Name: Laringeal Transplantasyonu İncelemek için Heterotopik Bir Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-01-13T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 15 s
Description: Öğrenin farelerde heterotopik laringeal transplantasyon prosedürünü. Bu düşük maliyetli model, immunolojik çalışmalar için idealdir ve organ nakli araştırmalarında yeni tedavilere olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Randall Raish'e mükemmel videografi ve düzenleme yardımı için teşekkür ederiz.

Bu araştırma, Mayo Clinic Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) ile uyumlu olarak gerçekleştirilmiştir. BalbC fareleri (10-12 haftalık) donör olarak kullanıldı ve C57 / BL6 fareleri (10-12 haftalık) alıcı olarak kullanıldı, çünkü sırasıyla majör histouyumluluk kompleksleri, H-2Db ve H-2Kb, immünolojik olarak uyumsuzdur ve bu nedenle greftlere karşı bağışıklık tepkisi daha fazla incelenebilir. Ameliyat sırasında kullanılan tüm aletler sterilize edildi (bakınız Ek Şekil S1 ve Ek Şekil S2) ve cerrahi alan IACUC talimatlarına göre protokol boyunca steril tutuldu.
1. Donör cerrahisi ve greft temini
<ol><li>Donöre prosedüre başlamadan 30 dakika önce uzatılmış salımlı buprenorfin (deri altından 3.25 mg / kg vücut ağırlığı) enjekte edin. Fareyi, 1 L / dakO2 akışı ile% 3 izofluranda anestezi indüksiyonu için kemirgen anestezi kutusuna yerleştirin. Hayvan tamamen anestezi altına alındıktan sonra, fareyi tıraş bölgesine aktarın ve anestezinin sürdürülmesi için 1 L / dakO2 akışı ile% 1.5 izofluran uygulayın. Anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamağı ile onaylayın.</li>
	<li>Farenin göğsünü ve boynunu çene hattına kadar tıraş edin ve tüy dökücü krem uygulayın. 30 sn sonra, kremi suyla ıslatılmış steril bir gazlı bezle silin ve fareyi ameliyat bölgesine aktarın.</li>
	<li>Farenin gözlerine göz yağlayıcısı uygulayın. Uygun vücut sıcaklığını sağlamak için fareyi dökümlü bir ek ısıtma yastığına yerleştirin.</li>
	<li>Fareyi hareketsiz hale getirin, ameliyat bölgesini povidon iyot ve alkolle üç kez hazırlayın ve ardından fareyi örtün. NOT: Anestezi derinliğini bir ayak parmağı sıkışmasıyla kontrol edin ve prosedür boyunca anesteziyi% 1.5 izofluran ve 1 L / dakO2 akışında tutun.</li>
	<li>Küçük bir yatay insizyonu suprasternal çentikten daha üstün hale getirin. İnce makas kullanarak, cildi bu kesiden mandibulaya kadar iki taraflı olarak yükseltin. Bilateral tükürük bezlerinin, sternomastoid kasların, digastrik kasların ve sternumun üstün yönünün maruz kalmasına neden olan yamuk şekilli bir cilt segmentini tüketin (Şekil 2A).</li>
	<li>Bilateral tükürük bezlerini, bezden geçen küçük bir damarın görselleştirildiği üst kısımda koter kullanarak tüketin (Şekil 2A). NOT: Bezi çıkarmadan önce damarı koterize etmeye özen gösterilmezse bu adımda belirgin kanamalarla karşılaşılabilir.</li>
	<li>Sternomastoid ve kayış kaslarını açığa çıkarmak için lenfoid ve yağ dokularını lateral olarak yavaşça geri çekin. Bilateral sternomastoid kasları çevreleyen dokulardan diseke edin ve retraktörler kullanarak lateral olarak geri çekin. NOT: Bu manevra, LTE kompleksini kayış kaslarıyla tamamen açığa çıkaracak ve karotis arterlerin diseksiyonu için rahat bir çalışma alanı sağlayacaktır (Şekil 2B).</li>
	<li>Kayış kasları arasında bir orta hat kesisi yapın ve altta yatan tiroid bezine zarar vermemeye ve LTE kompleksinde bırakmamaya dikkat ederek iki taraflı olarak eksize edin. NOT: Bu adımdan sonra bilateral karotis arterler görünür olmalıdır (Şekil 2C).</li>
	<li>Ortak karotis arterleri klavikula seviyesine inferior olarak ve karotis bifurkasyon seviyesine üstün olarak çevresel olarak diseke edin. Vagus sinirini ve internal juguler veni karotis arterlerden diseke edin. Onları tedarik edilen greftlere dahil etmeyin. NOT: Superior tiroid arter, medial olarak seyahat eden bifurkasyondan sadece daha üstün görülebilir. Bu kabı çevreleyen ince fasyayı sağlam bırakın ve çevresel olarak diseke etmeye çalışmayın. Bu damar LTE kompleksine kan akışını sağlar ve transplantasyondan sonra pedikül görevi görür. Bu kabın korunması son derece önemlidir.</li>
	<li>İç ve dış karotis arterleri ligate ve bölebilecek kadar üstün bir şekilde diseke edin. Damarların görselleştirilmesinde zorluk varsa, digastrik kasları yanal olarak geri çekmek için ayrı bir retraktör kullanın. NOT: Superior tiroid artere herhangi bir zarar gelmesini önlemek için eksternal karotis arteri bifurkasyona daha yakın diseke etmekten kaçının. Bu adımda eksternal karotiden dallanan ve internal karotis artere paralel olarak takip eden oksipital arter ile karşılaşılabilir ve daha büyük ve daha derin bulunan internal karotis arter ile karıştırılmamalıdır (Şekil 2D).</li>
	<li>8-0 kullanma naylon sütürler, karotis bifurkasyonundan 2 ila 3 mm daha üstün iç karotis arterleri bağlar. Eksternal karotis arterleri, superior tiroid arterin dallanma noktasından en az 3 mm daha üstün bağlar. NOT: Bu ligasyonlardan sonra, LTE kompleksi superior tiroid arterler aracılığıyla bilateral karotis arterlere pediklenecektir.</li>
	<li>Ortak karotis arterleri sternum seviyesinde bağlayın ve tüm bağlı damarları iki taraflı olarak kesin. Daha fazla diseksiyon sırasında kazara hasar görmesini önlemek için vasküler pedikülleri LTE kompleksinin üstünde tutun. Herhangi bir gaz sızıntısını veya yanlışlıkla anestezi kaybını önlemek için, herhangi bir hava yolu kesiği yapmadan önce hayvanın süresinin dolduğundan emin olun.</li>
	<li>İnfrahyoid kasları hyoid seviyesinde bölün. Hioidden hemen daha düşük bir anterior farengotomi oluşturun. LTE kompleksini üstün bir şekilde serbest bırakmak için insizyonu prevertebral fasyaya kadar taşıyın.</li>
