Name: Karbon-nanopartikül yardımlı paratiroidektomi ile hipoparatiroid sıçanlarının üretimi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 57 s
Description: Öğrenin, karbon nanopartikül destekli paratiroidektomi ile stabil hipoparatiroid sıçan modeli oluşturmayı. Bu yöntem mineral iyon homeostazı ve yeni tedavilerin değerlendirilmesi için kritik bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma NSFC hibe 81800928, Batı Çin Stomatoloji Okulu / Hastanesi Sichuan Üniversitesi'nden Araştırma Fonu (No. RCDWJS2021-1) ve Ağız Hastalıkları Açık Finansman Devlet Anahtar Laboratuvarı SKLOD-R013 tarafından desteklenmiştir.

Bu çalışma, Sichuan Üniversitesi Ağız Hastalıkları Devlet Anahtar Laboratuvarı'ndaki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır. Deneyden önce ilgili yerel kurumlardan izin alınmıştır. Bu çalışmada ortalama ağırlığı 200-250 g olan sekiz adet 8-10 haftalık erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanı kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bakınız Malzeme Tablosu). Deney dönemi boyunca yiyecek ve su ad libitum olarak sağlanmıştır.
1. Karbon-nanopartikül destekli PTX sıçanlarının üretimi için preoperatif hazırlık
<ol><li>8-10 haftalık sıçanları %2.0-%2.5 izofluran inhalasyonu kullanarak uyuşturun, ardından 10 mL/kg vücut ağırlığında intraperitoneal (i.p.) tribromoetanol enjeksiyonu yapın. Pupilla ışık refleksinin yokluğunu test ederek yeterli anestezi derinliğini garanti edin. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlerde veteriner merhemi kullanın. NOT: 8-10 haftalık sıçanlar yetişkin sıçanlar olarak kabul edilir. Bununla birlikte, bu modelleme yöntemi 7 günlük kadar genç sıçanlarda kullanılabilir.</li>
	<li>Anestezi uygulanan SD sıçanları, ventral boyun bölgesinin kürkünü sırtüstü pozisyonda tıraş ederek ameliyat için hazırlayın. Povidon-iyot pamuk topları kullanarak ameliyat bölgesini dezenfekte edin (bakınız Malzeme Tablosu).</li>
	<li>Hayvanı cerrahi örtülerle örtün (bakınız Malzeme Tablosu) ve mikrobiyal kontaminasyonu en aza indirmeyi amaçlayan cerrahi bölgeyi açığa çıkarın.</li>
</ol>2. Paratiroidektomi (PTX)
<ol><li>İki kulak arasındaki orta noktadan başlayın ve cerrahi bir neşter kullanarak kuyruğa doğru uzunlamasına 2 cm'lik bir kesi kesin. Fasya ve yağ tabakasını keskin, kavisli, tırtıklı forsepslerle art arda diseke edin.</li>
	<li>Paratrakeal kasları ayırın ve trakeayı stereo mikroskop altında 4x-5x büyütmede nispeten künt forseps kullanarak açığa çıkarın.</li>
	<li>Kelebek şeklindeki tiroid bezlerinin sol ve sağ loblarını trakeanın yan tarafına yerleştirin.</li>
	<li>30 G eğimli iğne ile 10 μL'lik bir şırınga kullanarak tiroid bezlerinin zarının altına 1 μL karbon nanopartikül süspansiyonu (bakınız Malzeme Tablosu) enjekte edin. 5 dakika sonra, tiroid bezi zarını kaplayan ekstra karbon nanopartikül süspansiyonunu temizlemek için ameliyat bölgesini salinle sulayın. NOT: Önerilen enjeksiyon noktası, tiroid bezi lobunun daha az kan damarına sahip olan mesial kısmıdır. Bir karbon nanopartikül süspansiyonu, lenf düğümlerini tespit etme kabiliyeti nedeniyle tiroid cerrahisinde yaygın olarak kullanılır. Tiroid bezlerinin boyanması ve paratiroid bezlerinin lekesiz bırakılması, ikincisinin tanımlanmasını kolaylaştırır.</li>
	<li>Paratiroid bezleri ~ 5 dakika içinde lekesiz kalırken tiroid bezlerinin siyaha döndüğünden emin olun. Vurgulanan paratiroid bezlerini, bir stereo mikroskobun veya bir masa lambasının ışığını kullanarak normal ışık altında gözlemleyin. NOT: Tipik olarak, kemirgenler tiroid bezlerinin sol ve sağ yüzeylerinde bulunan iki damla şeklinde paratiroid bezine sahiptir. Bazen, ek paratiroid bezleri daha uzağa yerleştirilebilir.</li>
	<li>Lekesiz paratiroid bezlerini mikrocerrahi forseps ve makasla kesin olarak kesin. Hemostaz için steril pamuk topları veya daha fazla kanama varsa jelatin sünger kullanın.</li>
	<li>Kasları, yağ tabakalarını ve cildi katman katman, 6-0 poliglactin 910 sütür kullanarak kesilmiş yatay yatak sütürü ile kapatın (bkz.</li>
	<li>Sahte grup için, preoperatif preparatın ve PTX'in adım 2.6 hariç tüm adımlarını uygulayın. Sıçanları uyuşturun ve trakeanın üzerindeki dokuları ayırın. Paratiroid bezlerini bulun, ancak çıkarmayın. PTX grubunun sıçanları ile birlikte postoperatif iyileşme ve gözlem yapın.</li>
</ol>3. Postoperatif iyileşme ve gözlem
<ol><li>Ameliyattan sonra, vücut ısılarını korumak için sıçanları termostatik bir elektrikli battaniyeye (37 ° C) yerleştirin. Postoperatif analjezi olarak her 12 saatte bir deri altından 0.01 mg/kg buprenorfin hidroklorür (s.c) enjekte edin. Sıçanları hareket etmeye başladıklarında ve sürünmeye çalıştıklarında steril bir kafese aktarın.</li>
	<li>Sıçanları ameliyat sonrası 2 saat boyunca yakından gözlemleyin. Sıçanları yetiştirme odasına geri getirin, rutin olarak gözlemleyin ve durumlarını kaydedin.</li>
	<li>Ameliyattan 7 gün sonra kuyruk damarından 10 μL kan alın. Serum Ca2+, serum Pi ve serum PTH'yi uygun ticari kitler kullanarak ölçün (bkz. Başarılı bir paratiroidektomi, sham ile ameliyat edilen sıçanlarınkinden daha düşük serum iyonize Ca2 + seviye 2 SD üretir (9.00 mmol / L, n = 16). NOT: İstatistiksel analiz için bir istatistik ve grafik yazılımı (bakınız Malzeme Tablosu) kullanılmıştır. Sahte ve PTX grupları arasındaki serum ve üriner parametreleri karşılaştırmak için bir Student'ın t-testi kullanıldı. p < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı bulundu. Serum ve idrar Ca2+ ve Pi ile serum üre ve kreatinin, üreticilerin talimatlarına göre ticari kitlerle ölçüldü (bakınız Malzeme Tablosu). Tip I kollajen ve osteokalsinin serum C-telopeptidi, piyasada bulunan ELISA kitleri ile ölçüldü (bakınız Malzeme Tablosu).</li>
</ol>

<ol><li>Bilezikian, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoparathyroidism+in+the+adult%3A+Epidemiology%2C+diagnosis%2C+pathophysiology%2C+target-organ+involvement%2C+treatment%2C+and+challenges+for+future+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Hypoparathyroidism in the adult: Epidemiology, diagnosis, pathophysiology, target-organ involvement, treatment, and challenges for future research.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 26 (10), 2317-2337 (2011).</li>
<li>Bilezikian, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoparathyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Hypoparathyroidism.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 105 (6), 1722-1736 (2020).</li>
<li>Underbjerg, L., Sikjaer, T., Mosekilde, L., Rejnmark, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postsurgical+hypoparathyroidism-Risk+of+fractures%2C+psychiatric+diseases%2C+cancer%2C+cataract%2C+and+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Postsurgical hypoparathyroidism-Risk of fractures, psychiatric diseases, cancer, cataract, and infections.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 29 (11), 2504-2510 (2014).</li>
<li>Underbjerg, L., Sikjaer, T., Mosekilde, L., Rejnmark, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+nonsurgical+hypoparathyroidism+in+Denmark%3A+A+nationwide+case+finding+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of nonsurgical hypoparathyroidism in Denmark: A nationwide case finding study.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 30 (9), 1738-1744 (2015).</li>
<li>Astor, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+health-related+quality+of+life+in+hypoparathyroidism+in+Norway%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and health-related quality of life in hypoparathyroidism in Norway.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 101 (8), 3045-3053 (2016).</li>
<li>Rodriguez-Ortiz, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+deficiency+reduces+circulating+levels+of+FGF23%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Calcium deficiency reduces circulating levels of FGF23.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 23 (7), 1190-1197 (2012).</li>
<li>Davies, B. M., Gordon, A. H., Mussett, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+plasma+calcium+assay+for+parathyroid+hormone%2C+using+parathyroidectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A plasma calcium assay for parathyroid hormone, using parathyroidectomized rats.</a> The Journal of Physiology. 125 (2), 383-395 (1954).</li>
<li>Clarke, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+diagnosis+of+hypoparathyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and diagnosis of hypoparathyroidism.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 101 (6), 2284-2299 (2016).</li>
<li>Liu, Y., Shan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+on+diagnosis+and+treatment+for+elderly+with+thyroid+diseases+in+China%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Medicine%22%5BJournal%5D)">Expert consensus on diagnosis and treatment for elderly with thyroid diseases in China.</a> Aging Medicine. 4 (2), 70-92 (2021).</li>
<li>Sulejmanovic, M., Cickusic, A. J., Salkic, S., Bousbija, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Annual+incidence+of+thyroid+disease+in+patients+who+first+time+visit+department+for+thyroid+diseases+in+Tuzla+Canton%5BTitle%5D)+AND+%22Materia+Socio-Medica%22%5BJournal%5D)">Annual incidence of thyroid disease in patients who first time visit department for thyroid diseases in Tuzla Canton.</a> Materia Socio-Medica. 31 (2), 130-134 (2019).</li>
<li>Liao, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+fibroblast+growth+factor+23+and+biochemical+and+bone+histomorphometric+alterations+in+a+chronic+kidney+disease+rat+model+undergoing+parathyroidectomy%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Relationship between fibroblast growth factor 23 and biochemical and bone histomorphometric alterations in a chronic kidney disease rat model undergoing parathyroidectomy.</a> PloS One. 10 (7), 0133278(2015).</li>
<li>Russell, P. S., Gittes, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parathyroid+transplants+in+rats%3A+A+comparison+of+their+survival+time+with+that+of+skin+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Parathyroid transplants in rats: A comparison of their survival time with that of skin grafts.</a> The Journal of Experimental Medicine. 109 (6), 571-588 (1959).</li>
<li>Sakai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast+development+in+immobilized+bone+is+suppressed+by+parathyroidectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Osteoclast development in immobilized bone is suppressed by parathyroidectomy in mice.</a> Journal of Bone and Mineral Metabolism. 23 (1), 8-14 (2005).</li>
