Name: Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-12-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 29 s
Description: Keşfedin farelerde miyokard enfarktüsü indüksiyonu için değiştirilmiş basit bir cerrahi yöntemi. Sol ön inen arter ligasyonu kullanarak kalp remodelasyonu ve yeni tedavilerin değerlendirilmesi için güvenilir bir model oluşturun.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), Şanghay Üstün Akademik Liderler Programı (18XD1402400), Şanghay Belediyesi Bilim ve Teknoloji Komisyonu (201409005200), Şanghay Pujiang Yetenek Programı (2020PJD030) ve Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı (2020M671161, BX20190216).

Hayvan çalışmalarını içeren deneyler, Şanghay Jiao Tong Üniversitesi Tıp Fakültesi, Renji Hastanesi Laboratuvar Hayvanları Refahı Etik Kurulu'ndan (R52021-0506) gerekli tüm onaylarla gerçekleştirilir. Çalışmada 8-10 hafta arasında değişen dişi ve erkek C57BL/6J fareler kullanıldı.
1. Basitleştirilmiş anestezi ekipmanının hazırlanması (OPSİYONEL)
NOT: Bu, isteğe bağlı bir ameliyat öncesi kurulumdur ve bölüm 2'de belirtildiği gibi titre edilebilir anestezi ile değiştirilebilir. Bu düzen hayvan prosedürlerine uyarlanmadan önce kurumsal hayvan etik kuruluna ve veteriner hekim(ler)e danışılmalıdır.
<ol><li>15 mL'lik bir santrifüj tüpü alın ve açıklıktan yaklaşık 3 cm uzakta tüpün uzun eksenine dik bir kesim yapın. NOT: Valfin başarılı bir şekilde yerleştirilebilmesi için kesimin boru lümeninin dairesel çevresinin yarısından büyük olduğundan emin olun.</li>
	<li>Kesim ve tüp açıklığı arasındaki santrifüj tüpü duvarında delikler (çap, 2 mm) açın.</li>
	<li>Plastik bir tabakadan valfin uygun boyutta bir parçasını kesin ve valfi boru duvarındaki oyuğa yerleştirin. NOT: Valf, yerleştirme derinliğini değiştirerek izofluranın salım hızını kontrol etmek için kullanılabilir.</li>
	<li>Bir çeker ocak içinde, tüpün altını kesin ve oksijen kaynağına bağlayın. Tüpün alt ucuna yakın bir pamuk top yerleştirin, pamuk topunun üzerine 0.5 mL izofluran (elde edildiği gibi, Malzeme Tablosuna bakın) yükleyin ve valfi kapatın.</li>
	<li>Fareleri yukarıda tarif edildiği gibi hazırlanmış tüplerle maskeleyerek anestezi etkinliğini test edin. Solunum hızını ve anestezi derinliğini ayak parmağı sıkışma tepkisi ile izleyin. NOT: Solunum hızının 10 kez/10 saniyeden az olması aşırı anestezi olduğunu gösterir ve valfin yerleştirme derinliği ayarlanmalıdır. Anestezi içeren tüm işlemler için içi aktif karbon levhalarla dolu bir gaz filtresi kullanılmalı (Şekil 1A-i) ve ameliyat bir başlık içinde yapılmalıdır.</li>
</ol>2. Operatif hazırlık ve anestezi
<ol><li>Bir çift forseps, bir mikro sivrisinek kanama durdurucu, bir çift cerrahi makas, iki çift iğne tutucu, 4-0 ipek cerrahi sütür, 6-0 ipek cerrahi sütür, bir gaz filtresi ve bir ışık kaynağı dahil olmak üzere ameliyat gününde gerekli tüm aletleri hazırlayın ve sterilize edin (bkz. Malzeme Tablosu) (Şekil 1A).</li>
	<li>Cerrahi maske ve steril eldiven giyin.</li>
	<li>Tüy dökücü kremi fare göğsüne sürün ve 1 dakika bekleyin. Tüy dökücü kremi ve saçı ıslak gazlı bezle nazikçe silin.</li>
