Name: Klorheksidin Glukonat Kaynaklı Periton Hasarının Bir Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-04-28T14:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 25 s
Description: Keşfedin periton diyalizi fare modelinde klorheksidin glukonat kaynaklı periton fibrozunu. Bu yöntem, periton diyalizi tedavisindeki fizyolojik ve patolojik değişiklikleri incelemek için araştırmacılara yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Shin-Han Tseng'e eleştirel tartışma ve çalışmanın kısmi yürütülmesi için içtenlikle teşekkür ederiz. Bu çalışma, E-DA Hastanesi Araştırma Vakfı ve Tayvan Ulusal Cheng Kung Üniversitesi'nden EDAHP110003 ve NCKUEDA110002 tarafından desteklenmiştir.

Tüm fare deneyleri, E-DA Hastanesi / I-Shou Üniversitesi Laboratuvar Hayvanları Merkezi tarafından onaylandı ve "Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu" na göre ele alındı (NRC, ABD 2011). Bu çalışmada 7-8 haftalık erkek C57BL/6 fareler kullanıldı.
1. Kimyasal preparat
<ol><li>% 0.1 klorheksidin glukonatı (CG, Malzeme Tablosuna bakınız) % 15 etanol içinde seyrelterek kimyasal tahriş edici maddeyi hazırlayın.</li>
</ol>2. Hayvan tedavisi
<ol><li>Kontrol grubu olarak üç fare atayın. 3 hafta boyunca her gün 1 mL/kg %0.9 normal salin (NS) intraperitoneal enjeksiyon (i.p.) 3 hafta boyunca her gün toplam dokuz kez uygulayın.</li>
	<li>Peritoneal fibroz grubuna üç fare atayın. Klorheksidin glukonat (CG) kullanarak, 12.5 μL / g vücut ağırlığı dozunda% 15 etanol (adım 1.1) içinde% 0.1 CG enjeksiyonları uygulayarak periton fibrozunu indükleyin. Bunu 3 hafta boyunca her gün, toplam dokuz kez gerçekleştirin.</li>
</ol>3. Periton fonksiyon testleri (modifiye periton denge testi)
<ol><li>% 4.25 glikoz içeren bir diyaliz çözeltisi hazırlayın. Bir şırınga ile 0,5 mL diyalizat numunesi çizin ve ardından diyalizat numunesindeki glikoz konsantrasyonunu kontrol edin. NOT: Glikoz konsantrasyonu hekzokinaz/G6PD yöntemine göre belirlenir. Diyalizat örneklerine L-tipi Glu 2 testine erişildi ve bir biyokimyasal analizör ile araştırıldı (bakınız Malzeme Tablosu). Bu ilk diyalizat glikoz konsantrasyonudur.</li>
	<li>Fareleri, 20 μL / 20 gw'lik bir dozda Zoletil ve Xylazin'in kas içi enjeksiyonu (hacimce 1: 2 oranında hazırlanır, Malzeme Tablosuna bakınız) ile uyuşturun. Ek olarak, anestezi altında kuruluğu önlemek için gözlerde veteriner merhemi kullanın.</li>
	<li>Diyaliz solüsyonunun i.p. damlatılmasını gerçekleştirin (2 mL/20 g vücut ağırlığı).</li>
	<li>30 dakika sonra, ayak parmağı sıkışma refleksi eksikliği ile anestezi derinliğini değerlendirin ve doğrulayın. Daha sonra, karın orta hattında (ksifoid işlemin altında) dikey bir kesi yapın, ardından farelerin karnını açın ve intraperitoneal sıvıyı bir şırınga ile toplayın ("hacim 1" olarak tanımlanır). Daha sonra, temiz ve kuru bir pamuğun ağırlığını ölçün ve kalan intraperitoneal sıvıyı emmek için pamuğu farelerin karın boşluğuna koyun. Son olarak, pamuk ağırlığını tekrar ölçün. NOT: Pamuğun kilo alımı, kalan intraperitoneal sıvının ağırlığına eşittir. Ardından, elde edilen hacme dönüştürün (özgül ağırlık: 1 g /cm3; "hacim 2" olarak tanımlanır). Son diyalizat hacmi cilt 1 artı cilt 2'dir.</li>
	<li>Glikoz konsantrasyonunu ölçmek için 0,5 mL diyalizat numunesi (son diyalizat) kullanın. Bu son diyalizat glikoz konsantrasyonudur.</li>
	<li>Formül15'i kullanarak net ultrafiltrasyonunu hesaplayın: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/63903/63903eq01.jpg" style="margin: auto;"></li>
	<li>Aşağıdaki formül15'i kullanarak periton geçirgenliğini hesaplayın: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/63903/63903eq02.jpg" style="margin: auto;"></li>
</ol>4. Karın duvarı, kas ve karaciğerin doku hazırlığı ve histolojik analiz
<ol><li>Fareleri kardiyak ponksiyon (flebotomi) yoluyla kurban edin3,16.</li>
	<li>Karın duvarını kesin (1 cm x 1 cm) ve total hepatektomi. Farelerin karın duvarını ve karaciğer dokularını gece boyunca% 10 nötr tamponlu formalin içinde sabitleyin.</li>
	<li>Karın duvarı kası ve karaciğerin 3 μm kalınlığında parafin kesitleri hazırlayın ve daha önce yayınlanan rapor17'yi takiben histolojik analiz yapın.</li>
	<li>Karın duvarının parietal peritonunu ve farelerin karaciğer yüzeylerinin viseral peritonunu morfometri kullanarak değerlendirin18.</li>
	<li>İstatistik ve grafik yazılımı kullanarak istatistiksel analizler gerçekleştirin (bkz. Tüm verileri ortalama ± SD olarak ifade edin ve bir t-testi19 kullanarak istatistiksel anlamlılık açısından analiz edin. P &lt; 0,05 ile değerleri anlamlı sonuçlar olarak tanımlayın.</li>
</ol>

<ol><li>Han, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+outcome+of+CAPD%3A+twenty-five+years%27+experience+in+a+single+Korean+center%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Improving outcome of CAPD: twenty-five years' experience in a single Korean center.</a> Peritoneal Dialysis International. 27 (4), 432-440 (2007).</li>
<li>Kawaguchi, Y., Hasegawa, T., Nakayama, M., Kubo, H., Shigematu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Issues+affecting+the+longevity+of+the+continuous+peritoneal+dialysis+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International+Supplements%22%5BJournal%5D)">Issues affecting the longevity of the continuous peritoneal dialysis therapy.</a> Kidney International Supplements. 62, 105-107 (1997).</li>
<li>Lee, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamin+D+can+ameliorate+chlorhexidine+gluconate-induced+peritoneal+fibrosis+and+functional+deterioration+through+the+inhibition+of+epithelial-to-mesenchymal+transition+of+mesothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Vitamin D can ameliorate chlorhexidine gluconate-induced peritoneal fibrosis and functional deterioration through the inhibition of epithelial-to-mesenchymal transition of mesothelial cells.</a> BioMed Research International. 2015, 595030(2015).</li>
<li>Nakamoto, H., Kawaguchi, Y., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+technique+survival+on+peritoneal+dialysis+better+in+Japan%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Is technique survival on peritoneal dialysis better in Japan.</a> Peritoneal Dialysis International. 26 (2), 136-143 (2006).</li>
<li>Schaefer, F., Klaus, G., Muller-Wiefel, D. E., Mehls, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+practice+of+peritoneal+dialysis+in+children%3A+results+of+a+longitudinal+survey.+Mid+European+Pediatric+Peritoneal+Dialysis+Study+Group+%28MEPPS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Current practice of peritoneal dialysis in children: results of a longitudinal survey. Mid European Pediatric Peritoneal Dialysis Study Group (MEPPS).</a> Peritoneal Dialysis International. 19, Suppl 2 445-449 (1999).</li>
<li>Woodrow, G., Turney, J. H., Brownjohn, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+failure+in+peritoneal+dialysis+and+its+impact+on+patient+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Technique failure in peritoneal dialysis and its impact on patient survival.</a> Peritoneal Dialysis International. 17 (4), 360-364 (1997).</li>
<li>Schmidt, D. W., Flessner, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+and+treatment+of+encapsulating+peritoneal+sclerosis%3A+basic+and+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis and treatment of encapsulating peritoneal sclerosis: basic and translational research.</a> Peritoneal Dialysis International. 28, Suppl 5 10-15 (2008).</li>
<li>Augustine, T., Brown, P. W., Davies, S. D., Summers, A. M., Wilkie, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Encapsulating+peritoneal+sclerosis%3A+clinical+significance+and+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nephron+Clinical+Practice%22%5BJournal%5D)">Encapsulating peritoneal sclerosis: clinical significance and implications.</a> Nephron Clinical Practice. 111 (2), 149-154 (2009).</li>
<li>Di Paolo, N., Nicolai, G. A., Garosi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+peritoneum%3A+from+histological+studies+to+mesothelial+transplant+through+animal+experimentation%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">The peritoneum: from histological studies to mesothelial transplant through animal experimentation.</a> Peritoneal Dialysis International. 28, Suppl 5 5-9 (2008).</li>
<li>Fusshoeller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histomorphological+and+functional+changes+of+the+peritoneal+membrane+during+long-term+peritoneal+dialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Histomorphological and functional changes of the peritoneal membrane during long-term peritoneal dialysis.</a> Pediatric Nephrology. 23 (1), 19-25 (2008).</li>
<li>Goffin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peritoneal+membrane+structural+and+functional+changes+during+peritoneal+dialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Dialysis%22%5BJournal%5D)">Peritoneal membrane structural and functional changes during peritoneal dialysis.</a> Seminars in Dialysis. 21 (3), 258-265 (2008).</li>
<li>Ito, T., Yorioka, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peritoneal+damage+by+peritoneal+dialysis+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Peritoneal damage by peritoneal dialysis solutions.</a> Clinical and Experimental Nephrology. 12 (4), 243-249 (2008).</li>
<li>Io, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SAHA+suppresses+peritoneal+fibrosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">SAHA suppresses peritoneal fibrosis in mice.</a> Peritoneal Dialysis International. 35 (3), 246-258 (2015).</li>
<li>Yoh, K., Ojima, M., Takahashi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Th2-biased+GATA-3+transgenic+mice+developed+severe+experimental+peritoneal+fibrosis+compared+with+Th1-biased+T-bet+and+Th17-biased+RORgammat+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Th2-biased GATA-3 transgenic mice developed severe experimental peritoneal fibrosis compared with Th1-biased T-bet and Th17-biased RORgammat transgenic mice.</a> Experimental Animals. 64 (4), 353-362 (2015).</li>
<li>Karl, Z. J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peritoneal+Equilibration+Test%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Peritoneal Equilibration Test.</a> Peritoneal Dialysis International. 7 (3), 138-148 (1987).</li>
<li>Lee, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+implication+of+vitamin+D+nanomedicine+for+peritoneal+dialysis-related+peritoneal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">The clinical implication of vitamin D nanomedicine for peritoneal dialysis-related peritoneal damage.</a> International Journal of Nanomedicine. 14, 9665-9675 (2019).</li>
<li>Goldner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+masson+trichrome+technique+for+routine+laboratory+purposes%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Modification of the masson trichrome technique for routine laboratory purposes.</a> The American Journal of Pathology. 14 (2), 237-243 (1938).</li>
<li>Cheng, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+application+of+magnetite+nanoparticle-mediated+vitamin+D3+delivery+for+peritoneal+dialysis-related+peritoneal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Novel application of magnetite nanoparticle-mediated vitamin D3 delivery for peritoneal dialysis-related peritoneal damage.</a> International Journal of Nanomedicine. 16, 2137-2146 (2021).</li>
<li>Ross, A., Willson, V. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRoss%2C+A+%22Basic+and+Advanced+Statistical+Tests%3A+Writing+Results+Sections+and+Creating+Tables+and+Figures%22">Basic and Advanced Statistical Tests: Writing Results Sections and Creating Tables and Figures</a>. , SensePublishers. 13-16 (2017).</li>
<li>Suga, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventive+effect+of+pirfenidone+against+experimental+sclerosing+peritonitis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Preventive effect of pirfenidone against experimental sclerosing peritonitis in rats.</a> Experimental and Toxicologic Pathology. 47 (4), 287-291 (1995).</li>
<li>Ishii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+sclerosing+encapsulating+peritonitis+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">An experimental sclerosing encapsulating peritonitis model in mice.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 16 (6), 1262-1266 (2001).</li>
<li>Nishino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotides+against+collagen-binding+stress+protein+HSP47+suppress+peritoneal+fibrosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotides against collagen-binding stress protein HSP47 suppress peritoneal fibrosis in rats.</a> Kidney International. 64 (3), 887-896 (2003).</li>
<li>Mishima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+expression+of+heat+shock+protein+47+in+rat+model+of+peritoneal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Peritoneal+Dialysis+International%22%5BJournal%5D)">Enhanced expression of heat shock protein 47 in rat model of peritoneal fibrosis.</a> Peritoneal Dialysis International. 23 (1), 14-22 (2003).</li>
<li>Kushiyama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+liposome-encapsulated+clodronate+on+chlorhexidine+gluconate-induced+peritoneal+fibrosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of liposome-encapsulated clodronate on chlorhexidine gluconate-induced peritoneal fibrosis in rats.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 26 (10), 3143-3154 (2011).</li>
<li>Nishino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+lymphocyte+infiltration+in+the+progression+of+mouse+peritoneal+fibrosis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Renal+Failure%22%5BJournal%5D)">Involvement of lymphocyte infiltration in the progression of mouse peritoneal fibrosis model.</a> Renal Failure. 34 (6), 760-766 (2012).</li>
<li>Lua, I., Li, Y., Pappoe, L. S., Asahina, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myofibroblastic+conversion+and+regeneration+of+mesothelial+cells+in+peritoneal+and+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Myofibroblastic conversion and regeneration of mesothelial cells in peritoneal and liver fibrosis.</a> The American Journal of Pathology. 185 (12), 3258-3273 (2015).</li>
<li>Kitamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigallocatechin+gallate+suppresses+peritoneal+fibrosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Chemico-Biological+Interactions%22%5BJournal%5D)">Epigallocatechin gallate suppresses peritoneal fibrosis in mice.</a> Chemico-Biological Interactions. 195 (1), 95-104 (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Bu çalışmada, CG'nin i.p. enjeksiyonu ile bir fare PD modeli sunulmuş ve sonuçlar bu modelde PD hastasının durumunu taklit eden periton fibrozu ve fonksiyonel bozulma göstermiştir.
Protokolde birkaç kritik adım vardır. İlk olarak, CG veya NS'nin bir i.p. enjeksiyonunu gerçekleştirmek için, farenin karın duvarı derisi, delinmeye bağlı intraperitoneal organ hasarını önlemek için forseps kullanılarak alınmalıdır. İkincisi, histolojik analizler için karın duvarının peritonunu toplarken, i.p. enjek...

Periton diyalizi (PD) bir tür renal replasman tedavisidir. Ancak PH'nin çözülemeyen sorunları vardır. Örneğin, uzun süreli PD tedavisi periton hasarına neden olabilir, sonuçta ultrafiltrasyon başarısızlığına ve tedavinin geri çekilmesine neden olabilir 1,2,3,4,5,6. Peritoneal fibrozis en ciddi komplikasyonlardan biridir 7,8. Peritoneal fibrozis, interstisyum içinde hücre dışı matriksin birikmesi ve birikmesi ve periton 9,10'un neo-anjiyogenezi ve vaskülopatisi ile karakterizedir.
Bu peritoneal değişikliklerin başlıca nedenleri tekrarlayan peritonit ve diyalizatın biyouyumlu olmamasıdır, bunlar hiperozmotik, yüksek glukoz, düşük pH ve glukoz yıkımı ürün birikimidir11,12. Bu nedenle, uygun hayvan deney modelleri, araştırmacıların PD tedavisi sırasında peritondaki fizyolojik ve patolojik değişiklikleri daha iyi incelemelerine yardımcı olabilir. Bu nedenle, bir hayvan PD modelinin oluşturulması, PD teknolojisinin ve diyaliz etkinliğinin iyileştirilmesi ve hasta sağkalımının uzatılması açısından önemlidir. Bu çalışma, daha önce13,14 olarak tarif edildiği gibi, klorheksidin glukonatın (CG) intraperitoneal (i.p.) enjeksiyonu ile bir PD fare modeli oluşturmayı amaçlamıştır. Bu PD fare modeli, diğer PD hayvan modellerine kıyasla basit, kullanımı kolay ve uygulanabilirdir.

<table><tbody><tr><td>% 0.9 Normal Tuzlu</td><td>Su F CHEMICAL CORP., New Taipei City, Tayvan</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>%10 nötr tamponlu formalin</td><td>Tayvan Burnett International Co., Ltd., Taipei Şehri, Tayvan</td><td>00002A</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik biyokimyasal analizör</td><td>Hitachi Ltd., Tokyo, Japonya</td><td>Glikoz konsantrasyonunu belirlemek için</td><td>Labospect Serisi 008</td></tr><tr><td>Klorheksidin diglukonat çözeltisi, H2 içinde% 20O</td><td>Sigma-Aldrich, MO, ABD</td><td>C9394</td>, <td>enjeksiyon için% 15 etanol ile% 0.1'e seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Avantor Performans Malzemeleri, LLC, PA, ABD</td><td>BAKR8006-05</td>, <td>çalışma konsantrasyonu için normal salin ile% 15'e seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Glikoz (Dianeal)</td> <td>Baxter International, Inc., IL, ABD</td><td>FNB9896</td><td>Ticari diyaliz çözeltisi (% 4.25)</td></tr> <tr><td>GraphPad Prism 8.0</td><td>GraphPad Yazılımı, Inc., CA, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-tipi Glu 2 testi</td><td>FUJIFILM Wako, Japonya</td><td>461-32403</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin 20</td><td>Juily Pharmaceutical Co., Ltd., New Taipei City,</td> <td>Tayvan-Zoletil</td><td></td></tr> <tr><td>50</td><td>Virbac Laboratuvarları, Carros, Fransa</td><td>-</td><td></td></tr></tbody></table>

klorheksidin glukonat kaynaklı periton hasarının bir fare modeli

A Mice Model of Chlorhexidine Gluconate-Induced Peritoneal Damage

Periton fibrozisi, periton diyalizinin (PD) önemli bir komplikasyonudur. Bu sorunu araştırmak ve ele almak için, uygun bir PD hayvan modeli gereklidir. Mevcut protokol, PD'li bir hastanın durumunu taklit eden bir klorheksidin glukonat (CG) ile indüklenen peritoneal fibroz modeli oluşturmaktadır. Peritoneal fibroz, erkek C57BL / 6 farelerde toplam dokuz kez, 3 hafta boyunca% 15 etanol içinde% 0.1 CG'nin% 0.1'inin intraperitoneal enjeksiyonu ile indüklenmiştir. Daha sonra 22. günde periton fonksiyonel testleri yapıldı. Fareler kurban edildikten sonra, karın duvarının parietal peritonu ve karaciğerin viseral peritonu toplandı. Masson'un trikrom boyamasından sonra mikroskobik olarak analiz edildiğinde daha kalın ve daha fibrotiktiler. Ultrafiltrasyon hızı azaldı ve glikoz kütle taşınması periton geçirgenliğinde CG kaynaklı bir artışa işaret etti. Bu şekilde oluşturulan PD modeli, PD teknolojisini, diyaliz etkinliğini iyileştirmede ve hasta sağkalımını uzatmada uygulamalara sahip olabilir.

Şekil 1A,B'de, karın duvarının parietal peritonu, Masson'un trikrom boyama 17'si altında belirgin şekilde daha kalın ve daha fibrotikti, bu da CG'ye maruz kalan grupta periton fibrozisinin kontrol salin grubundan (NS) daha şiddetli olduğunu göstermektedir. Şekil 2A, B'de, karaciğer yüzeylerinin viseral peritonunun da belirgin şekilde daha kalın ve daha fibrotik olduğu kanıtlanmıştır, böylece CG'ye maruz k...

Bu protokol, klorheksidin glukonat (CG) ile indüklenen periton fibrozisinin periton diyalizi (PD) fare modelini oluşturmaktadır. Mevcut model, diğer PD hayvan modellerine kıyasla basit ve kullanımı kolaydır.

Klorheksidin Glukonat Kaynaklı Periton Hasarının Bir Fare Modeli

Peritoneal fibrosis is an important complication of peritoneal dialysis (PD). To investigate and address this problem, an appropriate animal model of PD ...

Periton diyalizi (PD) için hayvan modelinin oluşturulması çok önemlidir. PD tedavisinin teknolojisini ve etkinliğini geliştirebileceğini ve sonunda hastanın sağkalımını iyileştirebileceğini umuyoruz. Bu periton diyalizi fare modeli, diğer periton diyalizi hayvan modellerine kıyasla basit, kullanımı kolay ve görülebilirdir.Uygun bir periton diyalizi hayvan modeli, araştırmacıların PD tedavisi sırasında peritonal, fizyolojik ve patolojik değişimi incelemelerine yardımcı olabilir. Prosedürün gösterimi, laboratuvarımdan bir araştırma asistanı olan Fang-Ling Liao olacak. Başlamak için,% 0.1 klorheksidin glukonatı % 15 etanol içinde seyrelterek kimyasal tahriş edici maddeyi hazırlayın.Daha sonra, kontrol grubu olarak üç fare atayın ve kilogram başına bir mililitre boyunca% 0.9 normal salin intraperitoneal olarak üç hafta boyunca toplam dokuz kez enjekte edin. Daha sonra periton fibroz grubuna üç fare atayın ve vücut ağırlığının kilogramı başına 12.5 mikrolitrelik bir dozda daha önce hazırlanan% 0.1 klorheksidin glukonat çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonunu uygulayarak periton fibrozunu indükleyin. Periton fonksiyon testleri için,% 4.25 glikoz içeren bir diyaliz solüsyonu hazırlayın.Daha sonra 0,5 mililitre diyalizat numunesi çekmek için bir şırınga kullanın. Bir zoletil ve ksilazin enjeksiyonu hazırlayın ve kas içi bir enjeksiyon uygulayarak fareleri uyuşturun. Diyaliz çözeltisinin intraperitoneal kurulumunu, 20 gram vücut ağırlığı başına iki mililitrelik bir dozda gerçekleştirin.Karın orta hattında küçük bir kesi yapın ve majör intraperitoneal sıvıyı bir şırınga ile toplayın. 30 dakika sonra, ksifoid işlemin altındaki karın orta hattında dikey bir kesi yapın ve artık intraperitoneal sıvıyı bir şırınga ile toplamak için farenin karnını açın. Ardından, temiz ve kuru bir pamuklu çubuğun ağırlığını ölçün.Artık intraperitoneal sıvıyı emmek için pamuğu farenin karın boşluğuna koyun ve sonra çıkarın. Pamuk ağırlığını tekrar ölçün. Masson'un trikrom boyaması, klorheksidin glukonata maruz kalan gruptaki karın duvarının parietal peritonunun kontrol grubuna göre belirgin şekilde daha kalın ve fibrotik olduğunu gösterdi.Karaciğer yüzeylerinin viseral peritonu, klorheksidin glukonata maruz kalan grupta, kontrol salin grubuna göre anlamlı derecede daha kalın ve fibrotikti, bu da periton fibrozisinin klorheksidin glukonata maruz kalan grupta daha şiddetli olduğunu gösteriyor. Klorheksidin glukonata maruz kalan grup, ultrafiltrasyon hızının azaldığını ve glikoz kütle taşınımının arttığını gösterdi, bu da klorheksidin glukonata maruz kalan farelerde periton geçirgenliğinin arttığını gösterdi İntraperitoneal enjeksiyon prosedürü uygularken, forsepsleri kullanın ve delinmeye bağlı intraperitoneal organ hasarını önlemek için farenin karın derisini seçin.

a-mice-model-of-chlorhexidine-gluconate-induced-peritoneal-damage

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kaynak: de Vries, C. R. , et.al. Kronik Pseudomonas aeruginosa yara enfeksiyonunun gecikmiş aşılama modeli. J. Vis. Exp. (2020)Bu video, parlak bir film pansı ile kaplı iki tam kalınlıkta dorsal deri yarası taşıyan bir fareye parlayan Pseudomonas aeruginosa'nın gecikmeli aşılanmasını gösteriyor. Bu, biyofilm oluşumunu ve kronik enfeksiyonun oluşmasını kolaylaştırır. Düzenli biyolüminesans izleme, bakteri yükünün nicelendirilmesini ve enfeksiyon ilerlemesinin zamanla izlenmesini sağlar.

Kronik Pseudomonas aeruginosa cilt yarası enfeksiyonunun fare modeli geliştirilmesi 

Burada gerçek zamanlı, non-invaziv, kollarındaki Pseudomonas aeruginosabiyofilm yara enfeksiyonları izleme için tüysüz fareler kullanan bir roman diyabetik fare modeli açıklar. Bu yöntem diğer bakteri ve genetiği değiştirilmiş mikroorganizmalar, çoklu türler biyofilmler, dahil olmak üzere enfeksiyon değerlendirmek ve antibiofilm stratejileri etkinliğini test etmek için adapte edilebilir.

Işık tarafa: In Vivo izleme bir diyabetik tüysüz fare modelinde kronik yaralarda Pseudomonas aeruginosa biyofilm enfeksiyonların

Bu makalede farelerde hayvan arka tarafında konumlandırılmış bir erişim bağlantı noktasına bağlı bir mayi kateter, cerrahi yerleşim için yöntem gösterilmektedir. Ayrıca, PD hastalar üremik durumunu benzemeye 5/6 nefrektomi için yordamı açıklar.

Kateter yerleştirme ve 5/6 nefrektomi periton diyalizi fare modelleri için cerrahi teknik

Kronik yaralar, tam kalınlıkta kutanöz bir yaradan sonra yüksek düzeyde oksidatif stres emilerek diyabetik fare modelindeki akut yaralardan gelişir. Yara katalaz ve glutatyon peroksidaz inhibitörleri ile tedavi edilir, cilt mikrobiyom mevcut bakteriler tarafından bozulmuş iyileşme ve biyofilm gelişimi ile sonuçlanan.

Diyabetik Farelerde Kronik Yaralar Oluşturma Protokolü

Burada, yerel olarak farelerde apikal periodontitis teşvik etmek için bir protokol sunuyoruz. Biz nasıl fare diş bir delik matkap ve onun hamuru maruz göstermek, amacıyla lokal inflamasyon neden. Mikro-CT ve histoloji gibi bu inflamasyonun doğasını araştırmak için analiz yöntemleri de gösterilmiştir.

Fareler içinde Apical periodontitis İndükleme

Mevcut protokol, farelerde infrarenal abdominal aortun adventitisine doğrudan elastaz uygulanması yoluyla elastaz kaynaklı AAA modeli için standartlaştırılmış bir cerrahi yöntemi tanımlamaktadır.

Elastazın Perivasküler Uygulaması ile İndüklenen Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Bu makalede, geleneksel tekniklerle gözlenen önemli teknik sorunlardan kaçınmak için periton diyalizi kateterinin murin modeline implante edilmesine yönelik bir prosedürün modifikasyonları açıklanmaktadır.

Farelerde Periton Diyalizi Kateter Yerleştirilmesinde Retrograd İmplantasyon Yaklaşımı

Bu çalışma iki önemli deneysel teknik sunmaktadır: yara kapanmasını değerlendirmek için bir murin yara modelinin oluşturulması ve hücresel canlılığı korumak için murin derisinden tek hücreli süspansiyonların hazırlanması.

Fare Yara Modelleri ve Tek Hücre Süspansiyonlarının Hazırlanması

Bu makale, önceki modelleme yöntemlerinin avantajlarını birleştirerek, kalsiyum klorür ve elastaz kullanarak bir fare abdominal aort anevrizması modeli oluşturmak için bir protokol sunmaktadır. Bu model, abdominal aort anevrizmalarının altında yatan patofizyolojik mekanizmaları araştırmak için kullanılabilir.

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

İntraperitoneal ilaç uygulaması, pankreas hasarını indüklemek için güvenli ve etkili bir non-invaziv yaklaşımdır. Bu çalışma, değişen derecelerde pankreas hasarını indüklemek için fareler üzerinde beş farklı intraperitoneal enjeksiyon protokolünü karşılaştırdı ve şiddetli akut pankreatit (SAP) için patolojik değişiklikleri ve tedavi stratejilerini araştırmak için bir ciddi pankreas hasarı modeli oluşturdu.

Semoreuin ve lipopolisakkarit intraperitoneal enjeksiyonunun bir kombinasyonu ile şiddetli akut pankreatitin bir fare modelinin hazırlanması

Keşfedin periton diyalizi fare modelinde klorheksidin glukonat kaynaklı periton fibrozunu. Bu yöntem, periton diyalizi tedavisindeki fizyolojik ve patolojik değişiklikleri incelemek için araştırmacılara yardımcı olur.

Klorheksidin Glukonat Kaynaklı Periton Hasarının Bir Fare Modeli

Daha fazla video keşfet