Name: Headspace Gaz Kromatografisi-Tandem Dört Kutuplu Kütle Spektrometrisi ile Hayvan Kaynaklı Tıpta Trimetilamin Tayini için Geliştirilmiş Bir Teknik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-10T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 19 s
Description: Öğrenin hayvansal ilaçlarda trimetilamin tayini için HS-GC-MS/MS yöntemiyle basit ön işlem ve doğru analiz tekniklerini. Bu yöntem kalite kontrolü için güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82173991) ve Sichuan Bilim ve Teknoloji Programı (2022YFS0442) tarafından sağlanan hibelerle desteklenmiştir.

Pheretima, Periplaneta americana ve Hirudo'nun tıbbi malzemeleri hakkında bilgi için Tablo 1'e bakınız. Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nden Prof. Xu Runchun tarafından Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. ve Whitmania pigra Whitman'ın kurutulmuş bedenleri olarak tanımlandılar.
1. Numune ekstraksiyonu
<ol><li>Pheretima, Periplaneta americana ve Hirudo'yu bitkisel bir öğütücü ile ezin (Malzeme Tablosuna bakınız), tıbbi tozu No. 2 (elek açıklığı: 0.8 mm) ve No. 4 (elek açıklığı: 0.25 mm) standart ilaç eleklerinden eleyin ve gerekli numune tozunu elde etmek için tozu iki elek arasında toplayın. NOT: Pheretima ezildikten sonra kabarıktır, bu nedenle tozunun elenmesine gerek yoktur.</li>
	<li>50 mL'lik bir plastik santrifüj tüpüne 1 g toz (0,001 g'a kadar hassas) alın, 20 mL %5 trikloroasetik asit (TCA) çözeltisi ekleyin (Malzeme Tablosuna bakın) ve yüksek hızlı dispersiyon homojenizatörü ile 1.000 rmin-1'de 1 dakika homojenize edin.</li>
	<li>Homojenizasyondan sonra, oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 1.717 x g'da santrifüjleyin, cam huniye biraz emici pamuk ekleyin ve süpernatanı 50 mL'lik hacimsel bir şişeye süzün.</li>
	<li>Yukarıdaki ekstraksiyon işlemini 15 mL ve 10 mL% 5 TCA çözeltisi ile iki kez tekrarlayın. Süzüntüyü birleştirin ve% 5 TCA çözeltisi ile 50 mL'ye seyreltin.</li>
</ol>2. Reaktif hazırlama
<ol><li>% 20 sodyum hidroksit çözeltisi hazırlayın: 20 g sodyum hidroksit tartın ve hacmi 100 mL'lik bir hacimsel şişeye sabitlemek için deiyonize su kullanın.</li>
	<li>% 5 TCA çözeltisi hazırlayın: 25 g TCA tartın ve hacmi 500 mL hacimsel bir şişeye sabitlemek için deiyonize su kullanın.</li>
</ol>3. TMA standart stok çözeltisi hazırlama
<ol><li>TMA standart stok çözeltisini hazırlayın: 0.0162 g TMA hidroklorür standart numunesini tartın, %5 TCA çözeltisi içinde çözün ve hacmi 100 μg/mL TMA standart stok çözeltisinin konsantrasyonuna eşit olan 100 mL'ye sabitleyin. 4 °C'de saklayın.</li>
	<li>TMA standart kullanım solüsyonu hazırlayın: belirli bir hacimde TMA standart stok solüsyonu alın ve 0,1 μg/mL, 0,5 μg/mL, 1 μg/mL, 2 μg/mL, 5 μg/mL ve 10 μg/mL TMA standart solüsyonu konsantrasyonlarına kadar %5 TCA solüsyonu ile adım adım seyreltin.</li>
</ol>4. Örnek headspace işleme
<ol><li>20 mL'lik bir üst boşluk şişesinde 2 mL sodyum hidroksit çözeltisi ve 0,5 g katı parafini (erime noktası: 58-60 °C) doğru bir şekilde tartın (bkz.</li>
	<li>Headspace şişesini yaklaşık 30 dakika boyunca 70 °C'de bir fırına koyun. Katı parafin tamamen erir.</li>
	<li>Çıkarın ve parafinin katılaşması için oda sıcaklığına soğumaya bırakın. Katılaşmış parafin, sodyum hidroksiti kapatacaktır.</li>
	<li>Her numune ekstraksiyon çözeltisinden 2 mL alın ve parafin tabakasının üzerine koyun, kapağa bastırın ve kapatın.</li>
	<li>Ölçüm için kapalı üst boşluk şişesini makineye koyun ( Malzeme Tablosuna bakın).</li>
</ol>5. HS-GC-MS/MS analiz koşullarının ayarlanması
<ol><li>Üst boşluk koşulları ve GC-MS koşulları için Tablo 2'ye bakın.</li>
	<li>İyon bilgisi için Tablo 3'e bakın.</li>
</ol>6. Standart eğri çizimi
<ol><li>Sodalı su ve parafin sızdırmazlık tabakası içeren üst boşluk şişesini hazırlamak için 4.1-4.3 adımlarındaki üst boşluk işlemesine bakın.</li>
