Name: 3D Hücre Kültürü için Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelelerinde Partikül Fraksiyonunun Kontrol Edilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-28T14:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Keşfedin, MAP iskelelerinde partikül fraksiyonunun kontrol edilmesiyle 3D hücre kültürü için tekrarlanabilir doku mühendisliği yöntemleri. Bu teknik, hücre yanıtlarını standartlaştırarak rejeneratif tıpta klinik uygulamaları geliştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Ulusal Sağlık Enstitüleri, Ulusal Nörolojik Bozukluklar ve İnme Enstitüleri (1R01NS112940, 1R01NS079691, R01NS094599) ve Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü'ne (1R01AI152568) teşekkür etmek ister. Bu çalışma kısmen, Ulusal Nanoteknoloji Koordineli Altyapısı'nın (NNCI) bir parçası olarak Ulusal Bilim Vakfı (ödül numarası ECCS-2025064) tarafından desteklenen Kuzey Carolina Araştırma Üçgeni Nanoteknoloji Ağı'nın (RTNN) bir üyesi olan Duke Üniversitesi Paylaşılan Malzemeler Enstrümantasyon Tesisi'nde (SMIF) gerçekleştirildi. Yazarlar, laboratuvarın eski doktora sonrası Dr. Lucas Schirmer'e ve Ethan Nicklow'a, hücre kültürü deneyleri için 3D baskılı cihazın üretilmesindeki yardımları için teşekkür etmek istiyor.

<ol><li>Griffin, D. R., Weaver, W. M., Scumpia, P. O., Di Carlo, D., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+wound+healing+by+injectable+microporous+gel+scaffolds+assembled+from+annealed+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Accelerated wound healing by injectable microporous gel scaffolds assembled from annealed building blocks.</a> Nature Materials. 14 (7), 737-744 (2015).</li>
<li>Daly, A. C., Riley, L., Segura, T., Burdick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogel+microparticles+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Materials%22%5BJournal%5D)">Hydrogel microparticles for biomedical applications.</a> Nature Reviews Materials. 5 (1), 20-43 (2020).</li>
<li>Darling, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Click+by+click+Microporous+Annealed+Particle+%28MAP%29+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Click by click Microporous Annealed Particle (MAP) scaffolds.</a> Advanced Healthcare Materials. 9 (10), 1901391(2020).</li>
<li>Truong, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microporous+annealed+particle+hydrogel+stiffness%2C+void+space+size%2C+and+adhesion+properties+impact+cell+proliferation%2C+cell+spreading%2C+and+gene+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Microporous annealed particle hydrogel stiffness, void space size, and adhesion properties impact cell proliferation, cell spreading, and gene transfer.</a> Acta Biomaterialia. 94, 160-172 (2020).</li>
<li>Pfaff, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+and+improved+photoannealing+of+Microporous+Annealed+Particle+%28MAP%29+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+%26+Engineering%22%5BJournal%5D)">Selective and improved photoannealing of Microporous Annealed Particle (MAP) scaffolds.</a> ACS Biomaterials Science & Engineering. 7 (2), 422-427 (2021).</li>
<li>Sideris, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+hydrogels+based+on+hyaluronic+acid+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+%26+Engineering%22%5BJournal%5D)">Particle hydrogels based on hyaluronic acid building blocks.</a> ACS Biomaterials Science & Engineering. 2 (11), 2034-2041 (2016).</li>
<li>Caldwell, A. S., Campbell, G. T., Shekiro, K. M. T., Anseth, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clickable+microgel+scaffolds+as+platforms+for+3D+cell+encapsulation%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Clickable microgel scaffolds as platforms for 3D cell encapsulation.</a> Advanced Healthcare Materials. 6 (15), 1700254(2017).</li>
<li>Qazi, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anisotropic+rod-shaped+particles+influence+injectable+granular+hydrogel+properties+and+cell+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Anisotropic rod-shaped particles influence injectable granular hydrogel properties and cell invasion.</a> Advanced Materials. 34 (12), 2109194(2022).</li>
<li>Wilson, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stoichiometric+post+modification+of+hydrogel+microparticles+dictates+neural+stem+cell+fate+in+microporous+annealed+particle+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Stoichiometric post modification of hydrogel microparticles dictates neural stem cell fate in microporous annealed particle scaffolds.</a> Advanced Materials. 34 (33), 2201921(2022).</li>
<li>Muir, V. G., Qazi, T. H., Shan, J., Groll, J., Burdick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+microgel+fabrication+technique+on+granular+hydrogel+properties%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+%26+Engineering%22%5BJournal%5D)">Influence of microgel fabrication technique on granular hydrogel properties.</a> ACS Biomaterials Science & Engineering. 7 (9), 4269-4281 (2021).</li>
<li>Highley, C. B., Song, K. H., Daly, A. C., Burdick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Jammed+microgel+inks+for+3D+printing+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Jammed microgel inks for 3D printing applications.</a> Advanced Science. 6 (1), 1801076(2018).</li>
<li>Anderson, A. R., Nicklow, E., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+fraction+as+a+bioactive+cue+in+granular+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Particle fraction as a bioactive cue in granular scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 150, 111-127 (2022).</li>
<li>Pruett, L., Ellis, R., McDermott, M., Roosa, C., Griffin, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+heterogeneous+epidermal+growth+factor+release+from+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+hydrogel+for+improved+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Spatially heterogeneous epidermal growth factor release from microporous annealed particle (MAP) hydrogel for improved wound closure.</a> Journal of Materials Chemistry B. 9 (35), 7132-7139 (2021).</li>
<li>Sheikhi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microengineered+emulsion-to-powder+technology+for+the+high-fidelity+preservation+of+molecular%2C+colloidal%2C+and+bulk+properties+of+hydrogel+suspensions%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Applied+Polymer+Materials%22%5BJournal%5D)">Microengineered emulsion-to-powder technology for the high-fidelity preservation of molecular, colloidal, and bulk properties of hydrogel suspensions.</a> ACS Applied Polymer Materials. 1 (8), 1935-1941 (2019).</li>
<li>Brower, K., White, A. K., Fordyce, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-step+variable+height+photolithography+for+valved+multilayer+microfluidic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Multi-step variable height photolithography for valved multilayer microfluidic devices.</a> Journal of Visualized Experiments. (119), e55276(2017).</li>
<li>JoVE. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+Magnetic+Resonance+%28NMR%29+Spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE+Science+Education+Database.+Organic+Chemistry.+JoVE%22%5BJournal%5D)">Nuclear Magnetic Resonance (NMR) Spectroscopy.</a> JoVE Science Education Database. Organic Chemistry. JoVE. , Cambridge, MA. (2022).</li>
<li>Roosa, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+synthesis+of+microgel+building+blocks+for+microporous+annealed+particle+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Microfluidic synthesis of microgel building blocks for microporous annealed particle scaffold.</a> Journal of Visualized Experiments. (184), e64119(2022).</li>
<li>Zhang, H., Dicker, K. T., Xu, X., Jia, X., Fox, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interfacial+bioorthogonal+crosslinking%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Macro+Letters%22%5BJournal%5D)">Interfacial bioorthogonal crosslinking.</a> ACS Macro Letters. 3 (8), 727-731 (2014).</li>
<li>Welzel, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryogel+micromechanics+unraveled+by+atomic+force+microscopy-based+nanoindentation%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Cryogel micromechanics unraveled by atomic force microscopy-based nanoindentation.</a> Advanced Healthcare Materials. 3 (11), 1849-1853 (2014).</li>
<li>Plieva, F., Huiting, X., Galaev, I. Y., Bergenståhl, B., Mattiasson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macroporous+elastic+polyacrylamide+gels+prepared+at+subzero+temperatures%3A+control+of+porous+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Macroporous elastic polyacrylamide gels prepared at subzero temperatures: control of porous structure.</a> Journal of Materials Chemistry. 16 (41), 4065-4073 (2006).</li>
<li>Rommel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionalized+microgel+rods+interlinked+into+soft+macroporous+structures+for+3D+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Functionalized microgel rods interlinked into soft macroporous structures for 3D cell culture.</a> Advanced Science. 9 (10), 2103554(2022).</li>
<li>Kurt, E., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleic+acid+delivery+from+granular+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Nucleic acid delivery from granular hydrogels.</a> Advanced Healthcare Materials. 11 (3), 2101867(2021).</li>
<li>Isaac, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microporous+bio-orthogonally+annealed+particle+hydrogels+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+%26+Engineering%22%5BJournal%5D)">Microporous bio-orthogonally annealed particle hydrogels for tissue engineering and regenerative medicine.</a> ACS Biomaterials Science & Engineering. 5 (12), 6395-6404 (2019).</li>
<li>Truong, N. F., Lesher-Pérez, S. C., Kurt, E., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathways+governing+polyethylenimine+polyplex+transfection+in+Microporous+Annealed+Particle+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Pathways governing polyethylenimine polyplex transfection in Microporous Annealed Particle scaffolds.</a> Bioconjugate Chemistry. 30 (2), 476-486 (2019).</li>
<li>Koh, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+in+vivo+delivery+of+stem+cells+using+microporous+annealed+particle+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Enhanced in vivo delivery of stem cells using microporous annealed particle scaffolds.</a> Small. 15 (39), 1903147(2019).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cartilage+tissue+formation+through+assembly+of+microgels+containing+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Cartilage tissue formation through assembly of microgels containing mesenchymal stem cells.</a> Acta Biomaterialia. 77, 48-62 (2018).</li>
</ol>

