Name: Sıçan Yağ Dokusu Mezenkimal Kök Hücrelerinin İnsülin Üreten Hücrelere Farklılaşması İçin İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 9 s
Description: Keşfedin, sıçan epididimal yağ dokusundan mezenkimal kök hücre izolasyonu ve insülin üreten hücrelere farklılaşma protokolünü. Bu yöntem, diyabet tedavisi için rejeneratif tıp araştırmalarına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dr. Rawda Samir Mohamed, MSc, Veteriner Uzmanı, Eczacılık Fakültesi, Mısır İngiliz Üniversitesi (BUE) sıçanların diseksiyonuna yardımcı olduğu için teşekkür ederiz.
Ayrıca, Mısır'daki İngiliz Üniversitesi (BUE) Kitle İletişim Fakültesi'nin bu el yazmasının videosunun üretimi ve düzenlenmesi için gösterdiği çabaları kabul etmek ve takdir etmek isteriz.
Makalenin revizyonu ve İngilizce dilinde düzeltilmesi için Mısır'daki İngiliz Üniversitesi (BUE) İngilizce Öğretim Görevlisi Yüksek Lisans Öğrencisi Bayan Fatma Masoud'a teşekkür ederiz.
Bu çalışma kısmen İlaç Araştırma ve Geliştirme Merkezi (CDRD), Eczacılık Fakültesi, Mısır'daki İngiliz Üniversitesi (BUE), Kahire, Mısır tarafından finanse edilmiştir.

<ol><li>Hmadcha, A., Martin-Montalvo, A., Gauthier, B. R., Soria, B., Capilla-Gonzalez, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+mesenchymal+stem+cells+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of mesenchymal stem cells for cancer therapy.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 8, 43(2020).</li>
<li>Kamal, M., Kassem, D., Haider, K. H. Sources and therapeutic strategies of mesenchymal stem cells in regenerative medicine. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKamal%2C+M+%22Handbook+of+Stem+Cell+Therapy%22">Handbook of Stem Cell Therapy</a>. Haider, K. H. , Springer. Singapore. 1-28 (2022).</li>
<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pluripotency+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+adult+marrow%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow.</a> Nature. 418 (6893), 41-49 (2002).</li>
<li>De Ugarte, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+expression+of+stem+cell+mobilization-associated+molecules+on+multi-lineage+cells+from+adipose+tissue+and+bone+marrow%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Letters%22%5BJournal%5D)">Differential expression of stem cell mobilization-associated molecules on multi-lineage cells from adipose tissue and bone marrow.</a> Immunology Letters. 89 (2-3), 267-270 (2003).</li>
<li>Mosna, F., Sensebe, L., Krampera, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+bone+marrow+and+adipose+tissue+mesenchymal+stem+cells%3A+A+user%27s+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Human bone marrow and adipose tissue mesenchymal stem cells: A user's guide.</a> Stem Cells and Development. 19 (10), 1449-1470 (2010).</li>
<li>Camara, B. O. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+canine+adipose+mesenchymal+stem+cells+into+insulin-producing+cells%3A+Comparison+of+different+culture+medium+compositions%5BTitle%5D)+AND+%22Domestic+Animal+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Differentiation of canine adipose mesenchymal stem cells into insulin-producing cells: Comparison of different culture medium compositions.</a> Domestic Animal Endocrinology. 74, 106572(2021).</li>
<li>Ren, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+expansion%2C+and+differentiation+of+goat+adipose-derived+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Research+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Isolation, expansion, and differentiation of goat adipose-derived stem cells.</a> Research in Veterinary Science. 93 (1), 404-411 (2012).</li>
<li>Vallee, M., Cote, J. F., Fradette, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-tissue+engineering%3A+Taking+advantage+of+the+properties+of+human+adipose-derived+stem%2Fstromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pathologie+Biologie%22%5BJournal%5D)">Adipose-tissue engineering: Taking advantage of the properties of human adipose-derived stem/stromal cells.</a> Pathologie Biologie. 57 (4), 309-317 (2009).</li>
<li>Dominici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+criteria+for+defining+multipotent+mesenchymal+stromal+cells.+The+International+Society+for+Cellular+Therapy+position+statement%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement.</a> Cytotherapy. 8 (4), 315-317 (2006).</li>
<li>Gong, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+stimulate+intestinal+stem+cells+to+repair+radiation-induced+intestinal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells stimulate intestinal stem cells to repair radiation-induced intestinal injury.</a> Cell Death & Disease. 7 (9), 2387(2016).</li>
<li>Dai, R., Wang, Z., Samanipour, R., Koo, K. I., Kim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+stem+cells+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+International%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived stem cells for tissue engineering and regenerative medicine applications.</a> Stem Cells International. 2016, 6737345(2016).</li>
<li>Ceccarelli, S., Pontecorvi, P., Anastasiadou, E., Napoli, C., Marchese, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulatory+effect+of+adipose-derived+stem+cells%3A+The+cutting+edge+of+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Immunomodulatory effect of adipose-derived stem cells: The cutting edge of clinical application.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 236(2020).</li>
<li>Karp, J., Leng Teo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+homing%3A+The+devil+is+in+the+details%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell homing: The devil is in the details.</a> Cell Stem Cell. 4 (3), 206-216 (2009).</li>
<li>Andaloussi, S., Mager, I., Breakefield, X. O., Wood, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+vesicles%3A+Biology+and+emerging+therapeutic+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Extracellular vesicles: Biology and emerging therapeutic opportunities.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 12 (5), 347-357 (2013).</li>
<li>Lopez, M. J., Spencer, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+adult+rat+adipose+tissue-derived+stromal+cell+isolation+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">In vitro adult rat adipose tissue-derived stromal cell isolation and differentiation.</a> Methods in Molecular Biology. 702, 37-46 (2011).</li>
<li>Karnieli, O., Izhar-Prato, Y., Bulvik, S., Efrat, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+insulin-producing+cells+from+human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+by+genetic+manipulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Generation of insulin-producing cells from human bone marrow mesenchymal stem cells by genetic manipulation.</a> Stem Cells. 25 (11), 2837-2844 (2007).</li>
<li>Yang, Y. K., Ogando, C. R., Wang See, C., Chang, T. Y., Barabino, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+phenotype+and+differentiation+potential+of+human+mesenchymal+stem+cells+aging+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Changes in phenotype and differentiation potential of human mesenchymal stem cells aging in vitro.</a> Stem Cell Research & Therapy. 9 (1), 131(2018).</li>
<li>Lee, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multipotent+stromal+cells+from+human+marrow+home+to+and+promote+repair+of+pancreatic+islets+and+renal+glomeruli+in+diabetic+NOD%2Fscid+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Multipotent stromal cells from human marrow home to and promote repair of pancreatic islets and renal glomeruli in diabetic NOD/scid mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (46), 17438-17443 (2006).</li>
<li>Gao, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+apelin+in+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cell+reverses+insulin+resistance+and+promotes+pancreatic+%CE%B2+cell+proliferation+in+type+2+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Overexpression of apelin in Wharton's jelly mesenchymal stem cell reverses insulin resistance and promotes pancreatic β cell proliferation in type 2 diabetic rats.</a> Stem Cell Research & Therapy. 9 (1), 339(2018).</li>
<li>Ghoneim, M. A., Refaie, A. F., Elbassiouny, B. L., Gabr, M. M., Zakaria, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+mesenchymal+stromal%2Fstem+cells+to+insulin-producing+cells%3A+Progress+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reviews+and+Reports%22%5BJournal%5D)">From mesenchymal stromal/stem cells to insulin-producing cells: Progress and challenges.</a> Stem Cell Reviews and Reports. 16 (6), 1156-1172 (2020).</li>
<li>Kassem, D. H., Kamal, M. M., El-Kholy, A. E. -L. G., El-Mesallamy, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exendin-4+enhances+the+differentiation+of+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+into+insulin-producing+cells+through+activation+of+various+%CE%B2-cell+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Exendin-4 enhances the differentiation of Wharton's jelly mesenchymal stem cells into insulin-producing cells through activation of various β-cell markers.</a> Stem Cell Research & Therapy. 7, 108(2016).</li>
