Name: Yenidoğan Farelerde Sol Ventrikül Yapısının, Fonksiyonunun ve Koroner Akımın Ekokardiyografik Karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Öğrenin, yenidoğan farelerde sol ventrikül morfolojisi, fonksiyonu ve koroner kan akışının ekokardiyografik değerlendirilmesi yöntemini. Bu protokol, kardiyovasküler hastalıkların erken tanısı ve tedavi stratejilerinin geliştirilmesine olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, bu makaleyi düzenledikleri için MS Chad M. Warren'a (Chicago'daki Illinois Üniversitesi) teşekkür eder. Bu çalışma PCR'ye NIH/NHLBI K01HL155241 ve AHA CDA849387 hibeleri ile desteklenmiştir.

Tüm deneyler, Chicago'daki Illinois Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı. Deneyler için 7 günlük FVB / N fareleri kullanıldı. Protokol fare hazırlığı, ekokardiyografi görüntü alımı ve görüntüleme sonrası hayvan bakımına ayrılmıştır.
1. Fare hazırlığı
<ol><li>7 günlük fareleri üreme kafesinden alın. NOT: Bu erken yaşta, hayvanın cinsiyetini fizik muayene ile belirlemek zordur.</li>
	<li>EKG jelini (bakınız Malzeme Tablosu) ısıtılmış platform elektrot pedlerine yerleştirin. Elektrot aralığını genişletmek ve bantla sabitlemek için elektrot pedlerinin üzerine alüminyum folyo şeritleri (~ 1,5 inç x 0,25 inç) yerleştirin (Şekil 1A). Daha sonra, EKG jelini alüminyum folyo şeritlerin üzerine yerleştirin. NOT: İşlem sırasında alüminyum folyo şeritlerin altındaki jelin kurumadığından emin olun. Bu meydana gelirse, iletkenliği korumak için daha fazla jel ekleyin.</li>
	<li>Bir nitril eldivenden bir parmağınızı kesin ve hem bir taraftaki izofluran/oksijen burun konisini hem de diğer taraftaki fare burnunu örtecek şekilde takın (Şekil 1B).</li>
	<li>Fare yavrusunu izofluran indüksiyon odasına yerleştirin ve% 100 oksijen tarafından tahrik edilen% 2.5 konsantrasyonda izofluran dağıtımına başlayın (Şekil 1C).</li>
	<li>Anestezi uygulanan yavruyu, alüminyum folyo pedlerin üstündeki pençelerle görüntüleme platformunda sırtüstü bir konuma yerleştirin ve bantla sabitleyin. Elektrik devresinin tamamlandığından ve EKG'nin kaydedildiğinden emin olun.</li>
	<li>İzofluran dağıtımını% 100 oksijen tarafından yönlendirilen% 1.5'e düşürün. Kesilen parmağı eldivenden yavrunun burnunun etrafına bantla sabitleyin. Yavrunun pençelerini sıkıştırarak anestezi derinliğini onaylayın.</li>
	<li>Yavrunun üst vücudunun üzerine kalın bir önceden ısıtılmış ultrason jeli tabakası yerleştirin. Ultrason jelini yerinde tutmak için iki gazlı bez rulosu kullanın (Şekil 1D).</li>
	<li>Yavrunun normal vücut sıcaklığını korumak için bir ısıtma lambası kullanın (Şekil 1E). NOT: Mevcut çalışmada yavrunun küçük boyutu nedeniyle vücut sıcaklığını izlemek için rektal prob kullanılmamıştır.</li>
</ol>2. Ekokardiyografik görüntü elde etme ve analizleri
<ol><li>Yetişkin farelerin ekokardiyografi protokolleri 7,8,9'u izleyerek, B modu için 40 MHz'de ve Doppler için 32 MHz'de (kare hızı 233) doğrusal dizi transdüseri ile donatılmış bir ekokardiyografi cihazı kullanarak transtorasik ekokardiyografi yapın (bkz.</li>
	<li>Ekokardiyografik görüntü elde etme sırasında eko dönüştürücüyü yerleştirirken yavrunun göğüs boşluğuna aşırı baskı uygulamaktan kaçının. NOT: Yavrunun küçük boyutu nedeniyle, dönüştürücünün ağırlığı, kalp fonksiyonunun değişmesine veya ölüme neden olabilir.</li>
	<li>Sol ventrikül çıkış yolunun ve sol atriyumun PLAX görünümünü yakalayın.<ol><li>Dönüştürücüyü, indeks işareti yavrunun sağ omzuna doğru olacak şekilde tutucuya yerleştirin.</li>
		<li>Transdüser, jel ile temas edene kadar alçaltın ve sol ventrikül çıkış yolunu B modunda görselleştirin (Şekil 2A).</li>
		<li>Sistol ucundaki sol atriyum (LA) maksimum çapını ölçmek için aort broşürlerinde M-modunu kullanın (Şekil 2B, Tablo 1). Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
	</ol></li>
	<li>Oda boyutlarını, duvar kalınlığını, aort akışını ve pulmoner akışı ölçmek için sol ventrikülün PSAX görünümünü yakalayın.<ol><li>PSAX görünümünü elde etmek için dönüştürücüyü PLAX'in saat yönünde ~90° döndürün.</li>
		<li>Probu papiller kasların seviyesine yerleştirin ve sistol ve diyastol sırasında sol ventrikül iç çaplarını (LVID), interventriküler septum kalınlığını (IVS) ve PW'yi ölçmek için M-modunu kullanın (Şekil 3A, Tablo 1). Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