	<li>Epilasyondan sonra fareyi baskın elinizle tutun. Buharlaştırılmış izofluranın (% 4) oksijen kaynağı (1L / dak) ile solunması yoluyla anesteziyi indükleyin ve% 2-3 izofluranda tutun.</li>
	<li>Ayak parmağı sıkışma tepkisi eksikliği ile yeterli anesteziyi onaylayın.</li>
	<li>Kornea kuruluğunu önlemek için her iki göze de steril göz kremi uygulayın.</li>
	<li>Fareleri sırtüstü pozisyonda bir ameliyat platformuna sabitleyin. Povidon-iyot bezlerini göğsüne üç kez uygulayın ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve dezenfekte edilmiş göğsü steril bir örtü ile örtün.</li>
</ol>3. Miyokard enfarktüsünün indüksiyonu
<ol><li>Steriliteyi sağlamak için kontamine eldivenleri değiştirin.</li>
	<li>Lidokain ile lokal bloktan sonra ksifoid ve koltuk altını birleştiren çizgi boyunca 0,5 cm'lik bir cilt kesimi yapın.</li>
	<li>Dördüncü interkostal boşluğu ortaya çıkarmak için forseps ve bir mikro-sivrisinek hemostatı kullanarak pektoral majör ve pektoral minör kasları künt olarak ayırın.</li>
	<li>Bir mikro sivrisinek hemostatı kullanarak dördüncü interkostal boşluğu açın.</li>
	<li>Sol elin işaret parmağı ile kalbi dördüncü interkostal boşluğa doğru iterek kalbi dışsallaştırın.</li>
	<li>Sol el ile kalbi sabitleyin ve sol ön inen dalı orijinden 3 mm uzakta 6-0 dikişle bağlayın.</li>
	<li>Kalbi hızlı bir şekilde göğüs boşluğuna geri yerleştirin. NOT: Kalbi 30 saniyeden daha kısa bir süre için dışsallaştırmak güvenlidir.</li>
	<li>Göğüs boşluğuna manuel olarak hafifçe bastırarak göğüs boşluğundaki havayı boşaltın.</li>
	<li>Kaburgaların üzerindeki kas tabakasını 6-0 ipek dikiş ile kapatın.</li>
	<li>Cildi 4-0 ipek dikiş ile kapatın.</li>
	<li>İşlemden hemen sonra fareleri bir ped (37 °C) üzerine yerleştirin.</li>
	<li>Ameliyat sonrası ağrıyı 72 saate kadar azaltmak için her 4-6 saatte bir deri altına buprenorfin (0.05-0.1 mg / kg) enjekte edin.</li>
	<li>Tamamen iyileştiğinde ameliyat edilen fareleri kafeslere geri koyun. NOT: Fareler ameliyattan sonra 3-5 dakika içinde tamamen iyileşecektir.</li>
	<li>Fareleri dikkatlice izleyin ve 7 güne kadar ıslak yiyecek sağlayın.</li>
</ol>4. Dokuların toplanması
<ol><li>Servikal çıkık ile MI kurulduktan sonra fareleri farklı zaman noktalarında feda edin.</li>
	<li>Kurban edilen fareleri sırtüstü pozisyonda ameliyat platformuna sabitleyin.</li>
	<li>Üst karın bölgesinde ventral bir kesi (~ 3-4 cm) yapın. Göğüs boşluğunun her iki tarafındaki kaburgaları kesin ve diyaframı çıkarın.</li>
	<li>İntraventriküler enjeksiyon yoluyla kalbi 10 mL soğuk fosfat tamponlu salin (1x PBS, 4 °C) ile perfüze edin.</li>
	<li>Aort kökünü keserek kalbi toplayın ve kalbi hemen -80 °C'de saklayın. NOT: Yazarların deneyimlerine göre, depolamadan sonraki iki hafta içinde TTC boyama yapmak mümkündür.</li>
	<li>Kalbi 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) ile boyayın.<ol><li>Donmuş kalbi jiletle buz üzerinde 1 mm kalınlığında bölümler halinde dilimleyin.</li>
		<li>Hazırlanan kalp dilimlerini %1 TTC solüsyonunda (1x PBS'de çözülmüş) 37 °C'de 10-15 dakika inkübe edin. NOT: 15 dakikalık inkübasyondan sonra, TTC solüsyonunu atın ve lekeli kalp dilimlerini 1x PBS'ye daldırın.</li>
	</ol></li>
	<li>Bir dijital kamera kullanarak dilimlerin fotoğrafını çekin.</li>
</ol>

