Name: Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-12-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Öğrenin sıçanlarda kalıcı juguler ven kanülasyonu mikrocerrahi tekniklerini ve bilinçli hayvanlarda stresi önleyerek seri kan örneklemesi yapma yöntemini. Bu model farmakokinetik çalışmalar için değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82003692) tarafından R.X. Zhang'a desteklenmektedir; Northwestern Politeknik Üniversitesi'nde R. Miao'ya En İyi Akademik Bursu.

Aşağıda açıklanan prosedürler, Northwestern Politeknik Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (No. 202101117) tarafından onaylanan bir protokolün parçası olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Preoperatif hazırlık (ameliyattan bir gün önce)
NOT: Gerekli çözeltiler: normal salin (% 0.9 w / v sodyum klorür), heparinize salin (% 1 w / v heparin sodyum), kateter kilit çözeltisi, meloksikam çözeltisi (2 mg / mL) gibi steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaç (NSAID).
<ol><li>Çözelti hazırlama<ol>
<li>Aliquot 200 μL, 1,5 mL steril mikrosantrifüj tüpünde önceden paketlenmiş kateter kilit çözeltisi. NOT: Kateter kilit çözeltisi, gliserol (v/v,1:1) ile karıştırılmış heparinize salinden (%0.4 v/v heparin sodyum) oluşur.</li>
		<li>% 1 heparinize salin hazırlamak için normal salinin 100 mL'sinde 1 g heparin sodyum karıştırın.</li>
		<li>Postoperatif ağrı kesici için 2 mg / mL'lik bir konsantrasyon çözeltisi hazırlamak için meloksikamı normal salin içinde çözün. NOT: Hazırlanan heparinize salin ve meloksikam çözeltisi 0,22 μm'lik bir filtreden geçirilir. Tüm çözeltiler sterilize edilir ve ileride kullanılmak üzere 4°C'de saklanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Cerrahi aletler ve malzemeler<ol>
<li>Tüm temiz cerrahi aletleri bir torbaya koyun ve bir parça otoklav sterilizasyon bandı ile bantlayın. Kullanılan spesifik cerrahi aletler için Şekil 1A'ya bakınız.</li>
		<li>Cerrahi torbayı ertesi gün kullanım için 30 dakika boyunca 121 °C'de otoklavlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Hayvan hazırlığı<ol>
<li>Ameliyattan önce, tüm erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanlarını standart Hayvan Odası'nda 22 ± 1 ° C'de kontrollü sıcaklıkta barındırın. Onları en az 7 gün boyunca standart laboratuvar yiyecek ve su ad libitum ile besleyin. NOT: JVC modeli için hem erkek hem de dişi sıçanlar kullanılabilir ve tipik yaşları ve vücut ağırlıkları sırasıyla 9-14 hafta ve 294 ± 57 g arasında değişir.</li>
		<li>Sıçanı, anestezi öncesi bir odada oksijenle karıştırılmış% 3-3.5% izofluran ile anestezi yapın. Sıçanın ayak sıkışmasına tepki vermemesi nedeniyle bilinçsiz hale gelip gelmediğini belirleyin.</li>
		<li>Sıçanı yavaşça dışarı çıkarın, sıçanın burnunu% 2 -% 2.5 izofluran sağlayan anestezik bir burun parçasına yerleştirin.</li>
		<li>Ventral ve dorsal pozisyonda, kürkü sağ omzunun etrafına ve boynun arka bölgelerine tüy dökücü krem ve evcil hayvan tıraş bıçağı ile iyice çıkarın. Ertesi gün yapılacak ameliyat için sıçanı kafese geri getirin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Ameliyattan önce gün
<ol><li>Aseptik iş istasyonunu hazırlama<ol>
<li>Operasyon alanını dezenfekte etmek için% 75 tıbbi alkol püskürtün ve ardından temiz bir yastıkla kaplı ısıtma yastığını yerleştirin. LED lambayı iş istasyonunun yanında soğuk bir ışık kaynağıyla ayarlayın.</li>
		<li>Gerekli çözeltileri (adım 1.1) oda sıcaklığına önceden ısıtın.</li>
		<li>İki steril 1.0 mL künt uçlu şırıngada sırasıyla 0.6 mL heparinize salin ve 0.15 mL kateter kilit çözeltisi doldurun. Steril bir 5.0 mL şırınga kullanarak normal salinin 2.5 mL'sini çekin.</li>
		<li>Pamuk toplarını% 75 tıbbi alkole batırın. Kullanmadan önce fazla etanol sıkın.</li>
		<li>Sıçanın vücut ağırlığını tartın ve kaydedin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Ameliyat sırasında
<ol><li>Cerrahi hazırlık<ol>
<li>Cerrahi paltoyu, steril eldivenleri ve yüz maskesini takın. Daha sonra sterilize edilmiş cerrahi keseyi açın, tüm cerrahi aletleri% 75 tıbbi alkolde bırakın ve kullanmadan önce kurulayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Juguler ven izolasyonu NOT: Bu parça için tahmini çalışma süresi 10 dakikadır.<ol>
<li>Ameliyata hazır ve tıraş edilmiş sıçanı, bir indüksiyon odasında oksijenle karıştırılmış %3-%3,5 izofluran ile uyuşturun ve ayak sıkışmasına yanıt verilmemesi nedeniyle sıçanın bilinçsiz hale gelip gelmediğini belirleyin.</li>
		<li>Anesteziyi sürdürmek için sıçanın burnunu% 2 -% 2.5 izofluran ile beslenen burun parçasına yerleştirin.</li>
		<li>Subkutan olarak (s.q.) meloksikam çözeltisini 2 mg / kg'lık bir dozda enjekte edin. NOT: Farmakokinetik çalışmasında ilgilenilen ilaç bileşiği ile etkileşime girmeyen analjezikleri seçtiğinizden emin olun.</li>
		<li>Yapışkan bant kullanarak, sıçanın önkollarını ventral pozisyonlarında cerrahi platformun her iki tarafına da kısıtlayın.</li>
		<li>% 75 tıbbi alkol ve iyot bazlı ovma işlemine batırılmış pamuk topları arasında toplam üç kez geçiş yaparak cerrahi bölgeyi nazikçe fırçalayın.</li>
		<li>Boynun orta çizgisinin sağ tarafındaki klavikulanın yakınındaki cildi forseps ile dikkatlice kaldırın ve bir çift cerrahi makasla göğse doğru yaklaşık 1.5-2.0 cm uzunluğunda bir kesi yapın.</li>
		<li>Künt, alt juguler veni açığa çıkarmak için ince doku kapağını iris makası ile diseke eder. Dış juguler venin proksimal sefalik ucu, görsel olarak tanımlanabilen iki daldan oluşur. NOT: Sıçanın yaşına ve cinsiyetine bağlı olarak, juguler veni kaplayan yumuşak doku (örneğin, tükürük bezleri, lenfatik düğümler ve yağ dokuları) değişir. Genç sıçanlarla karşılaştırıldığında, yaşlı sıçanlar daha şişmandır (örneğin, BW > 300 g) ve bu nedenle juguler ven görünmeden önce daha fazla doku ayrımına ihtiyaç duyarlar.</li>
		<li>Juguler vene, juguler vene bağlı lenf bezini görselleştirmek için bağ membranöz dokularıyla birlikte juguler veni kaldırın. Damar yönü boyunca damarı çevreleyen kas, yağ ve diğer dokulardan dikkatlice ayırın.</li>
		<li>Forsepsleri kollateral kan damarlarına zarar vermeden juguler venin altına dürtün ve kan damarının iki ucunu ayrı ayrı işaretlemek için damarın altına iki parça 6-0 dikiş geçirin.</li>
		<li>Dikişin bir parçasını sıçan kafasına doğru mümkün olduğunca çekin ve forseps kullanarak damarı kraniyal olarak 2-3 knot ile yağlayabilirsiniz.</li>
		<li>İkinci ligattürü damarın kaudal ucuna 1 gevşek düğümle yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>Juguler ven kanülasyonu NOT: Bu bölüm için tahmini çalışma süresi 15 dakikadır.<ol>
