Diseksiyon Teknikleri ve Kardiyovasküler Hastalıklar için Büyük Hayvan Modellerinde Kalbin Histolojik Örneklemesi

Türler ve bireyler arasındaki kalpteki yapısal farklılıkların yanı sıra literatürdeki tutarsızlıklar, kalp anatomisinin tam olarak anlaşılmasını ve katı metodolojiye bağlılığı gerektirmektedir. Bu teknik, gözlemci homojenliğini artırabilir ve deneysel kardiyovasküler hastalık araştırmalarının karşılaştırılabilirliğini ve tekrarlanabilirliğini artırabilir. Bu tekniğe aşina olmayan bir kişi, kalbin tüm bileşenlerini tanımlamakta zorluk çekebilir.

Benim tavsiyem, kalbin anatomisini tanımak için biraz zaman harcamak. Kalbin karmaşık anatomisini anlamak zor olduğundan, yöntemin görsel bir sunumu gereklidir. Başlamak için, konu hayvanı sol tarafındaki nekropsi masasına yerleştirmeden önce tartın.

Daha sonra, cutis ve mukozayı inceleyerek ve palpe ederek, renk, tutarlılık ve hacimdeki tüm değişiklikleri not ederek konunun harici bir incelemesini yapın. Daha sonra, bir bıçak kullanarak, sağ aksillada yedi santimetrelik keskin bir kesi yapın. Koxofemoral kavşağı bulduktan sonra, kapsülü bir bıçakla açın ve femur başının bağını kesin.

Aksilla kraniyalindeki deri insizyonunu mandibuler simfizise ve kaudal olarak peroneuma uzatın. Cildi neşterle çıkarın, torasik ve abdominal duvarı ventral orta hattan vertebral enine süreçlerin seviyesine maruz bırakın. Daha sonra, neşter ve forseps kullanarak, karın duvarından sağ kostal kemere ventrocaudal bir flep oluşturun.

Daha sonra, sağ hipokondriyumun kaudal yönünü takip ederek, karın boşluğunu makasla açın. İnsizyonu sağ paralomber bölge boyunca kaudal olarak eksternal iliak tepeye kadar uzatmaya devam edin. Daha sonra, insizyonu linea alba'nın kasık yerleştirilmesine kadar uzatın ve renk, kıvam, hacim ve pozisyonlarındaki herhangi bir değişikliği not etmek için karın organlarını in situ olarak kısaca inceleyin.

Daha sonra, neşter ve forseps kullanarak, diyaframı en yüksek noktada delin. Daha sonra kemik kesici forseps kullanarak, önce parasternal kıkırdaklı segmenti ve daha sonra kaburgaların dorsal segmentini kostovertebral eklemlere proksimal kesitleyerek sağ göğüs kafesini çıkarın. Büyüklüğünü, rengini, konumunu ve bitişik dokularla bağlantılarını not etmek için kalbi yerinde inceleyin.

Ayrıca, palpasyonla tutarlılıkta herhangi bir değişiklik olup olmadığına bakın. Daha sonra, makas kullanarak, perikardiyal boşluğu, tabandan kalbin tepesine kadar uzunlamasına bir kesitle açın. Perikard boşluğunu ve epikardın renk, tutarlılık ve hacimdeki herhangi bir değişiklik olup olmadığını inceleyin.

Daha sonra, makas kullanarak, superior vena kavasını sağ atriyuma girişten en az bir santimetre yukarıda keserek, crista terminalis'i koruyarak ve aort, pulmoner gövde ve her iki vena kavanın enine bölümlerini vererek kalbi serbest bırakın. Organın dış konturunu, epikardın görünümünü, miyokardın görünümünü epikardın şeffaflığı ile ve büyük damarların dış görünümünü inceleyin. Kardiyak diseksiyon için giriş-çıkış yöntemini gerçekleştirmek için, kalbi atriyal yüzü yukarı bakacak şekilde yerleştirin ve makas ve dişsiz forseps kullanarak, kaudal vena kavadan sağ atriyuma geniş ölçüde kesin.

Crista terminalis veya sinoatriyal düğümü ortaya çıkarmak için kalbi sağ auriküler uzantıya kestikten sonra, triküspid kapağı dorsal görünümden inceleyin. Daha sonra, sağ atriyumdan sağ ventrikül ve intraventriküler septum arasındaki kavşağa kadar bir kesit keserek, sağ atriyoventriküler kapağı görüntüleyin. Daha sonra, sağ ventrikül serbest duvarını intraventriküler septum boyunca pulmoner gövdenin kökenine kadar kesitleyin.

Kordae tendinea ve papiller kaslar dahil olmak üzere sağ atriyoventriküler kapakları iyice inceledikten sonra, chordae tendineae kesildi. Daha sonra, forsepsleri pulmoner gövde boyunca yerleştirin ve pulmoner çıkış yolunu, pulmoner gövde kökenini ve semilunar kapakları incelemek için gövdeyi uzunlamasına kesin. Biküspid kapağı dorsal görünümden incelemek için, sol atriyumu pulmoner damarlardan sol kulak kepçesinin ucuna kadar kesin.

Daha sonra, kalbi interventriküler septum aşağıya bakacak şekilde yerleştirin ve ventrikül serbest duvarında ventrikül tabanından kardiyak tepeye kadar büyük bir kesi yapın. Daha sonra, sol atriyoventriküler kapağın cuspunun kordae tendineasını kesin. Son olarak, forseps sol ventrikül çıkış yolundan yerleştirerek aortu açın.

Tüm kan pıhtılarını çıkarmak ve kalbi tartmak için salin kullanın. Histoloji için numune almak için, ilk olarak, sağ atriyumu, triküspid kapağı ve sağ ventrikül serbest duvarını içeren bir neşterle, yaklaşık beş milimetre arayla iki uzunlamasına paralel kesim yapın. Daha sonra, sol atriyum, mitral kapak, dorsal papiller kas ve sol ventrikülü içeren iki benzer paralel kesim yapın.

Kalbin dorsal üst üçte birinde, interventriküler septum, sağ atriyum, aort, aort kapağı ve triküspid kapak dahil olmak üzere bir çizgiyi takip ederek kalbin tabanını enine kesitleyin. Ve aort tabanını ve interventriküler septumu içeren iki paralel uzunlamasına kesik yapın. Ardından, crista terminallerinin etrafındaki sağ atriyumu kesin.

Sinoatriyal düğümün altı parçasını elde etmek için, kristanın uzunlamasına ekseni üzerinde enine yönlendirilmiş, yaklaşık üç ila dört milimetre aralıklarla birkaç paralel bölüm yapın. Daha sonra, elde edilen dokuları histolojik kasetlerde kesin ve dokuları en az 48 saat boyunca% 10 nötr tamponlu formalin içine daldırın. Koroner arterleri örneklemek için, koroner arterleri parakonal oluktan ayırmak ve gece boyunca% 10 nötr tamponlu formalin içinde sabitlemek için forseps ve neşter kullanın.

Gerekirse, dokuyu% 8'lik formik asit ve hidroklorik asidin bire bir karışımında dekalsifiye edin. Ardından, yaklaşık üç milimetre arayla birkaç enine kesim yapın. Bölümleri histolojik bir kasete yerleştirin ve kaseti gömmek için% 10 nötr tamponlu formalin içine koyun.

Kalbi en az 48 saat boyunca% 10 nötr tamponlu formalinde sabitledikten sonra, iki dişsiz düz diseksiyon forsepsleri yerleştirin. Biri kraniyal kava, sağ atriyum, triküspid kapak ve sağ ventrikülden geçer. Diğeri pulmoner ven, sol atriyum, mitral kapak ve sol ventrikül yoluyla.

Forseps arasındaki boşluğu kılavuz olarak kullanarak, tabandan kalbin tepesine kadar kesmek için bir kesme bıçağı kullanın. Yaklaşık beş milimetre arayla, aortu içeren kardiyak segmentin uzunlamasına bir bölümünü kesin. Daha sonra, kalp tabanını tepeden tamamen ayırın.

Her doku segmentini histolojik bir kasete yerleştirdikten sonra, kasetleri gömene kadar% 10 nötr tamponlu formalin içine yerleştirin. Bu protokol, kalbin dış özelliklerinin ve iç yapılarının başarılı bir şekilde görselleştirilmesini sağladı. Bu tekniği kullanarak, kalp dokusu örnekleri köpekler ve kediler gibi farklı hayvanlardan histolojik çalışmalar için başarıyla toplanabilir.

Kalbi serbest bırakırken her zaman dikkatli olun, çünkü bazı ilgi çekici yapılara zarar verebilir. Ayrıca, sinoatriyal düğümün diseksiyonu, toplanması ve gömülmesi sırasında. Bu yöntem aritmi modellemesi, hipertrofik kardiyomiyopati, miyokard enfarktüsü ve kardiyak zehirlenmeyi teşhis etmek için oluşturulmuş olmasına rağmen, herhangi bir kardiyak durumu teşhis etmek için kullanılabilir.