	<li>2 mL 0,1 μg/mL, 0,5 μg/mL, 1 μg/mL, 2 μg/mL, 5 μg/mL ve 10 μg/mL TMA standart çözeltisini 20 mL'lik bir üst boşluklu şişeye aspire edin, kapağı kapatın ve makinede ölçün.</li>
</ol>7. Hassasiyet testi
<ol><li>Sodalı su ve parafin sızdırmazlık tabakası içeren üst boşluk şişesini hazırlamak için 4.1-4.3 adımlarındaki üst boşluk işlemesine bakın.</li>
	<li>2 mL 0.1 μg/mL TMA standart solüsyonunu 20 mL'lik bir üst boşluk şişesine aspire edin ve kapağı kapatın. Üreticinin talimatlarını izleyerek makinede altı paralel test gerçekleştirin (bkz. Malzeme Tablosu).</li>
</ol>8. Kurtarma oranı deneyi
<ol><li>Bir grup Pheretima, Periplaneta Americana ve Hirudo (S02, S05, S07; Tablo 1) geri kazanım oranı deneyi için temsili ilaçlar olarak.</li>
	<li>Birkaç parti numune tozu (S02, S05, S07) alın ve bunları 50 °C'de bir fırında 72 saat boyunca TMA tespit edilmeyene kadar pişirin.</li>
	<li>Pişmiş ilaç tozundaki TMA içeriğini tespit etmek için bölüm 4-6'daki numune hazırlama yöntemine bakın.</li>
	<li>1 g pişmiş toz alın (0.001 g'a kadar hassas), 50 mL'lik bir plastik santrifüj tüpüne koyun ve 50 μL TMA standart çözeltisi ekleyin. NOT: TMA standart çözeltisinin konsantrasyonu 100 μg/mL, 1000 μg/mL ve 10000 μg/mL'dir.</li>
	<li>20 mL% 5 TCA çözeltisi ekleyin ve 1 dakika boyunca 1000 rmin-1'de homojenize edin.</li>
	<li>Homojenizasyondan sonra, 5 dakika boyunca 1717 x g'da santrifüjleyin, cam huniye biraz emici pamuk ekleyin ve süpernatanı 50 mL'lik bir hacimsel şişeye süzün.</li>
	<li>Yukarıdaki ekstraksiyon işlemini 15 mL ve 10 mL% 5 TCA çözeltisi ile iki kez tekrarlayın; filtratı birleştirin ve% 5 TCA çözeltisi ile 50 mL'ye seyreltin.</li>
</ol>9. Tespit (LOD) ve miktar tayini (LOQ) sınırlarının belirlenmesi
<ol><li>Sinyal-gürültü oranı (S/N) = 3 olduğunda LOD'yi karşılık gelen konsantrasyona göre belirleyin.</li>
	<li>S/N = 10 olduğunda karşılık gelen konsantrasyona göre LOQ'yu belirleyin.</li>
</ol>10. Örnek TMA içeriğinin belirlenmesi
<ol><li>Sırasıyla yaklaşık 1 g ince toz Pheretima, Periplaneta americana ve Hirudo alın, numuneyi yukarıdaki yönteme göre çıkarın ve makinede belirleyin.</li>
</ol>

Headspace GC-MS ile Hayvan Kaynaklı İlaçta Trimetilamin Tayini

<ol><li>Fan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Material+basis+of+stench+of+animal+medicine%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Material basis of stench of animal medicine: a review.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 47 (20), 5452-5459 (2022).</li>
<li>Deng, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+on+formation+and+taste-masking+technology+of+stench+of+animal+medicines%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Progress on formation and taste-masking technology of stench of animal medicines.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (10), 2353-2359 (2020).</li>
<li>Casaburi, A., Piombino, P., Nychas, G. J., Villani, F., Ercolini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+populations+and+the+volatilome+associated+to+meat+spoilage%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Bacterial populations and the volatilome associated to meat spoilage.</a> Food Microbiology. 45 (Pt A), 83-102 (2015).</li>
<li>Rouger, A., Tresse, O., Zagorec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+contaminants+of+poultry+meat%3A+sources%2C+species%2C+and+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Bacterial contaminants of poultry meat: sources, species, and dynamics.</a> Microorganisms. 5 (3), 50(2017).</li>