<li>11 cm poliüretan (PU) kateter içeren paketi açın (I.D. 0.6 mm x O.D. 0.9 mm, Şekil 1B) ve kateteri heparinize salin ile doldurulmuş hazırlanmış künt uçlu şırıngaya takın.</li>
		<li>Hava kabarcıklarını önlemek için heparinize salini yavaşça kateterin içine itin.</li>
		<li>Forsepslerin uçsuz bucaksız düz tarafını juguler venin altından diğer taraftan çıkmak için dürtün. Bir çift castroviejo mikro makas ile kraniyal bağın yakınındaki damarda küçük bir v şeklinde kesik yapın ve dirsek damarı dilatatör forsepslerinin ucuyla insizyonu yavaşça açın. NOT: Az miktarda kan fışkırırsa, insizyonu önceden ısıtılmış normal salin (37 ° C) ile durulayın.</li>
		<li>Juguler ven kateterinin ön ucunun eğik açıklığını kesin. Tüpün eğik ucunu forseps ile kelepçeleyin ve juguler damara kaydırın. NOT: Bu adım, kateter kaymasını kolaylaştırmak için başka bir kişiye ihtiyaç duyabilir.</li>
		<li>Kateteri ilerletirken, dirsek mikrocerrahi forsepslerini yavaşça geri çekin ve damarın dış yüzeyini forseps ile sıkıştırın. NOT: Doğru kan damarı seçilirse ve kateterin ucu başarılı bir şekilde kan damarına kaydırılırsa, tüm kateter yerleştirme işlemi herhangi bir akış direnci hissetmemelidir.</li>
		<li>Yaklaşık 3.0 cm uzunluğundaki PU tüpünün ilk mavi işaretine (Şekil 1B) çarptıktan sonra kateteri yerleştirmeyi bırakın.</li>
		<li>Yerleştirilen kateteri forseps kullanarak hem kaudal hem de rostral ligatürlerle damara sabitleyin.</li>
		<li>Bir dikiş iğnesi (1/2 kavisli kesim, 12 mm) kullanarak insizyonun sağ tarafındaki açıkta kalan dokudan 6-0'lık bir dikiş geçirin ve ligattürü bir hemostat ile bağlayın.</li>
		<li>Aynı ligatürle (adım 3.3.8'de) bağlanmak ve PU borusunun tıkanmasını önlemek için kateteri ikinci mavi işarette (Şekil 1B) bükün.</li>
		<li>Tüm ekstra dikiş ipliğini kesin ve künt uçlu şırıngayı 22 G paslanmaz çelik bir tıkaç ile değiştirerek kateteri kapatın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kateter dış cephe izasyonu NOT: Bu parça için tahmini çalışma süresi 10 dakikadır.<ol>
<li>Sıçanı sırt pozisyonuna yerleştirin ve% 75 tıbbi alkole batırılmış pamuk topu ile kürek kemiği arasındaki alanı nazikçe temizleyin.</li>
		<li>Cerrahi makasla dorsal boynun merkezinde çok küçük bir kesi yapın. Dorsal insizyondan, cildin altındaki trokarı boynun sağ tarafındaki ventral insizyona doğru yönlendirin ve yavaşça itin.</li>
		<li>Venöz kateteri trokar içine koyun ve ardından dışarı çekin ve venöz kateteri dorsal insizyona doğru yönlendirin.</li>
		<li>Dışsal kateteri kas tabakasına dikişle aynı şekilde sabitleyin (adım 3.3.8 ve 3.3.9'daki prosedüre bakınız).</li>
		<li>Ventral ve dorsal insizyonların deri tabakasını 6-0 naylon sütür ve dikiş iğnesi (3/8 kavisli kesim, 17 mm) ile kapatın. Tüm cerrahi insizyonları iyodofor ile sürün. NOT: Yara klipsleri cilt insizyonunu kapatmak için alternatif bir yöntemdir.</li>
		<li>Kateteri parmak uçlarıyla sıkıştırarak kateter tıkacını çıkarın. Yeni bir künt uçlu şırınga yerleştirin ve kan akışını test etmek için şırıngayı yavaşça geri çekin. NOT: Sıçan sırtüstü pozisyonda olduğundan, kan örnekleri alınamayabilir. Kan örnekleri, yan vücut pozisyonuna geçerek elde edilebilir.</li>
		<li>Kateteri parmak uçlarıyla tekrar tutun ve künt uçlu şırıngayı kullanarak kateterin içine 0.2 mL heparinize salin ve 0.1 mL kilit çözeltisi enjekte edin.</li>
		<li>Kateteri parmak uçlarıyla tutun ve şırıngayı paslanmaz çelik bir tıkaç ile değiştirin. Kateteri açın ve kateterin sıkılığını sağlamak için fişi hafifçe itin.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Ameliyat sonrası acil bakım
<ol><li>Sıçanı dorsal decubitus pozisyonunda, taze mısır koçanı yataklarıyla ayrı ayrı kafesleyerek kurtarın. Genellikle, çekirdek vücut sıcaklığını korumak için sıcaklık ayarlı bir ısıtma yastığı sağlayın. NOT: Hayvan refahı için, yataklarda yiyecek ve su bırakmak, yemek yerken ve içerken boyun hareketlerinin neden olduğu ağrıyı hafifletmenin etkili bir yoludur.</li>
	<li>Ameliyatın bitiş zamanını kaydedin ve sıçanı en az 4 saat boyunca 2 saat aralıklarla izleyin. Sıçan ağrı veya sıkıntı belirtileri gösteriyorsa iyileşme için ek analjezi sağlayın.</li>
</ol>5. İyileşme aşamasında fizyolojik ve hematolojik izleme
<ol><li>Vücut ağırlığını ve günlük yiyecek ve su alımını izleyin ve verileri kaydedin.</li>
	<li>Hematolojik test için az miktarda taze kan toplamak için, sıçanı bir tutucuya yerleştirin. Fişi açın ve kateterin tıkanmadığından emin olmak için şırıngayı venöz PU kateterine yerleştirin. NOT: Kan alımı art arda 6 gün boyunca her gün aynı anda yapıldı.</li>
	<li>Kan, heparinize salin ve kateter kilit çözeltisi karışımı içeren ilk çekilen kanı atın.</li>
	<li>150 μL taze kan örneği toplamak için yeni bir şırınga kullanın ve kan örneğini tüp duvarında kurutulmuş K2EDTA (1.8 mg / mL kan) spreyi içeren 0.5 mL tüpe aktarın. NOT: Kateter bloke edilirse, bir sonraki kan toplama zamanından birkaç dakika önce kateteri yıkamak için kateterin içine 0.2 mL heparinize salin enjekte edilebilir.</li>
	<li>Geri çekilen kanı telafi etmek için aynı hacimde steril salin enjekte edin. 150 μL önceden ısıtılmış normal salin (37 ° C) enjekte edin ve kateterden 0.2 mL steril heparinize normal salin enjekte edin.</li>
	<li>Bir sonraki numune toplamadan önce kateterin sızdırmazlığını ve sterilitesini sağlamak için kilit çözeltisinin 100 μL'sini kateterin içine enjekte edin.</li>
	<li>Otomatik bir kan hücresi sayacı kullanarak kan örneklerini toplandıktan sonraki 2 saat içinde analiz edin.</li>
</ol>6. Oral yoldan verilen ilacın farmakokinetik çalışmaları için tekrarlanan kan örneklemesi
NOT: Kilo alımı >10 g ve stabil hematolojik düzeyi olan sıçanların gelecekteki çalışmalara kaydedilmesi önerilmektedir. Mevcut protokolü takiben, JVC sıçanlarının iyileşmesi için 4 ila 6 gün gerekiyordu.
<ol><li>4-6 günlük ameliyattan sonra, sıçanı suya serbest erişim ile 12 saat boyunca oruç tutun. NOT: Deney amacına bağlı olarak, hayvanın oruç tutulması isteğe bağlıdır.</li>
	<li>Oruç tutan sıçanı doğal fenol biyoaktif ellajik asit ile düz bir gavage iğnesi16 ile 6 mg / kg'lık bir dozda oral olarak gavage edin.</li>
	<li>Heparinize tüplerde juguler ven kanülü yoluyla 200 μL kan örneğini, oral uygulama sonrası 24 saat boyunca önceden belirlenmiş zaman noktalarında toplayın. Kan toplama işlemi, adım 5.5'teki prosedürü izler. NOT: Kan alımı tamamlanana kadar kateterin kilit solüsyonu ile kapatılmasına gerek yoktur.</li>
	<li>Kan örneğini derhal 10 dakika boyunca 4 ° C'de 3000 x g'de santrifüj edin.</li>
	<li>Ekstrakte edilen plazma örneğini sıvı kromatografisi-kütle spektroskopisi17,18 ile analiz edin.</li>
</ol>

<ol><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Pharmacotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Sadler, A. M., Bailey, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+refined+technique+for+taking+repeated+blood+samples+from+juvenile+and+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Validation of a refined technique for taking repeated blood samples from juvenile and adult mice.</a> Laboratory Animals. 47 (4), 316-319 (2013).</li>
<li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinating+biointeraction+and+bioreaction+of+a+nanocarrier+material+and+an+anticancer+drug+to+overcome+membrane+rigidity+and+target+mitochondria+in+multidrug-resistant+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Coordinating biointeraction and bioreaction of a nanocarrier material and an anticancer drug to overcome membrane rigidity and target mitochondria in multidrug-resistant cancer cells.</a> Advanced Functional Materials. 27 (39), 12(2017).</li>
<li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymer-lipid+hybrid+nanoparticles+synchronize+pharmacokinetics+of+co-encapsulated+doxorubicin-mitomycin+C+and+enable+their+spatiotemporal+co-delivery+and+local+bioavailability+in+breast+tumor%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine-Nanotechnology+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Polymer-lipid hybrid nanoparticles synchronize pharmacokinetics of co-encapsulated doxorubicin-mitomycin C and enable their spatiotemporal co-delivery and local bioavailability in breast tumor.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 12 (5), 1279-1290 (2016).</li>
<li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+extraction+and+simultaneous+chromatographic+quantitation+of+doxorubicin+and+mitomycin+C+following+drug+combination+delivery+in+nanoparticles+to+tumor-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Sample extraction and simultaneous chromatographic quantitation of doxorubicin and mitomycin C following drug combination delivery in nanoparticles to tumor-bearing mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e11(2017).</li>
<li>Bakar, S. K., Niazi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+reliable+method+for+chronic+cannulation+of+the+jugular+vein+for+pharmacokinetic+studies+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Simple reliable method for chronic cannulation of the jugular vein for pharmacokinetic studies in rats.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 72 (9), 1027-1029 (1983).</li>
<li>Harms, P. G., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+simple+procedure+for+chronic+cannulation+of+the+rat+jugular+vein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A rapid and simple procedure for chronic cannulation of the rat jugular vein.</a> Journal of Applied Physiology. 36 (3), 391-392 (1974).</li>
<li>Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Jugular+vein+catheterization+for+repeated+blood+sampling+in+the+unrestrained+conscious+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Protocols%22%5BJournal%5D)">Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat.</a> Brain Research Protocols. 10 (2), 84-94 (2002).</li>
<li>Weeks, J. R., Davis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+intravenous+cannulas+for+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chronic intravenous cannulas for rats.</a> Journal of Applied Physiology. 19 (3), 540-541 (1964).</li>
<li>Goldkuhl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+concentrations+of+corticosterone+and+buprenorphine+in+rats+subjected+to+jugular+vein+catheterization%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Plasma concentrations of corticosterone and buprenorphine in rats subjected to jugular vein catheterization.</a> Laboratory Animals. 44 (4), 337-343 (2010).</li>
<li>Steffens, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+frequent+sampling+of+blood+and+continuous+infusion+of+fluids+in+the+rat+without+disturbing+the+animal%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal.</a> Physiology & Behavior. 4 (5), 833-836 (1969).</li>
<li>Terao, N., Shen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+serum+protein+binding+and+pharmacokinetics+of+l-propranolol+in+the+rat+elicited+by+the+presence+of+an+indwelling+venous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Alterations in serum protein binding and pharmacokinetics of l-propranolol in the rat elicited by the presence of an indwelling venous catheter.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 227 (2), 369-375 (1983).</li>
<li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures%2C+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (95), e51881(2015).</li>
<li>Karim, N., Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Jugular+vein+cannulation+in+rats+-+A+mini+review%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Pure+and+Applied+Sciences%22%5BJournal%5D)">Jugular vein cannulation in rats - A mini review.</a> Canadian Journal of Pure and Applied Sciences. 3, 929-935 (2009).</li>
<li>Ling, S., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+cannulation+surgery+and+restraint+stress+on+the+plasma+corticosterone+concentration+in+the+rat%3A+application+of+an+improved+corticosterone+HPLC+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacy+%26+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay.</a> Journal of Pharmacy & Pharmaceutical Sciences. 6 (2), (2003).</li>
<li>Lei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+study+of+ellagic+acid+in+rat+after+oral+administration+of+pomegranate+leaf+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B-Analytical+Technologies+in+the+Biomedical+and+Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic study of ellagic acid in rat after oral administration of pomegranate leaf extract.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 796 (1), 189-194 (2003).</li>
<li>Yan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+development+and+validation+for+pharmacokinetic+and+tissue+distributions+of+ellagic+acid+using+Ultrahigh+Performance+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+%28UPLC-MS%2FMS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Method development and validation for pharmacokinetic and tissue distributions of ellagic acid using Ultrahigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS/MS).</a> Molecules. 19 (11), 18923-18935 (2014).</li>
<li>Long, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioavailability+and+bioactivity+of+free+ellagic+acid+compared+to+pomegranate+juice%5BTitle%5D)+AND+%22Food+%26+Function%22%5BJournal%5D)">Bioavailability and bioactivity of free ellagic acid compared to pomegranate juice.</a> Food & Function. 10 (10), 6582-6588 (2019).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKSolver%3A+An+add-in+program+for+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+data+analysis+in+Microsoft+Excel%5BTitle%5D)+AND+%22Computer+Methods+and+Programs+in+Biomedicine%22%5BJournal%5D)">PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel.</a> Computer Methods and Programs in Biomedicine. 99 (3), 306-314 (2010).</li>
<li>Christakis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+curve+of+vessel+cannulation+in+rats+using+cumulative+sum+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Learning curve of vessel cannulation in rats using cumulative sum analysis.</a> Journal of Surgical Research. 193 (1), 69-76 (2015).</li>
<li>Nm, S., Oduola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haematological+profile+shows+that+Inbred+Sprague+Dawley+rats+have+exceptional+promise+for+use+in+biomedical+and+pharmacological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Journal+of+Biomedical+and+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Haematological profile shows that Inbred Sprague Dawley rats have exceptional promise for use in biomedical and pharmacological studies.</a> Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences. 4 (37), 33-37 (2014).</li>
<li>Lillie, L. E., Temple, N. J., Florence, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+values+for+young+normal+Sprague-Dawley+rats%3A+weight+gain%2C+hematology+and+clinical+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Human+%26+Experimental+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Reference values for young normal Sprague-Dawley rats: weight gain, hematology and clinical chemistry.</a> Human & Experimental Toxicology. 15 (8), 612-616 (1996).</li>
<li>He, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-specific+reference+intervals+of+hematologic+and+biochemical+analytes+in+Sprague-Dawley+rats+using+the+nonparametric+rank+percentile+method%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sex-specific reference intervals of hematologic and biochemical analytes in Sprague-Dawley rats using the nonparametric rank percentile method.</a> PLoS One. 12 (12), 18(2017).</li>
<li>EPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+and+Documentation+of+Biological+Values+for+Use+in+Risk+Assessment%5BTitle%5D)+AND+%22U.S.+Environmental+Protection+Agency%22%5BJournal%5D)">Recommendations for and Documentation of Biological Values for Use in Risk Assessment.</a> U.S. Environmental Protection Agency. , EPA/600/6-87/008 (NTIS PB88179874) (1988).</li>
<li>Gaud, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+jugular+vein+cannulated+rats+may+not+be+suitable+for+intravenous+pharmacokinetic+screening+of+high+logP+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Single jugular vein cannulated rats may not be suitable for intravenous pharmacokinetic screening of high logP compounds.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 99, 272-278 (2017).</li>
<li>Turck, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+pharmacokinetics+of+meloxicam%5BTitle%5D)+AND+%22Arzneimittel-Forschung%2FDrug+Research%22%5BJournal%5D)">Clinical pharmacokinetics of meloxicam.</a> Arzneimittel-Forschung/Drug Research. 47 (3), 253-258 (1997).</li>
<li>Aghazadeh-Habashi, A., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+meloxicam+administered+as+regular+and+fast+dissolving+formulations+to+the+rat%3A+Influence+of+gastrointestinal+dysfunction+on+the+relative+bioavailability+of+two+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of meloxicam administered as regular and fast dissolving formulations to the rat: Influence of gastrointestinal dysfunction on the relative bioavailability of two formulations.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 70 (3), 889-894 (2008).</li>
<li>Ludwig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+human+cytochrome+P-450+3A4-catalyzed+meloxicam+5+%27-methylhydroxylation+by+quinidine+and+hydroquinidine+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Activation of human cytochrome P-450 3A4-catalyzed meloxicam 5 '-methylhydroxylation by quinidine and hydroquinidine in vitro.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 290 (1), 1-8 (1999).</li>
<li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticulate+drug+delivery+strategies+to+address+intestinal+cytochrome+P450+CYP3A4+metabolism+towards+personalized+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Nanoparticulate drug delivery strategies to address intestinal cytochrome P450 CYP3A4 metabolism towards personalized medicine.</a> Pharmaceutics. 13 (8), (2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Damar kanülasyonu tekniğinde ustalaşmak, önemli bir uygulama ve her işlemden ders çıkarmayı gerektirir. Christakis ve ark. kümülatif toplam (CUSUM) analizini kullanarak, bir araştırmacının ilaç adaylarının PK değerlendirmesine hazır olmadan önce bir yıllık bir süre boyunca200 sıçan uygulaması gerektiğini bulmuşlardır 20. Bununla birlikte, damar kanülasyonu için gereken çalışma süresi,13,20 yapılan sıçan sayısı ile önemli ölçüde azaltılabil...

Kemirgenler, kobaylar ve tavşanlar gibi küçük laboratuvar hayvanlarından kan örneklerinin tekrar tekrar alınması, farmasötik kurşun optimizasyonu ve ayrıca araştırmada kullanılan hayvan sayısını azaltmak için önemli bir husustur 1,2. Yeni tanı araçları ve ilaç formülasyonu (örneğin, aşı) geliştirme boru hattı, farmakokinetiği (PK), toksisitesi ve duyarlılığı 3,4,5 gibi sağlamlıklarını ve performanslarını in vivo olarak değerlendirmek için farklı kan hacimlerine erişim gerektirir.
Kan örneği toplamaya laboratuvar yaklaşımı genel olarak cerrahi ve cerrahi olmayan 6 olmak üzere iki tip olaraksınıflandırılır. Cerrahi olmayan yaklaşımın, kardiyak ponksiyon, orbital sinüs delinmesi ve safen ve kuyruk veninin kanaması gibi yaygın teknikleri içeren araştırmacı için kavranması nispeten kolaydır. Bazı cerrahi olmayan yöntemlerle çoklu kan örneklemesi mümkündür, ancak numune hacmi küçüktür ve hayvanlarda fiziksel yara ve psikolojik strese neden olabilir1. Öte yandan, cerrahi yaklaşım tekrarlanan venipunktura favori bir alternatiftir ve hayvanların kan damarlarına geçici veya kalıcı bir kanülün yerleştirilmesini içerir 7,8,9. Büyük kan hacmi, bilinçli sıçanlarda kanülden tekrar tekrar çekilebilirken, kullanım tekniği, kısıtlama ve anestezi 7,8,10,11 nedeniyle stres ve ağrıdan kaçınılabilir. Bununla birlikte, kanül implantasyonu, kanı başarılı bir şekilde toplamak için yeterli eğitime sahip deneyimli bir araştırmacı gerektirir.
Sıçanlarda juguler ven kanülasyonu (JVC) yoluyla kan toplanması, PK6,10,12,13 ilacını incelemek için en yaygın kullanılan yöntemdir. Bununla birlikte, JVC sıçan modelinin kurulması, mikrocerrahi becerilerin dikkatli bir şekilde uygulanmasını ve cerrahi sonrası bakım ve bakım bilgisine ihtiyaç duymaktadır. Özellikle ameliyattan sonra sıçan, daha ileri deneyler için stabil fizyolojik duruma ulaşmak için analjeziklerin uygulanmasını ve yeterli iyileşme süresini gerektirir13,14,15. Vücut ağırlığı artışı (yani, >10 g), sıçanın iyileşmesi için geçerli ve yaygın olarak uygulanan bir gösterge olmasına rağmen, sıçanların, erken başlangıçtaki14,15'te fark edilmesi ince olabilen dehidrasyon, enfeksiyon ve iltihaplanma nedeniyle ameliyat sonrası beklenmedik bir ölüme sahip olmaları nadir değildir. Ek olarak, JVC modelinde kateter tıkanıklığı, kan alımı sırasında bir sorun olmaya devam etmektedir.
Mevcut protokol, juguler venin tanımlanması, izolasyonu ve kanülasyonuna özel olarak odaklanarak anestezi uygulanmış bir sıçanda JVC için mikrocerrahi prosedürleri ayrıntılı olarak göstermiştir. İyileşme aşamasında sıçanların fizyolojik ve hematolojik olarak izlenmesinin önemi vurgulanmaktadır. Son olarak, JVC sıçan modelini doğrulamak için oral yoldan uygulanan doğal fenol ellajik asidin PK'sini zayıf biyoyararlanımlı (yani düşük sistemik konsantrasyon) incelemek için venöz kateter yoluyla seri kan örnekleri toplandı.

<table><tbody><tr><td>EDTA antikoagülan içeren 0,5 mL test tüpü</td><td>Xinkang</td><td>N/A</td><td>hematoloji testi için kan örnekleri toplama</td></tr><tr><td>0,5*20 mm 1,0 mL şırınga</td><td>KLMEDICAL</td><td>N/A</td><td>sıvının yıkanması veya tuzlu su ile değiştirilmesi</td></tr><tr><td>0,6*28,5 mm 5,0 mL şırınga</td><td>HD</td><td>N/A</td><td>Deri altı enjeksiyon</td></tr><tr><td>1.0 mL Künt uçlu şırınga (22G)</td><td>skillsmodel</td><td>S4-PKT22G</td><td>Salini enjekte edin ve kateter</td></tr><tr><td>1.5 mL steril mikrosantrifüj tüpü</td> aracılığıyla kan örnekleri toplayın <td>Axygen</td><td>MCT-150-C-S Steril</td><td>kateter kilit solüsyonunu saklayın, heparinize salin ve meloksikam solüsyonu</td></tr><tr><td>1.5&nbsp; mL mikrosantrifüj tüpleri</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M</td><td>kan alma</td></tr><tr><td>1/2&nbsp; daire kesme 5*12 mm sütür iğnesi</td><td>becerilerimodel</td><td>S4-FHZ</td><td>Kateteri sabitlemek için kas tabakasını geçirin</td></tr><tr><td>3/8 daire kesme 7*17 mm sütür iğnesi</td><td>becerilerimodel</td><td>S5-FHZ</td><td>Sütür, sıçan korteksinin insizyonu</td></tr><tr><td>6-0 steril emilmeyen ipek dikiş ipliği</td><td>JUNSHENG</td><td>N/A</td><td>ligatürü</td></tr><tr><td>%75 tıbbi alkol</td><td>HONGSONG</td><td>N/A</td><td>Dezenfeksiyon</td></tr><tr><td>Yapıştırıcı bant</td><td>LIUTAI</td><td>N/A Fareyi</td><td>konumlandırma</td></tr><tr><td>Otoklav sterilizasyon bandı</td><td>Biosharp</td><td>BS-QT-028</td><td>Sterilize edilmiş ürünleri işaretleyin</td></tr><tr><td>Otomatik kan hücresi sayacı</td><td>Sysmex</td><td>XN-550</td><td>Hematoloji testi</td></tr><tr><td>Castroviejo mikro makas</td><td>becerilerimodel</td><td>WA1010</td><td>Kan damarındaki açıklığı kesin</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>75002402</td><td>Plazma hazırlama</td></tr><tr><td>Temiz yastık</td><td>Qingjie</td><td>N/A</td><td>Operasyon alanını hazırlayın</td></tr><tr><td>Pamuk topları</td><td>HC</td><td>N/A</td><td>Yara dezenfeksiyonu ve sterilizasyonu</td></tr><tr><td>Pamuklu çubuklar</td><td>BEITAGOGO</td><td>N/A</td><td>Dezenfeksiyon</td></tr><tr><td>Kavisli hemostat</td><td>becerilermodel</td><td>N/A</td><td>ligatür</td></tr><tr><td>DN50 Paslanmaz çelik sıçan tutucu</td><td>becerilerimodel</td><td>S4-RGDQ1</td><td>Kolay kullanım için sıçanların hareketini kısıtlayın</td></tr><tr><td>Oral uygulama için</td><td>Elajik asit</td><td>Aladdin</td><td>E102710-25g</td> doğal fenol</tr><tr><td>Yarım kavisli forseps</td><td>becerilerimodel</td><td>53072</td><td>Kas tabakasını ve dokuyu kaldırın, şah damarını izole edin ve dikişi bağlayın</td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Sıcak arkadaş</td><td>Yok</td><td>Hayvanın ısı kaybını önleme</td></tr><tr><td>Heparin sodyum</td><td>Solarbio</td><td>H8060</td><td>antikoagülan</td></tr><tr><td>İyodofor</td><td>Xidebao</td><td>Yok Yarayı</td><td>temizleyin</td></tr><tr><td>İris makas</td><td>becerilerimodel</td><td>54002</td><td>Kas tabakasının künt ayrılması</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>RWD R510-22-16</td><td></td><td>anestezi</td></tr><tr><td>LED lamba</td><td>EMPERORFEEL</td><td>N/A</td><td>sugery</td></tr><tr><td>Sıvı kromatografisi-kütle spektroskopisi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>VQF01-20001/ TSQ02-10002</td><td>plazmada ilaç konsantrasyonunun tespiti</td></tr><tr><td>Meloksikam</td><td>Hongqiang</td> N<td>/A</td><td>Analjezik</td></tr><tr><td>Normal salin</td><td>KL</td><td>N/A</td><td>Solüsyonu hazırlayın ve kan damarlarının kurumasını önleyin</td></tr><tr><td>Pet razor</td><td>Codos</td><td>3180</td><td>Kürkü tıraş etmek</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin</td><td>ZHHC</td><td>PW012</td><td>Elajik asit çözeltisinin hazırlanması</td></tr><tr><td>PU kateter</td><td>beceri modeli</td><td>RJVC-PU</td><td>Juguler ven kanülasyonu</td></tr><tr><td>Küçük hayvan operasyon anestezi konsolu</td><td>RWD</td><td>68620</td><td>Operasyon iş istasyonu</td></tr><tr><td>Sprey şişesi</td><td>Diğer</td><td>N / A</td><td>aseptik iş istasyonu</td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik fiş (22G)</td> <td>beceri modeli</td><td>S4-PKD22G</td><td>Sızdırmazlığını sağlamak için kateteri takın</td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik trokar</td><td>becerilerimodel</td><td>S$-PKDGZ</td><td>Kateterin dış yüzeyine rehberlik</td></tr> edin <tr><td>Steril kilit çözümü</td><td>becerilerimodel</td><td>SK-FB</td><td>sterilitesini sağlamak için kateteri kilitleyin</td></tr><tr><td>Düz besleme iğnesi</td><td>becerilerimodel</td><td>N/A</td><td>Oral gavaj</td></tr><tr><td>Cerrahi torba</td><td>BKMAM</td><td>N/A</td><td>cerrahi aletlerin sterilizasyonu için kap</td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>becerilerimodel</td><td>J21070</td><td>Sıçan derisinde kesi</td></tr><tr><td>kesi Damar genişletici dengeli forseps</td><td>becerilerimodel</td><td>WA3020</td><td>Kan damarını genişletin ve kanülü içeri kayması için yönlendirin</td></tr><tr><td>ZS-MV Küçük hayvan anestezi makinesi</td><td>ZSLab</td><td>1057003</td><td>anesteziyi indüklemek ve sürdürmek</td></tr></tbody></table>