		<li>Bir hipertrofi indeksi olan RWT'yi, diyastolik oda boyutlarını aşağıdaki gibi kullanarak hesaplayın 3,10: (Diyastol ucunda PW + IVS) / (Diyastol ucunda LVID)</li>
		<li>Transdüseri kalbin tabanına doğru hareket ettirin ve pulmoner arteri görselleştirmek için renkli Doppler'i kullanın. Pulmoner pik akım hızını, pulmoner akım profillerini, pulmoner ejeksiyon süresini (PET) ve pulmoner hızlanma süresini (PAT)11,12 (Şekil 3B) ölçmek için PW Doppler'e basın. Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
		<li>Transdüseri tabana doğru hareket ettirin ve aort akışını görselleştirmek için renkli Doppler kullanın (Şekil 3C). Kan akışını görselleştirmek ve aort ejeksiyon süresini (AET) ölçmek için PW Doppler'i kullanın. Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
		<li>LVID uç diyastol (LVIDd), LVID uç sistol (LVID'ler) ve AET kullanarak miyokard performansının bir göstergesi olan Vcf (circ/sn)13,14'ü aşağıdaki gibi hesaplayın (Tablo 1): (LVIDd - LVID'ler) / (LVIDd x AET)</li>
	</ol></li>
	<li>Apikal dört odacıklı görünümü yakalayın.<ol><li>Platformu Trendelenburg konumuna getirin, sola eğin ve dört odacığı görselleştirmek için probu ayarlayın (Şekil 4A).</li>
		<li>Kan akışını görselleştirmek için renkli Doppler ve mitral akışı kaydetmek için mitral kapak deliğinin ortasındaki mitral kapak broşürlerinin ucunda PW Doppler kullanın. Verileri kaydetmek için Cine Store'a basın.</li>
		<li>Bu görünümde, aşağıdaki parametreleri 2,3,10 hesaplayın (Şekil 4B ve Tablo 1):<ol><li>Diyastolün (E) erken fazındaki kan akışının maksimum hızı olan E / A oranını, diyastolün geç fazındaki (A) kan akışının maksimum hızına göre hesaplayın.</li>
			<li>E dalgası yavaşlama süresini (DT) belirleyin, bu da E zirvesinden erken diyastolün sonuna kadar geçen süredir.</li>
			<li>AG izolvumik gevşeme süresini (IVRT) hesaplayın, bu da aort kapağının kapanmasından mitral kapak açılmasına kadar geçen süredir.</li>
			<li>Mitral kapak kapanmasından aort kapağı açılmasına kadar geçen süre olan LV izovolumik kasılma süresini (IVCT) hesaplayın.</li>
		</ol></li>
		<li>Erken diyastolik dolgudaki (e') ve geç diyastolik dolgudaki (a') pik miyokard gevşeme hızını ve ayrıca pik sistolik miyokard kontraksiyon hızını (s') ölçmek için mitral kapak anulusunun septal tarafında dört odacıklı bir görünümde Doku Doppler'i kullanın (Şekil 4C ve Tablo 1). Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
	</ol></li>
	<li>Sol ön inen koroner arteri incelemek için modifiye edilmiş PLAX görünümünü yakalayın.<ol><li>Modifiye edilmiş bir PLAX görünümü15 kullanın, dönüştürücüyü yanal olarak hareket ettirin ve kirişi ön tarafa doğru eğin (Şekil 5A).</li>
		<li>Probu hareket ettirin ve aorttan oluşan sol ana koroner arterin (LCA) kökenini görselleştirmek için renkli Doppler kullanın. LCA'dan çıkan ve sol ventrikül ön duvarı ile sağ ventrikül çıkış yolu arasında çalışan LAD arterini tanımlayın16,17. Bu pozisyonda, LAD akışını ölçmek için PW Doppler uygulayın (Şekil 5B). Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın.</li>
		<li>Aşağıdaki LAD koroner arter akış parametrelerini hesaplayın (Şekil 5C ve Tablo 2): pik koroner akış hızı (CFV), ortalama CFV ve hız-zaman integrali (VTI). NOT: Tüm bu parametreler %1,5'lik bir bazal izofluran konsantrasyonunda ölçülür (başlangıç).</li>
		<li>İzofluran konsantrasyonunu% 2.5'e yükseltin ve maksimum akışı elde etmek için 5 dakika bekleyin (Şekil 5C). Verileri kaydetmek için Cine Store düğmesine basın. CFR'yi, maksimum akıştaki diyastolik pik CFV'nin başlangıç 18,19,20'deki diyastolik pik CFV'ye oranı olarak hesaplayın (Tablo 2): CFR = diyastolik pik CFV (%2.5) / diyastolik pik CFV (%1.5)</li>
	</ol></li>
</ol>3. Görüntüleme sonrası hayvan izleme ve bakımı
<ol><li>Ekokardiyografik görüntülemeyi tamamladıktan sonra, yavruyu dikkatlice temizleyin ve yaklaşık 2 dakika boyunca anesteziden kurtulmasına izin verin.</li>
	<li>Yavruyu kafesine geri döndürmeden önce, reddedilmeyi veya yamyamlaşmayı önlemek için yavruyu kafes annesinin yatağıyla bulaştırın.</li>
	<li>İşlemden sonra yaklaşık 30 dakika boyunca annenin davranışını gözlemleyin. Agresif davranış gözlenirse, hayvan prosedürü kurallarına uyarak yavruyu ötenazi yapın.</li>
</ol>

