Name: Dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-05T13:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 45 s
Description: Öğrenin diş pulpası kök hücrelerinin ekplant kültür yöntemiyle izolasyonunu ve karakterizasyonunu. Bu teknik, doku rejenerasyonu ve kemik defektlerinin tedavisinde yeni terapiler geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Hindistan Sağlık Araştırmaları Departmanı (DHR), ICMR, Govt.'dan AK'ye sağlanan finansman desteğini kabul ediyoruz (DHR-NRI Hibe # R.12015/01/2022-HR). SR, ICMR, Govt.Hindistan (Hibe # 2020-7593/SCR-BMS) ve PS, CSIR, Govt.'dan burs aldı. Ayrıca akış sitometrisi konusunda yardımları için Bayan Sandhya Tokhi ve Bayan Bhupinder Kaur'a ve altyapı desteği sağladıkları için merkezi sofistike enstrümantasyon çekirdeği (CSIC) ve PGIMER, Chandigarh'a müteşekkiriz.

Dental pulpa kök hücrelerinin primer kültürünün oluşturulması

<ol><li>Bhattacharyya, S., Kumar, A., Lal Khanduja, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+voyage+of+stem+cell+toward+terminal+differentiation%3A+a+brief+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochimica+et+Biophysica+Sinica%22%5BJournal%5D)">The voyage of stem cell toward terminal differentiation: a brief overview.</a> Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 44 (6), 463-475 (2012).</li>
<li>Prentice, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Adult stem cells.</a> Circulation Research. 124 (6), 837-839 (2019).</li>
<li>Raik, S., Kumar, A., Bhattacharyya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+cell-free+therapeutic+approach%3A+Role+of+stem+cell+%26%2334%3Bsoup-ernatant%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Applied+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Insights into cell-free therapeutic approach: Role of stem cell &#34;soup-ernatant&#34.</a> Biotechnology and Applied Biochemistry. 65 (2), 104-118 (2018).</li>
<li>Rodriguez-Fuentes, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+current+clinical+applications%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Medical+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells current clinical applications: a systematic review.</a> Archives of Medical Research. 52 (1), 93-101 (2021).</li>
<li>Yamazaki, K., Kawabori, M., Seki, T., Houkin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+trials+of+stem+cell+treatment+for+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Clinical trials of stem cell treatment for spinal cord injury.</a> International Journal of Molecular Sciences. 21 (11), 3994(2020).</li>
<li>Kumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+spectrum+of+secretome+regulates+the+relative+hepatogenic+potential+of+mesenchymal+stem+cells+from+bone+marrow+and+dental+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Molecular spectrum of secretome regulates the relative hepatogenic potential of mesenchymal stem cells from bone marrow and dental tissue.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15015(2017).</li>
<li>Kumar, A., Kumar, V., Rattan, V., Jha, V., Bhattacharyya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secretome+cues+modulate+the+neurogenic+potential+of+bone+marrow+and+dental+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Secretome cues modulate the neurogenic potential of bone marrow and dental stem cells.</a> Molecular Neurobiology. 54 (6), 4672-4682 (2017).</li>
<li>Kumar, A., Kumar, V., Rattan, V., Jha, V., Bhattacharyya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secretome+proteins+regulate+comparative+osteogenic+and+adipogenic+potential+in+bone+marrow+and+dental+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimie%22%5BJournal%5D)">Secretome proteins regulate comparative osteogenic and adipogenic potential in bone marrow and dental stem cells.</a> Biochimie. 155, 129-139 (2018).</li>
<li>Kumar, A., Bhattacharyya, S., Rattan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+uncontrolled+freezing+on+biological+characteristics+of+human+dental+pulp+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Bank%22%5BJournal%5D)">Effect of uncontrolled freezing on biological characteristics of human dental pulp stem cells.</a> Cell Tissue Bank. 16 (4), 513-522 (2015).</li>
<li>Raik, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+post-thaw+quality+of+dental+mesenchymal+stromal+cells+after+long-term+cryopreservation+by+uncontrolled+freezing%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Biochemistry+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Assessment of post-thaw quality of dental mesenchymal stromal cells after long-term cryopreservation by uncontrolled freezing.</a> Applied Biochemistry and Biotechnology. 191 (2), 728-743 (2020).</li>
<li>Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+human+dental+pulp+stem+cells+%28DPSCs%29+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 97 (25), 13625-13630 (2000).</li>
<li>Tsutsui, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cells%3A+advances+to+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Cloning%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cells: advances to applications.</a> Stem Cells and Cloning. 13, 33-42 (2020).</li>
<li>Huang, G. T. -J., Gronthos, S., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+tissues+vs.+those+from+other+sources%3A+their+biology+and+role+in+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells derived from dental tissues vs. those from other sources: their biology and role in regenerative medicine.</a> Journal of Dental Research. 88 (9), 792-806 (2009).</li>
<li>La Noce, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cells%3A+state+of+the+art+and+suggestions+for+a+true+translation+of+research+into+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dentistry%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cells: state of the art and suggestions for a true translation of research into therapy.</a> Journal of Dentistry. 42 (7), 761-768 (2014).</li>
<li>Xiao, L., Tsutsui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+dental+pulp+cells-derived+spheroids+in+serum-free+medium%3A+stem+cells+in+the+core%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Characterization of human dental pulp cells-derived spheroids in serum-free medium: stem cells in the core.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 114 (11), 2624-2636 (2013).</li>
<li>Kumar, A., Yun, H., Funderburgh, M. L., Du, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+therapy+for+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Regenerative therapy for the cornea.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 87, 101011(2022).</li>
<li>Gandia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+dental+pulp+stem+cells+improve+left+ventricular+function%2C+induce+angiogenesis%2C+and+reduce+infarct+size+in+rats+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Human dental pulp stem cells improve left ventricular function, induce angiogenesis, and reduce infarct size in rats with acute myocardial infarction.</a> Stem Cells. 26 (3), 638-645 (2008).</li>
<li>Yong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+angiogenic+ability+between+SHED+and+DPSC+in+a+mice+model+with+critical+limb+ischemic%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of the angiogenic ability between SHED and DPSC in a mice model with critical limb ischemic.</a> Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 19 (4), 861-870 (2022).</li>
<li>Zhang, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+dental+pulp+stem+cell+transplantation+in+a+rat+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regeneration+Research%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of dental pulp stem cell transplantation in a rat model of Alzheimer's disease.</a> Neural Regeneration Research. 16 (5), 893-898 (2021).</li>
<li>Kabir, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imperative+role+of+dental+pulp+stem+cells+in+regenerative+therapies%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nigerian+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Imperative role of dental pulp stem cells in regenerative therapies: a systematic review.</a> Nigerian Journal of Surgery. 20 (1), 1-8 (2014).</li>
<li>Kumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cell+secretome+ameliorates+d-galactose+induced+accelerated+aging+in+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biochemistry+and+Function%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cell secretome ameliorates d-galactose induced accelerated aging in rat model.</a> Cell Biochemistry and Function. 40 (5), 535-545 (2022).</li>
<li>Hirata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifaceted+therapeutic+benefits+of+factors+derived+from+dental+pulp+stem+cells+for+mouse+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Multifaceted therapeutic benefits of factors derived from dental pulp stem cells for mouse liver fibrosis.</a> Stem Cells Translational Medicine. 5 (10), 1416-1424 (2016).</li>
<li>Fujii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((regeneration+by+human+dental+pulp+stem+cells+using+a+helioxanthin+derivative+and+cell-sheet+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">regeneration by human dental pulp stem cells using a helioxanthin derivative and cell-sheet technology.</a> Stem Cell Research & Therapy. 9 (1), 24(2018).</li>
<li>Ferrua, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+has+dental+pulp+stem+cells+isolation+been+conducted%3F+A+scoping+review%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Oral+Research%22%5BJournal%5D)">How has dental pulp stem cells isolation been conducted? A scoping review.</a> Brazilian Oral Research. 31, e87(2017).</li>
<li>Pilbauerova, N., Soukup, T., Suchankova Kleplova, T., Suchanek, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+isolation%2C+amplification+and+characterization+of+dental+pulp+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Folia+Biologica%22%5BJournal%5D)">Enzymatic isolation, amplification and characterization of dental pulp stem cells.</a> Folia Biologica. 65 (3), 124-133 (2019).</li>
<li>Tatullo, M., Marrelli, M., Shakesheff, K. M., White, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cells%3A+function%2C+isolation+and+applications+in+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cells: function, isolation and applications in regenerative medicine.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 9 (11), 1205-1216 (2015).</li>
<li>Hilkens, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+isolation+methodology+on+stem+cell+properties+and+multilineage+differentiation+potential+of+human+dental+pulp+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of isolation methodology on stem cell properties and multilineage differentiation potential of human dental pulp stem cells.</a> Cell and Tissue Research. 353 (1), 65-78 (2013).</li>
<li>Hendijani, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Explant+culture%3A+An+advantageous+method+for+isolation+of+mesenchymal+stem+cells+from+human+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Proliferation%22%5BJournal%5D)">Explant culture: An advantageous method for isolation of mesenchymal stem cells from human tissues.</a> Cell Proliferation. 50 (2), e12334(2017).</li>
<li>Aryal Ac, S., Islam, M. S., Samsudin, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+the+effect+of+a+time+delay+on+the+characteristics+and+survival+of+dental+pulp+stem+cells+from+extracted+teeth%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Investigation of the effect of a time delay on the characteristics and survival of dental pulp stem cells from extracted teeth.</a> Archives of Oral Biology. 119, 104896(2020).</li>
<li>Langenbach, F., Handschel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+dexamethasone%2C+ascorbic+acid+and+%CE%B2-glycerophosphate+on+the+osteogenic+differentiation+of+stem+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Effects of dexamethasone, ascorbic acid and β-glycerophosphate on the osteogenic differentiation of stem cells in vitro.</a> Stem Cell Research & Therapy. 4, 117(2013).</li>
<li>Jaiswal, N., Haynesworth, S. E., Caplan, A. I., Bruder, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenic+differentiation+of+purified%2C+culture-expanded+human+mesenchymal+stem+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Osteogenic differentiation of purified, culture-expanded human mesenchymal stem cells in vitro.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 64 (2), 295-312 (1997).</li>
<li>Bernar, A., Gebetsberger, J. V., Bauer, M., Streif, W., Schirmer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+alizarin+red+S+assay+by+enhancing+mineralization+of+osteoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Optimization of the alizarin red S assay by enhancing mineralization of osteoblasts.</a> International Journal of Molecular Sciences. 24 (1), 723(2022).</li>
<li>Coe, C. L., Lubach, G. R., Schneider, M. L., Dierschke, D. J., Ershler, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+rearing+conditions+alter+immune+responses+in+the+developing+infant+primate%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Early rearing conditions alter immune responses in the developing infant primate.</a> Pediatrics. 90, 505-509 (1992).</li>
<li>Bakopoulou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+impact+of+two+different+isolation+methods+on+the+osteo%2Fodontogenic+differentiation+potential+of+human+dental+stem+cells+derived+from+deciduous+teeth%5BTitle%5D)+AND+%22Calcified+Tissue+International%22%5BJournal%5D)">Assessment of the impact of two different isolation methods on the osteo/odontogenic differentiation potential of human dental stem cells derived from deciduous teeth.</a> Calcified Tissue International. 88 (2), 130-141 (2011).</li>
<li>Arthur, A., Rychkov, G., Shi, S., Koblar, S. A., Gronthos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+human+dental+pulp+stem+cells+differentiate+toward+functionally+active+neurons+under+appropriate+environmental+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Adult human dental pulp stem cells differentiate toward functionally active neurons under appropriate environmental cues.</a> Stem Cells. 26 (7), 1787-1795 (2008).</li>
<li>Kim, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoblastic%2Fcementoblastic+and+neural+differentiation+of+dental+stem+cells+and+their+applications+to+tissue+engineering+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+B%2C+Reviews%22%5BJournal%5D)">Osteoblastic/cementoblastic and neural differentiation of dental stem cells and their applications to tissue engineering and regenerative medicine.</a> Tissue Engineering. Part B, Reviews. 18 (3), 235-244 (2012).</li>
<li>Ge, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+C+terminus+of+CaV1.2+channels+plays+a+crucial+role+in+the+neural+differentiation+of+dental+pulp+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Distal C terminus of CaV1.2 channels plays a crucial role in the neural differentiation of dental pulp stem cells.</a> PLoS One. 8 (11), e81332(2013).</li>
</ol>

Yazarlar finansal veya finansal olmayan herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Kök hücreler, plastisiteleri, sağlamlıkları, immünomodülatör özellikleri, parakrin mekanizmaları ve hedef arama verimlilikleri nedeniyle çok sayıda hastalığı tedavi etme umutlarını bağlamıştır. Diş pulpası dokusu, üstün plastisite ve rejeneratif kabiliyete sahip en güçlü ve değerli kök hücre kaynağı olarak kabul edilir. Burada, hücrelerin pulpa dokusu parçalarından veya eksplantlardan morfolojik olarak iğ şeklindeki fibroblast benzeri hücrelere benzeyen homojen bir hücre kültürüne büyümek için göç ettiği, yaygın olarak b...

Yetişkin kök hücreler, plastisiteleri, parakrin mekanizmaları ve immünomodülatör özellikleri nedeniyle hücreye yönelik tedaviler ve terapiler için güçlü bir terapötik araç haline gelmiştir 1,2,3. Kök hücre bazlı klinik öncesi çalışmalardan elde edilen cesaret verici veriler, araştırmacılara tezgahtan başucu çevirisi için çalışmaya ilham verdi. Kök hücre tedavisi için kullanılan kök hücre türü, başarılı sonuçlarda önemli bir rol oynar. Preklinik ve klinik çalışmalarda, mezenkimal kök hücreler (MSC'ler) için en yaygın olarak bildirilen kaynak kemik iliği olmaya devam etmektedir 4,5. Bununla birlikte, kemik iliği kaynaklı kök hücrelerin (BMSC'ler) kullanılmasının en büyük dezavantajları, nadir popülasyonlarını, izolasyon için oldukça invaziv prosedürleri ve sınırlı genişleme yeteneklerini içerir. Bu nedenle, MSC'lerin alternatif kaynakları araştırılmaktadır. Bu bağlamda, diş dokuları, erişilebilirlik kolaylığı, muazzam plastisitesi, yüksek rejeneratif potansiyeli ve yüksek proliferatif yeteneği ile artık zengin ve potansiyel bir alternatif kök hücre kaynağı olarak kabul edilmiştir6,7,8,9,10.
Dental pulpa kök hücreleri (DPSC'ler), 2000 yılında Gronthos tarafından izole edilen ve karakterize edilen ilk dental kök hücre tipiydi11. DPSC'ler, yüksek çoğalma hızları, önemli farklılaşma potansiyelleri, zahmetsiz kültürleme ile erişilebilirlik kolaylıkları ve en önemlisi herhangi bir etik kaygı olmaksızın atılmış bir dişten elde edilebilme yetenekleri nedeniyle doku mühendisliği uygulamalarının dikkatini çekmiştir12. BMSC'ler ve adipoz kaynaklı kök hücreler (ADSC'ler) gibi diğer kök hücre kaynaklarının izolasyonlarında ve yetersiz kendini yenileme kapasitelerinde ortaya çıkan sınırlamalar, DPSC'ler tarafından aşılmaktadır13. İnsan DPSC'leri insan süt dişleri, kalıcı dişler, yirmilik dişler, pul pul dökülmüş süt dişleri (SHED'ler) ve apikal papillalardan elde edilebilir. Ayrıca, DPSC'ler genellikle atılan süpernümerer dişlerden de izole edilebilir14. DPSC'ler nöral krest ile ilişkili belirteçleri eksprese eder ve hem in vitro hem de in vivo olarak nöronal hücrelere farklılaşma potansiyeline sahiptir 15. Nörojenik potansiyellerine ek olarak, DPSC'ler, spesifik farklılaşma koşulları verildiğinde ostojenik, kondrojenik, adipojenik, hepatik ve miyojenik gibi diğer hücre soylarına farklılaşabilir13. Bu nedenle, bu multipotent hücreler hücre bazlı tedavi için büyük bir potansiyele sahiptir ve çeşitli dokuların yenilenmesi için kullanılabilir. Çalışmalar ayrıca DPSC'lerin korneanın16 rekonstrüksiyonunda, miyokard enfarktüsünün17 onarımında potansiyel rolünü ve uzuv iskemisi18, Alzheimer 19, Parkinson 20 ve yaşlanma21 gibi hastalıklarda potansiyel terapötik rolünü bildirmiştir. Bu nedenle, diş dokusu kaynaklı kök hücreler sadece diş rejenerasyonu için değil, aynı zamanda gözler16, kalpler17, karaciğerler22, kemikler23 gibi diş dışı organların onarımı ve yenilenmesi için de kullanılabilir.
Bir MSC popülasyonunun pulpa dokusundan izolasyonu için iki özel yöntem vardır - enzimatik sindirim ve eksplant kültürü24,25. DPSC'lerin miktar ve özelliklerinde önemli bir fark olmaksızın birincil kültürlerin başarılı bir şekilde kurulması, bu yöntemlerin her ikisi de ile bildirilmiştir26. Bu çalışmada, fibroblast kontaminasyonu ile sonuçlanabilen enzimatik sindirime kıyasla, bu yöntem hematopoietik ve endotel hücrelerinin kontaminasyonu olmadan DPSC'ler ürettiğinden, eksplant yöntemi27 ile DPSC'lerin izolasyonuna odaklandık28.

<table><tbody><tr><td>6 kuyulu hücre kültürü plakası</td><td>Costar</td><td>3516</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>Alcian mavi leke</td><td>EZstain kondrosit boyama kiti, HiMedia</td><td>CCK029</td><td></td></tr><tr><td>alizarin kırmızı S lekesi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>TMS-008</td><td>Osteojenik leke</td></tr><tr><td>Antibiyotik kokteyl</td><td>Himedia</td><td>A002-5X50ML</td><td>Kültür kontaminasyonunu önlemek için</td></tr><tr><td>Askorbik Asit Himedia</td><td></td><td>TC094-25G</td><td>Kondrojenik indüksiyon</td></tr><tr><td>B27 takviyesi</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td>Nöral indüksiyon</td></tr><tr><td>bFGF için (temel Fibroblast Büyüme Faktörü)</td> <td>Gibco</td><td>PHG0024</td><td>Nöral indüksiyon</td></tr><tr><td>için CD 105</td><td>BD-Pharmingen</td><td>560839</td><td></td></tr><tr><td>CD 35</td><td>Biolegend</td><td>343604</td><td></td></tr><tr><td>CD 45</td><td>Biolegend</td><td>304006</td><td></td></tr><tr><td>CD 73</td><td>Biolegend</td><td>344016</td><td></td></tr><tr><td>CD 90</td><td>Biolegend</td><td>328107</td><td>Karakterizasyonu</td></tr><tr><td>setil piridinyum klorür (CPC)</td> <td>Alizarin Red ekstraksiyonu için</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>1104006</td></tr><tr><td>Deksametazon 21-fosfat disodyum</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D1159-100MG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Tuzlu Su</td><td>Himedia</td><td>TS1006-5L</td><td>Yıkama amaçlı</td></tr><tr><td>EGF (Epidermal Büyüme Faktörü)</td> <td>Gibco</td><td>PHG0311</td><td>Hepatik ve nöral ve nbsp; indüksiyon</td></tr><tr><td>EVOS LED mikroskop</td><td>Invitrogen</td><td></td><td>For&nbsp; floresan görüntüleme</td></tr><tr><td>EZ lekesi Kondrosit boyama kiti</td><td>Himedia</td><td>CCK029-1KT</td><td>Kondro boyama Kiti</td></tr><tr><td>FACS Canto akış sitometresi</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td>Hücre için karakterizasyon</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Gibco</td><td>16000044</td><td>Primer kültür için</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F2442</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>için G5 takviyesi</td><td>Gibco</td><td>17503012</td><td>Nöral indüksiyon için</td></tr><tr><td>HGF (Hepatosit Büyüme Faktörü)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>H1404</td><td>Hepatik İndüksiyon</td></tr><tr><td>HLA-DR</td><td>için Biyoefsane</td><td>307605</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; İnsan TGF-&beta; 3</td><td>Peprotech</td> <td># 100-36E-10U</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin-Transferrin-Selenöz asit ön karışımı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I3146</td><td>Hepatik İndüksiyon için</td></tr><tr><td>ITS ön karışımı</td><td>Corning</td><td>354350</td><td></td></tr><tr><td>LDL Alım Test kiti</td><td>Abcam</td><td>ab133127</td><td>Hepatik</td></tr><tr><td>indüksiyon</td><td></td><td></td><td></td> için Düşük glikozlu DMEM Gibco 11885-084</tr><tr><td>Nöral karakterizasyon için MAP2 antikoru</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M4403</td><td>Nöral</td></tr><tr><td>indüksiyon için</td><td></td><td>Gibco</td><td>17502048</td></tr><tr><td>Nöral Bazal Medya</td><td>Gibco</td><td>21103049</td><td>Nöral indüksiyon</td></tr><tr><td>NFM antikoru</td> için <td>Sigma-Aldrich</td><td>N4142</td><td>Nöral karakterizasyon için</td></tr><tr><td>Nikon Elipse TS100 mikroskobu</td><td>Nikon</td><td></td><td>For&nbsp; floresan görüntüleme</td></tr><tr><td>Yağı Kırmızı O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>01391-250Ml</td><td>Adipojenik leke</td></tr><tr><td>Oncostatin M</td><td>R & D Sistemleri</td><td>295-OM-010 / CF</td><td>Hepatik İndüksiyon</td></tr><tr><td>Petridish</td><td>Tarson</td><td>460090-90MM</td><td>Doku kesme için</td></tr><tr><td>Potasyum fosfat monobazik</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>15655-100G</td><td>Osteojenik indüksiyon</td></tr><tr><td>Propan-2-ol</td><td>Thermo Fisher</td><td>Q13827</td><td>Yağ Kırmızı O ekstraksiyonu için</td></tr><tr><td>Sodyum piruvat çözeltisi</td><td>Sigma yaşam bilimleri</td><td>S8636-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin-EDTA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T4049</td><td>Hücre geçişi için</td></tr><tr><td>Whatman filtre kağıdı</td><td>merck</td><td>WHA1001325</td><td>filtre kağıdı</td></tr><tr><td>&alpha;- Minimum Temel Ortam (&alpha;-MEM)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M0643-10X Birincil</td> kültür&beta;-gliserofosfat disodyum tuzu hidrat <td>için 1L Ortam</td></tr> <tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G9422-50G</td><td></td></tr></tbody></table>

dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürü

Primary Culture of Dental Pulp Stem Cells

İnsan diş pulpası, çekilmiş bir dişten elde edilebilen, üstün rejeneratif yetkinliğe sahip, umut verici bir multipotent kök hücre rezervuarını temsil eder. Dental pulpa kök hücrelerinin (DPSC'ler) nöral krestten türetilmiş ekto-mezenkimal kökeni, doku onarımı ve rejenerasyonundaki çok yönlü faydalarına borçlu olan yüksek derecede plastisite sağlar. Rejeneratif tıpta kullanımları için araştırılan yetişkin kök hücreleri toplamanın, sürdürmenin ve çoğaltmanın çeşitli pratik yolları vardır. Bu çalışmada, eksplant kültür yöntemi ile diş dokusundan primer mezenkimal kök hücre kültürünün oluşturulmasını gösteriyoruz. İzole edilen hücreler iğ şeklindeydi ve kültür plakasının plastik yüzeyine yapıştırıldı. Bu kök hücrelerin fenotipik karakterizasyonu, CD90, CD73 ve CD105 gibi MSC için uluslararası hücre tedavisi derneği (ISCT) tarafından önerilen hücre yüzeyi belirteçlerinin pozitif ekspresyonunu gösterdi. Ayrıca, hematopoietik (CD45) ve endotelyal belirteçlerin (CD34) ihmal edilebilir ekspresyonu ve HLA-DR belirteçlerinin% 2'den az ekspresyonu, DPSC kültürlerinin homojenliğini ve saflığını doğruladı. Adipojenik, osteojenik ve kondrojenik soylara farklılaşmaya dayalı çoklu potansiyellerini daha da gösterdik. Ayrıca, bu hücreleri, karşılık gelen stimülasyon ortamı ekleyerek hepatik benzeri ve nöronal benzeri hücrelere farklılaşmaya teşvik ettik. Bu optimize edilmiş protokol, laboratuvarda veya klinik öncesi çalışmalar için kullanılmak üzere oldukça genişletilebilir bir mezenkimal kök hücre popülasyonunun yetiştirilmesine yardımcı olacaktır. Benzer protokoller, DPSC tabanlı tedavileri uygulamak için klinik kurulumlara dahil edilebilir.

Burada, araştırmacıların eksplant yöntemi 6,7,8,9,10 aracılığıyla saf bir DPSC kültürünü nasıl oluşturabileceklerini ve aşağı akış uygulamaları için kültürün saflığını belirlemek için bunları birden fazla soya doğru nasıl indükleyebileceklerini açıklıyoruz.
Şekil 1A'da gösterildiği gibi, hastal...

Bu makale, eksplant kültür yöntemini kullanarak dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürünü oluşturmak ve bu hücrelerin ICSCRT yönergelerine dayalı olarak karakterizasyonunu yapmak için adım adım bir kılavuz sağlar. Bu protokol ile izole edilen hücreler, daha sonraki uygulamalar için mezenkimal kök hücreler olarak kabul edilebilir.

Dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürü

The human dental pulp represents a promising multipotent stem cell reservoir with pre-eminent regenerative competence that can be harvested from an ...

Doku rejenerasyonunda yer alan hücresel ve moleküler mekanizmaları incelerken, hastalık modelleri için hücre bazlı ve hücresiz uygulamalarda DPSC'lerin potansiyelini araştırıyoruz. Ek olarak, kök hücre kaderini kontrol etmede ve doku yenilenmesini teşvik etmede kök hücre kaynaklı salgı faktörlerinin rolünü araştırıyoruz. Şu anki odak noktamız, doku rejenerasyonu ile ilişkili moleküler mekanizmalar, genetik ve epigenetik değişiklikler hakkında daha derin bir anlayış kazanmak için 3D kültür tekniklerini kullanmaktır.Çeşitli hücresel süreçleri yöneten düzenleyici alanları çözmek için yeni nesil dizileme, RNA dizileme ve çip dizileme gibi gelişmiş teknikleri bir araya getiriyoruz. DPSC'yi izole etmek için eksplant yöntemleri kullanılarak, homojen bir kök hücre popülasyonu, endotel ve perisitler gibi diğer hücrelerden bağımsız olarak verimli bir şekilde hasat edilebilir. Bu hücre tipleri, DPSC'ler enzimatik prosedürler kullanılarak oluşturulduğunda hücre kültüründe kalır.DPSC'leri ilaç taraması ve doku rejenerasyonu için hücresel bir model olarak kullanan araştırmamız, yeni tedaviler, gelişmiş kişiselleştirilmiş tıp geliştirebilir ve kraniyofasiyal rekonstrüksiyon ve diş çekimi sonrası in vivo kemik rejenerasyonu dahil olmak üzere rejeneratif tıpta geniş kapsamlı etkilere sahip olabilir. Şu anda DPSC'lerin uzun kemik ve kalvarial kusurlar gibi kemik kusurlarını ele almak için nasıl kullanılabileceğini araştırıyoruz. Ek olarak, nörodejenerasyon ve glokom dahil olmak üzere çeşitli hastalık modellerinde DPSC'lerden türetilen salgı moleküllerinin potansiyel terapötik etkilerini araştırıyoruz.

primary-culture-of-dental-pulp-stem-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Yöntemi kullanarak insan dental pulpa kök hücrelerinin (hDPSCs) izolasyonu ve karakterizasyonu...

İnsan Diş Pulp Kök Hücre İzolasyonu, Karakterizasyonu ve Karşılaştırmalı Farklılaşma İki Farklı Yöntemler Kullanılarak Daimi Dişler türetilen

Mezenkimal kök hücre diş hamurundan izole ve prostat kanseri hücre etkileşimi doğrudan ve dolaylı ortak kültür yöntemleri üzerinde temel değerlendirilmesi için iletişim kuralları sağlar. Koşul orta ve trans-şey membranlar dolaylı parakrin etkinliğini çözümlemeye uygundur. Differentially Tohum hücreleri birlikte lekeli doğrudan hücre-hücre etkileşim için uygun bir model olduğunu.

Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Burada insan diş Pulp kök hücre izolasyon ve yayılması için bir protokol Nöronal Farklılaşma süreci sırasında prion protein ifade değerlendirmek için mevcut.

Yalıtım, yayma ve insan diş Pulp kök hücrelerin Nöronal Farklılaşma sırasında Prion Protein ifade

Bu protokol, multipotent kök hücrelerin enzimatik sindirim yoluyla diş pulpasından ekstraksiyonunu, kültürünü ve korunmasını vurgular. Ek olarak, osteoblastlara, adipositlere ve kondrositlere farklılaşma potansiyellerini göstererek süreçte hassasiyet ve tutarlılığın önemini vurgular.

İnsan Süt ve Daimi Dişlerinden Dental Pulpa Kök Hücrelerinin İzolasyonu, Kültürü ve Karakterizasyonu

Bu protokol, sağlıklı, farklılaşmamış insan embriyonik kök (ES) hücreleri korumak için nasıl kullanılacağını gösterir.

İnsan Embriyonik Kök Hücre Kültürü ve Bakım

İlköğretim hepatositler bir fizyolojik ilgili deneysel sistem biyokimyasal, moleküler ve metabolik fonksiyonlarını değerlendirmek için değerli bir araç sağlar. Biz sürekli to1.0 × 10 kadar yaşayabilir hepatositler üretir yerinde karaciğer perfüzyon, sıçan için güvenilir bir protokol...

Sıçan Karaciğer Hücreleri İzolasyon ve İlköğretim Kültür

Doğrudan bir yöntem, hücre tiplerinde çeşitli mezenkimal geçiş (EMT) epitel indüklenmesi için tarif edilmektedir. Immünositokimya EMT eyalette hücrelerin analiz yöntemleri dahildir.

Mezenkimal Geçiş indüksiyon ve Epitel Analizi

Bu yayında, böylece yalıtma ve sıçangil pankreas kültür birincil pankreatik acinar hücreleri için bir hızlı ve uygun bir prosedürü açıklar. Bu yöntem taze birincil dönüştürülmemiş / Normal ekzokrin pankreas hücrelerinin fizyolojisi incelemek için değerli bir yaklaşım oluşturmaktadır.

Fare Primer Pankreas Asiner Hücreleri İzolasyon ve Kültür

Burada detay doku helikopter kullanarak mandibul dilimler kültür diş mikroplar için bir yöntemi biz. Bu yöntem, daha geleneksel kültürü yöntemleri kullanılarak mevcut manipülasyon ve soy izleme, değil mükemmel bir fırsat sağlayarak, gelişimi sırasında dişe eşsiz erişim sağlar.

Eksplantasyon Kültüründe Diş mikropların Geliştirme takiben için Dilim Kültür Yöntemi

Hareketsiz uydu hücrelerin saf nüfusun izolasyonu ve kültürü, kas kök hücre topluluğu, kas kök hücre biyolojisi ve rejenerasyon, hem de kas distrofisi ve diğer dejeneratif hastalıklarda tedavileri için kök hücre nakli anlaşılması için gereklidir.

Kas Uydu Hücreleri İzolasyon, Kültür ve Transplantasyon

Öğrenin diş pulpası kök hücrelerinin ekplant kültür yöntemiyle izolasyonunu ve karakterizasyonunu. Bu teknik, doku rejenerasyonu ve kemik defektlerinin tedavisinde yeni terapiler geliştirmeye yardımcı olur.

Dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürü

Daha fazla video keşfet