Elastazın Perivasküler Uygulaması ile İndüklenen Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli
11 Şubat 2022
Mevcut protokol, farelerde infrarenal abdominal aortun adventitisine doğrudan elastaz uygulanması yoluyla elastaz kaynaklı AAA modeli için standartlaştırılmış bir cerrahi yöntemi tanımlamaktadır.
Bu, elastaz kaynaklı abdominal aort anevrizması için standartlaştırılmış bir protokoldür ve bu modeli kullanan çalışmaların tekrarlanabilirliğini ve tutarlılığını büyük ölçüde artıracaktır. Bu teknik, abdominal aort anevrizmasının tutarlı bir indüksiyon oranına sahiptir. Ayrıca, daha güçlü istatistiksel güç ve tekrarlanabilirlik ile sonuçlanacak düşük masraflar ve kısa çalışma süresi avantajına sahiptir.
Aortu kaplayan bağ dokularının çıkarıldığından emin olmanız gerekir, böylece elastaz daha iyi penetrasyon şansına sahip olur, ancak damarlara zarar vermemeye dikkat edin. Başlamak için, anestezi indüksiyonundan 30 dakika önce, deri altından kilogram karprofen başına beş miligram uygulayın. Anestezi uygulanan fareyi, cilt insizyonundan önce ayak parmağı sıkışma yanıtının olmaması açısından test edin.
Orta ve alt karın bölgesinin orta çizgisi boyunca cilt üzerinde 2,5 santimetre uzunlamasına bir kesi yapın. Altta yatan kası yavaşça yukarı çekin ve linea alba boyunca 2,5 santimetre uzunlamasına bir kesi yapın. Bağırsakları ve mideyi farenin sağ tarafına taşımak ve karın boşluğuna erişmek için ıslak pamuklu uçlu aplikatörler kullanın.
Abdominal aort ve inferior vena kavayı kaplayan bağ dokusunu nazikçe çıkarmak için forseps kullanın. Abdominal aortun arka tarafını ve inferior vena kavayı altta yatan kaslardan nazikçe diseke etmek için forseps kullanın. Karın aortunun ve inferior vena kavanın arka tarafına dört santimetre x dört milimetre eldiven şeridi yerleştirin ve şeridi düzeltin.
Şeridi sağ renal arterden yaklaşık 0,5 santimetre uzağa yerleştirin. Şeridin üstüne, abdominal aortun ve inferior vena kavanın arka tarafına üç santimetre x iki milimetre pamuklu ped parçası yerleştirin. Ardından, pamuklu pedi düzeltin.
Elastazı inkübe etmek için, pamuklu pedin üzerindeki aort segmentine 30 mikrolitre domuz pankreas elastazı damlatmak için bir pipet kullanın. Pamuklu pedi sarın ve aort ve inferior vena kavanın etrafına şerit çekin. 10 santimetrelik bir parçayı steril% 0.9 salin ile 10 santimetre gazlı bezle durulayın ve karın üzerine yerleştirin.
30 dakika sonra, çizgiyi ve pamuklu pedi forseps ile çıkarın. Aort ve karın boşluğunu 500 mikrolitre steril% 0.9 salin ile sulayın. Kalan salini emmek için gazlı bez kullanın.
Kas katmanlarını 6-0 emilemeyen monofilament sütür ile yeniden yaklaştırın. Daha sonra, cildi 6-0 emilemeyen monofilament dikişlerde kesilen üç ila dört ile kapatın. Postoperatif 14. günde abdominal aort anevrizması gelişme oranı dişi hayvanlarda %91.7 iken, erkek hayvanlarda görülme oranı %72.7 idi Abdominal aort anevrizması gelişen 19 hayvan arasında kadınlarda ve erkeklerde sırasıyla 1.7 kat ve maksimum abdominal aort çapının 1.6 kat arttığı gözlendi. cerrahi olmayan kontrollerle karşılaştırıldığında.
Ameliyat sonrası 14. günde ameliyat dışı ve cerrahi gruplardan aortun temsili görüntüleri görüntülenir. Bu teknik, üçlü A'nın patofizyolojisini incelemeye ve yeni potansiyel terapötik hedeflerin keşfine yardımcı olmak için potansiyel bir araç olarak hizmet etti.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, farelerde elastaz kullanarak abdominal aort anevrizması (AAA) oluşturmak için standartlaştırılmış bir cerrahi protokol sunmaktadır. Yöntem, yüksek tekrarlanabilirlik ve düşük operasyon maliyetleri sağlayarak AAA çalışmaları için güçlü bir araç sunar.
Temel Çalışma Bileşenleri
Araştırma Alanı
- Kardiyovasküler biyoloji
- Aort hastalıklarının patofizyolojisi
- Farelerde deneysel modelleme
Arka Plan
- Abdominal aortik anevrizma, ciddi morbiditeye yol açan ağır bir tıbbi durumdur.
- Mevcut modeller tekrarlanabilirlik ve maliyet açısından farklılık göstermektedir.
- Standartlaştırılmış bir yaklaşım, araştırma sonuçlarını iyileştirebilir.
Kullanılan Yöntemler
- Porsin pankreatik elastazın aorta adventisyasına doğrudan uygulanması.
- Fare modeli (C57BL/6 veya benzer suşlar).
- Cerrahi diseksiyon teknikleri ve takip değerlendirmeleri.
Ana Sonuçlar
- Postoperatif 14. güne kadar dişi farelerde %91,7 ve erkeklerde %72,7 oranında AAA insidansı görülmüştür.
- Maksimum abdominal aort çapında anlamlı artışlar gözlemlenmiştir.
- Modelin, AAA'nın daha iyi anlaşılması ve terapötik hedef keşfindeki uygulanabilirliğini desteklemektedir.
Sonuçlar
- Bu protokol, AAA indüksiyonu için güvenilir bir yöntemi göstermektedir.
- Kardiyovasküler biyoloji araştırmalarını ve terapötik geliştirmeleri ileri taşıma potansiyeline sahiptir.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama Alanları
Abdominal aortik anevrizma (AAA) için standartlaştırılmış fare modelleri, erken dönem kardiyovasküler hedef keşiflerindeki risklerin azaltılması ve tekrarlanabilir mekanistik çalışmaların yürütülmesi açısından kritik öneme sahiptir. Perivasküler elastaz uygulama protokolü, yüksek tutarlılık ve istatistiksel güç sağlayarak sağlam hipotez testlerini ve çalışmalar arası karşılaştırılabilirliği destekler. Bu model, AAA patogenezi ve terapötik hedef değerlendirmesi için güvenilir bir preklinik sistem sunarak portföy güvenini artırır.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- AAA patofizyolojisinin sorgulanmasına ve hastalığa yol açan mekanizmaların belirlenmesine olanak tanır.
- Aday hedeflerin tekrarlanabilir bir in vivo bağlamda fonksiyonel validasyonunu destekler.
- Erken evre kardiyovasküler programlar için öngörü güvenilirliğini kolaylaştırır.
Tarama ve Assay Geliştirme
- AAA'yı hedefleyen farmakolojik müdahalelerin değerlendirilmesi için valide edilmiş bir in vivo sistem sunar.
- Deney geliştirme için aort çapı değişiklikleri gibi standartlaştırılmış, kantitatif sonuçlar sağlar.
- Preklinik çalışmalarda bileşik taraması için tekrarlanabilirlik ve ölçeklenebilirlik imkanı tanır.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Translasyonel biyobelirteç araştırmaları için hastalıkla ilgili son noktalarla uyumludur.
- Mekanistik keşiften preklinik etkinlik değerlendirmesine kadar olan sürekliliği destekler.
- İnsan AAA'sının temel özelliklerini farelerde modelleyerek biyolojik riski azaltır.
İş Akışı ve Boru Hattı Entegrasyonu
Bu model, mekanistik çalışmalar ile AAA terapötikleri için öncü bileşik tanımlama süreçleri arasında köprü kurarak, keşiften preklinik aşamaya uzanan sürekliliğe entegre olur.
- Keşif Biyolojisi: AAA mekanizmalarının ve hedef rollerinin hipotez odaklı testlerini destekler.
- Tarama: Bileşik etkinliğinin değerlendirilmesi için tekrarlanabilir, kantitatif çıktılar sağlar.
- Analitik: Deneysel gruplar arasında aortik dilatasyon ve insidans oranlarının istatistiksel karşılaştırmasına olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Biyobelirteç ve son nokta geliştirme süreçleri için klinik AAA özellikleri ile uyumu kolaylaştırır.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Kardiyovasküler araştırma ekipleri genelinde uyarlanabilir, standardize ve maliyet etkin bir model sunar.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: AAA araştırmalarında öngörü güvenini artırır ve mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: in vivo çalışmalar için tekrarlanabilirliği, standardizasyonu ve işlem kapasitesini artırır.
- Stratejik Değer: Erken evre kardiyovasküler hatlarda devam/durdur karar kalitesini ve sermaye tahsisini iyileştirir.
- Portföy Etkisi: AAA hedeflerinin ve terapötik adayların riskle uyumlu önceliklendirilmesini sağlar.
Uygulama Hususları
- Tutarlı sonuçlar elde etmek için cerrahi uzmanlık ve standartlaştırılmış prosedür eğitimi gereklidir.
- Hayvan cerrahi suitlerine ve kantitatif görüntüleme veya ölçüm araçlarına erişim gereklidir.
- Çalışmalar arası değişkenliği en aza indirmek için ekipler arası protokollere sıkı bir şekilde bağlı kalınması gerekir.
- Farklı fare soyları veya deneysel son noktalar için adaptasyon gerekebilir.
- Potansiyel kısıtlamalar arasında teknik değişkenlik ve modele özgü patofizyolojik özellikler yer almaktadır.
