Name: Artemia salina L. Kullanarak Öldürücülük Biyotahlili (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Keşfedin Artemia salina öldürücülük biyoassayını toksisite taraması için. Bu basit ve ekonomik yöntem, doğal ve sentetik örneklerin ön değerlendirmesinde ilaç kimyasında değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Profesör Amilcar Roberto'nun anısına.
Bu çalışma, CBIOS ve doktora hibesi SFRH / BD / 018'e (Vera Isca) atfedilen UIDB / 04567/2020 ve UIDP / 04567 / 2020 projeleri kapsamında Fundação para a Ciência e a 137671 Tecnologia (FCT, Portekiz) tarafından finansal olarak desteklenmiştir.

1. Ekipman hazırlığı
<ol><li>Ticari olarak temin edilebilen kuluçka ekipmanlarını satın alın. Kuluçka ekipmanını kurmak için uygun bir yer seçin (Şekil 2A). Huni şeklindeki kabı siyah desteğe (sete dahil) yerleştirin ve seviye işaretini ve musluğu görmek için huniyi uygun bir yöne çevirin.</li>
	<li>El yapımı migrasyon ekipmanı yapmak için, 12 cm'lik bir son yükseklik elde etmek için iki adet 0,5 L (5,8 cm çapında) plastik şişenin üstünü kesin. Her şişede alttan 7 cm uzakta bir tarafta 1,5 cm çapında bir delik oluşturun ve iki açıklık arasına 13 cm'lik bir lastik tüp (1,3 cm dış ve 0,9 cm iç çap) yerleştirin. Açıklıkları sıcak tutkalla kapatın (Şekil 2B) ve 15 dakika kurumaya bırakın; şişeleri düz bir yüzeye koyun ve sızıntı olmadığını doğrulamak için suyla doldurun.</li>
</ol>2. Yapay tuz çözeltisinin hazırlanması
<ol><li>Bir cam beherde, 35 g / L konsantrasyonda yapay bir tuz çözeltisi (tuzlu su karides tuzu) hazırlayın. Bunu yapmak için, üreticinin talimatlarına göre 800mL musluk suyuna 28 g tuz ekleyin. Tüm tuz iyice çözülene kadar bir karıştırma çubuğuyla karıştırın. NOT: Hazırlanan tuzlu su çözeltisinin hacmini, mevcut kapların boyutuna göre ayarlayın.</li>
</ol>3. Numune hazırlama
<ol><li>Uygun miktarda ekstraktı çözerek tüm numuneleri bir mikrosantrifüj tüpünde hazırlayın (Plectranthus extracts, Pa- P. ambigerus; Pb- P. barbatus; Pc- P. cylindraceus ; ve Pe- P. ecklonii) veya bileşikler 1-5 ( Plectranthus spp. ve üç yarı sentetik türev [3, 4, 5]'den elde edilen iki doğal bileşik [1 ve 2]; Şekil 3) dimetil sülfoksit (DMSO)12'de, 10 mg / mL'lik bir nihai konsantrasyon elde etmek için (numune suda çözünürse, DMSO kullanımı gerekli değildir).</li>
	<li>Her numunenin 10 μL'sini (ve negatif kontrol için DMSO'yu), 0.1 mg / mL'lik bir nihai konsantrasyon elde etmek için adım 2.1'de hazırlanan 990 μL yapay salin çözeltisi kullanarak yeni bir mikrosantrifüj tüpünde seyreltin.</li>
	<li>Bir duman başlığı altında, bir Erlenmeyer şişesinde, damıtılmış suda 1 mg/ mL 13,14,15 konsantrasyonunda bir potasyum dikromat çözeltisi (K 2 Cr 2O7) hazırlayın.</li>
</ol>4. Salamura karides öldürücülük biyotahlili
NOT: Bu tahlil,1,16,17,18,19 modifikasyonları ile birkaç yazarın çalışmalarından geliştirilmiştir.
<ol><li>Kuluçkalık kabı, seviye işaretine (500 mL) kadar adım 2.1'de hazırlanan ortamla doldurun (Şekil 2C).</li>
	<li>Tuz çözeltisine bir kaşık (yaklaşık 0.75 g) tuzlu su karides kistleri yerleştirin ve ardından kabı kapatın. Doğrudan ekipmana doğru işaret eden bir lamba (masa lambası, 40 W, 230 V, 50 Hz, 8 W, 4.000 K, 830 lm LED ampullü) yerleştirin (Şekil 2A) ve açın.</li>
	<li>Hava tedarikçi sistemini (3 W çıkış, 50 Hz, 230 V) ekipmanın üstüne yerleştirilen konektöre takın ve pompayı açın.</li>
	<li>Oda sıcaklığını 25 ± 3 °C'de tutun. Salamura karides kistleri, yapay tuz çözeltisinde, kuvvetli havalandırma, sürekli aydınlatma ve sabit sıcaklık altında, 24 saat ila 48 saat sonra yumurtadan çıkar. NOT: Alternatif olarak, dikey bir inkübatör kullanılabilir.</li>
	<li>Yumurtalar yumurtadan çıktıktan sonra, hava pompasını kapatın ve nauplii (huninin dibine doğru hareket eden) boş yumurta kutularından (üstte yüzen) ayrılana kadar bekleyin.</li>
	<li>Yumurtadan çıkmamış yumurtaları canlı nauplii'den ayırmak için, alttaki çıkış musluğunu açın ve huninin içeriğini el yapımı göç ekipmanı kabının kaplarından birine boşaltın (adım 1.2'de açıklanmıştır). Nauplii ve artık yumurtadan çıkmamış yumurtaları içeren çözeltinin tüp seviyesinin altında olduğundan emin olun. İkinci kapta, artık tuz çözeltisini tüpün yüksekliğinin üzerindeki adım 2.1'den ekleyin.</li>
	<li>Kabı nauplii ve alüminyum folyo kullanarak artık yumurtadan çıkmamış yumurtalarla örtün. Lambayı sadece tuz çözeltisi ile ikinci kaba yerleştirin. Salamura karidesi ışıktan etkilenecek ve bir kaptan diğerine (hasat kabı) göç edecek ve yumurtalar (yavaşça dibe çökelmiş) ile canlı Artemia arasında verimli bir ayrıma yol açacaktır.</li>
	<li>Ardından, ekipmanı inkübatöre 4.4 adımında 4 saat boyunca kullanılan aynı koşullar altında yerleştirin (Şekil 2E). Hasat kabından, 10 ila 15 nauplii içeren 900 μL tuzlu su çözeltisi toplayın. Tuzlu su çözeltisini nauplii ile 24 delikli bir plakanın her bir kuyucuğuna yerleştirin (Şekil 2F); tüm numuneler quadruplicates halinde test edilir.</li>
	<li>Negatif kontrolün (DMSO), pozitif kontrolün (K 2 Cr2O7, potasyum dikromat), yapay tuz çözeltisinin ve numunelerin her birinin her birini ilgili kuyuya 100 μL ekleyin (Şekil 2F)13,14. NOT: Her bir kuyucuktaki numuneler 0.01 mg/mL konsantrasyonda olacaktır. Tuz çözeltisindeki pozitif kontrolün son konsantrasyonu, kuyudaki tüm naupliilerin potasyum dikromatın toksik etkisine maruz kaldığından ve öldüğünden emin olmak için 0.1 mg / mL olacaktır. Yapay tuz çözeltisi boş gibi davranacaktır.</li>
	<li>Plakayı 25 ± 3 °C'de 24 saat boyunca aydınlatma altında inkübe edin (Şekil 2G). 24 saat sonra, her bir kuyucuktaki ölü larva sayısını (5 s için mobil olmayan nauplii) bir dürbün mikroskobu (12x) 20 altında kaydedin (Şekil 2H). Alternatif olarak, bir el lensi kullanın.</li>
	<li>Kalan canlı larvaların ölümüne neden olmak için 100 μL potasyum dikromat çözeltisi ekleyin ve 6 saat bekleyin. Her kuyucuktaki toplam ölü larvaları mikroskop altında sayın. Ölüm oranını aşağıdaki denkleme göre belirleyin. <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64472/64472eq01.jpg" style="margin: auto;"></li>
	<li>Tüm tahlilleri üçlü olarak yapın. Standart sapmaları (SD) hesaplayın ve sonuçları, her biri dahili dörtgenlere (n = 12) sahip üç bağımsız deneyin ortalaması olarak ifade edin ± SD. Meyer ve ark. tarafından belirtildiği gibi, ham ekstraktları ve LC50&lt; 1.000 μg / mL ile saf bileşikleri toksik olarak düşünün; Ayrıca, tuzlu su karidesinin ölüm oranının, test edilen numunelerin konsantrasyonu ile orantılı olduğunu dikkate alın21.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64472/64472fig02.jpg"> Şekil 2: Artemia salina öldürücülük biyotahlil yöntemi. (A) Salamura karides kistlerinin kuluçkalanması için kullanılan ticari olarak temin edilebilen ekipman; (B) El yapımı göç ekipmanları; (C) Tuzlu su çözeltisi ile doldurulmuş kuluçkalık kap; (D) Yumurtadan çıkmamış yumurta ve naupliilerin toplanması; (E) Migrasyon adımı sırasında inkübatörde bulunan el yapımı ekipman. Lambadan uzaktaki kap alüminyum folyo ile kaplanmalıdır; ancak, buradaki set kurulumunun daha iyi bir görünümü için kaldırıldı; (F) Tahlil yapılmadan önce kuyularda Artemia'nın toplanması. Bileşikler gösterildiği gibi yerleştirilmelidir: - negatif kontrole (DMSO), + pozitif kontrole (K2Cr2O7), yapay tuz çözeltisine tuza ve test edilecek numunelere 1 ila 3'e (bu durumda bileşikler 1-3) atıfta bulunur; (G) Artemia'yı ve seçilen numuneleri içeren 24 delikli plakanın kuluçkalanması; (H) Artemia dürbün mikroskobu altında sayılır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64472/64472fig02large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64472/64472fig03.jpg"> Şekil 3: Seçilmiş bileşiklerin yapıları. Plectranthus türlerinden ekstrakte edilen bileşiklerin 1-2 ve yarı sentez ile elde edilen 3-5 numaralı bileşiklerin yapısı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64472/64472fig03large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

<ol><li>Ntungwe, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artemia+species%3A+An+important+tool+to+screen+general+toxicity+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Design%22%5BJournal%5D)">Artemia species: An important tool to screen general toxicity samples.</a> Current Pharmaceutical Design. 26 (24), 2892-2908 (2020).</li>
<li>Cragg, G. M., Newman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+products%3A+A+continuing+source+of+novel+drug+leads%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+%28BBA%29+-+General+Subjects%22%5BJournal%5D)">Natural products: A continuing source of novel drug leads.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects. 1830 (6), 3670-3695 (2013).</li>
<li>Ntungwe, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+toxicity+screening+of+Royleanone+derivatives+using+an+artemia+salina+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Biomedical+and+Biopharmaceutical+Research%22%5BJournal%5D)">General toxicity screening of Royleanone derivatives using an artemia salina model.</a> Journal Biomedical and Biopharmaceutical Research. 18 (1), 114(2021).</li>
<li>Seca, A., Plant Pinto, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((secondary+metabolites+as+anticancer+agents%3A+Successes+in+clinical+trials+and+therapeutic+application%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">secondary metabolites as anticancer agents: Successes in clinical trials and therapeutic application.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (1), 263(2018).</li>
<li>Calixto, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+natural+products+in+modern+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Anais+da+Academia+Brasileira+de+Ci%C3%AAncias%22%5BJournal%5D)">The role of natural products in modern drug discovery.</a> Anais da Academia Brasileira de Ciências. 91 (3), 1-7 (2019).</li>
<li>Mandrell, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+zebrafish+chorion+removal+and+single+embryo+placement%3A+optimizing+throughput+of+zebrafish+developmental+toxicity+screens%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Laboratory+Automation%22%5BJournal%5D)">Automated zebrafish chorion removal and single embryo placement: optimizing throughput of zebrafish developmental toxicity screens.</a> Journal of Laboratory Automation. 17 (1), 66-74 (2012).</li>
<li>Zhang, Y., Mu, J., Han, J., Gu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+brine+shrimp+larvae+lethality+microwell+test+method%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+Mechanisms+and+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved brine shrimp larvae lethality microwell test method.</a> Toxicology Mechanisms and Methods. 22 (1), 23-30 (2012).</li>
<li>Domínguez-Villegas, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((antioxidant+and+cytotoxicity+activities+of+methanolic+extract+and+prenylated+flavanones+isolated+from+leaves+of+eysehardtia+platycarpa%5BTitle%5D)+AND+%22Natural+Product+Communications%22%5BJournal%5D)">antioxidant and cytotoxicity activities of methanolic extract and prenylated flavanones isolated from leaves of eysehardtia platycarpa.</a> Natural Product Communications. 8 (2), 177-180 (2013).</li>
<li>Hamidi, M. R., Jovanova, B., Panovska, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicological+evaluation+of+the+plant+products+using+Brine+Shrimp+%28Artemia+salina+L.%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Macedonian+Pharmaceutical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Toxicological evaluation of the plant products using Brine Shrimp (Artemia salina L.) model.</a> Macedonian Pharmaceutical Bulletin. 60 (01), 9-18 (2014).</li>
<li>Libralato, G., Prato, E., Migliore, L., Cicero, A. M., Manfra, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+toxicity+testing+protocols+and+endpoints+with+Artemia+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Ecological+Indicators%22%5BJournal%5D)">A review of toxicity testing protocols and endpoints with Artemia spp.</a> Ecological Indicators. 69, 35-49 (2016).</li>
<li>Mendes Hacke, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+of+cymbopogon+citratus+%28DC%29+Stapf+fractions%2C+essential+oil%2C+citral%2C+and+geraniol+in+human+leukocytes+and+erythrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity of cymbopogon citratus (DC) Stapf fractions, essential oil, citral, and geraniol in human leukocytes and erythrocytes.</a> Journal of Ethnopharmacology. 291, 115147(2022).</li>
<li>Thangapandi, V., Pushpanathan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+Artemia+salina+and+Artemia+fransiscana+bioassays+for+toxicity+of+Indian+medicinal+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Coastal+Life+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of the Artemia salina and Artemia fransiscana bioassays for toxicity of Indian medicinal plants.</a> Journal of Coastal Life Medicine. 2 (6), 453-457 (2014).</li>
<li>Syahmi, A. R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+oral+toxicity+and+brine+shrimp+lethality+of+Elaeis+guineensis+Jacq.%2C+%28Oil+Palm+Leaf%29+methanol+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Acute oral toxicity and brine shrimp lethality of Elaeis guineensis Jacq., (Oil Palm Leaf) methanol extract.</a> Molecules. 15 (11), 8111-8121 (2010).</li>
<li>Sasidharan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+impacts+of+Euphorbia+hirta+L+extract+on+behavior%2C+organs+body+weight+index+and+histopathology+of+organs+of+the+mice+and+Artemia+salina%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacognosy+Research%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity impacts of Euphorbia hirta L extract on behavior, organs body weight index and histopathology of organs of the mice and Artemia salina.</a> Pharmacognosy Research. 4 (3), 170(2012).</li>
<li>Libralato, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+case+of+Artemia+spp.+in+nanoecotoxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Environmental+Research%22%5BJournal%5D)">The case of Artemia spp. in nanoecotoxicology.</a> Marine Environmental Research. 101, 38-43 (2014).</li>
<li>Okumu, M. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artemia+salina+as+an+animal+model+for+the+preliminary+evaluation+of+snake+venom-induced+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicon%3A+X%22%5BJournal%5D)">Artemia salina as an animal model for the preliminary evaluation of snake venom-induced toxicity.</a> Toxicon: X. 12, 100082(2021).</li>
<li>Rajabi, S., Ramazani, A., Hamidi, M., Naji, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artemia+salina+as+a+model+organism+in+toxicity+assessment+of+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22DARU+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Artemia salina as a model organism in toxicity assessment of nanoparticles.</a> DARU Journal of Pharmaceutical Sciences. 23 (1), 20(2015).</li>
<li>Svensson, B. -M., Mathiasson, L., Mårtensson, L., Bergström, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artemia+salina+as+test+organism+for+assessment+of+acute+toxicity+of+leachate+water+from+landfills%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Monitoring+and+Assessment%22%5BJournal%5D)">Artemia salina as test organism for assessment of acute toxicity of leachate water from landfills.</a> Environmental Monitoring and Assessment. 102 (1), 309-321 (2005).</li>
<li>Banti, C., Hadjikakou, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+toxicity+with+brine+shrimp+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-Protocol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of toxicity with brine shrimp assay.</a> Bio-Protocol. 11 (2), 3895(2021).</li>
<li>Pecoraro, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artemia+salina%3A+A+microcrustacean+to+assess+engineered+nanoparticles+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy+Research+and+Technique%22%5BJournal%5D)">Artemia salina: A microcrustacean to assess engineered nanoparticles toxicity.</a> Microscopy Research and Technique. 84 (3), 531-536 (2021).</li>
<li>Lillicrap, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+approaches+to+vertebrate+ecotoxicity+tests+in+the+21st+century%3A+A+review+of+developments+over+the+last+2+decades+and+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Alternative approaches to vertebrate ecotoxicity tests in the 21st century: A review of developments over the last 2 decades and current status.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 35 (11), 2637-2646 (2016).</li>
<li>Ribeiro, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeasts+as+a+model+for+assessing+the+toxicity+of+the+fungicides+Penconazol%2C+Cymoxanil+and+Dichlofulanid%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Yeasts as a model for assessing the toxicity of the fungicides Penconazol, Cymoxanil and Dichlofulanid.</a> Chemosphere. (10), 1637-1642 (2000).</li>
<li>Armour, C. D., Lum, P. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+drug+to+protein%3A+using+yeast+genetics+for+high-throughput+target+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Chemical+Biology%22%5BJournal%5D)">From drug to protein: using yeast genetics for high-throughput target discovery.</a> Current Opinion in Chemical Biology. 9 (1), 20-24 (2005).</li>
<li>Modarresi Chahardehi, A., Arsad, H., Lim, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+successful+animal+model+for+screening+toxicity+of+medicinal+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a successful animal model for screening toxicity of medicinal plants.</a> Plants. 9 (10), 1345(2020).</li>
<li>Fischer, I., Milton, C., Wallace, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+testing+is+evolving%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+Research%22%5BJournal%5D)">Toxicity testing is evolving.</a> Toxicology Research. 9 (2), 67-80 (2020).</li>
<li>de Araújo, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+methods+in+toxicity+testing%3A+the+current+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Alternative methods in toxicity testing: the current approach.</a> Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. 50 (1), 55-62 (2014).</li>
<li>Toussaint, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+method+to+measure+the+sensitivity+of+yeast+cells+to+genotoxic+agents+in+liquid+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Mutation+Research%2FGenetic+Toxicology+and+Environmental+Mutagenesis%22%5BJournal%5D)">A high-throughput method to measure the sensitivity of yeast cells to genotoxic agents in liquid cultures.</a> Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 606 (1), 92-105 (2006).</li>
<li>Horzmann, K. A., Freeman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+waves%3A+New+developments+in+toxicology+with+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Making waves: New developments in toxicology with the zebrafish.</a> Toxicological Sciences. 163 (1), 5-12 (2018).</li>
<li>Avdesh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regular+care+and+maintenance+of+a+zebrafish+%28Danio+rerio%29+laboratory%3A+An+introduction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: An introduction.</a> Journal of Visualized Experiments. (69), e4196(2012).</li>
<li>Cunliffe, V. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCunliffe%2C+VT+%22Zebrafish%3A+A+Practical+Approach%22">Zebrafish: A Practical Approach</a>. Nüsslein-Volhard, C., Dahm, R. , Oxford University Press. (2002).</li>
<li>Sitarek, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insight+the+biological+activities+of+selected+Abietane+Diterpenes+isolated+from+Plectranthus+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Insight the biological activities of selected Abietane Diterpenes isolated from Plectranthus spp.</a> Biomolecules. 10 (2), 194(2020).</li>
<li>Matias, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxic+activity+of+Royleanone+Diterpenes+from+Plectranthus+madagascariensis+Benth%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">Cytotoxic activity of Royleanone Diterpenes from Plectranthus madagascariensis Benth.</a> ACS Omega. 4 (5), 8094-8103 (2019).</li>
<li>Garcia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Royleanone+derivatives+from+Plectranthus+spp.+as+a+novel+class+of+P-glycoprotein+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Royleanone derivatives from Plectranthus spp. as a novel class of P-glycoprotein inhibitors.</a> Frontiers in Pharmacology. 11, (2020).</li>
</ol>

Yazarlar, finansal veya başka türlü hiçbir çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Son yıllarda, bilimsel topluluk toksisite taramaları için alternatif modellere olan dikkatini artırmıştır21. A. salina öldürücülük biyotahlilinin yanı sıra, diğer metodolojiler genellikle numune tolere edilebilirliğinin değerlendirilmesi için yapılır ve omurgalı biyotahlilleri (kemirgenler gibi), omurgasızlar (zebra balığı gibi), maya suşları veya hücreleri kullanan in vitro yöntemler ve siliko yöntemler22,23,24,25</su...

Bitkilerden, hayvanlardan veya mikroorganizmalardan elde edilen doğal ürünler, çeşitli biyolojik ve farmakolojik aktiviteleri nedeniyle yeni biyoaktif moleküllerin geliştirilmesinde yıllar içinde artan bir ilgi alanı olmuştur1. Bununla birlikte, ilişkili yan etkiler, ilaç direnci veya ajanların yetersiz özgüllüğü, özellikle antikanser ilaçları olarak kullanıldığında, etkisiz tedaviye yol açabilecek başlıca faktörleri temsil etmektedir 1,2.
Son birkaç on yılda, bazıları antikanser ajanları olarak kullanılan birkaç bitki kaynaklı sitotoksik ajan keşfedilmiştir 1,2,3. Bu bağlamda paklitaksel, doğal kökenli en iyi bilinen ve en aktif kemoterapötik ilaçlardan biri olarak bildirilmektedir 3,4. Şu anda, piyasadaki tüm ilaçların% 35'inden fazlasının doğal ürünlerden türetildiği veya bunlardan ilham aldığı tahmin edilmektedir5. Bu bileşiklerin potansiyel yüksek toksisitesi, tüm çalışma aşamalarında dikkate alınmasını gerektirir, çünkü farklı kirletici maddeler ve hatta bitkinin metabolik bileşenleri toksik etkilere neden olabilir. Bu nedenle, yeni potansiyel bitki bazlı tedavilerin biyolojik aktivitesini ve güvenliğini değerlendirmek için ön aşamada farmakolojik ve toksikolojik profiller yapılmalıdır. Yeni biyoaktif örneklerin toksisitesini değerlendirmek için, omurgasız hayvanlar incelenecek en iyi modeller olarak düşünülebilir. Minimum etik gereklilikler talep ederler ve omurgalılarda bir sonraki test turu için en umut verici ürünlere öncelik vermek için ön in vitro testlere izin verirler 1,6.
Genellikle tuzlu su karidesi olarak bilinen A. salina, Artemia cinsine ait küçük bir halofilik omurgasızdır (Artemiidae familyası, Anostraca, subphylum Crustacea; Şekil 1). Deniz ve sucul tuzlu su ekosistemlerinde, tuzlu su karidesleri mikroalglerle beslendikleri ve balıkları beslemek için kullanılan zooplanktonun bileşenleri oldukları için önemli bir besinsel rol oynarlar. Ayrıca, larvaları (nauplii olarak bilinir), ön çalışmalarsırasında genel toksisitenin değerlendirilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır 1,3,7.
Artemia spp. öldürücülük çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır ve aynı zamanda laboratuvarda yetiştirilen nauplii'yi öldürme yeteneklerine dayanarak potansiyel olarak biyoaktif bileşiklerin toksisitesini izleyerek toksisite değerlendirmeleri için uygun bir başlangıç noktasıdır 1,8. Bu nedenle, A. salina kullanımı genel toksisite çalışmalarında cazibe kazanmıştır, çünkü hayvan modelleri9 üzerindeki diğer testlere kıyasla çok verimli ve kullanımı kolay bir yöntemdir.
Basit anatomileri, küçük boyutları ve kısa yaşam döngüleri sayesinde, çok sayıda omurgasız tek bir deneyde incelenebilir. Bu nedenle, genetik uygunluğu ve düşük maliyetli uyumluluğu büyük ölçekli taramalarla birleştirirler1. Bu bağlamda, genel bir toksisite tahlilinde tuzlu su karidesinin kullanılması, hızlı büyüme (kuluçkadan ilk sonuçlara kadar 28-72 saat gereklidir), maliyet etkinliği ve ticari yumurtaların uzun raf ömrü gibi tüm yıl boyunca kullanılabilen 3,10 gibi çeşitli avantajlar göstermektedir. Öte yandan, omurgasızlar ilkel bir organ sistemine sahip olduklarından ve adaptif bir bağışıklık sisteminden yoksun olduklarından, insan hücreleri için mükemmel ve güvenilir bir model temsil etmezler1.
Bununla birlikte, seçilen numunelerin genel toksisitesi için bir ön değerlendirme yöntemi sağlar. Ölümcül bir tahlil olarak yaygın olarak kullanıldığından, potansiyel antikanser ajanlarının toksik etkileri hakkında geçici endikasyonlar sağlayabilir. Genellikle Artemia karidesleri arasında mümkün olan en düşük ölüm oranını göstermenin gerekli olduğu diğer biyolojik aktivitelerle donatılmış bileşiklerin genel toksisitesi hakkında geri bildirim almak için de kullanılır.
Grubumuzdan devam eden bir çalışmada, Plectranthus türlerinden elde edilen farklı ekstraktlar antioksidan ve antimikrobiyal aktiviteler göstermiştir (yayınlanmamış sonuçlar). Paralel olarak, ekstraktların saflaştırılmasıyla izole edilmiş bileşikler elde edildi ve daha sonra kimyasal olarak modifiye edildi. Ekstraktlar, saf bileşikler ve yarı sentetik türevler daha sonra genel toksisite açısından test edildi. Bu bağlamda, bu çalışma, Plectranthus11 cinsinin farklı bitkilerinden biyoaktif ekstraktların ve izole edilmiş bileşiklerin genel toksisitesi ve potansiyel sitotoksik aktivitesinin değerlendirilmesi için Artemia öldürücülük biyotestinin kullanımına genel bir bakış sunmayı amaçlamaktadır.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64472/64472fig01.jpg"> Resim 1: Mikroskop altında Artemia salina . Mikroskop altında görüldüğü gibi A. salina'nın yeni yumurtadan çıkmış nauplii (büyütme 12x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64472/64472fig01large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

<table><tbody><tr><td>24 kuyulu plakalar</td><td>Thermo Fisher Scientific, Danimarka</td><td>174899</td><td>Thermo Scientific Nunc Up Cell 24 çok çanaklı</td></tr><tr><td>Alüminyum folyo</td><td>Albal-Süpermarkette</td><td></td> <td>satın alınabilir</td></tr><tr><td>Artemio Set</td><td>JBL GmbH and Co. KG, D-67141, Neuhofen Almanya</td><td>61066000</td><td>Evcil hayvan dükkanlarından satın alınabilir</td></tr><tr><td>Binoküler mikroskop</td><td>Ceti, Belçika</td><td>  1700.0000</td><td>Flexum-24AED, 220-240 V, 50 Hz</td></tr><tr><td>Şişeler</td> <td>-</td><td></td> <td>0.5 L Çap: 5.8 cm; Yükseklik: 12 cm</td></tr><tr><td>Salamura karides kistleri</td><td>JBL GmbH and Co. KG, D-67141, Neuhofen Almanya</td><td>3090700</td><td>Evcil hayvan dükkanlarından satın alınabilir</td></tr><tr><td>Salamura karides tuzu</td><td>JBL GmbH and Co. KG, D-67141, Neuhofen Almanya</td><td>3090600</td><td>Evcil hayvan dükkanlarından satın alınabilir</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>VWR kimyasalları</td><td>CAS: 67-68-5</td><td>  % 99 saflık</td></tr><tr><td>Çözülebilir uçlar</td><td>Elmas</td><td>F171500</td><td>Hacim aralığı: 100 - 1000 &amp;mikro; L</td></tr><tr><td>Eppendorf mikrotüpler</td><td>MARKA</td><td>7,80,546</td><td>Mikrotüpler, PP, 2 mL, BIO-CERT  PCR KALİTESİ</td></tr><tr><td>Erlenmeyer şişesi</td><td>VWR kimyasalları</td><td>4,47,109</td><td>hacim: 100 mL</td></tr><tr><td>Cam beher</td><td>Normax</td><td>3.2111654N</td><td>Hacim: 1000 mL</td></tr><tr><td>Eldiven</td><td>Guantes Luna</td><td>GLSP3-GraphPad</td><td></td></tr> <tr><td>Prism</td><td>GraphPad Software, San Diego, CA,</td> <td>ABD-Windows</td><td>, www.graphpad.com için GraphPad Prism sürüm 5.00, 5 Şubat 2021'de erişildi; Ticari İstatistik analiz yazılımı</td></tr><tr><td>Ev yapımı A. salina Yetiştirici</td><td> -</td><td> -</td><td>Ev yapımı: bir hortumla bağlanmış iki plastik şişe</td></tr><tr><td>Sıcak tutkal</td><td>Parkside</td><td>PHP500E3</td><td>230 V, 50 Hz, 25 W</td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td>: Heidolph Instruments, Danimarka </td><td> -Bir</td> <td>adet Heidolph Unimax 1010 ekipmanı ve bir adet Heidolph Inkubator 1006</td></tr><tr><td>Light</td><td>Roblan</td><td>SKYC3008FE14</td><td>LED ampul</td></tr><tr><td>Mikropipetler</td><td>VWR kimyasalları</td><td>613-5265</td><td>Hacim aralığı: 100 - 1000 &amp;mikro; L</td></tr><tr><td>Potasyum dikromat (K &lt; alt &gt; 2 &lt; / alt &gt;Cr &lt; alt &gt; 2 &lt; alt &gt; O &lt; alt &gt; 7 &lt; / alt &gt;)</td> <td>VWR kimyasalları</td><td>CAS: 7778-50-9</td> <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td> </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td><img alt="Denklem 1" src="/files/ftp_upload/64472/64472eq02.jpg" style="margin: auto; "></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>&amp;derece</td></tr></tbody></table>

artemia salina l. kullanarak Öldürücülük biyotahlili

Lethality Bioassay Using Artemia salina L.

Doğal ürünler antik çağlardan beri ilaç üretmek için kullanılmıştır. Günümüzde, doğal kaynaklardan elde edilen ve çok sayıda hastalığa karşı kullanılan birçok kemoterapötik ilaç bulunmaktadır. Ne yazık ki, bu bileşiklerin çoğu sıklıkla sistemik toksisite ve yan etkiler gösterir. Seçilmiş potansiyel biyoaktif örneklerin tolere edilebilirliğini daha iyi değerlendirmek için, tuzlu su karidesi (Artemia salina) genellikle öldürücülük çalışmalarında bir model olarak kullanılır. A. salina testi, çalışılan biyoaktif bileşiklerin larva evrelerinde (nauplii) mikrokabukluları öldürme yeteneğine dayanmaktadır. Bu yöntem, sitotoksisite çalışmaları ve sentetik, yarı sentetik ve doğal ürünlerin genel toksisite taraması için uygun bir başlangıç noktasını temsil eder. Yukarıda belirtilen amaçlar için genellikle uygun olan diğer birçok tahlille (in vitro hücreler veya maya suşları, zebra balığı, kemirgenler) karşılaştırıldığında basit, hızlı ve düşük maliyetli bir tahlil olarak kabul edilebilir; dahası, herhangi bir özel eğitim olmadan bile kolayca gerçekleştirilebilir. Genel olarak, A. salina testi, seçilen bileşiklerin ön toksisite değerlendirmesi ve doğal ürün ekstraktlarının biyo-rehberli fraksiyonasyonu için yararlı bir araçtır.

Son zamanlarda grubumuz tarafından incelenen bazı doğal ürünlerin genel toksisitesi, tuzlu su karidesi öldürücülük biyotahlili ile değerlendirilmiştir. Dört ekstrakt (Pa- P. ambigerus; Pb- P. barbatus; Pc- P. cylindraceus; ve antioksidan aktiviteleri ile bilinen Plectranthus cinsinden Pe- P. ecklonii) test edildi (yayınlanmamış sonuçlar). Ek olarak, Plectranthus spp.'den elde edilen iki doğal bileşik (1 ve 2) ve üç yarı sentetik türev (3, 4, 5; Şe...

Bu çalışma, tuzlu su karides öldürücülük testi olarak da tanımlanan Artemia salina öldürücülük biyotahlil prosedürünü değerlendirmeyi ve gözden geçirmeyi amaçlamaktadır. Bu basit ve ucuz yöntem, numunelerin, yani doğal ürünlerin genel toksisitesi (ön toksisite değerlendirmesi olarak kabul edilir) hakkında bilgi verir.

Artemia salina L. Kullanarak Öldürücülük Biyotahlili

Natural products have been used since ancient times to produce medicines. Nowadays, there are plenty of chemotherapeutic drugs obtained from natural ...

Bu protokol, farklı doğal veya sentetik kaynaklardan elde edilen ekstraktlar, fraksiyonlar ve bileşikler gibi farklı numune türleri üzerinde ön genel toksisite değerlendirmesi için çok yararlı bir araçtır. Protokolümüzün temel avantajı, çok kolay ve ucuz olması ve aynı anda birçok örnekte kullanılabilmesidir. Ayrıca, el yapımı ekipman sitenin güvenilirliğini artırır.Bu teknik aşamasında, numuneleri, geniş hücre hatları ve hatta in-vivo testler gibi daha spesifik testlere tabi tutulacak ön genel toksisite profillerine göre seçmek için bir tarama yapıyoruz. Bu yöntem esas olarak biyotik numuneleri taramak için tıbbi ve diğer ürünler kimyası alanlarında kullanılmaktadır. Protokolümüz nanosistemler gibi diğer örnekler için de kullanılabilir.İlk kez performans gösterirken, sabırlı olun çünkü bu iyi gözlem becerileri gerektirir ve Marcia Filipe ve Vera Isca'nın bildirdiği tüm parametrelere çok dikkat edilmesi gerekir, laboratuvarımızdaki doktora öğrencileri bu prosedürü göstermeye yardımcı olacaktır. Huni şeklindeki kabı siyah desteğe yerleştirerek ve seviye işaretini ve musluğu görmek için huniyi uygun bir yöne çevirerek başlayın. El yapımı göç ekipmanını yapmak için, 12 santimetrelik son bir yükseklik elde etmek için iki adet 0,5 litrelik plastik şişenin üstünü kesin.Bir tarafta 1,5 santimetre çapında ve her şişenin dibinden yedi santimetre çapında bir delik oluşturun ve iki açıklık arasına 13 santimetrelik bir lastik tüp yerleştirin. Açıklıkları sıcak tutkalla kapatın ve 15 dakika kurumaya bırakın. Şişeleri düz bir yüzeye koyun ve sızıntı olmadığından emin olmak için suyla doldurun.Yapay tuz çözeltisini hazırlamak için 800 mililitre musluk suyuna 28 gram tuz ekleyin veya litre başına 35 gram konsantrasyonda salamura karides tuzu ekleyin. Tüm tuz iyice çözülene kadar bir karıştırma çubuğuyla karıştırın. Numuneleri hazırlamak için, her bir ekstraktın uygun bir miktarını ve bileşik dimetilsülfoksit veya DMSO'yu, mililitre başına 10 miligramlık bir nihai konsantrasyonda çözün.Daha sonra, mililitre başına 0.1 miligramlık bir nihai konsantrasyon elde etmek için 990 mikrolitre yapay tuzlu su çözeltisi kullanarak her numunenin 10 mikrolitresini yeni bir mikro santrifüj tüpünde seyreltin. Bir Erlenmeyer şişesindeki bir duman başlığının altında, mililitre başına bir miligram konsantrasyonda damıtılmış suda bir potasyum dikromat çözeltisi hazırlayın. Kuluçkalık kabı 500 mililitre işaretine kadar olan ortamla doldurun ve tuz çözeltisine bir kaşık veya yaklaşık 0,5 gram tuzlu su karides kisti ekleyin.Kapsayıcıyı kapatın. Doğrudan ekipmana doğru işaret eden bir lamba yerleştirin ve açın. Hava tedarikçi sistemini ekipmanın üzerine yerleştirilen konektöre takın ve pompayı açın.Salamura karides kistleri, güçlü havalandırma, sürekli aydınlatma ve sabit sıcaklık altında yapay tuz çözeltisinde yumurtadan çıkar. 24 ila 48 saat sonra, yumurtalar yumurtadan çıktığında, hava pompasını kapatın ve nauplii boş yumurta kutularından ayrılana kadar bekleyin. Yumurtadan çıkmamış yumurtaları canlı nauplii'den ayırmak için, alttaki çıkış musluğunu açın ve huninin içeriğini el yapımı göç ekipmanı kabının kaplarından birine boşaltın.Nauplii ve artık yumurtadan çıkmamış yumurtaları içeren çözeltinin tüp seviyesinin altında olduğundan emin olun. Ekipmanı dört saat boyunca inkübatöre yerleştirin, ardından ikinci kaba artık tuz çözeltisini tüpün yüksekliğinin üzerine ekleyin. Kabı nauplii ve artık yumurtadan çıkmamış yumurtaları alüminyum folyo kullanarak örtün ve lambayı sadece tuz çözeltisi ile ikinci kaba yerleştirin.Salamura karidesi ışıktan etkilenecek ve bir kaptan diğerine göç edecek ve yumurtalar ile canlı artemi arasında etkili bir ayrıma yol açacaktır. Hasat kabından, 10 ila 15 nauplii içeren 900 mikrolitre tuzlu su çözeltisi toplayın ve çözeltiyi 24 kuyucuklu bir plakanın bir oluğuna yerleştirin. Tüm numuneler kuadruplikatlar halinde test edilir.Her negatif kontrolden 100 mikrolitre ekleyin. Pozitif kontrol, yapay tuz çözeltisi ve numunelerin her biri kuyucuklara gider ve plakayı 24 saat boyunca aydınlatma altında inkübe eder. 24 saat sonra, her bir kuyucuktaki ölü larva sayısını dürbün mikroskobu altında 12 x büyütmede kaydedin.Kalan canlı larvaların ölümüne neden olmak için 100 mikrolitre potasyum dikromat çözeltisi ekleyin ve altı saat bekleyin. Her bir kuyucuktaki toplam ölü larvaları mikroskop altında sayın ve ekranda gösterilen denkleme göre ölüm oranını belirleyin. Tüm testleri üçlü olarak gerçekleştirin ve standart sapmaları hesaplayın.Son olarak, sonuçları, her biri iç dörtlü artı eksi standart sapmalara sahip üç bağımsız deneyin ortalaması olarak ifade edin. Plectranthus türlerinden ekstrakte edilen ve yarı sentez ile elde edilen seçilmiş bileşiklerin yapısı bu şekilde gösterilmiştir. Artemia Salina'nın mikroskop altında görüldüğü gibi yeni yumurtadan çıkmış bir nauplii bu resimde gösterilmiştir.Bu grafiksel görüntü, Plectranthus türlerinin dört metanol ekstraktına mililitre başına 0.1 miligramda 24 saat maruz kaldıktan sonra Artemia Salina'nın ölüm oranını temsil etmektedir. Tüm ekstraktlar bu tahlil kullanılarak genel toksisite açısından kabul edilebilirdi. Burada tuz, tuz çözeltisine veya boşluğa karşılık gelir.Potasyum dikromat pozitif kontrol olarak, DMSO ise negatif kontrol olarak kullanıldı. Test edilen tüm ekstraktlar, boş ve negatif kontrol için kayıtlı olanlarla karşılaştırılabilir çok düşük ölüm yüzdeleri değerleriyle çok cesaret verici sonuçlar göstermiştir. Artemia Salina'nın beş saf bileşiğe mililitre başına 0.1 miligramda 24 saat maruz kaldıktan sonra ölüm oranı bu şekilde sunulmuştur.Bu verilerden, sadece beşinin bu tahlili kullanarak minimum toksisite gösterdiği açıktır Özellikle üç adımı hatırlamanız gerekir, kuluçkalama, göç ve toplama. Sonuç olarak, ayrılan başka karideslerimiz ve çalışılacak sayılarımız var. Ön bölge, hücre kültürü veya zebra balığı gibi diğer bölgelere kıyasla basit ve düşük maliyetli bir model kanal toksisitesidir.Ayrıca, daha pahalı sitotoksisite bölgeleri daha sonra kullanılabilir.

lethality-bioassay-using-artemia-salina-l

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Bu çalışmada, kimyasal maddeler, endüstriyel atık su veya kanalizasyon ve tuzlu kabuklu sıvı çevresel örneklerde tarafından uygulanan uzun vadeli (14 gün) ölümcül toksisite belirlemek için değerli bir metodolojik protokolünün geliştirilmesi ve standardizasyonu ile...

Kabuklu uzun vadeli Lethal Toksisite Testi Artemia Franciscana</em

Embriyonik evreler, ksenobiyotiklere en duyarlı olanlardır. Kimyasal toksisite tuzluluğa bağlı olmasına rağmen, toksisitenin suda yaşayan organizmalara tuzluluk bağımlılığını test etmek için hiçbir yöntem yoktur. Burada, toksisitenin suda yaşayan embriyolara tuzluluk bağımlılığını belirlemek için yeni ve yüksek verimli bir yöntem açıklıyoruz.

Medaka Yumurta kullanma Gümüş Nanocolloids tuzluluk bağımlı zehirlilik Deneyi

Endokrin Bozucu Bileşikler (EDC) Akuatik çevre için önemli bir risk oluşturmaktadır. Belediye atıksu arıtma tesisleri yüzey sularının östrojenik etki gücüne önemli katkıda bulunmaktadır. Bu yazıda verilen metodoloji EDC kaldırılması ile ilgili etkinlik ve atıksu arıtma süreçlerinin uygunluğunun değerlendirilmesi için izin verir.

Atıksu Arıtma Süreçlerinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için Kimya ve Ekotoksikolojik Yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik Potency çıkarmak

Bu çalışma, kirleticilerin ekotoksisitesini değerlendirmek için nanomalzemeler gibi gelişmekte olan bulaşıcılar da dahil olmak üzere deniz bakterisini Vibrio anguillarum kullanarak yeni bir protokolü açıklamaktadır . Bu yöntem, LC 50'nin veya 6 saatlik maruz kaldıktan sonra bakteri kültürlenebilirliğinde% 50 azalmaya neden olan ölüm konsantrasyonunun belirlenmesine izin verir.

Deniz Bakterileri ile Ekotoksikolojik Yöntem<emVibrio anguillarum</em&gt; Çevresel Kirleticilerin Akut Zehirliliğini Değerlendirmek

Bu çalışmada, akut, kronik ve multigenerational bir bioassay turkuaz killifish Nothobranchius furzeritek ve kombine stresler etkilerini çalışmaya açıklar. Bu iletişim kuralı hayat-Tarih özellikleri (ölüm, büyüme, verimlilik, ağırlık) ve kritik termal maksimum çalışma için tasarlanmıştır.

Akut ve kronik Ecotoxicity test turkuaz Killifish Nothobranchius furzeri için iletişim kuralı

Bu iletişim kuralı, biz Astyanax mexicanus yetişkin doğurmak, larvalar yükseltmek nasıl gösterir ve bütün Dağı immünhistokimya yüzey fenotipleri karşılaştırmak ve morphotypes mağara sonrası larva balık gerçekleştirin.

Meksika Tetra Astyanax mexicanus analiz Post-larval fenotipleri ve bütün Dağı immünhistokimya için yetiştirme

Zebra balığı embriyoları kimyasal bileşiklerin toksisitesini değerlendirmek için kullanılır. Onlar harici geliştirmek ve kimyasallara duyarlı, ince phenotik değişikliklerin tespitine izin. Deney sadece doğrudan embriyo içeren plaka eklenir bileşik küçük bir miktar gerektirir, test sistemi verimli ve maliyet-etkin hale.

Zebrabalığı Embriyoları Kullanılarak Kimyasal Bileşiklerin Toksisitesinin Hızlı Değerlendirilmesi

Bu protokol, zebra balığı embriyo (ZEM2S) ve karaciğer (ZFL) hücre hatlarında 96 kuyucuklu plakalarda sitotoksisitenin değerlendirilmesi için uyarlanmış yaygın olarak kullanılan sitotoksisite testlerini (Alamar Blue [AB], CFDA-, Nötr Kırmızı ve MTT testleri) sunar.

Zebra Balığı Hücre Hatları ile Sitotoksisite Testleri

Zebra balığı embriyo titreşimi ürkütücü tepkisine dayalı olarak kimyasal bileşik toksisitesini değerlendirmek için bir tarama sisteminin iş akışını ve veri analizini açıklıyoruz. Sistem, zebra balığı embriyolarının bir titreşim uyaranına maruz kaldıklarında hareketlerini kaydeder ve genel toksisite/ölümcüllük ve nöromüsküler toksisitenin entegre bir değerlendirmesine izin verir.

Zebra Balığı Titreşim İrkilme Tepkisi Tarama Sistemi Kullanılarak Kimyasalların Toksisitesinin Değerlendirilmesi

Makale, Mytilus galloprovincialis hemositlerinin motilitesine dayalı olarak kirleticilerin toksisitesinin ve ekotoksisitesinin hızlı ve hassas bir şekilde değerlendirilmesi için yeni bir in vitro yöntem önermektedir. Yöntem, daha etik ve hassas toksikolojik ve ekotoksikolojik maruziyet testlerinin geliştirilmesine katkıda bulunmayı amaçlamaktadır.

Midye (Mytilus galloprovincialis) Hemosit Motilitesine Dayalı Toksikolojik ve Ekotoksikolojik Bir Test

Keşfedin Artemia salina öldürücülük biyoassayını toksisite taraması için. Bu basit ve ekonomik yöntem, doğal ve sentetik örneklerin ön değerlendirmesinde ilaç kimyasında değerli bir araçtır.

Artemia salina L. Kullanarak Öldürücülük Biyotahlili

Daha fazla video keşfet