	<li>Trakeayı beşinci trakea halkasının altına aktarın ve LTE kompleksini aşağı yönde serbest bırakmak için insizyonu yemek borusundan prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Trakea ve yemek borusunu altta yatan prevertebral fasyadan inferior ila superior yöne doğru serbest bırakın. NOT: Daha fazla diseksiyon sırasında kazara hasar görmesini önlemek için vasküler pedikülleri LTE kompleksinin üstünde tutun.</li>
	<li>Hioidden hemen daha düşük bir anterior farengotomi oluşturun. LTE kompleksini üstün bir şekilde serbest bırakmak için insizyonu prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Kalan lenfoid veya bağ dokusu bağlantılarını LTE kompleksi ve çevresindeki doku arasında bölün. Grefti çıkarın. NOT: Greft, donör larinks, trakea, tiroid bezleri, paratiroid bezleri, yemek borusu ve laringeal kasları kompozit birim olarak içerir (Şekil 2E).</li>
</ol>2. Greft hazırlama
<ol><li>Tedarik edilen grefti steril bir Petri kabına yerleştirin ve herhangi bir kan pıhtısından kurtulmak için normal salin ile yıkayın. Mikro forseps kullanarak, kanı ve pıhtıları bilateral karotis arterlerden nazikçe sağın. İki taraflı karotis arterleri 1 mm mikrodilatörler kullanarak genişletin.</li>
	<li>30 G künt uçlu bir iğne kullanarak, grefti yıkamak için her karotis artere yaklaşık 2 mL heparinize salin enjekte edin. NOT: Kan ve salin, kontralateral karotis arterden ve küçük serbest damar uçlarından dışarı akarak görülebilir, bu da bozulmamış superior tiroid arterlerini doğrular.</li>
	<li>Adventitiyi arteriyel uçlardan uzaklaştırın, böylece anastomoz için temiz kenarlara sahip olurlar. NOT: Greft heparinize salin içinde bırakılabilir ve alıcıya nakledilmeden önce 3 saate kadar kısa bir mola verilebilir9.</li>
</ol>3. Alıcı cerrahisi ve damarların anastomozu
<ol><li>Alıcı fareyi, anestezi indüksiyonu, tıraş ve cerrahi hazırlık adımlarını takiben donör için tarif edildiği şekilde hazırlayın. Alıcı fareye, ameliyatın başlamasından 30 dakika önce deri altından uzatılmış salımlı analjezik enjekte edin.</li>
	<li>Bir neşter kullanarak, çene hattından sternuma üstün olarak uzanan bir orta hat boyun kesisi yapın. Sol taraftaki cildi yükseltin ve yanal olarak geri çekin.</li>
	<li>Sol tükürük bezini tüketin, daha önce tarif edildiği gibi üst damarları koterize edin. Yağ ve lenfoid dokusunu, görünür damarları düşük sıcaklıkta koter ile bölerek, altta yatan dış juguler venin zarar görmemesine dikkat ederek tüketin (Şekil 3A).</li>
	<li>Dış juguler veni çevresel olarak diseke edin. Anastomoz için damarın en az 5 mm berrak uzunluğunu kullanın. Düşük sıcaklıkta koter veya ligate kullanın ve juguler venden dallanan nispeten büyük damarları bölün.</li>
	<li>Sternomastoid kası diseke edin ve yanal olarak geri çekin. Retraktör ile doğrudan teması önlemek için disseke edilmiş damarı kasın arkasında koruyun.</li>
	<li>Alıcı karotis arterine erişmek için sol kayış kaslarını tüketin. Ortak karotis arteri klavikuladan inferior olarak karotis bifurkasyonuna kadar çevresel olarak diseksiyon yapın (Şekil 3B).</li>
	<li>Arka plan malzemesini dış juguler venin altına geçirin ve çift yaklaşık V3 damar kelepçelerini uygulayın.</li>
	<li>İstenilen venotominin bulunduğu yere dış juguler venin ön duvarından 10-0 naylon bir sütür yerleştirin ve bu sütürü önden çekmek ve damarı çadırlamak için kullanın.</li>
	<li>Uygun boyutta tek yarıklı venotomi oluşturmak ve kesimin venöz duvardan tamamen geçmesini sağlamak için yeterince derin mikromakasla dikişe kesin.</li>
	<li>30 G künt uçlu bir iğne kullanarak, damarın içini heparinize salin ile yıkayın.</li>
	<li>Donör LTE kompleksini alıcı sol karotis arter ile sol eksternal juguler ven arasına yerleştirin. Donör sol karotis arterin serbest ucunu alıcının sol eksternal juguler venine doğru hizalayın ve damarların uçlarını keskin makasla eğimlendirin.</li>
	<li>Dört adet 10-0 naylon kesilmiş sütür kullanarak, donör karotis arteri terk etti ve alıcı uçtan yana bir şekilde dış juguler veni terk etti.</li>
	<li>Arka plan malzemesini alıcı ortak karotis arterinin altına kaydırın ve çift yaklaşan A3 damar kelepçelerini alıcı ortak karotis arterine yerleştirin. Venotomi ile aynı şekilde bir arteriyotomi oluşturun. NOT: Arteriyotominin donör karotis arterin lümeni ile aynı boyutta olduğundan emin olun. Çok büyükse, kelepçeler çıkarıldıktan sonra bol kanama meydana gelecektir. Çok küçükse, greftlere kan akışı engellenecektir.</li>
	<li>Anastomoz donör sağ karotis arteri alıcının sol karotis arterine altı adet 10-0 naylon kesilmiş sütür kullanarak uçtan uca bir şekilde uygulayın. NOT: Damar anastomozu boyunca doğru mikrovasküler tekniğe uyulmalıdır. Arka duvardan geçmek, greftin hayatta kalmasını tehlikeye atan önemli ölçüde daralmış kan akışına neden olur. Damarların küçük boyutu nedeniyle, dikişleri tekrar yapmaya çalışmak çok zordur.</li>
	<li>Venöz taraftaki kelepçeleri çıkarın. Kanama ile karşılaşılırsa, pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulayın.</li>
	<li>Arter üzerindeki kelepçeleri çıkarın ve hemen pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulayın. NOT: Bu adımda genellikle 1 dakika sonra hafif basınçla duran bir miktar kanama beklenir.</li>
	<li>Arter ve damardaki kan akışının bütünlüğünü kontrol edin. NOT: Bozulmamış arteriyel akışta, donör karotis arterin nabzı genellikle görülür ve donör tiroid bezi kızarmış şeffaf renginden orijinal kırmızımsı rengine geri döner. LTE kompleksi üzerindeki küçük kapların kırmızı renklenmesi de gözlemlenebilir.</li>
	<li>Cerrahi alanı heparinize salin ile sulayın ve cilt insizyonunu 5-0 monofilament dikişle koşu şeklinde kapatın. Kesi üzerine antibiyotik merhem veya cilt yapıştırıcısı uygulayın.</li>
	<li>Ameliyat sırasında sıvı kaybını hesaba katmak için deri altından 1 mL sıcak salin enjekte edin.</li>
	<li>Anesteziyi durdurun ve fareyi bir kurtarma kafesine aktarın. Hipotermiyi önlemek için fareyi tamamen uyanık olana kadar bir ısıtma yastığı üzerinde gözlemleyin.</li>
</ol>

<ol><li>Strome, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laryngeal+transplantation+and+40-month+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Laryngeal transplantation and 40-month follow-up.</a> The New England Journal of Medicine. 344 (22), 1676-1679 (2001).</li>
<li>Hilgers, F. J. M., Ackerstaff, A. H., Aaronson, N. K., Schouwenburg, P. F., Zandwijk, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+psychosocial+consequences+of+total+laryngectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Otolaryngology%22%5BJournal%5D)">Physical and psychosocial consequences of total laryngectomy.</a> Clinical Otolaryngology. 15 (5), 421-425 (1990).</li>
<li>Heyes, R., Iarocci, A., Tchoukalova, Y., Lott, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulatory+role+of+mesenchymal+stem+cell+therapy+in+vascularized+composite+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Immunomodulatory role of mesenchymal stem cell therapy in vascularized composite allotransplantation.</a> Journal of Transplantation. 2016, (2016).</li>
<li>Kluyskens, P., Ringoir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follow-up+of+a+human+larynx+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Follow-up of a human larynx transplantation.</a> Laryngoscope. 80 (8), 1244-1250 (1970).</li>
<li>Krishnan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+current+status+of+human+laryngeal+transplantation+in+2017%3A+A+state+of+the+field+review%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">The current status of human laryngeal transplantation in 2017: A state of the field review.</a> Laryngoscope. 127 (8), 1861-1868 (2017).</li>
<li>Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+for+a+vascularized+laryngeal+allograft%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model for a vascularized laryngeal allograft.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), 950-953 (1992).</li>
<li>Lorenz, R. R., Dan, O., Nelson, M., Fritz, M. A., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+laryngeal+transplant+model%3A+technical+advancements+and+a+redefined+rejection+grading+system%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat laryngeal transplant model: technical advancements and a redefined rejection grading system.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 111 (12), 1120-1127 (2002).</li>
<li>Shipchandler, T. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mouse+model+for+studying+laryngeal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">New mouse model for studying laryngeal transplantation.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 118 (6), 465-468 (2009).</li>
<li>Strome, M., Wu, J., Strome, S., Brodsky, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+preservation+techniques+in+a+vascularized+rat+laryngeal+transplant+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">A comparison of preservation techniques in a vascularized rat laryngeal transplant model.</a> The Laryngoscope. 104 (6), 666-668 (1994).</li>
<li>Nocini, R., Molteni, G., Mattiuzzi, C., Lippi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updates+on+larynx+cancer+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Updates on larynx cancer epidemiology.</a> Chinese Journal of Cancer Research. 32 (1), 18-25 (2020).</li>
<li>Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+for+a+vascularized+laryngeal+allograft%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model for a vascularized laryngeal allograft.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), (1992).</li>
<li>Work, W. P., Boles, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Larynx%3A+Replantation+in+the+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Larynx: Replantation in the dog.</a> Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 82 (4), 401-402 (1965).</li>
<li>Birchall, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+for+experimental+revascularized+laryngeal+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Model for experimental revascularized laryngeal allotransplantation.</a> British Journal of Surgery. 89 (11), 1470-1475 (2002).</li>
<li>Nakai, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+laryngeal+transplantation+with+normal+circulation+maintained+by+combination+with+the+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Rat model of laryngeal transplantation with normal circulation maintained by combination with the tongue.</a> Microsurgery. 23 (2), 135-140 (2003).</li>
<li>Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+laryngeal+allograft+survival+using+low-dose+everolimus%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Long-term laryngeal allograft survival using low-dose everolimus.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 142 (1), 72-78 (2010).</li>
<li>Lott, D. G., Russell, J. O., Khariwala, S. S., Dan, O., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ten-month+laryngeal+allograft+survival+with+use+of+pulsed+everolimus+and+anti-%CE%B1%CE%B2+T-cell+receptor+antibody+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Ten-month laryngeal allograft survival with use of pulsed everolimus and anti-αβ T-cell receptor antibody immunosuppression.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 120 (2), 131-136 (2011).</li>
<li>Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoy+NF-%CE%BAB+fortified+immature+dendritic+cells+maintain+laryngeal+allograft+integrity+and+provide+enhancement+of+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Decoy NF-κB fortified immature dendritic cells maintain laryngeal allograft integrity and provide enhancement of regulatory T cells.</a> The Laryngoscope. 120 (1), 44-52 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden finansal çıkarları olmadığını beyan ederler. Egehan Salepci'nin seyahat ve yaşam giderleri Türkiye Bilimsel ve Teknolojik Araştırma Kurumu (TÜBİTAK) tarafından finanse edildi.

Gırtlak kanseri insidansı ve prevalansı son otuz yılda sırasıyla %12 ve %24 oranında artmıştır ve bu hastaların çoğu tedavi için larenjektomi geçirmektedir10. Bu prosedür bir kişinin yaşam kalitesini önemli ölçüde kötüleştirir ve bu nedenle alternatif bir tedavi istenir. Larenksin vaskülarize kompozit allotransplantasyonu, hastanın nefes alma ve konuşma yeteneğini artırabilir; Bununla birlikte, bu tekniğin bu hasta popülasyonu için klinik olarak kullanılabilmesi için hala araştırma yapılması gerek...

Onarılamaz laringeal hasar veya laringeal kanserden muzdarip hastalar için, total larenjektomi genellikle tek seçenek1'dir. Total larenjektomi, hastaları sosyal ve psikolojik sıkıntı yaşamanın yanı sıra kendi başlarına nefes alma ve konuşma yeteneğinden yoksun bırakır2. Total larenjektomiye ihtiyaç duyan laringeal kanserli hastalar laringeal transplantasyon için mükemmel potansiyel adaylardır. Onarılamaz laringeal hasar ortamında insan laringeal transplantasyonu yapılırken, tümör nüks korkusu, kronik rejeksiyon olasılığı ve donör kaynaklı enfeksiyonlar nedeniyle bu hastalarda larenks allotransplantasyonundan kaçınılmaktadır3. İmmünsüpresyon bu endişelerin başlıca nedenidir. Konvansiyonel immünsüpresif tedavi sonrası tümör nüksüne bağlı olarak ilk parsiyel laringeal transplantasyon hastasının dramatik kaybı, laringeal kanserli hastalarda transplantasyon için daha fazla girişimde bulunulmadan önce uygun bir immünsüpresif rejimin tasarlanması gerektiğinin kanıtıdır 4,5.
Transplante edilen bir larinkse karşı konakçı immün yanıtını daha iyi anlamak için, sıçanlarda ilk laringeal transplantasyon modeli 1992 yılında Strome tarafından geliştirilmiş ve cerrahi teknikte iyileştirmeler 2002 yılındayapılmıştır 6,7. Bu model laringeal transplantasyonu incelemek için etkili olmasına rağmen, sıçana özgü immünolojik ajanların eksikliği ve sıçan modelleriyle ilişkili daha yüksek maliyet, 2009 yılında laringeal transplantasyonu incelemek için yeni bir fare modelinin geliştirilmesine yol açmıştır8.
Tanımlanan tekniğin ana uygulaması, laringeal transplantasyonda farklı immünsüpresif ilaç rejimlerini incelemektir. Mevcut immünsüpresif tedavilerin iyileştirilmesi aday havuzunu genişletebilir ve kanser hastalarında güvenli transplantasyona yol açabilir. Bu fare modelinin faydaları, maliyet etkinliği ve immünolojik verilerin ve reaktiflerin geniş kullanılabilirliğidir.
Laringeal transplantasyon için immünsüpresif tedavi rejimleri üzerinde çalışan ekipler, büyük miktarda immünolojik veri toplamak için bu yöntemi kullanabilir ve farklı ilaç rejimleri hızla test edilebilir ve karşılaştırılabilir. Kök hücre enjeksiyonları gibi nakil için bağışıklık tepkisini modüle edebilen diğer potansiyel tedavi yöntemleri de bu model kullanılarak test edilebilir. Son olarak, laringeal transplantasyonun uzun vadeli sistemik etkilerini gözlemlemek için takip süresini uzatarak deneyler yapılabilir.
Burada tarif edilen teknik, heterotopik bir larinks greftine arteriyel ve venöz akış sağlamak için uçtan uca anastomozlar kullanır. Greft, donörün larinks, tiroid bezleri, paratiroid bezleri, trakea ve yemek borusundan oluşan, bilateral karotis arterleri ve pedikülleri sağlam olan laringotrakeoözofageal (LTE) bir komplekstir. Bir donör karotis arter alıcı karotis artere anastomoz edilir ve arteriyel kan akışını sağlarken, diğer donör karotis arter alıcı eksternal juguler vene anastomoz edilir ve venöz kan akışını sağlar (Şekil 1).
Fare modelinde başarı sağlamak için sıçan modelinin cerrahi tekniğinde çeşitli değişiklikler yapılmıştır. Örneğin, anestezi derinliği üzerindeki kontrolü arttırmak ve komplikasyonları azaltmak için enjekte edilebilir bir ajan yerine inhale anestezik bir ajan kullanılmıştır. Sıçanlarda arteriyel-arteriyel anastomozda sürekli dikiş kullanılır; Bununla birlikte, fare damarlarının daha küçük boyutu nedeniyle, bu teknik olarak zordur ve damar lümeninin7 lümeninin daralmasına neden olabilir. Sonuç olarak, kesilen dikişler fare modelinde kullanılır ve damar açıklığının artmasına neden olur. Ek olarak, sıçan modelinde, superior tiroid arter (STA) pedikülü diseke edilir ve görselleştirilir. Farelerde STA'nın daha küçük boyutu göz önüne alındığında, bu diseksiyon STA'nın zarar görmesine ve hatta transeksiyonuna neden olabilir. Sonuç olarak, fare modelinde disseke edilmez. Bunun yerine, STA'nın bozulmadan kalmasını sağlamak için yakındaki fasyalar korunur.
Bu tekniğin başlıca potansiyel tuzakları arasında donör LTE kompleks pediküllerine zarar vermek, yanlış boyutta bir arteriyotomi veya venotomi yapmak, anastomoz bölgelerinde damar tıkanıklığı veya anastomoz bölgelerinde kanamaya neden olabilecek boşluklar bırakmak sayılabilir. Bu yanlış adımları önlemek için, STA pedikülünün etrafında bir manşet doku bırakarak donör grefti tedarik ederken dikkatli olunmalıdır. Arteriyotomi ve venotomi, kan akışına izin verecek kadar büyük, ancak sızıntıyı önleyecek kadar küçük olmalıdır. Anastomozların herhangi bir boşluğu kapatması için uygun sayıda dikiş kullanılmalıdır, ancak damarları tıkamak için çok fazla olmamalıdır.
Mikrocerrahi tekniklere aşinalık kazanılırsa bu işlem yaklaşık 3 saat içinde gerçekleştirilebilir. Bu laringeal transplantasyon modeli farelerde güvenilir bir şekilde gerçekleştirilebilir ve vaskülarize kompozit allotransplantasyon sonrası konakçı immün yanıtını incelemek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td># 1 Ataç</td><td>Zımbalar</td><td>OP-7404</td><td>Klipsler, ekartör olarak kullanılmak üzere manuel olarak şekillendirilmiştir</td></tr><tr><td>1 cc İnsülin Şırıngaları&nbsp;</td><td>BD&nbsp;</td><td>329412</td><td>27 G 5/8</td></tr><tr><td>10-0 Ethilon Naylon Sütür</td><td>Ethicon</td><td>2870G</td><td></td></tr><tr><td>25 G Hassas Kayar İğne</td><td>BD&nbsp;</td><td>305125</td><td>3 mL'de 1</td></tr><tr><td>Luer-Lok Uçlu Şırınga</td><td>BD&nbsp;</td><td></td><td></td>309657</tr><tr><td>30 G Steril Standart Künt İğneler</td><td>Cellink</td><td>NZ5300505001</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Monokril Sütür</td><td>Ethicon</td><td>Y822G</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Ethilon Naylon Sütür</td><td>Ethicon</td><td>2815G</td><td></td></tr><tr><td>Adson Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11027-12</td><td>Düz, 1 x 2 diş</td></tr><tr><td>Adventitia makas</td><td>S & T</td><td>SAS-10</td><td>19 mm, 10 cm, düz</td></tr><tr><td>Açılı Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>00109-11</td><td>45/11 cm</td></tr><tr><td>Yapay Gözyaşı Kayganlaştırıcı Oftalmik Merhem</td><td>Akorn Hayvan Sağlığı</td><td>59399-162-35</td><td></td></tr><tr><td>Yara bandı kumaş parmak ucu</td><td>Cardinal Healthcare</td><td>299399</td><td></td></tr><tr><td>Betadine Solüsyonu Swabsticks Purdue</td><td>Ürünleri</td><td>67618-153-01</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex Enjeksiyon</td><td>CIII</td><td>12495-0757-1</td><td>0.3 mg / mL</td></tr><tr><td>Kelepçe kilitsiz forseps uygulama</td><td>Doğru Cerrahi ve Bilimsel Aletler</td><td>ASSI. CAF5</td><td>14 cm</td></tr><tr><td>Pamuklu Çubuklar</td><td>Puritan</td><td>10806-001-PK</td><td></td></tr><tr><td>DeBakey forseps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dermabond Mini</td><td>Cardinal Healthcare</td><td>315999</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Tahtaları</td><td>Mopec</td><td>22-444-314</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Steril Tek Kullanımlık Petri Kabı&nbsp;</td><td>Corning</td><td>25373-041</td><td>35 mm</td></tr><tr><td>İnce Makaslar</td><td>İnce Bilim Aletleri</td><td>14029-10</td><td>Kavisli Keskin-Küt 10 cm</td></tr><tr><td>Altın A5 2 Hızlı Bıçak Kesme Makinesi&nbsp;</td><td>Oster</td><td>008OST-78005-140#</td><td>10</td></tr><tr><td>Tüy Dökücü Hassas Formül</td><td>Nair</td><td>2260000033</td><td></td></tr><tr><td>Heparin&nbsp;</td><td>Meitheal İlaç</td><td>71288-4O2-10</td><td>10 mL başına 10.000 USP birimi</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal Sağlık</td><td>66794-013-25</td><td></td></tr><tr><td>Düşük Sıcaklık Mikro İnce Uçlu Kotery</td><td>Bovie Medical</td><td>AA90</td><td></td></tr><tr><td>Mercian Görünürlük Arka Plan Malzemesi</td><td>Synovis Mikro Şirketler</td><td>VB3</td><td>Yeşil</td></tr><tr><td>Mikrovasküler Yaklaşım Kelepçesi Çerçevesiz</td><td>Doğru Cerrahi ve Amp; Bilimsel Aletler</td><td>ASSI. ABB11V</td><td>0.4-1 mm Damar Çapı</td></tr><tr><td>Fare yüz maskesi kiti</td><td>Xenotec</td><td>XRK-S</td><td>Küçük</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>S & T</td><td>C-14 W</td><td>5,5", 8 mm, 0,4 mm</td></tr><tr><td>Press n' Seal</td><td>Glad</td><td>70441</td><td></td></tr><tr><td>Neşter</td><td>Braun</td><td>BA210</td><td>10 bıçaklı</td></tr><tr><td>Tek Mini Damar Kelepçesi</td><td>Doğru Cerrahi ve Bilimsel Aletler</td><td>ASSI. ABB11M.31</td> <td>(8 mm), 3 x 1 mm Rnd. Bl., Siyah Çift</td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td></td></tr><tr><td>Steril Alkol Hazırlama Pedleri</td><td>Fisherbrand</td><td>06-669-62</td><td></td></tr><tr><td>Steril Tek Kullanımlık Örtü Levhaları</td><td>Dynarex</td><td>DYN4410-CASE</td><td></td></tr><tr><td>Steril Gazlı Bez Pedleri</td><td>Dukal</td><td>1212</td><td></td></tr><tr><td>Steril Salin&nbsp;</td><td>Hospira</td><td>236173</td><td>NaCl %0.9</td></tr> <tr><td>Steril Cerrahi Eldiven</td><td>Gammex</td><td>851_A</td><td></td></tr><tr><td>Düz Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>00108-11</td><td>11 cm</td></tr><tr><td>Doku forseps</td><td>Doğru Cerrahi ve Bilimsel Aletler</td><td>ASSI. JFLP3</td><td>13,5 cm, 8 mm, 0,3 mm</td></tr><tr><td>Vannas Desenli Makas&nbsp;</td><td>Doğru Cerrahi & Bilimsel Aletler</td><td>ASSI. SDC15RV</td><td>15 cm, 8 mm, kavisli 7mm bıçak</td></tr><tr><td>Vannas Yaylı Makas</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>15000-10</td><td>3 mm kesici kenar, kavisli</td></tr><tr><td>Damar Dilatör Ucu&nbsp;</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>00126-11</td><td>Çap 0,1 mm/Açılı 10/11 cm</td></tr><tr><td>Damar Genişletici, Klasik seri</td><td>S& T</td><td>D-5a.3 G</td><td>9 mm, 0,3 mm, açılı 10</td></tr></tbody></table>

laringeal transplantasyonu İncelemek için heterotopik bir fare modeli

A Heterotopic Mouse Model for Studying Laryngeal Transplantation

Laringeal heterotopik transplantasyon, teknik olarak zorlu bir prosedür olmasına rağmen, diğer hayvan modellerine kıyasla daha fazla bilimsel analiz ve maliyet avantajı sunmaktadır. İlk olarak 2009 yılında Shipchandler ve ark. tarafından tanımlanmasına rağmen, bu teknik, muhtemelen mikrocerrahi tekniği öğrenmedeki zorluklar ve ustalaşmak için gereken zaman nedeniyle yaygın olarak kullanılmamaktadır. Bu yazıda, bu tekniğin etkili kullanımını teşvik etmek için cerrahi adımlar ve kaçınılması gereken potansiyel tuzaklar ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.
Bu modelde, donör larinksin bilateral karotis arterleri, alıcı karotis artere ve eksternal juguler vene anastomoz edilerek greft yoluyla kan akışına izin verilir. Greft bilateral karotis arterlerde kan dolgusunun görselleştirilmesi, greftin tiroid bezlerinin kızarması ve greftteki mikro damarlardan kanama ile kan akımı intraoperatif olarak doğrulanabilir. Başarı için kritik unsurlar arasında greft damarlarının hassas bir şekilde korunması, doğru boyutta arteriyotomi ve venotominin yapılması ve damarların sızıntı olmadan güvence altına alınması ve tıkanıklığın önlenmesi için arteriyel-arteriyel ve arteriyel-venöz anastomozlarda uygun sayıda dikiş kullanılması yer almaktadır. 
Herkes yeterli eğitimle bu modelde yetkin hale gelebilir ve prosedürü yaklaşık 3 saat içinde gerçekleştirebilir. Başarılı bir şekilde gerçekleştirilirse, bu model immünolojik çalışmaların kolaylıkla ve düşük maliyetle yapılmasını sağlar.

Başarılı transplantasyonun onaylanması Yukarıda açıklanan protokolü kullanarak, damar kelepçelerini çıkardıktan sonra donör karotis arterin nabzını gözlemleyerek LTE kompleksine kan akışını değerlendirmek mümkündür. Nabız tipik olarak görülebilir ve donör arterin hemen kırmızı renklenmesi aktif kan akışını doğrular (Şekil 4A). Anastomoz etkili değilse, arterin nabzı olmaz, kısmen çökmüş görünür ve soluk renkli olur (Şekil 4B).
<p class="j...

Bu makalenin amacı, farelerde heterotopik laringeal transplantasyon gerçekleştirmek için gereken mikrocerrahi adımları tanımlamaktır. Bu fare modelinin laringeal transplantasyonun diğer hayvan modellerine kıyasla avantajları, maliyet etkinliği ve immünolojik tahlillerin ve verilerin mevcudiyetidir.

Laringeal Transplantasyonu İncelemek için Heterotopik Bir Fare Modeli

Laryngeal heterotopic transplantation, although a technically challenging procedure, offers more scientific analysis and cost benefits compared to other ...

Laringeal transplantasyon modelleri farelerde ve sıçanlarda tanımlanmıştır. Kıdemli alter'in önceki çalışmaları, anastomoz için donör karotis arterleri kullanarak daha etkili bir yöntem geliştirmeye odaklandı ve üstün tiroid arterlerini diseke etme ihtiyacını ortadan kaldırdı. Bu videoda, bu prosedürü farelerde açıkladık.Bu fare laringeal transplantasyon modeli, immünolojik çalışmaların kolaylıkla ve düşük maliyetle yapılmasını sağlar. Bir sıçan modeline kıyasla damarların daha küçük boyutu nedeniyle teknik olarak daha zor olsa da, cerrahi adımlara aşinalık elde edilirse bu prosedür yaklaşık üç saat içinde gerçekleştirilebilir. Hayvan tamamen anestezi altına alındıktan sonra, fareyi, anestezinin sürdürülmesi için dakikada bir litre oksijen akışına sahip% 1.5 izofluranın% 1.5 izofluran'ın bir yüz maskesi aracılığıyla verileceği tıraş alanına aktarın.Anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamağı ile onaylayın. Farenin göğsünü ve boynunu çene çizgisine kadar tıraş edin ve epilasyon kremi uygulayın. Ve 30 saniye sonra, kremi silin ve fareyi ameliyat bölgesine aktarın.Fareyi hareketsiz hale getirin ve ameliyat bölgesini povidon-iyot ve alkolle üç kez hazırlayın, ardından fareyi örtün. Küçük bir yatay insizyonu suprasternal çentikten daha üstün hale getirin. İnce makas kullanarak, cildi bu kesiden mandibulaya kadar iki taraflı olarak yükseltin ve yamuk şekilli bir cilt segmentini çıkarın.Bilateral tükürük bezlerini, bezden geçen küçük bir damarın görselleştirildiği üst kısımda koter kullanarak tüketin. Bilateral sternokleidomastoid kasları çevre dokulardan diseke edin ve lateral olarak geri çekin. Kayış kasları üzerinde bir orta hat kesisi yapın ve altta yatan tiroid bezine zarar vermemeye dikkat ederek ve laringotrakeal özofagus veya LTE kompleksi üzerinde bırakarak iki taraflı olarak eksize edin.Bu adımdan sonra bilateral karotis arterler görülebilir. Ortak karotis arterleri klavikula seviyesine inferior olarak ve karotis bifurkasyon seviyesine üstün olarak çevresel olarak diseke edin. Vagus siniri ve internal juguler ven karotis arterlerden arındırılmış olarak diseke edilir ve elde edilen greftte yer almaz.İç ve dış karotis arterleri ligate ve bölebilecek kadar üstün bir şekilde diseke edin. 10-0 naylon sütür kullanarak, iç karotis arterleri karotis bifurkasyonundan iki ila üç milimetre daha üstün olarak yaslandırın. Dış karotis arterleri, superior tiroid arterin dallanma noktasından en az üç milimetre daha üstün bir şekilde bağlayın ve ortak karotis arterleri sternum seviyesinde bağlayın.Tüm ligate kapları iki taraflı olarak kesin. Daha fazla diseksiyon sırasında kazara hasar görmesini önlemek için vasküler pedikülleri LTE kompleksinin üstünde tutun. Herhangi bir gaz sızıntısını veya yanlışlıkla anestezi kaybını önlemek için, herhangi bir hava yolu kesiği yapmadan önce hayvanın süresinin dolduğundan emin olun.Trakeayı beşinci trakea halkasının altına aktarın ve LTE kompleksini aşağı yönde serbest bırakmak için insizyonu yemek borusundan prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Trakea ve yemek borusunu altta yatan prevertebral fasyadan inferiordan superior'a doğru serbest bırakın. Hioidden hemen daha düşük bir anterior farenjektomi oluşturun.LTE kompleksini üstün bir şekilde serbest bırakmak için insizyonu prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Kalan lenfoid veya bağ dokusu bağlantılarını LTE kompleksi ve çevresindeki doku arasında bölün. Ve son olarak, grefti çıkarın.Tedarik edilen grefti steril bir Petri kabına yerleştirin ve herhangi bir kan pıhtısından kurtulmak için normal salin ile yıkayın. Bir milimetre mikro dilatörler kullanarak bilateral karotis arterleri genişletin. 30 gauge künt uçlu bir iğne kullanarak, grefti yıkamak için her karotis artere yaklaşık iki mililitre heparinize salin enjekte edin.Kan ve salin, kontralateral karotis arterden ve sağlam superior tiroid arterlerini doğrulayan küçük serbest damar uçlarından dışarı akarak görülecektir. Greft heparinize salin içinde bırakılabilir ve alıcıya nakledilmeden önce üç saate kadar kısa bir mola verilebilir. Alıcı fareyi, anestezi indüksiyonu, tıraş ve cerrahi hazırlık adımlarını takiben donör için tarif edilenle aynı şekilde hazırlayın.Alıcı fareye, ameliyatın başlamasından 30 dakika önce deri altından uzatılmış salınımlı analjezik enjekte edin. Bir neşter kullanarak, çene hattından sternuma üstün olarak uzanan bir orta hat boyun kesisi yapın. Sol taraftaki cildi yükseltin ve yanal olarak geri çekin.Sol tükürük bezini daha önce tarif edildiği gibi üst damarları koterize ederek tüketin. Düşük sıcaklıktaki koter ile görünür damarları bölerek yağ ve lenfoid dokuyu tüketin. Altta yatan dış juguler venin zarar görmemesine dikkat etmek.Dış juguler veni çevresel olarak diseke edin. Anastomoz için damarın en az beş milimetre berrak uzunluğunu kullanın. Sternomastoid kası diseke edin ve yanal olarak geri çekin.Ortak karotis arteri klavikuladan inferior olarak karotis bifurkasyonuna kadar çevresel olarak diseksiyon yapın. Arka plan malzemesini dış juguler venin altına geçirin ve çift yaklaşan B-3 damar kelepçelerini uygulayın. İstenilen monotominin bulunduğu yere dış juguler venin ön duvarından 10-0 naylon bir sütür yerleştirin ve damarı ön niyetle çekmek için sütürü kullanın.Uygun boyutta tek yarık venotominin oluşturulmasını kolaylaştırmak ve kesimin venöz duvardan tamamen geçmesini sağlamak için mikro makasla dikişin hemen derinliklerinde kesin. 30 gauge künt uçlu bir iğne kullanarak, damarın içini heparinize salin ile yıkayın. Donör LTE kompleksini alıcı sol karotis arter ile sol eksternal juguler ven arasına yerleştirin.Donör sol karotis arterin serbest ucunu alıcının sol eksternal juguler venine doğru hizalayın ve keskin makas kullanarak ucu eğimlendirin. Dört adet 10-0 naylon kesilmiş sütür kullanarak, donör karotis arteri terk etti ve alıcı uçtan yana bir şekilde dış juguler veni terk etti. Arka plan malzemesini alıcının ortak karotis arterinin altına kaydırın ve çift yaklaşan A-3 damar kelepçelerini uygulayın.Venotomi ile aynı şekilde bir arteriyotomi oluşturun. Donör sağ karotis arteri alıcı sol karotis artere uçtan uca bir şekilde anastomoz eder. 10-0 naylon ile altı kesilmiş dikiş kullanmak arteriyel anastomoz için idealdir.Venöz taraftaki kelepçeleri çıkarın. Kanama ile karşılaşılırsa, pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulanır. Arter üzerindeki kelepçeleri çıkarın ve hemen pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulayın.Genellikle hafif bir basınçla bir dakika sonra duran adımda bir miktar kanama beklenir. Damardaki arterdeki kan akışının bütünlüğünü kontrol edin. Bozulmamış arteriyel akışla, donör karotis arterin nabzı genellikle görülür ve donör tiroid bezi kızarmış şeffaf renginden orijinal kırmızımsı rengine geri döner.LTE kompleksi üzerindeki küçük kapların kırmızı renklenmesi de gözlemlenebilir. Cilt kesisini 5-0 monofilament dikişle koşu şeklinde kapatın. Kesi üzerine bir cilt yapıştırıcısı uygulayın.Ameliyat sırasında sıvı kaybını hesaba katmak için deri altından bir mililitre ılık salin enjekte edin. Anesteziyi durdurun ve fareyi bir kurtarma kafesine aktarın. Hipotermiyi önlemek için fareyi tamamen uyanık olana kadar bir ısıtma yastığı üzerinde gözlemleyin.Cerrahi başarı, damar kelepçeleri çıkarıldıktan hemen sonra değerlendirilebilir. Şekil A, başarılı bir ameliyatı temsil eder, çünkü kan akışı donör larinksin karotis arterlerinde görselleştirilebilir ve tiroid bezleri kırmızıya döner. Şekil B, başarısız bir ameliyatı temsil etmektedir, çünkü donör larinksin karotis arterlerinde kan akışı görselleştirilemez ve tiroid bezleri soluk kalır.İmmünsüpresyonun yokluğunda 15 gün sonra, çoğu alıcının nakil için kan akışı yoktur. Arterin açıklığı, çevredeki alıcı dokudan arındırılmış laringotrakeal kompleksin diseksiyonu ve uçtan yana anastomozun görselleştirilmesiyle makroskopik olarak değerlendirilebilir. Teşekkürler. Bu videoyu izledikten sonra, bir laringeal trakeoözofageal kompleksin yaklaşık üç saat içinde bir fareden diğerine heterotopik olarak nasıl nakledileceğini anlamalısınız.Bu uygulanabilir ve nispeten düşük maliyetli model, bağışıklık sisteminin laringotrakeal kompleksinin reddedilmesindeki rolünü incelemede önemli bir potansiyel sunmakta ve böylece organ transplantasyonunda yeni tedaviler için potansiyel sunmaktadır.

