Name: Noninvaziv Mikrodiyaliz Tekniği ile Sıçan Kalbinden Dinamik Sürekli Kan Ekstraksiyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 52 s
Description: Öğrenin, sıçan kalbinden noninvaziv mikrodiyaliz ile dinamik kan ekstraksiyonunu. Bu yöntem, kardiyovasküler hastalıklarda biyobelirteç analizi ve gerçek zamanlı izleme için gelişmiş bir alternatif sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82104533), Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı (2020M683273), Sichuan eyaleti Bilim ve Teknoloji Bölümü (2021YJ0175) ve Sichuan İl Bilim ve Teknoloji Planı'nın Anahtar Ar-Ge projesi (2022YFS0438) tarafından desteklenmiştir. Bu arada, yazarlar TRI-ANGELS D&H TRADING PTE'de kıdemli bir ekipman mühendisi olan Bay Yuncheng Hong'a teşekkür etmek istiyor. LTD. (Singapur şehri, Singapur), mikrodiyaliz teknikleri için teknik hizmetler sağlamak için.

Hayvan protokolü, Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi İdari Komitesi tarafından onaylanmıştır (Kayıt numarası: 2021-11). Belirtilen patojensiz erkek Sprague Dawley (SD) sıçanları (8-10 hafta, 260-300 g) bağımsız ventilasyon kafeslerinde yetiştirildi, laboratuvar ortamı 22 °C ve %65 bağıl nemde tutuldu ve bu çalışmada kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bakınız Malzeme Tablosu). Tüm sıçanlar, dönem boyunca serbest su ve diyetle 1 hafta boyunca adaptif beslenmeye alışmıştır.
1. Deneysel hazırlık
<ol><li>Kan örneklemesinin mikrodiyalizinde yer alan ekipmanı Şekil 1'de gösterildiği gibi bir araya getirin (bkz.</li>
	<li>Mikrodiyaliz kan alımı için perfüzyon sıvısı olarak 3.50 mmol/L sitrat, 7.50 mmol/L sodyum sitrat ve 13.60 mmol/L glikoz içeren anti-koagülan sitrat dekstroz çözeltisi ( ACD'ler) hazırlayın (bkz.</li>
	<li>Kullanmadan önce, ACD'leri 0.22 μm membran filtrasyon ünitesi ile filtreleyin ve kabarcıkları ultrasonik olarak çıkarın. SD sıçanlar için stimülasyonu azaltmak için ACD'leri 37 ° C'de tutun.</li>
</ol>2. Mikrodiyaliz boru sisteminin açıklık muayenesi
<ol><li>Diyaliz ünitesinin probunun girişini şırınga iğnesi, boru adaptörü ve fep tüpü ile takın ( bkz. NOT: Mikrodiyaliz probunun mavi ucu sıvı akışı içindir ve şeffaf ucu sıvı çıkışı içindir.</li>
	<li>ACD18'i boru sistemine 2 μL/dak hızında geçirerek mikrodiyaliz boru sisteminin açıklığını kontrol edin. NOT: ACD'ler numune toplama bölgesinden akıyorsa, engelsiz mikrodiyaliz sistemi daha fazla kardiyak kan alımı için kullanılabilir. Değilse, kan probu kırık sızıntılar için veya boru-boru ekleminin kapalı olup olmadığı kontrol edilmelidir.</li>
</ol>3. Mikrodiyaliz probu implantasyonu
<ol><li>Sıçanları 0.6 L / dak'lık bir hava-oksijen karışımında% 2 izofluran ile uyuşturun, tamamen bilinçsiz sıçanları ameliyat masasına sabitleyin ve bir hayvan sıcaklığı tutucu kullanarak vücut sıcaklığını 37 ° C'de tutun (bkz.</li>
	<li>Kürkü bir elektrikli tıraş makinesi ile boyundan çıkarın ve cerrahi bölgeyi üç alternatif betadin turu ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. Sıçana bupivakain (1.5 mg / kg) enjekte edin. Sağ juguler veni, yumuşak doku ve perivasküler fasyanın künt diseksiyonu ile boynun orta hattı boyunca 1,5 cm'lik bir kesiden geçirin. NOT: Deneyde kullanılan tüm cerrahi alet ve aletler otoklavlama ile önceden sterilize edilmelidir. Steril eldivenler ve cerrahi örtüler kullanın. Tüm deneysel işlem steril bir ortamda yapılmalıdır. Anestezi ve analjezi rejimi için yerel hayvan kullanım kılavuzlarını izleyin.</li>
	<li>Kan akışını geçici olarak engellemek için kalbin distal ucundaki sağ juguler vende 4-0'lık bir cerrahi sütür kullanarak çıkarılabilir bir slipknot yapın ve kalbin yakınındaki sağ juguler vende 1.5 cm'lik bir kesi yapın.</li>
	<li>İğne şeklinde bir kateter stili (uzunluk 25 mm, çap 0.7 mm, bakınız Malzeme Tablosu) sıçan kalbinin proksimal ucuna doğru sağ juguler ven içine yerleştirin, kan mikrodiyaliz probunu (toplam prob uzunluğu 24 mm, membran uzunluğu 10 mm) bir kateter içine yerleştirin ve probu kateter stylet19'un eğik insizyonu boyunca oftalmik forseps ile implante edin.</li>
	<li>Kılavuzlu kateter stilini çıkarın ve probun yarı geçirgen membranını (membran uzunluğu 10 mm, membran çapı 0,5 mm) sağ juguler ven içine tamamen daldırın. Sağ juguler vendeki kan akışını yeniden sağlamak için kalbin distal ucundaki çıkarılabilir kaymayı çözün.</li>
	<li>Probu 4-0 cerrahi dikiş kullanarak sağ juguler ven ile bağlayın ve prob kuyruk tüpünü boynun arkasından deri altından geçirin. Belirli prob implantasyon adımları için Şekil 2'ye bakınız. NOT: Bu çalışmada kullanılan kan mikrodiyaliz probu ile moleküler kesim >20 kD'dir. Toplanan kan örnekleri, moleküler ağırlığı 20 kD'den az olan maddeler içerir.</li>
</ol>4. Mikrodiyaliz örneklemesi
<ol><li>Mikrodiyaliz probu implantasyonundan bir hafta sonra, cerrahi travmadan iyileşen sıçanlar mikrodiyaliz örneklemesine tabi tutulur. Uyanık sıçanı serbest hareket eden bir tanka yerleştirin ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve probu mikrodiyaliz sistemine bağlayın. ACD'leri 1 saat boyunca 2 μL / dak hızında sulayarak prob diyaliz membranını dengeleyin.</li>
	<li>Mikrodiyaliz kan örneklerini 2 μL / dak akış hızında toplayın ve geçici olarak 4 ° C fraksiyonel bir kapta saklayın. NOT: Elde edilen kan örnekleri, oda sıcaklığında 10 dakika boyunca 20.000 x g'de santrifüj edilerek doğrudan test edilebilir. Veya aşağıdaki testler için -80 ° C'de saklanabilir. Numune toplarken, probun prolapsusu ve / veya sızıntısı olup olmadığını gözlemlemek her zaman önemlidir.</li>
</ol>5. Numune alma sonrası işlem
<ol><li>SD sıçanları 0.6 L / dak'da bir hava-oksijen karışımında% 2 izofluran ile uyuşturun.</li>
	<li>Probun sağ juguler vende olduğunu tekrar doğrulamak için diseksiyon. Mikrodiyaliz probunu sağ juguler damardan çıkarın ve ultra saf suya koyun.</li>
	<li>Son olarak, sıçanları% 5 izofluran soluyarak ötenazi yapın.</li>
	<li>Probu boru hattına bağlayın ve boru ve probdaki artık tuzu tamamen temizlemek için gece boyunca ultra saf su ile 2 μL / dak hızında durulayın.</li>
	<li>Probu çıkarın ve ultra saf suya batırın. Prob diyaliz membranının büzülmesini önlemek için 4 °C'de saklayın. NOT: Diyaliz sıvısının hacmi perfüzyon sıvısının hacmi ile tutarsızsa, prob pıhtılaşmış kan tarafından bloke edilebilir. Prob, görünür madde prob zarının ucundan pul pul dökülene kadar pankreas protein çözeltisine yerleştirilebilir.</li>
</ol>

<ol><li>van Rensburg, W. J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-mortem+evidence+of+a+diverse+distribution+pattern+of+atherosclerosis+in+the+South+African+population%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population.</a> Scientific Reports. 12 (1), 11366(2022).</li>
<li>Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+prevention+and+management+of+pre-existent+cardiovascular+disease+in+a+cohort+of+prostate+cancer+survivors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cancer+Survivorship%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors.</a> Journal of Cancer Survivorship. , (2022).</li>
<li>Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+risk+in+people+with+severe+mental+disorders%3A+an+update+and+call+for+action%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action.</a> Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).</li>
<li>Izumi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+circulating+cathepsin+K+on+the+coronary+calcification+and+the+clinical+outcome+in+chronic+kidney+disease+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients.</a> Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whey+protein+hydrolysate+alleviated+atherosclerosis+and+hepatic+steatosis+by+regulating+lipid+metabolism+in+apoE-%2F-+mice+fed+a+Western+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Research+International%22%5BJournal%5D)">Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet.</a> Food Research International. 157, 111419(2022).</li>
<li>Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nesfatin-1+in+cardiovascular+orchestration%3A+From+bench+to+bedside%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside.</a> Pharmacological Research. 156, 104766(2020).</li>
<li>Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+a+LC-MS%2FMS+method+for+evaluating+lung+penetration+of+tobramycin+in+rats+by+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).</li>
<li>Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+microdialysis+and+its+applications+in+experimental+neurochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry.</a> Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).</li>
<li>Joukhadar, C., Müller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis%3A+current+applications+in+clinical+pharmacokinetic+studies+and+its+potential+role+in+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future.</a> Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).</li>
<li>Stangler, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+and+microperfusion+electrodes+in+neurologic+disease+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids+and+Barriers+of+the+CNS%22%5BJournal%5D)">Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring.</a> Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52(2021).</li>
<li>Young, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Nursing+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Cerebral microdialysis.</a> Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).</li>
<li>O'Connell, M. T., Krejci, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+techniques+and+microdialysis-based+patient-near+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).</li>
<li>Hammarlund-Udenaes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+as+an+important+technique+in+systems+pharmacology-a+historical+and+methodological+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).</li>
<li>Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Human microdialysis.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).</li>
<li>Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microdialysis+as+a+tool+for+assessing+the+delivery+of+chemotherapy+in+brain+tumor+patients%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients.</a> World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).</li>
<li>Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+in+equine+research%3A+a+review+of+clinical+and+experimental+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings.</a> Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).</li>
<li>Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+release+of+neurotransmitters+from+superficial+and+deep+layers+of+the+dorsal+horn+in+response+to+acute+noxious+stimulation+and+inflammation+of+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pain%22%5BJournal%5D)">Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw.</a> European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).</li>
<li>Li, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+sampling+and+HPLC-MS%2FMS+quantification+of+sinomenine%2C+ligustrazine%2C+gabapentin%2C+paracetamol%2C+pregabalin+and+amitriptyline+in+rat+blood+and+brain+extracellular+fluid%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmaceutica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid.</a> Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).</li>
<li>Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+study+of+Aztreonam-Avibactam+distribution+in+peritoneal+fluid+and+muscle+of+rats+with+or+without+experimental+peritonitis%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228(2018).</li>
<li>Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+metabolic+landscape+of+iron+and+ferroptosis+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease.</a> Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).</li>
<li>Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+risk+reduction+and+body+mass+index%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Hypertension+Reports%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease risk reduction and body mass index.</a> Current Hypertension Reports. , (2022).</li>
<li>Kim, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((School+racial+segregation+and+long-term+cardiovascular+health+among+Black+adults+in+the+US%3A+A+quasi-experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Medicine%22%5BJournal%5D)">School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study.</a> PLoS Medicine. 19 (6), 1004031(2022).</li>
<li>Qin, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+m6A+RNA+methylation+in+cardiovascular+disease+%28Review%29%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review).</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).</li>
<li>Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+aspects+of+the+%28pro%29renin+receptor%3A+Function+and+significance%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance.</a> FASEB Journal. 36 (4), 22237(2022).</li>
<li>Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intermediary+role+of+the+central+cyclooxygenase+%2F+lipoxygenase+enzymes+in+intracerebroventricular+injected+nesfatin-1-evoked+cardiovascular+effects+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats.</a> Neuroscience Letters. 756, 135961(2021).</li>
<li>Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+blood+collection+techniques+in+mice+and+their+effects+on+welfare%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).</li>
<li>Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+applications+of+cutaneous+microdialysis%3A+Continuous%2Bintermittent+vs+continuous-only+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).</li>
<li>Reyes-Garcés, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+brain+sampling+using+a+microextraction+probe+reveals+metabolic+changes+in+rodents+after+deep+brain+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation.</a> Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).</li>
<li>Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+microdialysis+calibration+methods%3A+the+theory+and+current+related+efforts%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts.</a> Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).</li>
<li>Zhuang, L. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Theory+and+application+of+microdialysis+in+pharmacokinetic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies.</a> Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).</li>
<li>Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabonomics+research+strategy+based+on+microdialysis+technique%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Metabonomics research strategy based on microdialysis technique.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).</li>
<li>Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+monitoring+in+traumatic+brain+injury%3A+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis.</a> Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).</li>
<li>Brunner, M., Langer, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+versus+other+techniques+for+the+clinical+assessment+of+in+vivo+tissue+drug+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution.</a> The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).</li>
<li>Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+dermal+microdialysis+for+the+evaluation+of+bioequivalence+of+a+ketoprofen+topical+gel%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).</li>
<li>Dhanani, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+rates+of+combination+antibiotic+therapy+using+in+vitro+microdialysis+simulating+in+vivo+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions.</a> Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

KVH'ler, Çin'de insidansı giderek artan kliniklerde yaygın bir kronik hastalıktır ve başlangıç yaşı daha genç olma eğilimindedir ve çoğu hastanın endişe ve paniğine neden olur20,21. Dünyada önde gelen ölüm nedeni olan KVH'ler, serebral enfarktüs ve diğer yüksek mortalite hastalıklarına neden olabilir ve hastaların sağlıklı yaşamını ciddi şekilde tehdit edebilir22. İskemik kalp hastalığı, kardiyomiyopati, ateroskleroz, yüksek tansiyon, felç...

Yaşam hızının hızlanması ve psikolojik baskının artmasıyla birlikte, kardiyovasküler hastalıklar (KVH) genç, orta yaşlı ve yaşlı insanlarda ortaya çıkma eğilimindedir 1,2. KVH'lerin morbidite ve mortalitesi yüksektir, akut başlangıç, hızlı progresyon ve hastalığın uzun seyri özellikleri ile hastaların güvenliğini ciddi şekilde etkiler3. CVD'lerin oluşumu, kolesterol, serum lipitleri, kan şekeri, miyokard enzimleri ve protein kinaz K 4,5,6 gibi bazı kan bileşenlerindeki değişikliklerle yakından ilişkili olabilir. Hastanın ilgili durumu, rutin kan muayene maddelerinin analiz edilmesiyle en hızlı şekilde yönetilebilir. Bu nedenle, kan örneklerinin kalitesi test sonuçlarının doğruluğunu belirler. Bununla birlikte, kan alımı için geleneksel yöntemlerin, büyük travma alanı, küçük kan alma hacmi, operatörler için yüksek gereksinimler, ilaç değişikliklerini gerçek zamanlı olarak yansıtamama, hantal kan örneği ön tedavisi, deney hayvanlarının büyük tüketimi ve hayvan etik gereksinimlerinin karşılanmaması gibi deneysel sonuçları ciddi şekilde etkileyen bazı kaçınılmaz dezavantajları vardır 7,8,9 . Tıbbi teknolojideki sürekli gelişmelerle birlikte, kan alma kalitesi de daha yüksek gereksinimleri ortaya koymuştur. Bu nedenle, yukarıdaki eksikliklerin üstesinden gelmek için yeni bir kan örnekleme teknolojisi geliştirmek acildir.
Mikrodiyaliz, diyaliz prensiplerine dayanan in vivo bir örnekleme tekniğidir10. Denge dışı koşullar altında, ölçülecek bileşikler konsantrasyon gradyanı boyunca dokudan diyalize edilir ve perfüze edilir, dokuya gömülü mikrodiyaliz probu diyalizat içine alınır, diyalizat ile birlikte sürekli olarak çıkarılır ve canlı dokudan numune alma amacına ulaşılır11,12. Geleneksel örnekleme yöntemleriyle karşılaştırıldığında, mikrodiyaliz tekniği aşağıdaki yönlerden muhteşem avantajlara sahiptir13,14,15: kandaki çeşitli bileşiklerin değişikliklerinin sürekli gerçek zamanlı takibi; Örnekleme, sıkıcı bir ön işlem gerektirmez ve örnekleme sahasındaki hedef bileşiğin konsantrasyonunu gerçekten temsil edebilir; problar, hedef bileşiklerin emilimini, dağılımını, metabolizmasını, atılımını ve toksisitesini araştırmak için vücudun farklı bölgelerine implante edilebilir; elde edilen numune biyolojik makromolekül içermez (>20 kD). Bu nedenle, daha kaliteli kan örnekleri, CVD'lerin ve etnik tıp tarafından tedavi edilen mekanizmanın daha iyi yorumlanmasını sağlar.
Mikrodiyaliz örnekleme sistemleri genellikle mikro enjeksiyon pompaları, bağlantı tüpleri, hayvansız hareket tankları, mikrodiyaliz probları ve numune toplayıcılardan oluşur16. Mikrodiyaliz sisteminin cihazının en kritik parçası olarak, yaygın mikrodiyaliz probları konsantrik problar, esnek problar, doğrusal problar ve şönt prob17'den oluşur. Bunlar arasında, esnek problar, esas olarak uyanık ve serbestçe hareket eden veya anestezi uygulanan hayvanların kalp, kas, cilt ve yağ gibi kan damarlarından ve periferik dokulardan örnekler toplamak için kullanılan yumuşak ve metalik olmayan problardır13. Kan damarları veya dokularla temas ettiğinde, prob esnek bir şekilde bükülebilir, böylece prob veya örnekleme bölgesinde geri dönüşü olmayan hasarlardan kaçınılır. Prob teknolojisinin sürekli gelişmesiyle birlikte mikrodiyaliz teknolojisinin çeşitli alanlarda uygulanması da derinleşmektedir. Bu yazıda, sıçan kalp kanı, kan alımı için tasarlanmış esnek prob aracılığıyla noninvaziv mikrodiyaliz teknolojisi ile dinamik ve sürekli olarak elde edilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Hayvan anestezi sistemi</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R500IE</td><td></td></tr><tr><td>Hayvan sıcaklığı koruyucu</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>69020</td><td></td></tr><tr><td>Kan mikrodiyaliz probu</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Kateter</td> <td>ve nbsp; CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Sitrat</td><td>Merck Kimyasal Teknoloji (Şangay) Co, Ltd</td><td>251275</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli tıraş makinesi</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>CP-5200</td><td></td></tr><tr><td>Fep boru</td> <td>ve nbsp; CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>3409501</td><td></td></tr><tr><td>Hayvanlar için serbest dolaşım tankı</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>CMA120</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz</td><td>Merck Kimya Teknolojisi (Şangay) Co, Ltd</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatik forseps</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>F21020-16</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R510-22</td><td></td></tr><tr><td>Mikro makas</td><td>Beyotime Biotechnology Co., Ltd</td><td>FS221</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz Toplama Tüpü</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>7431100</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz kollektörü</td><td> CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>CMA4004</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz in vitro stand</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>CMA130</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz mikroenjeksiyon pompası</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>788130</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz şırıngası (1.0 mL)</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>8309020</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiyaliz boru adaptörü</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>3409500</td><td></td></tr><tr><td>Mikro gözenekli filtre membranı</td><td>Merck Millipore Ltd.</td><td></td><td></td>R0DB36622</tr><tr><td>Emilmeyen cerrahi iplikler</td><td>Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd</td><td>S19004</td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat masası</td><td>Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd</td><td>30153</td><td></td></tr><tr><td>Oftalmik forseps</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>F12016-15</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum sitrat</td><td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1613859</td><td></td></tr><tr><td>Sprague Dawley  (SD) sıçanlar</td><td>Chengdu Dossy Deney Hayvanları Co., Ltd</td><td>SYXK(<img alt="Denklem 1" src="/files/ftp_upload/64531/64531eq01.jpg" style="margin: auto; ">)2019-049</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>S14014-15</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd</td><td>BY-103</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga iğnesi</td><td>  CMA Mikrodiyaliz AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonik temizleyici</td><td>Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd</td><td>KMH1-240W8101</td><td></td></tr></tbody></table>

noninvaziv mikrodiyaliz tekniği ile sıçan kalbinden dinamik sürekli kan ekstraksiyonu

Dynamic Continuous Blood Extraction from Rat Heart via Noninvasive Microdialysis Technique

Kan bileşenlerinin dinamik analizi, kardiyovasküler hastalıkların ve miyokard enfarktüsü, aritmi, ateroskleroz, kardiyojenik pulmoner ödem, pulmoner emboli ve serebral emboli gibi ilişkili hastalıkların anlaşılmasında büyük önem taşımaktadır. Aynı zamanda, ayırt edici etnik tıp tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için canlı sıçanlarda sürekli kalp kan örnekleme tekniğini kırmak acildir. Bu çalışmada, sıçanların sağ juguler venine hassas ve noninvaziv bir cerrahi prosedürle bir kan mikrodiyaliz probu implante edildi. Kardiyak kan örnekleri daha sonra çevrimiçi bir mikrodiyaliz numune toplama sistemine bağlanarak 2.87 nL / dak ila 2.98 mL / dak oranında toplandı. Daha da önemlisi, elde edilen kan örnekleri geçici olarak 4 ° C'de mikrodiyaliz kaplarında saklanabilir. Sıçan kalbinden mikrodiyaliz tabanlı çevrimiçi sürekli kan toplama programı, kan örneklerinin kalitesini büyük ölçüde garanti etmiş, sistemik kardiyovasküler hastalıklar üzerine yapılan araştırmaların bilimsel rasyonalitesini ilerletmiş ve canlandırmış ve etnotıp tedavisini hematoloji perspektifinden değerlendirmiştir.

Mevcut protokol, mikrodiyaliz ekipmanında belirlenen örnekleme parametrelerine göre bilinçli sıçanlardan kardiyak kan elde edilmesine izin verdi. Normal kan örnekleri parlak kırmızı olmalıyken, hipoksi, potansiyel kan pıhtıları veya anemik hastalığı olan hayvanlar koyu mor veya koyu kırmızı olabilir. Kan mikrodiyaliz tekniği ile elde edilen örnekler renksiz, berrak ve şeffaftır, bu da yüksek performanslı sıvı kromatografisi veya kütle spektrometrisi kullanılarak farklı hastalıkların serum belirteçlerini ve ilaçların ve m...

Mevcut protokol, mikrodiyaliz tekniğini kullanarak sıçan kalp kanının gerçek zamanlı ve dinamik olarak toplanması için basit ve etkili bir yöntemi tanımlamaktadır.

Noninvaziv Mikrodiyaliz Tekniği ile Sıçan Kalbinden Dinamik Sürekli Kan Ekstraksiyonu

Dynamic analysis of blood components is of great importance in understanding cardiovascular diseases and their related diseases, such as myocardial ...

