Name: Yaralı PC12 Hücrelerini Tedavi Etmek için İki Bitki Kombinasyonu Stratejisini Keşfetmek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T14:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Keşfedin, hipoksi hasarlı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitki kombinasyonu stratejisini. Bu yöntem, geleneksel Çin tıbbı uygulamalarını optimize etmek için güvenilir bir in vitro tarama protokolü sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma, Sichuan İl Bilim ve Teknoloji Departmanı'nın (2020YFS0325) kilit Ar-Ge projeleri tarafından finanse edilmiştir.

<ol><li>Mendelevich, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cerebral+ischemia%2C+and+dizziness%5BTitle%5D)+AND+%22Zhurnal+Nevrologii+i+Psikhiatrii+Imeni+SS+Korsakova%22%5BJournal%5D)">Chronic cerebral ischemia, and dizziness.</a> Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii Imeni SS Korsakova. 122 (3), 22-26 (2022).</li>
<li>Gao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+on+the+diagnosis+and+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+integrated+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Expert consensus on the diagnosis and treatment of chronic cerebral ischemia with integrated traditional Chinese and western medicine.</a> Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 38 (10), 1161-1167 (2018).</li>
<li>Luyu, S., Heng, L., Dengke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+treatment+of+45+cases+of+cerebral+infarction+with+Astragalus+and+Dengzhan+Xixin+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Combined treatment of 45 cases of cerebral infarction with Astragalus and Dengzhan Xixin injection.</a> Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine. 27 (4), 23-24 (2007).</li>
<li>Bei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+study+of+Dengzhanxixin+injection+combined+with+Astragalus+injection+in+the+treatment+of+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Basic+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical study of Dengzhanxixin injection combined with Astragalus injection in the treatment of acute ischemic stroke.</a> Journal of Basic Chinese Medicine. 21 (9), 1123-1127 (2015).</li>
<li>Tian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+ratio+of+Astragalus+injection+combined+with+Dengzhan+Xixin+injection+against+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+rats+by+baseline+equal-ratio+increase-decrease+design+method%5BTitle%5D)+AND+%22China+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Optimal ratio of Astragalus injection combined with Dengzhan Xixin injection against cerebral ischemia-reperfusion injury in rats by baseline equal-ratio increase-decrease design method.</a> China Pharmacy. 30 (14), 1885-1889 (2019).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+and+mechanism+of+Astragalus+combined+with+Erigeron+breviscapusin+the+best+proportion+on+cerebral+ischemia+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Protective effect and mechanism of Astragalus combined with Erigeron breviscapusin the best proportion on cerebral ischemia rats.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 35 (2), 104-108 (2019).</li>
<li>Yan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+oxidative+damage+of+PC12+cells+with+hypoxia+and+hypoglycemia+based+on+the+combination+of+Astragalus+and+Dengzhan+Asarum+based+on+the+Nrf2%2FHO-1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Study on the oxidative damage of PC12 cells with hypoxia and hypoglycemia based on the combination of Astragalus and Dengzhan Asarum based on the Nrf2/HO-1 pathway.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 38 (2), 159-164 (2022).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Dengzhan Asarum Granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69</a> 924(2020).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Astragalus granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8</a> 1592(2020).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-linoleyltyrosine+protects+PC12+cells+against+oxidative+damage+via+autophagy%3A+Possible+involvement+of+CB1+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">N-linoleyltyrosine protects PC12 cells against oxidative damage via autophagy: Possible involvement of CB1 receptor regulation.</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (5), 1827-1837 (2020).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gab1+regulates+SDF-1-induced+progression+via+inhibition+of+apoptosis+pathway+induced+by+PI3K%2FAKT%2FBcl-2%2FBAX+pathway+in+human+chondrosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Tumor+Biology%22%5BJournal%5D)">Gab1 regulates SDF-1-induced progression via inhibition of apoptosis pathway induced by PI3K/AKT/Bcl-2/BAX pathway in human chondrosarcoma.</a> Tumor Biology. 37 (1), 1141-1149 (2016).</li>
<li>Meng, M., Zhang, L., Ai, D., Wu, H., Peng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Asarone+ameliorates+%CE%B2-Amyloid-induced+neurotoxicity+in+PC12+cells+by+activating+P13K%2FAkt%2FNrf2+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">β-Asarone ameliorates β-Amyloid-induced neurotoxicity in PC12 cells by activating P13K/Akt/Nrf2 signaling pathway.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 659955(2021).</li>
<li>Li, J., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Xinjiang+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in the treatment of chronic cerebral ischemia with traditional Chinese and western medicine.</a> Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine. 39 (3), 115-118 (2021).</li>
<li>Yu, M., Zhan, Q., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discussion+on+the+therapeutic+value+of+traditional+Chinese+medicine+on+cognitive+dysfunction+caused+by+chronic+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine+Modern+Distance+Education+of+China%22%5BJournal%5D)">Discussion on the therapeutic value of traditional Chinese medicine on cognitive dysfunction caused by chronic cerebral ischemia.</a> Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 11 (19), 155-157 (2013).</li>
<li>Wang, M., Liu, J., Yao, M., Ren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+research+on+pharmacological+and+neuroprotective+effects+of+traditional+Chinese+medicine+after+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Advances in research on pharmacological and neuroprotective effects of traditional Chinese medicine after cerebral ischemia.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (3), 513-517 (2020).</li>
<li>Wang, N., Sun, H., Ma, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+doses+of+astragalus+injection+on+neurological+rehabilitation+of+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Clinical+Rational+Drug+Use%22%5BJournal%5D)">Effects of different doses of astragalus injection on neurological rehabilitation of stroke patients.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 9 (13), 67-69 (2016).</li>
<li>Sun, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+astragalus+injection+on+apoptosis+after+cerebral+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hebei+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effects of astragalus injection on apoptosis after cerebral ischemia-reperfusion in rats.</a> Hebei Medicine. 22 (7), 1147-1149 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengzhan+Xixin+injection+derived+from+a+traditional+Chinese+herb+Erigeron+breviscapusameliorates+cerebral+ischemia%2Freperfusion+injury+in+rats+via+modulation+of+mitophagy+and+mitochondrial+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Dengzhan Xixin injection derived from a traditional Chinese herb Erigeron breviscapusameliorates cerebral ischemia/reperfusion injury in rats via modulation of mitophagy and mitochondrial apoptosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 288, 114988(2022).</li>
<li>Liao, Y., Ni, X., Zhan, C., Cai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+research+progress+of+Dengzhanhua+preparation+in+prevention+and+treatment+of+ischemic+stroke+and+transient+ischemic+attack%5BTitle%5D)+AND+%22Guangdong+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Clinical research progress of Dengzhanhua preparation in prevention and treatment of ischemic stroke and transient ischemic attack.</a> Guangdong Medical Journal. 41 (9), 963-967 (2020).</li>
<li>Li, C., Li, J., Xu, G., Sun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+chronic+ethanol+consumption+on+apoptosis+and+autophagy+following+transient+focal+cerebral+ischemia+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of chronic ethanol consumption on apoptosis and autophagy following transient focal cerebral ischemia in male mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 6164(2020).</li>
<li>El Khashab, I. H., Abdelsalam, R. M., Elbrairy, A. I., Attia, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chrysin+attenuates+global+cerebral+ischemic+reperfusion+injury+via+suppression+of+oxidative+stress%2C+inflammation+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Chrysin attenuates global cerebral ischemic reperfusion injury via suppression of oxidative stress, inflammation and apoptosis.</a> Biomedicine Pharmacotherapy. 112, 108619(2019).</li>
<li>Su, X., He, S., Chen, Z., Xie, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+breviscapine+aglycone+on+PI+3+K%2FAkt+conduction+pathway+in+neonatal+rats+with+hypoxic-ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Armed+Police+Logistics+College+%28Medical+Edition%29%22%5BJournal%5D)">Effect of breviscapine aglycone on PI 3 K/Akt conduction pathway in neonatal rats with hypoxic-ischemic brain injury.</a> Journal of Armed Police Logistics College (Medical Edition). 27 (2), 93-96 (2018).</li>
<li>Wang, X., Shi, C., Pan, H., Meng, X., Ji, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-22+exerts+its+neuroprotective+and+angiogenic+functions+via+regulating+PI3K%2FAkt+signaling+pathway+in+cerebral+ischemia-reperfusion+rats%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Transmission%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-22 exerts its neuroprotective and angiogenic functions via regulating PI3K/Akt signaling pathway in cerebral ischemia-reperfusion rats).</a> Journal of Neural Transmission. 127 (1), 35-44 (2020).</li>
<li>Luca, M., Luca, A., Calandra, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+oxidative+damage+in+the+pathogenesis+and+progression+of+alzheimer%27s+disease+and+vascular+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The role of oxidative damage in the pathogenesis and progression of alzheimer's disease and vascular dementia.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2015, 504678(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lupeol+alleviates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+correlation+with+modulation+of+PI3K%2FAkt+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychiatric+Disease+and+Treatment%22%5BJournal%5D)">Lupeol alleviates cerebral ischemia-reperfusion injury in correlation with modulation of PI3K/Akt pathway.</a> Neuropsychiatric Disease and Treatment. 16 (8), 1381-1390 (2020).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+phosphocreatine+on+oxidative+stress+and+mitochondrial+dysfunction+induced+apoptosis+in+vitro+and+in+vivo%3A+Involvement+of+dual+PI3K%2FAkt+and+Nrf2%2FHO-1+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of phosphocreatine on oxidative stress and mitochondrial dysfunction induced apoptosis in vitro and in vivo: Involvement of dual PI3K/Akt and Nrf2/HO-1 pathways.</a> Free Radical Biology and Medicine. 120, 228-238 (2018).</li>
<li>Muñoz-Sánchez, J., Chánez-Cárdenas, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+cobalt+chloride+as+a+chemical+hypoxia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">The use of cobalt chloride as a chemical hypoxia model.</a> Journal of Applied Toxicology. 39 (4), 556-570 (2019).</li>
<li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside+attenuates+CoCl2-simulated+hypoxia+injury+in+PC12+cells+partly+by+mitochondrial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Salidroside attenuates CoCl2-simulated hypoxia injury in PC12 cells partly by mitochondrial protection.</a> European Journal of Pharmacology. 912 (10), 174617(2021).</li>
<li>Yin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+potency+of+Tofu+bio-processed+using+Actinomucor+elegans+against+hypoxic+injury+induced+by+cobalt+chloride+in+PC12+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective potency of Tofu bio-processed using Actinomucor elegans against hypoxic injury induced by cobalt chloride in PC12 cells.</a> Molecules. 26 (10), 2983(2021).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Modern klinik pratikte serebral iskemi tedavisi için hala ideal ilaç eksikliği vardır2. Qi'nin takviyesi ve kan dolaşımı yönteminin aktive edilmesi rehberliğinde, Ast, Eri ve diğer preparatlar TCM'nin klinik uygulamasında kombinasyon halinde kullanılmış ve iyi kapsamlı avantajlar elde etmişlerdir13,14,15. Çok sayıda çalışma, Ast'ın kan-beyin bariyerinin geçirgenliğini artırabileceğini, serebral kan akışın...

Serebral hipoperfüzyonun neden olduğu kronik serebral iskemi, orta yaşlı ve yaşlı insanlarda sık görülen bir hastalıktır1. Uzun süreli gizli iskemi hastalığı olarak ilerleyici veya kalıcı nörolojik disfonksiyona yol açabilir. Başlıca patolojik mekanizmalar arasında ilerleyici veya kalıcı nörolojik disfonksiyona yol açan hücre apoptozu ve oksidatif hasar; Alzheimer hastalığının, vasküler demansın ve diğer hastalıkların patolojik temelidir ve hastaların yaşam kalitesini ciddi şekilde etkiler. Bununla birlikte, modern tıpta kronik serebral iskemiyi tedavi etmek için hala ideal ilaçların eksikliği vardır2. Aynı zamanda, Astragalus mongholicus (Ast) ve Erigeron breviscapus (Eri) kombinasyonu, geleneksel Çin tıbbının (TCM) klinik uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır4. Kombinasyon stratejisi, tek bir ilaçtan daha iyi olan serebral iskemi sonrası sinir fonksiyonunun iyileşmesini teşvik etmede önemli ölçüde gelişmiştir; Bununla birlikte, iki ilacın kombinasyonundaki dozaj oranında büyük farklılıklar vardır4. Etkili bileşenler ve etki mekanizması iyi tanımlanmamıştır, bu da klinik uygulamasını kısıtlayan temel konudur.
Önceki çalışmalar, sıçanlarda serebral iskeminin tedavisinde Ast enjeksiyonu ve Eri enjeksiyonunun hazırlık kombinasyonunun sinerjik etkisini göstermiştir. P-Akt proteininin ekspresyonunu yukarı düzenleyebilir ve B-lenfoblastoma 2 (Bcl-2) ailesi proteinlerinden biri olan ve apoptozu teşvik etme etkisine sahip olan Bcl-2 ilişkili ölüm promotörü (BAD) proteini 5,6'nın ekspresyonunu aşağı regüle edebilir. Bununla birlikte, sinerjik etkisinin maddi temeli ve mekanizması açık değildir. Ayrıca, PC12 hücrelerinin yaralanma modeli CoCl2 kombine glukozsuz ortam ile oluşturulmuş ve Ast ve Eri'deki optimal bileşen kombinasyonu taranmış ve tanımlanmıştır7.
Bu çalışmada, Ast ve Eri'nin etkili dozları, yaralı PC12 hücre modeli kullanılarak taranmıştır. İki ilacın optimal kombinasyonu, homojen tasarım yöntemi ile birlikte bu model kullanılarak taranır. Hücre modeli, yaralı PC12 hücrelerinde preparat kombinasyonunun ve bileşen kombinasyonunun etkileri ve mekanizmalarındaki farkı daha fazla değerlendirmek için kullanılır. Bu strateji, en iyi kombinasyon modunu belirlemek için PI3K / Akt / Nrf2 sinyal yolu aracılığıyla yaralı PC12 hücreleri üzerindeki iki tip kombinasyonun koruyucu etkisini ve düzenleyici mekanizmasını araştırmayı amaçlamaktadır. Bu çalışma, TCM'nin en iyi uygulama modunu optimize etmek için bir referans sunmaktadır.

<table><tbody><tr><td>1300 serisi sınıf II biyogüvenlik kabini</td><td>Thermo Fisher Bilimsel Aletler Şirketi</td><td>1374</td><td></td></tr><tr><td>3- (4,5-Dimetiltiyazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolyum bromür</td><td>Guangzhou saiguo biyoteknoloji şirketi</td><td>1334GR001</td><td>MTT</td></tr><tr><td>ACEA NovoExpress ve nbsp; 1.4.0</td><td>ACEA Biosciences,</td> <td>Inc-Akt</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>10176-2-AP</td><td></td></tr><tr><td>Analitik akış sitometrisi</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>62-2-1810-1027-0</td><td></td></tr><tr><td>Annexin V-FITC apoptoz tespit kiti</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>C1062L</td><td></td></tr><tr><td>Astragalus enjeksiyonu</td><td>Heilongjiang Zhenbao Ada İlaç Şirketi</td><td>A03190612144</td><td>Ast enjeksiyonu</td></tr><tr><td>Astragaloside A</td><td>Chongqing Gao Ren Biyoteknoloji Şirketi</td><td>84687-43-4</td><td></td></tr><tr><td>Bax</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>60267-1-Ig</td><td></td></tr><tr><td>BCA protein miktar tayin kiti</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P0012</td><td></td></tr><tr><td>Bcl-2</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>26593-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Karbondioksit inkübatörleri</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>0816-2014</td><td></td></tr><tr><td>Kaspaz-3</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>19677-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Klorojenik asit</td><td>Chongqing Gao Ren Biyoteknoloji Şirketi</td><td>327-97-9</td><td></td></tr><tr><td>Kobalt klorür heksahidrat</td><td>Merck Biotechnology, Inc.</td><td>7791-13-1</td><td>CoCl2</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit</td><td>Guangzhou saiguo biyoteknoloji şirketi</td><td>2020112701</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Disodyum hidrojen fosfat dodekahidrat</td><td>Chengdu Kolon Kimya Şirketi</td><td>2020090101</td><td></td></tr><tr><td>DMEM yüksek şekerli orta</td><td>Termo bilimsel Hyclone</td><td>2110050</td><td></td></tr><tr><td>DMEM şekersiz ortam</td><td>Pekin Solarbio yaşam bilimleri şirketi</td><td></td><td></td>2029548</tr><tr><td>ECL ışıklı sıvı</td><td>Lianshuo Biyoloji Şirketi</td><td>WBKLS0500</td><td></td></tr><tr><td>Elektronik denge</td><td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Şangay, Çin</td><td>FA1204</td><td></td></tr><tr><td>Elektroforez cihazı</td><td>Bio-Rad Laboratuvarları (Şangay) Co., Ltd</td><td>1658026</td><td></td></tr><tr><td>Erigeron breviscapus kapsülü</td><td>Yunnan Biogu İlaç Şirketi</td><td>Z53021671</td><td>Eri kapsülü</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Dört Mevsim Biyoloji Mühendisliği Enstitüsü</td><td>20210402</td><td>FBS</td></tr><tr><td>Floresan mikroskobu</td><td>Olympms Şirketi</td><td>IX71-F32PH</td><td></td></tr><tr><td>Jel görüntüleyici</td><td>Bio-Rad Laboratuvarları (Şangay) Co., Ltd</td><td>1708265</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti-fare ikincil antikoru</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>SA00001-1</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan ikincil antikoru</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>SA00001- 2</td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS Statistics sürüm 26.0</td><td></td> <td>International Business Machines Corporation, USA-ImageJ</td><td></td></tr> <tr><td>1.8.0</td><td>National Institutes of Health, USA-görüntüleme</td><td></td> <td>yazılımı</td></tr><tr><td>Immunol&nbsp; floresan & nbsp; boyama kiti</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P0196</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Chengdu Kolon Kimya Şirketi</td><td>2021070901</td><td></td></tr><tr><td>Marker</td><td>Thermo Fisher Bilimsel Aletler Şirketi</td><td>26616</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka okuyucu</td><td>Perkin Elmer Kurumsal Yönetim (Şangay) Co.</td><td></td><td></td>HH35L2018296</tr><tr><td>Motic Ters mikroskop</td><td>Nanda Scientific Instruments Co.</td><td></td><td></td>AE2000LED</tr><tr><td>NaCl</td><td>Chengdu Kolon Kimya Şirketi</td><td>2014081301</td><td></td></tr><tr><td>Yağsız süt</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P0216</td><td></td></tr><tr><td>Nrf2</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>16396-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>P-Akt</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>66444-1-IG</td><td></td></tr><tr><td>PC12 hücreleri</td><td>Çin Bilimler Akademisi</td><td></td><td></td>CBP60430</tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin çözeltisi</td><td>Termo bilimsel Hyclone</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>Fosfataz proteaz inhibitörü karışımı</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P1045</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum dihidrojen fosfat</td><td>Chengdu Kolon Kimya Şirketi</td><td>2015082901</td><td></td></tr><tr><td>Reaktif oksijen türleri test kiti</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>S0033S</td><td></td></tr><tr><td>RI-PA lizis çözeltisi</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>Scutellarin</td><td>Chongqing Gao Ren Biyoteknoloji Şirketi</td><td>27740-01-8</td><td></td></tr><tr><td>SDS-PAGE numune yükleme tamponu, 5x</td><td>Beyotime Biyoteknoloji Şirketi</td><td>P0015L</td><td></td></tr><tr><td>Steril filtre uçları (0.22 ve mikro; m)</td> <td>Merck Biyoteknoloji A.Ş.</td><td></td><td></td>SLGP033RB</tr><tr><td>Tris-base</td><td>Guangzhou saiguo biyoteknoloji şirketi</td><td>1115GR500&nbsp;</td><td>Tbs</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Chengdu</td><td></td> J190013 Kolon Kimya Şirketi 2021051301 <td></td></tr><tr><td>Vorteks osilatörü</td><td>OHAUS International Co., Ltd., Şangay, Çin</td><td>VXMNAL</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-actin</td><td>Wuhan Üç Kartal Proteintech Grubu, Inc</td><td>66009-1-IG</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

yaralı pc12 hücrelerini tedavi etmek için İki bitki kombinasyonu stratejisini keşfetmek

Exploring the Two Herb Combination Strategy to Treat Injured PC12 Cells

Serebral iskemi tedavisinde geleneksel Çin tıbbı (TCM) kombinasyonunun avantajları göz önüne alındığında, yaralı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitki kombinasyonu stratejisini araştırmak için preparat kombinasyonu ve bileşen kombinasyonu arasındaki etkinlik ve mekanizmadaki farklılıkları inceledik. PC12 hücrelerinin oksidatif hasarını indüklemek için glikozsuz bir ortam ile kombine edilmiş kobalt klorür (CoCl 2) kullanılmıştır. Daha sonra, Astragalus mongholicus (Ast) ve Erigeron breviscapus (Eri ) enjeksiyonunun optimal kombinasyonu seçildi ve PC12 hücreleri üzerindeki güvenli ve etkili konsantrasyonları tarandıktan sonra tek tip tasarım yöntemlerini takiben birleştirildi. Ayrıca, taranan bileşen kombinasyonu iki bitkide 10 μM astragaloside A, 40 μM scutellarin ve 75 μM klorojenik asit içerir. Daha sonra, MTT, Annexin V-FITC / PI, immünofloresan ve Western blot analizi, preparat kombinasyonunun ve hasarlı PC12 hücreleri üzerindeki bileşen kombinasyonunun etkinliğini ve mekanizmasını değerlendirmek için kullanıldı. Sonuçlar, hücre pro-sağkalımı için en uygun preparat kombinasyonunun Ast enjeksiyonu ve 6: 1.8 (μM) konsantrasyonlu Eri kapsülü olduğunu göstermiştir. Bileşen kombinasyonu (10 μM astragaloside A, 40 μM scutellarin ve 75 μM klorojenik asit) preparat kombinasyonundan daha etkiliydi. Her iki kombinasyon da apoptotik hızı, kaspaz-3'ün floresan yoğunluğunu ve hücre içi reaktif oksijen türleri (ROS) seviyesini önemli ölçüde azalttı; Bu arada, p-Akt / Akt, Bcl-2 / Bax ve Nrf2'nin ifade seviyelerini yükselttiler. Bu etkiler bileşen kombinasyonunda daha belirgindi. Sonuç olarak, her iki kombinasyon da PC12 hücrelerinde glikozsuz bir ortam ile birlikte CoCl2 tarafından indüklenen yaralanmayı inhibe edebilir ve böylece hücre sağkalımını teşvik edebilir. Bununla birlikte, bileşen kombinasyonunun preparat kombinasyonu üzerindeki etkinliği, oksidatif stres ve apoptoz ile ilgili PI3K / Akt / Nrf2 sinyal yolunun daha güçlü düzenlenmesinden kaynaklanıyor olabilir.

