöronların ritmik ateşlemesinin nasıl kaydedileceğini açıklar.

Bir sıçanın spinal motonöronunun trans-spinal doğru akım stimülasyonu

Bu video, fare omurilik bölümlerinde nöronal ağ aktivitesini incelemek için mikroelektrot dizisi tabanlı bir testi göstermektedir. İlk olarak, dilimin yüzeysel dorsal boynuzundan (SDH) gelen elektrofizyolojik aktivite kaydedilir. Daha sonra, depolarizasyonu uzatmak için bir potasyum kanal inhibitörü eklenir ve bu da nöronal ağ boyunca senkron ritmik aktivite ile sonuçlanır.

Fare Omurilik Dilimlerinde Nöronal Ağların Mikroelektrot Dizisi Tabanlı Değerlendirmesi

Bu video, sıçanlarda C-fiber sinir iletiminin tek lifli bir kaydını göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçan, alt ekstremitelere duyusal ve motor besleme sağlayan siyatik siniri açığa çıkarmak için kesilir. Tek tek C-lifleri daha sonra açığa çıkar. Ayağa yerleştirilen uyarı elektrotları kullanılarak elektriksel stimülasyon sağlanır ve tek bir sinir lifinden yanıt kaydedilir.

Sıçanlarda siyatik sinir C-liflerinin in vivo tek lif kaydı

4 aminopyridine uyarılan epileptiform aktivite kayıt ve elektrik modülasyon elektrot dizileri kullanma kemirgen beyin dilimler halinde gerçekleştirme göstermektedir. Özel kayıt odası doku canlılığı uzun süreli deneysel oturumları boyunca korur. Elektrot eşleme yaşamak ve uyarıcı çiftlerinin seçimi özel bir grafik kullanıcı arabirimi tarafından yapılmaktadır.

Kayıt ve modülasyon Epileptiform aktivite elektrot dizilerin birleştiğinde kemirgen beyin dilimleri içinde

Biz aynı anda hem electrocorticography hem de yerel alan potansiyelleri fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt kaydeder bir teknik geliştirmiştir. Bu teknik araştırma nosiseptif bilgi beyinde işleme kolaylaştırır electrocortical sinyalleri mezoskopik ve makroskopik düzeyde, doğrudan bir ilişki kurmak yardımcı olur.

Kortikal yerel alan potansiyelleri ve Electrocorticograms fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt olarak eşzamanlı kayıt

Tek lifli kayıt, merkezi ve periferik sinir sistemleri için geçerli olan etkili bir elektrofizyolojik tekniktir. Bağlı siyatik sinir ile bozulmamış DRG hazırlanması ile birlikte, iletim yetmezliği mekanizması incelenir. Her iki protokol de periferik sinir sisteminin ağrı ile ilişkisini geliştirmek.

İletim Yetmezliği Mekanizmasını İncelemek Için Bağlı Siyatik Sinir ile In Vivo Tek Lifli Kayıt ve Bozulmamış Dorsal Kök Ganglion Kullanımı

Bu protokol, eşzamanlı trans-spinal doğru akım stimülasyonu ile sıçan lomber motoneurons in vivo hücre içi kayıt açıklar. Bu yöntem, omuriliğin anodal veya kahodal polarizasyonuöncesinde, sırasında ve sonrasında motononların ritmik ateşlemesini kaydetmemizi sağlar.

Trans-Spinal Doğrudan Akım Stimülasyonu Sırasında Tip-Tanımlanmış Sıçan Spinal Motoneurons In Vivo Hücre İçi Kayıt

APTrack, gerçek zamanlı veri görselleştirme ve nöronal aksiyon potansiyellerinin kapalı döngü elektriksel eşik takibini sağlayan Open Ephys platformu için geliştirilmiş bir yazılım eklentisidir. Bunu mikronörografide insan C-fiber nosiseptörleri ve fare C-fiber ve Aδ-fiber nosiseptörleri için başarıyla kullandık.

Translasyonel ağrı araştırması için açık kaynaklı gerçek zamanlı kapalı döngü elektrik eşiği izleme

Burada, sinir lifi alt tiplerinin aktivitesini ayırt edebilen iki tür omurga elektrofizyolojik ölçümü kullanarak periferik sinirlerdeki çevresel sinirlerdeki duyusal aksonların aktivasyonu ve bloklanmasını değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz: Yerel Alan Potansiyelleri ve Geniş Dinamik Aralıklı tek nöron kayıtları.

Anestezi Edilmiş Bir Farede Çevresel Ağrı Blokunu Değerlendirmek İçin Elektrofizyolojik Yöntemler

Öğrenin, mikroelektrot dizileri kullanarak fare omurilik dorsal boynuz kesitlerinde ağ düzeyinde elektriksel aktiviteyi kaydetme ve analiz etme yöntemini. Bu protokol, ağ dinamiklerini incelemek ve antinosiseptif bileşikleri taramak için sağlam bir platform sunar.

Spinal Nosiseptif Devrelerde Ağ Aktivitesini Mikroelektrot Dizileri Kullanarak Kaydetme

Daha fazla video keşfet