Bir sıçan kalbinden dinamik sürekli kan toplama tekniğimiz, kan bileşenlerini analiz etmek, kardiyovasküler hastalıkları ve bunlarla ilgili hastalıkları anlamaya katkıda bulunmak için çok önemlidir. Geleneksel örnekleme yöntemleriyle karşılaştırıldığında, bu teknik in vivo, gerçek zamanlı, dinamik avantajlara sahiptir ve yabancı bir test için biyolojik mikro moleküller ve titre numunesi ön işlemi olmadan invaziv değildir. Bu teknik sadece kardiyovasküler hastalıklar için geçerli değildir, aynı zamanda yüksek fazlı sıvı kromatografisi ve kütle spektrometrisi ile birlikte kan biyobelirteçlerini tespit ederek hastalık tanı ve tedavisi için de çalışmalıdır.Bu yöntem miyokard enfarktüsü, apne ve ateroskleroz gibi kardiyovasküler hastalıkları araştırmak için kullanılabilir. Ek olarak, kardiyojenik pulmoner ödem ve pulmoner ve serebral emboli için de geçerlidir. Deneysel hazırlığı yaptıktan sonra, diyaliz ünitesi probunun girişini şırınga iğnesi, boru adaptörü ve FEP tüpü ile takın.Antikoagülan sitrat dekstroz çözeltisini boru sistemine perfüzyon ederek mikrodiyaliz boru sisteminin açıklığını kontrol edin. Yumuşak doku ve perivasküler fasyanın künt diseksiyonu ile sağ juguler veni açığa çıkarmak için bir kesi yapın. 4-0'lık bir cerrahi dikiş kullanarak, kan akışını geçici olarak engellemek için kalbin distal ucundaki sağ juguler damarda çıkarılabilir bir kayma düğümü yapın.Daha sonra kalbin yakınındaki sağ juguler vende bir kesi yapın. Sıçan kalbinin proksimal ucuna doğru sağ juguler ven içine iğne şeklinde bir kateter stilit yerleştirin. Kan mikrodiyaliz probunu bir kateter içine yerleştirin ve probu kateter stiletinin eğik insizyonu boyunca oftalmik forseps ile implante edin.Kılavuzlu kateter stilini çıkarın ve probun yarı geçirgen zarını sağ juguler damara tamamen daldırın. Sağ juguler vendeki kan akışını yeniden sağlamak için kalbin distal ucundaki ayrılabilir kayma düğümünü çözün. Daha sonra probu sağ juguler ven ile bağlamak için 4-0 cerrahi dikiş kullanın.Uyanık sıçanı serbest hareket eden bir tanka yerleştirin ve probu mikrodiyaliz sistemine bağlayın. Daha sonra, prob diyaliz membranını dengelemek için antikoagülan sitrat dekstroz çözeltisini bir saat boyunca dakikada iki mikrolitre oranında sulayın. Mikrodiyaliz kan örneklerini toplayın ve geçici olarak dört santigrat derece fraksiyonel kapta saklayın.Probun sağ juguler vende olduğunu tekrar doğrulamak için, sıçanı disseke edin. Mikrodiyaliz probunu sağ juguler damardan çıkarın ve ultra saf suya koyun. Probu boru hattına bağlayın ve boru ve probdaki kalan tuzu iyice yıkamak için gece boyunca ultra saf suyla durulayın.Normal kan örnekleri parlak kırmızı görünürken, hipoksik örneklerde potansiyel kan pıhtıları gözlendi. Kan mikrodiyaliz tekniği ile elde edilen örnekler renksiz, berrak ve şeffaftı. Membranın tahrip olmasını ve kayma veya yer değiştirme probunu önlemek için, probu sıçan juguler damarına yerleştirirken ve daldırırken dikkat etmeliyiz.Mikrodiyaliz tekniği ile elde edilen kan örnekleri, farklı hastalıkların biyobelirteçlerini ve ilaçların ve nadir metabolitlerin kan dağılımını analiz etmek için kullanılabilir.

dynamic-continuous-blood-extraction-from-rat-heart-via-noninvasive

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu protokol, izole edilmiş perfüze edilmiş fare kalpten kardiyak interstisyel sıvıyı toplamak için bir yöntemi açıklamaktadır. İnterstisyel transüdaatı koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayırmak için, Langendorff perfüze edilen kalp ters çevrilir ve kalp yüzeyinde oluşan transüda (interstisyel sıvı) yumuşak bir lateks kapak kullanılarak toplanır.

İzole edilen fare kalpten interstisyel transüdao toplanması için ters kalp modeli

Burada, in vivo microdialysis EEG kayıtları ile birlikte epileptik ve sigara-epileptik sıçan ventral hipokampus glutamat ve aspartat sürümde analiz etmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Ekstraselüler glutamat ve aspartat konsantrasyonu hastalık farklı aşamalarında ile ilişkili.

Microdialysis fareler serbestçe hareket EEG kayıtları sırasında eksitatör Amino asit

Burada, biz standart bir ekipman olarak hayvan imkanları ile yapılabilir ve fizyolojik veya farmakolojik uygulanmış olan deneysel sıçanlarda elektrokardiyografi ve intra arteryel kan basıncı (tansiyon) aynı anda kayıt için bir kurulum tarif patojen veya tedavi mekanizmaları kardiyovasküler tıpta araştırmak için çalışmalar.

Eşzamanlı elektrokardiyografi kayıt ve invaziv kan basınç ölçüm sıçanlarda

Bu makalede, minimal invaziv bir yaklaşım kullanarak sıçanlarda miyokardiyal iskemi ve sonraki kronik reperfüzyon gerçekleştirmek için etkili bir yöntem sunar. Ayrıca sıçanların sol ventrikül hemodinamik fonksiyonu ekokardiyografi ve izole çalışma kalp yöntemleri ile değerlendirilmektedir.

Sıçanlarda Miyokard İnfarktüsü İndükleyen Yarı-Minimal İnvaziv Yöntem ve İzole Çalışan Kalp Sistemi Ile Kardiyak Fonksiyonun Değerlendirilmesi

Kardiyolojide hücresel ve moleküler fonksiyonel deneyler için altın standart kardiyomiyositlerdir. Bu makalede, fare kardiyomiyositlerini izole etmek için Langendorff dışı tekniğe yapılan uyarlamalar açıklanmaktadır.

Fare kardiyomiyositlerini sürekli olarak izole etmek için basit ve etkili bir yöntem

Mevcut protokol ex-vivo neonatal murin kalbin aort kanülasyonunu ve retrograd perfüzyonunu tanımlamaktadır.  Diseksiyon mikroskobu ve körelmiş küçük çaplı bir iğne kullanan iki kişilik bir strateji, güvenilir kanülasyona izin verir. Uzunlamasına kontraktil gerilimin miktarı, sol ventrikülün tepesine bağlı bir kuvvet dönüştürücü kullanılarak elde edilir.

Langendorff Preparatında Yenidoğan Murin Kalplerinin Kullanımı için Modifiye Tekniği

Buradaki protokol, bir mikrodiyaliz sistemi kullanarak uyanık sıçanların hipokampüsünden hücre dışı sıvının ayrıntılı bir gerçek zamanlı dinamik örneklemesini sağlar.

Bir Mikrodiyaliz Sistemi Kullanarak Bilinçli Sıçanlardan Hipokampal Hücre Dışı Sıvının Gerçek Zamanlı Dinamik Toplanması

Protokol, sürekli video-elektroensefalogram (EEG) monitörizasyonuna paralel olarak gerçekleştirilen epileptik sıçanlardan tekrarlanan beyin omurilik sıvısı ve kan alımlarını gösterir. Bunlar, çeşitli vücut sıvısı moleküllerindeki değişiklikler ile nöbet aktivitesi arasındaki olası bağlantıları araştırmak için etkilidir.

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

Bu protokol, basınç-hacim iletkenlik tekniğini kullanarak sol ventrikül basıncını ve hacmini ölçmek için bir yöntemi açıklar. Bu yöntem, ilaçların kalp üzerindeki etkilerinin sürekli gerçek zamanlı olarak izlenmesini sağlar.

Basınç-Hacim İletkenlik Kateteri Kullanılarak Sıçan Sol Ventrikül Üzerindeki Ferulik Asit Etkilerinin Gerçek Zamanlı Tespiti

Bu protokol, biyoelektronik araştırmaları için hassas kardiyak stimülasyon, kayıt ve enfarktüs modellemesi sağlayan optik ve elektriksel çift yönlü biyoarayüz için gelişmiş malzeme üretimi ve ex vivo sıçan kalbi yöntemlerini ana hatlarıyla belirtir.

Sağlıklı ve İskemik Ex Vivo Sıçan Kalplerinde Çift Yönlü Elektrik ve Optoelektronik Arayüzler

Öğrenin, sıçan kalbinden noninvaziv mikrodiyaliz ile dinamik kan ekstraksiyonunu. Bu yöntem, kardiyovasküler hastalıklarda biyobelirteç analizi ve gerçek zamanlı izleme için gelişmiş bir alternatif sunar.

Noninvaziv Mikrodiyaliz Tekniği ile Sıçan Kalbinden Dinamik Sürekli Kan Ekstraksiyonu

Daha fazla video keşfet