a-heterotopic-mouse-model-for-studying-laryngeal-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Bu video gösterileri ve farelerde obliteratif hava yolu hastalığı (OAD) geliştirilmesi, heterotopik ve ortotopik trakeal nakli modeli incelemek için iki deneysel modeller karşılaştırır.

Obliteratif Havayolu Hastalığı Geliştirme Eğitim Modeli olarak kullanılan Farelerde Heterotopik ve Ortotopik Trakeal Nakli

Obliteratif bronşiolit akciğer transplantasyonu uzun süreli yaşam için anahtar engel ve sağlam bir preklinik model eksikliği obliteratif bronşiolit immünopatogenezi inceleyerek engellemektedir. Diğer solid organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer transplantasyonu vardır ancak son zamanlarda geliştirilmiştir. Burada fare ortotopik tek-akciğer transplantasyonu sonrası bağımsız geliştirilen obliteratif bronşiolit modeli gösterilmektedir.

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Greft stenoz mühendislik doku hava yolu değiştirme kritik bir engel teşkil etmektedir. Stenoz temel hücresel mekanizmaları araştırmak için bir fare modeli doku Mühendisliği trakeal değiştirme numaralı seribaşı kemik iliği mononükleer hücreler (BM-MNC) kullanmaktadır. Burada, iskele imalatı, BM-MNC yalıtım, greft tohum ve implantasyon dahil olmak üzere bizim Protokolü ayrıntılı.

Tohum ve bir biyosentetik doku Mühendisliği trakeal greft bir fare modeli implantasyonu

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Murin intrapulmoner trakeal transplantasyon (IPTT) modeli, akciğer transplantasyonu sonrası obliteratif hava yolu hastalığını (OAD) incelemek için değerlidir. Allotransplantasyon sonrası hava yolu obliterasyonunda akciğere özgü immünolojik ve anjiyojenik davranış hakkında yüksek tekrarlanabilirlik ile bilgi sunar. Burada, IPTT prosedürünü ve beklenen sonuçlarını açıklıyoruz.

Murin İntrapulmoner Trakeal Transplantasyon: Akciğer Transplantasyonu Sonrası Obliteratif Hava Yolu Hastalığının Araştırılmasında Bir Model

Bu protokol, farelerde manşetsiz, dikiş bazlı servikal heterotopik kalp nakli tekniği sunar; bu teknik, donör-spesifik bağışıklık toleransını fizyolojik koşullarda minimum yabancı madde müdahalesiyle değerlendirmek için ikinci heterotopik kalp greftinin güvenilir şekilde yerleştirilmesini sağlamaktadır.

Farelerde Donör-Spesifik Bağışıklık Toleransını Değerlendirmek İçin İkincil Heterotopik Kalp Nakli için Manşetsiz Dikiş Tabanlı Servikal Model

Heterotopik arka uzuvdan boyuna vaskülerize kompozit allotransplantasyonlu tekrarlanabilir bir fare modeli sunuyoruz. Bu süpermikrocerrahi protokol, 0,3-0,5 mm damar anastomozlarını içerir ve naylon filament yönlendirmesi ile venöz kelepçeleme ile birleştirilir. Vaskülerize kompozit allotransplantasyonda tolerans, iskemi-reperfüzyon hasarı ve immünolojik mekanizmalar üzerine translasyonel çalışmalar için güvenilir bir platform sağlar.

Farede Heterotopik Arka Uzuvdan Boyuna Nakil: Vaskülerize Kompozit Allotransplantasyonun Süpermikrocerrahi Modeli

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Öğrenin farelerde heterotopik laringeal transplantasyon prosedürünü. Bu düşük maliyetli model, immunolojik çalışmalar için idealdir ve organ nakli araştırmalarında yeni tedavilere olanak tanır.

Laringeal Transplantasyonu İncelemek için Heterotopik Bir Fare Modeli

Daha fazla video keşfet