Murine Hind-limb Damarlarının Bilgisayarlı Tomografi Tabanlı Üç Boyutlu Görselleştirilmesi için Örnek Hazırlık

Burada, mikro-X-ışını bilgisayarlı tomografi kullanarak murine arka eks uzuv damarları için bir görselleştirme ve niceleme yöntemini açıklıyoruz.

Alt uzuvlardaki ve karın organlarındaki kan damarlarının BT görüntülerini adım protokolü kullanılarak çekmek mümkündür. Yöntem, tüm kan damarlarının kapsamlı bir şekilde değerlendirilmesini sağlar. Ek olarak, sadece arterleri veya aynı zamanda arterleri ve damarları değerlendirmek mümkündür.

Kan pıhtılarını, sızan veya kanı iyi önlemek ve hava kabarcıklarından kaçınmak çok önemlidir. Operasyondan önce, PBS'deki 1 birim/gram heparini farenin intraperitoneal boşluğuna enjekte edin. 30 dakika sonra, ötenazili farenin sternumunda bir orta çizgi kesisi yapın ve açık toraksı pimlerle sabitleyin.

Kalbi çıkarmadan önce yükselen aortu kesin ve ardından inen aortu açığa çıkarmak için akciğeri çıkarın. Geminin kesitini ortaya çıkarmak için alçalanı çapraz olarak kesin. Ardından, vazodilasyon tamponunu çalıştırırken azalan aort içine 22 ölçer kateter yerleştirin.

Kateterin kökünü sabitleyin ve geri akış nedeniyle sızıntıyı önlemek için bir düğüm yapın. Tamamlandığında, perfüzyonu 13 ila 15 kilopaskal arasında sabit bir basınçta ısıtılmış bir vazodilasyon çözeltisi ile başlatın. Üç dakika sonra, PBS'de% 4 paraformaldehit çözeltisi 3 dakika boyunca perfuse.

Perfüzyonu durdurun ve katetere bağlı uzatma tüpünü 13 ila 15 kilopaskal arasında sabit bir şekilde perfüzyon için 1:1 oranında seyreltilmiş taze hazırlanmış kontrast ortamının 2 mL'si ile doldurun. Arterleri görselleştirmek için, kontrast ortamının artere ulaştığını doğrulamak için ağzın tırnağı kontrol edin. Aynı şekilde, kontrast ortamının tam dolaşımını onaylamak ve tüm damarları görselleştirmek için diyaframın alt vena kavasını kontrol edin.

Kontrast ortamının dolaşımı tamamlandıysa, üç yönlü stopcock'u kapatın ve tüpü çıkarın. Numuneyi 4 santigrat derecede bir gecede kuluçkaya yatırın. Bu protokolde, farenin alt ekstremitelerindeki tüm damarlar görselleştirildi.

Arka ekspertiz iskemi modelinin sonuçları, liglenmemiş femoral arterin femoral damara paralel çalıştığını doğruladı. Ayrıca, kontrast ortamdaki kesinti, liglenmiş bir femoral arteri ve kollateral damarların gelişimini görüntülemeyi kolaylaştırdı. Kontrast ortamı ile dolu birkaç gemi görüntülenebilir.

Öte yandan, kontrast ortamdaki bozulma, noncontrast ortamların karıştırılması veya yetersiz perfüzyon nedeniyle de fark edildi. Vücudun yüzeyindeki arterleri, vaskültürdeki kusurları değerlendirmeyi kolaylaştıran kontrast ortamının mikroskobik gözlemi ile görüntülemek imkansızdı. Kateteri takarken hava kabarcıklarından kaçınmak çok önemlidir.

Karın organları da gevşediği için organlardan dışarı çıkıp tomografi çektirmek mümkündür. Bu yöntemi kullanarak, doygunluk yeni bir çeyrek tanımlayabildik.