oral yoldan verilen İlacın seri kan Örneklemesi için sıçanlarda kalıcı juguler ven kanülasyonu oluşturma mikrocerrahi becerileri

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Küçük laboratuvar hayvanlarında kan örneklemesi farmasötik kurşun optimizasyonu için gereklidir, ancak deney hayvanlarına büyük zarar ve strese neden olabilir ve bu da sonuçları potansiyel olarak etkileyebilir. Sıçanlarda juguler ven kanülasyonu (JVC), tekrarlanan kan alımı için yaygın olarak kullanılan bir modeldir, ancak cerrahi becerilerin ve hayvan bakımının yeterli eğitimini gerektirir. Bu makalede, juguler kanülün yerleştirilmesi ve sızdırmazlığına özel olarak odaklanarak kalıcı bir JVC sıçan modelinin kurulması ve sürdürülmesi için mikrocerrahi prosedürler detaylandırılmıştır. Fizyolojik (örneğin, vücut ağırlığı, yiyecek ve su alımı) ve hematolojik parametrelerin izlenmesinin önemi, sıçanın iyileşmesi sırasında ameliyat sonrası 6 gün boyunca sunulan sonuçlarla vurgulanmıştır. JVC sıçan modelinde oral yoldan uygulanan doğal fenol ellajik asidin ilaç-plazma konsantrasyon-zaman profili belirlenmiştir.

Bu protokol, seri kan alımı için mikrocerrahi becerileri kullanarak uzun vadeli bir JVC modelinin nasıl oluşturulacağını kapsamlı bir şekilde göstermiştir. Şekil 1A , ameliyatı yürütmek için kullanılan temel cerrahi aletleri ve malzemeleri göstermektedir. Üç mavi işaretli PU kateterinin spesifikasyonu da gösterilmiştir, bu da araştırmacıya damar kanülünü adım 3.3'e yerleştirmesi için rehberlik etmek için yararlıdır., kanülasyonu yönlendirmek için PU kateteri üzerindeki işaretlerin n...