ARA ve TS bu teknoloji için geçici bir patent başvurusunda bulundu.

HA-NB mikrojellerinin mikroakışkan üretiminin, emülsiyon parti üretiminden daha dar bir boyut dağılımına sahip mikrojeller ürettiği gösterilmiştir 3,9. Bu protokolde açıklanan mikrojeller, malzeme bozulmasını desteklemek için MMP-bölünebilir bir çapraz bağlayıcı (Ac-GCRDGPQGIWGQDRCG-NH2) kullanılarak formüle edilmiştir. Bununla birlikte, HA-NB mikrojelleri, parçalanamayan ditiyotreitol (DTT) gibi alternatif bir di-tiol bağlayıcı kullanılarak çapraz bağ...

Mikro gözenekli tavlanmış parçacık (MAP) iskeleleri, mikrojel (μgel) yapı taşlarının toplu, gözenekli bir iskele oluşturmak için birbirine bağlandığı granüler malzemelerin bir alt sınıfıdır. Bu granüler iskelelerin benzersiz mikromimarisi ile, birbirine bağlı küresel mikrojel arasındaki boşluk boşluğunun yarattığı doğuştan gelen gözeneklilik, hızlandırılmış hücre infiltrasyonunu ve göçünü destekler1. MAP iskelelerinin mikrojel yapı taşları, kimyasal modifikasyonlarla hem sentetik hem de doğal polimerlerden imal edilebilir2. Burada açıklanan yöntemler, fonksiyonel norbornen (NB) sapları ile modifiye edilmiş bir hyaluronik asit (HA) omurgasından oluşan mikrojellerin kullanımını özellikle vurgulamaktadır. HA polimeri üzerindeki NB fonksiyonel tutamacı, mikrojeller oluşturmak ve MAP iskeleleri oluşturmak için bunları birbirine bağlamak için tıklama kimyası reaksiyonlarını destekler 3,4. Mikrojelleri birbirine bağlamak için enzimatik1, ışık bazlı5,6 ve katkısız tıklama kimyası 3,7 reaksiyonları gibi çok sayıda şema kullanılmıştır (yani, tavlama). Bu çalışmada, HA-NB mikrojellerini birbirine bağlamak için tetrazin-norbornen ters elektron talebi Diels-Alder konjugasyonu kullanılarak katkısız tıklama kimyası açıklanmaktadır.
MAP iskelelerini imal etmek için, kullanıcılar önce parti sistemlerinde veya mikroakışkan cihazlarda ters emülsiyonlar kullanarak ve ayrıca elektrohidrodinamik püskürtme, litografi veya mekanik parçalanma2 ile mikrojel yapı taşlarını üretirler. Küresel HA-NB mikrojellerinin üretimi iyi tanımlanmış ve daha önce hem toplu emülsiyon2 hem de mikroakışkan damlacık oluşturma teknikleri 8,9,10,11 kullanılarak bildirilmiştir. Bu çalışmada, küresel HA-NB mikrojelleri, dahaönce 8,9,10'da tanımlandığı gibi, kontrollü boyut ve şekil için akış odaklı bir mikroakışkan platform üzerinde üretildi. Saflaştırmadan sonra, mikrojeller sulu bir süspansiyonda bulunur ve sıkışmış bir duruma neden olmak için konsantre edilmelidir. Sıkıştığında, mikrojeller, enjekte edilebilir, boşluk doldurucu malzemeler olarak işlev görmelerini sağlayan kesme inceltme özellikleri sergiler1. Sıkışmış bir durumu indüklemenin bir yöntemi, mikrojelleri liyofilizasyon veya dondurarak kurutma yoluyla kurutmak, daha sonra kurutulmuş ürünü kontrollü bir hacim12'de yeniden hidratlamaktır. Alternatif olarak, fazla tampon, bir süzgeç üzerinde santrifüjleme yoluyla veya tamponun aspirasyon yoluyla veya emici bir malzeme kullanılarak mikrojel peletinden manuel olarak çıkarılmasıyla mikrojel bulamacından uzaklaştırılabilir. Bununla birlikte, mikrojelleri kurutmak için santrifüjleme kullanmak, granüler iskeleler12 yaparken oldukça değişken bir partikül fraksiyonları ve boşluk fraksiyonları aralığı oluşturabilir. Polietilen glikol (PEG) mikrojelleri için %70 IPA13, jelatin metakriloil (GelMa) mikrojelleri için florlu yağlar14 ve HA mikrojelleri için %70 etanol kullanılarak mikrojellerin liyofilize edilmesi için tekniklertanımlanmıştır 12. Bu protokol, kurutma işlemi sırasında orijinal mikrojel özelliklerini korumak için standart bir laboratuvar reaktifi olan %70 etanol kullanarak küresel HA mikrojellerinin dondurularak kurutulması için yöntemleri vurgulamaktadır. Dondurularak kurutulmuş HA mikrojelleri, MAP iskeleleri12'deki son partikül fraksiyonlarını kontrol etmek için kullanıcı tanımlı ağırlık yüzdelerinde tartılabilir ve yeniden hidratlanabilir.
MAP iskele oluşumundaki son adım, toplu, gözenekli bir iskele oluşturmak için mikrojellerin tavlanmasına dayanır1. Doğal hücre dışı matris bileşenlerini kullanarak ve biyo-ortogonal tavlama şemaları kullanarak, MAP iskeleleri hem in vitro hücre kültürü hem de in vivo doku onarımı için biyouyumlu bir platform görevi görür3. Bu yaklaşımlar sayesinde, MAP iskeleleri, doku mühendisliği uygulamalarında kullanılmaları için kullanıcı tanımlı parçacık fraksiyonlarına sahip HA-NB yapı taşlarından imal edilebilir12. Aşağıdaki protokol, HA-NB mikrojellerinin mikroakışkan üretimini ve ardından MAP iskelelerinde parçacık fraksiyonunu kontrol etmek için liyofilizasyon ve rehidrasyon ile tanımlanmaktadır. Son olarak, mikrojellerin tavlanması için adımlar, in vitro 3D hücre kültürü deneyleri için biyo-ortogonal kimya kullanılarak tanımlanmıştır.

<table><tbody><tr><td>1 mL Luer-Lok şırınga steril, tek kullanımlık, polikarbonat</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Luer-Lok şırınga steril, tek kullanımlık, polikarbonat</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 C5 maleimid</td><td>Invitrogen</td><td>A10254</td><td>Floresan etiketli tetrazin sentezi için</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 Phalloidin</td><td>Invitrogen</td><td>A22287</td><td>Hücre kültürü örneklerini boyamak için</td></tr><tr><td>Alüminyum folyo</td><td>VWR</td><td>89107-726</td><td></td></tr><tr><td>Pistonlu biyopsi zımbası, 1.0 mm</td><td>Integra Miltex</td><td>69031-01</td><td></td></tr><tr><td>Biyopsi zımbası, 4 mm</td><td>Integra Miltex</td><td>33-34</td><td></td></tr><tr><td>Künt iğne, 23 G 0.5", Steril Olmayan, Kapaklı</td><td>SAI İnfüzyon Teknolojileri</td><td>B23-50</td><td></td></tr><tr><td>Şişe üstü vakum filtresi, 0.22 & mu; m</td><td>Corning</td><td>CLS430521</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür</td><td>VWR</td><td>1B1110</td><td>Mikrojel yıkama tamponu için</td></tr><tr><td>Pozitif deplasmanlı pipetler için kılcal piston tertibatları, 1000 &; L hacim</td><td>Rainin</td><td>17008609</td><td></td></tr><tr><td>Pozitif yer değiştirmeli pipetler için kılcal piston tertibatları, 25 &mu; L hacim</td><td>Rainin</td><td>17008605</td><td></td></tr><tr><td>Pozitif deplasmanlı pipetler için kılcal piston tertibatları, 250 &mu; hacim</td><td>Rainin</td><td>17008608</td><td></td></tr><tr><td>Kontes Hücre Sayma Odası Slaytları</td><td>Invitrogen</td><td>C10228</td><td></td></tr><tr><td>Kontes II FL Otomatik Hücre Sayacı</td><td>Invitrogen</td><td>AMQAF1000</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj tüpü, 15 mL</td><td>CELLTREAT</td><td>667015B</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj tüpü, 50 mL</td><td>CELLTREAT</td><td>229421</td><td></td></tr><tr><td>Kloroform, ACS sınıfı, Cam Şişe</td><td>Stellar Scientific</td><td>CP-C7304</td><td>Floresan etiketli tetrazin Corona plazma tabancasının sentezi için</td></tr><tr><td>, BD-10A Yüksek Frekans Jeneratörü</td><td>ETP</td><td>11011</td><td></td></tr><tr><td>CryoTube Şişeleri, Polipropilen, Vidalı Kapaklı İç Dişli</td><td>Nunc</td><td>368632</td><td></td></tr><tr><td>D1 fare mezenkimal hücreleri</td><td>ATCC</td><td>CRL-12424</td><td>MAP jellerinde kültür için örnek hücre hattı</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542</td><td>Hücre kültürü örneklerini boyamak için</td></tr><tr><td>Döteryum oksit, %99,9 D</td><td>NMR spektroskopisi için</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>151882</td></tr><tr><td>Diyaliz tüpü, rejenere selüloz membran, 12-14 kDa moleküler ağırlık kesme</td><td>Spectra/Por</td><td>132703</td><td>HA-NB ve HA-Tet'i saflaştırmak için</td></tr><tr><td>Dietil eter</td><td>VWR</td><td>BDH1121-4LPC</td><td>Floresan etiketli tetrazin sentezi için</td></tr><tr><td>Dimetilformamid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>277056</td><td>Floresan etiketli tetrazin</td></tr><tr><td>4- (4,6-dimetoksi-1,3,5-triazin-2-il) -4-metilmorfolinyum klorür (DMTMM) sentezi için;</td><td>TCI-Chemicals</td><td>D2919</td><td>HA</td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td> <td>Thermo Scientific</td><td>R0861</td><td>Bozunmayan ditiol bağlayıcı (MMP-parçalanabilir peptit yerine geçer)</td></tr> <tr><td>Dulbecco'nun Modifiye Eagle's Medium (DMEM), yüksek glikoz, w / 4500 mg / L glikoz, L-glutamin, sodyum piruvat ve sodyum bikarbonat, sıvı, steril filtreli, hücre kültürü için uygun</td><td>D1 için Sigma-Aldrich</td><td>D6429-500ML</td><td> hücre kültürü</td></tr><tr><td>EMS Paraformaldehit, Granül</td><td>VWR</td><td>100504-162</td><td>%4 PFA</td></tr><tr><td>Etanolü mutlak yapmak için (200 kanıt)</td><td>KOPTEC</td><td>89234-850</td><td></td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu (FBS)</td><td>ATCC</td><td>30-2020</td><td>D1 hücre kültürü için</td></tr><tr><td>Isıtma Plakası</td><td>Kopf Instruments</td><td>HP-4M</td><td></td></tr><tr><td>Kapak camlı hemasitometre</td><td>Daigger Scientific</td><td></td><td></td>EF16034F</tr><tr><td>2- [4- (2-hidroksietil) piperazin-1-il] etansülfonik asit (HEPES)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hyaluronat, 79 kDa ortalama moleküler ağırlık, Streptococcus zooepidemicus bakterisinde üretilen, farmasötik sınıf, mikrobiyal kontaminasyon < 100 CFU/g, bakteriyel endotoksinler < HA-Tet sentezi için 0.050 IU/mg</td><td>Contipro</td><td>N/A</td><td>79 kDa ortalama moleküler ağırlık kullanıldı, ancak bu yöntemler diğer moleküler ağırlıklar için uyarlanabilir.