<ol><li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+and+efficient+method+for+in+vivo+cardiac-specific+gene+manipulation+by+intramyocardial+injection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).</li>
<li>Pell, S., Fayerweather, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+the+incidence+of+myocardial+infarction+and+in+associated+mortality+and+morbidity+in+a+large+employed+population%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population.</a> The New England Journal of Medicine. 312 (16), 1005-1011 (1985).</li>
<li>Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiarrhythmic+effects+of+growth+hormone--in+vivo+evidence+from+small-animal+models+of+acute+myocardial+infarction+and+invasive+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Electrocardiology%22%5BJournal%5D)">Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology.</a> Journal of Electrocardiology. 41 (2), 144-151 (2008).</li>
<li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Cardiovascular+Therapy%22%5BJournal%5D)">β-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Review of Cardiovascular Therapy. 11 (3), 293-296 (2013).</li>
<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update%3A+A+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141 (9), 139(2020).</li>
<li>Cahill, T. J., Choudhury, R. P., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+regeneration+and+repair+after+myocardial+infarction%3A+Translational+opportunities+for+novel+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Heart regeneration and repair after myocardial infarction: Translational opportunities for novel therapeutics.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 16 (10), 699-717 (2017).</li>
<li>Froese, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-androgenic+therapy+with+finasteride+improves+cardiac+function%2C+attenuates+remodeling+and+reverts+pathologic+gene-expression+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Anti-androgenic therapy with finasteride improves cardiac function, attenuates remodeling and reverts pathologic gene-expression after myocardial infarction in mice.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 122, 114-124 (2018).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+branched+chain+amino+acid+catabolism+contributes+to+cardiac+dysfunction+and+remodeling+following+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Defective branched chain amino acid catabolism contributes to cardiac dysfunction and remodeling following myocardial infarction.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 311 (5), 1160-1169 (2016).</li>
<li>Acikel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+dantrolene+against+myocardial+injury+induced+by+isoproterenol+in+rats%3A+Biochemical+and+histological+findings%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Protective effects of dantrolene against myocardial injury induced by isoproterenol in rats: Biochemical and histological findings.</a> International Journal of Cardiology. 98 (3), 389-394 (2005).</li>
<li>vanden Bos, E. J., Mees, B. M. E., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse%3A+A+comparison+with+coronary+artery+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li>
<li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstration+of+an+early+and+a+late+phase+of+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Demonstration of an early and a late phase of ischemic preconditioning in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 275 (4), 1375-1387 (1998).</li>
<li>Kumar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+myocardial+infarction%3A+Mainstay+in+clinical+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Regulatory+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Animal models of myocardial infarction: Mainstay in clinical translation.</a> Regulatory Toxicology and Pharmacology. 76, 221-230 (2016).</li>
<li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318(2013).</li>
<li>Johns, T. N., Olson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+myocardial+infarction.+I.+A+method+of+coronary+occlusion+in+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Experimental myocardial infarction. I. A method of coronary occlusion in small animals.</a> Annals of Surgery. 140 (5), 675-682 (1954).</li>
<li>Ahn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in C57BL/6 mice.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 286 (3), 1201-1207 (2004).</li>
<li>Gao, E., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A novel and efficient model of coronary artery ligation in the mouse.</a> Methods in Molecular Biology. 1037, 299-311 (2013).</li>
<li>Most, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+S100A1+protein+levels+determine+contractile+performance+and+propensity+toward+heart+failure+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardiac S100A1 protein levels determine contractile performance and propensity toward heart failure after myocardial infarction.</a> Circulation. 114 (12), 1258-1268 (2006).</li>
<li>Christia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+characterization+of+myocardial+inflammation%2C+repair%2C+and+remodeling+in+a+mouse+model+of+reperfused+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+%26+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Systematic characterization of myocardial inflammation, repair, and remodeling in a mouse model of reperfused myocardial infarction.</a> Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 61 (8), 555-570 (2013).</li>
<li>Frantz, S., Bauersachs, J., Ertl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-infarct+remodelling%3A+Contribution+of+wound+healing+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Post-infarct remodelling: Contribution of wound healing and inflammation.</a> Cardiovascular Research. 81 (3), 474-481 (2008).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Bu rapor, Gao16 tarafından bildirilen bir yöntemden modifiye edilen, hazır materyallere sahip farelerde MI indüksiyonu için kolay bir protokol göstermiştir. Murine MI modelleri, MI sonrası disfonksiyon ve yeniden şekillenme için mekanik keşif ve ilaç taraması için vazgeçilmezdir12. MI indüksiyonu için mevcut teknikler arasında koroner arter ligasyonu en sık uygulananı temsil eder. Koroner arter ligasyonu, miyokard enfarktüsünün iskemi doğasını sadık bir şekilde özetler ve k...

Miyokard enfarktüsü (MI) dünya çapında önemli ölüm ve sakatlık nedenlerinden birini temsil eder 1,2,3,4,5. Zamanında reperfüzyona rağmen, şu anda MI sonrası kardiyak yeniden şekillenmeyi tedavi etmek için etkili tedaviler eksikliği vardır. Buna bağlı olarak, MI 6,7,8 için mekanik keşif ve terapi kullanımı için önemli çabalar sarf edilmiştir. Dikkat çekici bir şekilde, MI modellerinin kurulması bu amaçlara ulaşmak için bir ön koşuldur.
Küçük hayvanlarda MI modellerini indüklemek için çeşitli yöntemler (örneğin, izoproterenol tedavisi, kriyohasar, koroner arter ligasyonu, vb.) önerilmiştir. İzoproterenol tedavisi, MI indüksiyonu için basit bir yöntemdir, ancak hedeflenen alanın enfarktüsünü indükleyemez9. Kriyoyaralanma, doğrudan iskemi10'dan ziyade buz kristallerinin oluşumu ve hücre zarının bozulması yoluyla miyokardiyal nekroza yol açar. Buna karşılık, koroner arter ligasyonu, oklüzyon bölgesinin ve enfarktüs alanının kapsamının hassas kontrolüne izin verir ve enfarktüs sonrası yeniden şekillenme yanıtını aslına uygun olarak özetler11,12. Koroner arter ligasyonu tipik olarak entübasyon, mekanik ventilasyon ve teknik olarak zor olan torakotomi sonrasında gerçekleştirilir13,14. Koroner arter ligasyonu için çeşitli modifiye protokoller bildirilmiştir (ör., ventilasyon serbest) ve MI indüksiyonunu güçlendirmiştir, ancak ayrıntılı görsel gösterimler eksiktir15,16,17. Bu sorunlar, MI modellerini kullanarak araştırma yapmak isteyen gruplar için önemli bir finansal ve teknik engel oluşturmaktadır. Bu rapor, farelerde MI'nın indüksiyonu için bir yaklaşım sunmaktadır. Mevcut yöntem kolaydır, zaman kazandırır ve çoğu laboratuvarda kolayca bulunan cerrahi alet ve ekipmanları kullanır.

<table><tbody><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür</td><td>SIGMA</td><td>T8877-25G</td><td>TTC boyama</td></tr><tr><td>4-0 ipek sütür</td><td>YUANKANG</td><td>4-0</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>Otoklav</td><td>HIRAYAMA</td><td>HVE-50</td><td>Katı</td></tr><tr><td>Buprenorfin</td> için Sterilizasyon <td>Qinghai İlaç FABRİKASI Co., Ltd.</td><td>H10940181</td><td>ameliyat sonrası ağrıyı azaltır</td></tr><tr><td>Santrifüj tüpü</td><td>Biological Hope</td><td>1850-K</td><td>15ML</td></tr><tr><td>Tüy dökücü krem</td><td>ZIKER BİYOTEKNOLOJİ</td><td>ZK-L2701</td><td>Laboratuvar hayvanları için epilasyon maddesi</td></tr><tr><td>Forcep</td><td>RWD</td><td>F12028</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>Gaz filtresi</td><td>ZHAOXIN</td><td>SA-493</td><td>Operatör koruması</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>RWD</td><td>20071302</td><td>Anestezi için kullanılır</td></tr><tr><td>Işık kaynağı</td><td>Pekin PDV</td><td>LG-150B</td><td>Ameliyat lambası</td></tr><tr><td>Mikro sivrisinek hemostat</td><td>FST</td><td>13011-12</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>İğnesi</td><td>BINXIONG 42180104</td><td></td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>İğne ve 6-0 ipek sütür</td><td>JIAHE</td><td>SC086</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>ShangHaiJZ</td><td>J32030</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>ShangHaiJZ</td><td>J32010</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>Povidon-iyot swabları</td><td>SingleLady</td><td>GB26368-2010</td><td>Cilt dezenfeksiyonu</td></tr><tr><td>Makas</td><td>CNSTRONG</td><td>JYJ1030</td><td>Cerrahi alet</td></tr><tr><td>Steril göz kremi</td><td>Shenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>Kornea</td><td>kuruluğunu önlemek</td></tr><tr><td>H10940177 Küçük hayvanlar için ultra yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme sistemi</td><td>VisualSonics</td><td>Vevo 2100</td><td>Ekokardiyografik analiz</td></tr></tbody></table>

farelerde miyokard enfarktüsünün İndüksiyonu için değiştirilmiş basit bir yöntem

A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

Miyokard enfarktüsü (MI) önde gelen ölüm nedenlerinden biridir. MI modelleri, MI sonrası yeniden şekillenmenin patomekanizmalarını araştırmak ve yeni terapötiklerin değerlendirilmesi için yaygın olarak kullanılmaktadır. MI'yı indüklemek için farklı yöntemler (örneğin, izoproterenol tedavisi, kriyoinjury, koroner arter ligasyonu, vb.) kullanılmıştır. İzoproterenol tedavisi ve kriyoyaralanma ile karşılaştırıldığında, koroner arter ligasyonu, MI sonrası iskemik yanıtı ve kronik yeniden şekillenmeyi daha iyi yansıtabilir. Bununla birlikte, farelerde koroner ligasyon için geleneksel yöntemler teknik olarak zordur. Bu çalışma, farelerde MI'nın indüksiyonu için basit ve verimli bir süreci hazır malzemelerle açıklamaktadır. Fare göğüs derisi stabil anestezi altında kesilerek açıldı. Kalp, pektoralis majör ve pektoralis minör künt olarak ayrıldıktan sonra interkostal boşluktan hemen dışsallaştırıldı. Sol ön inen dal (LAD) orijinden 3 mm kala 6-0 sütür ile bağlandı. LAD ligasyonunu takiben, 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) ile boyama, MI'nın başarılı bir şekilde indüksiyonunu ve MI sonrası skar boyutunun zamansal değişikliklerini gösterdi. Bu arada, sağkalım analizi sonuçları, esas olarak kalp rüptürüne bağlı olarak, MI'dan sonraki 7 gün içinde açık mortalite gösterdi. Ayrıca, MI sonrası ekokardiyografik değerlendirme, kontraktil disfonksiyonun ve ventriküler yeniden şekillenmenin başarılı bir şekilde indüklendiğini gösterdi. Bir kez ustalaştıktan sonra, farelerde 2-3 dakika içinde hazır malzemelerle bir MI modeli oluşturulabilir.

Deneysel protokol ve bazı kritik adımlar Şekil 1'de gösterilmektedir. Basitleştirilmiş anestezi ekipmanı anesteziye neden oldu. Şekil 2A'da gösterildiği gibi, indüklenen anestezi, düzenli solunum hızlarının yansıttığı gibi stabildi (test edilen farelerde 90-107 nefes / dak arasında değişmiştir). Koroner arter ligasyonunu takiben, TTC boyama analizi, miyokard enfarktüsünün başarılı bir şekilde indüklendiğini ve MI sonrası skar boyutunda zamansal değişiklikleri gö...

Yeterli anestezi altında, fare kalbi interkostal boşluktan dışsallaştırıldı ve miyokard enfarktüsü, çoğu laboratuvarda kolayca bulunabilen malzemeler kullanılarak sol ön inen arteri (LAD) bağlayarak başarılı bir şekilde indüklendi.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI ...

Bu rapor, farelerde miyokard enfarktüsünün indüksiyonu için benzersiz bir yaklaşım sunmaktadır. Mevcut yöntem kolaydır, zaman kazandırır ve çoğu laboratuvarda kolayca bulunan cerrahi tüpleri ve ekipmanları kullanır. Miyokard enfarktüsü modellerinin oluşturulması, MI sonrası yeniden şekillenmenin geçmiş mekanizmalarını ve yeni terapötiklerin varyasyonunu araştırmak için bir öncül sağlar.Tüy dökücü kremi fare göğsüne uygulayın ve bir dakika bekleyin. Ardından tüy dökücü kremi ve saçı ıslak gazlı bezle nazikçe silin. Fareyi sırtüstü pozisyonda bir ameliyat platformuna sabitleyin.Cerrahi alanı metinde anlatıldığı gibi dezenfekte edin. Ardından dezenfekte edilmiş alanın etrafına steril bir örtü yerleştirin. Ksifoid ve koltuk altını birbirine bağlayan çizgi boyunca 0,5 santimetrelik bir cilt kesimi yapın ve pektoral majör ve pektoral minör kasları forseps kullanarak kör bir şekilde ayırın.Mikro Sivrisinek hemostatı kullanarak dördüncü interkostal boşluğu açın. Sol elin işaret parmağı ile kalbi dördüncü interkostal boşluğa doğru iterek dışsallaştırın. Kalbi sol elinizle sabitleyin ve sol ön inen dalı orijinden üç milimetre uzakta 6/0'lık bir dikişle bağlayın.Kalbi hızlı bir şekilde göğüs boşluğuna geri yerleştirin. Göğüs boşluğuna hafifçe bastırarak havayı göğüs boşluğundan boşaltın. Ameliyat sonrası ağrı yönetimi için, ameliyattan sonra yetmiş iki saate kadar her dört ila altı saatte bir deri altına buprenorfin enjekte edin.Anesteziden kurtulmak için fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin. Ötenazi yapılan fareyi sırtüstü pozisyonda ameliyat platformuna sabitleyin. Üst karın bölgesinde yaklaşık üç ila dört santimetrelik bir ventral kesi yapın.Kaburgaları göğüs boşluğunun her iki tarafından kesin ve ardından diyaframı çıkarın. İntraventriküler enjeksiyon yoluyla kalbi 10 mililitre soğuk dört santigrat derece 1X PBS ile perfüze edin. Daha sonra aort kökünü keserek kalbi toplayın ve hemen eksi 80 santigrat derecede saklayın.Donmuş kalbi jilet kullanarak buz üzerinde bir milimetre kalınlığında bölümler halinde dilimleyin. Hazırlanan kalp dilimlerini, 10 ila 15 dakika boyunca 37 santigrat derecede bir 1X PBS içinde çözülmüş% 1 TTC çözeltisinde inkübe edin. Ardından bir dijital kamera kullanarak dilimlerin fotoğrafını çekin.Koroner arter ligasyonunu takiben, TTC boyama analizi, miyokard enfarktüsünün başarılı bir şekilde indüklendiğini ve MI sonrası skar boyutunda zamansal değişiklikler olduğunu gösterdi. Sağkalım analizi sonuçları, erkek ve dişi C57BL / 6J farelerinde MI'dan sonraki yedi gün içinde açık mortalite gösterdi. Ventriküler rüptür, MI sonrası ölümün yaygın bir nedeniydi.MI sonrası ekokardiyografik değerlendirme, kontraktil disfonksiyon ve ventriküler yeniden şekillenmenin başarılı bir şekilde indüklendiğini gösterdi. Kalbi dışsallaştırmaya çalışırken, önce göğüs boşluğuna basmayın ve direncimizi takip ederek, ağırlıklı övgüye karşı yönü ayarlama ihtiyacını gösterir. Bu prosedürü takiben, kalp hastalığı konularında gen terapilerinin veya hücre tedavilerinin etkinliğini test etmek için viral vektörlerin veya hücrelerin intramiyokardiyal enjeksiyonu yapılabilir.

a-modified-simple-method-for-induction-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Farelerde Deneysel miyokardiyal enfarktüs indüklemek için kullanılan cerrahi prosedür kalp ve akciğer sol ön yüzeyine görselleştirmek için üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasındaki sol torakotomi ile başlar. Sol koroner arter ligasyonu olduğu, göğüs kapalı ve fare kendiliğinden kurtarmak için izin verilir.