Ast enjeksiyonu ve Eri kapsülünün optimal kombinasyonunun taranması Şekil 1'de gösterilmiştir. Ast enjeksiyonu ve Eri kapsülünün normal PC12 hücreleri üzerindeki hücre sağkalım hızı Şekil 1A'da gösterilmiştir. Hücre canlılığı, 12 μM'den (Şekil 1A) daha yüksek konsantrasyonlarda Ast enjeksiyonu ve 5 μM'den büyük konsantrasyonlarda Eri kapsülü ile% 95'ten düşüktü (Şekil 1A), maksimum toksik olmayan konsan...

Bu protokol, yaralı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitkinin bir kombinasyon stratejisini sağlar. Protokol, geleneksel Çin tıbbının (TCM) en iyi uygulama modunu optimize etmek için bir referans sağlar.

Yaralı PC12 Hücrelerini Tedavi Etmek için İki Bitki Kombinasyonu Stratejisini Keşfetmek

In view of the advantages of the combination of traditional Chinese medicine (TCM) in the treatment of cerebral ischemia, we studied the differences in ...

Bu çalışmadaki protokol, hipoksi hasarlı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitkinin bir kombinasyon stratejisini ve bitkilerin en iyi kombinasyon modunu optimize etmek için bir referans sunmaktadır. Bu teknik, hipoksiyal hücrelere karşı bitkilerden etkili bileşen kombinasyonunu taramak için basit, güvenilir ve verimli bir in vitro deneysel yöntem sağlayabilir. Bu strateji, bileşen kombinasyonlarını diğer bitki hazırlama kombinasyonlarından hipoksiyal hücrelere karşı taramak ve koruyucu mekanizmalarını göstermek için de uygulanabilir.Başlamak için, PC12 hücrelerini her iki ila üç günde bir 37 santigrat derecede bir inkübatörde, sonraki tüm deneyler için 4 ila 8'lik bir geçiş elde etmek için% 5 karbondioksit ile desteklenmiş bir inkübatörde alt kültüre alın. Bir mililitre% 0.25 tripsin ile% 70 ila% 80 akışkan PC12 hücrelerini tedavi edin ve hücreleri hücre ayrılması için mikroskop altında gözlemleyin. Ardından, tam ortamın üç mililitresini ekleyerek tripsin sindirimini durdurun.Aktarılan hücreleri 15 mililitrelik bir santrifüj tüpünde beş dakika boyunca 840 x g'de döndürün. Süpernatanı attıktan sonra, hücre peletini tam ortamla yeniden askıya alın ve hücre süspansiyonunu 1.5 mil

exploring-two-herb-combination-strategy-to-treat-injured-pc12

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Spinal kord travması sonucu beyin ile iletişimi bozar. Kayıp bağlantısı geri yüklemek için uzun mesafe büyümeyi teşvik etmek için inhibitör molekülleri kaldırmak için nörotrofik faktörler ve matris-modüle enzimler ile kombinasyon halinde rejenere lifler için altyapısını sağlamak üzere bir periferik sinir grefti kullanmaktadır.

Periferik Sinir Aşılama ve Matrix Modülasyon birleştiren Yaralı Rat Spinal Kord Onarım

Nöronal plastisite gastrointestinal (Gİ) sistem giderek tanınan, fakat yeterince anlaşılır bir özelliktir. Burada, insan pankreas bozuklukların örnekte, morfolojik ve fonksiyonel hem düzeyinde GI nöronal plastisite çalışma için, bir in vitro deneyi nöroplastisite mevcut.

Pankreas Nöroplastisite benzetme:<em&gt; In Vitro</em&gt; Dual-nöron Plastisitesi Deneyi

Omurilik yaralanması ciddi morbidite ve mortalitesi yüksek bir neden travmatik bir durumdur. Bu çalışmada detaylı olarak nöral kök hücrelerin bir nakli ardından farelerde omurilik yaralanması bir kontüzyon modelini tarif.

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Çok hücreli organizmalarda, salgılanan çözünür faktörler, parakrin sinyalizasyonunun bir sonucu olarak farklı hücre tiplerinden yanıtlar ortaya çıkarır. Insert ko-kültür sistemleri, hücre-hücre temasının yokluğunda salgılanan çözünür faktörlerin aracılık ettiği değişiklikleri değerlendirmek için basit bir yol sunar.

Hücre-Hücre İletişim Yokluğunda iki Hücresel Türleri Ekleme Co-kültür Sisteminin Geliştirilmesi

Mezenkimal kök hücre diş hamurundan izole ve prostat kanseri hücre etkileşimi doğrudan ve dolaylı ortak kültür yöntemleri üzerinde temel değerlendirilmesi için iletişim kuralları sağlar. Koşul orta ve trans-şey membranlar dolaylı parakrin etkinliğini çözümlemeye uygundur. Differentially Tohum hücreleri birlikte lekeli doğrudan hücre-hücre etkileşim için uygun bir model olduğunu.

Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Bu protokolde, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerinin kardiyomiyosit farklılaşma ve arıtma için nasıl kullanılacağı ve daha fazla, Rho ile ilişkili protein kinaz inhibitörü ile transplantasyon verimliliğini nasıl iyileştirebileceğini gösteriyoruz. bir fare miyokard infarktüsü modelinde ön tedavi.

Rho kinase aktivitesinin geçici Inhibisyonu ile ınsan kaynaklı pluripotent kök hücreli türev Kardiyomiyositlerin engraftment artırılması

Bu protokol, Açık kafatası travmatik beyin hasarı ve kültür insan kaynaklı pluripotent kök hücre türeyen hücrelerin transplantasyonu için bir fare modeli için metodolojileri yaralanma sitesine gösterir. Bu prosedürlerden gelen sonuçların davranışsal ve histolojik testleri de kısaca açıklanmıştır.

Insan kaynaklı pluripotent kök hücre türetilen nöral hücrelerin terapötik transplantasyonu ile fare beyin yaralanması kontrollü Kortiik darbe modeli

Burada, Schwann hücrelerini in vitro olarak uyarmak için nanosaniye darbeli elektrik alanı (nsPEF) uygulamak için bir protokol sunuyoruz. İlgili faktörlerin ve hücre davranışı değişikliklerinin sentezi ve salgılanma yeteneği, nsPOF kullanılarak başarılı stimülasyonu doğruladı. Çalışma, periferik sinir rejenerasyon yönteminin olumlu bir görünümünü vermektedir.

İn Vitro Periferik Sinir Rejenerasyonu için Nanosaniye Darbeli Elektrik Alanı ile Schwann Hücre Büyümesinin Düzenlenmesi

Bu çalışmada, omurilik yaralanması onarımı için adipoz kaynaklı kök hücrelerin pro-rejeneratif davranışını araştırmak ve bunlardan yararlanmak için kullanılabilecek sinir-mimetik kompozit hidrojeller geliştirilmiş ve karakterize edilmiştir.

Kök Hücre Dağıtımı Kullanılarak Omurilik Yaralanması için Kombinatoryal Terapötiklerin Geliştirilmesi

Otizm ve şizofreni gibi ortak bir bozukluğa yol novo mutasyonlar bulmak için moleküler genetik strateji.

Ortak Bozuklukları de Novo Mutasyonlar, otizm ve şizofreni gibi tanımlayın Bir Strateji

Keşfedin, hipoksi hasarlı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitki kombinasyonu stratejisini. Bu yöntem, geleneksel Çin tıbbı uygulamalarını optimize etmek için güvenilir bir in vitro tarama protokolü sunar.

Yaralı PC12 Hücrelerini Tedavi Etmek için İki Bitki Kombinasyonu Stratejisini Keşfetmek

Daha fazla video keşfet