Name: Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-15T14:55:00.000+00:00
Duration: 6 min 37 s
Description: Öğrenin, sitokin salınım testlerinde referans reaktifler kullanarak terapötik monoklonal antikorların güvenlik profillerini nasıl değerlendirebilirsiniz. Bu yöntem, farklı laboratuvarlarda tekrarlanabilirliği ve standardizasyonu artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Suntharalingam, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+storm+in+a+phase+1+trial+of+the+anti-CD28+monoclonal+antibody+TGN1412%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cytokine storm in a phase 1 trial of the anti-CD28 monoclonal antibody TGN1412.</a> The New England Journal of Medicine. 355 (10), 1018-1028 (2006).</li>
<li>Hünig, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+storm+has+cleared%3A+lessons+from+the+CD28+superagonist+TGN1412+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Immunology%22%5BJournal%5D)">The storm has cleared: lessons from the CD28 superagonist TGN1412 trial.</a> Nature Reviews Immunology. 12 (5), 317-318 (2012).</li>
<li>Wing, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+first-dose+cytokine-release+syndrome+by+CAMPATH+1-H%3A+involvement+of+CD16+%28FcgammaRIII%29+and+CD11a%2FCD18+%28LFA-1%29+on+NK+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Mechanism of first-dose cytokine-release syndrome by CAMPATH 1-H: involvement of CD16 (FcgammaRIII) and CD11a/CD18 (LFA-1) on NK cells.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (12), 2819-2826 (1996).</li>
<li>Gaston, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OKT3+first-dose+reaction%3A+Association+with+T+cell+subsets+and+cytokine+release%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">OKT3 first-dose reaction: Association with T cell subsets and cytokine release.</a> Kidney International. 39 (1), 141-148 (1991).</li>
<li>Riechmann, L., Clark, M., Waldmann, H., Winter, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reshaping+human+antibodies+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Reshaping human antibodies for therapy.</a> Nature. 332 (6162), 323-327 (1988).</li>
<li>Kung, P., Goldstein, G., Reinherz, E. L., Schlossman, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibodies+defining+distinctive+human+T+cell+surface+antigens%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibodies defining distinctive human T cell surface antigens.</a> Science. 206 (4416), 347-349 (1979).</li>
<li>Ball, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+C+region+influences+TGN1412-like+functional+activity+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Antibody C region influences TGN1412-like functional activity in vitro.</a> Journal of Immunology. 189 (12), 5831-5840 (2012).</li>
<li>Vessillier, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+first+reference+antibody+panel+for+qualification+and+validation+of+cytokine+release+assay+platforms+-+Report+of+an+international+collaborative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%3A+X%22%5BJournal%5D)">Development of the first reference antibody panel for qualification and validation of cytokine release assay platforms - Report of an international collaborative study.</a> Cytokine: X. 2 (4), 100042(2020).</li>
<li>Findlay, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+in+vitro+methods+to+predict+the+in+vivo+toxicity+in+man+of+therapeutic+monoclonal+antibodies+including+TGN1412%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Improved in vitro methods to predict the in vivo toxicity in man of therapeutic monoclonal antibodies including TGN1412.</a> Journal of Immunological Methods. 352 (1-2), 1-12 (2010).</li>
<li>oVE Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Science+Education+Database.+Basic+Methods+in+Cellular+and+Molecular+Biology.+Using+a+Hemacytometer+to+Count+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Science Education Database. Basic Methods in Cellular and Molecular Biology. Using a Hemacytometer to Count Cells.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2023).</li>
<li>Lehmann, J. S., Zhao, A., Sun, B., Jiang, W., Ji, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplex+Cytokine+Profiling+of+Stimulated+Mouse+Splenocytes+Using+a+Cytometric+Bead-based+Immunoassay+Platform%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Multiplex Cytokine Profiling of Stimulated Mouse Splenocytes Using a Cytometric Bead-based Immunoassay Platform.</a> Journal of Visualized Experiments. (129), e56440(2017).</li>
<li>Murthy, H., Iqbal, M., Chavez, J. C., Kharfan-Dabaja, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+Release+Syndrome%3A+Current+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Immunotargets+Therapy%22%5BJournal%5D)">Cytokine Release Syndrome: Current Perspectives.</a> Immunotargets Therapy. 8, 43-52 (2019).</li>
<li>Vidal, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+cytokine+release+assays+for+predicting+cytokine+release+syndrome%3A+the+current+state-of-the-science.+Report+of+a+European+Medicines+Agency+Workshop%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">In vitro cytokine release assays for predicting cytokine release syndrome: the current state-of-the-science. Report of a European Medicines Agency Workshop.</a> Cytokine. 51 (2), 213-215 (2010).</li>
<li>Grimaldi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+release%3A+A+workshop+proceedings+on+the+state-of-the-science%2C+current+challenges+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Cytokine release: A workshop proceedings on the state-of-the-science, current challenges and future directions.</a> Cytokine. 85, 101-108 (2016).</li>
<li>Vessillier, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+release+assays+for+the+prediction+of+therapeutic+mAb+safety+in+first-in+man+trials+-+Whole+blood+cytokine+release+assays+are+poorly+predictive+for+TGN1412+cytokine+storm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Cytokine release assays for the prediction of therapeutic mAb safety in first-in man trials - Whole blood cytokine release assays are poorly predictive for TGN1412 cytokine storm.</a> Journal of Immunological Methods. 424, 43-52 (2015).</li>
<li>Chu, J. W. K., Sharom, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycophorin+A+interacts+with+interleukin-2+and+inhibits+interleukin-2-dependent+T-lymphocyte+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Immunology%22%5BJournal%5D)">Glycophorin A interacts with interleukin-2 and inhibits interleukin-2-dependent T-lymphocyte proliferation.</a> Cellular Immunology. 145 (2), 223-239 (1992).</li>
<li>Stebbings, R., Eastwood, D., Poole, S., Thorpe, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((After+TGN1412%3A+recent+developments+in+cytokine+release+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunotoxicology%22%5BJournal%5D)">After TGN1412: recent developments in cytokine release assays.</a> Journal of Immunotoxicology. 10 (1), 75-82 (2013).</li>
<li>Hanke, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+TGN1412%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Lessons from TGN1412.</a> Lancet. 368 (9547), author reply 1570 1569-1570 (2006).</li>
<li>Stebbings, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%2334%3BCytokine+storm%26%2334%3B+in+the+phase+I+trial+of+monoclonal+antibody+TGN1412%3A+better+understanding+the+causes+to+improve+preclinical+testing+of+immunotherapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">#34;Cytokine storm&#34; in the phase I trial of monoclonal antibody TGN1412: better understanding the causes to improve preclinical testing of immunotherapeutics.</a> Journal of Immunology. 179 (5), 3325-3331 (2007).</li>
<li>Bartholomaeus, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+contact-dependent+priming+and+Fc+interaction+with+CD32%2B+immune+cells+contribute+to+the+TGN1412-triggered+cytokine+response%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Cell contact-dependent priming and Fc interaction with CD32+ immune cells contribute to the TGN1412-triggered cytokine response.</a> Journal of Immunology. 192 (5), 2091-2098 (2014).</li>
<li>Hussain, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upregulation+of+Fc%CE%B3RIIb+on+monocytes+is+necessary+to+promote+the+superagonist+activity+of+TGN1412%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Upregulation of FcγRIIb on monocytes is necessary to promote the superagonist activity of TGN1412.</a> Blood. 125 (1), 102-110 (2015).</li>
<li>Reed, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+autologous+endothelial+cell%3Aperipheral+blood+mononuclear+cell+assay+that+detects+cytokine+storm+responses+to+biologics%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">An autologous endothelial cell:peripheral blood mononuclear cell assay that detects cytokine storm responses to biologics.</a> The FASEB Journal. 29 (6), 2595-2602 (2015).</li>
<li>Eastwood, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+of+the+TGN1412+trial+disaster+cytokine+storm+correlated+with+IL-2+release%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Clinical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Severity of the TGN1412 trial disaster cytokine storm correlated with IL-2 release.</a> British Journal of Clinical Pharmacology. 76 (2), 299-315 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 ml&nbk; Mikrosantrifüj Tüpleri, Doğal (Steril)</td> <td>Starlab</td><td>S1615-5510</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu, nitelikli, ısıyla inaktive</td> edilmiş <td>ThermoFisher</td><td>10500064</td><td></td></tr><tr><td>Heparinize tüpler</td><td>ThermoFisher</td><td>12967676</td><td></td></tr><tr><td>Heracell 150i CO2 İnkübatörü</td><td>ThermoFisher</td><td>16406639</td><td></td></tr><tr><td>MESO QuickPlex SQ 120 İnsan Proinflamatuar Paneli 1 V-PLEX kiti&nbsp;</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15049</td><td></td></tr><tr><td>MESO QuickPlex SQ 120MM</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>AI1AA-0</td><td></td></tr><tr><td>Neubauer Geliştirilmiş Hemositometre Sayma Odası</td><td>Hawksley</td><td>AS1000</td><td></td></tr><tr><td>Sitokin Salınım Testleri için liyofilize rekombinant antikor kontrolleri paneli</td><td>NISBC</td><td>19/156</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>ThermoFisher</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Polipropilen 96 oyuklu mikrotitre plakası&nbsp;</td><td>Corning</td><td>3879</td><td></td></tr><tr><td>Polistiren 96 oyuklu mikrotitre plakası</td><td>Corning</td><td>3799</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Sorvall ST 40 Steril</td> su <td>75004525</td><td></td><td>ThermoFisher</td></tr><tr><td></td><td>Santrifüj ThermoFisher</td><td>15230162</td><td></td></tr></tbody></table>

