Intravital Widefield Fluorescence Microscopy of Pulmonary Microcirculation in Experimental Acute Lung Injury Using a Vacuum-Stabilized Imaging System

Stefan Hall; Sufyan Faridi; Irene Euodia; Sophie Tanner; Andrew Krzysztof Chojnacki; Kamala D. Patel; Juan Zhou; Christian Lehmann

doi:10.3791/63733

Vakumla Stabilize Edilmiş Bir Görüntüleme Sistemi Kullanılarak Deneysel Akut Akciğer Hasarında Pu...

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Intravital Widefield Fluorescence Microscopy of Pulmonary Microcirculation in Experimental Acute Lung Injury Using a Vacuum-Stabilized Imaging System

Vakumla Stabilize Edilmiş Bir Görüntüleme Sistemi Kullanılarak Deneysel Akut Akciğer Hasarında Pulmoner Mikrosirkülasyonun İntravital Geniş Alan Floresan Mikroskopisi

Full Text

3,534 Views

09:28 min

April 6, 2022

DOI: 10.3791/63733-v

Stefan Hall¹, Sufyan Faridi², Irene Euodia^2,3, Sophie Tanner⁴, Andrew Krzysztof Chojnacki⁵, Kamala D. Patel^6,7, Juan Zhou^2,4, Christian Lehmann^1,2,4,8

¹Department of Physiology and Biophysics,Dalhousie University, ²Department of Microbiology and Immunology,Dalhousie University, ³Department of Neuroscience,Dalhousie University, ⁴Department of Anesthesia, Pain Management, and Perioperative Medicine,Dalhousie University, ⁵Live Cell Imaging Center,University of Calgary, ⁶Department of Physiology and Pharmacology,University of Calgary, ⁷Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of Calgary, ⁸Department of Pharmacology,Dalhousie University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

İntravital floresan mikroskopi, lökosit-endotel etkileşimlerini ve kılcal perfüzyonu gerçek zamanlı olarak incelemek için kullanılabilir. Bu protokol, vakumla stabilize edilmiş bir akciğer görüntüleme sistemi kullanarak pulmoner mikrosirkülasyondaki bu parametreleri görüntüleme ve ölçme yöntemlerini açıklar.

Bu protokol, pulmoner lökosit adezyonu ve kılcal perfüzyonu in vivo olarak görüntülemek için vakumla stabilize edilmiş bir sistemin cerrahi olarak hazırlanmasını ve kullanımını ayrıntılı olarak açıklamaktadır. Bu tekniğin temel avantajı, minimal fiziksel travma ile sağlam aynalı akciğerin stabil yüksek çözünürlüklü intravital görüntülemesine izin vermesidir. Başlamak için, vakum kanalının kirlenmesini önlerken dış halkanın üstüne ince bir vakum gresi tabakası uygulayarak görüntüleme penceresini hazırlayın.

Pencereye temiz bir 8 milimetrelik cam kapak kayması yerleştirin ve bir conta oluşturmak için yavaşça aşağı bastırın. Görüntüleme penceresini dijital basınç göstergesi ile donatılmış ve 50 ila 60 milimetre cıva sabit emme sağlayabilen bir vakum pompasına bağlayın. Bir uzunlukta fiber optik kabloyu 20 gauge endotrakeal kanülden geçirin ve ucu lidokain HCL'ye batırın.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos