Gümüş Nanopartiküller Kullanarak Farelerde Osteoartritin İyileştirilmesi

Bu yöntem diz osteoartriti için yeni bir klinik strateji olarak kullanılma potansiyeline sahiptir. Bu teknik güvenlidir, lokal enjeksiyonlar için basittir ve tedavi hayvan deneylerinde etkilidir. Gümüş nanopartiküller diğer inflamasyon hastalıklarında uygulanabilir ve daha fazla araştırmaya ihtiyaç duyar.

Farelerin diz boyutunu enjekte ederken dikkatli olmak ve doğru prosedürü sağlamak önemlidir. Dizlerdeki diz ekleminin el dolgusunun değerlendirilmesi ve herhangi bir ilaç sızıntısının önlenmesi. Anestezi uygulanmış bir fareyi ameliyat masasına yerleştirerek başlayın.

Farenin uzuvlarını bantlayın, ardından kürkü bir usturayla tıraş edin. Daha sonra, traş edilmiş bölgeyi% 0.1 iyodoform ve alkolün alternatif fırçalarıyla üç kez dezenfekte edin. Makas kullanarak, deri altı dokusunu ve infra patella ligamentini sırayla açığa çıkararak cilt üzerinde bir kesi yapın.

Bir mililitrelik insülin şırıngası ile eklem boşluğuna 10 ünite tip iki kollajenaz enjekte edin. Deri altı dokusunu dikin, ardından cildi dikin. Şimdi dikişli alanı% 0.1 iyodoform ile sterilize edin.

Fareyi anesteziden uyandıktan sonra ayrı ayrı havalandırılan kafeslere yerleştirin. Buz üzerine yerleştirilmiş 1,5 mililitrelik bir mikro santrifüj tüpüne 400 mikrolitre tip bir kollajen ekleyerek başlayın. Şimdi 200 mikrolitre PBX ekleyin, iyice karıştırın ve tüpleri buzun üzerine yerleştirin.

Bu süspansiyona 400 mikrolitre gümüş nanopartikül ekleyin ve nihai nanopartikül konsantrasyonunu bir mili mol haline getirin. Süspansiyonu iyice karıştırın. Kollajenaz enjeksiyonundan bir hafta sonra, KOA farelerini kafeslerinden çıkarın.

Gümüş nanopartikülleri enjekte etmeden önce, fareyi daha önce gösterildiği gibi uyuşturun ve cerrahi olarak hazırlayın. Cildi, deri altı dokusunu ve diz bağlarını sırayla ortaya çıkarmak için makas kullanın. Daha sonra, bir mililitrelik insülin şırıngasının iğnesini kullanarak, eklem boşluğuna 15 derecelik bir açıyla girin ve yavaşça 20 mikrolitre gümüş nanopartikül kollajen karışımı enjekte edin.

Enjeksiyon sırasında diz eklemi şişecek ve başarılı bir ilaç enjeksiyonu sağlayacaktır. Ameliyat bölgesini daha önce olduğu gibi diktikten ve sterilize ettikten sonra, anestezi geçtikten sonra fareleri ayrı ayrı havalandırılan kafeslere yerleştirin. Ötenazi yapılan farenin uzuvlarını cerrahi olarak sterilize edin ve inceleyin.

Femur ve tibia dahil olmak üzere diz eklemlerini toplayın ve kas dokusunu çıkarın. Femur ve tibia ve çevresindeki yumuşak bağ dahil olmak üzere diz eklemi dokularını toplayın. Koruma ve fiksasyon için% 10 formalin içinde kapsülleyin.

Dokuların gece boyunca sabitlenmesinden sonra, bölümleri parafine gömün. Bir mikrotom kullanarak, gömülü dokuları 0.4 mikro kalınlığında bölümler halinde kesin. Dokuları farklı boyama tekniklerine tabi tutun.

KOA farelerinin ortalama vücut ağırlığı, kontrol grubundaki farelerinkinden önemli ölçüde daha düşüktü. Tip iki kollajenaz ve gümüş nanopartikül grubundaki farelerin ortalama vücut ağırlığı, KOA farelerine kıyasla daha yüksekti. HE boyama, KOA grubundaki farelerin sinovyal kalınlığının kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksek olduğunu gösterdi.

Nanopartiküllerle muamele edilen grubun sinovyal kalınlığı KOA grubuna göre azaltıldı. Sinovyumun vasküler hiperplazisi KOA grubunda gözlendi ve nanopartikül ile tedavi edilen grupta önemli ölçüde azaldığı bulundu. Safranin-O boyama, KOA farelerinde tahrip olmuş bir kıkırdak matrisi ortaya çıkarırken, nanopartikül kollajen karışımı ile tedavi edilen fareler önemli ölçüde daha iyi bir kıkırdak matrisi gösterdi.

Kollajen II uygulanan grupta morfolojik özellik skorları kontrol grubuna göre daha yüksekti. İmmünohistokimyasal boyama, nanopartikül ile tedavi edilen farelerin sinovyal bölgelerinde KOA grubuna kıyasla nötrofil infiltrasyonunun azaldığını gösterdi. Tip II kollajenaz ve birkaç nanopartikül enjeksiyonu sırasında ilaç tıkanmasını önlemek önemlidir.

Birkaç nanopartikülün terapötik etkisi, ön çapraz bağ yaralanmasının hayvan modellerinde denenebilir.