<li>Bi, R., Fan, Y., Luo, E., Yuan, Q., Mannstadt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+techniques+to+create+hypoparathyroid+mice%3A+parathyroidectomy+using+GFP+glands+and+diphtheria-toxin-mediated+parathyroid+ablation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Two techniques to create hypoparathyroid mice: parathyroidectomy using GFP glands and diphtheria-toxin-mediated parathyroid ablation.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55010(2017).</li>
<li>Bi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diphtheria+toxin-+and+GFP-based+mouse+models+of+acquired+hypoparathyroidism+and+treatment+with+a+long-acting+parathyroid+hormone+analog%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Diphtheria toxin- and GFP-based mouse models of acquired hypoparathyroidism and treatment with a long-acting parathyroid hormone analog.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 31 (5), 975-984 (2016).</li>
<li>Huang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanoparticles+suspension+injection+for+photothermal+therapy+of+xenografted+human+thyroid+carcinoma+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22MedComm%22%5BJournal%5D)">Carbon nanoparticles suspension injection for photothermal therapy of xenografted human thyroid carcinoma in vivo.</a> MedComm. 1 (2), 202-210 (2020).</li>
<li>Zhang, R. J., Chen, Y. L., Deng, X., Yang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanoparticles+for+thyroidectomy+and+central+lymph+node+dissection+for+thyroid+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Surgeon%22%5BJournal%5D)">Carbon nanoparticles for thyroidectomy and central lymph node dissection for thyroid cancer.</a> The American Surgeon. , (2022).</li>
<li>Long, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+carbon+nanoparticle+lymphatic+tracer+protected+parathyroid+glands+during+radical+thyroidectomy+for+papillary+thyroid+non-microcarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Innovation%22%5BJournal%5D)">A carbon nanoparticle lymphatic tracer protected parathyroid glands during radical thyroidectomy for papillary thyroid non-microcarcinoma.</a> Surgical Innovation. 24 (1), 29-34 (2017).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+long-term+universal+salt+iodization+on+thyroid+disorders%3A+Epidemiological+evidence+from+31+provinces+of+mainland+China%5BTitle%5D)+AND+%22Thyroid%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of long-term universal salt iodization on thyroid disorders: Epidemiological evidence from 31 provinces of mainland China.</a> Thyroid. 30 (4), 568-579 (2020).</li>
<li>Powers, J., Joy, K., Ruscio, A., Lagast, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+incidence+of+hypoparathyroidism+in+the+United+States+using+a+large+claims+database%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Prevalence and incidence of hypoparathyroidism in the United States using a large claims database.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 28 (12), 2570-2576 (2013).</li>
<li>Zihao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+allogeneic+parathyroid+cell+transplantation+in+rats+with+hypoparathyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22Gland+Surgery%22%5BJournal%5D)">Promotion of allogeneic parathyroid cell transplantation in rats with hypoparathyroidism.</a> Gland Surgery. 10 (12), 3403-3414 (2021).</li>
<li>Goncu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenotransplantation+of+microencapsulated+parathyroid+cells+as+a+potential+treatment+for+autoimmune-related+hypoparathyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Xenotransplantation of microencapsulated parathyroid cells as a potential treatment for autoimmune-related hypoparathyroidism.</a> Experimental and Clinical Transplantation. , (2021).</li>
<li>Jung, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+a+physiologic+hypoparathyroidism+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Standardization of a physiologic hypoparathyroidism animal model.</a> PLoS One. 11 (10), 0163911(2016).</li>
<li>Chen, W., Lv, Y., Xie, R., Xu, D., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+lymphatic+mapping+to+recognize+and+protect+parathyroid+in+thyroid+carcinoma+surgery+by+using+carbon+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Otorhinolaryngology%2C+Head%2C+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Application of lymphatic mapping to recognize and protect parathyroid in thyroid carcinoma surgery by using carbon nanoparticles.</a> Journal of Clinical Otorhinolaryngology, Head, and Neck Surgery. 28 (24), 1918-1920 (1924).</li>
</ol>

Yazarlar, rakip finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Epidemiyolojik raporlar, tiroid hastalıklarının saptanmasının önemli ölçüde arttığını ve buna bağlı olarak yapılan ilgili ameliyatların sayısının arttığını göstermektedir19,20. Cerrahi sonrası hipoparatiroidi insidansı yaklaşık %7,68,21 iken, edinsel hipoparatiroidizmin artmış morbiditesi bu nadir hastalığın araştırmalara daha fazla ilgi çekmesine neden olmuştur. Bu nedenle, hastalığın patogenezini araştı...

Paratiroid hormonu (PTH) paratiroid bezleri tarafından salgılanır. Kalsiyum dengesinin önemli bir modülatörüdür, fosfat metabolizmasını korur ve kemik döngüsüne katılır 1,2. Hipoparatiroidizm (HipoPT), PTH'nin sekresyonunun azalması veya fonksiyonel kaybı olarak kendini gösterir. Nadir görülen bir endokrin bozukluktur ve prevalansı 100.000 kişi-yıl başına yaklaşık 9-37 arasındadır 3,4,5. HipoPT, artmış serum fosfor 6,7 ile birlikte azalmış serum PTH ve kalsiyum seviyeleri ile karakterizedir. HipoPT nedenine göre sınıflandırılır: edinilmiş hipoparatiroidizm (AHypoPT) veya idiyopatik hipoparatiroidizm (IHypoPT)8. AHypoPT klinik pratikte daha sık rastlanmaktadır; AHypoPT vakalarının yaklaşık% 75'i, tiroid cerrahisi veya diğer baş boyun ameliyatları sırasında paratiroid bezlerinin rezeksiyonu veya kazara yaralanmasından kaynaklanır. Diğer nedenler arasında baş boyun tümörleri için radyoterapi ve kemoterapi ve ilaç toksisitesi 1,8 sayılabilir. Gelişen tanı yöntemleri ve tiroid bezi ile ilişkili hastalıkların taranmasında artış, tiroid bezi cerrahi operasyonlarının sayısını artırmıştır. Bu da ilişkili paratiroid bezi komplikasyonlarında 9,10 artışa yol açmıştır.
AHypoPT'yi daha iyi araştırmak ve yeni tedavilerin terapötik etkinliğini doğrulamak için kararlı özelliklere sahip kolayca oluşturulmuş hayvan modellerine ihtiyaç vardır. Sıçan ve farelere yapılan paratiroidektomi (PTX) önceki çalışmalarda bildirilmiştir 6,11; Bununla birlikte, paratiroid bezlerinin son derece küçük boyutları ve anatomik dağılımlarındaki değişkenlik nedeniyle, pratikte başarı oranı nispeten düşüktür. Bu nedenle, tiro-paratiroidektomi (TPTX) (yani, tiroid ve paratiroid bezlerinin tamamen çıkarılması) genellikle paratiroid bezlerinin rezeksiyonunu sağlamak için yapılır12. Bununla birlikte, ortaya çıkan düşük tiroksin seviyeleri, bu hayvan modeli13 ile yapılan çalışmaları zorlaştırabilir. İlaç stimülasyonu ve gen düzenleme gibi diğer yöntemlerle oluşturulan hipoPT modelleri, en yaygın AHypoPT patogenezini doğru bir şekilde temsil edememektedir. Grubumuz daha önce paratiroid bezlerini etiketlemek ve tiroid bezlerine ve çevresindeki anatomik yapılara zarar vermeden paratiroid bezlerinin çıkarılmasına izin vermek için nakavt fare modelleri kullanmıştır14,15. Bununla birlikte, bu yöntem, çiftleşme ve üreme gereksinimleri nedeniyle daha uzun bir geliştirme süresi gerektiren transgenik fare modellerini kullanır.
Bu nedenle, AHypoPT'nin kolay oluşturulan bir modelini kurmayı amaçladık. Bu çalışma, karbon nanopartikül etiketlemesini kullanarak PTX için bir sıçan modelini açıklamaktadır. Tiroid cerrahisinde yaygın olarak kullanılan 50 mg / mL'lik bir karbon nanopartikül süspansiyonu, lokal enjeksiyon16'dan sonra tiroid bezlerinde eşit olarak dağılır. Tiroid bezleri siyaha döner, ancak paratiroid bezleri lekesiz kalır17, böylece paratiroid bezlerini tiroid bezlerinden açıkça ayırt eder ve PTX'in tiroid bezlerini etkilemeden yapılmasına izin verir. Bu yöntem farklı yaşlardaki sıçanlar için uygundur. Karbon nanopartikül süspansiyonunun enjeksiyonu güvenlidir ve tiroid fonksiyonu üzerinde ihmal edilebilir bir etkiye sahiptir18. Bu çalışmada üretilen karbon nanopartikül etiketli PTX sıçan modeli, 4 haftalık gözlem süresi boyunca önemli hipokalsemi ve hiperfosfatemi fenotipleri göstermiştir. Bu nedenle, bu AHypoPT modelinin kurulması kolaydır ve tekrarlanabilir bir fenotipe sahiptir.

<table><tbody><tr><td>% 0.9 Sodyum Klorür Çözeltisi</td><td>Kelun Co. Sichuan, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 ve mikro; L 30G NanoFil Şırınga</td><td>WPI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-0 poliglaktin 910 sütür iğne</td><td>ile Ethicon, Inc</td><td>J510G</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum LiquiColor testi</td><td>EKF</td><td>0155-225</td><td>Ca2 + analizi için</td></tr><tr><td>Karbon Nanopartiküller Süspansiyon Enjeksiyonu</td><td>Lummy, Chongqing, Çin</td><td>H20073246</td><td>1 mL : 50 mg</td></tr><tr><td>Kreatinin (Cr) Test kiti ( sarkozin oksidaz)</td><td>Jiancheng, Nanjing, Çin</td><td>C011-2-1</td><td>Kreatinin analizi için</td></tr><tr><td>Tek Kullanımlık Neşter</td><td>Shinva, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumstar Biyoloji forseps</td><td>Shinva, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikro Diseksiyon Yaylı Makas</td><td>Shinva, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MicroVue Sıçan bozulmamış PTH ELISA</td><td>İmmünotopics</td><td>30-2531</td><td>Sıçan serumunda</td></tr> <tr><td>PTH ölçümü içinİğne Tutucu</td><td>Shinva, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fosfor Sıvı-UV testi</td><td>EKF</td><td>0830-125</td><td>Pi analizi için</td></tr><tr><td>Kat gazlı bez</td><td>Weian Co. Henan, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidon-İyot</td><td>Yongan ilaç Co.Ltd. Chengdu, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prism 9.0 (istatistik ve grafik yazılımı)</td><td>GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, ABD</td><td></td><td>https://www.graphpad.com/scientific-software/prism/</td></tr> Tip <tr><td>I kollajenin (CTX-I) RAN C-telopeptiti ELISA Kiti</td><td>CUSABIO, Wuhan, Çin</td><td>CTX-I analizi için</td><td>CSB-E12776r</td></tr><tr><td>Sıçan Osteokalsin/Kemik Gla Proteini (OT/BGP) ELISA Kit</td><td>CUSABIO, Wuhan, Çin</td><td>Osteokalsin analizi için CSB-E05129r</td><td></td></tr><tr><td>Güvenlik Tek Kenarlı Tıraş Bıçakları</td><td>Amerikan Güvenlik Tıraş Bıçağı</td><td>Şirketi 66-0089</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley Sıçanlar</td><td></td><td></td><td>8 ila 10 haftalık</td></tr><tr><td>Cerrahi İnsizyon Örtüleri</td><td>Liangyou Co. Sichuan, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Üre Test Kiti</td><td>Jiancheng, Nanjing, Çin</td><td>Üre analizi için</td> <td>C013-2-1</td></tr></tbody></table>

karbon-nanopartikül yardımlı paratiroidektomi ile hipoparatiroid sıçanlarının üretimi

Generation of Hypoparathyroid Rats via Carbon-Nanoparticle-Assisted Parathyroidectomy

Hipoparatiroidizm (HipoPT), paratiroid bezlerini tutan, yüksek serum fosfor düzeylerine ve düşük serum kalsiyum düzeylerine yol açan, paratiroid hormonunun (PTH) salgılanmasının veya gücünün azalması ile karakterize nadir görülen bir hastalıktır. HipoPT en sık bezlerin kazara hasar görmesinden veya tiroid veya diğer ön boyun cerrahisi sırasında çıkarılmasından kaynaklanır. Paratiroid/tiroid cerrahisi son yıllarda daha yaygın hale gelmiştir ve postoperatif bir komplikasyon olarak HipoPT oluşumunda buna bağlı bir artış olmuştur. HipoPT'nin mineral iyon homeostazı üzerindeki etkilerinin altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamak ve yeni tedavilerin terapötik etkinliğini doğrulamak için bir HipoPT hayvan modeline kritik bir ihtiyaç vardır. Burada, karbon nanopartikülleri kullanılarak paratiroidektomi (PTX) yapılarak erkek sıçanlarda edinilmiş HipoPT oluşturmak için bir teknik bildirilmiştir. Sıçan modeli, hipoparatiroidizmin fare modelleri üzerinde büyük umut vaat ediyor. Önemli olarak, insan PTH reseptörü bağlanma bölgesi, farelerle paylaşılan% 73.7 benzerlikten daha yüksek olan sıçanınkiyle % 84.2'lik bir dizi benzerliğine sahiptir. Ayrıca, PTH / PTHrP reseptör sinyal yolunu etkileyebilen östrojenin etkileri, erkek sıçanlarda tam olarak araştırılmamıştır. Karbon nanopartikülleri, tiroid lenf düğümlerini işlevlerini etkilemeden siyaha boyayan lenfatik izleyicilerdir, ancak paratiroid bezlerini boyamazlar, bu da onları tanımlamayı ve çıkarmayı kolaylaştırır. Bu çalışmada, PTX sonrası serum PTH düzeyleri saptanamadı ve bu da belirgin hipokalsemi ve hiperfosfatemi ile sonuçlandı. Bu nedenle, postoperatif HipoPT'nin klinik durumu sıçan modelinde dikkat çekici bir şekilde temsil edilebilir. Bu nedenle, karbon-nanopartikül destekli PTX, HipoPT'nin patogenezini, tedavisini ve prognozunu incelemek için olağanüstü etkili ve kolayca uygulanabilir bir model olarak hizmet edebilir.

Paratiroid bezlerinin yerleri ve sayısı başlangıçta diseksiyon mikroskobu altında sıçanlarda gözlendi. Karbon nanopartikül enjeksiyonundan önce, tiroid bezleri yarı saydam kırmızı bir renkteydi ve paratiroid bezleri mikroskop altında zorlukla ayırt edilebiliyordu (Şekil 1A). Nanopartikül enjeksiyonundan sonra, tiroid bezleri siyaha boyanırken, paratiroid bezleri lekesiz kaldı (Şekil 1B). Açık renkli paratiroid bezlerinin dikkatli diseksiyonu tiroid bezlerine dok...

Kazanılmış hipoparatiroidizmin (HypoPT) bir hayvan modeli, HipoPT'nin mineral iyon homeostazını nasıl etkilediğini anlamak ve yeni tedavilerin etkinliğini doğrulamak için çok önemlidir. Burada, karbon nanopartikülleri kullanılarak paratiroidektomi (PTX) ile edinilmiş bir hipoparatiroidizm (AHypoPT) sıçan modeli oluşturmak için bir teknik sunulmuştur.

Karbon-nanopartikül yardımlı paratiroidektomi ile hipoparatiroid sıçanlarının üretimi

Hypoparathyroidism (HypoPT) is a rare disease involving the parathyroid glands that is characterized by a reduced secretion or potency of the parathyroid ...

Bu protokolün genel amacı, kurulması kolay, karakterde stabil ve tiroid bezlerine zararsız olan edinilmiş hipoparatiroidizmin bir sıçan modelini oluşturmaktır. Bu modelin temel avantajı, karbon nanopartiküllerinin yardımıyla paratiroid bezlerinin hassas bir şekilde çıkarılmasıdır. Modelin hipoparatiroidizm alanındaki birkaç sorunun çözülmesine yardımcı olabileceğini umuyoruz.Örneğin, tiroidektomi sonrası hipokalsemi riskini azaltmak için ameliyat öncesi kalsiyum ve D vitamini kullanımı. Bu yöntem, kemik döngüsünün PTH analoglarından nasıl etkilendiği ve PTH analoglarının uzun süreli kullanımda vücudu nasıl etkilediği hakkında fikir verebilir. Bu tekniği ilk kez uygulayanlar, stereo mikroskop altında mikro-manipülasyon yapmayı zor bulabilirler.Stereo mikroskop altında bazı uygulamalar yardımcı olabilir. Başlamak için, anestezi uygulanan sıçanı sırtüstü pozisyona yerleştirin ve ventral boyun bölgesinin kürkünü tıraş edin. Makalede açıklandığı gibi bir kesi yaptıktan sonra, tiroid bezinin loblarını bulun.30 gauge konik iğne ile donatılmış 10 mikrolitrelik bir şırınga kullanarak, karbon nanopartikül süspansiyonunun bir mikrolitresini tiroid bezi zarının mesial kısmına enjekte edin. Beş

generation-hypoparathyroid-rats-via-carbon-nanoparticle-assisted

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

İnsan perivasküler kök hücreler (PSC'ler) mezenkimal kök hücreler (MKH) benzer iskelet doku yenilenmesine yönelik yeni bir kök hücre sınıfı vardır. PSC'ler standart bir yağ emme prosedürleri sırasında temin adipoz dokusu FACS (floresans aktive hücre ayırma) yoluyla izole edilebilir, ardından kemik oluşumunu sağlamak için bir osteoendüktif iskelesi ile...

Kemik Rejenerasyon için İnsan perivasküler Kök Hücre kullanın

Genler yetişkin hayvanlarda davranış veya nöropatoloji sonraki çalışmalar için nöronal bağlantı hızlı ve hedeflenen değişiklikleri mümkün kılmak için, E16 de utero elektroporasyon (IUE) in ile korteks veya sıçanın hipokampusun gelişimi sırasında manipüle edilebilir. IUE başarı kontrolü için in vivo görüntüleme doğum sonrası ko-transfekte edilmiş lusiferaz aktive biyolüminesans ile gerçekleştirilir.

Topikal Transgenik Rats nesil tarafından<em&gt; Utero</em&gt; Elektroporasyon ve<em&gt; In vivo</em&gt; Biyoparlaklık Eleme

Bu farelere, sıkıştırılmış hormon peletlerin üretimi, hem de deri altından cerrahi implantasyon açıklar. Bu strateji, hormonal karsinojenezi ve iyi huylu prostat büyümesi düzenleme değerlendirmek için atimik çıplak farelerin böbrek kapsülünün altına hücre ve doku senograflarının büyümesi ile kombine edilebilir.

Prostat Karsinogenezde ve İyi Huylu Prostat Büyümesi ve Değerlendirilmesi için böbrek Kapsül Xenografting ve Derialtı Pelet İmplantasyonu

Edinilmiş hipoparatiroidizmi olan fareler, hipoparatiroidizm için yeni ilaç tedavilerini incelemek için yararlı olacaktır. Bu tür fareler oluşturmak için iki prosedür gösterilmiştir.  GFP-PTX faresi, yeşil floresan paratiroid bezleri tarafından yönlendirilen cerrahi paratiroidektomi ile üretilir.  İkinci, cerrahi olmayan bir yaklaşım, difteri toksin reseptörünün paratiroid spesifik ekspresyonuna dayanır.

Hipoparatiroid Fare oluşturma iki Teknikleri: Paratiroidektomi GFP Rakorlar ve Difteri-Toksin-Aracılı Paratiroid Ablasyonu kullanma

Bu iletişim kuralı bir iletken polimer iskele vitro elektriksel stimülasyon ve kök hücre numaralı seribaşı iskele kullanarak sonraki vivo içinde implantasyon için üzerinde kök hücrelerin tohum izin vermek için bir hücre kültür sistemi imalatı açıklar bir minimal invaziv tekniği.

Modüle ve kök hücre sunmak için elektriksel olarak iletken iskele

Bu protokol, ex vivo kalsitonin genine bağlı peptid (CGRP) salınım modelini ve farmakolojik ajanların kemirgenlerde trigeminovasküler sistemden salınan CGRP miktarı üzerindeki etkisini ölçme stratejisini açıklamaktadır.

Eski Vivo Kemirgenlerde Trigeminovasküler Sistemden Kalsitonin Geni ile İlgili Peptitin Salınımı

Tiroid/paratiroid cerrahisinde yeni geliştirilen cerrahi enerji cihazlarının güvenli bir şekilde uygulanması cerrahların dikkatini çekmektedir. Hayvan deney modelleri, insan cerrahisinde gereksiz denemeleri ve hataları önleyebilir. Bu yazının amacı, tiroid/paratiroid cerrahisinde SED'lerin güvenlik parametrelerini değerlendirmek için elektrofizyolojik ve termografik yöntemleri göstermektedir.

Tiroid ve Paratiroid Cerrahisi Sırasında Cerrahi Enerji Cihazlarının Elektrofizyolojik ve Termografik Güvenlik Parametrelerinin Bir Domuz Modelinde İncelenmesi

Bugüne kadar, paratiroid bezi (PG) tanımlama yöntemlerinin gelişimi, klinik öncesi araştırmalarda hayvan modellerinin eksikliği ile sınırlıdır. Burada, intraoperatif PG görüntüleme için basit ve etkili bir sıçan modeli oluşturuyoruz ve yeni bir PG kontrast maddesi olarak demir oksit nanopartikülleri kullanarak etkinliğini değerlendiriyoruz.

İntraoperatif Paratiroid Bezi Görüntülemede Basit ve Etkili Bir Sıçan Modelinin Oluşturulması

Bu protokol, domuzlardan paratiroid bezleri elde etmek için hızlı ve öldürücü olmayan bir yöntem sunar. Prosedür üç ana adımdan oluşur: anestezi ile domuz hazırlığı, tek taraflı timus alımı ve intratimik paratiroid bezinin ex vivo tanımlanması ve çıkarılması.

Canlı Donör Domuzlardan Paratiroid Bezi Temini ve Ex Vivo Kimliklendirme

Bu makale, bir sıçan modelinde orta hat laparotomi yoluyla keskin bipolektomi ile 5/6 nefrektomi için standart bir protokol sunmakta olup, büyük ölçüde metodik hassasiyet ve düşük teknik hata riski ile renal parankim redüksiyonu yoluyla böbrek yetmezliği durumunu indüklemeyi amaçlamaktadır.

Sıçanlarda Orta Hat Laparotomi ile Keskin Bipolektomi Kullanılarak 5/6 Nefrektomi

Öğrenin, karbon nanopartikül destekli paratiroidektomi ile stabil hipoparatiroid sıçan modeli oluşturmayı. Bu yöntem mineral iyon homeostazı ve yeni tedavilerin değerlendirilmesi için kritik bilgiler sunar.

Karbon-nanopartikül yardımlı paratiroidektomi ile hipoparatiroid sıçanlarının üretimi

Daha fazla video keşfet