Name: Anofellerde Plasmodium falciparum Enfeksiyonunun Tespiti için Standart Membran Besleme Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-05-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: Öğrenin, Anopheles gambiae sivrisineklerinde Plasmodium falciparum enfeksiyonunu tespit etmek için standart membran besleme testi yöntemini. Bu teknik, antimalaryal bileşiklerin iletim engelleme potansiyelini değerlendirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar teşekkür ederProf. Pretoria Üniversitesi Biyokimya, Genetik ve Mikrobiyoloji Bölümü'nden Lyn-Mari Birkholtz ve Dr. Janette Reader, gametosit kültürünün kültürlenmesi ve tedarik edilmesi için Pretoria Üniversitesi Sürdürülebilir Sıtma Kontrolü Enstitüsü. Parazit suşu ikinci bölümden elde edildi (bu yayının bir parçası değil). Bilim ve İnovasyon Bölümü (DSI) ve Ulusal Araştırma Vakfı (NMG); Güney Afrika Araştırma Başkanları Girişimi (UID 64763'ten LK'ya ve UID 84627'den LMB'ye); NMG Uygulama Toplulukları (UID 110666 LMB ve LK'ya); ve Güney Afrika Tıbbi Araştırma Konseyi Stratejik Sağlık İnovasyon Ortaklıkları (SHIP) da DSI'dan gelen fonlar için kabul edilmektedir.

Protokolün bir örneği için Şekil 1'e bakın. İnsan kanının geri çekilmesi ve kullanılması için Pretoria Üniversitesi Sağlık Bilimleri Etik Kurulu'ndan (506/2018) etik izin alınmıştır.
1. Gametosit kültürü
NOT: SMFA'yı kurmadan önce, Pretoria Üniversitesi'nde bir gametosit kültürü hazırlanmıştır (protokolün tamamı için Reader ve ark.22'ye bakınız).
<ol><li>NF54 parazit suşundan evre V gametositlerden oluşan bir gametosit kültürü hazırlayın.</li>
	<li>Kültürün gametositemisinin% 1.5 ila% 2.5 arasında olduğundan, taze kırmızı kan hücrelerinin eklendiği A + erkek serumunda% 50 hematokrit olduğundan emin olun.</li>
	<li>Kültürü farklı şişelere ayırın ve SMFA'yı gerçekleştirmeden 48 saat önce her bir ilgili işlem için her bileşiğin 2 μM'sini ekleyin. Kontrol grubunu tedavi edilmeden bırakın.</li>
	<li>Erkek gametlerin 3: 1 dişi: erkek oranının varlığıyla kamçılanmasını sağlamak için SMFA'yı yürütmeden kısa bir süre önce gametosit kültürünü değerlendirin.</li>
</ol>2. SMFA yoluyla sivrisineklerin yapay enfeksiyonu
NOT: Biyogüvenlik: Enfekte sivrisinekler, sınırlı erişime sahip bir biyogüvenlik seviye 2 (BSL2) tesisinde barındırılmalıdır.
<ol><li>Bir ağız aspiratörü kullanarak, 25 adet beslenmemiş dişi An. gambiae sivrisineğini 350 mL'lik bir besleme kabına yerleştirin. Her tedavi kabı için aynısını yapın ve bardakları kontrol veya tedavi grubu olarak kullanılıp kullanılmadıklarına göre açıkça etiketleyin. Dahil edilen teknik kopyaların sayısına göre tedavi başına bardak sayısını seçin. NOT: 5 ila 7 günlük koloni sivrisinekleri, tipik bir iletim engelleyici bileşik değerlendirmesinde kullanılır. Kan beslemeden önce 3-4 saat veya daha uzun süre aç kalan sivrisinekler, SMFA sırasında kan alımını kolaylaştıracaktır.</li>
	<li>Cam besleyici sistemini su banyosuna bağlayın ve sıcaklığı 37 ° C'de tutun. NOT: Cam besleyici, su banyosunun bağlı olduğu silikon boruya bağlı iki koldan oluşur (Şekil 2). Besleyicinin içi boş yapısı, suyun dolaşmasına ve kanın sıcaklığının korunmasına izin verir.</li>
	<li>bağırsağını (veya sentetik membranı) musluk suyunda durulayarak hazırlayın ve her besleyici için takılı olan parçalara ayırın. Her besleyiciyi örtün ve membranı elastik bir bantla sabitleyin. NOT: Bağırsak için etik bir izne gerek yoktu, çünkü yerel bir kasaplıktan satın alındı ve burada gıda hazırlama için halka satıldı.</li>
	<li>Enfeksiyon kaplarını besleyicilerin altına yerleştirin, membran kabın ağının üzerine serilir.</li>
	<li>Kontrol kaplarının besleyicilerine 1 mL gametosit ile enfekte olmuş kan ve gametosit ile enfekte olmuş kan, karşılık gelen her bir bileşik besleyiciye ve kaba bileşik eklenmiştir.</li>
	<li>Sivrisinekleri, besleyiciler açıkken yaklaşık 40 dakika boyunca beslenmeye bırakın. </li><li><li></li><li></li></ol><ol><li><li></ol><ol><li><li><li></li><li></li><li></li><li></li><li> <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/63546/63546eq01.jpg" style="margin: auto;"> </li><li> <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/63546/63546eq02.jpg" style="margin: auto;"> </li><li></li></ol>