</td></tr><tr><td>IMARIS Essentials yazılım paketi</td><td>Oxford Instruments</td><td>N/A Mikroskopi</td><td>görüntü analiz yazılımı</td></tr><tr><td>İnfüzyon pompası, çift şırınga</td><td>Chemyx</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipe</td><td>Kimberly-Clark</td><td>34120</td><td></td></tr><tr><td>Destekli laboratuvar standı laboratuvar kelepçesi</td><td>Geyer</td><td>212100</td><td></td></tr><tr><td>Sıvı nitrojen</td><td>Hava gazı</td><td>NI 180LT22</td><td></td></tr><tr><td>Lityum Fenil (2,4,6-trimetilbenzoil) fosfinat</td><td>TCI-Chemicals</td><td>L0290</td><td></td></tr><tr><td>Liyofilizatör</td><td>Labconco</td><td>N/A</td><td>Labconco FreeZone 6 plus'ın üretimi durduruldu, ancak bu protokol için diğer laboratuvar sınıfı konsol dondurarak kurutucular kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Metiltetrazin-PEG4-maleimid</td><td>Kerafast</td><td>FCC210</td><td>Floresan etiketli tetrazin</td></tr><tr><td>2- (4-Morfolino) etan sentezi için Sülfonik Asit (MES)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>BP300-100</td><td>HA</td></tr><tr><td>Mikro kapak camını değiştirmek için, 24 x 60 mm No. 1</td><td>VWR</td><td>48393-106</td><td></td></tr><tr><td>Mikroakışkan cihaz SU8 ana gofret</td><td>FlowJem</td><td></td><td>Özel tasarım ya şirket içinde yapılır temiz oda veya dış kaynaklı</td></tr><tr><td>Mineral yağ, ağır</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>330760</td><td></td></tr><tr><td>MMP-bölünebilir dithiol çapraz bağlayıcı peptit (Ac-GCRDGPQGIWGQDRCG-NH2)</td> <td>GenScript</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>5-Norbornene-2-metilamin</td><td>TCI-Kimyasallar</td><td>95-10-3</td><td>HA-NB sentezi için</td></tr><tr><td>Koli bandı</td><td>Scotch</td><td>3M 1426</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Bemis</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>PEG (tiyol) 2</td><td>JenKem Technology USA</td><td>A4001-1</td><td>Floresan etiketli tetrazin</td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin sentezi için, 10.000 birim / mL</td><td>D1 hücre kültürü için</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15140122</td></tr><tr><td>Petri kabı, polistiren, tek kullanımlık, Çap. x H = 150 x 15 mm</td><td>Corning</td><td>351058</td><td></td></tr><tr><td>Pluronic F-127</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2443</td><td>HMP'leri yıkamak için</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) 1x</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>RainX su itici cam tedavisi</td><td>Grainger</td><td>465D20</td><td>Mikroakışkan cihaz tedavisi için sentetik hidrofobik arıtma solüsyonu</td></tr><tr><td>RGD peptid (Ac-RGDSPGERCG-NH2)</td><td>GenScript</td> N<td>/A</td><td></td></tr><tr><td>Lastik bantlar</td><td>Zımbalar</td><td>112417</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum klorür</td><td>Chem-Impex</td><td>30070</td><td>Diyaliz için</td></tr><tr><td>Span 80 sentez için</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1338-43-8</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 184 Silikon Elastomer Elektron</td><td>Mikroskobu Bilimi</td><td>4019862</td><td>mikroakışkan cihazlar ve doku kültürü cihazları yapmak için polidimetilsiloksan (PDMS)</td></tr><tr><td>elastomeri Şırınga filtresi, Whatman Uniflo, 0.2 & mu; m PES, 13 mm çap</td><td>Cytvia</td><td>09-928-066</td><td></td></tr><tr><td>Tetraview LCD dijital mikroskop</td><td>Celestron</td><td>44347</td><td></td></tr><tr><td>Tetrazin-amin HCl tuzu</td><td>Chem-Impex</td><td>35098</td><td>HA-Tet sentezi için</td></tr><tr><td>Trietilamin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>471283</td><td>Floresan etiketli tetrazin</td></tr><tr><td>sentezi için Tris(2-karboksietil)fosfin (TCEP)</td><td>Millipore Sigma</td><td>51805-45-9</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>VWR</td><td>97063-864</td><td></td></tr><tr><td>Tripan mavisi çözeltisi, %0.4</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin EDTA (%0.25), Fenol kırmızısı</td><td>Fisher Scientific</td><td>25-200-056</td><td>MAP jellerinde yapışan hücreleri tohuma kaldırmak için</td></tr><tr><td>Tygon ND-100-80 DEHP Olmayan Tıbbi Boru, İğne Ölçer=23, Duvar Kalınlığı=0.020 inç, İç çap = 0.020, Dış çap = 0.060 in</td><td>Thomas Scientific</td><td>1204G82</td><td></td></tr><tr><td>UV kürleme sistemi kontrolörü, LX500 LED&nbsp;</td><td>OmniCure</td><td>010-00369R</td><td></td></tr><tr><td>UV kürleme başlığı, LED spot UV</td><td>OmniCure</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>UV ışık ölçer, İzlenebilir</td><td>VWR</td><td>61161-386</td><td></td></tr><tr><td>Vakumlu kurutucu</td><td>Bel-Art</td><td>08-594-15C</td><td></td></tr><tr><td>X-ACTO Z Serisi Hassas Maket Bıçağı</td><td>Elmer's</td><td>XZ3601W</td><td></td></tr></tbody></table>

