Name: Çağdaş Aseptik Teknik, Anestezi ve Analjezi Standartlarına Uygun Modifiye Murin Heterotopik Kalp Nakli Protokolü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-28T13:20:00.000+00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Öğrenin, modifiye edilmiş murin heterotopik kalp nakli tekniği ile mikrocerrahi becerilerinizi geliştirin ve genetik olarak modifiye edilmiş fare soylarını kullanarak transplantasyon bağışıklığını araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Batı Avustralya Üniversitesi hayvan bakım personelinin ve Harry Perkins Tıbbi Araştırma Enstitüsü'nün özveri ve uzmanlıklarının bu ameliyatların fizibilitesine ve başarısına katkıda bulunan mükemmel çabalarını kabul etmek isterler.

<ol><li>Mann, F. C., Priestley, J. T., Markowitz, J., Yater, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+the+intact+mammalian+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Transplantation of the intact mammalian heart.</a> Archives of Surgery. 26 (2), 219-224 (1933).</li>
<li>Neptune, W. B., Cookson, B. A., Bailey, C. P., Appler, R., Rajkowski, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complete+homologous+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22A.M.A.+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Complete homologous heart transplantation.</a> A.M.A. Archives of Surgery. 66 (2), 174-178 (1953).</li>
<li>Downie, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homotransplantation+of+the+dog+heart%5BTitle%5D)+AND+%22A.M.A.+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Homotransplantation of the dog heart.</a> A.M.A. Archives of Surgery. 66 (5), 624-636 (1953).</li>
<li>Blanco, G., Adam, A., Rodriguezperez, D., Fernandez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complete+homotransplantation+of+canine+heart+and+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22A.M.A.+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Complete homotransplantation of canine heart and lungs.</a> A.M.A. Archives of Surgery. 76 (1), 20-23 (1958).</li>
<li>Abbott, C. P., Lindsey, E. S., Creech, O., Dewitt, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+heart+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">A technique for heart transplantation in the rat.</a> Archives of Surgery. 89, 645-652 (1964).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 57 (2), 225-229 (1969).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D%2C+H-2K%2C+and+non-H-2+antigens+in+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).</li>
<li>Joffre, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+acute+and+chronic+allograft+rejection+with+CD4%2BCD25%2BFoxp3%2B+regulatory+T+lymphocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Prevention of acute and chronic allograft rejection with CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T lymphocytes.</a> Nature Medicine. 14 (1), 88-92 (2008).</li>
<li>Gregori, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+T+cells+induced+by+1+alpha%2C25-dihydroxyvitamin+D3+and+mycophenolate+mofetil+treatment+mediate+transplantation+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Regulatory T cells induced by 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3 and mycophenolate mofetil treatment mediate transplantation tolerance.</a> The Journal of Immunology. 167 (4), 1945-1953 (2001).</li>
<li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice%3A+Experience+of+3000+operations+by+one+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: Experience of 3000 operations by one surgeon.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li>
<li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).</li>
<li>Hoogstraten-Miller, S. L., Brown, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+in+aseptic+rodent+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Techniques in aseptic rodent surgery.</a> Current Protocols in Immunology. 82, 1-14 (2008).</li>
<li>Navarro, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+anesthesia%3A+The+art+and+science%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Mouse anesthesia: The art and science.</a> ILAR Journal. , (2021).</li>
<li>Adams, S., Pacharinsak, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+anesthesia+and+analgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Mouse+Biology%22%5BJournal%5D)">Mouse anesthesia and analgesia.</a> Current Protocols in Mouse Biology. 5 (1), 51-63 (2015).</li>
<li>Australian code for the care and use of animals for scientific purposes. NHMRC. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nhmrc.gov.au/about-us/publications/australian-code-care-and-use-animals-scientific-purposes">https://www.nhmrc.gov.au/about-us/publications/australian-code-care-and-use-animals-scientific-purposes</a> (2013).</li>
<li>Prosser, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+changes+to+tissue-resident+immunity+after+MHC-matched+and+MHC-mismatched+solid+organ+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Dynamic changes to tissue-resident immunity after MHC-matched and MHC-mismatched solid organ transplantation.</a> Cell Reports. 35 (7), 109141(2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak çıkar çatışmaları yoktur.

