Name: Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 52 s
Description: Öğrenin, farelerde kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği çalışmaları için modifiye transvers aort daralması (TAC) prosedürünü. Bu teknik, mekanik ventilasyon gerektirmeden minimal invaziv cerrahi sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC 81822002) tarafından finanse edilmektedir. Bu çalışmada emeği geçen tüm üyelerimize teşekkür ederiz.

Mevcut protokol, Tongji Hastanesi, Tongji Tıp Fakültesi, Huazhong Bilim ve Teknoloji Üniversitesi, Wuhan, Çin'in etik komitesi tarafından onaylanmıştır. Bu prosedür erkek yetişkin C57 / BL6 farelerde (>10 haftalık) gerçekleştirilir. Operasyon öncesinde tüm cerrahi aletler otoklavlama ile sterilize edildi.
1. Cerrahi aletin hazırlanması
<ol><li>5 mL'lik bir şırınga hazırlayın ve iğnenin ucunu köreltmek için bir iğne tutucu ile sıkıştırın.</li>
	<li>27 G'lık bir iğne hazırlayın ve bir iğne tutucu ile köreltin. İğnenin ucunu oftalmik makasla kesmek, iğneyi köreltmenin alternatif bir yoludur.</li>
	<li>27 G iğnenin ucunu 90° bükün. NOT: Bu iğne, damar daralması için aort ile bağlamak için bir ara parça olarak kullanılacaktır.</li>
	<li>Ticari olarak elde edilmiş bir demir tel kullanın (tıbbi sınıf, 0,5 mm çapında, Malzeme Tablosuna bakınız) ve iğnenin etrafında sicim kullanın (Şekil 1A). İğnenin körelmiş ucunda küçük bir tuzak veya halka oluşturun (Şekil 1B). NOT: Bu yeniden kullanılabilir alet, kendi kendine yapılan özel bir retraktör görevi görür ve sonraki adımlarda aortun altında ipek sütür geçmesine izin verir.</li>
	<li>Sterilize etmek için ameliyattan önce tüm cerrahi aletleri (yukarıda yapılan özel retraktör dahil) otoklavlayın.</li>
</ol>2. Hayvan hazırlama
<ol><li>Vücut ağırlığına göre pentobarbital sodyum çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu ( 50 mg / kg, Malzeme Tablosuna bakınız) ile fareyi uyuşturun. Subkutan olarak cerrahi bölgeye lokal olarak 100 μL% 0.5 lidokain enjekte edin.</li>
	<li>Farenin ayak parmağını forsepsin ucuyla sıkıştırarak farenin tamamen anestezi aldığını onaylayın.</li>
	<li>Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için her iki göze de oftalmik merhem uygulayın.</li>
	<li>Saçları boğazdan ve üst göğüsten tüy dökücü krem veya bir kesme makinesi ile çıkarın.</li>
	<li>Tüysüz alanı, dışa doğru hareket eden eşmerkezli dairelerde üç alternatif iyot ovma ve% 70 etanol ile dezenfekte edin.</li>
	<li>Fareyi, başı operatöre bakacak şekilde steril bir örtü ile kaplı bir ısıtma yastığına sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Ekstremiteleri yapışkan bant ve kesici dişlerle 4-0 sütürle sabitleyin (Şekil 2A).</li>
	<li>Operasyon sırasında vücut ısısını izlemek için bir rektal prob yerleştirin ( bkz. Tüm operasyon boyunca vücut ısısını 37 ° C'de tutun.</li>
	<li>Bir çift steril eldiven giyin. NOT: Steril eldivenler giyildikten sonra, sterilize edilmemiş diğer alanlara veya nesnelere dokunmayın.</li>
	<li>Sterilize edilmiş oftalmik makas ile yeni bir tek kullanımlık steril örtüde bir delik (1-1,5 cm çapında) kesin. Steril örtüyü farenin üzerine yerleştirin ve tüysüz çalışma alanının delikten görülebildiğinden emin olun. NOT: Bu adım, operatörün diğer sterilize edilmemiş alanlara dokunmaktan kaçınmasını sağlar, bu da ameliyat sırasında steril koşulların korunmasına yardımcı olur.</li>
</ol>3. Transvers aortun daralması
<ol><li>Neşter bıçağı ile suprasternal çentik hizasında 1,5 cm'lik dikey deri kesisi yapın (Şekil 2B). Cilt kesisini sternal açı seviyesine kadar genişletin. NOT: Suprasternal çentik, manubrium sterni'nin üst kenarında bulunan bir çentiktir. Fare kılı çıkarıldığında algılanabilen bir yüzey sembolüdür (Şekil 2B). Sternal açı, manubrium sterni ve corpora sterni arasındaki eklemdir. Sternum açığa çıktığında, sternum üzerinde aynı costa secunda seviyesinde yatay beyaz bir çizgi olarak ortaya çıkar (Şekil 2C).</li>
	<li>Cildi ve yüzeysel fasyayı dikkatlice ayırın ve trakea ve proksimal sternali açığa çıkarın. Üst kenardan başlayarak sternal açıya kadar sternuma 3-4 mm uzunluğunda uzunlamasına orta hat insizyonunu dikkatlice yapın (Şekil 2D). NOT: Kesik sternal açıyı aşmamalıdır, çünkü farede akut pnömotoraksa neden olma riski vardır.</li>
	<li>Sternumu forseps ve altındaki timus ve arkus aortu ile yavaşça kaldırın. Dikkatlice düz forseps kullanın ve hedef damarı ve etrafındaki dokuları açıkça diseke edin.</li>
	<li>Kullanıcının sağ elinin ucunda bir tel tuzak içeren önceden kendi kendine yapılan retraktörü (adım 1.4) tutun.</li>
	<li>Kendi kendine yapılan retraktörün tuzağını aortun altından, sol ortak karotis arter ile sağ innominat arterin orijini arasında dikkatlice geçirin (Şekil 2E).</li>
	<li>Sağ eli diğer aletlere ayırmak için kendi kendine yapılan retraktörü sol ele geçirin.</li>
	<li>Sağ eldeki mikroskobik cımbızla, sonundaki tuzak halkasından 7-0'lık bir ipek sütür geçirin ve retraktörü çıkarın. Bu, daha fazla ligasyon için ipek sütürünün arter etrafında bırakılmasına izin verecektir (Şekil 2F). NOT: Nazik olun ve aort kemerini orijinal konumundan çok fazla sürüklemeyin.</li>
	<li>Aortun üzerine 27 G'lık bir iğne yerleştirin ve dikişi iğne ile aortun etrafına bağlayın (Şekil 2G,H). NOT: Sahte prosedür, aort ligasyonu olmaması dışında aynı olmalıdır.</li>
	<li>Oftalmik forseps ve düğümü 27 G iğnesine ve aorta bağlı tutan başka bir forseps ile 27 G iğnesine tutun. 27 G iğnesini hızlı ama nazikçe ligasyondan çekin (Şekil 2H). NOT: Düğüm çok sıkı olmamalıdır, aksi takdirde iğneyi çıkarmak kolay olmayacaktır. Aortun yırtılması durumunda iğneyi çekerken dikkatli olun.</li>
	<li>Cildi 4-0 sentetik monofilament sütür ile kesilmiş bir sütür paterninde dikiş atın (Şekil 2I).</li>
</ol>4. Postoperatif bakım
<ol><li>Fareyi sıcak bir pedin üzerine yerleştirin (bkz. Malzeme Tablosu) ve canlanmasını bekleyin. Genel olarak, fare yaklaşık 60 dakika içinde canlanır. NOT: Hayvan, ana sternal yatışmaya yeterli bilinci yeniden kazanana kadar gözetimsiz bırakılmamalıdır.</li>
	<li>Subkutan olarak 0.5 mL ılık salin enjekte edin ve hayvanların sıvı homeostazını izleyin. NOT: Bu adım, hayvanların dehidratasyonunu ve hipovolemik dolaşım durumunu önler.</li>
	<li>Eritromisin merhemini 3 gün boyunca her gün yara yüzeyine uygulayın.</li>
	<li>Ameliyat sonrası ağrı tedavisi için, insizyon bölgesine parenteral olarak 1 mg / L buprenorfin lokal anestezik uygulayın (bakınız Malzeme Tablosu).</li>
	<li>Postoperatif olarak, fareyi enfeksiyon ve bozulma belirtileri (yetersiz beslenme, kambur duruş ve karıştırılmış kürk) açısından izleyin. NOT: Ameliyat edilen hayvanlar, tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların yanına iade edilmez.</li>
</ol>5. Ultrason görüntüleme
<ol><li>Ameliyattan 28 gün sonra bir ultrason görüntüleme sistemi12,13 (24 MHz, Malzeme Tablosuna bakınız) aracılığıyla kan akış hızını hesaplayarak transvers aortun başarılı bir şekilde bağlandığını onaylayın.<ol><li>Hayvanı% 20 oksijenle zenginleştirilmiş havada% 4.5 izofluran ile uyuşturun ve% 20 oksijenle zenginleştirilmiş havada% 0.5 izofluran ile koruyun.</li>
		<li>Fareyi sırtüstü pozisyona yerleştirin ve ekstremitelerini yapışkan bantla elektrota sabitleyin.</li>
		<li>Tüy dökücü krem kullanarak, göğüs kıllarını çıkarın ve göğsünüze ultrasonik bir bağlantı maddesi uygulayın.</li>
		<li>Platformu mümkün olduğunca sola doğru eğin. Probu dikey konumda tutarken, hayvanın çenesine işaret eden çentik ile göğüsteki sağ parasternal çizgi boyunca kademeli olarak indirin.</li>
		<li>Cihazın B modu altında, aort arkı ve daralma bölgesi açıkça görünene kadar X ve Y eksenini ayarlayın.</li>
		<li>Darbe dalgası moduna geçmek için Darbe Dalgası Doppler düğmesine tıklayın.</li>
		<li>Kesikli imleç numune hacmi kutusunu daraltılmış bölgeye distal olarak ayarlayın ve en yüksek hıza sahip stenotik jeti bulun.</li>
		<li>Aort akışının dalga formunu almak ve tepe hızını ölçmek için Darbe Dalgası Doppler düğmesine tekrar tıklayın. Dalga paternlerinin zirvesine göre kan akış hızını hesaplayın (Şekil 3A, B).</li>
		<li>Görüntüleyiciyi B moduna ayarlayın. Platformu yatay konumda dinlendirin. Probu sol parasternal çizgiye 30° döndürün.</li>
		<li>Kısa eksen görünümü elde etmek için X ve Y eksenlerini ayarlayın. Gösterge çizgisini göstermek için M moduna basın ve daha sonra kalp duvarı kalınlığı, oda boyutu ve ejeksiyon fraksiyonunun ölçümü için görüntüyü kaydetmek üzere Cine Store'a tıklayın. NOT: Ejeksiyon fraksiyonunu hesaplamak için formül: %100 * ((LV Vol;d - LV Vol;s) / LV Vol;d). Kalp debisini hesaplamak için formül: İnme Hacmi * Kalp atış hızı (çizilen ilk karede) / 1000. Ejeksiyon fraksiyonu ve kalp debisi gibi çoğu indeks, ultrasonik görüntüleme sisteminin yazılımı aracılığıyla otomatik olarak ölçülebilir. LV Vol;d: Sol ventrikülün diyastolik hacmi. LV Vol;s: Sol ventrikülün sistolik hacmi.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Heidenreich, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHA%2FACC%2FHFSA+Guideline+for+the+Management+of+Heart+Failure%3A+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology%2FAmerican+Heart+Association+Joint+Committee+on+Clinical+Practice+Guidelines%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">AHA/ACC/HFSA Guideline for the Management of Heart Failure: A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Joint Committee on Clinical Practice Guidelines.</a> Circulation. 145 (18), 895(2022).</li>
<li>McDonagh, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESC+Guidelines+for+the+diagnosis+and+treatment+of+acute+and+chronic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure.</a> European Heart Journal. 42 (36), 3599(2021).</li>
<li>Lv, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarction+and+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (179), e63257(2022).</li>
<li>Curaj, A., Simsekyilmaz, S., Staudt, M., Liehn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+invasive+surgical+procedure+of+inducing+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), e52197(2015).</li>
<li>Nakamura, M., Sadoshima, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+physiological+and+pathological+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of physiological and pathological cardiac hypertrophy.</a> Nature Reviews Cardiology. 15 (7), 387-407 (2018).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bibliometric+analysis+on+the+progress+of+chronic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Problems+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Bibliometric analysis on the progress of chronic heart failure.</a> Current Problems in Cardiology. 47 (9), 101213(2022).</li>
<li>Riehle, C., Bauersachs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure.</a> Cardiovascular Research. 115 (13), 1838-1849 (2019).</li>
<li>Melleby, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+high+precision+aortic+constriction+that+allows+for+generation+of+specific+cardiac+phenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).</li>
<li>Rockman, H. A., Wachhorst, S. P., Mao, L., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ANG+II+receptor+blockade+prevents+ventricular+hypertrophy+and+ANF+gene+expression+with+pressure+overload+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">ANG II receptor blockade prevents ventricular hypertrophy and ANF gene expression with pressure overload in mice.</a> The American Journal of Physiology. 266, 2468-2475 (1994).</li>
<li>Eichhorn, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closed-chest+model+to+induce+transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A closed-chest model to induce transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (134), e57397(2018).</li>
<li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+minimally+invasive+transverse+aortic+constriction+in+mice+for+induction+of+left+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy.</a> Journal of Visualized Experiments. (127), e56231(2017).</li>
<li>Lang, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+cardiac+chamber+quantification+by+echocardiography+in+adults%3A+an+update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 28 (1), 1-39 (2015).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATF4+protects+the+heart+from+failure+by+antagonizing+oxidative+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">ATF4 protects the heart from failure by antagonizing oxidative stress.</a> Circulation Research. 131 (1), 91-105 (2022).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GCN5-mediated+regulation+of+pathological+cardiac+hypertrophy+via+activation+of+the+TAK1-JNK%2Fp38+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">GCN5-mediated regulation of pathological cardiac hypertrophy via activation of the TAK1-JNK/p38 signaling pathway.</a> Cell Death & Disease. 13 (4), 421(2022).</li>
<li>Syed, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Up-regulation+of+Nrf2%2FHO-1+and+inhibition+of+TGF-beta1%2FSmad2%2F3+signaling+axis+by+daphnetin+alleviates+transverse+aortic+constriction-induced+cardiac+remodeling+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Up-regulation of Nrf2/HO-1 and inhibition of TGF-beta1/Smad2/3 signaling axis by daphnetin alleviates transverse aortic constriction-induced cardiac remodeling in mice.</a> Free Radical Biology and Medicine. 186, 17-30 (2022).</li>
<li>Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55293(2017).</li>
<li>Lao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operating+transverse+aortic+constriction+with+absorbable+suture+to+obtain+transient+myocardial+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Operating transverse aortic constriction with absorbable suture to obtain transient myocardial hypertrophy.</a> Journal of Visualized Experiments. (163), e61686(2020).</li>
<li>Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+ventilation+of+isolated+mouse+lungs+on+surfactant+and+inflammatory+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines.</a> European Respiratory Journal. 17 (3), 488-494 (2001).</li>
<li>Withaar, C., Lam, C. S. P., Schiattarella, G. G., de Boer, R. A., Meems, L. M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+in+humans+and+mice%3A+embracing+clinical+complexity+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Heart failure with preserved ejection fraction in humans and mice: embracing clinical complexity in mouse models.</a> European Heart Journal. 42 (43), 4420-4430 (2021).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan etmişlerdir.

Sürekli basınç aşırı yükünün indüklenmesi yavaş yavaş kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliğine neden olabilir. Bu model dünya çapında çok sayıda laboratuvarda kullanılmıştır14,15,16. Protokol, mikrocerrahi becerilere veya mekanik ventilasyona ihtiyaç duymayan gelişmiş bir TAC yöntemi sağladı.
Bu protokoldeki en önemli adım ipek dikişin aort kemerinin altına geçirilmesidir. Tuzak aort arkını bağladığın...

Kalp yetmezliği, ventriküler dolgu veya kanın dışarı atılmasının yapı ve fonksiyonlarının bozulmasından kaynaklanan karmaşık bir klinik semptomdur1. Hastalığın evresi esas olarak semptomların şiddetine ve fiziksel aktiviteye dayanan New York Kalp Derneği fonksiyon sınıflandırması ile tanımlanır2. Ejeksiyon fraksiyonu %50'nin üzerinde olan hastalar için, yapısal ve/veya fonksiyonel anormallikler, korunmuş ejeksiyon fraksiyonu (HFpEF)2 ile kalp yetmezliği tanısını desteklemek için natriüretik peptitleri yükseltmiştir. İskemik kalp hastalığı, kalp yetersizliğinin birçok etiyolojisi arasında önde gelen bir nedendir. Bu nedenle, miyokard enfarktüsü modeli (kalıcı koroner ligasyon gibi) genellikle kardiyak hipoperfüzyon veya iskemi-reperfüzyon hasarı sonrası patofizyolojiyi incelemek için kullanılır 3,4. Akut miyokard hasarının yanı sıra, hipertansiyon, diyabet, obezite ve ailede kardiyomiyopati öyküsü gibi diğer risk faktörleri de kalp yetmezliğinin gelişimine katkıda bulunur. Hastalar Evre A'yı (kalp yetmezliği riski altında) geçtikten ve Evre B'ye (kalp yetmezliği öncesi) girdikten sonra, yapısal modifikasyon meydana gelir1. Örneğin, hipertansif hastalar önce adaptif sol ventrikül hipertrofisinden geçer ve daha sonra yavaş yavaş maladaptif kardiyak hipertrofiye dönüşür ve patolojik yeniden yapılanma yoluyla kalp yetmezliğine geçer5.
Çeşitli kardiyovasküler hastalıkların terminal aşaması olarak, kronik kalp yetmezliği on yıllardır çalışılmaktadır6. İlaç infüzyonu (anjiyotensin II), metabolik bozukluklar (diyabet veya yüksek kalorili diyet) ve aort daralması7 dahil olmak üzere kalp yetmezliği araştırmalarında çoklu fare modelleri yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu modeller arasında, anjiyotensin II perfüzyonuna, böbrek7 gibi çeşitli organ yan etkileri eşlik eder. Metabolik bozuklukları indüklemek genellikle oldukça uzun bir süre gerektirir. Yükselen aort daralmasının insan hastalığı ile sınırlı bir ilgisi olduğu düşünülmektedir7.
TAC, artçı yükü artıran ve kalp yetmezliğinin yanı sıra kalp yetmezliğini de indükleyen güvenilir bir modeldir8. Açık göğüs TAC modeli ilk olarak Rockman ve ark. tarafından tanımlanmış ve dünya çapında çok sayıda laboratuvarda kullanılmıştır9. Bununla birlikte, bu klasik TAC prosedürü farelerde oldukça büyük bir travmaya neden olur ve normal davranışlarını değiştirir, bu da uzun bir iyileşme süresi alabilir ve daha sonraki tedaviyi bozabilir10. Diğer modifiye kapalı göğüs TAC prosedürleri bazı invaziv adımları azalttı, ancak mikrocerrahi beceriler veya mekanik ventilasyon gerektirdi10,11.
Mevcut protokol, sternumun üst kenarının 3 mm'lik bir orta hat insizyonu yoluyla kendi kendine yapılan bir retraktör kullanarak aort arkına minimal invaziv bir yaklaşımla adım adım bir yöntemi detaylandırmaktadır. Bu model mikrocerrahi beceriye, mekanik ventilasyona veya kaburgaların kesilmesine ihtiyaç duymaz, böylece TAC ameliyatını gerçekleştirmek için hızlı, cerrahi travma sınırlı, karmaşık olmayan, ucuz bir yol sağlar.

<table><tbody><tr><td>4-0 emilmeyen sütür</td><td>Jinhuan</td><td>HM403</td><td>Cildi dikmek için kullanılır</td></tr><tr><td>5 mL şırınga</td><td>Haifuda Technology Co., Ltd.</td><td>BD-309628</td><td>Ekartör içeren tuzak yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>7-0 emilmeyen sütür</td><td>Jinhuan</td><td>HM701</td><td>Aort ligasyonu için kullanılır</td></tr><tr><td>Hayvan sıcaklık monitörü</td><td>Kaerwen</td><td>FT3400</td><td>Vücut ısısını izlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Buprenorfin ve nbsp;</td><td>Sigma</td><td>B-044</td><td>Ameliyat sonrası ağrı tedavisinde kullanılır</td></tr><tr><td>Tüy dökücü krem&nbsp;</td><td>Veet</td><td>N/A</td><td>Cerrahi alandan vücut kıllarını almak için kullanılır</td></tr><tr><td>Isıtma Yastığı</td><td>Xiaochuangxin</td><td>N/A</td><td>Vücut ısısını korumak için kullanılır</td></tr><tr><td>Ibuprofen</td><td>MCE</td><td>HY-78131</td><td>Ameliyat sonrası ağrı tedavisi için kullanılır</td></tr><tr><td>Demir tel (0,5 mm)</td><td>Qing Yuan</td><td>Demir tel # 26</td><td>Tuzak içeren ekartör yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Mikroskobik cımbız</td><td>RWD</td><td>F12006-10</td><td>Dokuyu açık çalışma alanına nüfuz etmek ve ayırmak için kullanılır</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>RWD</td><td>F12005-10</td><td>Gösterge iğnesinin ucunu sıkıştırmak ve köreltmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Oftalmik forseps</td><td>RWD</td><td>F14012-10&nbsp;</td><td>Cildi ve diğer dokuları tutmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Oftalmik makas</td><td>RWD</td><td>S11001-08</td><td>Farenin sking insizyonunu yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Pentobarbital sodyum</td><td>Sigma</td><td>P3761</td><td>Fare anestezisi için kullanılır</td></tr><tr><td>Steril ameliyat matı</td><td>Hale & doyurucu</td><td>211002</td><td>Ameliyat sırasında hayvanı yerleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Ultra-ses görüntüleme sistemi</td><td>Fujifilm visualsonics</td><td>vevo1100</td><td>Kan akış hızını, sol ventrikül duvar kalınlığını ve ejeksiyon fraksiyonunu ölçmek için kullanılır, https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-1100</td></tr></tbody></table>

farelerde transvers aort daralması için modifiye bir teknik

A Modified Technique for Transverse Aortic Constriction in Mice

Transvers aort daralması (TAC), fare modellerinde aşırı basınç yükü oluşumuna dayanan kalp yetmezliği ve kardiyak hipertrofi ile ilgili araştırmalarda sıklıkla kullanılan bir ameliyattır. Bu prosedürün ana zorluğu, enine aort arkını açıkça görselleştirmek ve hedef damarı hassas bir şekilde bantlamaktır. Klasik yaklaşımlar transvers aort arkını ortaya çıkarmak için kısmi torakotomi uygular. Ancak oldukça büyük bir cerrahi travmaya neden olan ve ameliyat sırasında ventilatör gerektiren açık göğüs modelidir. Gereksiz travmayı önlemek ve ameliyat prosedürünü basitleştirmek için, aort arkına sternumun proksimal oranı üzerinden yaklaşılır, bir tuzak içeren küçük bir kendi kendine yapılan retraktör kullanılarak hedef damara ulaşır ve bağlanır. Bu prosedür plevra boşluğuna girmeden yapılabilir ve fareleri fizyolojik solunum paternleriyle bırakan, prosedürü basitleştiren ve operasyon süresini önemli ölçüde azaltan bir ventilatör veya mikrocerrahi operasyona ihtiyaç duymaz. Daha az invaziv yaklaşım ve daha az operasyon süresi nedeniyle, fareler daha az stres reaksiyonuna maruz kalabilir ve hızla iyileşebilir.

Başarılı TAC ameliyatından sonra, ultrason görüntüleme sistemi kullanılarak aşırı basınç yükü tespit edildi. Ameliyattan dört hafta sonra, fareler azalmış kalp fonksiyonu geliştirir. Bu çalışmada, TAK cerrahisinin etkinliği, 4 hafta sonra TAC cerrahisi uygulanan farelerin ejeksiyon fraksiyonu (EF), fraksiyonel kısalma (FS), sol ventrikül kitlesi (LV kitlesi) ve sol ventrikül iç çapı (LVID) ile doğrulanmıştır. EF, 4 hafta sonra TAC farelerde sahte farelere kıyasla anlamlı derecede azaldı (G ± 'a karşılık x ± %4, ...

Bu protokol, kendi kendine yapılan bir retraktör kullanılarak minimal invaziv transvers aort daralması (TAC) prosedürü ile modifiye edilmiş ve basitleştirilmiş bir tekniği tanımlamaktadır. Bu prosedür ventilatör veya mikroskop olmadan yapılabilir ve sonunda kardiyak hipertrofi veya kalp yetmezliğine yol açan aşırı basınç yüküne neden olur.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Transverse aortic constriction (TAC) is a frequently used surgery in research regarding heart failure and cardiac hypertrophy based on the formation of ...

Bu protokol, TAC cerrahisini gerçekleştirmek için sınırlı, komplike olmayan ve ucuz kitlelere hızlı bir cerrahi travma sağlar. Bu model, aort arkına kendi kendine yapılan bir retraktör kullanarak yaklaşır ve mikrocerrahi ölçek veya mekanik ventilasyona ihtiyaç duymaz, bu nedenle cerrahi travmayı önemli ölçüde sınırlar. Başlamak için beş mililitrelik bir şırınga hazırlayın.Ardından, ucunu bir iğne tutucu ile sıkıştırarak iğneyi köreltin. Bir iğne tutucu ile köreltilmiş 27 gauge bir iğne hazırlayın ve ucunu 90 derecede bükün. Ticari olarak elde edilen bir demir tel kullanın ve iğnenin etrafına yerleştirin.İğnenin körelmiş ucunda küçük bir tuzak veya halka oluşturun. Ameliyattan önce tüm cerrahi aletleri otoklavlama ile sterilize edin. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için anestezinin derinliğini bir parmak tutamağı ile onaylayın.Her iki göze de oftalmik merhem sürün. Ardından, fareyi sırtüstü pozisyonda, başı operatöre işaret edecek şekilde steril bir örtü ile kaplı bir ısıtma yastığına yerleştirin. Ekstremitelerini yapışkan bant ve kesici dişlerle 4-0 dikişle sabitleyin.Şimdi, operasyon sırasında vücut ısısını izlemek için bir rektal prob yerleştirin. Sterilize edilmiş oftalmik makas kullanarak, yeni, tek kullanımlık steril bir örtüde bir delik açın. Steril örtüyü farenin üzerine yerleştirin ve tüysüz çalışma alanının delikten görülebildiğinden emin olun.Bir kesi yaptıktan sonra cildi ve yüzeysel fasyayı ayırın ve trakea ve proksimal sternali açığa çıkarın. Daha sonra sternuma üst kenardan sternal açıya kadar üç ila dört milimetre uzunlamasına orta hat insizyonunu dikkatlice yapın ve sternumu forsepslerle yavaşça kaldırın. Düz forseps kullanmak, hedef damarı ve etrafındaki dokuları açıkça diseke eder.Şimdi, daha önce kendi kendine yapılan retraktörü sağ elinizde bir tel tuzakla tutun. Retraktörün tuzağını aortun altından, sol ortak karotis arter ile sağ determinat arterin kökeni arasında dikkatlice geçirin. Retraktörü sol ele geçirin.Mikroskobik cımbızları sağ elinizde tutun ve sonundaki tuzak halkasından 7-0'lık bir ipek dikiş geçirin. Retraktörü dışarı çekin. Aort ile paralel 27 gauge bir iğne yerleştirin ve dikişi iğnenin ve aortun etrafına bağlayın.Daha sonra 27 gauge iğneyi oftalmik forseps ile tutun ve düğümü 27 gauge iğneye ve aort ile başka bir forseps ile bağlayın. 27 gauge iğneyi hızlı ama nazikçe ligasyondan çekin. Cildi 4-0 sentetik monofilament sütür ile kesintili bir dikiş düzeninde dikin.Fareyi sıcak bir pedin üzerine yerleştirin ve canlanmasını bekleyin. Genel olarak, fare yaklaşık 60 dakika içinde canlanır. Dört haftalık ameliyattan sonra.Ejeksiyon fraksiyonu ve fraksiyonel kısalma, transvers aort konstriksiyon farelerinde sahte farelere kıyasla önemli ölçüde azalmıştır. Bununla birlikte, transvers aort daralma farelerinde sol ventrikül kitlesi ve sol ventrikül iç çapı anlamlı olarak yükselmiştir. Bu parçacıktaki en önemli adım aort arkının altına dikiş atılmasıdır.Artere gereksiz çekişi azaltmak için tüm filmler nazik olmalıdır. Bu prosedürü takiben, araştırmacılar kardiyo hipertrofisi veya kalp yetmezliği olan hastalara potansiyel terapötik hedefleri araştırmak için hayvan modeline tıbbi tedavi uygulayabilirler.

a-modified-technique-for-transverse-aortic-constriction-in-mice

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Fare Enine aort daralma (TAC), kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği gelişme yatan mekanizmaları incelemek için yaygın olarak kullanılan bir deneysel model. Burada, prosedürler, farelerde kalp hipertrofisi tekrarlanabilir bir derece oluşturmak için aort sıkmak için açıklanmaktadır.

Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon

Bu videoda, basınca bağlı aşırı yüklenmeye bağlı kalp yetmezliğini incelemek için farelerde minimal invaziv transvers aort daralması için deneysel bir protokol gösteriyoruz.

Fare Modelinde Transvers Aort Ark Bantlaması: Sol Ventrikülde Yüksek Basıncın İndüksiyonu için Farelerde Minimal İnvaziv Bir Teknik

Bu protokolün amacı, noninvaziv B- ve M-mod ekokardiyografi ve renk / nabız dalga Doppler görüntüleme kullanarak, enine aort daralma yarattığı kalp hastalığı fare modelinde kardiyak yapısal ve fonksiyonel değişikliklerin değerlendirilmesidir.

Ekokardiyografik Imaging tarafından Enine Aort Konstrüksiyon Mouse Modeli Kardiyak Morfolojik Değerlendirilmesi ve Fonksiyonel Değişiklikler

entübasyon ile bir vantilatör kullanımını ortadan kaldırırken Minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) normal enine aort daralma (TAC) temellerini korur. Özellikle translasyonel çalışmalarda sol ventrikül aşırı, yüksek verimli çalışmalar için oldukça aranan bir yöntem olduğu kanıtlanmıştır.

Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir minimal invaziv transvers aort daralma (TAC) farelerde tekniği. Entübasyon ve yaygın olarak kullanılan standart prosedür için zorunlu olan havalandırma ortadan kaldırılması, minimal invaziv TAC operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Burada, köklü fareler aort daralması modelinde cerrahi aort debandinginin adım adım protokolünü açıklıyoruz. Bu prosedür sadece hipertrofinin sol ventrikül ters remodeling ve regresyonunun altında kalan mekanizmaların incelenmesine izin vermekle kalmaz, aynı zamanda miyokard iyileşmesini hızlandırabilecek yeni terapötik seçenekleri test eder.

Kemirgenlerde Aort Debanding tarafından Sol Ventrikül Ters Tadilatı Eğitimi

Bu protokol, basınç aşırı yükünü giderdikten sonra sol ventrikül hipertrofisi düşüşünü simüle ederek emilebilir dikişli geçici miyokard hipertrofisi elde etmek için geliştirilmiş bir yöntem sunar. Miyokard hipertrofik önkoşul çalışmaları için değerli olabilir.

Geçici Miyokard Hipertrofisi Elde Etmek için Emilebilir Dikiş ile Enine Aort Daralmasını Çalıştırma

Pyrosequencing (R) polimorfizmleri analiz için kullanılan, bugüne kadarki en kapsamlı ama basit yöntemlerle biridir. Bu yöntem, birçok klinik olarak ilgili polimorfizmleri dahil olmak üzere, hızlı ve verimli bir tek nükleotid polimorfizmi değerlendirme yol açmıştır. Pyrosequencing tekniği ve metodoloji açıklanmıştır.

Pyrosequencing: Doğru Genotiplendirme için Basit Bir Yöntem

Anjiyogenez, önceden mevcut olan damarsal kan damarlarının çimlenme hem de doğal ve patolojik süreçleri ile ilişkilidir. Burada anjiyogenik potentiators ve inhibitörleri doğrudan kültür aort halkalar eklenecek sağlayan bir aort halka tahlil göstermektedir. Çimlenme ve neovessel akıbet aort halkaları 6-12 günlük bir süre içinde inceleyerek tespit edilebilir.

Aort Halka Testi

Öğrenin, farelerde kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği çalışmaları için modifiye transvers aort daralması (TAC) prosedürünü. Bu teknik, mekanik ventilasyon gerektirmeden minimal invaziv cerrahi sunar.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Daha fazla video keşfet