<ol><li>Le, V. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+Characterization+of+Postnatal+Development+in+Mice+with+Reduced+Arterial+Elasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Engineering+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic Characterization of Postnatal Development in Mice with Reduced Arterial Elasticity.</a> Cardiovascular Engineering and Technology. 3 (4), 424-438 (2012).</li>
<li>Nagueh, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+Evaluation+of+Left+Ventricular+Diastolic+Function+by+Echocardiography%3A+An+Update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the Evaluation of Left Ventricular Diastolic Function by Echocardiography: An Update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 17 (12), 1321-1360 (2016).</li>
<li>Lang, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+cardiac+chamber+quantification+by+echocardiography+in+adults%3A+an+update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 16 (3), 233-270 (2015).</li>
<li>Chrysant, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+paradigm+in+the+treatment+of+the+cardiovascular+disease+continuum%3A+focus+on+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Hippokratia%22%5BJournal%5D)">A new paradigm in the treatment of the cardiovascular disease continuum: focus on prevention.</a> Hippokratia. 15 (1), 7-11 (2011).</li>
<li>Blom, J. N., Lu, X., Arnold, P., Feng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+neonatal+mice%2C+a+model+of+cardiac+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in neonatal mice, a model of cardiac regeneration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e54100(2016).</li>
<li>Mahmoud, A. I., Porrello, E. R., Kimura, W., Olson, E. N., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+models+for+cardiac+regeneration+in+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocol%22%5BJournal%5D)">Surgical models for cardiac regeneration in neonatal mice.</a> Nature Protocol. 9 (2), 305-311 (2014).</li>
<li>Chowdhury, S. A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modifications+of+sarcoplasmic+reticulum+function+prevent+progression+of+sarcomere-linked+hypertrophic+cardiomyopathy+despite+a+persistent+increase+in+myofilament+calcium+response%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Modifications of sarcoplasmic reticulum function prevent progression of sarcomere-linked hypertrophic cardiomyopathy despite a persistent increase in myofilament calcium response.</a> Frontiers in Physiology. 11, 107(2020).</li>
<li>Batra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+P21-activated+kinase-1+induces+age-dependent+increased+visceral+adiposity+and+cardiac+dysfunction+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Deletion of P21-activated kinase-1 induces age-dependent increased visceral adiposity and cardiac dysfunction in female mice.</a> Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (3), 1337-1349 (2021).</li>
<li>Capote, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B-arrestin-2+signaling+is+important+to+preserve+cardiac+function+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">B-arrestin-2 signaling is important to preserve cardiac function during aging.</a> Frontiers in Physiology. 12, 1302(2021).</li>
<li>Armstrong, W. F., Ryan, T., Feigenbaum, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArmstrong%2C+WF+%22Feigenbaum%27s+Echocardiography.+7th+ed%22">Feigenbaum's Echocardiography. 7th ed</a>. , Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins. (2010).</li>
<li>Su, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+chronic+hypoxia+on+proximal+pulmonary+artery+wave+propagation+and+mechanical+properties+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Impact of chronic hypoxia on proximal pulmonary artery wave propagation and mechanical properties in rats.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 314 (6), 1264-1278 (2018).</li>
<li>Rudski, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+echocardiographic+assessment+of+the+right+heart+in+adults%3A+a+report+from+the+American+Society+of+Echocardiography+endorsed+by+the+European+Association+of+Echocardiography%2C+a+registered+branch+of+the+European+Society+of+Cardiology%2C+and+the+Canadian+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the echocardiographic assessment of the right heart in adults: a report from the American Society of Echocardiography endorsed by the European Association of Echocardiography, a registered branch of the European Society of Cardiology, and the Canadian Society of Echocardiography.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 23 (7), 685-713 (2010).</li>
<li>Wilson, J. R., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+indices+of+left+ventricular+function.+A+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic indices of left ventricular function. A comparison.</a> Chest. 76 (4), 441-447 (1979).</li>
<li>Stypmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+global+left+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of global left ventricular function in mice.</a> Lab Animal. 43 (2), 127-137 (2009).</li>
<li>Wikstrom, J., Gronros, J., Bergstrom, G., Gan, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+morphologic+imaging+of+coronary+atherosclerosis+in+living+mice+using+high-resolution+color+Doppler+echocardiography+and+ultrasound+biomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Functional and morphologic imaging of coronary atherosclerosis in living mice using high-resolution color Doppler echocardiography and ultrasound biomicroscopy.</a> Journal of the American College of Cardiology. 46 (4), 720-727 (2005).</li>
<li>Douglas, P. S., Fiolkoski, J., Berko, B., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+visualization+of+coronary+artery+anatomy+in+the+adult%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic visualization of coronary artery anatomy in the adult.</a> Journal of the American College of Cardiology. 11 (3), 565-571 (1988).</li>
<li>Lambertz, H., Lethen, H., Tries, H. P., Kersting, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+assessment+of+coronary+flow+reserve+-+valuable+functional+information+in+cardiac+workflow%5BTitle%5D)+AND+%22Ultraschall+in+der+Medizin%22%5BJournal%5D)">Non-invasive assessment of coronary flow reserve - valuable functional information in cardiac workflow.</a> Ultraschall in der Medizin. 25 (1), 25-33 (2004).</li>
<li>Lenzarini, F., Di Lascio, N., Stea, F., Kusmic, C., Faita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+isoflurane-induced+vasodilation%3A+A+Doppler+ultrasound+study+of+the+left+coronary+artery+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Time course of isoflurane-induced vasodilation: A Doppler ultrasound study of the left coronary artery in mice.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 42 (4), 999-1009 (2016).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Bergstrom, G., Wandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+imaging+of+coronary+arteries+in+living+mice+using+high-resolution+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Cardiovascular+Journal%22%5BJournal%5D)">Non-invasive imaging of coronary arteries in living mice using high-resolution echocardiography.</a> Scandinavian Cardiovascular Journal. 38 (2), 121-126 (2004).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Fritsche-Danielson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+from+mouse+to+man--from+mechanistic+understanding+to+future+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve from mouse to man--from mechanistic understanding to future interventions.</a> Journal of Cardiovascular Translational Research. 6 (5), 715-728 (2013).</li>
<li>Krzanowski, M., Bodzon, W., Dimitrow, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+all+three+coronary+arteries+by+transthoracic+echocardiography.+An+illustrated+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Imaging of all three coronary arteries by transthoracic echocardiography. An illustrated guide.</a> Cardiovascular Ultrasound. 1, 16(2003).</li>
<li>Constantinides, C., Mean, R., Janssen, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+anesthesia+on+the+cardiovascular+function+of+the+C57BL%2F6+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane anesthesia on the cardiovascular function of the C57BL/6 mouse.</a> ILAR Journal. 52 (3), 21-31 (2011).</li>
<li>Ha, T. W., Oh, B., Kang, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiogram+recordings+in+anesthetized+mice+using+lead+II%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrocardiogram recordings in anesthetized mice using lead II.</a> Journal of Visualized Experiments. (160), e61583(2020).</li>
<li>Chu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+non-invasively+recording+electrocardiograms+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Method for non-invasively recording electrocardiograms in conscious mice.</a> BMC Physiology. 1, 6(2001).</li>
<li>Hartley, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+on+coronary+blood+flow+velocity+in+young%2C+old+and+ApoE%28-%2F-%29+mice+measured+by+Doppler+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane on coronary blood flow velocity in young, old and ApoE(-/-) mice measured by Doppler ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 33 (4), 512-521 (2007).</li>
<li>You, J., Wu, J., Ge, J., Zou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+adenosine+and+isoflurane+for+assessing+the+coronary+flow+reserve+in+mouse+models+of+left+ventricular+pressure+and+volume+overload%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Comparison between adenosine and isoflurane for assessing the coronary flow reserve in mouse models of left ventricular pressure and volume overload.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 303 (10), 1199-1207 (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Koruyucu hekimlik çağında, kardiyovasküler fonksiyondaki değişikliklerin erken değerlendirilmesi, hastalığın başlangıcını belirlemek ve uygun girişimsel tedavileri tasarlamak için gereklidir. Fareler, kardiyak araştırmalarda klinik öncesi modeller olarak giderek daha fazla kullanılmaktadır ve ekokardiyografik çalışmalar tipik olarak genç yetişkin farelerle yürütülmektedir. Bununla birlikte, genetik değişikliklerin veya farmakolojik müdahalelerin kalp hastalıklarının erken evrelerindeki rolünü incelemek için, ekokardiyogr...