monoklonal antikor güvenliğinin tahmini için sitokin salınım testlerinin sağlamlığını doğrulamak için referans reaktiflerin kullanılması

Using Reference Reagents to Confirm Robustness of Cytokine Release Assays for the Prediction of Monoclonal Antibody Safety

SP testinin sonuçları, 48 saatte tüm pozitif kontrol antikorlarından pg / mL aralığında IL-2, IFN-γ, IL-6 ve TNF-α12'nin salındığını göstermeli ve eşleşen izotip kontrollerinden istatistiksel olarak anlamlı derecede büyük olmalıdır. Temsili sonuçlarımız, pozitif kontrol antikorlarının, αCD28, αCD3 ve αCD28SA'nın, PBMC SP testinde çalıştırıldığında, eşleşen izotip kontrollerine kıyasla önemli ölçüde yüksek seviyelerde IFN-γ, IL-6 ve TNF-α indüklediğini göstermektedir (Şekil 1). Bu test aynı zamanda, eşleşen izotipine (859.0) kıyasla αCD28SA ile stimülasyondan IL-2 salınımının yüksek kat değişimi ile karakterize edilir. αCD3 ve αCD52, hala IL-2 ekspresyonunu indüklerken, αCD28SA'dan daha düşük kat değişikliklerine neden olur (sırasıyla αCD3 ve αCD52 için 6.2 ve 3.3, Şekil 2).
WB AQ testinde (Şekil 3), saptanabilir sitokinlerin seviyesi PBMC SP testinden belirgin şekilde daha düşüktür, ancak αCD52 antikoru tarafından stimülasyona karşı daha büyük bir duyarlılık ile karakterize edilir (Şekil 2 ve Şekil 3) IL-2, IFN-γ ve IL-6'nın 100'ün üzerinde ortalama kat değişiklikleri.
Gelecekteki ilk insan dozunun, ilgili izotip kontrollerine kıyasla sitokin salınımında beklenmedik önemli artışlara neden olmaması beklenebilecek bir test antikoru. Bununla birlikte, yeni bir terapötik mAb'nin gelişimini durdurmak yerine, bir CRA'da olumlu bir sonuç, risk / fayda yönetiminin bir parçası olarak düşünülmelidir13. Yeni bir CRA platformu geliştirirken, platformun tekrarlanabilirliğini sağlamak için tahlil farklı bir donör seti kullanılarak tekrarlanmalıdır. Bağışçılar14 arasındaki yanıtın değişkenliğini hesaba katmak için de önem verilmelidir ve bu nedenle iyi güçlü bir deney önerilir15. Yanıtların genişliğini anlamak ve donör yanıtlarında gözlemlenebilecek değişkenliğin tam bir temsilini elde etmek için, tahlil ideal olarak tekrarlanan deneylerde terapötik tahlillere ek olarak birden fazla bireysel donör ile yapılmalıdır.
<img alt="PBMC-SP sitokin sekresyon grafiği; günlük ölçeği; IFN-γ, IL varyantları; CD işaretleyicileri; İmmünoloji çalışması." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65087/65087fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> 
Şekil 1: PBMC-SP deneyinden sitokin salınımı. PBMC-SP sitokin salınım testlerinden elde edilen IFN-γ, IL-2, IL-6 ve TNF-α salınımının temsili sonuçları (her biri deney başına 5-8 donör içeren 3 bağımsız deney; n = 8, n = 10, n = 5 [yukarıdan aşağıya]) referans reaktif antikorları kullanılırken 48 saat sonra. Kısaltmalar: PBMC = periferik kan mononükleer hücreleri; SP = katı faz; IFN-γ = interferon-gama; IL-2 = interlökin 2; IL-6 = interlökin 6; TNF-α = tümör nekroz faktörü alfa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65087/65087fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Çubuk grafik; sitokin seviyeleri (IFN-γ, IL-2, IL-6, TNF-α); PBMC-SP, DÜNYA BANKASI-AQ; antikor analizi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65087/65087fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> 
Şekil 2: PBMC-SP ve WB-AQ deneylerinden sitokin kıvrım değişimi artışı. 48 saat sonra PBMC-SP ve WB-AQ sitokin salınım testlerinden elde edilen, CRS ile indüklenen antikor referans reaktiflerinin IFN-γ, IL-2, IL-6 ve TNF-α salınımının, eşleşen izotip kontrollerine göre kat değişimi. Kısaltmalar: PBMC = periferik kan mononükleer hücreleri; SP = katı faz; WB = tam kan; AQ = sulu (faz); IFN-γ = interferon-gama; IL-2 = interlökin 2; IL-6 = interlökin 6; TNF-α = tümör nekroz faktörü alfa; CRS = sitokin salınım sendromu. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65087/65087fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Sitokin yanıt tablosu, WB-AQ deneyleri, αCD28 ve Ig belirteçleri, sitokin düzeyleri analizi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65087/65087fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> 
Şekil 3: WB-AQ deneyinden sitokin salınımı. WB-AQ sitokin salım testlerinden elde edilen IFN-γ, IL-2, IL-6 ve TNF-α salınımının temsili sonuçları (her biri deney başına 5-8 donör içeren 3 bağımsız deney; n = 8, n = 10, n = 5 [yukarıdan aşağıya]) referans reaktif antikorları kullanılırken 48 saat sonra. Kısaltmalar: WB = tam kan; AQ = sulu (faz); IFN-γ = interferon-gama; IL-2 = interlökin 2; IL-6 = interlökin 6; TNF-α = tümör nekroz faktörü alfa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65087/65087fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması

New immunostimulatory antibody drugs designed to either directly stimulate specific immune cells or indirectly enhance the immune response by blocking or ...

using-reference-reagents-to-confirm-robustness-cytokine-release

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu yazıda, insan periferik kan mononükleer hücrelerinde alloantigen özel anerji ikna etmek için basit bir teknik anlatılmaktadır. Tekniği olmayan alloreactive donör hücreleri oluşturmak için klinik olarak uygulanabilir. İnfüzyon bu hücrelerin bağışıklık sulandırıldıktan geliştirmek ve allojeneik hematopoietik kök hücre transplantasyonu sonrası toksisite azaltabilir.

Co-uyarıcı Sinyal Abluka Alloantigen Uyarım İnsan periferik kan mononükleer hücreleri içinde Alloantigen özel anerji indüksiyonu

Bu video, bir numunedeki birden fazla sitokin hedefini ölçmek için multipleks boncuk tabanlı bir immünolojik testi gösterir. Numunede bulunan sitokinleri bağlamak için sitokin spesifik antikorlara konjuge edilmiş farklı mikrokürelerin bir karışımı kullanılır. Streptavidin etiketli raportörler, biyotinile edilmiş tespit antikorları kullanılarak bağlı sitokinler üzerinde immobilize edilir. Akış sitometrisi, mikrokürelerin benzersiz boyutlarına ve iç floresan yoğunluklarına dayalı olarak bağlı...

Çoklu Sitokin Hedeflerini Ölçmek için Multipleks Boncuk Bazlı İmmünoassay

Biz HIV-spesifik CD4 T hücreleri tarafından sitokin salgılanmasının düzenlenmesinde immünregulatuar yolların rolünü araştırmak için bir in vitro testi geliştirdi.

Vitro Testi HIV-spesifik CD4 T hücre efektör işlevi üzerinde immünoregülatör yolları etkisini değerlendirmek için

Bir protokol WEHI 164 hücrelerle nötralizasyon mekanizmasını kullanarak bir anti-TNFα mAb göreli anti-apoptotik aktivitesinin belirlenmesi için burada sunulan. Bu iletişim kuralı ile aynı biyolojik işlevi farklı molekül nötralizasyon gücünü karşılaştırmak için yararlıdır.

Göreceli güç, bir Anti-TNF Monoklonal antikor (mAb) Neutralizing In Vitro Bioanalytical yöntemini kullanarak TNF tarafından belirlenmesi

Bu protokol, rituksimab iki önemli fonksiyonel özellikleri in vitro karşılaştırmasını tarif: hedef bağlanma ve tamamlayıcıya bağlı sitotoksisite (CDC) indüksiyonu. yöntem, referans rituksimab ve rituksimab biyobenzerin arasında bir yan-yana karşılaştırma için kullanılmıştır. Bu tahliller, biyobenzer geliştirme sırasında veya üretimlerinde bir kalite kontrol olarak kullanılabilir.

Terapötik Antikorlar Arasındaki Hedef Bağlanma ve CDC İndüksiyonunu Karşılaştırmak İçin İn Vitro Yöntemler: Biyoeşdeğerlik Analizindeki Uygulamalar

Sitokinler çeşitli oküler hastalıklar eğitim yardımcı olur gözyaşı film analizi. Boncuk dayalı multiplex deneyleri basit ve hassas ve küçük hacimli örneklerde birden çok hedef test etkinleştirin. Burada biz bir protokolü kullanarak bir profil oluşturma gözyaşı film sitokin için tarif boncuk dayalı multiplex tahlil.

Boncuk Multiplex tahlil için gözyaşı sitokin profilleri analizi dayalı

Bu iletişim kuralı birden fazla sitokin hedeflerin aynı anda doku kültürü supernatants multiplex boncuk tabanlı immunoassay platform ve bir Akış Sitometresi kullanarak uyarılmış fare splenocytes toplanan miktar açıklar.

Multiplex sitokin Immunoassay sitometrik boncuk tabanlı platformu kullanarak uyarılmış fare Splenocytes profil oluşturma

Burada nötralize antikorlar veya enzim replasman terapiler beyin omurilik sıvısı (BOS) veya insan serumu gibi insan bir matris hücresel alımını müdahale diğer faktörler tespit etmek için bir hücre tabanlı akış sitometresi Yöntem mevcut.

Enzim replasman terapileri ile hücre tabanlı tahlil hücresel alımını nötralize antikorların tespiti

Protokol, bireysel insan periferik kan mononükleer hücrelerinin sitokin sekresyon dinamiklerini kantitatif olarak ölçmek için gelişmiş bir mikroakışkan platformu tanımlar. Platform, örnek olarak lipopolisakkarit ile uyarılan her bir hücre için paralel olarak üç adede kadar sitokini (IL-6, TNFa ve IL-1β) ölçer.

Bireysel Çok Fonksiyonlu Hücrelerin Eşzamanlı ve Ardışık Sitokin Sekresyonunu Çözmek için Mikroakışkan Yaklaşım 

Tam kan bazlı immünolojik testler, tanı ve araştırma amaçları için antijene özgü bağışıklığı analiz etmek için kolay ve kaynak açısından verimli bir araç sağlar. Bu makale, pediatrik hastalar ve küçük hayvanlar için düşük hacimli bir versiyon da dahil olmak üzere, mantar ve viral patojenlere karşı konak bağışıklığının kapsamlı analizi için ikili ko-stimülasyonlu optimize edilmiş bir tam kan bazlı protokol sağlar.

Fungal ve Viral Patojenlere Karşı Konak Bağışıklığının Antijene Özgü Analizi için İkili Ko-stimülasyonlu Tam Kan Testi

Öğrenin, sitokin salınım testlerinde referans reaktifler kullanarak terapötik monoklonal antikorların güvenlik profillerini nasıl değerlendirebilirsiniz. Bu yöntem, farklı laboratuvarlarda tekrarlanabilirliği ve standardizasyonu artırır.

Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması (Video) | JoVE Journal

Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması

Daha fazla video keşfet