Murin ortotopik kalp nakli modeli, öncelikle MHC uyumsuzluğunun immünolojik rejeksiyonun seviyesi ve doğası üzerindeki etkilerini ve daha yakın zamanda transplantasyonun greft dokusunda yerleşik bağışıklığın tutulması üzerindeki etkisini araştırmak için kullanılan sağlam bir klinik öncesi modeldir16. Başlangıçta Corry ve ark.7 protokolünü yakından takip ederken, protokolü aseptik teknik, analjezi ve anestezinin en iyi uygulama standartlarını içerecek şekilde geliştirdik. Bu...

İmmünoloji ve transplantasyon anlayışımızın çoğunu, hayvan denekleri kullanarak katı organ naklinin deneysel modellerine dayanan araştırmalara borçluyuz. Memelilerde vaskülarize kalp transplantasyonunun ilk tanımından bu yana1, bu tür modeller, hipotermi2'nin terapötik uygulaması, özel sütürlerin kullanılmasının faydaları3 ve toplam akciğer ve kalp homotransplantasyonları için teknikler4 dahil olmak üzere geniş kapsamlı alanlarda bilgiye katkıda bulunmuştur. Sıçanlarda kardiyak transplantasyon modellerinin geliştirilmesi 5,6, farklı üreme hatlarının mevcudiyeti nedeniyle immünolojik deneyler için daha geniş bir kapsam sağlamıştır. Mevcut akraba ve mutant fare suşlarının önemli ölçüde daha geniş yelpazesi, Corry ve ark.7'yi, bu aralığın transplantasyon araştırmalarına getirdiği önemli avantajlar nedeniyle bir murin heterotopik kardiyak transplantasyon tekniği geliştirmeye yönlendirmiştir. Bu model yaygın olarak kullanılmaktadır ve greft reddi8 ve terapötikler9'un daha iyi anlaşılmasına katkıda bulunmuştur. Bununla birlikte, ilk tanımından bu yana, teknik, anastomoz bölgelerinin konumundaki ayarlamalar gibi bazı küçük teknik detaylar dışında büyük ölçüde değişmeden kalmıştır10,11.
Corry ve ark.7 tekniğinin deneylerimize entegrasyonundan bu yana, protokolün iyileştirilmesi için umut vaat edilen alanları, yani aseptik teknik, anestezi ve analjezi alanlarını belirledik. Bu alanlardaki gelişmelerin deneysel sonuçlar üzerinde olumlu bir etki yaratması ve hayvan refahını iyileştirmesi bekleniyordu. Bu daha önce küçük hayvan ameliyatlarında aseptik teknik kullanıldığında gösterilmiştir, çünkü postoperatif enfeksiyonların azaltılmasına yardımcı olur12, bu sadece morbidite ve mortaliteyi etkilemekle kalmaz, aynı zamanda transplantasyon cerrahisini takiben bağışıklık tepkisini değerlendirmek için tasarlanmış deneyleri de tehlikeye atabilir. Anestezi ve analjezik bakış açısından, rafine bir rejimin kullanılması, hayvanlara maliyeti düşürmeye ve deneysel deneklerin acı ve ıstırabını hafifleterek bu cerrahi modelin etik argümanını dengelemeye yardımcı olur. Ayrıca, uygun anestezi ve analjezi, ağrıya bağlı stres yanıtını sınırlar, postoperatif iyileşmenin kalitesini arttırır ve sonuçta cerrahi başarı oranını arttırır13.
Hem hayvan refahını hem de deneysel sonuçları iyileştirmek amacıyla, bu boşlukları kapatmak için ayarlamalar içeren bir protokol geliştirilmiştir. Bu protokol, Corry ve ark.7 tarafından orijinal olarak tanımlananlardan bir veteriner anestezistinden konsültasyonla ve anestezik ve analjezik rejimde kullanılan farmakolojik müdahalelerin hem etkileri hem de etkilerinin süresi dikkate alınarak uyarlanmıştır. Yaklaşım, uygun perioperatif bakımı sağlamak için dengeli anestezi ve multimodal analjezi prensiplerine dayanıyordu14. Aseptik tekniğin uygulanmasına ek olarak, opioid buprenorfin ve lokal anestezik bupivakain önleyici olarak uygulandı. Genel anestezi inhalan anestezik ajan izofluran kullanılarak yapıldı.

<table><tbody><tr><td>2030 Rycroft sulama kanülü 30 G</td><td>McFarlane</td><td>56005HU</td><td></td></tr><tr><td>Örgülü cerrahi ipek 7-0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bulldog kelepçesi kavisli - 35 mm&nbsp;</td><td>Roboz</td><td>RS-7441-5</td><td></td></tr><tr><td>Bupivakain% 0.25&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo iğne tutucu mandalı kavisli -&nbsp; 145 mm</td><td>Haag-Streit</td><td>11.62.15</td><td></td></tr><tr><td>Klorheksidin %5 çözelti</td><td>Ebos</td><td>JJ61371</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatör - 7,5 cm</td><td>Dove</td><td>SN109510</td><td></td></tr><tr><td>Etanol %70 çözelti</td><td>Ebos</td><td>WH130192EE</td><td></td></tr><tr><td>Gazlı bez 5 x 5 cm beyaz</td><td>Aero</td><td>AGS50</td><td></td></tr><tr><td>Jel Köpük 80 mm x 125 mm&nbsp;</td><td>Pfizer</td><td>7481D</td><td></td></tr><tr><td>Saç kesme makinesi</td><td>Wahl</td><td>9860L</td><td></td></tr><tr><td>Heparin 1,000 IU 1 mL</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iris SuperCut makas düz - 11,5 cm&nbsp; &nbsp;</td><td>İnka Cerrahi&nbsp;</td><td>11550.11</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran buharlaştırıcı</td><td>Darvall</td><td>9176</td><td></td></tr><tr><td>Mikro bulldog kelepçesi - 3,7 cm</td><td>Greman</td><td>14119-G</td><td></td></tr><tr><td>Mikro makas kavisli 105 mm&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikro gözenekli düz kağıt cerrahi bant - 2,5 cm genişliğinde</td><td>Ebos</td><td>7810L</td><td></td></tr><tr><td>Mikrocerrahi makas - kavisli uçlu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Monofilament polipropilen sütür - 5/0</td><td>Surgipro</td><td>P-205-X</td><td></td></tr><tr><td>Myweigh i101 Hassas Tartı 100 g x 0,005 g</td><td>Myweigh</td><td>Kit00053</td><td></td></tr><tr><td>İğne - 30 G x 0,5 inç</td><td>BD</td><td>BD304000</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu 15 cm kavisli "süper ince"</td><td>Cerrahi Uzmanları</td><td>ST-B-15-8.2</td><td></td></tr><tr><td>Nylene 10/0 x 15 cm 3.8 mm 3/8 daire yuvarlak gövdeli konik (çap 0.07mm) CV300</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yuvarlak gövde sütür forseps kavisli 0.3 mm 120 mm</td><td>B. Braun</td><td>FD281R</td><td></td></tr><tr><td>Yuvarlak gövde sütür forseps düz 0.3 mm 120 mm</td><td>B. Braun</td><td>FD280R</td><td></td></tr><tr><td>Yuvarlak saplı vannalar yaylı makas-str/12,5 cm</td><td></td><td>15400-12</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı makas-Cvd Sm bıçakları</td><td></td><td>15001-08</td><td></td></tr><tr><td>Stevens makas künt düz 110 mm</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi arkalık</td><td></td><td></td><td>Sert lamine karton. 15 x 15 cm</td></tr><tr><td>Cerrahi örtüler</td><td></td><td></td><td>İki boyutta kesin. 25 cm x 25 cm ve 25 cm x 40 cm&nbsp;</td></tr><tr><td>Cerrahi mikroskop</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Şırınga - 1 mL</td><td>BD</td><td>592696</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga - 3 mL</td><td>Leica</td><td>M651</td><td></td></tr><tr><td>Dişli forseps</td><td>BD</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>Wisconsin Üniversitesi Çözümü</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isıtma pedi</td><td></td><td></td><td>Uzak kızılötesi ısıtma pedi 20 x 25 cm</td></tr><tr><td>Westcott yaylı makas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yaşargil klips uygulayıcı süngü</td><td>Aesculap</td><td>FE582K</td><td></td></tr><tr><td>Yaşargil titanyum klips perma 6.6 mm</td><td>Aesculap</td><td>A19FT222T</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Fare kullanımı</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Gerginlik/SEX/Ağırlık</güçlü</td><td>><güçlü>Donör</güçlü><</td><td>güçlü>Tarifçi</güçlü></td><td></td></tr><tr><td>BALB/c, dişi, 19-23 g</td><td>7</td><td>21</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6, dişi, 17-20 g</td><td>7</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CD45.1 BALB/c, dişi, 17-21 g</td><td>5</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Çağdaş aseptik teknik, anestezi ve analjezi standartlarına uygun modifiye murin heterotopik kalp nakli protokolü

A Modified Murine Heterotopic Heart Transplant Protocol Matching Contemporary Standards of Aseptic Technique, Anesthesia, and Analgesia

Hayvanlarda deneysel kalp nakli modellerinin geliştirilmesi, immünoloji ve solid organ transplantasyonu alanlarında birçok ilerlemeye katkıda bulunmuştur. Heterotopik vaskülarize murin kardiyak transplantasyon modeli başlangıçta uyumsuz inbred fare suşlarının kombinasyonları kullanılarak greft reddi çalışmalarında kullanılırken, genetiği değiştirilmiş suşlara ve terapötik modalitelere erişim güçlü yeni klinik öncesi anlayışlar sağlayabilir. Temel olarak, bu tekniğin cerrahi metodolojisi, özellikle cerrahi sonrası morbidite ve mortalite üzerinde maddi etkiler yaratan aseptik teknik, anestezi ve analjezi gibi önemli faktörler açısından, geliştirilmesinden bu yana değişmemiştir. Ek olarak, perioperatif yönetimdeki gelişmelerin hem hayvan refahında hem de deneysel sonuçlarda iyileşmeler sağlaması beklenmektedir. Bu yazıda veteriner anestezi alanında uzman bir konu ile işbirliği içinde geliştirilen bir protokol sunulmakta ve perioperatif yönetime vurgu yapılarak cerrahi teknik anlatılmaktadır. Ek olarak, bu iyileştirmelerin etkilerini tartışıyoruz ve bu prosedür için kritik cerrahi adımların giderilmesi hakkında ayrıntılı bilgi veriyoruz.

Cerrahi tekniğin yara iyileşmesi ve fare iyileşmesinin iyi sonuçlarını teşvik etmedeki etkinliğini belirlemek için, laboratuvardaki erken deneyler, alıcıya değişken immünojeniteye sahip bir dizi kalp greftinin hayatta kalma özelliklerini belirlemiştir. Bunlar, alıcı ile aynı majör histokompatibilite kompleksi (MHC) belirteçlerini paylaşan konjenik (n = 5) ve sinjenik (n = 5) greftleri ve greft ile alıcının farklı MHC belirteçlerine sahip olduğu majör uyumsuzluk greftlerini (n = 9) içeriyordu. Devam eden greft fonksiyonun...

Bu yazıda heterotopik vaskülarize kardiyak transplantasyon için modifiye edilmiş bir teknik, güncel aseptik teknik, analjezi ve anestezi anlatılmaktadır.

Çağdaş Aseptik Teknik, Anestezi ve Analjezi Standartlarına Uygun Modifiye Murin Heterotopik Kalp Nakli Protokolü

The development of experimental models of cardiac transplantation in animals has contributed to many advances in the fields of immunology and solid organ ...

Bu, kardiyak transplantasyonun ekonomik ve tekrarlanabilir bir modelidir. Hem mikrocerrahi becerilerini geliştirmek hem de genetiği değiştirilmiş fare suşlarının donör veya alıcı olarak kullanılmasına izin vermek için kullanılabilir. Bu teknik, ameliyat sonrası morbiditeyi sınırlamak için normal insan cerrahisinin tüm ağrı yönetimini ve anestezik karmaşıklığını geniş ölçüde içerir.Bu model, cerrahi olarak indüklenen bağışıklığı, uyumsuzluğun nakil reddi üzerindeki etkisini ve nakil ömrünü incelemek için kritik öneme sahiptir. Bu modelin genel cerrahi yaklaşımları, diğer fare solid organ nakillerine modifiye edilmiş bir biçimde uygulanabilir. Mikroskobik ölçek ve ilişkili zaman kısıtlamaları küçük bir hata payı bırakır.Başarının anahtarı, zorluk alanları hakkında özel geri bildirim sağlayan, profesyonel denetimle düzenli olarak pratik yapmaktır. Prosedürü gösteren, laboratuvarımdan bir araştırma görevlisi olan Bayan Liu Liu olacak. Cerrahi prosedürlere yardımcı olacak Dr.Wen Hua Huang, Bayan Jas Kaur ve Bayan Xiao Zhang olacaktır.Anestezi uyguladıktan ve fareyi indüksiyon odasından çıkardıktan sonra, makas kullanarak ventral karnı yakından tıraş ederek saçları çıkarın. Donörün durumunda, cinsel organdan ventral toraksın üst kenarına kadar uzanan alanı tıraş edin. Tıraş edilen alanın lateral olarak orta aksiller çizgiye ulaştığından emin olun.Hayvanın rektumuna temiz bir yağlanmış rektal prob yerleştirerek ve daha sonra mikropor bandı kullanarak ameliyat tahtasına sabitleyerek sıcaklığı izleyin. Travmatik forseps, palpebral refleks ve kas tonusu tarafından uygulanan basınçtan pençe veya kuyruğun uyarılmasına verilen yanıtları gözlemleyerek anestezik derinliği değerlendirin. Gelgit hacmini değerlendirmek için solunum çabasını gözlemlerken göğüs duvarı hareketini gözlemleyerek solunum hızını ölçün ve ardından makalede açıklandığı gibi solunum hızını hesaplayın.Cerrahi bölge steril pamuk uçlu aplikatörler kullanılarak dezenfekte edildikten sonra, klorheksidini cerrahi bölge merkezinden kenarlara üç kez dairesel bir hareketle uygulayın, ardından aynı desende klorheksidin ve etanol kombinasyonu uygulayın. Steril aletlerin yerleştirileceği yer olarak cerrahi tahtanın her iki tarafına steril cerrahi örtüler yerleştirerek cerrahi alanı hazırlayın. Örtüde oval şekilli küçük bir açıklık yaptıktan sonra, federe örtüyü önerilen insizyon bölgesine yerleştirin.Hayvanı daha önce gösterildiği gibi hazırladıktan sonra, göz yağlayıcısı uygulayın. Planlanan insizyon bölgesi boyunca 29 gauge'lik bir insülin şırıngası kullanarak, deri altından ventral karın içine ağırlık bazlı bir bupivakain dozu enjekte edin ve planlanan insizyonun kapsamını kapsayan düz bir görünür lekelenme çizgisi arayın. Daha sonra, sekiz kat büyütme altında ventral orta hat cilt insizyonu yapmak için steril bir cerrahi neşter bıçağı kullanın.Laparotominin alt karın bölgesini kostal marja kadar uzattığından emin olun. Ve cerrahi alanı en üst düzeye çıkarmak için bir retraktör yerleştirin. Steril gazlı bez segmentini% 0.9 oranında ısıtılmış sodyum klorür çözeltisi ile nemlendirin ve cerrahi bölgenin üstün yönüne yerleştirin.Şimdi, bağırsakları nazikçe boşaltmak için nemlendirilmiş steril pamuk tomurcukları kullanın. Onları bu gazlı bezin üzerine yerleştirin ve gazlı bezi organın etrafına sarın. Pamuk uçlu aplikatörler ve yuvarlak vücut sütür forsepslerinin bir kombinasyonunu kullanarak, abdominal aort ve inferior vena kavayı künt diseksiyon tekniği ile çevre dokulardan serbest bırakın ve mobilize edin.Açıklık alanının damarların infrarenal yönü arasında ve aortun çatallanmasının üzerinde olduğundan emin olun. Posterior abdominal damarları tanımladıktan sonra, forseps kullanarak aortu vertebral kolondan uzak bir yönde yavaşça çekin. Kavisli forsepsleri posteriordan karın damarlarına geçirerek bu damarların her iki tarafına sefalokodal olarak bir kanal açın.Ligate her damar planlanan anastomoz bölgesinde tanımlanmış ve aktive edilmiştir, aletlerle bağlanmış 10-O naylon uzunlukları kullanılarak cerrahın düğümlerine bir ek atışla bağlanmıştır. Karın damarının başına ve coddle uçlarına cerrahi bir kelepçe takarak anastomoz bölgesini dolaşımdan izole edin. Kelepçelerin tam tıkanmayı sağlamak için her iki damarı da yeterli derecede geçtiğinden emin olun.Aortu sabitlemek için baskın olmayan elde forseps kullanın. Aortun ön tarafında 30 gauge iğne kullanarak aortotomi yapın. Aortotomiyi düz uçlu mikrocerrahi makas kullanarak uzatın.Adendotomi yapmak için düz forseps kullanın ve aortotominin ortasına uygun noktada inferior vena kavaya nazik anterior traksiyon uygulayın. Aortotomiye eşit uzunlukta inferior vena kava segmentini çıkarmak için içbükey tarafı önden bakacak şekilde kavisli mikrocerrahi makas kullanın. Kalan kanın açık damarlarının iç kısımlarını heparinize sodyum klorür çözeltisi ile yıkayın.Donör kalbi karın içine yerleştirin ve yükselen aortun doğrudan abdominal aortotominin yanında olduğundan ve kalbin döndürüldüğünden emin olun, böylece pulmoner arter ikinci anastomoz için çekilebilir. 10-O naylon kullanarak, aortotominin 12: 00 pozisyonu ile yükselen aortun lümeninin karşılık gelen ekstremitesi arasına bir konaklama sütürü yerleştirin. Bir mikrocerrahi iğne tutucuda düz uçlu forseps kullanarak, bir cerrahın düğümünün sonraki üç atışıyla bağlayın ve yaklaşık iki milimetre dikiş bırakmak için uçları kesin.Aortotominin 6:00 pozisyonu ile çıkan aortun karşılık gelen yönü arasına ikinci bir kalış sütürü yerleştirin. Bu dikiş aynı zamanda sonraki koşu dikişleri için temel görevi göreceğinden, nihai bağlantı için kuyruğun en az 10 milimetresini bırakın. Aortotominin anatomik sağ kenarına ve yükselen aortun karşılık gelen serbest kenarına karşı çıkmak için 10-O naylondan sürekli akan bir sütür yerleştirin.Bu prosedürü dikkatlice uygulayın ve bu çizgi için yaklaşık dört atış kullanın. Aortotominin kalan serbest kenarı ile appozisyonu etkilemek için anatomik sol taraftan aşağıya ikinci bir sürekli çalışan sütür yerleştirmeden önce dikişin serbest ucunu distal kalış sütürünün etrafından geçirin. İki ek atışla bir cerrahın düğümünü kullanarak dikişi kuyruğa bağlayın.İnferior vena kava, venotomi ve pulmoner arter lümeninin karşılık gelen ekstremitesinin 12:00 pozisyonu arasına bir kalış sütürü yerleştirin. Bu ankraj noktasından, pulmoner arterin anatomik sol kenarı ile venotominin karşılık gelen kenarı arasına ayırt edici bir şekilde sürekli çalışan bir sütür yerleştirin. İğneyi venotominin 6: 00 pozisyonundan ve pulmoner arter lümeninin karşılık gelen ekstremitesinden geçirin.Artan bir şekilde, iğneyi pulmoner arterin kalan serbest kenarından ve venotominin anatomik sağından geçirin. Bu çizgi için ortalama dört atış kullanın ve ardından pulmoner arter ve venotominin son serbest kenarlarını birlikte çizin. Dikişin serbest ucunu çapaya bağlayın ve bir alet kullanarak cerrahın düğümünü iki ek atışla bağlayın ve ekstra ipliği kesin.Damarları, kan akışına müdahale edecek bükülme açısından kontrol edin. Jel köpüğü dikiş çizgisinin üzerine yerleştirin. Etraflarına iki parça yaklaşık iki milimetrelik jel köpük yerleştirin ve görünür tüm dikiş çizgilerinin kaplanması için kalıplayın.Coddle kelepçesi ve ardından sefalo kelepçesi ile başlayan vasküler kelepçeleri serbest bırakın. Az miktarda kanama beklendiğinden, basınç sağlamak için pamuk uçlu aplikatörleri anastomoz bölgeleri üzerine önleyici olarak yerleştirin. Görünür sızıntıları düzelttikten sonra, kalbi nabız için kontrol edin.Yoksa, kalp damarlarını büküm açısından kontrol edin, ardından bağırsakları kalbin üzerine ve etrafına yeniden konumlandırın ve kuru görünüyorsa periton boşluğunu ısıtılmış sodyum klorür çözeltisi ile nemlendirin. Sürekli kesintisiz tekniği kullanarak, önce kas tabakasını, ardından cildi dikerek emilemeyen 6-O prolen monofilament kullanarak karın boşluğunu kapatın. Alıcı ameliyat tahtasından ve anesteziden çıkarıldıktan sonra, deri altından bir mililitre sıcak salin uygulayın ve alıcıyı postoperatif iyileşme protokollerine göre gözlem için ısınma ile hazırlanmış bir kafese yerleştirin.Sinjenik ve konjenik heterotopik murin kalp nakillerinde ameliyat sonrası 100 gün boyunca tam iyileşme ve kabul gözlendi. Bununla birlikte, hızlı rejeksiyon, majör uyumsuz heterotopik murin kalp nakli durumunda ameliyattan yedi gün sonra gözlendi. Anastomozlar sırasında, dikişinizin cerrahi alanda nerede olduğuna dair farkındalığı korumalısınız.Bunun yapılmaması, yapılarda kritik hasara veya dikişin karışmasına neden olabilir. Diseksiyon ve anastomozun bu mikrocerrahi teknikleri, heterotopik böbrek ve ortotopik karaciğer transplantasyonu da dahil olmak üzere diğer küçük memeli cerrahi modellerine oldukça uygulanabilir ve araştırmacıların greft reddini incelemelerine olanak tanır.

a-modified-murine-heterotopic-heart-transplant-protocol-matching

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Farelerde kalplerin heterotopik nakli için mikrocerrahi prosedür için, donör toplama ve alıcı damar anastomozu için basitleştirilmiş yöntemler de dahil olmak üzere bir teknik gösterilmiştir.

Heterotopik Fare Kalp NAKLİ için Modifiye Yöntem

El yazması fare heterotopik kalp nakli gerçekleştirmek için gereken adımları açıklar.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Sıçanlarda heterotopik karın kalp transplantasyonunun bir modelini açıklayarak, basitleştirilmiş bir cerrahi yaklaşıma yol açan mevcut stratejilerde değişiklik ima ediyoruz. Ayrıca, hayati kardiyak kas hücrelerinin kulak içi enjeksiyonu ile yeni bir ret modeli tarif, sıçanlarda daha fazla nakil immünolojik analizler sağlayan.

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Biz manşet üzerinde evert yardımcı olmak için fare servikal heterotopik kalp nakli için manşet tekniği bir iç tüp yaklaşım tanıtmak. İki deneyimli cerrah arasındaki işbirliğinin ameliyat süresini belirgin bir şekilde kısalttAdığını gördük.

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Domuz heterotopik kalp nakli modelinde terapötiklerin tüm kardiyak allogreftlere verilmesi için normotermik ex vivo sanguinöz perfüzyon sisteminin kullanılması için bir protokol sunuyoruz.

Terapötiklerin Kardiyak Allogrefte Verilmesi için Domuz Heterotopik Kalp Transplantasyonu Protokolü

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Öğrenin, modifiye edilmiş murin heterotopik kalp nakli tekniği ile mikrocerrahi becerilerinizi geliştirin ve genetik olarak modifiye edilmiş fare soylarını kullanarak transplantasyon bağışıklığını araştırın.

Çağdaş Aseptik Teknik, Anestezi ve Analjezi Standartlarına Uygun Modifiye Murin Heterotopik Kalp Nakli Protokolü

Daha fazla video keşfet