Name: Sol Koroner Arter Ligasyonu: Miyokard Enfarktüsünün Cerrahi Murin Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 48 s
Description: Keşfedin sol koroner arter ligasyonu yöntemiyle farelerde miyokard enfarktüsü modeli oluşturmayı. Bu cerrahi teknik, patofizyoloji ve inflamatuar yanıtı güvenilir şekilde incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüsü hibeleri (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 ve R01DK129339), AHA Dönüşümsel Proje Ödülü (19TPA34910142), AHA Yenilikçi Proje Ödülü (19IPLOI34760566) ve ALA İnovasyon Projesi Ödülü (IA-629694) (PD'ye) tarafından desteklenmiştir.

Bu çalışma protokolü, Pittsburgh Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır. Bu deneyler için 24-30 g ağırlığındaki sekiz (sahte n = 4 ve MI n = 4) 1 yaşındaki dişi C57BL / 6J fareleri kullanıldı. Farelerin yaklaşık% 100'ü ve en az% 80'i sırasıyla ilk 24 saat ve 28 gün içinde hayatta kaldı.
1. Farelerin hazırlanması ve endotrakeal entübasyonu
<ol><li>Bir boncuk sterilizatörünü (bakınız Malzeme Tablosu) 250 ° C'ye ısıtın ve otoklavlanmış cerrahi aletleri birkaç dakika boyunca içine yerleştirin.</li>
	<li>Fareyi bir indüksiyon odasında 5 dakika boyunca% 3 izofluran ve 1 L / dak oksijen ile uyuşturun.</li>
	<li>Sert bir ayak parmağı sıkışmasına verilen yanıtı kontrol ederek faredeki anestezi derinliğini sağlayın.</li>
	<li>Ameliyat öncesi analjezik ilaç olan buprenorfinin (0.1 mg / kg) dozajını tahmin etmek için fareyi tartın. İlacı intraperitoniyal olarak enjekte edin.</li>
	<li>Elektrikli bir tıraş bıçağı kullanarak toraksın sol tarafındaki kürkü kesin.</li>
	<li>Cerrahi bölgeyi povidon-iyot ve% 70 etanol ile üç kez dezenfekte edin.</li>
	<li>Fareyi eğimli bir tahta üzerinde sırtüstü konuma getirin. Farenin başını ve uzuvlarını, sırasıyla üst kesici dişlere ve yapışkan banda tutturulmuş elastik bir bant kullanarak sabitleyin. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlere steril oftalmik kayganlaştırıcı uygulayın.</li>
	<li>Çeneyi açın ve dili yavaşça ağız boşluğundan çekin.</li>
	<li>Bir laringoskop kullanarak orofarenksi aydınlatarak larinksin açıklığını tanımlayın (bkz.</li>
	<li>24 G'lik bir kateter iğnesinden yaklaşık 0,5 cm kesin ve künt iğneyi plastik kalkana yerleştirin. Künt iğneyi plastik kalkanla trakeaya yönlendirin. Plastik kalkanı trakeaya bırakarak iğneyi çıkarın.</li>
	<li>Vantilatörünü ( Malzeme Tablosuna bakınız) dakikada 137 atım solunum hızına (bu çalışmada kullanılan fareler için optimize edilmiş) ve gelgit hacmine 0,18 cc ayarlayın. Solunum cihazı tüplerini kateter kalkanına bağlayın ve ventilatör ile senkronize bir göğüs hareketi arayarak doğru entübasyonu onaylayın.</li>
	<li>Solunum cihazı tüpünü kateter kalkanından ayırın ve hayvanı önceden ısıtılmış sıcaklık kontrollü bir cerrahi tahta üzerinde sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Fareyi ventilatöre yeniden bağlayın.</li>
</ol>2. Sol koroner arterin kalıcı ligasyonu
<ol><li>Cerrahi bölgeyi povidon-iyot ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. Cerrahi bölgeyi güvence altına almak için merkezde çeyrek büyüklüğünde bir deliğe sahip steril bir örtü uygulayın. Bir çift forseps kullanarak cildi nazikçe kaldırın ve bir çift cerrahi makas kullanarak sol pektoralis majör ve minör kaslar arasındaki çizgi boyunca küçük (1.5-2 cm) kutanöz enine bir kesi yapın. NOT: Makas, kesiğin derinliği ve yönü üzerinde gerekli kontrolü sağladığı için insizyonu yapmak için kullanılmıştır.</li>
	<li>Altta yatan pektoralis kaslarını forseps ve diseksiyon makası ile ayırın. Kaslar, elastik bantlara bağlı retraktörler kullanılarak ayrıldı.</li>
	<li>Üçüncü interkostal boşlukta, göğüs kafesinin doğal açısını takip eden bir çift mikro makasla bir kesi yapın. Bu aşamada, kalp ve akciğerlerin yaralanmasını önlemek için çok dikkatli olunmalıdır.</li>
	<li>Sol ventrikülü açığa çıkarmak için retraktörleri kullanarak kaburgaları yavaşça gerin. Perikard yağını bir kenara taşıyın ve sol atriyumun kenarından kalbin tepesine doğru uzanan LCA'yı bulun.</li>
	<li>8-0'lık bir pas Bir iğne tutucu yardımıyla LCA altında naylon sütür. LCA'yı çift düğümle ve ardından ikinci bir düğümle (modifiye edilmiş bir cerrahın düğümü) bağlayın. NOT: Sol alt ventrikülün ağartılması, başarılı bir LCA ligasyonunu doğrular. Buna ek olarak, troponin ölçümü, EKG monitörizasyonu (ST elevasyonu), eko / in vivo kardiyak kapılı MRG veya mikro-BT görüntüleri de karşılaştırılabilir MI lezyonlarını doğrulamak için önerilmektedir.</li>
	<li>Retraktörleri çıkarın ve göğüs boşluğuna 22 G'lik bir kateter iğnesi yerleştirin. Plastik kalkanın ucunu göğüs boşluğunda bırakarak iğneyi çıkarın. 4-0 naylon dikiş kullanarak göğüs kafesini kapatın.</li>
	<li>22 G plastik kalkana bir şırınga bağlayın ve negatif bir hava basıncı oluşturmak için göğsüne hafifçe bastırarak göğüs boşluğunda sıkışmış fazla havayı yavaşça çıkarın. Plastik kalkanı çıkarın.</li>
	<li>Cildi 4-0 naylon dikişle kapatın.</li>
	<li>İzofluran beslemesini kapatın. Bu aşamada, fare oksijen sağlayan vantilatörün üzerindedir.</li>
</ol>3. Ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Spontan solunum başladıktan sonra ventilatörü kapatın. NOT: Prosedür, farelerin hazırlanmasından bu adıma kadar hayvan başına yaklaşık 30-35 dakika sürer.</li>
	<li>Fareyi bir ısı lambasının altında tutun ve uyanana kadar izleyin. Hayvan, sternal yassılığı korumak için yeterli bilinci geri kazanana kadar gözetimsiz bırakılmamalıdır.</li>
	<li>Ameliyattan sonra, hayvanı ayrı bir kafese yerleştirin ve ancak tamamen iyileştikten sonra diğer hayvanlarla birlikte orijinal kafese geri koyun.</li>
	<li>Herhangi bir ağrı veya rahatsızlık belirtisi için fareyi günlük olarak izleyin.</li>
	<li>Ameliyattan sonraki 2 gün boyunca her 6-8 saatte bir intraperitoneal buprenorfin (0.1 mg / kg) enjeksiyonuna devam edin.</li>
</ol>4. Ekokardiyografik Değerlendirme
NOT: MI'den sonraki 28. günde kalp yetmezliği parametrelerini değerlendirmek için ekokardiyografi yapıldı.
<ol><li>Ameliyattan 28 gün sonra, fareleri% 3 izofluran ve 1 L / dak oksijen ile uyuşturun, gözlere steril oftalmik kayganlaştırıcı uygulayın ve epilasyon kremi kullanarak göğüs kıllarını çıkarın. Göğüs bölgesini povidon-iyot ve% 70 etanol ile üç kez dezenfekte edin.</li>
	<li>Anestezi uygulanan fareleri görüntüleme platformunun üzerine (bakınız Malzeme Tablosu) sırtüstü pozisyonda sabitleyin ve anestezik sisteme bağlı bir burun konisi (% 1-2 izofluran ve 1 L / dak oksijen) kullanarak prosedür boyunca sabit bir anestezi seviyesini koruyun.</li>
	<li>Dört pençeyi EKG elektrotlarına elektrot jeli ile bantlayın (bkz. Bir rektal prob yerleştirerek hayvanın sıcaklığını izleyin (bkz.</li>
	<li>Tarama jelini göğsünüze uygulayın ( bakınız Malzeme Tablosu) dönüştürücüyü dikey olarak yerleştirin, parasternal çizgiye (toraksa paralel) indirin ve sol ventrikülün parasternal uzun eksen görünümünü elde etmek için saat yönünün tersine 35 ° döndürün.</li>
	<li>Kalbin tam bir uzun eksen görünümünü elde etmek için görüntüleme yazılımındaki B modu görüntüleme düğmesine dokunun (bkz. Kapı boyutunu ve parlaklığını ayarlayın ve daha sonraki ölçümler için Klibi Kaydet veya Çerçeveyi Kaydet'i kullanarak görüntüleri kaydedin 16.</li>
	<li>M moduna (hareket modu) geçin ve M modu eksenini papiller kas seviyesine yerleştirin. Kapı boyutunu ayarlayın ve M modu Başlat düğmesine dokunun. Klibi Kaydet veya Kareyi Kaydet 16,17'yi kullanarak görüntüleri kaydedin.</li>
	<li>4D modu görüntü alma işlemi otomatik olduğundan, verileri almadan önce EKG ve solunum sinyallerinin etkin olduğunu doğrulayın (Şekil 1).</li>
	<li>Verileri B Modunda almaya başlayın. 4B tarama panelini açın ve 3B motoru başlatın. 4B tarama panelinde görüntü parametrelerini ayarlayın ve taramaya başlamak için Tara düğmesine dokunun. Görüntüleri 2B görünümde inceledikten sonra, 4D'ye yükle düğmesini kullanarak görüntüleri 4B moduna yükleyin .</li>
</ol>

<ol><li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254(2021).</li>
<li>Mendis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((World+Health+Organization+definition+of+myocardial+infarction%3A+2008-09+revision%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision.</a> International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).</li>
<li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of myocardial infarction.</a> Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).</li>
<li>Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+myocardial+ischemia+and+perioperative+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+and+Vascular+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).</li>
<li>Johny, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+mediated+inflammation+in+coronary+artery+disease+with+Type+2+Diabetes+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation+Research%22%5BJournal%5D)">Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 5131(2021).</li>
<li>Martin, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+models+of+myocardial+infarction%3A+from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation.</a> British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).</li>
<li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+myocardial+infarction%3A+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models & Mechanisms. 13 (11), (2020).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+of+hematopoietic+progenitor-derived+adipose+tissue-resident+macrophages+contributes+to+insulin+resistance+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).</li>
<li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryoinjury%3A+a+model+of+myocardial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Cryoinjury: a model of myocardial regeneration.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).</li>
<li>Lam, N. T., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+heart+regeneration%3A+comprehensive+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review.</a> Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).</li>
<li>Heusch, G., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+acute+myocardial+infarction+and+strategies+of+protection+beyond+reperfusion%3A+a+continual+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge.</a> European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).</li>
<li>Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+myocardial+infarction+with+a+high+survival+rate%3A+A+suitable+model+for+evaluation+of+efficacy+of+stem+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Stem+Cells+%26+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy.</a> Journal of Stem Cells & Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).</li>
<li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e59591(2019).</li>
<li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice%3A+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52206(2014).</li>
<li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (42), e2100(2010).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neuronal+activation+triggers+myeloid+progenitor+proliferation+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation.</a> Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).</li>
<li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+left+anterior+descending+%28LAD%29+coronary+artery+ligation%3A+an+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353(2017).</li>
<li>Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+anesthesia+in+cardiac+surgery%3A+a+review+of+drugs+and+practices%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Extra-Corporeal+Technology%22%5BJournal%5D)">General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).</li>
<li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAD-ligation%3A+a+murine+model+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1438(2009).</li>
<li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (48), e2464(2011).</li>
<li>Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+six-cell+biology+of+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Review+of+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. , Academic Press. 229-317 (2012).</li>
<li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54814(2016).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li>
<li>Xu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+fentanyl+preconditioning+on+cardiomyocyte+apoptosis+induced+by+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286(2017).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+monocyte+kinetics+in+acute+myocardial+infarction+are+sustained+by+extramedullary+monocytopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis.</a> Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+CCR2+in+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Silencing of CCR2 in myocarditis.</a> European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).</li>
<li>Dutta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-selectin+inhibition+mitigates+splenic+HSC+activation+and+myelopoiesis+in+hypercholesterolemic+mice+with+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).</li>
<li>Jiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+simple+method+for+induction+of+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63042(2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacağı herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

MI'nin murin modeli kardiyovasküler araştırma laboratuvarlarında popülerlik kazanmaktadır ve bu çalışma tekrarlanabilir ve klinik olarak ilgili bir MI modelini tanımlamaktadır. Bu protokol, LCA ligasyon sürecini çeşitli şekillerde geliştirir. Başlangıç olarak, ksilazin / ketamin veya sodyum pentobarbital14,15 gibi enjekte edilebilir ameliyat öncesi anesteziklerin kullanımından kaçınılır. Sadece izofluran anestezisi kullanıldı, bu da hayvan sağkalım oranlarını art...

Kardiyovasküler hastalık, her yıl 17,9 milyon yaşam iddia eden ve küresel ölümlerin yüzde 31'ini oluşturan önemli bir halk sağlığı sorunudur1. En sık görülen kardiyovasküler anomali tipi koroner kalp hastalığıdır ve miyokard enfarktüsü (MI) koroner kalp hastalığının başlıca belirtilerinden biridir2. MI genellikle hassas bir plağın yırtılmasına bağlı olarak koroner arterin trombotik tıkanıklığındankaynaklanır 3. Ortaya çıkan iskemi, etkilenen miyokardda derin iyonik ve metabolik değişikliklere ve ayrıca sistolik fonksiyonda hızlı bir azalmaya neden olur. MI, kardiyomiyositlerin ölümüyle sonuçlanır, bu da ventriküler disfonksiyona ve kalp yetmezliğine yol açabilir4.
Hastalarda MI üzerine yapılan araştırmalar, MI5'li hastalardan elde edilen dokuların azlığı nedeniyle sınırlıdır. Bu nedenle, MI'nin murin modelleri hem hastalık mekanizmalarını incelemede hem de potansiyel terapötik hedeflerin geliştirilmesinde yararlıdır. MI'nin şu anda mevcut murin modelleri, geri dönüşümsüz iskemi modellerini (LCA ve ablasyon yöntemleri) ve reperfüzyon modellerini (iskemi / reperfüzyon, I / R) 6'yı içermektedir. Farelerde sol koroner arterin (LCA) kalıcı ligasyonu en çok kullanılan yöntemdir ve 7,8,9 hastalarında MI'nin patofizyolojisini ve immünolojisini taklit eder. Kalıcı MI, elektriksel hasar veya kriyoyaralanma içeren ablasyon yöntemleri ile de indüklenebilir. Ablasyon yöntemleri,10 numaralı kesin yerde eşit büyüklükte enfarktüs üretebilir. Öte yandan, skar oluşumu, enfarktüs morfolojisi ve moleküler sinyal mekanizmaları ablasyon yöntemleri arasında farklılık gösterebilir10,11. Murin I/R yöntemi, reperfüzyon tedavisinin klinik senaryosunu temsil ettiği için bir diğer önemli MI modelidir12. I / R modeli, değişken enfarktüs boyutu, ilk yaralanma yanıtlarını ayırt etmede zorluk ve reperfüzyon6 gibi zorluklarla ilişkilidir.
LCA ligasyon yöntemleri yaygın olarak kullanılmasına rağmen düşük sağkalım oranları ve postoperatif ağrı ile ilişkilidir13. Bu protokol, farelerin hazırlanması ve entübasyonunu, LCA ligasyonunu, ameliyat sonrası bakımı ve MI'nin doğrulanmasını içeren LCA ligasyonunun murin cerrahi MI modelini göstermektedir. Hayvan, orofarenksi bir laringoskop kullanarak aydınlatılarak entübe edilir, bu da prosedürü daha kolay, daha güvenli ve daha az travmatikhale getirir 15. Fare, prosedür boyunca ventilatör desteğinde ve izofluran anestezisi altında tutulur. Ayrıca, MI sonrası kalp fonksiyonlarını ve kardiyak fibrozisi değerlendirmek için sırasıyla ekokardiyografi ve Masson trikrom boyama yapılır. Genel olarak, bu yöntem, MI sonrası patofizyoloji ve inflamasyonu incelemek için kullanılabilecek güvenilir ve tekrarlanabilir bir cerrahi murin MI modeli sağlar.

