Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Jeanne A. Ishimwe; Jianyong Zhong; Valentina Kon; Annet Kirabo

doi:10.3791/64310

Murin Fekal İzolasyonu ve Mikrobiyota Transplantasyonu

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Murin Fekal İzolasyonu ve Mikrobiyota Transplantasyonu

Full Text

5,779 Views

07:32 min

May 26, 2023

DOI: 10.3791/64310-v

Jeanne A. Ishimwe¹, Jianyong Zhong^2,3, Valentina Kon², Annet Kirabo¹

¹Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine Vanderbilt University Medical Center and Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University, ²Division of Pediatric Nephrology Department of Pediatrics,Vanderbilt University Medical Center, ³Department of Pathology, Microbiology, and Immunology,Vanderbilt University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Buradaki amaç, kardiyovasküler hastalıklarda dysbiosis mekanizmalarını araştırmak için bir protokolün ana hatlarını çizmektir. Bu yazıda, murin dışkı örneklerinin aseptik olarak nasıl toplanacağı ve nakledileceği, bağırsakların nasıl izole edileceği ve "Swiss-roll" yönteminin nasıl kullanılacağı, ardından gastrointestinal sistemdeki değişiklikleri sorgulamak için immün boyama teknikleri tartışılmaktadır.

Burada, dışkı örnekleri toplamaktan bağırsaktaki değişiklikleri incelemek için İsviçre rulo yöntemini kullanmaya kadar, hastalıktaki dysbiosis mekanizmalarını araştırmada başkalarına rehberlik edecek bir protokol tanımladık. Başlamak için, ötenazi farenin göğsüne ve yanlarına% 70 etanol püskürtün ve gastrointestinal sistemi açığa çıkarmak için cildi ve periton boşluğunu dikkatlice açın. Çekumu izole edin ve ikiye bölmek için steril cerrahi makas kullanın.

Çekumu kısaca açığa çıkarın ve ileumdan proksimal olarak 0.5 santimetre ve kolon ile birleşme noktasında distal olarak 0.5 santimetre kesin. İzole çekumu steril bir Petri kabına aktarın. Çekal içeriğini steril tüplere aktarmak için steril bir spatula kullanın ve alikotları 80 santigrat derecelik bir dondurucuda saklayın.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos