Name: Farelerde Atriyal Fibrilasyon Duyarlılığını Değerlendirmek için Transözofageal Atriyal Pacingin Optimizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-29T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Keşfedin farelerde atriyal fibrilasyon duyarlılığını değerlendirmek için transözofageal atriyal pacing optimizasyonunu. Bu yöntem aynı hayvanda tekrarlanan testlere olanak tanıyarak sonuçların tekrarlanabilirliğini artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Şekil 2 , BioRender.com ile oluşturulmuştur. Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri'ndeki Ulusal Kalp, Akciğer ve Kan Enstitüsü'nden (HL096844 ve HL133127) gelen hibelerle desteklenmiştir; Amerikan Kalp Derneği (2160035, 18SFRN34230125 ve 903918 [MBM]); ve Ulusal Sağlık Enstitüsü Ulusal Translasyonel Bilimleri Geliştirme Merkezi (UL1 TR000445).

Bu prosedür Vanderbilt Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır ve Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu ile tutarlıdır. Protokol hem genetik9 kullanılarak geliştirildi hem de AF duyarlılığının10 (örneğin hipertansiyon) fare modelini edindi. Operatör, incelenen farenin fenotipine kör edildi.
1. Hayvan seçimi
<ol><li>Genetik modeller için, optimal AF duyarlılığı dönemini belirlemek için fareleri aşağıda açıklandığı gibi iki haftada bir (yani her iki haftada bir) atriyal pacing'e maruz bırakın (bkz. adım 6.).<ol><li>8 haftalıkken iki haftada bir tempoya başlayın. Değişkenliği azaltmak için vahşi tip çöp arkadaşlarını kontrol olarak kullanın. Her iki cinsiyeti de inceleyin, çünkü AF fenotip9 gelişmeyebilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Edinilmiş modeller için, fareler fiziksel olgunluğa ulaştıktan sonra (~ 12 haftalık) pacing yapın10. Yukarıda belirtildiği gibi, her iki cinsiyeti de inceleyin.</li>
	<li>Bu ön çalışmalar sırasında, optimum pacing modunu belirlemek için hem patlama hızı8 (sabit bir pacing döngü uzunluğu [CL] kullanarak) hem de azalan pacing7 (giderek daha kısa bir pacing CL ile) gerçekleştirin. Her prosedürü en az 24 saat ayırın. NOT: Artan sayıda fare incelendikçe, AF'ye duyarlı farelerde AF'yi destekleyen ancak kontrolleri destekleyen optimal yaş, cinsiyet ve pacing modunu belirlemek için biriken verileri gözden geçirin.<ol><li>AF duyarlılığının birden fazla tanımını kullanarak verileri analiz edin (örneğin, AF ataklarının sayısı8, toplam AF süresi 9, AF insidansı4 ve yaygın olarak 10s 11 veya 15 s 12 olarak tanımlanan sürekli AF insidansı ve hatta 5 dakika13,14'e kadar) çünkü bazı modeller biri için bir AF fenotipi gösterebilir, ancak tüm tanımlar9 için değil. NOT: AF atağının tanımı ve AF duyarlılığı yayınlanmış çalışmalar arasında farklılık göstermektedir 4,7. AF atak8 genellikle en az 1 saniye boyunca meydana gelen düzensiz düzensiz ventrikül yanıtı ile hızlı atriyal aktivite olarak tanımlanır (Şekil 1). AF'ye ek olarak, atriyal pacing ayrıca düzenli veya düzensiz bir ventrikül yanıtı ile atriyal flutter'ı da indükleyebilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Ek fareler üzerinde sonraki çalışmalar için optimize edilmiş modele özgü parametreleri ve AF duyarlılığının tanımını kullanın.</li>
</ol>2. Hayvan hazırlığı
<ol><li>Fareyi bir indüksiyon odasında, 1 L/dak %100 oksijende %3 izofluran kullanarak (bakınız Malzeme Tablosu) anestezi altına alın. NOT: İzofluran zararlıdır. Cildi veya gözü tahriş edebilir ve diğer merkezi sinir sistemi toksisitelerinin yanı sıra baş dönmesine, yorgunluğa ve baş ağrısına neden olabilir. İyi havalandırılan bir alanda uygun bir süpürme yöntemiyle (örneğin, aktif karbon bidonu) kullanın.</li>
	<li>Pedal refleksinin kaybedilmesinden sonra, fareyi, arka bacakları ped yüzeyine bantlanmış olarak vücut ısısını yaklaşık 37 ° C'de tutmak için tasarlanmış bir ısıtma yastığı üzerine sırtüstü bir konuma getirin.</li>
	<li>Kurumayı önlemek için gözlere yağlayıcı göz merhemi uygulayın.</li>
	<li>Farenin burnunun üzerine güvenli bir şekilde anestezik bir maske yerleştirin. 1 L/dk %100 oksijende %1 izofluran kullanarak anestezi idaresine başlayın. Burun deliklerinin tıkanıklıktan arındırıldığından emin olun, çünkü fareler zorunlu burun soluyanlardır.</li>
	<li>Bir biyolojik amplifikatöre bağlı 27 G EKG iğne elektrotlarının deri altına yerleştirilmesiyle bir yüzey elektrokardiyogramı (EKG, kurşun I) ve ön ayaklara veri toplama donanımı elde edin. Sol arka bacağa bir iğne elektrodu yerleştirerek sinyali topraklayın.</li>
</ol>3. Kateter yerleştirme
<ol><li>İzofluran maskesini fareden kısaca çıkarın.</li>
	<li>Yemek borusuna bir uyarıcı ve uyaran izolatörü (bkz. Malzeme Tablosu) bağlı 2-F oktapolar elektrot kateteri ( elektrot genişliği ve aralığı = 0,5 mm) yerleştirin (Şekil 2).<ol><li>Ağızdan (boyun uzatılmış) kifoid kıkırdağın hemen üstüne kadar olan mesafeye yaklaşan bir derinliğe yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>İzofluran maskesini farenin burun deliklerinin üzerine yeniden yerleştirin.</li>
	<li>Analiz yazılımı kullanarak EKG derivasyonunun sürekli kaydedilmesiyle veri toplamaya başlayın (bkz.</li>
	<li>Uyaran izolatör modunu bipolar olarak ayarlayın. Stimülasyon sırasında en çok kullanılan elektrot çiftini kullanın.</li>
	<li>Yakalamayı sağlamak için kateteri yemek borusu içinde uygun şekilde konumlandırın. Bunu yapmak için, sinüs CL'sinden biraz daha kısa bir CL'de darbe genişliği 2 ms olan 1,5 mA'lık bir uyaran uygulayın (örneğin; sinüs CL 120 ms ise 100 ms'lik bir CL kullanın). Tutarlı atriyal yakalama elde edilene kadar kateteri dikkatlice konumlandırın.</li>
</ol>4. Eşik belirleme
<ol><li>Atriyal diyastolik yakalama eşiğini (TH) belirlemek için, atriyal yakalama için kullanılan CL'de 2 ms'lik bir darbe genişliği ile 1.5 mA'da pacing başlatın. Atriyal yakalama kaybına kadar uyaran genliğini 0,05 mA artışlarla azaltın, ardından yakalamaya kadar artırın. NOT: Tutarlı atriyal yakalamanın elde edildiği en düşük genlik atriyal TH'dir. Yüksek uyaran genliklerinde parasempatik stimülasyon endişesi nedeniyle, yapay AF indüksiyonu9 ile pacing sırasında aşırı AV bloğu tarafından yansıtılan maksimum kabul edilebilir TH, 0.75 mA'dır. Gerekirse, TH ≤0.75 mA'ya ulaşmak için kateteri yeniden konumlandırın.</li>
	<li>Uyaran genliğini TH'nin iki katına ayarlayın.</li>
</ol>5. Elektrofizyolojik özelliklerin belirlenmesi
<ol><li>AF indüksiyonu15 için hızlı atriyal pacing öncesinde sinüs düğümü iyileşme süresi (SNRT), Wenckebach döngü uzunluğu (WCL) ve atriyoventriküler etkili refrakter dönem (AVERP) dahil olmak üzere elektrofizyolojik parametreleri ölçün.</li>
</ol>6. Atriyal aritmi duyarlılığı
<ol><li>Farklı CL'lerde patlama hızı veya ilk çalışmalardan belirlenen düşük tempoyu kullanarak 2 ms'lik bir darbe genişliğine sahip iki TH'de pacing gerçekleştirin (adım 1.1.-1.4.).</li>
	<li>Patlama hızı için, 15 s için 50 ms'lik bir başlangıç CL'sinde hızlayın ve sonraki trenler 40 ms, 30 ms, 25 ms, 20 ms ve 15 ms 8,10'luk CL'lerde gerçekleşir. Devam etmeden önce iyileşmeye izin vermek için her tempolu trenden sonra tempoyu 30 sn duraklatın. Bir tempolu trenden sonra AF oluşursa, sonraki tempoya geçmeden önce sonlandırmadan sonra 30 s bekleyin.</li>
	<li>Azaltılmış tempo için, 40 ms'lik bir CL'de hız yapın ve CL'yi 20 ms7'de sona erene kadar her 2 saniyede bir 2 ms azaltın. Her treni takiben iyileşme için 30 saniyelik bir duraklama ile üçlü16 veya beşli17'de tempolu trenler gerçekleştirin. Yukarıdaki gibi, AF gelişirse, devam etmeden önce sonlandırmadan sonra 30 s bekleyin. NOT: Ön deneyler sırasında protokol parametrelerini optimize ederken (yani, adım 1.1.-1.5.), beş trenle azaltılmış tempo gerçekleştirin. Üç veya beş trenin en yüksek hassasiyeti sağlayıp sağlamadığını belirlemek için post hoc bir analiz yapın.</li>
	<li>Son tempo trenini takiben 30 sn sinüs ritmi üzerine veya 10 dakikalık bir AF atağından sonra, hangisi önce gelirse, prosedürü sonlandırın.</li>
</ol>7. İşlem sonrası
<ol><li>Veri alımını durdurun.</li>
	<li>Kateter ve EKG elektrotlarını nazikçe çıkarın.</li>
	<li>Anesteziyi durdurun.</li>
	<li>Anestezi uygulanan fareyi bir kafese yerleştirin ve iyileşmeyi sağlamak için 10 dakika boyunca gözlemleyin.</li>
	<li>Veri dosyasını kaydedin. Seri test durumunda, pacing prosedürünü tekrarlamadan önce en az 24 saat bekleyin.</li>
</ol>

<ol><li>Sumitomo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+atrial+arrhythmia+and+sinus+node+dysfunction+in+patients+with+catecholaminergic+polymorphic+ventricular+tachycardia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Journal%22%5BJournal%5D)">Association of atrial arrhythmia and sinus node dysfunction in patients with catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia.</a> Circulation Journal. 71 (10), 1606-1609 (2007).</li>
<li>Fukui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+leptin+signaling+in+the+pathogenesis+of+angiotensin+II-mediated+atrial+fibrosis+and+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Arrhythmia+and+Electrophysiology%22%5BJournal%5D)">Role of leptin signaling in the pathogenesis of angiotensin II-mediated atrial fibrosis and fibrillation.</a> Circulation: Arrhythmia and Electrophysiology. 6 (2), 402-409 (2013).</li>
<li>Schutter, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of atrial fibrillation.</a> Circulation Research. 127 (1), 91-110 (2020).</li>
<li>Li, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptor-mediated+calcium+leak+drives+progressive+development+of+an+atrial+fibrillation+substrate+in+a+transgenic+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptor-mediated calcium leak drives progressive development of an atrial fibrillation substrate in a transgenic mouse model.</a> Circulation. 129 (12), 1276-1285 (2014).</li>
<li>Wakimoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+atrial+tachycardia+and+fibrillation+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Induction of atrial tachycardia and fibrillation in the mouse heart.</a> Cardiovascular Research. 50 (3), 463-473 (2001).</li>
<li>Schrickel, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+atrial+fibrillation+in+mice+by+rapid+transesophageal+atrial+pacing%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Research+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Induction of atrial fibrillation in mice by rapid transesophageal atrial pacing.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (6), 452-460 (2002).</li>
<li>Verheule, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+vulnerability+to+atrial+fibrillation+in+transgenic+mice+with+selective+atrial+fibrosis+caused+by+overexpression+of+TGF-beta1%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Increased vulnerability to atrial fibrillation in transgenic mice with selective atrial fibrosis caused by overexpression of TGF-beta1.</a> Circulation Research. 94 (11), 1458-1465 (2004).</li>
<li>Faggioni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+spontaneous+ca+elevations+prevents+atrial+fibrillation+in+calsequestrin+2-null+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Arrhythmia+and+Electrophysiology%22%5BJournal%5D)">Suppression of spontaneous ca elevations prevents atrial fibrillation in calsequestrin 2-null hearts.</a> Circulation: Arrhythmia and Electrophysiology. 7 (2), 313-320 (2014).</li>
<li>Murphy, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+transesophageal+atrial+pacing+in+mice+to+detect+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Optimizing transesophageal atrial pacing in mice to detect atrial fibrillation.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 332 (1), 36-43 (2022).</li>
<li>Prinsen, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+reactive+isolevuglandins+promote+atrial+fibrillation+caused+by+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22JACC%3A+Basic+to+Translational+Science%22%5BJournal%5D)">Highly reactive isolevuglandins promote atrial fibrillation caused by hypertension.</a> JACC: Basic to Translational Science. 5 (6), 602-615 (2020).</li>
<li>Aschar-Sobbi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+atrial+arrhythmia+susceptibility+induced+by+intense+endurance+exercise+in+mice+requires+TNF%CE%B1%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Increased atrial arrhythmia susceptibility induced by intense endurance exercise in mice requires TNFα.</a> Nature Communications. 6, 6018(2015).</li>
<li>Bruegmann, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+termination+of+atrial+fibrillation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Optogenetic termination of atrial fibrillation in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (5), 713-723 (2017).</li>
<li>Matsushita, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-1%CE%B2+plays+an+important+role+in+pressure+overload-induced+atrial+fibrillation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+and+Pharmaceutical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">IL-1β plays an important role in pressure overload-induced atrial fibrillation in mice.</a> Biological and Pharmaceutical Bulletin. 42 (4), 543-546 (2019).</li>
<li>Sato, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+overexpression+of+perilipin+2+induces+atrial+steatosis%2C+connexin+43+remodeling%2C+and+atrial+fibrillation+in+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cardiac overexpression of perilipin 2 induces atrial steatosis, connexin 43 remodeling, and atrial fibrillation in aged mice.</a> American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 317 (6), 1193-1204 (2019).</li>
<li>Li, N., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+electrical+stimulation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Programmed electrical stimulation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (39), e1730(2010).</li>
<li>Yao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+cardiomyocyte+NLRP3+inflammasome+signaling+promotes+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Enhanced cardiomyocyte NLRP3 inflammasome signaling promotes atrial fibrillation.</a> Circulation. 138 (20), 2227-2242 (2018).</li>
<li>Purohit, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidized+Ca2%2B%2Fcalmodulin-dependent+protein+kinase+II+triggers+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Oxidized Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II triggers atrial fibrillation.</a> Circulation. 128 (16), 1748-1757 (2013).</li>
<li>Jansen, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atrial+fibrillation+in+aging+and+frail+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Arrhythmia+and+Electrophysiology%22%5BJournal%5D)">Atrial fibrillation in aging and frail mice.</a> Circulation: Arrhythmia and Electrophysiology. 14 (9), 01077(2021).</li>
<li>Luo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+atrial+histopathological+and+electrophysiological+changes+in+a+mouse+model+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Characterization of atrial histopathological and electrophysiological changes in a mouse model of aging.</a> International Journal of Molecular Medicine. 31 (1), 138-146 (2013).</li>
<li>McCauley, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channel+and+structural+remodeling+in+obesity-mediated+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Arrhythmia+and+Electrophysiology%22%5BJournal%5D)">Ion channel and structural remodeling in obesity-mediated atrial fibrillation.</a> Circulation: Arrhythmia and Electrophysiology. 13 (8), 00896(2020).</li>
<li>Kato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+analysis+of+heart+rate+variability+during+isoflurane+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Spectral analysis of heart rate variability during isoflurane anesthesia.</a> Anesthesiology. 77 (4), 669-674 (1992).</li>
<li>Schmeckpeper, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abstract+11402%3A+Targeting+RyR2+to+suppress+ventricular+arrhythmias+and+improve+left+ventricular+function+in+chronic+ischemic+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Abstract 11402: Targeting RyR2 to suppress ventricular arrhythmias and improve left ventricular function in chronic ischemic heart disease.</a> Circulation. 144, Suppl_1 11402(2021).</li>
<li>Kim, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abstract+B-PO01-017%3A+RyR2+hyperactivity+promotes+susceptibility+to+ventricular+tachycardia+in+structural+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Rhythm%22%5BJournal%5D)">Abstract B-PO01-017: RyR2 hyperactivity promotes susceptibility to ventricular tachycardia in structural heart disease.</a> Heart Rhythm. 18, Suppl_8 57(2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Transözofageal atriyal pacing sadece aynı hayvanda seri çalışmalara izin vermekle kalmaz, aynı zamanda süresi tipik olarak intrakardiyak çalışmalardan (~ 20 dakika) daha kısadır, böylece anestezik kullanımı ve elektrofizyolojik parametreler üzerindeki etkilerini en aza indirir. 
Her bir fare modeli için yöntemleri başlangıçta optimize etmek çok önemlidir. Yaşlanma, normal farelerde AF indüklenebilirliğiniarttırır 18,19 ve bireysel gene...

Atriyal fibrilasyon (AF), çoklu edinsel ve genetik risk faktörleri için son ortak yolu temsil eder. AF substratının patofizyolojik mekanizmalarını araştıran çalışmalar için, fare modelleri, genetik manipülasyonun kolaylığı ve genel olarak, farklı klinik fenotipler 1,2,3 için insanlarda gözlenen AF duyarlılığını yeniden ürettikleri gerçeği göz önüne alındığında avantajlıdır. Bununla birlikte, fareler nadiren spontan AF4 geliştirir ve bu da provokatif atriyal pacing çalışmalarının kullanılmasını gerektirir.
Programlanmış elektriksel stimülasyon (PES), intrakardiyak5 veya transözofageal6 pacing kullanılarak murin atriyal elektrofizyolojisini ve AF duyarlılığını değerlendirmek için yapılabilir. Transözofageal yaklaşım bir sağkalım prosedürü olarak özellikle avantajlı olsa da, kullanımı çok sayıda yayınlanmış deneysel protokol 7,8 ve tekrarlanabilirliği engelleyebilecek değişkenlik kaynakları9 ile karmaşıktır. Ayrıca, sınırlı rapor edilen protokol karşılaştırmaları, uygun bir pacing protokolünün seçilmesini zorlaştırmaktadır.
Mevcut protokol, tekrarlanabilirliği artırmak amacıyla murin AF duyarlılığını değerlendirmek için modele özgü transözofageal PES yöntemleri geliştirmek için sistematik bir strateji kullanmayı amaçlamaktadır. Daha da önemlisi, yaş, cinsiyet ve pacing modu değişkenliğini hesaba katarak pacing protokolünü optimize etmek için ilk pilot çalışmalar yapılır ve sonuçları karıştırabilecek yanlışlıkla parasempatik stimülasyonu en aza indirmek için tasarlanmış pacing9.

<table><tbody><tr><td>27 G EKG elektrotları</td><td>ADInstruments</td><td>MLA1204</td><td></td></tr><tr><td>2-F oktapolar elektrot kateteri</td><td>NuMED</td><td>CIBercath</td><td></td></tr><tr><td>Aktif karbon bidonu</td><td>VetEquip</td><td>931401</td><td></td></tr><tr><td>Analiz yazılımı</td><td>ADInstruments</td><td>LabChart v8.1.13</td><td></td></tr><tr><td>Biyolojik amplifikatör</td><td>ADInstruments</td><td>FE231</td><td></td></tr><tr><td>Verileri satın alma</td><td>donanımı ADInstruments</td><td>PowerLab 26T</td><td></td></tr><tr><td>Göz merhemi</td><td>MWI Veteriner</td><td>NC1886507</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Braintree Scientific</td><td>DPIP</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Piramal</td><td>66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>Stimülatör</td><td>Bloom Associates</td><td>DTU-210</td><td></td></tr><tr><td>Uyaran İzolatör</td><td>Dünyası Hassas Aletler</td><td>Ürün Kodu: A365</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde atriyal fibrilasyon duyarlılığını değerlendirmek için transözofageal atriyal pacing'in optimizasyonu

Optimization of Transesophageal Atrial Pacing to Assess Atrial Fibrillation Susceptibility in Mice

Atriyal fibrilasyon (AF) için genetik ve edinilmiş risk faktörlerinin fare modelleri, AF'nin moleküler belirleyicilerinin araştırılmasında değerli olduğunu kanıtlamıştır. Programlanmış elektriksel stimülasyon, hayatta kalma prosedürü olarak transözofageal atriyal pacing kullanılarak gerçekleştirilebilir, böylece aynı hayvanda seri test yapılabilir. Bununla birlikte, tekrarlanabilirliği zorlaştıran çok sayıda pacing protokolü vardır. Mevcut protokol, çalışmalar arasında tekrarlanabilirliği artırmak için modele özgü deneysel parametreler geliştirmek için standartlaştırılmış bir strateji sağlamayı amaçlamaktadır. Çalışma sırasındaki yaş, cinsiyet ve pacing protokolünün parametreleri (örneğin, pacing modu ve AF duyarlılığının tanımı) dahil olmak üzere, incelenen spesifik model için deneysel yöntemleri optimize etmek için ön çalışmalar yapılır. Önemli olarak, yüksek uyaran enerjilerinden kaçınmak için özen gösterilir, çünkü bu, gangliyonik pleksi'nin yanlışlıkla parasempatik aktivasyonla uyarılmasına neden olabilir, pacing sırasında abartılı atriyoventriküler (AV) blok ile kendini gösterir ve genellikle yapay AF indüksiyonu ile ilişkilidir. Bu komplikasyonu gösteren hayvanlar analizin dışında tutulmalıdır.

Transözofageal atriyal pacing çalışmaları, SNRT ve AVERP'nin yanı sıra AF duyarlılığını 6'yı belirleyerek SA ve AV düğümlerinin elektrofizyolojik özelliklerinideğerlendirir (Şekil 1). EKG kaydı, P dalga süresi, PR aralığı, QRS süresi ve QT / QTc aralıklarının ölçülmesini sağlar. Hızlı atriyal pacing sırasında EKG'nin sürekli kaydedilmesi, AF kırılganlığının aşağıdaki ölçümlerini sağlayabilir: çalışma sırasında indüklenen bölüm sayısı, bölümlerin kümülatif ve ortalama ...

Mevcut protokol, farelerde atriyal fibrilasyon duyarlılığını değerlendirmek için transözofageal atriyal pacing kullanıldığında deneysel parametrelerin optimizasyonunu açıklamaktadır.

Farelerde Atriyal Fibrilasyon Duyarlılığını Değerlendirmek için Transözofageal Atriyal Pacing'in Optimizasyonu

Mouse models of genetic and acquired risk factors for atrial fibrillation (AF) have proven valuable in investigating the molecular determinants of AF. ...

Transözofageal atriyal pacing kullanılarak programlanmış elektriksel stimülasyon, farelerde elektrofizyolojik özellikleri ve atriyal fibrilasyona duyarlılığı belirleyebilir. Burada, tekrarlanabilirliği optimize edebilen protokol geliştirme için standartlaştırılmış bir prosedür açıkladık. Atriyal pacing için transözofageal yaklaşım tipik olarak bir hayatta kalma prosedürüdür, böylece aynı hayvanda seri test yapılmasını sağlar.Protokol geliştirme için önemli bileşenler arasında, incelenen model için deneysel parametreleri optimize etmek için ilk palet çalışmaları ve pacing kaynaklı parasempatik stimülasyonun neden olduğu aritmilerin tanımlanması yer almaktadır. Genetik modeller için, fareleri AF duyarlılığının optimal periyodunu belirlemek için sekiz haftalıktan başlayarak iki haftada bir atriyal pacing'e maruz bırakır, her iki cinsiyeti de AF fenotipi geliştiremeyeceği için inceler. Edinilen modeller için, fareler fiziksel olgunluğa ulaştıktan sonra pacing yapın.Olgunluk tipik olarak 12 haftada elde edilirken, deneysel modeller için yaşı gerektiği gibi ayarlayın. En uygun tempo modunu belirlemek için hem seri çekim hem de azaltma hızı gerçekleştirin. Her prosedürü en az 24 saat ayırın.AF duyarlılığının birden fazla tanımını kullanarak verileri analiz edin. Ek fareler üzerinde sonraki çalışmalar için optimize edilmiş modele özgü parametreleri ve AF duyarlılığının tanımını kullanın. Pedal refleksinin kaybından sonra, anestezi uygulanan fareyi, vücut ısısını yaklaşık 37 santigrat derecede tutmak için tasarlanmış bir ısıtma yastığı üzerinde, arka bacakları ped yüzeyine bantlanmış olarak sırtüstü pozisyonda yerleştirin.Biyolojik bir amplifikatöre bağlı 27 gauge EKG iğne elektrodunun ve veri toplama donanımının arka bacakta bir toprak elektrodu ile ön ayaklara deri altına yerleştirilmesiyle bir yüzey EKG kablosu elde edin. Yemek borusuna bir uyarıcıya ve uyaran izolatörü bağlı iki Fransız oktapolar elektrot kateteri yerleştirin. Boyun uzatılmış olarak ağızdan ksifoid kıkırdağın hemen üstüne kadar olan mesafeye yaklaşan bir derinliğe yerleştirin.Analiz yazılımını kullanarak EKG kurşununun sürekli kaydedilmesiyle veri toplamaya başlayın. Yakalamayı sağlamak için kateteri yemek borusu içinde uygun şekilde konumlandırın. Bunu yapmak için, sinüs döngüsü uzunluğundan biraz daha kısa bir döngü uzunluğunda iki milisaniyelik bir darbe genişliğine sahip 1.5 miliamperlik bir uyaran uygulayın.Tutarlı atriyal yakalama elde edilene kadar kateteri dikkatlice konumlandırın. Atriyal diyastolik yakalama eşiğini belirlemek için, atriyal yakalama için kullanılan döngü uzunluğunda iki milisaniyelik bir darbe genişliğine sahip 1,5 miliamperde pacing başlatın. Atriyal yakalama kaybına kadar uyaran genliğini 0,05 miliamperlik artışlarla azaltın ve ardından yakalamaya kadar artırın.Yanlışlıkla pacing kaynaklı parasempatik stimülasyonu en aza indirmek için mümkün olan en düşük pacing eşiğini elde edin. Uyaran genliğini eşiğin iki katına ayarlayın. AF indüksiyonu için hızlı atriyal pacing öncesinde sinüs düğümü iyileşme süresi, Wenckebach siklus uzunluğu ve atriyoventriküler etkili refrakter dönem dahil olmak üzere elektrofizyolojik parametreleri ölçün.Farklı döngü uzunluklarında patlama hızı veya ilk çalışmalardan belirlendiği gibi azaltılmış tempo kullanarak iki milisaniyelik darbe genişliğiyle eşiğin iki katı hızda tempo gerçekleştirin. Patlama hızı için, 15 saniye boyunca 50 milisaniyelik bir başlangıç döngüsü uzunluğunda tempo uygulayın, ardından 40, 30, 25, 20 ve 15 milisaniyelik döngü uzunluklarında trenler izleyin. Azalan tempo için, üç ila beş tren gerçekleştirin ve 20 milisaniyede sona erene kadar her iki saniyede iki milisaniye azaltılan 40 milisaniyelik bir döngü uzunluğunda tempo uygulayın.Son tempo trenini takiben 30 saniyelik sinüs ritminden sonra veya 10 dakikalık bir AF atağından sonra, hangisi önce gelirse, prosedürü sonlandırın. Kateter ve EKG elektrotlarını nazikçe çıkarın. Seri test durumunda, pacing prosedürünü tekrarlamadan önce en az 24 saat bekleyin.EKG Kaydı, P dalga süresi, PR aralığı, QRS süresi ve QT ve QTC aralıklarının ölçümlerini mümkün kıldı. Hızlı atriyal pacing sırasında EKG'nin sürekli kaydı, çalışma sırasında indüklenen her AF bölümünün kaydını sağladı. Bu verilerden, bölümlerin kümülatif ve ortalama süresi ve sürekli AF bölümlerinin sayısı kaydedildi.Pacing sırasında aşırı atriyoventriküler blok atakları, pacing kaynaklı parasempatik stimülasyon dönemlerini gösterir ve ilişkili herhangi bir AF'nin, modelin kendisinin patofizyolojisinden ziyade bu fenomenin bir eseri olduğunu gösterir. Bu, arka sol atriyumda bulunan gangliyonik pleksi'nin yanlışlıkla uyarılmasından kaynaklandı ve parasempatik aktivasyonla sonuçlandı. Bu tip aritmi indüksiyonu, kontrol farelerinde AF insidansını arttırır ve bir deney grubunda daha fazla aritmi değişkenliğine neden olur.Bu kirletici özellikler göz önüne alındığında, bu koşullar altında AF yaşayan hayvanlar analizin dışında tutulmalıdır. Bu deneysel stratejiyi kullanırken, ilk pilot çalışmalar ve yanlışlıkla AF indüksiyonuna neden olan parasempatik stimülasyonun tanınması, protokol optimizasyonu ve çalışma tekrarlanabilirliği için özellikle önemlidir.

optimization-transesophageal-atrial-pacing-to-assess-atrial

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Programlı elektrik stimülasyonu, kalp iletim özellikleri belirlemek için yeteneği ve çeşitli pacemaker protokolleri kullanarak kardiyak aritmiler neden ve sona erdirme imkanı sağlar. Transvenöz bir kateter yardımıyla, intrakardiyak elektrogram kayıtları, programlı elektrik stimülasyonu protokolleri aritmojenik substratlar tanımlamak için aşağıdaki farelerde elde edilebilir.

Farelerde Programlı Elektrik Stimülasyon

Burada, bir yüksek uzaysal ve zamansal çözünürlükte, farenin sağ atrium ve özellikle Çin-atriyal düğümden elektriksel aktivitenin optik haritalama için bir protokol mevcut.

Fare Çin-atriyal düğüm yüksek çözünürlüklü optik Haritalama

Bu iletişim kuralı ile yüksek zamansal ve mekansal çözünürlüklü, membran gerilim çift kayıtları da dahil olmak üzere bir optik haritalama sistemi kullanan fare Kulakçık Elektrofizyolojik değerlendirme açıklar ve Ca2 + geçici altında programlanmış stimülasyon özel elektrot kateter aracılığıyla.

Yüksek çözünürlüklü optik eşleştirmenin fare Atria Elektrofizyolojik değerlendirme

Burada, temel EKG parametreleri ve yaygın aritmiler için murin uzun süreli elektrokardiyografi (EKG) verilerini analiz etmek için yarı otomatik bir yaklaşım için adım adım bir protokol sunuyoruz. Veriler, canlı ve uyanık farelerde implante edilebilir telemetri vericileri tarafından elde edilir ve Ponemah ve analiz modülleri kullanılarak analiz edilir.

Farelerde Aritmileri Tespit Etmek için Uzun Süreli Elektrokardiyografi Kayıtlarının Analizi

Bu protokol, farelerdeki hız yapma kusurlarını tanımlamak için tüm sinoatriyal düğüm dokusunun mikroelekrod dizi kaydını kullanarak içsel kardiyak ateşleme hızını ölçmek için yeni bir metodoloji tanımlamayı amaçlamaktadır. Farmakolojik ajanlar, içsel tempo yapımı üzerindeki etkilerini incelemek için bu yöntemde de tanıtılabilir.

Farelerde İçSel Kardiyak Pacemaking Kusurlarını Belirlemek için Sinoatrial Düğüm Ateşleme Hızının Mikroelekrod Dizisi Kaydı

Atriyal miyopati ve atriyal fibrilasyonu (AF) incelemek için minidomuzlarda steril bir perikardit modeli tanımladık. Bu yazıda cerrahi ve anestezik teknikler, vasküler erişim stratejileri ve AF'nin indüklenebilirliğini incelemek için bir protokol sunulmaktadır.

Atriyal Miyopati ve Atriyal Fibrilasyon için Bir Model Olarak Aachener Minipiglerde Steril Perikardit

Bu çalışmada, sıçanlarda atriyal fibrilasyonun (AF) etkin indüksiyonu için transözofageal atriyal patlama pacing'in deneysel bir protokolü açıklanmaktadır. Protokol, sağlıklı veya yeniden şekillendirilmiş kalpleri olan sıçanlarda kullanılabilir, AF patofizyolojisinin incelenmesine, yeni terapötik hedeflerin belirlenmesine ve yeni terapötik stratejilerin değerlendirilmesine izin verir.

Sıçanlarda Atriyal Fibrilasyon İndüksiyonu için Transözofageal Atriyal Patlama Pacing

Bu çalışmada, preklinik çalışmalarda yapay pacing ve kalp yetmezliği gelişimi için kullanılabilecek uzun süreli kardiyak pacing'in minimal invaziv leporin modeli sunulmaktadır.

Kronik Kardiyak Pacing'in Translasyonel Tavşan Modeli

Mevcut protokol, kalp yetmezliğinin fare modellerinde diyastolik fonksiyonun değerlendirilmesinde değerli bir araç olarak hizmet eden transözofageal pacing yoluyla basınç-hacim ilişkisinin elde edilmesini açıklamaktadır.

Murin Kalp Yetmezliği Modellerinde Kalp Hızına Bağlı Diyastolik Fonksiyonların Değerlendirilmesi için Pacing Kontrollü Bir Prosedür

Sağ kalp yetmezliği (RHF), ventriküler ve atriyal fonksiyon bozukluğuna yol açan sağ taraflı kardiyak dilatasyon ve hipertrofi ile karakterizedir. RHF ile ilişkili kardiyopulmoner durumlara kardiyak aritmi riskinde artış eşlik eder. Bu makale, gelişmiş ventriküler ve atriyal aritmogenez ile ilişkili pulmoner arter bantlamasına bağlı RHF'nin standart bir modelini açıklamaktadır.

Pulmoner Arter Bantlaması Kullanılarak Sağ Taraflı Kardiyak Yeniden Şekillenme ve Aritminin Sıçan Modeli

Keşfedin farelerde atriyal fibrilasyon duyarlılığını değerlendirmek için transözofageal atriyal pacing optimizasyonunu. Bu yöntem aynı hayvanda tekrarlanan testlere olanak tanıyarak sonuçların tekrarlanabilirliğini artırır.

Farelerde Atriyal Fibrilasyon Duyarlılığını Değerlendirmek için Transözofageal Atriyal Pacing'in Optimizasyonu

Daha fazla video keşfet