<table><tbody><tr><td>22 G kateter iğnesi</td><td>Exel INT</td><td>26741</td><td>Torasentez</td></tr><tr><td>24 G kateter iğnesi</td><td>Exel INT</td><td>26746</td><td>Endotrakeal entübasyon</td></tr><tr><td>4-0 naylon sütür</td><td>Covetrus</td><td>29263</td><td>Kasların ve cildin dikilmesi</td></tr><tr><td>8-0 naylon sütür</td><td>S& T</td><td>3192</td><td>LAD Anestezik Buharlaştırıcıların Ligasyonu</td></tr><tr><td></td><td>Veteriner donanımlı</td><td>VE-6047</td><td>Anestezik destek</td></tr><tr><td>Hayvan fizyolojisi monitörü</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>Kalp atış hızını, solunum hızını ve vücut ısısını izleyin</td></tr><tr><td>Betadine çözeltisi</td><td>PBS hayvan sağlığı</td><td>11205</td><td>Antispetik</td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Covetrus</td><td>55175</td><td>Analjezik</td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>OMANO</td><td>OM2300S-V7</td><td>Dürbün</td></tr><tr><td>Elektrikli tıraş bıçağı</td><td>Wahl</td><td>79300-1001M</td><td>Tıraş</td></tr><tr><td>Elektrodu jeli</td><td>Parker Laboratuvarları</td><td>W60698L</td><td>Elektriksel olarak iletken jel</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Decon Laboratuvarları</td><td>22-032-601</td><td>Dezenfektan</td></tr><tr><td>Forseps</td><td>FST</td><td>11065-07</td><td>Paslanmaz Çelik</td></tr><tr><td>Gazlı</td><td>Bez Kürü</td><td>CAR-6339-PK</td><td>Steril</td></tr><tr><td>Isı lambası</td><td>Satco</td><td>S4998</td><td>Ameliyat sonrası bakım</td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Kent scientific</td><td>Surgi-M</td><td>Sıcaklık kontrolü</td></tr><tr><td>Sıcak Boncuk sterilizatörü</td><td>Çimlendirici 500</td><td>11503</td><td>Cerrahi aletin sterilizasyonu</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Masson&rsquo; s trikrom boyama kiti</td><td>Thermoscientific</td><td>87019</td><td>Kardiyak Fibrozis</td></tr><tr><td>Ölçümü Mikro İğne Tutucu</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td>Paslanmaz Çelik</td></tr><tr><td>Mikro makas</td><td>FST</td><td>15000-02</td><td>Paslanmaz Çelik</td></tr><tr><td>Oftalmik merhem</td><td>Dechra</td><td>Puralube Vet</td><td>Steril oküler kayganlaştırıcı</td></tr><tr><td>Tarama Jeli</td><td>Parker Laboratuvarları</td><td>Aquasonic 100</td><td>Sulu ultrason iletim jeli</td></tr><tr><td>Makas</td><td>FST</td><td>14060-11</td><td>Paslanmaz Çelik</td></tr><tr><td>Küçük Hayvan Laringoskop</td><td>Penn-Century</td><td>Model LS-2-M</td><td>Orofarenksin aydınlatılması</td></tr><tr><td>Küçük hayvan ventilatörü</td><td>Harvard cihazı</td><td>557058</td><td>Ventilatör desteği</td></tr><tr><td>Cerrahi ışık</td><td>Cole parmer</td><td>41723</td><td>Aydınlatıcı Genişliği (inç): 7</td></tr><tr><td>Vevo 3100 klinik öncesi görüntüleme platformu</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>Ekokardiyografi</td></tr><tr><td>VevoLAB yazılımı</td><td>Fujifilm</td><td>VevoLAB 3.2.6</td><td>Ekokardiyografi veri analizi</td></tr></tbody></table>