3d hücre kültürü için mikro gözenekli tavlanmış partikül İskelelerinde partikül fraksiyonunun kontrol edilmesi

Controlling Particle Fraction in Microporous Annealed Particle Scaffolds for 3D Cell Culture

Mikrojeller, hem in vitro hücre kültürü hem de in vivo doku onarımı için bir platform görevi gören mikro gözenekli tavlanmış parçacık (MAP) iskelelerinin yapı taşlarıdır. Bu granüler iskelelerde, mikrojeller arasındaki boşluk boşluğunun yarattığı doğuştan gelen gözeneklilik, hücre infiltrasyonu ve göçünü sağlar. Boşluk fraksiyonunu ve parçacık fraksiyonunu kontrol etmek, MAP iskele tasarımı için kritik öneme sahiptir, çünkü gözeneklilik hücreler için biyoaktif bir ipucudur. Küresel mikrojeller, kontrollü boyut ve şekil için mikroakışkan bir cihaz üzerinde üretilebilir ve daha sonra polimer ağının kırılmasını önleyen yöntemler kullanılarak dondurularak kurutulabilir. Rehidrasyon üzerine, liyofilize mikrojeller MAP iskelelerinde kontrollü parçacık fraksiyonlarına yol açar. Mikrojel liyofilizasyonu için bu yöntemlerin uygulanması, parçacık fraksiyonunun makromolekül difüzyonu ve hücre yayılımı üzerindeki etkisini gösteren tekrarlanabilir çalışmalara yol açmıştır. Aşağıdaki protokol, MAP iskelelerinde parçacık fraksiyonunu kontrol etmek için mikrojellerin üretimini, liyofilizasyonunu ve rehidrasyonunu ve ayrıca mikrojellerin in vitro 3D hücre kültürü için biyo-ortogonal çapraz bağlama yoluyla tavlanmasını kapsayacaktır.

Bu protokolün amacı, biyo-ortogonal çapraz bağlama şemasına sahip mikro gözenekli tavlanmış parçacık (MAP) iskelelerinin yanı sıra 3D hücre kültürü için kontrollü parçacık fraksiyonlarının hazırlanmasını göstermektir. İlk olarak, HA, hem mikrojel oluşumunda hem de MAP iskeleleri oluşturmak için birbirine bağlanmada kullanılmak üzere norbornen kolye grupları ile modifiye edildi. Bu yöntemler kullanılarak, HA tekrar ünitelerinin yaklaşık% 31'i norbornen fonksiyonel tutamağı ile başarılı bir şekilde modifiye edilmiştir (<st...

Granüler iskeleler içindeki partikül fraksiyonundaki değişkenliği en aza indirmek, tekrarlanabilir deneyleri kolaylaştırır. Bu çalışma, in vitro doku mühendisliği uygulamaları için kontrollü parçacık fraksiyonlarına sahip granüler iskeleler üretme yöntemlerini açıklamaktadır.

3D Hücre Kültürü için Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelelerinde Partikül Fraksiyonunun Kontrol Edilmesi

Microgels are the building blocks of microporous annealed particle (MAP) scaffolds, which serve as a platform for both in vitro cell culture and in vivo ...

