Orotrakeal Entübasyon ve Ventilasyonlu Akciğer İskemisi Reperfüzyon Cerrahisinin Bir Fare Modeli

Ventilasyonlu akciğer iskemisi-reperfüzyon cerrahisi, resüsitasyonlu hemorajik travmayı takiben akciğer transplantasyonu, pulmoner emboli ve akciğer hasarı dahil olmak üzere birçok sürecin akciğere özgü patofizyolojisini incelemek için kullanılabilir. Bu model atelektazi, mekanik ventilasyon ve hipoksinin enflamatuar katkılarını en aza indirir. Bozulmamış bir in vivo dolaşım bağışıklık sistemini korur ve uzun süreli çalışmalara izin verir.

Bu model, steril inflamasyonun akciğer içinde nasıl kontrol edildiği ve düzenlendiği hakkında fikir verebilir. Mikrocerrahi teknik öncelikle saatlerce pratik gerektirir. Başlamadan önce dikkatli organizasyon ve planlama önemlidir.

Ayrıca, başlangıçta ötenazi fare tarafından kardiyak aktivitenin ve neden olduğu hareketin dikkati dağılmadan uygulanabilir. Sol PA'daki kan stazı, daha kolay görselleştirilmesini ve manipüle edilmesini sağlar. Başlamak için, fiber optik esnek ışığı, ses tellerinin biraz altında, anestezi uygulanmış bir farenin trakeasına yavaşça yerleştirin.

Aydınlatma seviyelerini, ses tellerinin altından yayılan kırmızı ışık dışında, fare oral farenksine bakarken yalnızca karanlık bir alan görünecek şekilde ayarlayın. Entübasyon için, cımbızları baskın elle tutun ve dili ağız boşluğundan hafifçe kavramak ve çekmek için kullanın. Baskın olmayan el tarafından tutulan forseps kullanarak alt çeneyi açın ve epiglottis kaldırmak için forsepsleri larinkse doğru itin.

Bu noktada, dili cımbızdan serbest bırakın. Ses tellerini gözlemleyin. Her nefese göre açılıp kapanmalıdırlar.

Kanülü kılavuz tel önceden yüklenmiş olarak tutarak, telin ucunu ses tellerinden geçirin. Daha sonra, telin kanülün dışında kalan ancak ses tellerinin hemen üstünde olan bir kısmını tutarak hareket ettirmemeye çok dikkat ederek, kanülü geri çekin, sadece teli trakea içindeki distal ucuyla yerinde bırakın. Bu noktada, tel distal ucunun aydınlatılmış ses tellerinden ve trakeadan geçtiğini ve aydınlatılmamış yemek borusunda olmadığını doğrulamak için ses tellerinin ikinci bir görselleştirmesini yapın.

Daha sonra, sol eldeki kavisli forseps sert bir yüzeye sabitlenmiş olarak teli ağzın dışında tutun ve 20 gauge kateteri tel üzerinde bant kanatlarıyla dikkatlice ilerletin. Telin distal ucu kateterin veya endotrakeal tüpün arka ucundan çıktığında, kavisli forseps ile biten bu ucu tutun ve kateteri trakeaya düzgün bir şekilde ilerletin. Daha sonra, kateterin yerleşimini yerinden çıkarmadan teli kateterin distal ucundan kavisli forseps ile dikkatlice çıkarın.

Daha sonra, yemek borusuna değil, trakeaya uygun yerleşimi onaylamak için sabitlemeden önce kateteri ventilatöre kısaca bağlayın. Mekanik ventilasyona bağımlı bilateral göğüs duvarı hareketlerini ve midenin şişirilmesinin yokluğunu gözlemleyerek trakea yerleşimini onaylayın. Entübasyondan sonra, orotrakeal tüpün doğru trakeal yerleşimini doğrulamak için kateteri 0.2 ila 0.225 mililitre başlık hacmine ve dakikada 120 ila 150 nefes solunum hızına ayarlanmış ventilatöre bağlayın.

Daha sonra orotrakeal tüpten kendiliğinden nefes alan fare ile bağlantıyı kesin. Fare kıllarını sol toraks bölgesi üzerinden sol kürek kemiğine kadar tıraş edin. Fazla tıraş edilmiş saçları alkollü çubuklarla çıkarın ve ameliyat alanını dezenfekte edin.

Ardından fareyi sol yanal veya dörtte üçü döndürülmüş konumda bir ısıtma pedinin üzerine yerleştirin. Trakeal tüpü ventilatöre bağlayın. Cilt insizyonunu yaptıktan sonra kas tabakasının altına üç sterilize edilmiş retraktör yerleştirin.

Daha sonra, ikinci interkostal boşluğu tanımlayın ve ikinci kaburgayı ekstra ince forsepslerle tutun. Daha sonra, kaburgayı yukarı doğru çekerek, ikinci ila üçüncü boşluklardaki interkostal kasları ayırarak ve keserek çoğul boşluğa girmek için steril bir 12 numaralı kavisli neşter bıçağı kullanın. Sol akciğer tepesindeki yaralanmayı azaltmak için ventilasyonu duraklatmayı düşünün.

Kaburgaların yönü boyunca en küçük, en dar retraktör sefaladını ve üçüncü kaburga boyunca sola orta boy retraktörü ve ikinci kaburganın yüzeyi boyunca sağa doğru en büyük retraktörü kullanın. Elastik retraktör kordonlarını kullanarak göğsü yavaş ve ilerleyici geri çekilme ile açın. Sol akciğer tepesini steril bir pamuklu çubukla veya cerrahi bir süngerle hareket ettirerek sol pulmoner arteri veya PA'yı açığa çıkarın ve tanımlayın.

Sol PA ve bronşun her ikisinin de görünür olduğu alanı nazikçe ortaya çıkarmak ve oluşturmak için sağ eldeki mikro forseps ultra ince forsepsleri ve sol eldeki PA veya damar dilate forsepslerini kullanın. PA forsepslerini kullanarak, sol PA'yı alın ve aşağıdaki şeffaf bronşu görselleştirmek için yavaşça ama sıkıca yukarı doğru ve sefalad çekin. PA'yı bronştan uzaklaştırırken, kapalı ultra ince forsepsleri sol PA ve bronş arasındaki boşluktan dikkatlice geçirin.

Daha sonra 7-0 veya 8-0'ı tutmak ve çekmek için bu forsepsleri kullanın prolen sütür, yukarıdaki sol pulmoner arter ile aşağıdaki bronş arasındaki boşluktan geçirilir. Ardından, PA'da bir tıkanıklık oluşturmak için bir kayma düğümü bağlayarak sol PA'yı çevreleyin. Kan akışının kesilmesi bu noktada kolayca görselleştirilir ve iskemik dönemin başlangıcını işaret eder. 24 ila 28 gauge iğne kullanarak düğümün serbest ucunu ön sol toraksta farklı bir giriş noktasından dışsallaştırın ve daha sonra daha kolay tanımlama için dikişin ucunu küçük bir bant parçasıyla sabitleyin.

Daha sonra, kemirgen ventilatöründe pozitif ve ekspiratuar bir basınç valfi veya tüp kullanarak, göğüs boşluğundan mümkün olduğunca fazla hava atmak için akciğeri yeniden şişirin. Daha sonra göğüs kafesini iki adet kesilmiş 4-0 naylon dikişle kapatın, ardından kas ve cilt tabakasını kapatıp lokal anestezi uygulayın. Fareyi ventilatörden ayırın ve iyileşme sırasında vücut ısısını korumak için ameliyat sonrası bakım için dikkatlice ısıtma pedine yerleştirin.

Farenin hareketi sırasında dışsallaştırılmış kayma düğümünün kontrol edildiğinden ve net bir şekilde görselleştirildiğinden emin olun. İskemik dönemin sonunda dışsallaştırılmış kayma düğümünü yavaşça çekin. C3H ve C57 siyah altı suşlarının vahşi tip farelerinde akciğer kesitlerinin histolojisi burada gösterilmiştir.

Bir saatlik iskemi ve üç saatlik reperfüzyondan sonra her iki suşta da akciğer sol dokusunda yoğun nötrofilik infiltrasyon gözlendi. Bununla birlikte, C3H suşu, C57 siyah altıya kıyasla belirgin şekilde daha fazla inflamasyon seviyesi gösterdi. Sol PA ile sol bronş arasındaki monofilamentin geçişi sırasındaki hatalar, sol PA'nın felaket kanaması veya sol bronşta geri dönüşümsüz yaralanma ile kurtarılmamış cerrahiye yol açabilir.

Bu, teknik olarak en zor olan ve bu prosedürü ilk öğrenirken tekrar pratik yapmayı gerektiren adımdır. Reperfüzyondan yaklaşık bir saat veya daha kısa bir süre sonra akciğer iskemisi-reperfüzyon ameliyatından fare iyileşmesinden sonra, iskemi-reperfüzyonun neden olduğu steril akciğer hasarını takip eden bir enfeksiyonu simüle etmek için üç saat veya 24 ila 48 saat sonra canlı bakterilerin intratrakeal indamlatması uygulanabilir. Steril inflamasyonu modüle edebilen diğer ajanların intratrakeal kurulumu da iskemi-reperfüzyondan sonra benzer şekilde yapılabilir.

Bu teknik, akciğerdeki steril yaralanma ve enfeksiyona yanıt olarak nötrofillerin kademeli kaçakçılığını ve aktivasyonunu keşfetmeye ve doğrulamaya yardımcı oldu.