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Bu protokolün başarılı bir şekilde yürütülebilmesi için, sıkıcı ve zahmetli bir süreç olsa bile, her adıma dikkat edilmelidir. En önemli adımlardan biri, SMFA23,24'e başlamadan önce gametosit kültürünün kaliteli olmasını ve doğru erkek:kadın oranına sahip olgun gametositlerden oluşmasını sağlamaktır. SMFA sırasında, erkek gametlerin sivrisineğe girmeden önce patlamasını önlemek için gametosit kültürünü doğru sıcaklıkta tutmak da çok önemlidir. Başarılı bir yapay ...

Dünya çapında en yıkıcı hastalıklardan biri olarak bilinen sıtma, birçok ülkeye, özellikle de Afrika bölgesindekilere hala büyük bir tehdit oluşturmaktadır ve dünya çapındaki vakaların yaklaşık% 95'ine katkıda bulunmaktadır1. Bu hastalığa bir protozoan parazit neden olur ve Anopheles sivrisinek vektörü ile birlikte, bu suçlular insan konakçısına büyük zarar verebilir2. Daha spesifik olarak, Plasmodium parazit cinsinin falciparum türleri, Sahra altı Afrika'daki sıtma vakalarının tahmini% 99'undan sorumludur1. Buna ek olarak, birkaç büyük Anopheles sivrisinek vektörü (An. gambiae Giles, An. arabiensis Patton, An. coluzzii Coetzee & Wilkerson sp.n. ve An. funestus Giles dahil) küresel olarak parazit iletiminin% 95'inden fazlası için suçlanabilir 3,4,5,6,7,8 . İdeal parazit-vektör arkadaşlığının kurulması için, sivrisinek vektörünün parazite duyarlı olması veonu 9 iletebilmeli olmalıdır. Ayrıca, hem vektör hem de parazit, mükemmel enfektif kombinasyonu oluşturmak için fiziksel engellerin üstesinden gelmelidir - sivrisinek vektörü parazit gelişimini sürdürebilmeli ve parazit, konağın savunma mekanizmalarının üstesinden gelme yeteneğine sahip olmalıdır10,11.
P. falciparum parazitinin cinsel aşaması olan gametositler, vektör ve parazit partnerlerinin birbirine bağlanmasında çok önemli bir rol oynar12. Cinsel gelişim in vivo olarak gerçekleşir ve gametositogenez, olgun gametositlerin hareketli erkek mikrogametlere ve dişi makrogametlere farklılaşma sürecini tanımlar13. Sivrisinek içinde gerçekleşen bir başka süreç de kamçılanmadır – erkek gametositin gametlere dönüştüğü ve bir kan yemeği sırasında alınan kırmızı kan hücrelerinden çıktığı süreç11. Eksflagellasyon sürecinin, sivrisinek midgut14'ün ortamındaki olumlu bir değişiklikle arttırılması önerilmektedir. Eksflagellasyondan sonra, erkek ve dişi gametlerin kaynaşmasıyla bir zigot oluşur13. Zigottan, hareketli bir ookinete ortaya çıkar ve kan unundan sivrisinek midgut13'ün epiteline doğru hareket eder. Burada, ookinete olgunlaşır ve sırayla hareketli sporozoitler13,15 üreten bir ookist oluşur. Sporozoitler daha sonra sivrisinek tükürük bezlerine göç eder ve sivrisinek konakçısından bir kan unu aldığından, bu sporozoitler konağın kan dolaşımına enjekte edilir15.
Vektör kontrol stratejileri ile etkili sıtma önleyici ilaçların kullanımını birleştiren sıtma kontrol müdahaleleri, bu hastalıkla mücadelede çok önemli hale gelmiştir15. Parazit ve sivrisinek direncindeki artışla birlikte, yeni sıtma önleyici bileşiklerin tanımlanması için aciliyetartmaktadır 16. Bu nedenle, iletimi bloke eden bileşiklerin in vivo değerlendirilmesi önemlidir16. Bu tür etkili bulaşmayı engelleyen ilaçların geliştirilmesinden sonra, SMFA, bu bileşiklerin Anopheles sivrisinek17,18,19'daki P. falciparum'un cinsel gelişimini inhibe edip etmediğini değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu tahlil, 1970-1980'lerden bu yana, iletim blokajı 20,21'i değerlendirmek için altın standart olarak tanınmıştır. Bu tahlil, özel ekipman gerektiren RT-qPCR gibi diğer tahlillerden daha ucuz bir alternatif sunar. Ayrıca, deneyleri yürütmek için hiçbir hastaya gerek yoktur. Bu tahlil aynı zamanda dişi sivrisineklere gametosit kaynaklı kanın sağlanmasını da içerir, bunlar daha sonra ookist gelişiminin mevcut olup olmadığını değerlendirmek için disseke edilir21. Bu, gametosit miktarının belirlenmesine ve bileşikler22 nedeniyle deforme olmuş ookistlerin tespit edilmesine izin verir. Bir bileşiğin etkili olarak sınıflandırılması için, enfeksiyon inhibisyonunu değerlendirmek için prevalansı (midgutta en az bir ookist barındıran sivrisineklerin oranı) ve sivrisinek midgutundaki ookist sayısı (yoğunluk) değerlendirilmelidir 17,21,22.