MAP iskeleleri gibi granüler malzemeler, birbirine bağlı mikro boyutlu hidrojel parçacıklarından yapılmış gözenekli enjekte edilebilir malzemelerdir. Parçacık fraksiyonunu kontrol etmek, malzeme özellikleri ve hücresel tepkiler için kritik öneme sahiptir. MAP iskelelerindeki değişken parçacık fraksiyonları bir dizi iskele özelliği ve hücre tepkisi ile sonuçlanır, ancak bu teknik, kullanıcıların oluşturdukları MAP iskelelerinde nihai parçacık fraksiyonunu tanımlamalarına izin verir.MAP iskeleleri, karmaşık yaraların onarımını ve yenilenmesini teşvik etmek ve ayrıca ilaç vermek için kullanılabilir. Örneğin parçacık fraksiyonu, hücresel infiltrasyon ve rejenerasyonun hızını ve derecesini etkiler. Bu yöntem, tüm granüler hidrojel sınıflarına uygulanabilir.Artık kullanıcı kontrollü parçacık fraksiyonlarına sahip MAP iskeleleri yapabildiğimize göre, bu malzemelerin biyoaktivitesini yeniden üretilebilir bir şekilde inceleyebilir ve hapsetme gibi benzersiz hücre tepkilerini araştırabiliriz. Mikroakışkan mikrojel üretimini ayarlamak, teknikleri öğrenirken zaman ve sabır gerektirir. Kurulumla ilgili sorunlarla karşılaşmanız durumunda birden fazla cihazın hazır ve hazır olması en iyisidir.Hyaluronik Asit veya HA ve Norbornen veya NB mikrojellerinin mikroakışkan üretimi ile başlayın. Mikrojelleri kurutmadan önce, kriyo-güvenli bir vidalı kapak tüpünü tartın. Daha sonra steril bir davlumbazda, yıkanmış ve saflaştırılmış mikrojelleri, pozitif yer değiştirmeli bir pipet kullanarak kriyo-güvenli bir vidalı kapak tüpüne aktarın.Saflaştırılmış mikrojellere% 70 etanol ekleyin ve iyice karıştırın. Tüpü 5.000 g'da beş dakika santrifüj yapın. Süpernatanı aspire edin ve% 70 etanol ekleyin.İyice karıştırın ve gece boyunca dört santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Ertesi gün, mikrojellerin tüpün dibinde olduğundan emin olmak için kısaca santrifüj yapın. Kriyojenik bir kaba sıvı azot ekleyin ve mikrojellerin tüpünü dondurmak için yerleştirin.Beş ila 10 dakika sonra, mikrojel tüpünü forseps ile çıkarın. Kapağı hızla çıkarın ve tüpü laboratuvar sınıfı doku ile örtün. Dokuyu lastik bir bantla sabitleyin ve bir liyofilizasyon kabına veya odaya aktarın.Numuneyi üreticinin talimatlarını izleyerek liyofilizatöre yükleyin ve 0.066 Torr ve eksi 63 santigrat derecede liyofilize edin. Liyofilize mikrojelleri oda sıcaklığında saklamadan önce tüpten tartın. Polidimetilsiloksan veya PDMS elastomer bazını, kürleme maddesi ile kütlece 10 ila bir oranında karıştırın.PDMS karışımını büyük bir plastik Petri kabına dökün ve kurutucuda 30 dakika boyunca veya tüm kabarcıklar kaybolana kadar gaz verin. Tüm kabarcıklar kaybolduktan sonra, yeni kabarcıkların oluşumunu en aza indirmek için 3D baskılı kalıbı PDMS'ye dikkatlice yerleştirin. PDMS'yi iyileştirmek için iki saat boyunca 60 santigrat derecede fırına koyun.Kürledikten sonra, kültür cihazının çevresini nazikçe izlemek için bir bıçak veya tıraş bıçağı kullanın ve kalıbı dikkatlice çıkarın. Herhangi bir PDMS'yi kuyucukların dibinden çıkarmak için dört milimetrelik bir biyopsi punch kullanın. Cihazları cam kapak kaymasına sığacak şekilde kesin.Kültür cihazının alt tarafındaki tozu temizlemek için bant kullanın. Nemi gidermek için temiz cam kapak kayma ve kültür cihazını 135 santigrat derecede bir sıcak plakaya 15 dakika boyunca yerleştirin. Bir duman başlığında, cam kapak kayması ve cihazın alt tarafında 30 saniye boyunca yüksek bir korona plazma tabancası kullanın.Daha sonra işlenmiş yüzeyleri hızla birbirine bağlayın. Kültür cihazı ile cam kapak kayması arasında iyi bir sızdırmazlık sağlamak için yavaşça basınç uygulayın. Bağı sabitlemek için cihazı gece boyunca 60 santigrat derecelik bir fırına yerleştirin.Ertesi gün, in vitro kullanmadan önce sterilize etmek için cihazı otoklav edin. Daha sonra, MAP iskelelerinde hücre kültürü için istenen parçacık fraksiyonuna dayanan Mikro Gözenekli Tavlanmış Parçacık veya MAP iskele bileşenlerini hazırlayın. Mikrojellerin kütlesini belirlemek için liyofilize mikrojelleri tartın.Daha sonra, seçilen ağırlık yüzdesi MAP'ye dayanarak hücre ortamının nihai MAP hacminin% 84'ünde mikrojelleri yeniden oluşturun. Mikrojellerin 20 dakika şişmesine izin verin. Hyaluronik Asit veya HA-tetrazin'i ve hücre ortamını nihai MAP hacminin% 16'sında çözün.Hücreler istenen akıcılığa ulaştığında, hücreleri kaldırın ve sayın. Mikrolitre MAP başına 10.000 hücreyi yeni bir tüpe aktarın. Hücreleri santrifüj edin ve hücreleri aspire etmeden süpernatantı peletten aspire edin.Deplasmanlı pipet kullanarak pelete mikrojeller ve çapraz bağlayıcı ekleyin. İyice karıştırın ve kuyu başına 10 mikrolitre tohumlayın. Karışımı kuyuya eşit olarak dağıtmak için dairesel bir hareketle pipet.Kuyucukları doldurmak için hücre ortamı eklemeden önce mikrojellerin 25 dakika boyunca 37 santigrat derecede tavlanmasına izin verin. 3B kültürleri 37 santigrat derecede tutun ve medyayı gerektiği gibi değiştirin. İskelenin aspire edilmesini önlemek için, pipet ucunu üst kuyucuğun sırtı boyunca stabilize edin.İstenilen zaman noktalarında, ortamı oda sıcaklığında 30 dakika boyunca kuyucuk başına 50 mikrolitre% 4 paraformaldehit ile değiştirerek numuneleri sabitleyin. Numuneleri 50 mikrolitre PBS veya tercih edilen tamponla üç kez yıkayın ve çalışma hacminin yanı sıra 50 mikrolitre kullanarak immünofloresan veya floresan boyama işlemine devam edin. Akış odaklı bir bölgeye sahip mikroakışkan cihazların, çapı 50 veya 100 mikron olan HA-NB mikrojelleri ürettiği gösterilmiştir.Mikrojelleri liyofilize etme ortamı,% 70 etanol kullanılarak kriyogen oluşumunu en aza indirgemek için optimize edilmiştir. Bununla birlikte, izopropil alkol, su ve asetonitril gibi diğer ortamlar, kriyogen oluşumunu kolaylaştırmak için birbirinin yerine kullanılabilir. HA-NB mikrojellerinin biyo-ortogonal birbirine bağlanmasını kolaylaştırmak için doğrusal bir HA-tetrazin çapraz bağlayıcı sentezlendi.Proton NMR spektroskopisi, tetrazin kolye grubu ile HA tekrar ünitelerinin% 11'inin başarılı bir modifikasyonunu göstermektedir. Kurutulmuş liyofilize mikrojel ürünü, özel hacimlerle rehidre edildi ve MAP iskelelerinde mikrojellerin farklı ağırlık yüzdesi formülasyonlarını elde etmek için tavlandı. MAP iskelelerindeki mikrojellerin bu ağırlık yüzdeleri, benzersiz parçacık fraksiyonlarına karşılık geliyordu.MAP iskelelerindeki hücre kültürü burada gösterilmiştir. MAP iskelelerindeki 3D kültürdeki hücreler beşinci günde sabitlendi, boyandı ve konfokal mikroskopta görüntülendi. Tek Z-dilimleri, hücre büyümesinde farklılıklar gösterir ve farklı ağırlık yüzdesi MAP'yi içeren iskeleler.Liyofilizasyon ortamınızı kriyojenleri isteyip istemediğinize bağlı olarak uygun şekilde seçin. Kuluçka adımlarını atlamayın, böylece mikrojelleriniz medyada şişmek için yeterli zamana sahip olur. Mikroskopi, akış sitometrisi, RNA dizilimi ve daha fazlası gibi standart teknikler, tanımlanmış gözeneklere sahip bu granüler materyallerdeki hücre yanıtlarını değerlendirmek için kullanılabilir.

controlling-particle-fraction-microporous-annealed-particle-scaffolds

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Biz, üç-boyutlu hücre kültürü için gözenekli polimer cips mikroimalat için iki süreç sunuyoruz. Bunlardan birincisi, solvent buhar kaynak işlemi ile birlikte sıcak kabartma. Ikincisi ise, kısa bir süre önce geliştirilen iyon izleme teknolojisi ile üretim önemli bir basitleştirme giden kombine microthermoforming süreci kullanır.