Aynı hayvanda sıralı kan alımı için daha uzun süreli juguler ven kanülasyon sıçanı modeli oluşturmak için ayrıntılı mikrocerrahi teknikler gösterilmiştir. Sıçanın iyileşme aşamasında fizyolojik ve hematolojik parametreler izlenmiştir. Bu model, hayvan stresine neden olmadan oral yoldan uygulanan polifenolün farmakokinetiğini incelemek için uygulanmıştır.

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Küçük laboratuvar hayvanından tekrarlanan kan örneklemesi, farmasötik kurşun optimizasyonunun önemli bir yönüdür. Bu protokol, kalıcı bir juguler ven kanülasyon sıçan modeli oluşturmak için mikrocerrahi becerileri detaylandırmaktadır. Bu teknik, bir juguler ven kanülasyon sıçan modelini verimli bir şekilde kurabilir ve stres ve ağrıdan kaçınırken bilinçli sıçanlarda kanül yoluyla tekrar tekrar kan örnekleri toplayabilir.Juguler veni ve kanülasyonunu bulmak önemlidir, çünkü anatomik karmaşıklığın görsel gösterimi bu model için mevcut değildir. Başlamak için, aseptik iş istasyonunu % 75tıbbi alkol ile hazırlayın, ardından tıraş edilmiş sıçanı oksijenle karıştırılmış izofluran ile uyuşturun. Subkutan olarak meloksikam solüsyonunu kilogram başına iki miligramlık bir dozda enjekte edin, daha sonra boynun orta çizgisinin sağ tarafındaki klavikula yakınındaki cildi forseps ile dikkatlice kaldırın ve bir çift cerrahi makas kullanarak göğse doğru 1.5 ila 2 santimetre uzunluğunda bir kesi yapın.Juguler venin altını açığa çıkarmak için, ince doku kapağını künt diseke etmek için iris makası kullanın. Dış juguler venin proksimal sefalik ucu, görsel olarak tanımlanabilen iki daldan oluşur. Juguler vene, juguler vene bağlı lenf bezini görselleştirmek için bağ zarı dokusu ile birlikte juguler veni kaldırın.Damar yönü boyunca damarı çevreleyen kas, yağ ve diğer dokulardan dikkatlice ayırın. Forsepsleri kollateral kan damarlarına zarar vermeden juguler venin altına dürtün ve kan damarının iki ucunu ayrı ayrı işaretlemek için damarın altına iki parça 6-0 dikiş geçirin. Dikişin bir parçasını sıçan kafasına doğru mümkün olduğunca çekin ve forseps kullanarak damarı kraniyal olarak iki ila üç düğümle yağlayabilirsiniz.İkinci bağı damarın kaudal ucuna bir gevşek düğümle yerleştirin. Heparinize salin ile doldurulmuş hazırlanmış künt uç şırıngasına 11 santimetrelik bir poliüretan veya PU kateter takın ve hava kabarcıklarını önlemek için heparinize salini yavaşça kateterin içine itin. Forsepslerin uçsuz bucaksız düz tarafını juguler venin altından diğer taraftan çıkmak için dürtün.Bir çift castroviejo mikromakas ile kraniyal bağın yakınındaki damarda küçük V şeklinde bir kesim yapın ve dirsek damarı dilatatör forsepslerinin ucuyla insizyonu yavaşça açın. Juguler ven kateterinin ön ucunun eğik açıklığını kesin. Tüpün eğik ucunu forseps ile yerleştirin ve juguler damara kaydırın.Kateteri ilerletirken, dirsek mikrocerrahi forsepslerini yavaşça geri çekin ve damarın dış yüzeyini forseps ile sıkıştırın. Yaklaşık üç santimetre uzunluğundaki PU tüpünün ilk mavi işaretine çarptıktan sonra kateteri yerleştirmeyi bırakın. Yerleştirilen kateteri forseps kullanarak hem kaudal hem de rostral ligatürlerle damara sabitleyin.Bir dikiş iğnesi kullanarak insizyonun sağ tarafındaki açıkta kalan dokudan 6-0'lık bir dikiş geçirin ve bağı bir hemostat ile bağlayın. Daha sonra aynı bağ ile bağlamak için kateteri ikinci mavi işarette bükün ve PU borusunu tıkamaktan kaçının. Tüm ekstra dikiş ipliğini kestikten sonra, künt uçlu şırıngayı 22 gauge paslanmaz çelik bir tapayla değiştirerek kateteri kapatın.Sıçanı sırt pozisyonuna yerleştirin ve% 75 tıbbi alkole batırılmış pamuk topu ile kürek kemiği arasındaki alanı nazikçe temizleyin. Cerrahi makası kullanarak, dorsal boynun merkezinde çok küçük bir kesi yapın. Dorsal insizyondan, cildin altındaki trokarı boynun sağ tarafındaki ventral insizyona doğru yönlendirin ve yavaşça itin.Venöz kateteri trokar içine koyun ve ardından dışarı çekin ve venöz kateteri dorsal insizyona doğru yönlendirin. Dışsal kateteri kas tabakasına sabitledikten sonra ventral ve dorsal insizyonların deri tabakasını 6-0 naylon sütür ve dikiş iğnesi ile kapatın ve tüm cerrahi kesileri iyodofor ile sürün. Ardından, kateteri parmak uçlarıyla sıkıştırarak kateter tıkacını çıkarın.Yeni bir künt uç şırıngası yerleştirin ve kan akışını test etmek için şırıngayı yavaşça geri çekin. Kateteri parmak uçlarıyla tekrar tutun. Künt uç şırıngasını kullanarak kateterin içine 0,2 mililitre heparinize salin ve 0,1 mililitre kilit çözeltisi enjekte edin ve ardından şırıngayı paslanmaz çelik bir tapayla değiştirin.Kateteri açın ve kateterin sıkılığını sağlamak için fişi hafifçe itin. Hematolojik testler için kan örnekleri toplamak için, sıçanı bir kısıtlayıcıya yerleştirin, fişi açın ve kateterin tıkanmadığından emin olmak için şırıngayı venöz PU kateterine yerleştirin. Bir kan karışımı, heparinize salin ve kateter kilit çözeltisi içeren başlangıçta çekilmiş kanı atın.Yeni bir şırınga kullanarak, 150 mikrolitre taze kan örneği toplayın ve kan örneğini daha önce K2EDTA ile püskürtülen 0.5 mililitrelik bir tüpe aktarın. 150 mikrolitre önceden ısıtılmış normal salin enjekte edin ve kateterden 0.2 mililitre steril heparinize normal salin enjekte edin. Bir sonraki numune toplamadan önce kateterin sızdırmazlığını ve sterilitesini sağlamak için kateterin içine 100 mikrolitre kilit çözeltisi enjekte edin.Bu çalışmada postoperatif altı gün içindeki fizyolojik ve hematolojik durumlar araştırılmıştır. Sıçanların çoğunluğu, 10 gramdan fazla vücut ağırlığı artışı, düzenli gıda alımı, beyaz kan hücresi, kırmızı kan hücresi, hemoglobin ve trombosit sayısı dahil olmak üzere enfeksiyon, dehidrasyon ve inflamasyonla ilgili seçilmiş kan bileşenleri ile kanıtlandığı gibi, ameliyattan sonraki dört ila altı gün içinde iyileşti. Bu nedenle, sıçanlar işlemden sonra iyileşme için en az dört ila altı gün gerektirdi.Büyük miktarda su alımı, operasyon sonrası ilk günde dehidrasyona işaret etti. Ek olarak, doğal polifenol ellajik asidin farmakokinetiği, yerleşik juguler ven kanülasyon sıçanı modelinde incelenmiş ve ellagik asidin zayıf biyoyararlanımı, 24 saat boyunca düşük plazma konsantrasyonu ile belirtilmiştir. Juguler venin doğru izolasyonu en önemli ilk adımdır, çünkü diğer yumuşak dokulara gömülü juguler ven araştırmacı tarafından hemen görülemeyebilir.Aynı hayvan içinde sıralı kan örneklemesi yerleşik JVC sıçan modelinde gerçekleştirilebilir. İlaç formülasyonlarının performansını in vivo olarak değerlendirmek için kullanışlı ve sağlam bir araçtır.

microsurgical-skills-establishing-permanent-jugular-vein-cannulation

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe insülin eylem değerlendirmesi için "altın standart". İnsülin, glukoz alımını teşvik sabit bir hızla doluyor. Bu düşüşün karşı aşılanmış eksojen glukoz miktarı insülin duyarlılığını göstermektedir. İşte prosedür bilinçli bir dizginlenmemiş sıçan yapılır.

Bilinçli Rat hiperinsülinemik öglisemik Kelepçe

Neointimal hiperplazi arterialized damarlarında darlık birincil nedenidir. Biz sağ eksternal juguler ven Sprague Dawley sıçan karotis arter manşet tekniği kullanılarak aşılı sayede yeni bir protokol öneriyorum. Hayatta kalma oranı, kurban zaman noktasında% 100 idi.

Sıçanlarda Common Karotid Arter interpozisyon Harici Juguler Ven Greft: Gelişmiş Mikrocerrahi Tekniği Eğitimi

Hemodinamiği ölçmek, sıvı sağlamak ve kan örneklemesi yapmak için vasküler erişimler, herhangi bir küçük hayvan modeli çalışması için önemlidir. Anestezi uygulanmış bir sıçanda monitörizasyon, infüzyon ve örnekleme yapmak üzere bir sisteme bağlanmak üzere karotis arter ve ortak juguler ven içine kateter implantasyonu için bir teknik sunuyoruz.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

Bu makale, IV metamfetamin bağımlılığının tedavisi için uyuşturucu kullanım ortamından zamansal ve mekansal olarak ayrı olan intrakraniyal elektriksel stimülasyonun verilmesini açıklamaktadır.

İntravenöz Metamfetamin Self-İdaresi Derin Beyin Stimülasyonu Etkileri değerlendirilmesi için Genel Bir Yöntem

Burada, sıçan subklaviyan ven kan örnekleri toplamak için bir protokol mevcut.

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Mevcut protokol, sıçanlarda subklaviyen damardan kan toplamak için basit ve etkili bir yöntemi açıklamaktadır. Anestezi olmadan hızlı, zamanında ve kolayca tanımlanabilir örnekleme sağlar ve tekrarlayan numune toplama yoluyla yüksek kaliteli kan elde eder.

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Bu protokol, sıçanlarda sistemik inflamatuar yanıt sendromu, iskemi/reperfüzyon hasarı, oksidatif stres, nöroinflamasyon vb. araştırmaları için uygulanabilecek derin hipotermik dolaşım durmasının kurulmasını sağlar.

Sıçanlarda Derin Hipotermik Dolaşım Tutuklamasının Kurulması

Mevcut protokol, mikrodiyaliz tekniğini kullanarak sıçan kalp kanının gerçek zamanlı ve dinamik olarak toplanması için basit ve etkili bir yöntemi tanımlamaktadır.

Noninvaziv Mikrodiyaliz Tekniği ile Sıçan Kalbinden Dinamik Sürekli Kan Ekstraksiyonu

Burada, sıçan modeli için hızlı, kolay ve güvenilir kan alma alternatifleri sunmak için bir protokol sunuyoruz. Bağlama göre üç farklı kan örnekleme yöntemini tanımlıyoruz: anestezi altında veya bilinçli bir hayvanda kuyruk damarı delinmesi ve anestezi altında dorsal penil ven delinmesi.

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Burada, sıçanlarda anestezi olmadan hızlı, güvenli ve tekrarlanan kan alımını sağlayan etkili sıçan kısıtlaması ve subklavyen ven ponksiyon yöntemlerinin bir kombinasyonunu sunuyoruz.

Bilinçli Sıçanlarda Subklavyen Ven Kan Örneklemesi

Bu deneysel protokol, karaciğer lenfatik ve damar drenajının doğrudan ve nicel olarak değerlendirilmesini sağlayan karaciğer lenf kanalı kanülasyonlu bir fare modelini tanımlar. Model, karaciğer taşıması, metabolizması ve bağışıklık sinyalini incelemek için karaciğer lenf ve sistemik kanın eşzamanlı örneklenmesine olanak tanır ve ilaç farmakokinetiği ile karaciğer-spesifik biyolojinin çalışmalarını destekler.

Hemefir Taşıma Yollarının Eşzamanlı Lenfatik ve Kan Damarları Örneklemesi Yoluyla Değerlendirilmesi İçin Kapsamlı Fare Modeli

Öğrenin sıçanlarda kalıcı juguler ven kanülasyonu mikrocerrahi tekniklerini ve bilinçli hayvanlarda stresi önleyerek seri kan örneklemesi yapma yöntemini. Bu model farmakokinetik çalışmalar için değerli bir araçtır.

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri (Video) | JoVE Journal

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri

Daha fazla video keşfet