<table><tbody><tr><td>Sığır bağırsağı/</td><td>Kasaplık</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bileşiği MMV1581558</td><td>MMV</td><td></td><td>Pandemi müdahale kutusu</td></tr><tr><td>Diseksiyon iğneleri</td><td>WRIM</td><td></td><td>Özel yapım</td></tr><tr><td>şahin tüpü</td><td>Lasec</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cam besleyiciler</td><td>Glastechniek Peter Coelen BV</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Graphpad Prism (8.3.0)</td><td>Graphpad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mercurochrome</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>129-16-8</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop slaytları</td><td>Merch (Sigma-Aldrich)</td><td>S8902</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Cleansafe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PBS tabletleri</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>BP2944</td><td></td></tr><tr><td>Perspex biyogüvenlik kabini</td><td>Wits Üniversitesi</td><td></td><td>Wits Plastik bardaklarda müteahhitler tarafından yapılmıştır</td></tr><tr><td>(350 mL)</td><td>Plastik Arazi</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

anofellerde plasmodium falciparum enfeksiyonunun tespiti için standart membran besleme testi

Standard Membrane Feeding Assay for the Detection of Plasmodium falciparum Infection in Anopheles Mosquito Vectors

Sıtma, dünya çapında en yıkıcı hastalıklardan biri olmaya devam etmektedir ve bugüne kadar, Afrika bölgesi hala dünya çapındaki tüm vakaların% 94'ünden sorumludur. Bu paraziter hastalık bir protozoan parazit, bir Anopheles sivrisinek vektörü ve bir omurgalı konakçı gerektirir. Anopheles cinsi, 60'ı parazitin vektörleri olarak bilinen 500'den fazla türden oluşur. Plasmodium parazit cinsi 250 türden oluşur ve bunların 48'i hastalık bulaşmasında rol oynar. Ayrıca, Plasmodium falciparum paraziti, son yıllarda Sahra altı Afrika'daki sıtma vakalarının tahmini% 99.7'sine katkıda bulunmuştur. 
Gametositler, parazitin cinsel aşamasının bir parçasını oluşturur ve enfekte bir insan konakçısı üzerinde beslendikten sonra dişi sivrisinek tarafından yutulur. Parazitin sivrisinek içindeki daha da gelişmesi, sivrisineğin orta bağırsağındaki elverişli çevresel koşullarla arttırılır. Burada, dişi ve erkek gametlerin kaynaşması gerçekleşir ve hareketli ookinetler ortaya çıkar. Ookinetes, sivrisineğin midgut epiteline girer ve olgun ookinetes, sırayla hareketli sporozoitler üreten ookistler oluşturur. Bu sporozoitler sivrisineğin tükürük bezlerine göç eder ve bir sivrisinek kan unu alırken enjekte edilir. 
İlaç keşfi amacıyla, sivrisinekler standart membran besleme testinde (SMFA) gametosit ile enfekte olmuş kan ile yapay olarak enfekte edildi. Sivrisinek içindeki enfeksiyonu tespit etmek ve / veya sıtma önleyici bileşiklerin etkinliğini değerlendirmek için, dişi sivrisineklerin orta bağırsakları enfeksiyon sonrası çıkarıldı ve merkürokrom ile boyandı. Bu yöntem, ookist prevalansının ve yoğunluğunun doğru belirlenmesi için mikroskop altında ookistlerin görsel tespitini arttırmak için kullanıldı.