Bu protokolün genel amacı, ekokardiyografi kullanarak 7 günlük yenidoğan fare yavrularında kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu ve koroner arter akımını incelemektir. Bu tekniğin geliştirilmesinin ardındaki mantık, kalp hastalığının fare modellerinde koroner akım ve kardiyak fonksiyondaki erken değişiklikleri belirlemektir1. Ekokardiyografinin invaziv olmayan doğası avantajlıdır, çünkü araştırmacıların fizyolojik koşullar altında kardiyovasküler fonksiyonu değerlendirmelerine izin verir ve araştırmacılara kardiyovasküler hastalıkları tedavi etmek için hedefe yönelik tedavilerin incelenmesi için bir tarama aracı sağlar 2,3. Geleneksel olarak, ekokardiyografik çalışmalar genç yetişkin farelerle (4-6 hafta) yapılır; Bununla birlikte, bazı fare modelleri (yani, genetiği değiştirilmiş modeller) zaten bu yaşta patolojik değişiklikler ve kardiyak disfonksiyon sergilemektedir. Bu nedenle, hayvan modellerini kullanan kardiyak araştırmalar, öncelikle kardiyak disfonksiyonu iyileştiren veya tedavi eden terapötik ajanlara odaklanmıştır. Buna karşılık, daha yakın zamanlarda, araştırma çabaları kalp hastalıklarında önleyici tedbirlere ve erken müdahalelere odaklanmak üzere yeniden yönlendirilmiştir4.
Önceki çalışmalar, yenidoğan farelerde miyokard enfarktüsü modellerinde kardiyak fonksiyonu ölçmek için ekokardiyografinin kullanımını tanımlamıştır 5,6; Bununla birlikte, bu çalışmalar koroner akışı ölçemedi ve en önemlisi, büyük olasılıkla elektrot pedlerine ulaşamayan yavruların uzuvlarının küçük boyutu nedeniyle, prosedür sırasında bir elektrokardiyogram (EKG) ve kalp atış hızı (HR) verilerini kaydedemedi. Bu protokolde, elektrot pedlerine ulaşmalarını ve bir EKG devresi oluşturmalarını sağlamak için uzuvlara alüminyum folyo takarak bu sorunun üstesinden geldik. Ayrıca, bu protokol yenidoğan farelerde koroner arter akışını tanımlar ve karakterize eder.
Bu çalışmada yapısal ve fonksiyonel parametreleri ölçmek için parasternal uzun ve kısa eksen görünümlerinde B-modu ve M-modu görüntüler elde edilmiştir 2,3. Morfolojik parametreler arasında sol atriyal boyutlar, sol ventrikül (AG) boyutları, AG duvar kalınlığı, AG kütlesi ve bağıl duvar kalınlığı (RWT) yer aldı. Fonksiyonel parametreler ejeksiyon fraksiyonu (EF), fraksiyonel kısalma (FS), kardiyak debi (CO) ve çevresel lif kısalma hızını (Vcf) içeriyordu. Parasternal kısa eksenli (PSAX) görünümde aort akımını ölçmek ve apikal dört odacıklı görünümde mitral kan akışını ölçmek için pulse wave (PW) Doppler kullanıldı. Apikal dört odacıklı görünüm, mitral kapak anulusunun septal kısmında Doku Doppler'i gerçekleştirmek için de kullanıldı. Sol anterior inen (LAD) koroner arterdeki koroner akım da modifiye parasternal uzun eksenli (PLAX) görünüm kullanılarak incelendi. Koroner akış rezervi (CFR), artmış izofluran konsantrasyonunun neden olduğu bir stres meydan okumasından sonra hesaplandı.
Mevcut protokol, yenidoğan farelerde ekokardiyografik çalışmaların çok erken yaşta yapılabileceğini göstermekte, böylece farklı fare modellerinde kardiyak patolojilerin erken tanınmasına ve LV hemodinamiği ve koroner akım parametrelerinin uzunlamasına takip çalışmalarına olanak sağlamaktadır. Bu teknik, erken postnatal yaşlarda genetik değişikliklerin veya farmakolojik müdahalelerin kardiyak fonksiyondaki rolünü incelemek için kullanılabilir. Dahası, protokol, yaşamın erken dönemlerinde kalp hastalıklarının başlangıcını belirlemek için değerli bir araç sağlar, böylece araştırmacıların farklı fare modellerinde kalp hastalıklarının ilk aşamalarının altında yatan moleküler mekanizmaların kilidini açmalarını sağlar.

<table><tbody><tr><td>Tüy dökücü ajan</td><td>Nair Tüy Dökücü</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elektrot jeli</td><td>Parker Laboratories</td><td>15-60</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Frekanslı Ultrason</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>MedVet</td><td>RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>Doğrusal dizi yüksek frekans dönüştürücü</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>MS550D</td><td></td></tr><tr><td>Fare üreme çifti</td><td>Charles River Laboratories</td><td>FVB/N</td><td>Gerinim Kodu 207</td></tr><tr><td>Ultrason Jeli</td><td>Parker Laboratories</td><td>11-08</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Lab Yazılımı</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td></td><td>Sürüm 5.5.1</td></tr></tbody></table>

yenidoğan farelerde sol ventrikül yapısının, fonksiyonunun ve koroner akımın ekokardiyografik karakterizasyonu

Echocardiographic Characterization of Left Ventricular Structure, Function, and Coronary Flow in Neonate Mice

Ekokardiyografi, kardiyovasküler hastalıkların hayvan modellerinde yapısal ve fonksiyonel parametrelerin değerlendirilmesini sağlayan ve klinik öncesi çalışmalarda potansiyel tedavilerin etkisini değerlendirmek için kullanılan non-invaziv bir prosedürdür. Ekokardiyografik çalışmalar genellikle genç yetişkin farelerde (yani 4-6 haftalıkken) yapılır. Erken yenidoğan kardiyovasküler fonksiyonunun değerlendirilmesi genellikle fare yavrularının küçük boyutu ve buna bağlı teknik zorluklar nedeniyle yapılmaz. En önemli zorluklardan biri, yavruların uzuvlarının kısa uzunluğunun, ekokardiyografi platformundaki elektrotlara ulaşmalarını engellemesidir. Vücut ısısı diğer zorluktur, çünkü yavrular sıcaklıktaki değişikliklere karşı çok hassastır. Bu nedenle, araştırmacıların erken patolojik değişiklikleri tespit etmelerine ve zaman içinde kardiyovasküler hastalığın ilerlemesini incelemelerine yardımcı olmak için küçük fare yavrularında ekokardiyografik çalışmalar yapmak için pratik bir rehber oluşturmak önemlidir. Mevcut çalışma, 7 günlükken fare yavrularında ekokardiyografi yapmak için bir protokol tanımlamaktadır. Yenidoğan farelerde kardiyak morfoloji, fonksiyon ve koroner akımın ekokardiyografik karakterizasyonu da tanımlanmıştır.

Bu çalışmada, kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu ve koroner arter akışını karakterize etmek için 7 günlük fare yavruları kullanılmıştır. Fare kullanımı dikkatle yapılmalı ve fare platformu, Şekil 1'de açıklandığı gibi yavruların küçük boyutlarına göre uyarlanmalıdır. PLAX görünümünün temsili bir görüntüsü Şekil 2A ve Ek Video 1'de gösterilmiştir. Bu görünümde, sol atriyum (LA) çapını ölçmek için M-modu kullanılmıştır (Şekil 2B...

Bu protokol, 7 günlük yenidoğan farelerde sol ventrikül morfolojisinin, fonksiyonunun ve koroner kan akımının ekokardiyografik değerlendirmesini açıklamaktadır.

Yenidoğan Farelerde Sol Ventrikül Yapısının, Fonksiyonunun ve Koroner Akımın Ekokardiyografik Karakterizasyonu

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular ...

Bu protokol, genetik değişikliklerin veya farmakolojik müdahalelerin erken postnatal yaşlarda kardiyak fonksiyon ve koroner akımdaki rolünü incelemek için kullanılabilir. Bu tekniğin temel avantajı, farklı fare modellerinde sol ventrikül hemodinamiği ve koroner akım parametrelerinde kardiyopatolojilerin ve uzunlamasına takip çalışmalarının erken tanınmasıdır. Yenidoğan farelerde ekokardiyografik çalışmalar teknik olarak zordur.Bu protokol, araştırmacıların uygun terapötik önlemleri tasarlamalarına izin verebilecek yenidoğan farelerde kardiyovasküler hastalığın erken başlangıcını incelemek için tasarlanmıştır. EKG jelini ısıtılmış platform elektrot pedlerine yerleştirerek başlayın. Elektrot aralığını genişletmek ve bantla sabitlemek için elektrot pedlerinin üzerine alüminyum folyo şeritler yerleştirin.Daha sonra, EKG jelini alüminyum şeritlerin üzerine yerleştirin. Alüminyum folyo şeritlerin altındaki jelin işlem sırasında kurumadığından emin olun. Bu meydana gelirse, iletkenliği korumak için daha fazla jel ekleyin.Anestezi uygulanan yavruyu görüntüleme platformunda sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve kesilmiş eldiven parmağını yavrunun burnunun etrafına sabitleyin. Pençeleri alüminyum folyo pedlerin üzerine yerleştirin ve bantla sabitleyin. Elektrik devresinin tamamlandığından ve EKG'nin kaydedildiğinden emin olun.Ultrason jelini yerinde tutmak için iki gazlı bez rulosu kullanın. Yavrunun üst vücudunun üzerine kalın bir önceden ısıtılmış ultrason jeli tabakası yerleştirin. Yavrunun normal vücut sıcaklığını korumak için bir ısıtma lambası kullanın.Yetişkin farelerin ekokardiyografi protokollerini takiben B-Modu için 40 megahertz'de ve Doppler için 32 megahertz'de doğrusal dizi transdüseri ile donatılmış bir ekokardiyografi cihazı kullanarak transtorasik ekokardiyografi yapın. Dönüştürücüyü, dizin işareti ile yavrunun sağ omzuna doğru tutucuya yerleştirin. Transdüseri jelle temas edene kadar indirin ve sol ventrikül çıkış yolunu B-Modunda görselleştirin.Ekokardiyografik görüntü elde etme sırasında ekotransdüseri yerleştirirken yavrunun göğüs boşluğuna aşırı baskı uygulamaktan kaçının. Sol ventrikülün, sol ventrikül çıkış yolunun ve sol atriyumun parasternal uzun eksen görünümünü yakalayın. N-sistoldeki sol atriyum maksimum çapını ölçmek için aort broşürlerinde M-Modunu kullanın.Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Parasternal kısa eksen görünümünü elde etmek için dönüştürücüyü parasternal uzun eksenin saat yönünde 90 derece döndürün. Oda boyutlarını, duvar kalınlığını, aort akışını ve pulmoner akışı ölçmek için sol ventrikülün parasternal kısa eksen görünümünü yakalayın.Probu papiller kasların seviyesine yerleştirin ve sistol ve diyastol sırasında sol ventrikül iç çaplarını ve duvar kalınlığını ölçmek için M-Mode'u kullanın. Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Transdüseri kalbin tabanına doğru hareket ettirin ve pulmoner arteri görselleştirmek için Color Doppler'ı kullanın.Pulmoner pik akım hızını, pulmoner akım profillerini, pulmoner ejeksiyon süresini ve pulmoner hızlanma süresini ölçmek için Pulse Wave Doppler'e basın. Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Transdüseri tabana doğru hareket ettirin ve aort akışını görselleştirmek için Color Doppler'ı kullanın.Kan akışını görselleştirmek ve aort ejeksiyon süresini ölçmek için Pulse Wave Doppler'ı kullanın. Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Apikal dört odacıklı görünümü yakalamak için platformu Trendelenburg konumuna getirin, sola eğin ve probu dört odacığı görselleştirecek şekilde ayarlayın.Kan akışını görselleştirmek için Color Doppler'ı ve mitral akışı kaydetmek için mitral kapak deliğinin ortasındaki mitral kapak broşürlerinin ucundaki Pulse Wave Doppler'ı kullanın. Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Erken diyastolik dolgu ve geç diyastolik dolgudaki pik miyokard gevşeme hızını ve ayrıca pik sistolik miyokard kontraksiyon hızını ölçmek için mitral kapak anulusunun septal tarafında Doku Doppler'i dört odacıklı bir görünümde kullanın.Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. Sol ön inen koroner arteri incelemek için modifiye parasternal uzun eksen görünümünü yakalayın. Transdüseri yanal olarak hareket ettirerek modifiye edilmiş bir parasternal uzun eksen görünümü kullanın.Probu hareket ettirin ve aorttan oluşan sol ana koroner arterin kökenini görselleştirmek için Color Doppler'i kullanın. Sol ana koroner arterden oluşan ve sol ventrikül ön duvarı ile sağ ventrikül çıkış yolu arasında çalışan sol ön inen arteri tanımlayın. Bu pozisyonda sol ön inen koroner arter akımını Pulse Wave Doppler'e basarak ölçün.Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin. İzofluran konsantrasyonunu% 2.5'e yükseltin ve maksimum akış elde etmek için beş dakika bekleyin. Cine Store düğmesine basarak verileri kaydedin.Parasternal uzun eksen görünümünde, sol atriyum çapını ölçmek için M-Modu kullanıldı. Parasternal kısa eksen görünümü sol ventrikül kamarası boyutlarını ve duvar kalınlığını, pulmoner akımı ve aort akımını ölçmek için kullanıldı. Apikal dört odacıklı görünüm, mitral kapak boyunca kan akış hızlarının yanı sıra mitral kapak anulusundaki miyokard gevşeme ve kasılma hızlarını incelemek için kullanıldı.Sol ön inen koroner arter akım parametrelerini incelemek için modifiye parasternal uzun eksen görünümü kullanıldı. Pik koroner akım hızının, ortalama koroner akış hızının ve izofluran artışından beş dakika sonra hız / zaman integralinin artmış değerleri, yenidoğan farelerde hiperemiye beklenen yanıtı doğruladı. Yavruların küçük boyutlarından dolayı, normal vücut sıcaklıklarını korumak ve elektropedlere ulaşmak ve bir EKG devresi oluşturmak için uzuvlarına alüminyum folyo şeritleri takmak önemlidir.

echocardiographic-characterization-left-ventricular-structure

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Embriyonik ve yenidoğan farelerde Ölçme sol ventrikül basıncı (LV) tarif edilir. Basınç ultrason eşliğinde LV içine bir sıvı dolu transdüktörüne bağlı bir iğne sokarak ölçülür. Bakım deneysel protokol sırasında normal kalp fonksiyonları korumak için alınması gerekir.

Geç Embriyonik ve Yenidoğan Farelerde Ölçüm Sol Ventrikül Basınç

Bu videoda, bir laboratuvar faresinde ekokardiyografi yapmak için kullanılan bir protokol açıklanmaktadır.

Fare Ekokardiyografisi: Kardiyak Morfolojiyi Değerlendirmek İçin İnvaziv Olmayan Bir Teknik

Bu makalede, sağ ventrikül boyut ve farelerde pulmoner hipertansiyon ekokardiyografik değerlendirilmesi için bir protokol sağlar. Uygulamalar transgenik ve kardiyomiyopati ve pulmoner vasküler hastalığı toksin kaynaklı fare modellerinde fenotip kararlılık ve seri değerlendirmesini içerir.

Farelerde Sağ Kalp Ekokardiyografik Değerlendirilmesi

Sağ ventrikül (RV) işlev bozukluğu, kardiyovasküler hastalığın patojenezine önemli olan, ancak sınırlı yöntemler ile değerlendirilmesi için kullanılabilir. Ultrason görüntülemede son gelişmeler boyuna RV çalışmada non-invaziv bir ve doğru bir seçenek sunar. Bu yazıda, detay RV basıncı aşırı bir fare modeli kullanılarak bir adım-adım ekokardiyografi yöntemi.

Transtorasik Ekokardiyografi ile Pulmoner Arter Konstrüksiyon Fare Modeli sağ ventrikül yapı ve fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Bu protokol, farelerde kalp ve kalp kapakçığı fonksiyonunun kapsamlı fenotiplemesi için ekokardiyografik yaklaşımın ayrıntılı bir tanımını sağlar.

Farelerde Kalp Kapak Hastalıkları Kapsamlı Fenotipik Karakterizasyonu için ekokardiyografik Yaklaşımlar ve Protokoller

Aşağıdaki protokol farelerde Sol Atriyal Hacmi (LAV), Aort (Ao) çapı ve Pulmoner Arter (PA) çapı elde etmek için kullanılan ekokardiyografik görüntülerin elde edilmesi ve analizi için yöntem anlatılmaktadır. Bu teknik kardiyopulmoner fonksiyonun değerlendirmesini sağlayan bir non-invaziv olmayan terminal işlemdir.

Sol Atrium, Aort ve Pulmoner Arter Murin Ekokardiyografi

Ekokardiyografik inceleme farelerde sık sık kullanılır. Bu amaç için pahalı yüksek çözünürlüklü ultrason cihazları geliştirilmiştir. Bu iletişim kuralı histolojik xarakteristikaları analizler ile kardiyak Morfoloji belirlemek için birlikte uygun fiyatlı bir Ekokardiyografik yordamı açıklar.

Kardiyak Morfoloji Ekokardiyografik ve histolojik muayene fare

Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme fetal fare görüntüleme çözümü geliştirdi ve hassas bir non-invaziv kalp geliştirme ve yapısal kusur karakterizasyonu sağlar. Burada özetlenen Protokolü gerçek zamanlı fetal fareler Ekokardiyografi vivo içindegerçekleştirmek için tasarlanmıştır.

Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler

Burada tarif ve farelerde apikal dört odası görünümü elde etmek için iki pozisyon karşılaştırmak. Bu pozisyonlar sağ ventrikül fonksiyonunun ölçülmesini sağlar, karşılaştırılabilir sonuçlar sağlar ve birbirinin yerine kullanılabilir.

Fareyle sağ ventriküler diyastolik parametrelerin ekokardiyografik ölçümü

Bu makalede fetal ekokardiyografi, nekropsi ve Episkopik floresan görüntü yakalama (EFIC) ve ardından üç boyutlu (3D) rekonstrüksiyon kullanılarak yapılan murin konjenital kalp hastalığı (KKH) tanı yöntemleri detaylandırılmıştır.

Fetal Faredeki Yapısal Kalp Kusurlarını Karakterize Etmek İçin Bir Boru Hattı

Öğrenin, yenidoğan farelerde sol ventrikül morfolojisi, fonksiyonu ve koroner kan akışının ekokardiyografik değerlendirilmesi yöntemini. Bu protokol, kardiyovasküler hastalıkların erken tanısı ve tedavi stratejilerinin geliştirilmesine olanak tanır.

Yenidoğan Farelerde Sol Ventrikül Yapısının, Fonksiyonunun ve Koroner Akımın Ekokardiyografik Karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet