Name: Üretra darlığı indüksiyonunu takiben sıçan modelinde bukkal mukoza greft üretroplastisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-04-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 9 s
Description: Öğrenin üretra darlığı indüksiyonunu ve bukkal mukoza greft üretroplastisini Wistar sıçanlarında uygulamayı. Bu yöntem yenilikçi tedavilerin moleküler mekanizmalarını çalışmak için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte Radyoloji bölümü başkanı João Leitão ve Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte Radyoloji bölümü teknisyeni Catia Fernandes'e üretrogramların gerçekleştirilmesindeki işbirlikleri için teşekkür ederiz.

Tüm hayvan prosedürleri 2010/63/EU Direktifine göre gerçekleştirilmiştir. Prosedürler, Portekiz hayvan koruma yetkili makamı DGAV tarafından lisanslanan kurumsal Hayvan Refahı Kurumu tarafından onaylanmıştır (lisans numarası 0421/000/000/2021). Bu çalışma için 12-14 haftalık erkek Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) sıçanları (400-500 g) kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bkz.
1. Çözeltilerin hazırlanması
<ol><li>Anestezik çözüm<ol><li>3 mL'lik bir şırıngayı 2.3 mL medetomidin (1 mg/mL; 0.715 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>3 mL'lik bir şırıngayı 1.55 mL fentanil (0.05 mg/mL; 0.02 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve aynı 15 mL'lik santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>10 mL'lik bir şırıngayı 6.15 mL midazolam (5 mg/mL; 9.5 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve aynı 15 mL'lik santrifüj tüpüne aktarın, böylece 10 mL'lik bir anestezik solüsyon elde edin.</li>
		<li>Tüpü etiketleyin ve karanlıkta 4 °C'de saklayın. NOT: Bu anestezik kombinasyon (medetomidin, fentanil ve midazolam) 3 saate kadar anestezik cerrahi pencere sağlar. Atipamezol ve flumazenil uygulaması etkiyi tersine çevirebilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Anti-yatıştırıcı çözüm<ol><li>1 mL'lik bir şırıngayı 0.7 mL atipamezol (5 mg / mL; 3.72 mg / kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>10 mL'lik bir şırıngayı 9.3 mL flumazenil (0.1 mg/mL; 1.56 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve aynı 15 mL'lik santrifüj tüpüne aktarın, böylece 10 mL'lik bir anti-yatıştırıcı çözelti yapın.</li>
		<li>Tüpü etiketleyin ve karanlıkta 4 °C'de saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Ameliyat sonrası analjezi çözümleri<ol><li>1 mL'lik bir şırıngayı 0.5 mL carprofen (50 mg/mL; 5 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>9.5 mL NaCl çözeltisi (% 0.9) ekleyerek 10 mL'lik bir karprofen çözeltisi elde edin.</li>
		<li>1 mL'lik bir şırıngayı 1 mL buprenorfin (0.3 mg/mL; 0.01-0.05 mg/kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>9 mL NaCl çözeltisi (% 0.9) ekleyerek 10 mL buprenorfin çözeltisi elde edin.</li>
		<li>Tüpleri etiketleyin ve karanlıkta 4 °C'de saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Perioperatif antibiyotik<ol><li>2.5 mL'lik bir şırıngayı 2.5 mL enrofloksasin (25 mg / mL; 10 mg / kg vücut ağırlığı) ile doldurun ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın.</li>
		<li>7.5 mL NaCl çözeltisi (% 0.9) ekleyerek 10 mL enrofloksasin çözeltisi elde edin.</li>
		<li>Tüpü etiketleyin ve karanlıkta 4 °C'de saklayın. NOT: Yukarıdaki çözeltileri hazırlamak için tüm reaktiflerin ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Üretra darlığının cerrahi indüksiyonu
NOT: Cerrahi prosedürler stereo mikroskop (10x) kullanılarak gerçekleştirilmiştir (bkz.
<ol><li>Kullanmadan önce tüm cerrahi aletleri sterilize edin: neşter bıçağı (11 numara), sivri forseps, yaylı makas, cerrahi forseps, oftalmik iğne tutucu, cerrahi makas ve iğne tutucu. Ameliyat alanını temizlemek için steril pamuk topları kullanın.</li>
	<li>Fareyi tutmadan önce şırıngayı anestezik solüsyonla doldurun.</li>
	<li>Hayvanı bir tüp veya havlu kullanarak kısıtlayın ve karnı ortaya çıkarmak için kuyruğu kaldırın.</li>
	<li>Hayvanı zapt edin ve anestezik solüsyonun intraperitoneal enjeksiyonunu yapın (adım 1.1'de hazırlanır).</li>
	<li>Anesteziyi değerlendirmek için sıçanın pedal çekme reflekslerini test edin.</li>
	<li>Hayvanın her iki gözüne de koruyucu göz jeli uygulayın. Antibiyotik çözeltisinin (adım 1.1'de hazırlanan) 10 mg / kg vücut ağırlığında deri altı enjeksiyonunu gerçekleştirin.</li>
	<li>Sıçanı ısıtılmış bir ped üzerinde dorsal dekübit pozisyonuna yerleştirin ve cerrahi prosedürü gerçekleştirmek için 10x veya 20x büyütmede bir diseksiyon mikroskobu kullanın.</li>
	<li>Penisi ve çevresindeki karın derisini povidon-iyot (100 mg / mL) ile temizleyin.</li>
	<li>Sünnet derisini manuel olarak geri çekin ve penise traksiyon uygulamak için penis başının dorsal yönüne yüzeysel bir destek sütürü (7.0 sütür; Malzeme Tablosuna bakınız) yerleştirin ve penisi geri çekilmeli tutmak için iğne tutucuyu yerinde bırakın.</li>
	<li>Kayganlaştırıcı bir jel kullanarak kateterizasyon için üretraya 22 G'lik bir venöz kateter yerleştirin.</li>
	<li>Cerrahi bir neşter bıçağı (11 numara) kullanarak, penis derisinde 1 cm uzunlamasına ventral kesi yapın.</li>
	<li>Sivri forseps ve yaylı makası kullanarak, üretrayı orta şaft seviyesinde açığa çıkarana kadar penis dokusu katmanlarını inceleyin.</li>
	<li>Bir elektrokoter cihazı ile (Malzeme Tablosuna bakınız), üretranın lateral yönlerine (her iki tarafta bir yerde), ventral olarak penisin orta şaftı seviyesinde 1 s boyunca 10 W'lık bir akım uygulayın.</li>
	<li>İnsizyonu 6.0 emilebilir bir koşu sütürü ile kapatın (bkz.</li>
	<li>Üretral kateteri çıkarın. Penil traksiyon sütürünü çıkarın.</li>
	<li>Deri altı analjezi enjeksiyonunu gerçekleştirin: 5 mg / kg vücut ağırlığında Carprofen ve 0.03 mg / kg vücut ağırlığında buprenorfin.</li>
	<li>Şırıngayı anti-yatıştırıcı solüsyonla (adım 1.2'de hazırlanan) yükleyin ve hayvan ventral dekübitteyken, anti-yatıştırıcı solüsyonun deri altı enjeksiyonunu uygulamak için gevşek cildi örtün.</li>
</ol>3. Bukkal mukoza grefti ile üretroplastinin cerrahi prosedürü
NOT: Cerrahi prosedürler stereo mikroskop (10x) kullanılarak gerçekleştirilmiştir (bkz.
<ol><li>Bu müdahale için gerekli tüm cerrahi aletleri sterilize edin: sivri forseps, yaylı makas, oftalmik iğne tutucu, cerrahi makas, iğne tutucu, üç sivrisinek forseps ve bir neşter bıçağı (11 numara). Ameliyat alanını temizlemek için küçük süngerler kullanın.</li>
	<li>Anesteziyi, antibiyotiği, dizginlemeyi uygulayın ve hayvanı daha önce tarif edildiği gibi yerleştirin (adım 2.2-2.8).</li>
	<li>Alt dudağın bukkal mukozasını, penisi ve çevresindeki karın derisini povidon-iyot (100 mg / mL) ile temizleyin.</li>
	<li>Alt dudağa, her iki yana ve ortaya üç adet dikiş (7.0 dikiş) yerleştirin ve alt dudağı geri çekmek ve iç mukozayı ortaya çıkarmak için her birine bir sivrisinek bırakın.</li>
	<li>Yaylı makas ve sivri uçlu forseps kullanarak, alt dudak iç bukkal mukozasından 4 mm çapında bir greft alın ve steril salin (%0.9 NaCl) içeren küçük bir alıcıya yerleştirin.</li>
	<li>Hemostaz için donör bölgeye bir süngerle kompresyon uygulayın.</li>
	<li>Alt dudağın önceden yerleştirilmiş askı dikişlerini çıkarın.</li>
	<li>Penisi daha önce tarif edildiği gibi ortaya çıkarın (adım 2.9).</li>
	<li>Kayganlaştırıcı bir jel kullanarak kateterizasyon için üretraya 22 G'lik bir venöz kateter yerleştirin.</li>
	<li>Yaylı makas kullanarak çevresel, subkoronal bir kesi yapın ve penisi tabana doğru deglove edin.</li>
	<li>Sivri forseps ve yaylı makası kullanarak, kalan katmanları inceleyin ve üretrayı ortaya çıkarın.</li>
	<li>Cerrahi bir neşter bıçağı (11 numara) ve yaylı makas kullanarak, 4 mm'lik bir uzantıda koronal sulkusun 3 mm distalinden başlayarak uzunlamasına bir ventral insizyon gerçekleştirin ve üretrayı daha önce indüklenen darlık seviyesinde spatula haline getirin (adım 2).</li>
	<li>Spatulasyonun her iki tarafına birer tane olmak üzere 7.0 malzemeden iki adet askı sütürü yerleştirin ve üretrayı geri çekmek için her birine bir sivrisinek bırakın.</li>
	<li>Spatulasyonun her iki ucuna birer tane olmak üzere iki adet 7.0 emilmeyen sütür yerleştirin.</li>
	<li>Bukkal mukoza greftini, mukoza tarafı üretral lümene bakacak şekilde ventral onley şeklinde yerleştirin.</li>
	<li>Dikişlerden birini greft ucundan geçirin ve çalışan bir sütürle yarım elips yapın.</li>
	<li>Adım 3.15 ve adım 3.16'yı greftin diğer tarafındaki diğer sütür ile tekrarlayın.</li>
	<li>Üretral kateteri çıkarın. Penis derisini yeniden konumlandırın.</li>
	<li>Çevresel, subkoronal insizyonu 6.0 emilebilir kesintili sütür ile kapatın.</li>
	<li>Penil traksiyon sütürünü çıkarın.</li>
	<li>Analjeziyi ve ardından 2.16-2.17 adımlarında açıklandığı gibi anti-yatıştırıcı solüsyonu uygulayın.</li>
</ol>4. Ameliyat sonrası izleme
<ol><li>Sıçanları saatte üç ila dört kez gözlemleyin ve anesteziden kurtulduklarını doğrulayın. Solunumu izleyin ve pedal ve göz reflekslerini değerlendirin.</li>
	<li>Deri altından 48 saat boyunca her 12 saatte bir analjezi enjekte edin. NOT: Carprofen 1 mL/500 mg vücut ağırlığında, buprenorfin ise 0.5 mL/500 mg vücut ağırlığında uygulandı (bkz.</li>
	<li>Her işlemden sonra 48 saat boyunca yumuşak yiyecekler ve su ad libitum sağlayın.</li>
	<li>Ameliyattan sonra sıçanları günlük olarak izleyin ve sağlık durumlarını ve ameliyat bölgesi görünümlerini kaydedin. Değerlendirilen belirtiler arasında yüz ifadesi, seslendirme, aktivite durumu, herhangi bir ağrı belirtisi, yiyecek ve içecek alımı, işeme ve kanama yer alır.</li>
</ol>5. Kan perfüzyon değerlendirmesi
NOT: Kan akışı, darlık indüksiyonundan hemen önce, üretroplastiden hemen önce ve üretroplastiden hemen sonra ölçülür.
<ol><li>Lazer Doppler perfüzyon görüntülemesi yapın.<ol><li>Anestezik solüsyonu kullanarak sıçanları uyuşturun (adım 1.1).</li>
		<li>Sıçanı, adım 2.9'da açıklandığı gibi, penis çekişli 37 ° C'lik bir ısıtma yastığına sırtüstü koyun.</li>
		<li>Veri elde etmek için lazer Doppler perfüzyon görüntüleyiciyi başlatın (Malzeme Tablosuna bakın). Lazer ışını tarafından okunacak ilgi alanını önceden ayarlayın.</li>
		<li>Anesteziyi geri döndürmek için anti-yatıştırıcı solüsyonu (adım 1.2) uygulayın.</li>
		<li>Görüntü analiz yazılımını kullanarak, penis bölgesinin etrafına ilgilenilen bölgeyi (ROI) çizin ve zaman içindeki akı değerlerini kaydedin.</li>
	</ol></li>
</ol>6. Radyografik değerlendirme
NOT: Üretroplasti sonrası darlık indüksiyonu onayı ve darlık rezolüsyonu retrograd üretrogram ile doğrulanır. Bu değerlendirme striktür indüksiyonundan 1 hafta sonra (üretroplasti öncesi) ve üretroplastiden 2 hafta sonra yapılır.
<ol><li>Monoplan anjiyografi sistemi kullanarak retrograd üretrogram yapın (bkz.<ol><li>Anestezik solüsyonu kullanarak sıçanları uyuşturun.</li>
		<li>Hayvanı, adım 2.9'da açıklandığı gibi, penis traksiyonu ile sağ eğik dekübitte anjiyografi yatağına yerleştirin.</li>
		<li>Koni ışınını penis de dahil olmak üzere hayvanın pelvik bölgesine odaklayın.</li>
		<li>Distal üretraya 2 mm ilerletilmiş 22 G venöz kateter yerleştirin.</li>
		<li>Üretraya 1 mL iyot radyografik kontrast madde (1:1 oranında 623 mg/mL iyopromid çözeltisi ve %0.9 NaCl) damlatmaya başlayın.</li>
		<li>Eşzamanlı olarak, üretral lümeni karşılayan radyografik kontrastı tanımlamak ve üretral çapı değerlendirmek için düz radyografi yapın.</li>
		<li>Görüntülemenin tamamlanmasının ardından, anesteziyi anti-yatıştırıcı solüsyonla geri alın.</li>
	</ol></li>
</ol>7. Ötenazi
NOT: Ötanazi, üretroplastiden 3 hafta sonra (darlık indüksiyonundan 4 hafta sonra), son perfüzyon değerlendirmesinden hemen sonra yapılır.
<ol><li>2.5 mL'lik bir şırıngayı 2 mL/kg pentobarbital sodyum (400 mg/mL) ile doldurun.</li>
	<li>Hayvanı ötenazi yapmak için çözeltinin intraperitoneal enjeksiyonunu gerçekleştirin.</li>
</ol>

<ol><li>Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+evaluation+of+urethroplasty+with+dorsal+buccal+mucosa%3A+an+experimental+study+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22International+Brazilian+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits.</a> International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).</li>
<li>Andrich, D. E., Mundy, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urethral+strictures+and+their+surgical+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Urethral strictures and their surgical treatment.</a> BJU International. 86 (5), 571-580 (2000).</li>
<li>Bhargava, S., Chapple, C. R., Bullock, A. J., Layton, C., MacNeil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+buccal+mucosa+for+substitution+urethroplasty%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered buccal mucosa for substitution urethroplasty.</a> BJU International. 93 (6), 807-811 (2004).</li>
<li>Fu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substitution+urethroplasty+for+anterior+urethral+stricture+repair%3A+comparison+between+lingual+mucosa+graft+and+pedicled+skin+flap%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Substitution urethroplasty for anterior urethral stricture repair: comparison between lingual mucosa graft and pedicled skin flap.</a> Scandinavian Journal of Urology. 51 (6), 479-483 (2017).</li>
<li>Blain, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+grafts+in+the+rat+model%3A+an+anatomic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Vascular grafts in the rat model: an anatomic study.</a> Microsurgery. 21 (3), 80-83 (2001).</li>
<li>Schmauss, D., Weinzierl, A., Schmauss, V., Harder, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+rodent+flap+models+in+experimental+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Common rodent flap models in experimental surgery.</a> European Surgical Research. 59 (3-4), 255-264 (2018).</li>
<li>You, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+orthotopic+renal+transplantation+model+for+renal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A rat orthotopic renal transplantation model for renal allograft rejection.</a> Journal of Visualized Experiments. (180), e63464(2022).</li>
<li>Park, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balloon-expandable+biodegradable+stents+versus+self-expandable+metallic+stents%3A+a+comparison+study+of+stent-induced+tissue+hyperplasia+in+the+rat+urethra%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Balloon-expandable biodegradable stents versus self-expandable metallic stents: a comparison study of stent-induced tissue hyperplasia in the rat urethra.</a> Cardiovascular and Interventional Radiology. 42 (9), 1343-1351 (2019).</li>
<li>Martín-Cano, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+and+immunohistochemical+changes+in+the+rat+oral+mucosa+used+as+an+autologous+urethral+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pediatric+Surgery%22%5BJournal%5D)">Histological and immunohistochemical changes in the rat oral mucosa used as an autologous urethral graft.</a> Journal of Pediatric Surgery. 48 (7), 1557-1564 (2013).</li>
<li>Hofer, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+primary+urethral+wound+healing+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Analysis of primary urethral wound healing in the rat.</a> Urology. 84 (1), e1-7 (2014).</li>
<li>Tavukcu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+platelet-rich+plasma+on+urethral+injury+model+of+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Protective effect of platelet-rich plasma on urethral injury model of male rats.</a> Neurourology and Urodynamics. 37 (4), 1286-1293 (2018).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Bukkal mukoza greftleri ile üretroplasti, üretral rekonstrüksiyonda önemli bir köşe taşıdır. Bununla birlikte, komplikasyonları ve morbiditeyi azaltmak için daha önce tanımlananları optimize etmek ve doku mühendisliği materyalleri ve biyolojik greftler gibi yenilerini oluşturmak için yenilikçi prosedürler geliştirilmelidir. Klinik öncesi modeller oluşturmak ve cerrahi teknikleri tanımlamak için çeşitli prosedürler yayınlanmıştır. Souza ve ark.1 , 12 Yeni Zelanda tavşanını içeren bir çalışma yaptı....

Üretral rekonstrüksiyon, striktürler, travma veya konjenital kusurlar durumunda üretral yaralanmanın tedavisinde üroloji cerrahları için büyük bir zorluktur1. İyileştirici amaçla, üretroplasti, bir tür ikame üretroplasti gerektiren uzun (>2 cm) ve anterior üretral defektleri olan çoğu hasta için tercih edilen tedavidir2. Genital veya ekstragenital bölgelerin tam veya bölünmüş kalınlıkta deri greftleri, mesane duvarı mukozası veya yaygın bukkal mukoza2 dahil olmak üzere birçok doku üretral ikame olarak kullanılmıştır. Bukkal mukoza greftlerinin ıslak ve tüysüz bir ortamdan gelmesi, kolay toplanması, enfeksiyona dirençli olması, kalın bir epitel olması, psödodivertikül oluşum olasılığının azalması ve ince bir lamina ile erken imbibisyon ve aşılamaya izin vermesi gibi çeşitli avantajları vardır3. Fleplerin aksine, greftlerin hayatta kalmak için alıcının vasküler yatağına bağlı olarak kan akışı yoktur4.
Greft veya fleplerin hayvan modelleri, cerrahi teknikler geliştirmek veya iyileştirmek, doku fizyolojisini, altta yatan mekanizmaları ve başarısızlığın nedenlerini incelemek ve anlamak ve yenilikçi tedavi stratejilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır 5,6. Daha büyük hayvanlar teknik uygulamayı kolaylaştırsa da, kemirgenlerin, yani sıçanlar ve farelerin kullanımı ve bakımı daha kolaydır, hastalıklara karşı dirençlidir, daha uygun maliyetlidir ve daha da önemlisi, yenilikçi tedavileri test etmek için çok önemli olan moleküler mekanizmaları araştırma araçlarıdır 5,6. Sıçanlarda deri, kemik, kas6, damarlar5 ve hatta katı organlar7 olmak üzere farklı dokular kullanılarak çeşitli flep ve greft modelleri tanımlanmıştır. Bununla birlikte, murin modellerinde üretral rekonstrüksiyon veya doku mühendisliği için greftlere yönelik araştırmalar azdır.
Bununla birlikte, translasyonel bilimdeki ilerlemeler, hastalığı taklit eden hayvan modellerine bağlıdır. Şimdiye kadar, lokal patofizyoloji ortamı ele alınmamıştır, çünkü üretral rekonstrüksiyon darlığından hemen sonra yapılır. Bu çalışmada lokal patofizyoloji ortamında bukkal mukoza grefti kullanılarak üretral rekonstrüksiyon yapılması amaçlanmıştır. Bu amaçla üretra darlığı rekonstrüksiyonundan 1 hafta önce indüklendi. Sıçanlarda gerçekleştirilen bu deneysel model, yenilikçi tedavilerin test edilmesine ve gelecekte moleküler mekanizmalarının ve klinik avantajlarının araştırılmasına olanak tanır.

<table><tbody><tr><td>Atipamezol</td><td>OrionPharma</td><td></td><td>ANTISEDAN (atipamezole), sedatif ve ağrı aljezik etkilerin tersine çevrilmesi için belirtilir.</td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>RichterPharma</td><td></td><td>Buprenorfin, opioid alkaloid thebaine'in bir türevidir ve morfinden daha güçlü (25-40 kez) ve daha uzun süre etkili bir analjeziktir.</td></tr><tr><td>Carl Zeiss Opmi-1 FC Cerrahi Stereo Mikroskop</td><td>Carl Zeiss Mikroskopisi, Almanya</td><td></td><td>ZEISS'in OPMI 1 FC modeli kalite, hassasiyet ve güvenilirliği simgeler. Manuel sistem kullanımı kolaydır ve efsanevi ZEISS optikleriyle yüksek isabetli görüntüler sunar.</td></tr><tr><td>Karprofen</td><td>Zoetis</td><td></td><td>Karprofen, propionik asit sınıfına ait steroid olmayan bir anti-inflamatuar ilacıdır (NSAID).</td></tr><tr><td>Kateter 22 G. x 1''</td><td>B Braun</td><td>Introcan Safety</td><td>Daha sağlam yapıya sahip florlu etilen propilen (FEP) IV Kateteri arterial erişim.</td></tr><tr><td>Enrofloksasin</td><td>Bayer</td><td></td><td>Enrofloksasin, florokinolon bir antibiyotiktir.</td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Braun</td><td>3644960</td><td>Fentanyl, güçlü bir sentetik opioid analjezisidir.</td></tr><tr><td>Flumazenil</td><td>Fresenius Kabi</td><td></td><td>Benzodiazepinlerin neden olduğu sedatif etkilerin tamamen veya kısmi tersine çevrilmesi için benzodiazepinler kullanılır.</td></tr><tr><td>Yüksek sıcaklık koteri</td><td>Fiab</td><td>F7244</td><td>Tek kullanımlık koter, steril, yüksek sıcaklık (1200 derece ve derece; C), 28 mm ince uç.</td></tr><tr><td>Instillagel jeli</td><td>Farco-pharma</td><td></td><td>Selüloz bazlı kayganlaştırıcı, lokal anestezik ve dezenfekte edici özelliklere sahiptir.</td></tr><tr><td>İopromid</td><td>Bayer</td><td></td><td>İyonik olmayan enjeksiyon kontrast maddesi, iyotla.</td></tr><tr><td>Lazer Doppler görüntüleme sistemi (perfüzyon görüntüleyici moorLDI2-HIR ve özel yazılım)</td><td>MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, Birleşik Krallık</td><td>5710</td><td>Anjiyogenez modelleri, arka uzuvlarda kan perfüzyonu değerlendirmek için Lazer Doppler görüntüleme kullanır; bunlardan biri cerrahi olarak bağlanmıştır. Özel ölçüm ve karşılaştırma yazılımı, iskemik ve iskemik olmayan uzuvlarda kan akışı değerlendirmesi için ilgi duyulan bölgelerin tanımlanmasına olanak tanır ve böylece aynı konuda ihtiyaç duydukça ve birkaç gün boyunca değerlendirilebilen bir "reperfüzyon oranı" oluşturulur.</td></tr><tr><td>Lubrithal Göz Jeli</td><td>Dechra</td><td></td><td>Hayvanlarda anestezi sırasında kuru gözlerin önlenmesi için kullanılan göz jeli. Kornea ve konjunktivada kayganlaştırıcı ve nemlendirici etki.</td></tr><tr><td>Erkek Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) fareleri</td><td>Charles River Laboratuvarları, İspanya</td><td></td><td>On iki ila on dört haftalık çocuklar</td></tr><tr><td>Metedomidin</td><td>Virbac</td><td>037/01/07RFVPT</td><td>Medetomidinin, cerrahi anestezi olarak kullanılan sentetik bir ilaçtır.</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Labesfal</td><td></td><td>Benzodiazepin ilacı anestezi ve prosedürel sedasyon için kullanılır.</td></tr><tr><td>Monoplan anjiyografi sistemi</td><td>Philips Medical Systems</td><td>Azurion 7 M20</td><td>Kullanıcıların kalp, beyin ve diğer organların anatomisi ve fonksiyonlarını görsel ve niceliksel olarak değerlendirme yeteneğini optimize etmek için özel olarak tasarlanmış sabit bir diagnostik floroskopik röntgen sistemi.</td></tr><tr><td>Sivrisinek forsepsi</td><td>Henry Schein</td><td>102-4346</td><td>Hartman-Mosquito Hemostatik Forsep Eğimli 3-1/2" Paslanmaz Çelik</td></tr><tr><td>İğne Tutucu</td><td>Henry Schein</td><td>100-2570</td><td>İğne tutucu, Mayo-Hegar, paslanmaz çelik, 14 cm</td></tr><tr><td>Oftalmik İğne Tutacağı</td><td>Asico</td><td>AE-6143</td><td>İğne tutucu barranquer en hassas kilitsiz</td></tr><tr><td>Pentobarbital Sodyum</td><td>Ecuphar</td><td></td><td>Pentobarbital Sodyum, ötenazi için kullanılan pentobarbitalin sodyum tuzudur.</td></tr><tr><td>Sivri Pensetler</td><td>Eskülap</td><td>BD335R</td><td>Mikroforseps, 0,30 mm uç</td></tr><tr><td>Polysorb 6.0</td><td>Medtronic (Covidien)</td><td>UL-101</td><td>Kaplamalı Sentetik Emilebilir Dikiş, dokularda iltihap reaksiyonunu azaltmayı ve ardından sügünün lifli bağ dokusu ile kademeli kapsüllenmesini amaçladı.</td></tr><tr><td>Providone-Iodine</td><td>Mylan</td><td></td><td>Povidon-iyot %10, ameliyat öncesi ve sonrası dezenfektan olarak kullanılan antiseptik bir ilaçtır.</td></tr><tr><td>Skalpel Bıçak n&ordm; 11</td><td>B Braun</td><td>BB511</td><td>Karbon çelik, steril</td></tr><tr><td>Bahar Makası</td><td>Henry Schein</td><td>600-4826</td><td>Cerrahi makas 31 castroviejo</td></tr><tr><td>Cerrahi Pensler</td><td>Eskülap</td><td>BD33R</td><td>Mikroforset, 0.20mm uç</td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>Eskülap</td><td>MA873R</td><td>Micro Iris Scissor, kavisli şarap uçları</td></tr><tr><td>SurgiPro 7.0</td><td>Medtronic (Coviden)</td><td>VP-702-X</td><td>Emilmez Monofilament Polipropilen Dikiş, genel yumuşak doku ligasyonu için önerilir.</td></tr></tbody></table>

Üretra darlığı indüksiyonunu takiben sıçan modelinde bukkal mukoza greft üretroplastisi

Urethral Stricture Induction Followed by Buccal Mucosa Graft Urethroplasty in a Rat Model

Üretral rekonstrüksiyon ürologlar için önemli bir uzmanlık alanıdır. Bukkal mukoza, üretral greftleme gerektiğinde en iyi seçenek olarak kabul edilir, ancak bazı durumlarda uygun değildir veya belirli bir darlığı onarmak için optimize edilmesi gerekir. Bu nedenle, yenilikçi prosedürler geliştirmek ve deneysel modellerde varsayılan başarılarını değerlendirmek, klinik ihtiyaca uyacak şekilde çok önemlidir. Bu amaçla, bu çalışmada Wistar sıçanlarında elektrokoter ile üretra darlığının indüklendiği bir protokol tanımlanmıştır. Üretral rekonstrüksiyon 1 hafta sonra alt dudaktan alınan bukkal mukoza grefti ile ventral onley şeklinde yerleştirildi. Retrograd üretrogram, üretroplasti sonrası üretral çapta, striktür indüksiyonundan sonraki ilgili değere kıyasla anlamlı bir iyileşme gösterdi. Ek olarak, greft yerleşimi lazer Doppler kullanılarak kan perfüzyon analizi ile değerlendirildi. Beklendiği gibi, koyu mavi bir alan vaskülarize olmayan bukkal mukoza greftine karşılık geldi. Bu prosedür, üretral yaralanma ve doku modülasyonunun normal patofizyolojik sürecini ve ayrıca tekrarlanabilir bir şekilde bir bukkal mukoza grefti kullanılarak üretral rekonstrüksiyonu başarılı bir şekilde simüle edebilir ve doku mühendisliği veya üretral greftlere dayalı gelecekteki araştırmalar için temel oluşturabilir.

Üretral darlık indüksiyonu için 400-500 g ağırlığında ve 12-14 haftalık toplam 12 erkek Wistar sıçan kullanıldı. 1 hafta sonraretrograd üretrogram (RUG1) yapıldı 8 ve tekniğin başarısını doğruladı. Üretral çap, striktür indüksiyonu seviyesinde milimetre cinsinden ölçüldü. Bundan sonra, sıçan üretrasının ventral yüzünde bukkal mukoza grefti ile üretroplasti yapıldı. Aynı sıçanlar, üretroplastiden 14 gün sonra ikinci bir retrograd üretrograma (RUG2) tabi tutuldu ve greft yerleştirme seviyesinde üret...

Bu protokolde, Wistar sıçanlarında üretra darlığı indüksiyonu geliştirildi ve bunu takiben bukkal mukoza grefti ile üretral rekonstrüksiyon yapıldı. Retrograd üretrogram ve lazer Doppler değerlendirmesi yapılarak üretral rekonstrüksiyon (striktür oluşumundan sonra) ve greft yerleşimi doğrulandı.

Urethral reconstruction is an important area of expertise for urologists. The buccal mucosa is considered the best option when urethral grafting is ...

Bu protokolde, hastalığı taklit etmek için çok önemli olan lokal patofizyolojik ortamda ilk kez bukkal mukoza grefti kullanılarak üretral rekonstrüksiyon geliştirilmiştir. Bu teknik, yenilikçi tedaviler geliştirmemize ve moleküler mekanizmalarını ve klinik avantajlarını translasyonel bir şekilde incelememize olanak tanır. Başlamak için, anestezi uygulanan sıçanın her iki gözüne de koruyucu göz jeli uygulayın.Hayvanı bir ısı yastığı üzerinde dorsal dekübit pozisyonuna yerleştirin ve cerrahi prosedür için sıçanın üzerine bir diseksiyon mikroskobu yerleştirin. Penisin sünnet derisini geri çektikten sonra, dorsal olarak penis bezlerine yüzeysel yedi sıfırlı bir dikiş yerleştirin. Penisi geri çekmek için bir iğne tutucuyu yerinde bırakın.Kayganlaştırıcı jel kullanarak kateterizasyon için üretraya 22 gauge venöz kateter yerleştirin. Cerrahi neşter bıçağı ile penis derisinde bir santimetre uzunluğunda ventral kesi yapın. Penis dokusu katmanlarını, üretra orta şaft seviyesine maruz kalana kadar forseps ve yaylı makasla inceleyin.Üretranın bir yan tarafına ve ventral olarak penis orta şaftına bir elektrokoter cihazı ile akım uygulayın. Kesiyi altı sıfır emilebilir koşu dikişi ile kapatın. Üretral kateteri ve penil traksiyon sütürünü çıkarın.Sıçanı ventral dekübit pozisyonuna yerleştirin ve anti-yatıştırıcı solüsyonun deri altı enjeksiyonunu uygulayın. Anestezi uygulanmış bir sıçanın alt dudağını, bukkal mukozasını, penisini ve karın derisini povidon iyot ile temizleyin. Alt dudağın her iki tarafına ve ortasına üç adet yedi sıfırlı dikiş yerleştirin.Dudağı geri çekmek ve iç mukozayı ortaya çıkarmak için her birine bir sivrisinek yerleştirin. Yaylı makas ve sivri uçlu forseps kullanarak, alt dudağın iç bukkal mukozasından dört milimetrelik bir greft alın. Grefti steril% 0.9 salin içeren küçük bir alıcıya yerleştirin.Donör bölgeyi bir süngerle sıkıştırın. Alt dudağın önceden yerleştirilmiş askı dikişlerini çıkarın ve penisi ortaya çıkarın. Kayganlaştırıcı bir jel kullanarak koterizasyon için üretraya 22 gauge venöz kateter yerleştirin.Yaylı makas kullanarak, çevresel bir subkoronal insizyon yapın ve penisi tabana doğru deglovize edin. Üretrayı ortaya çıkarmak için kalan katmanları inceleyin. Koronal sulkusun yaklaşık üç milimetre distalinde dört milimetre uzunlamasına ventral bir kesi yapın ve üretrayı darlık seviyesinde spatula haline getirin.Spatulasyonun her iki tarafına iki adet yedi sıfırlı dikiş yerleştirin. Üretrayı geri çekmek için her birine bir sivrisinek bırakın. Spatulasyonun her iki ucuna iki adet emilmeyen yedi oh sütür yerleştirin.Bukkal mukoza greftini, mukoza tarafı üretral lümene bakacak şekilde ventral onley şeklinde yerleştirin. Dikişlerden birini greftin içinden geçirin ve akan bir sütürle yarım elips yapın. Üretral kateteri çıkarın ve penis derisini yeniden konumlandırın.Çevresel subkoronal insizyonu altı sıfır emilebilir kesintili sütür ile kapatın. Penil traksiyon sütürünü çıkarın, ardından daha önce gösterildiği gibi anti-yatıştırıcı solüsyonu uygulayın. Darlık indüksiyonuna tabi tutulan sıçan, greft üretroplastisinden iki hafta sonra 1.59 milimetreye yükselen 0.92 milimetrelik bir üreter çapı gösterdi.Üretroplasti sonrası ortalama kan akımı, üretroplasti öncesi hayvanlara kıyasla önemli ölçüde azaldı. Çok fazla akım üretral kapanma riskine yol açabilir. Greft, fistülleri önlemek için mukoza üretral lümene bakacak şekilde su geçirmez bir dikiş ile yerleştirilmelidir.Greft ile her türlü üretroplasti yapılabilir, farklı greft tipleri değerlendirilebilir. Bu deneysel model, greftlerin kullanımını optimize etmemize ve klinik ihtiyaçlara uyacak şekilde translasyonel araştırmalar üzerinde etkisi olan doku mühendisliği malzemeleri gibi yeni terapötik stratejileri keşfetmemize olanak tanır.

urethral-stricture-induction-followed-buccal-mucosa-graft

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Geri dönüşümsüz tek taraflı üreter tıkanıklığının (UUO) murin modeli, kopmuş üreterin mesaneye anastomozu ile üreter tıkanıklığının giderildiği geri dönüşümlü UUO modeli ile birlikte sunulmuştur. Bu modeller, böbrek iltihabı ve yara izinin yanı sıra doku yeniden şekillenmesinin incelenmesini sağlar.

Geri dönüşümsüz ve Tersinir Tek taraflı Üreterik Obstrüksiyon bir fare modeli

Burada, izole kısa bulber veya posterior üretral darlık gemi tutumlu eksizyonu ve anastomoz birincil tedavi etmek için ayrıntılı ve verimli bir protokol mevcut.

Gemi tutumlu eksizyon ve birincil anastomoz

Bu makalede, liken sklerozustan kaynaklanan uzun segment üretra darlığını tedavi etmek için pediküllü tunika vaginalis kullanılan cerrahi bir yöntem tanıtılmaktadır. Tunika vaginalis, üretra için mükemmel bir alternatiftir ve hastalar için hızlı postoperatif iyileşmeye yol açar.

Glans Penis Liken Sklerozusunun Neden Olduğu Uzun Segment Anterior Üretra Darlığının Tedavisi İçin Pedikled Tunica Vaginalis ile Üretroplasti

Rekonstrüktif cerrahi için doku mühendisliği implantları, karmaşık ve pahalı iskele bileşenleri içeren zahmetli ex vivo kültürleme nedeniyle nadiren klinik öncesi çalışmaların ötesine geçer. Burada, otolog mikrogreftler içeren erişilebilir kollajen bazlı tübüler iskele ile üriner diversiyon için tasarlanmış tek aşamalı bir prosedür sunuyoruz.

Minipiglerde Tek Aşamalı Doku Mühendisliği Ürotelyal Tüpler için Cerrahi Model

Bu protokol, tek taraflı üreter tıkanıklığının adım adım, tekrarlanabilir bir modelini tanımlamaktadır.

Geri Dönüşümlü Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığının Olgunlaşmamış Bir Murin Modeli

Bu makale, subüretral greft materyallerini test etmek için tasarlanmış yeni bir hayvan modelini açıklamaktadır. Bu modelde, koyunlarda vajinal bir kesiden bir ağ bant implante edilir ve hayvanlar üç aylık bir süre boyunca gözlemlenir. Bu model, greftler üzerinde deneysel araştırmaların temelini attığı için önemlidir.

Subüretral Greft İmplantasyonu için Bir Koyun Modelinde Yeni Bir Cerrahi Teknik

Bu protokol, termal yaralanma kaynaklı fibrotik yeniden yapılandırma ve terapötik müdahaleleri incelemek için mesane boynu fibrozunun tekrarlanabilir bir fare modeli oluşturmak amacıyla transvezikal Ho:YAG lazer ablasyonunu göstermektedir.

Holmium:YAG Bir Fare modelinde mesane boyun kontraktürünin lazer destekli indüksiyonu

Bir meme kanseri beyin metastazı fare modeli MDA-MB231/Br-GFP hücreleri ultrason görüntüleme kılavuzluğunda intrakardiyak enjeksiyonu ile kurulmuştur. Multifokal intrakranial metastaz gelişimi, yüksek çözünürlüklü 9.4 T MR kullanılarak uzunlamasına izlenir olmuştur.

Boyuna MRG Ardından Meme Kanseri Beyin Metastaz bir Fare Modeli geliştirmek için ultrason görüntüleme eşliğinde intrakardiyak enjeksiyon

Akut beyin travması bugüne kadar yeterli bir tedavisi olmayan ciddi bir yaralanma olduğunu. Multiphoton mikroskopi uzunlamasına akut beyin travması gelişim sürecini inceleyerek ve kemirgenlerde terapötik stratejiler sondalama sağlar. Beynin in vivo iki foton görüntüleme ile incelenmiştir akut beyin travması iki model bu protokolde gösterilmiştir.

Boyuna İki foton görüntüleme ile takip Farelerde Akut Beyin Travma

Hücresel ve moleküler neotissue oluşumu hakkındaki bilgi geliştirmek için, TEVG bir fare modeli yakın zamanda geliştirilmiştir. Greftler C57BL / 6 farelerinde Infrarenal vena kava araya girme greft olarak implante edildi. Bu model bizim klinik araştırmada elde edilenlere benzer sonuçlar elde, ama çok kısaltılmış zaman zarfında.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Öğrenin üretra darlığı indüksiyonunu ve bukkal mukoza greft üretroplastisini Wistar sıçanlarında uygulamayı. Bu yöntem yenilikçi tedavilerin moleküler mekanizmalarını çalışmak için kullanılır.

Üretra darlığı indüksiyonunu takiben sıçan modelinde bukkal mukoza greft üretroplastisi

Daha fazla video keşfet