<li>Yang, Z., Li, K., Yan, X., Dong, F., Zhao, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amelioration+of+diabetic+retinopathy+by+engrafted+human+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+in+streptozotocin+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Amelioration of diabetic retinopathy by engrafted human adipose-derived mesenchymal stem cells in streptozotocin diabetic rats.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 248 (10), 1415-1422 (2010).</li>
<li>Zhang, N., Li, J., Luo, R., Jiang, J., Wang, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+induce+angiogenesis+and+attenuate+the+remodeling+of+diabetic+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Endocrinology+%26+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Bone marrow mesenchymal stem cells induce angiogenesis and attenuate the remodeling of diabetic cardiomyopathy.</a> Experimental and Clinical Endocrinology & Diabetes. 116 (2), 104-111 (2008).</li>
<li>Zhao, A. G., Shah, K., Freitag, J., Cromer, B., Sumer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+potential+of+early-+and+late-passage+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+cultured+under+hypoxia+and+normoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+International%22%5BJournal%5D)">Differentiation potential of early- and late-passage adipose-derived mesenchymal stem cells cultured under hypoxia and normoxia.</a> Stem Cells International. 2020, 8898221(2020).</li>
<li>Krishnamurthy, H., Cram, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basics+of+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Applications+of+Flow+Cytometry+in+Stem+Cell+Research+and+Tissue%22%5BJournal%5D)">Basics of flow cytometry.</a> Applications of Flow Cytometry in Stem Cell Research and Tissue. , Hoboken, NJ. 1-12 (2010).</li>
<li>Habib, S. A., Kamal, M. M., El-Maraghy, S. A., Senousy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exendin-4+enhances+osteogenic+differentiation+of+adipose+tissue+mesenchymal+stem+cells+through+the+receptor+activator+of+nuclear+factor-kappa+B+and+osteoprotegerin+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Exendin-4 enhances osteogenic differentiation of adipose tissue mesenchymal stem cells through the receptor activator of nuclear factor-kappa B and osteoprotegerin signaling pathway.</a> Journal of Cellular Biochemistry. , (2022).</li>
<li>Qi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+from+obese+mice+prevent+body+weight+gain+and+hyperglycemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived mesenchymal stem cells from obese mice prevent body weight gain and hyperglycemia.</a> Stem Cell Research & Therapy. 12 (1), 277(2021).</li>
<li>Tiryaki, T., Conde-Green, A., Cohen, S. R., Canikyan, S., Kocak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+3-step+mechanical+digestion+method+to+harvest+adipose-derived+stromal+vascular+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery+-+Global+Open%22%5BJournal%5D)">A 3-step mechanical digestion method to harvest adipose-derived stromal vascular fraction.</a> Plastic and Reconstructive Surgery - Global Open. 8 (2), 2652(2020).</li>
<li>Alstrup, T., Eijken, M., Bohn, A. B., Moller, B., Damsgaard, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+adipose+tissue-derived+stem+cells%3A+Enzymatic+digestion+in+combination+with+mechanical+distortion+to+increase+adipose+tissue-derived+stem+cell+yield+from+human+aspirated+fat%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Stem+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Isolation of adipose tissue-derived stem cells: Enzymatic digestion in combination with mechanical distortion to increase adipose tissue-derived stem cell yield from human aspirated fat.</a> Current Protocols in Stem Cell Biology. 48 (1), 68(2019).</li>
<li>Taghizadeh, R. R., Cetrulo, K. J., Cetrulo, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagenase+impacts+the+quantity+and+quality+of+native+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+derived+during+processing+of+umbilical+cord+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Collagenase impacts the quantity and quality of native mesenchymal stem/stromal cells derived during processing of umbilical cord tissue.</a> Cell Transplantation. 27 (1), 181-193 (2018).</li>
<li>Kamal, M. M., Kassem, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+for+diabetes%3A+Achievements+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of Wharton's jelly mesenchymal stem cells for diabetes: Achievements and challenges.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 16(2020).</li>
<li>Gabr, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+human+mesenchymal+stem+cells+to+insulin-producing+cells%3A+Comparison+between+bone+marrow-+and+adipose+tissue-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">From human mesenchymal stem cells to insulin-producing cells: Comparison between bone marrow- and adipose tissue-derived cells.</a> BioMed Research International. 2017, 3854232(2017).</li>
<li>Xin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-producing+cells+differentiated+from+human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+in+vitro+ameliorate+streptozotocin-induced+diabetic+hyperglycemia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Insulin-producing cells differentiated from human bone marrow mesenchymal stem cells in vitro ameliorate streptozotocin-induced diabetic hyperglycemia.</a> PLoS One. 11 (1), 0145838(2016).</li>
<li>Kassem, D. H., Kamal, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+efficacy+of+umbilical+cord-derived+stem+cells+for+diabetes+mellitus%3A+A+meta-analysis+study%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Therapeutic efficacy of umbilical cord-derived stem cells for diabetes mellitus: A meta-analysis study.</a> Stem Cell Research & Therapy. 11 (1), 484(2020).</li>
<li>El-Demerdash, R. F., Hammad, L. N., Kamal, M. M., El Mesallamy, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+Wharton%27s+jelly+and+cord+blood+as+a+source+of+mesenchymal+stem+cells+for+diabetes+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A comparison of Wharton's jelly and cord blood as a source of mesenchymal stem cells for diabetes cell therapy.</a> Regenerative Medicine. 10 (7), 841-855 (2015).</li>
<li>Kassem, D. H., Kamal, M. M., El-Kholy, A. E. -L. G., El-Mesallamy, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+expression+levels+of+pluripotency%2Fstem+cell+markers+with+the+differentiation+outcome+of+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+into+insulin+producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimie%22%5BJournal%5D)">Association of expression levels of pluripotency/stem cell markers with the differentiation outcome of Wharton's jelly mesenchymal stem cells into insulin producing cells.</a> Biochimie. 127, 187-195 (2016).</li>
<li>El-Asfar, R. K., Kamal, M. M., Abd El-Razek, R. S., El-Demerdash, E., El-Mesallamy, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obestatin+can+potentially+differentiate+Wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+into+insulin-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Obestatin can potentially differentiate Wharton's jelly mesenchymal stem cells into insulin-producing cells.</a> Cell and Tissue Research. 372 (1), 91-98 (2018).</li>
<li>Gabr, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-producing+cells+from+adult+human+bone+marrow+mesenchymal+stromal+cells+could+control+chemically+induced+diabetes+in+dogs%3A+A+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Insulin-producing cells from adult human bone marrow mesenchymal stromal cells could control chemically induced diabetes in dogs: A preliminary study.</a> Cell Transplantation. 27 (6), 937-947 (2018).</li>
</ol>

Tüm ortak yazarlar bu çalışmayla ilişkili çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Bu protokolde, Ad-MSC'lerin sıçan epididim yağından izolasyonu ve bu Ad-MSC'lerin IPC'lere farklılaşması için ayrıntılı bir protokol sunmayı başardık. Aslında, sıçan epididim yağı, Ad-MSC'leri elde etmek için kolayca elde edilebilir bir yağ dokusu kaynağıdır ve ne toplamane de işleme için herhangi bir özel ekipman gerektirmez 15,26,27. İzole edilmiş Ad-MSC'ler mükemmel kültür genişlemesi gösterdi ve MSC'ler olarak tanımlanacak t...

Mezenkimal stromal hücreler olarak da bilinen mezenkimal kök hücreler (MSC'ler), rejeneratif tıp için en yaygın kullanılan hücre tipleri arasındadır 1,2. Yetişkin kök hücreler olarak sınıflandırılırlar ve çok soylu farklılaşma potansiyeli ve kendini yenileme kapasitesi3 ile karakterize edilirler. MSC'ler izole edilebilir ve yağ dokusu, kemik iliği, periferik kan, göbek kordonu dokusu ve kan, saç kökleri ve dişler dahil olmak üzere çeşitli kaynaklardan elde edilebilir 4,5.
Kök hücrelerin yağ dokusundan izole edilmesi, kolay erişim, in vitro hızlı genişleme ve yüksek verim6 nedeniyle hem çekici hem de umut verici olarak görülmektedir. Yağ dokusundan türetilen mezenkimal kök hücreler (Ad-MSC'ler) insanlar, sığırlar, fareler, sıçanlar ve daha yakın zamanda keçiler gibi farklı türlerden izole edilebilir7. Ad-MSC'lerin artık doku mühendisliği ve gen/hücre tedavisi için potansiyel adaylar olduğu ve yumuşak doku hasarı veya defektlerinin uzun süreli onarımı için otolog bir alternatif geliştirmek için bile kullanılabileceği kanıtlanmıştır 7,8.
Uluslararası Hücre ve Gen Terapisi Derneği (ISCT), tam karakterizasyon için MSC'ler tarafından sergilenmesi gereken üç minimum kriter tanımlamıştır9. İlk olarak, plastik yapışkan olmalıdırlar. İkincisi, MSC'ler CD73, CD90 ve CD105 gibi mezenkimal kök hücre yüzey belirteçlerini eksprese etmeli ve hematopoetik belirteçler CD45, CD34, CD14 veya CD11b, CD79α veya CD19 ve HLA-DR'nin ekspresyonundan yoksundur. Son olarak, MSC'ler üç mezenkimal soya farklılaşma yeteneğini sergilemelidir: adipositler, osteositler ve kondrositler. İlginç bir şekilde, MSC'ler nöronal hücreler, kardiyomiyositler, hepatositler ve epitel hücreleri10,11 gibi diğer soylara da farklılaşabilir.
Aslında, MSC'ler, farklı hastalıklar için rejeneratif tedavide potansiyel terapötik ajanlar olarak uygulanmalarını sağlayan benzersiz özelliklere sahiptir. MSC'ler, terapötik faydalar sağlayan immünomodülatör bir ortamı indüklemek için çözünür faktörleri salgılayabilir12. Ek olarak, MSC'ler hedefe yönelik tedavi sunmak için yaralanma bölgelerine ve tümör mikro ortamlarına doğru göç edebilir; ancak, mekanizmalar tam olarak aydınlatılamamıştır13. Ek olarak, MSC'ler, son zamanlarda MSC'lerin çeşitli hastalıklardaki terapötik potansiyelinin yeni bir mekanizması olarak ortaya çıkan kodlanmamış RNA'lar, protein ve çözünür faktörlerden oluşan bir kargo taşıyan nano ölçekte eksozomları, hücre dışı vezikülleri salgılama yeteneğine sahiptir14.
Daha da önemlisi, MSC'ler, genetik modifikasyon 15,16 veya in vitro 17 kültür ortamında çeşitli dışsal indükleyici faktörler kullanarak, insülin üreten hücrelere (IPC'ler) farklılaşma potansiyelleri için belirgin bir dikkat çekmiştir. IPC indüksiyon periyodu, kullanılan indüksiyon protokolüne ve kullanılan dışsal faktörlere bağlı olduğu için büyük ölçüde değişir. Farklılaşma süreci günlerden aylara kadar sürebilir ve farklı aşamalarda eklenmesi ve / veya geri çekilmesi gereken eksojen indükleyici faktörlerin bir kombinasyonunu gerektirir. Endokrin pankreas farklılaşması için kullanılan bu faktörlerin çoğu, insülin salgılayan β hücrelerinin proliferasyonunu veya farklılaşmasını / neogenezini teşvik ettiği ve / veya IPC'lerin insülin içeriğini arttırdığı gösterilen biyolojik olarak aktif bileşiklerdir 18,19,20,21. Burada, MSC'lerin diyabette ve komplikasyonlarında, sekretomları da dahil olmak üzere çeşitli mekanizmalar yoluyla terapötik etkilere ve ayrıca çok çeşitli immüno-modülatör etkilere sahip oldukları bildirilmiştir22,23,24.
Bu protokolde, Ad-MSC'lerin sıçan epididim yağından izolasyonu ve karakterizasyonu için ayrıntılı bir aşamalı protokol ve ardından Ad-MSC'lerden IPC'lerin üretilmesi için basit, nispeten kısa bir protokol sunuyoruz.

<table><tbody><tr><td>Albümin, sığır serumu Fraksiyon V</td><td>MP Biyomedikal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcian Blue 8GX</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>A3157</td><td></td></tr><tr><td>Alizarin Kırmızı S</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>A5533</td><td></td></tr><tr><td>Amonyum hidroksit</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sıçan CD90 için Antikor, FITC</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>60024FI</td><td></td></tr><tr><td>Sığır serum albümini</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3912</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum Klorür</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CD105 Monoklonal Antikor, FITC</td><td>Thermo Fisher Scientific, Invitrogen, ABD</td><td>MA1-19594</td><td></td></tr><tr><td>CD34 Poliklonal Antikor</td><td>Thermo Fisher Scientific, Invitrogen, ABD</td><td>PA5-85917</td><td></td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>Fisher Scientific, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz tip I, toz</td><td>Gibco, Thermo Fisher, ABD</td><td>17018029</td><td></td></tr><tr><td>D-Glikoz susuz, ekstra saf</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td>G/0450/53</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>Fisher Scientific, Almanya</td><td>BP231-100</td><td></td></tr><tr><td>Ditizon boyama</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>D5130</td><td></td></tr><tr><td>DMEM - Yüksek Glikoz 4.5 g / L</td><td>Lonza, İsviçre</td><td>12-604F</td><td></td></tr><tr><td>DMEM - Düşük Glikoz 1 g / L</td><td>Lonza, İsviçre</td><td>12-707F</td><td></td></tr><tr><td>DMEM / F12 orta</td><td>Lonza, İsviçre</td><td>BE12-719F</td><td></td></tr><tr><td>DNAse / RNAse serbest su</td><td>Gibco Thermo Fisher, ABD</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>Etanol mutlak, Moleküler biyoloji notu</td><td>Sigma-Aldrich, Almanya</td><td>24103</td><td></td></tr><tr><td>Exendin-4</td><td>Sigma-Aldrich, Almanya</td><td>E7144</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Gibco Thermo Fisher, Brezilya</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehit %37</td> <td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hidroklorik asit (HCl)</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İzopropanol, Moleküler biyoloji sınıfı</td><td>Fisher Scientific, ABD</td><td>BP2618500</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamin</td><td>Gibco Thermo Fisher, ABD</td><td>25030-024</td><td></td></tr><tr><td>Magnezyum Klorür (Susuz)</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mezenkimal Kök Hücre Fonksiyonel tanımlama kiti</td><td>R& D systems Inc., MN, ABD</td><td>SC006</td><td></td></tr><tr><td>Nikotinamid</td><td>Sigma-Aldrich, Almanya</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Yağ Kırmızı Leke</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>O0625</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin-Amfoterisin</td><td>Gibco Thermo Fisher, ABD</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin, 1X, Ca / Mg olmadan</td><td>Lonza, İsviçre</td><td>BE17-516F</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum Chloride</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sıçan İnsülin ELISA Kiti</td><td>Cloud-Clone Corp., ABD</td><td>CEA682Ra</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Bikarbonat</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Fosfat Dibazik (Susuz)</td> <td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Fosfat Monobazik (Susuz)</td><td>Fisher Scientific, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SYBR Green Maxima</td><td>Thermo Scientific, ABD</td><td>K0221</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga filtresi, 0.2 mikron</td><td>Corning, ABD</td><td>431224</td><td></td></tr><tr><td>TRIzol</td><td>Thermo Scientific, ABD</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Tripan mavisi</td><td>Gibco Thermo Fisher, ABD</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin-Versene-EDTA, 1X</td><td>Lonza, İsviçre</td><td>CC-5012</td><td></td></tr><tr><td>Verso cDNA sentez kiti</td><td>Thermo Scientific, ABD</td><td>AB-1453 / A</td><td></td></tr> <tr><td>ve beta; -merkaptoetanol</td><td>Sigma-Aldrich, Almanya</td><td>M3148</td><td></td></tr></tbody></table>

sıçan yağ dokusu mezenkimal kök hücrelerinin İnsülin Üreten hücrelere farklılaşması İçin İzolasyonu

Isolation of Rat Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cells for Differentiation into Insulin-producing Cells

Mezenkimal kök hücreler (MSC'ler) - özellikle yağ dokusundan izole edilenler (Ad-MSC'ler) - herhangi bir etik kaygı oluşturmayan yenilenebilir, bol miktarda kök hücre kaynağı olarak özel ilgi görmüştür. Bununla birlikte, Ad-MSC'leri izole etmek için mevcut yöntemler standartlaştırılmamıştır ve özel ekipman gerektiren karmaşık protokoller kullanmaktadır. Ad-MSC'leri Sprague-Dawley sıçanlarının epididim yağından basit, tekrarlanabilir bir yöntem kullanarak izole ettik. İzole Ad-MSC'ler genellikle izolasyondan sonraki 3 gün içinde ortaya çıkar, çünkü yapışkan hücreler fibroblastik morfoloji gösterir. Bu hücreler izolasyondan sonraki 1 hafta içinde% 80 akıcılığa ulaşır. Daha sonra, pasaj 3-5'te (P3-5), CD90, CD73 ve CD105 gibi karakteristik MSC farklılaşma (CD) yüzey belirteçleri kümesi için immünofenotipleme yapılarak izole Ad-MSC'ler için tam bir karakterizasyon gerçekleştirildi ve bu hücrelerin osteojenik, adipojenik ve kondrojenik soylardan farklılaşması indüklendi. Bu da, izole edilmiş hücrelerin çok potansiyelli olduğunu ima eder. Ayrıca, izole Ad-MSC'lerin insülin üreten hücrelere (IPC'ler) doğru farklılaşmasını, yüksek glikozlu Dulbecco'nun modifiye edilmiş Eagle ortamı (HG-DMEM), β-merkaptoetanol, nikotinamid ve eksendin-4'ü dahil ederek basit, nispeten kısa bir protokol yoluyla indükledik. IPC'lerin farklılaşması, ilk olarak, MafA, NKX6.1, Pdx-1 ve Ins1 gibi spesifik β hücre belirteçlerinin ekspresyon seviyelerinin yanı sıra üretilen IPC'ler için ditizon boyaması yoluyla genetik olarak değerlendirildi. İkincisi, değerlendirme fonksiyonel olarak glukoz ile uyarılmış insülin sekresyonu (GSIS) testi ile gerçekleştirildi. Sonuç olarak, Ad-MSC'ler tüm MSC karakterizasyon kriterlerini sergileyerek kolayca izole edilebilir ve diyabet araştırması için laboratuarda bol, yenilenebilir bir IPC kaynağı sağlayabilirler.

Ad-MSC'lerin izolasyonu ve karakterizasyonu Şekil 2'de gösterildiği gibi, yağ dokusundan izole edilen hücreler, izolasyonun ertesi gününden başlayarak heterojen bir yuvarlak ve fibroblast benzeri hücre popülasyonu göstermiştir (Şekil 2A). İzolasyondan 4 gün sonra, fibroblast hücreleri sayı ve boyut olarak artmaya ve 1. pasajla homojen bir popülasyon olarak büyümeye başladı (Şekil 2B, C). Bu hücre...

Yağ dokusundan türetilmiş mezenkimal kök hücreler (Ad-MSC'ler), insülin üreten hücrelere (IPC'ler) farklılaşan potansiyel bir MSC kaynağı olabilir. Bu protokolde, sıçan epididim Ad-MSC'lerinin izolasyonu ve karakterizasyonu için ayrıntılı adımlar ve ardından aynı sıçan Ad-MSC'lerinden IPC'lerin üretilmesi için basit, kısa bir protokol sunuyoruz.

Sıçan Yağ Dokusu Mezenkimal Kök Hücrelerinin İnsülin Üreten Hücrelere Farklılaşması İçin İzolasyonu

Mesenchymal stem cells (MSCs)-especially those isolated from adipose tissue (Ad-MSCs)-have gained special attention as a renewable, abundant source of ...

Bu protokolün genel amacı, kırmızı yağ dokusunu izole etmek ve karakterize etmek, mezenkimal kök hücreleri kurutmak ve basit yöntemler kullanarak insülin üreten hücrelere doğru ayırt etmektir. Mezenkimal kök hücreler genetik alanında yollar bulmuşlardır. Kemik iliği, yağ dokusu ve perinatal doku gibi çeşitli kaynaklardan izole edilebilirler.Mükemmel kültürel özellikleri kabul ederler. Çok güçlüdürler ve potansiyel olarak çeşitli hastalıkları tedavi edebilirler. Yağ dokusu zengin bir mezenkimal kök hücre kaynağı sağlar.Bu yağ MSC'leri, kemik iliği gibi diğer kaynaklara kıyasla yüksek verimle lipo aspiratlardan kolayca izole edilebilir. Ve hem otolog hem de allojenik transplantasyon için iyi bir kaynak sağlayabilirler. Bu videoda, sıçan epididim yağından yağ mezenkimal kök hücrelerinin izolasyonu ve karakterizasyonu için basit bir protokol sunulmaktadır.Bu prosedür, izolasyon için basit, son derece verimli bir yöntemdir. İzolasyondan sonra, bu yağ mezenkimal kök hücrelerinin basit, nispeten kısa bir protokol kullanarak insülin üreten hücrelere farklılaşmasına katlanacağız. Daha güçlü vasküler fraksiyon elde etmek için epididim yağının kollajenöz sindirimi ile yağ mezenkimal kök hücrelerinin izolasyonu ile başlayacağız.Daha sonra mezenkimal kök hücreler, plastik yapışmalarının yanı sıra CD belirteçlerinin ekspresyonu ve çoklu mezodermal soylara farklılaşma ile karakterize edilecektir. Hayvanı anestezi edin, daha sonra servikal çıkık kullanarak ötenazi yapın. Vücudun her yerine% 70 etanol püskürtün ve cildin ve karnın alt kısmındaki kasların eksizyonu ile başlayın.Daha sonra testisleri epididim yağ ile açığa çıkarın. Epididim yağını nazikçe kesin. Kan damarlarını yağlarla kesmemeye dikkat edin.Bir biyo güvenlik kabininde, forseps ve neşter kullanarak yağ dokusunu küçük parçalara ayırın. Yağ dokusunu 10 mililitre steril PBS içeren santrifüj tüpüne aktarın. Falcon tüpünü 45 saniye boyunca eğerek yıkamaya başlayın.Ardından tüpü iki katmana ayırmak için beş dakika bekletin. İhlal edilmiş PBS'yi 10 mililitrelik bir şırınga kullanarak çıkarın. PBS temizlenene kadar bu yıkama adımlarını dört ila beş kez tekrarlayın.Yıkadıktan sonra, yağ dokusunu kollajenöz çözelti içinde tekrar askıya alın, daha sonra doku neredeyse homojen olana kadar çalkalayıcı su banyosunda inkübe edin. Daha sonra, doku kollajenöz karışımını 15 saniye boyunca vorteksleyin, daha sonra beş dakika boyunca santrifüj yapın. Santrifüjlemeden sonra üç katmanınız olacak.Süpernatantı stromal vasküler fraksiyonun üzerine dikkatlice atın. İlk önce üstteki yağ tabakasını dikkatlice atın, ardından stromal vasküler fraksiyon peletini rahatsız etmeden yankı tabakası izleyin. Stromal vasküler fraksiyonu steril BSA'da tekrar askıya alın ve beş dakika boyunca yeniden santrifüj yapın.Tüm santrifüjleme, komple DMEM F-12 ortamını 25 santimetrekare şişeye yerleştirin. Santrifüjlemeden sonra, süpernatantı atın ve stromal vasküler peleti tam DMEM F-12 ortamında tekrar askıya alın. Ve kültür şişesine transfer.37 derece% 5 karbondioksit inkübatörüne yerleştirin. Ertesi gün, bağlanmamış hücreleri çıkarın ve ortamı taze ortamlarla değiştirin. İzolasyonun ertesi gününden itibaren, fibroblast benzeri hücreler ortaya çıkmaya başlayacaktır.Sonra yavaş yavaş zaman geçtikçe sayı ve boyut olarak artacaklardır. Pasaj yaparak, hücreler daha homojen hale gelecektir. Bu hücreler tüm mezenkimal kök hücre karakterizasyon kriterlerini sergiler.Bu hücreler, nikotinamid beta merkaptoetanol ve Exendin-4 içeren bu basit protokol kullanılarak insülin üreten hücrelere doğru farklılaştırıldı. Farklılaşma adımları boyunca hücreler fibroblastik şekillerini kaybetmeye başlar ve bence morfoloji gibi kümelenirler. Kullanılan insülin üreten hücreler pozitif kırmızı kırmızı disithon boyama gösterir, daha sonra kullanılan insülin üreten hücreler Pdx-1, mafA ve insülin gibi çeşitli beta hücre belirteçlerini eksprese eder.Ek olarak, indüklenmiş insülin üreten hücreler, daha yüksek glikoz konsantrasyonu ile zorlandıklarında süpernatantta daha yüksek insülin seviyeleri salgılarlar. Yağ mezenkimal kök hücrelerinin izolasyonu ve karakterizasyonu için ayrıntılı, kademeli bir protokol sağladık. Ayrıca burada yağ mezenkimal kök hücrelerinin insülin üreten hücrelere farklılaşması için nispeten kısa, basit ve etkili bir protokol sunuyoruz.Bu, araştırmacıların mezenkimal kök hücreler alanına girmeleri ve insülin üreten hücrelere farklılaşmalarını incelemeleri için bir geçit sağlar.

isolation-rat-adipose-tissue-mesenchymal-stem-cells-for

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Bu videoda, murin periaortik ark yağ dokusundan floresan etiketli nöral krestten türetilmiş adipoz türevli kök hücrelerin (ADSC'ler) izole edilmesi ve kültürlenmesi için bir teknik gösterilmektedir. İzolasyonu takiben, NCADSC'ler tespit edilir, floresanla aktive edilen hücre sıralaması kullanılarak sıralanır ve daha sonra hücre proliferasyonunu teşvik ederek bir plaka üzerinde kültürlenir.

Murin Periaortik Yağ Dokusundan Yağ Kaynaklı Kök Hücrelerin İzole Edilmesi

Bu protokol, domuz adipoz kaynaklı kök hücrelerin (pADSC) deri altı yağ dokularından izolasyonunu ve çoklu potansiyelin incelenmesini tanımlar. Multipotent pADSC, adiposit farklılaşma süreçlerini tanımlamak ve rejeneratif çalışmalar için mezodermal mezenşimin çoklu hücre soylarına veya ektoderm ve endodermin diğer soylarına transdiferansiyonu incelemek için kullanılır.

Domuz Subkutan yağ dokularındaki İzolasyonu ve Yağ-Türetilmiş Kök Hücre Farklılaşması

Burada Manyetik Aktif Hücre Ayırma (MCS) kullanarak Perivasküler Adipoz Doku (PVAT) Adiposit Progenitör Hücre (APC) popülasyonlarının izolasyonu için bir yöntem rapor. Bu yöntem, floresan-Aktive Hücre Ayırma (FACS) ile karşılaştırıldığında, yağ dokusunun gramı başına APC'nin artan bir izolasyonuna izin verir.

Manyetik Aktive Hücre Ayırma ile İzole Edilen Perivasküler Adipoz Doku&#39;ndan Adiposit Progenitörlerinin Genleşmesi ve Adipogenez İndüksiyonu

Yağ dokusu vasküler ataları gelen beyaz ve bej adiposit farklılaşma obezite metabolik iyileştirme için potansiyel taşımaktadır. CD34 + CD31 + insan yağı endotel hücre izolasyon ve bir sonraki vitro genişleme ve farklılaşma beyaz ve bej adiposit içine iletişim kurallarını açıklar. Birkaç aşağı akım uygulamaları ele alınmıştır.

Yalıtım, genişleme ve Adipojenik indüksiyon CD34 + CD31 + insan Omental ve deri altı yağ dokusu endotel hücrelerden

Bu protokol, adipojenik ve fibro-inflamatuar stromal hücre alt popülasyonlarını murin karın içi beyaz yağ dokusu (WAT) depolarından floresanla aktive edilen hücre sınıflandırması veya immünmanyetik boncuk ayırma yoluyla izole etmek için teknik yaklaşımı açıklar.

Murin İntraabdominal Yağ Depolarından Adipojenik ve Fibroinflamatuar Stromal Hücre Alt Popülasyonlarının İzolasyonu

Bu makalede, enzimatik doku sindirim protokolü kullanılarak rhesus makak kaynaklı adipoz kaynaklı kök hücrelerin (ADSC'ler) izolasyonu anlatılmaktadır. Daha sonra, hücre dekolmanı, saymayı ve kaplamayı içeren ADSC proliferasyonunu tanımladık. Son olarak, ADSC farklılaşması spesifik adipojenik indükleyici ajanlar kullanılarak tanımlanmıştır. Ek olarak, farklılaşmayı doğrulamak için boyama tekniklerini açıklıyoruz.

Rhesus Macaque Adipoz Türevi Kök Hücrelerin İzolasyonu, Proliferasyonu ve Farklılaşması

Bu protokol, fare preadipositlerinin deri altı yağdan izolasyonunu, olgun adipositlere farklılaşmasını ve insülin direncinin indüklenmesini açıklar. İnsülin etkisi, batı lekesi boyunca insülin sinyal yolunun üyelerinin fosforilasyonu / aktivasyonu ile değerlendirilir. Bu yöntem, primer adipositlerde insülin direncinin/duyarlılığının doğrudan belirlenmesini sağlar.

Primer Kültürde Diferansiye Fare Adipositleri: İnsülin Direncinin Bir Modeli

Bu protokol, Sprague Dawley sıçanlarından yağ dokusu kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (MSC'ler) izole edilmesi ve tanımlanması için bir metodoloji açıklamaktadır.

Sprague Dawley Sıçanlarının Yağ Dokusundan Elde Edilen Mezenkimal Kök Hücrelerin İzolasyonu ve Tanımlanması

Bu protokol, preadipositleri elde etmek ve in vitro adiposit diferansiyasyonunu sağlamak için stromal vasküler fraksiyonun (SVF) murin yağ dokusundan yarı otomatik izolasyonunu tanımlar. Kollajenaz sindirimi için bir doku ayrıştırıcısı kullanmak deneysel varyasyonu azaltır ve tekrarlanabilirliği arttırır.

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

Yağ dokusu mükemmel bir mezenkimal kök hücre kaynağıdır. Burada, İsviçre fareleri epididimal yağ dokusundan yağ dokusu türevli kök hücrelerin (ADSC'ler) adım adım ekstraksiyonunu, yetiştirilmesini ve karakterizasyonunu getiriyoruz.

Fare Epididimal Yağ Dokusundan Mezenkimal Kök Hücrelerin İzolasyonu, İn Vitro Genişletme ve Karakterizasyonu

Burada, &gt;90% işlem süresi azalması, yüksek hücre canlılığı ve geniş uyumlulukla karakterize edilen yağ kaynaklı kök hücreleri ve adipositleri verimli şekilde izole etmek için standart bir yöntem sunuyoruz.

Domuz yağ dokusundan yağ kök hücrelerinin ve adipositlerin etkili izolasyonu

Keşfedin, sıçan epididimal yağ dokusundan mezenkimal kök hücre izolasyonu ve insülin üreten hücrelere farklılaşma protokolünü. Bu yöntem, diyabet tedavisi için rejeneratif tıp araştırmalarına katkı sağlar.

Sıçan Yağ Dokusu Mezenkimal Kök Hücrelerinin İnsülin Üreten Hücrelere Farklılaşması İçin İzolasyonu

Daha fazla video keşfet