Fare Koroner Arter Ligasyonu için Modifiye Tekniği

Biz tekrar elde edilebilirliğini arttırmak için, sol ön inen arter (LAD) üzerine ligasyon konumlandırma daha fazla netlik sağlar fare modellerinde miyokard infarktüsü (MI) simüle etmek için deneysel iskemi / reperfüzyon (I / R) hasarı ikna etmek için bir cerrahi yöntemi tanıtmak Farelerde MI deneyler.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Minimal invaziv manipülasyonlara sahip farelerde miyokard enfarktüsü için yüksek oranda tekrarlanabilir bir model tanımlanmıştır. Model kolayca gerçekleştirilebilir, bu da yüksek tekrarlanabilirlik ve hayatta kalma oranı ile sonuçlanır. Bu nedenle, açıklanan model, 3R ilkesinin (Değiştirme, İyileştirme ve İndirgeme) talep ettiği gibi gerekli hayvan sayısını azaltacaktır.

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Murin miyokard iskemisi/reperfüzyon cerrahisi sırasında, tıkayıcı ligatür doğru yerleşimi tipik olarak miyokardiyal solgunluğun gözle görülür şekilde izlenmesi ile doğrulanır. Burada, gözlenen miyokardiyal solgunluğu desteklemek için iskemi ve reperfüzyonu elektrokardiyografik olarak doğrulayan bir yöntem, erkek C57Bl / 6 farelerinde gösterilmiştir.

Yüzey Pad Elektrokardiyografi kullanılması Farelerde Miyokard İskemi ve Reperfüzyon Hasarı Onayı

Bir fare modelinde sol ön inen arter (LAD) ligasyonu için güvenilir bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, endotrakeal entübasyon, sol taraflı torakotomi yaklaşımı ve torasentezi içeren diğer yöntemlere göre nispeten daha az invazivdir. Bu yöntem hem akut hem de kronik miyokard enfarktüsü (MI) için bir model olarak kullanılabilir.

Kemirgen Sol Ön İnen (LAD) koroner arter ligasyonu: Miyokard İnfarktüsü Yönelik Gelişmiş ve Basitleştirilmiş Modeli

Burada farelerde sol anterior inen koroner arterin kalıcı ligasyonunun nasıl elde edilebildiğini gösteren bir cerrahi prosedürü açıklıyoruz. Bu model miyokard enfarktüsü ve eşlik eden biyolojik süreçlerin patofizyolojisini araştırmak için yüksek öneme hemşilir.

Sol Anterior İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile Murine Miyokard Enfarktüsü Modeli

Bu makalede, minimal invaziv bir yaklaşım kullanarak sıçanlarda miyokardiyal iskemi ve sonraki kronik reperfüzyon gerçekleştirmek için etkili bir yöntem sunar. Ayrıca sıçanların sol ventrikül hemodinamik fonksiyonu ekokardiyografi ve izole çalışma kalp yöntemleri ile değerlendirilmektedir.

Sıçanlarda Miyokard İnfarktüsü İndükleyen Yarı-Minimal İnvaziv Yöntem ve İzole Çalışan Kalp Sistemi Ile Kardiyak Fonksiyonun Değerlendirilmesi

Bu protokol, perikard ve içeriğini korurken farelerde miyokard enfarktüsünü indükleme adımlarını özetlemektedir.

Bozulmamış Bir Perikard İskemik Kemirgen Modeli

Burada, mikromanipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin hassas ligasyonu ile farelerde miyokard enfarktüsü veya miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını indükleyebilen basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlanmıştır.

Farelerde Miyokard Enfarktüsü ve Miyokard İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Burada sunulan, farelerde sol koroner arterin kalıcı olarak bağlanması için cerrahi bir prosedürdür. Bu model, miyokard enfarktüsü sonrası patofizyolojiyi ve ilişkili inflamatuar yanıtı araştırmak için kullanılabilir.

Sol Koroner Arter Ligasyonu: Miyokard Enfarktüsünün Cerrahi Murin Modeli

Keşfedin farelerde miyokard enfarktüsü indüksiyonu için değiştirilmiş basit bir cerrahi yöntemi. Sol ön inen arter ligasyonu kullanarak kalp remodelasyonu ve yeni tedavilerin değerlendirilmesi için güvenilir bir model oluşturun.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Daha fazla video keşfet