Kırmızı Kan Hücresi Proteinlerinde Dinamik Değişikliklerin İmmün Boyama Tabanlı Tespiti

Yöntemimiz, geçici protein modifikasyonlarını yerinde sabitleyerek ve daha sonra bunları spesifik antikorlarla tespit ederek hızlı hareket eden mekanobiyoloji alanında mekanik hücre altı araştırmaları mümkün kılar. Bu yöntemin uygulanması teknik olarak kolaydır. Sonuçlar son derece geçerli ve tekrarlanabilir.

Ayrıca, diğer tekniklerle karşılaştırıldığında, yöntemimiz, geçici protein modifikasyonlarına, özellikle de kırmızı hücre mekanosinyalizasyonuna bağlı olan, gelişmekte olan translasyon sonrası kırmızı kan hücresi sinyalizasyonu alanında gerçekten etkili bir şekilde kullanılabilir. RBC protein fiksasyonunu gerçekleştirmek için, tam kanı oda sıcaklığında 20 dakika boyunca% 4 paraformaldehit çözeltisinde bir ila iki oranında seyreltin. Kan çözeltisini oda sıcaklığında üç dakika boyunca 132 g'da santrifüjleyin ve süpernatanı dikkatlice çıkarın.