<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63546/63546fig01.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63546/63546fig01large.jpg" target="_blank"></a><p class="jove_content biglegend" fo:keep-together.within-page="1...

Standart membran besleme testi (SMFA), potansiyel sıtma önleyici bileşiklerin değerlendirilmesi ve tanımlanması için altın standart olarak kabul edilir. Bu yapay besleme sistemi, bu tür bileşiklerin Plasmodium falciparum parazitinin yoğunluğu ve prevalansı üzerindeki etkilerini daha fazla değerlendirmek için sivrisinekleri enfekte etmek için kullanılır.

Anofellerde Plasmodium falciparum Enfeksiyonunun Tespiti için Standart Membran Besleme Testi

Malaria remains one of the most devastating diseases worldwide and, to date, the African region is still responsible for 94% of all cases worldwide. This ...

Protokol, tedavinin Afrika sıtma vektörlerinin sıtma duyarlılığı üzerindeki etkisini tespit etmemizi sağlar. Örneğin, insandan sivrisineğe bulaşmayı engellemeyi amaçlayan bileşikler. Bu teknik, araştırmacıların toksisite GATE'leri mevcut olmadan önce bile, laboratuvar koşullarında çok sayıda bileşiği değerlendirmelerini sağlar.Midgut diseksiyonları ilk başta zor olabilir, ancak sadece biraz pratik gerektirir. Ayrıca, ookistleri tanımlayabilmek her zaman kolay değildir. İlk olarak, bir ağız aspiratörü kullanarak, 25 adet beslenmemiş dişi Anopheles gambiae sivrisineklerini 350 mililitrelik bir besleme kabına yerleştirin.Kontrol ve tedavi grupları arasında ayrım yapmak için bardakları açıkça etiketleyin. Dahil edilen teknik kopyaların sayısına göre tedavi başına bardak sayısını seçin. Cam besleyici sistemini bir su banyosuna bağlayın ve sıcaklığı 37 santigrat derecede tutun.Daha sonra, bağırsağını veya sentetik zarı musluk suyunda durulayarak ve her besleyici için takılı olan parçalara ayırarak hazırlayın. Her besleyicinin alt kısmını örtün ve membranı elastik bir bantla sabitleyin. Besleme kaplarını enfeksiyon kapları olarak kullanmak için, önce zarı bardakların ağlarının üstünde tutun.Daha sonra enfeksiyon kaplarını besleyicilerin altına yerleştirin. Şimdi, kontrol kaplarının besleyicilerine bir mililitre gametosit ile enfekte olmuş kan ve tedavi kaplarının besleyicilerine bir test bileşiği ile gametosit ile enfekte olmuş kan ekleyin. Sonra sivrisinekleri yaklaşık 40 dakika beslemeye bırakın.Beslendikten sonra, besleyicileri bardaklardan çıkarın, besleyicileri durulayın ve fazla kanı hipoklorit ile tedavi edin. Ardından, tüm sivrisinekleri bir ila iki dakika boyunca buzun üzerine vurun ve şişmiş ve kırmızı karınları arayarak kan yemeği alan sivrisinekleri seçin. Her enfeksiyon kabına alternatif günlerde verilen şekerli suyu% 10'luk bir şekerli su pedi ile değiştirin ve enfeksiyon bardaklarını sekiz ila 10 gün boyunca bir biyogüvenlik odasında inkübe edin.Beslenmeden sekiz ila 10 gün sonra, enfekte sivrisinekleri buzun üzerine yerleştirerek yıkın. Daha sonra, bunları% 70 etanol içeren etiketli tüplere aktarın ve her tedavi grubunda kontrolü ayrı tüplerde tutun. Kontrol ve test gruplarını ayrı tutarak, sivrisinekleri filtre kağıdı ile kaplı etiketli Petri kaplarına aktarın.Uygun şekilde işaretlenmiş bir cam slayta bir damla PBS ekleyin ve filtre kağıdından damlaya bir sivrisinek aktarın. Sivrisinek göğüs kafesini diseksiyon iğnesi ile sabitleyin. Ardından, yedinci karın segmentini forsepslerle çekerek midgutu çıkarın ve yeni bir mikroskop slaytında% 0.1'lik bir merkürokrom damlacığına aktarın.Bağırsağı sekiz ila 10 dakika lekelenmeye bırakın. Ardından lekeli bağırsağa bir kapak kayması yerleştirin ve 20 ila 40 kat büyütmede parlak alan aydınlatması altında görüntüleyin. Kontrol ve her tedavi grubu için midgut başına ookist sayısını kaydedin.Bu çalışmada, MMV1581558 bileşiğinin, dişi Anopheles gambiae sivrisineklerinin orta bağırsaklarındaki Plasmodium falciparum ookistlerinin sayısını kontrole kıyasla anlamlı derecede kısıtladığı bulunmuştur. Kontrol grubunda, midguttaki ookistlerin ortalama prevalansı% 89 idi ve midgut başına ortalama 9.5 ookist yoğunluğa sahipti. Ancak MMV1581558 ile tedavi edilen grupta, ortalama ookist prevalansı% 36 idi ve midgut başına ortalama yoğunluk sadece 1.5 ookist idi.Böylece, MMV1581558 tedavisi, her üç biyolojik replikasyonda da% 58 iletim bloke edici aktivite% 88 ve% 82 iletim azaltıcı aktivite ile sonuçlandı. Sivrisineklerin sağlıklı bir gametosit kültürüyle beslenmesini sağlamak çok önemlidir. Bunlar olgunlaşmamış gametositler ise veya beşinci aşama gametositler değilse, sivrisineklerde enfeksiyon kapma olasılığı sınırlıdır veya imkansızdır.Tahlil görsel bir morfolojik tanımlama yöntemi kullanır, ancak moleküler niceleme testleri kullanılabilir. Bununla birlikte, bu daha maliyetlidir ve kaynak kısıtlı laboratuvarlarda kullanımlarını sınırlayabilir. Bu tekniği yapabilme yeteneğine sahip olmak, sivrisineklerdeki hemen hemen her şey arasındaki sıtma prevalansının ve yoğunluğunun değişimini değerlendirmek için yeni yollar açar.Örneğin, türlerin vektörel kapasitesinin karşılaştırılması.

standard-membrane-feeding-assay-for-detection-plasmodium-falciparum

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Dang virüsü için potansiyel refrakter olarak bir gen tespit edildikten sonra, bu sivrisinek içinde viral enfeksiyonların önlenmesinde rolü için değerlendirilmesi gerekmektedir. Bu protokol, dang sivrisinek enfeksiyonların ölçüde test nasıl göstermektedir. Kültür, membran beslenmesi sivrisinek insan kanı virüs büyüyor ve sivrisinek midgut viral titreleri assaying teknikler gösterilmiştir.

Dang Enfeksiyonlar Sivrisinekler (A. aegypti) ve Enfeksiyon Fenotip belirlenmesi için protokol

Sıtma için potansiyel bir gen refrakter olarak tespit edildikten sonra, bu sivrisinek içinde Plasmodium enfeksiyonları önlemede rolü için değerlendirilmesi gerekmektedir. Bu protokol, sivrisinek Plasmodium enfeksiyonların ölçüde test nasıl göstermektedir. Gametocyte kültür, membran beslenmesi sivrisinek insan kanı hazırlamak ve sivrisinek midgut viral titreleri assaying teknikler gösterilmiştir.

Sivrisinekler ve Enfeksiyon Fenotip belirlenmesi Plasmodium falciparum Enfeksiyonlar Protokol

Bu video, dişi sivrisinekler üzerinde yeni etki modlarına sahip test bileşiklerinin mortalitesini ve doğurganlığını değerlendirmek için bir kanla besleme testini göstermektedir. Bu teknik, dirençli sivrisinek popülasyonunu öldürmek ve hastalığın yayılmasını kontrol etmek için yeni böcek ilacı sınıflarının taranmasına yardımcı olur.

Sivrisinek Besleme Deneyi: Yetişkin Dişi Sivrisineklerin Mortalitesi ve Doğurganlığı Üzerindeki Test Bileşiği Etkilerini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Antikor fonksiyonu Ölçme Plasmodium falciparum sıtma dokunulmazlık anlamanın anahtarıdır. Bu yöntem, uygun bir merozoit saflaştırılmasını ve akış sitometresi ile opsonizasyon bağımlı fagositoz ölçümünü açıklamaktadır.

Yüksek Kapasiteli saflaştırılması<em&gt; Plasmodium falciparum</emOpsonizing Antikor Analizlerde kullanım için&gt; merozoitler

Sıtma bulaştıran sivrisinekler, yalnızca moleküler teknikler kullanılarak tespit edilebilen epidemiyolojik olarak önemli bir dizi özelliğe sahiptir. MALDI-TOF tabanlı bir SNP genotipleme platformu kullanarak, sıtma vektörlerinin birden fazla temel özelliğini (tür, böcek ilacı direnci, parazit enfeksiyonu ve konakçı seçimi) aynı anda tespit etmek için bir test geliştirdik.

Sıtma verici Sivrisinekler için bir çok algılama Deneyi

Deneysel serebral sıtmanın bir fare modelini tarif ediyoruz ve manyetik rezonans görüntüleme kullanılarak inflamatuar ve mikrovasküler patolojinin in vivo olarak nasıl izlenebileceğini gösteriyoruz.

Manyetik Rezonans Görüntüleme Kullanarak Deneysel Serebral Sıtma Bir Modelinde Ödem Gelişimi ve Mikrovasküler Patolojinin İn Vivo Takibi

İnsan sıtma parazitlerine kemirgen sıtma parazitlerinin yaşam döngüsü ve biyolojisinin çarpıcı benzerlikleri nedeniyle, kemirgen sıtma modelleri sıtma araştırmaları için vazgeçilmez hale gelmiştir. Burada, vahşi tip ve transgenik kemirgen sıtma türlerinin fenotipeksi analizinde kullanılan en önemli tekniklerden bazılarını standardize ettik.

Kemirgen Sıtma paraziti Asexual ve cinsel kan aşamaları ve sivrisinek aşamaları phenotypic Analizi

Açıklanan, yumurtaları saymak ve 24 kuyu doku kültürü plakası kullanarak bireysel sivrisineklerin kuluçka oranlarını belirlemek için zaman ve yerden tasarruf sağlayan bir yöntemdir, bu da doğurganlık ve doğurganlık testlerinin ölçeğini ve hızını önemli ölçüde artırabilir.

24 Kuyu Doku Kültürü Plakası (EAgaL Plakaları) kullanılarak Aedes aegypti için Geliştirilmiş Doğurganlık ve Doğurganlık Tahlilleri

Sıtma parazitlerinin sivrisinek aşamaları üzerinde ayrıntılı araştırmalar, etkili bulaşma engelleme stratejileri tasarlamak için kritik öneme sahiptir. Bu protokol, enfeksiyöz gametositlerin etkili bir şekilde nasıl kültüreılacağını ve daha sonra bu gametositlerin sivrisineklere nasıl beslendiğini gösterir P. falciparumsivrisinek aşamaları .

Plazmodium falciparum Yapay Membran Besleme Yoluyla Gametosit Kültürü ve Sivrisinek Enfeksiyonu

Bu protokolün amacı, yapay bir membran besleyici aracılığıyla Aedes aegypti sivrisineklerine hayvansal türevli ve yapay kan yemekleri sunmak ve yutturılan yemek hacmini tam olarak ölçmektir.

Aedes aegypti Sivrisineklerinde Hayvansal Türevli Kan ve Yapay Yemeklerin Beslenmesi ve Ölçülmesi

Bu protokol, sivrisineklerde tükürük bezi sporozoitlerini tespit etmek için sandviç enzime bağlı bir immünosorbent testini tanımlar. Kolayca bulunabilen monoklonal antikorları kullanan yöntem, Plasmodium falciparum veya Plasmodium vivax taşıyan sivrisineklerin uygun maliyetli, yüksek verimli tespitini sağlar. Yöntem, vektör araştırmaları da dahil olmak üzere sıtma bulaşma araştırmaları için uygundur.

Enzime Bağlı İmmünosorbent Testi Kullanılarak Anofel Sivrisineklerinde Plasmodium Sporozoitlerin Tespiti

Öğrenin, Anopheles gambiae sivrisineklerinde Plasmodium falciparum enfeksiyonunu tespit etmek için standart membran besleme testi yöntemini. Bu teknik, antimalaryal bileşiklerin iletim engelleme potansiyelini değerlendirmeye yardımcı olur.

Anofellerde Plasmodium falciparum Enfeksiyonunun Tespiti için Standart Membran Besleme Testi

Daha fazla video keşfet