Üç boyutlu Hücre ekimi için Chip-ölçekli Yapı iskeleleri mikroimalat

Biyo-uyumlu pH duyarlı sol-jel nanosensors poli (laktik-ko-glikolik asit) (PLGA) electrospun iskeleleri katılabilecektir. Üretilen kendi-rapor iskeleleri iskelesi üzerinde hücrelerin kültürlenmesi iken microenvironmental durumların in situ izlenmesi için de kullanılabilir. 3D hücresel yapı deneyi bozmadan gerçek zamanlı olarak izlenebilir edildiğinden bu durum yararlıdır.

3-Boyutlu Hücre Kültürü için Self-raporlama iskeleleri

Bu makale, insan mezenkimal kök hücrelerinin, bilinen tohumlama yoğunluğuna kıyasla başlangıçta bağlanan hücre sayısını en üst düzeye çıkarmak ve ölçmek için standart kültür kuyusu plakalarının tabanını kaplamayan malzemelere, bu durumda elektro eğrilmiş ipliklere tohumlanması için bir dizi kurulumu açıklamaktadır.

Poli (ε-kaprolakton) electrospun İplik İnsan Mezenkimal Kök Hücre Ek Optimize

Biyomalzeme teknolojilerindeki gelişmeler, üç boyutlu çok hücreli tip yapıların geliştirilmesini sağlar. Hava yolu bronşiyol duvarının 3D in vitro modelini sağlamak için hava yolunun ana yapısal hücrelerini kültürlemek için üç ayrı iskele üretmek için elektrospinning protokolleri geliştirdik.

Elektrospinning Süreci Uyarlama bir Tri-katmanlı için üç Benzersiz ortamlar sağlamak için<em&gt; In Vitro</em&gt; Havayolu Wall Modeli

Burada, kendi kendine dediferansiye insan artiküler kondrosit farklılaşma kıkırdak benzeri doku içine tanıtmak için peptid iskele montaj içinde 3D-kültür sistemleri elde etmek için bir iletişim kuralı mevcut.

Üç boyutlu peptid iskele memeli hücrelerinde kültür

Biz bir tekrarlanabilir model formasyonu elde etmek için 3D bir hücre dışı matriks ilk hücre kümesi şeklinde kontrol etmek için bir yordam mevcut. İki farklı hydrogels içeren bir küp aygıtı doku Desen oluşumu için çok yönlü görüntüleme elde etmek için istihdam edilmektedir.

İlk 3D hücre küme denetimi içinde a Hybrid jel küp aygıt için tekrarlanabilir model oluşumları

Tamamlayıcı reaktif gruplara sahip mikrojel çubuklar, sulu çözeltide birbirine bağlanma kabiliyetine sahip mikroakışkanlar yoluyla üretilir. Anizometrik mikrojeller, küresel tabanlı sistemlere kıyasla daha büyük gözeneklere sahip kararlı yapılara sıkışır ve birbirine bağlanır. GRGDS-PC ile modifiye edilmiş mikrojeller, hücre kültürü için kullanılabilecek makrogözenekli 3D yapılar oluşturur.

Mikrojel Çubuklardan Birbirine Bağlı Makrogözenekli 3D İskeleler

Bu protokol, çeşitli rejeneratif tıp uygulamaları için kullanılabilecek mikro gözenekli tavlanmış parçacık iskelesi için mikrojel yapı taşlarını sentezlemek için bir dizi yöntemi açıklamaktadır.

Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelesi için Mikrojel Yapı Taşlarının Mikroakışkan Sentezi

Bu çalışma detayları 3D fibrin hazırlanması kültür ve plutipotent kök hücrelerin ayrıştırılması için iskeleleri. Bu tür iskelesi sıra ilaç verme sistemleri içeren değiştirilmiş olarak kök hücre davranışı üzerindeki çeşitli biyolojik etkiler bileşiklerin taranması için kullanılabilir.

3D Fibrin hazırlanması Kök Hücre Kültürü Uygulamaları için iskeleleri

Mikro-parçacık görüntü velosimetri (μPIV) doğru bir hız profili vermek için çapraz ilişkili olan kan akışındaki numaralı seribaşı mikro parçacıklar eşleştirilmiş görüntüleri görselleştirmek için kullanılır. Klinik uygulama için, her biri kesme hızı, maksimum hız, hız profili şekil ve akış hızı, bu ölçümler elde edilebilir.

Mikro Kan akış hızı Profil ölçümleri için mikro-parçacık imaj velosimetri

Keşfedin, MAP iskelelerinde partikül fraksiyonunun kontrol edilmesiyle 3D hücre kültürü için tekrarlanabilir doku mühendisliği yöntemleri. Bu teknik, hücre yanıtlarını standartlaştırarak rejeneratif tıpta klinik uygulamaları geliştirir.

3D Hücre Kültürü için Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelelerinde Partikül Fraksiyonunun Kontrol Edilmesi

Daha fazla video keşfet