7 Temmuz 2023
Dinamik ışık saçılması (DLS), intravenöz olarak uygulanan demir-karbonhidrat komplekslerinin partikül boyutunu ve dağılımını değerlendirmek için uygun bir test olarak ortaya çıkmıştır. Bununla birlikte, protokoller standardizasyondan yoksundur ve analiz edilen her demir-karbonhidrat kompleksi için değiştirilmesi gerekir. Bu protokol, demir sakarozun analizi için uygulamayı ve özel hususları açıklamaktadır.
Dinamik ışık saçılması veya DLS, bozulmamış parçacık boyutunu ve dağılımını değerlendirmek için temel bir yöntemdir. Bununla birlikte, demir karbonhidrat nanopartiküllerinin analizi bazı zorluklar ortaya çıkarmaktadır. DLS'nin bir avantajı, geniş çapta mevcut enstrümantasyonu, analizi gerçekleştirmenin kolay olmasını ve nanomalzemelerin analizi için protokoller oluşturmasını içerir.
DLS'nin amaçlarından biri, sonuçta biyolojik çevre ile etkileşimi etkileyebilecek nanopartiküllerin poli dağılım profilini değerlendirmektir. Prosedürün gösterilmesi için, Cenevre Üniversitesi'nden doktora adayı Cintia Batista Marques olacak. Cihazı cihaz yazılımında çalıştırdıktan sonra, açılan pencerede depolama konumunu seçin, ölçüm dosyasını adlandırın ve kaydet'e tıklayarak ayrıntıları onaylayın.
Cihaz arayüzündeki açılır listeden gerekli standart çalışma prosedürünü seçin. Daha eski bir SÇP'ye ihtiyaç duyulursa, listeden SÇP'ye gözat'ı seçin ve yeşil oka tıklayarak seçimi onaylayın. Ölçüm işlemine başlamak için, cihaz arayüzü ekranının altındaki yeşil başlat düğmesine tıklayın.
Ardından, seyreltilmemiş parçacık standardının bir mililitresini bir polistiren küvete doldurun ve kapakla kapatın. Doldurulduktan sonra, hava kabarcığı olmadığından emin olun. Herhangi bir hava kabarcığı varsa, küvete hafifçe dokunarak çıkarın.
Küveti, ok işareti öne bakacak şekilde cihazın hücre tutucusuna yerleştirin ve ölçüm odası kapağını kapatın. Birim parametresi SOP'yi yükleyin ve başlangıç penceresine SST 20 nanometre parçacık standardı örnek adını girin. Ayrıca, tanımlayıcı numarası ve standardın son kullanma tarihini içeren bir not ekleyin.
Demir sakkaroz çözeltisini ölçmek için, hacimce %2 kütleye sahip bir demir sakkaroz çözeltisinin 0,5 mililitresini 25 mililitrelik bir hacimsel şişeye pipet edin ve işarete kadar düşük parçacıklı su ile doldurun, böylece mililitre başına 0,4 miligram demir içeren bir çözelti elde edin. Şimdi ölçüm solüsyonunu içeren plastik küveti, ok işareti öne bakacak şekilde cihaza yerleştirin ve kapağı kapatın. SOP parametresini tekrar yükleyin ve başlangıç penceresine örnek adı toplu iş numarasını girin.
Ölçümü başlatın ve bittiğinde, akustik bir sinyalle gösterilir, ölçüm penceresini kapatın. Altı ayrı ölçümün ortalama değerini hesaplayın. Ölçüm dosyasının kayıtlar görünümünde tek tek ölçümleri işaretleyin ve ortalama sonuç oluştur'a sağ tıklayın.
Örnek adı altına ortalama değerin adını ekleyin. Ardından Tamam'a tıklayarak onaylayın. Yazılımın listenin sonunda yeni bir kayıt oluşturmasını bekleyin ve girilen adın yanı sıra bu kayıttaki ortalama sonucu arayın.
Yoğunluk, hacim ve sayıya göre boyut dağılım grafikleri gösterilir. İkinci bir zirveden etkilenen yoğunluğa göre boyut dağılımı, kötü bir sonuca örnek olarak verilmiştir. Düşük kaliteli veriler, 5.000 nanometrede ek bir sinyal gösterdi.
Sayıya göre boyut dağılımı, önerilen yoğunluğa dayalı Z ortalamasından iki faktöre kadar farklıydı. Hacme göre boyut dağılımı ile yalnızca biraz daha düşük değerler hesaplanmıştır. Demir karbonhidrat nanopartiküllerini karakterize etmek için DLS kullanırken, doğru SOP, numune seyreltme ve ayrıca küvet dolumunun sağlanması önemlidir.
Asimetrik akış alanı akış fraksiyonasyonu ve boyut dışlama kromatografisi ve küçük açılı x-ışını saçılması ek ortogonal fiziko-kimyasal yöntemler olarak gerçekleştirilebilir. DLS için doğrulanmış protokoller, demir karbonhidrat nanopartiküllerinin ilk ve karşılaştırmalı karakterizasyonunun sağlamlığını büyük ölçüde artırır. Bununla birlikte, numune hazırlama ve tekniğin büyük partikül boyutlarına yönelik önyargısı, ortogonal metodolojiler bağlamında dikkate alınmalıdır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu protokol, demir sükroz komplekslerinin parçacık boyutunu ve dağılımını analiz etmek için dinamik ışık saçılmasının (DLS) kullanımını özetlemektedir. Çeşitli demir-karbonhidrat kompleksleri için DLS protokollerinde standardizasyonun zorluklarını ele almaktadır.
Dynamic light scattering (DLS) is a critical analytical tool for characterizing the particle size and distribution of iron-carbohydrate complexes, which are widely used in intravenous iron therapies. Standardized DLS protocols enable robust assessment of nanoparticle attributes, supporting early-stage quality evaluation and cross-product comparability. Reliable particle size data informs risk assessment and portfolio decisions for novel iron formulations in biopharma R&D.
DLS-based particle sizing is positioned at the interface of early discovery and preclinical development, informing both initial quality assessment and ongoing comparability studies.