sol koroner arter ligasyonu: miyokard enfarktüsünün cerrahi murin modeli

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

İskemik kalp hastalığı ve ardından gelen miyokard enfarktüsü (MI), Amerika Birleşik Devletleri'nde ve dünyada mortalitenin önde gelen nedenlerinden biridir. Miyokard enfarktüsü sonrası patofizyolojik değişiklikleri araştırmak ve gelecekteki tedavileri tasarlamak için MI'nin araştırma modellerine ihtiyaç vardır. Farelerde sol koroner arterin (LCA) kalıcı ligasyonu, MI sonrası kardiyak fonksiyonu ve ventriküler yeniden şekillenmeyi araştırmak için popüler bir modeldir. Burada LCA'nın kalıcı ligasyonu ile daha az invaziv, güvenilir ve tekrarlanabilir bir cerrahi murin MI modeli tanımlanmıştır. Cerrahi modelimiz kolay geri dönüşümlü genel anestezi, trakeotomi gerektirmeyen endotrakeal entübasyon ve torakotomiden oluşmaktadır. MI'den sonraki 28. günde ekokardiyografi kalp fonksiyonlarını ve kalp yetmezliği parametrelerini ayırt edecektir. Kardiyak fibrozis derecesi Masson trikrom boyama ve kardiyak MRG ile değerlendirilebilir. Bu MI modeli, MI sonrası patofizyolojik ve immünolojik değişiklikleri incelemek için yararlıdır.

Şekil 1, sahte (Şekil 1A) ve MI (Şekil 1B) farelerinin ekokardiyografik değerlendirmesi sırasında temsili aktif EKG ve solunum sinyallerini göstermektedir. Ekokardiyografik veriler elde edilmeden önce aktif EKG ve solunum sinyallerinin doğrulanması önemlidir. Şekil 2, LCA ligasyonundan 28 gün sonra kardiyak fonksiyonel parametrelerin ekokardiyografik ölçümünü göstermektedir. Şekil 2, s...

Burada sunulan, farelerde sol koroner arterin kalıcı olarak bağlanması için cerrahi bir prosedürdür. Bu model, miyokard enfarktüsü sonrası patofizyolojiyi ve ilişkili inflamatuar yanıtı araştırmak için kullanılabilir.

Sol Koroner Arter Ligasyonu: Miyokard Enfarktüsünün Cerrahi Murin Modeli

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...

Farelerde sol arterin kalıcı ligasyonu cerrahi modeli, miyokard enfarktüsü sonrası patofizyolojiyi ve ilişkili inflamatuar yanıtı araştırmak için kullanılabilir. Bu yöntem, kolay, güvenli ve daha az invaziv olan güvenilir ve üretilebilir bir MI fare modeli sağlar. Başlamak için, bir boncuk sterilizatörünü 250 santigrat dereceye kadar önceden ısıtın ve otoklavlanmış cerrahi aletleri birkaç dakika boyunca içine yerleştirin.Sert bir ayak parmağı sıkışmasına verilen yanıtı kontrol ederek faredeki anestezi derinliğini sağlayın. Ameliyat öncesi analjezik ilaç buprenorfinin dozajını tahmin etmek için fareyi tartın ve ilacı intraperitoneal olarak enjekte edin. Elektrikli bir tıraş bıçağı kullanarak toraksın sol tarafındaki kürkü kesin.Cerrahi bölgeyi dezenfekte ettikten sonra, fareyi eğimli bir tahta üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Farenin başını ve uzuvlarını, sırasıyla üst kesici dişlere ve yapışkan banda tutturulmuş elastik bir bant kullanarak sabitleyin. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlere steril oftalmik kayganlaştırıcı uygulayın.Çeneyi açın ve dili yavaşça ağız boşluğundan çekin. Bir laringoskop kullanarak oral farenksi aydınlatarak larinksin açıklığını tanıml

left-coronary-artery-ligation-surgical-murine-model-myocardial

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, miyokard iskemisi pathobiological ve patofizyolojik süreçleri incelemek için hızlı ve güvenilir bir model nasıl kullanılacağını gösterir.

LAD-ligasyon murin Model: Miyokard Enfarktüsü

Çok sayıda genetik manipülasyonlar ve / veya genler, proteinler, hücre ve / veya biyomalzemeler intramiyokardiyal enjeksiyonu, akut iskemi / reperfüzyon hasarı ve farelerde kronik remodeling çalışmaları zaman boyutu üzerine bindirilmiş. Bu video iskemi / reperfüzyon için mikrocerrahi prosedürleri, kalıcı koroner arter ligasyonu ve intramiyokardiyal enjeksiyon çalışmaları göstermektedir.

Enfarktüsü bir murin Model Koroner Arter ligasyon ve intramiyokardiyal Enjeksiyon

Farelerde Deneysel miyokardiyal enfarktüs indüklemek için kullanılan cerrahi prosedür kalp ve akciğer sol ön yüzeyine görselleştirmek için üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasındaki sol torakotomi ile başlar. Sol koroner arter ligasyonu olduğu, göğüs kapalı ve fare kendiliğinden kurtarmak için izin verilir.

Fare Koroner Arter Ligasyonu için Modifiye Tekniği

Bu videoda, sol ön inen koroner arteri kalıcı olarak bağlayarak miyokard enfarktüsünün bir fare modelini oluşturmak için cerrahi bir prosedürü açıklıyoruz.

Miyokard Enfarktüsünün Murin Modelinin Oluşturulması: Fare Modelinde Sol Ön İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu İçin Cerrahi Bir İşlem

Biz tekrar elde edilebilirliğini arttırmak için, sol ön inen arter (LAD) üzerine ligasyon konumlandırma daha fazla netlik sağlar fare modellerinde miyokard infarktüsü (MI) simüle etmek için deneysel iskemi / reperfüzyon (I / R) hasarı ikna etmek için bir cerrahi yöntemi tanıtmak Farelerde MI deneyler.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Kalp yetersizliği hastaneye yatışların önde gelen nedeni ve mortalitenin önemli bir nedenidir. Miyokard enfarktüsü sonrası ventriküler yeniden şekillenme ve kardiyak disfonksiyonu araştırmak için farelerde sol ön inen koroner arterin kalıcı ligasyonu modeli uygulanır. Farelerde invaziv hemodinamik ölçüm tekniği sunulmuştur.

Farelerde Sol Ön İnen Koroner Arter Daimi ligasyonu: Post-miyokard Enfarktüs Remodelling ve Kalp Yetmezliği Bir Model

Bir fare modelinde sol ön inen arter (LAD) ligasyonu için güvenilir bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, endotrakeal entübasyon, sol taraflı torakotomi yaklaşımı ve torasentezi içeren diğer yöntemlere göre nispeten daha az invazivdir. Bu yöntem hem akut hem de kronik miyokard enfarktüsü (MI) için bir model olarak kullanılabilir.

Kemirgen Sol Ön İnen (LAD) koroner arter ligasyonu: Miyokard İnfarktüsü Yönelik Gelişmiş ve Basitleştirilmiş Modeli

Burada farelerde sol anterior inen koroner arterin kalıcı ligasyonunun nasıl elde edilebildiğini gösteren bir cerrahi prosedürü açıklıyoruz. Bu model miyokard enfarktüsü ve eşlik eden biyolojik süreçlerin patofizyolojisini araştırmak için yüksek öneme hemşilir.

Sol Anterior İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile Murine Miyokard Enfarktüsü Modeli

Bu protokol, perikard ve içeriğini korurken farelerde miyokard enfarktüsünü indükleme adımlarını özetlemektedir.

Bozulmamış Bir Perikard İskemik Kemirgen Modeli

Burada, mikromanipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin hassas ligasyonu ile farelerde miyokard enfarktüsü veya miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını indükleyebilen basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlanmıştır.

Farelerde Miyokard Enfarktüsü ve Miyokard İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Keşfedin sol koroner arter ligasyonu yöntemiyle farelerde miyokard enfarktüsü modeli oluşturmayı. Bu cerrahi teknik, patofizyoloji ve inflamatuar yanıtı güvenilir şekilde incelemek için kullanılır.

Sol Koroner Arter Ligasyonu: Miyokard Enfarktüsünün Cerrahi Murin Modeli

Daha fazla video keşfet