<li>Baliño-Zuazo, L., Barranco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+liquid+chromatography-mass+spectrometric+method+for+the+simultaneous+determination+of+trimethylamine%2C+dimethylamine+and+methylamine+in+fishery+products%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A novel liquid chromatography-mass spectrometric method for the simultaneous determination of trimethylamine, dimethylamine and methylamine in fishery products.</a> Food Chemistry. 196, 1207-1214 (2016).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultra-efficient+trimethylamine+gas+sensor+based+on+Au+nanoparticles+sensitized+WO3+nanosheets+for+rapid+assessment+of+seafood+freshness%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Ultra-efficient trimethylamine gas sensor based on Au nanoparticles sensitized WO3 nanosheets for rapid assessment of seafood freshness.</a> Food Chemistry. 392, 133318(2022).</li>
<li>Bota, G. M., Harrington, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+detection+of+trimethylamine+in+meat+food+products+using+ion+mobility+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Talanta%22%5BJournal%5D)">Direct detection of trimethylamine in meat food products using ion mobility spectrometry.</a> Talanta. 68 (3), 629-635 (2006).</li>
<li>Neyer, P., Bernasconi, L., Fuchs, J. A., Allenspach, M. D., Steuer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Derivatization-free+determination+of+short-chain+volatile+amines+in+human+plasma+and+urine+by+headspace+gas+chromatography-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Laboratory+Analysis%22%5BJournal%5D)">Derivatization-free determination of short-chain volatile amines in human plasma and urine by headspace gas chromatography-mass spectrometry.</a> Journal of Clinical Laboratory Analysis. 34 (2), e23062(2020).</li>
<li>Mitsubayashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trimethylamine+biosensor+with+flavin-containing+monooxygenase+type+3+%28FMO3%29+for+fish-freshness+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+%26+Actuators+B%3A+Chemical%22%5BJournal%5D)">Trimethylamine biosensor with flavin-containing monooxygenase type 3 (FMO3) for fish-freshness analysis.</a> Sensors & Actuators B: Chemical. 103 (1-2), 463-467 (2004).</li>
<li>National Health and Family Planning Commission of the People's Republic of China. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22GB+5009.+179-2016%22">GB 5009. 179-2016</a>. , 12(2016).</li>
<li>Liu, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+material+basis+and+processing+principle+of+fishy+smell+of+Pheretima+aspergillum+by+electronic+nose+and+HS-GC-MS%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Experimental+Traditional+Medical+Formulae%22%5BJournal%5D)">Study on material basis and processing principle of fishy smell of Pheretima aspergillum by electronic nose and HS-GC-MS.</a> Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 26 (12), 154-161 (2020).</li>
<li>Zheng, X., Sun, F., Du, L., Huang, Y., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+on+changes+of+volatile+components+in+Gecko+before+and+after+processing+by+HS-SPME-GC-MS%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Experimental+Traditional+Medical+Formulae%22%5BJournal%5D)">Comparison on changes of volatile components in Gecko before and after processing by HS-SPME-GC-MS.</a> Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 28 (15), 145-152 (2022).</li>
<li>Yoshiharu, I. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYoshiharu%2C+I+%22Odor+olfactory+measurement%22">Odor olfactory measurement</a>. , Japan Association on Odor Environment. Tokyo. (2004).</li>
<li>Jia, Z. W., Mao, B. P., Miao, S., Mao, X. H., Ji, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+sulfur+dioxide+residues+in+sulfur+fumigated+Chinese+herbs+with+headspace+gas+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmaceutica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Determination of sulfur dioxide residues in sulfur fumigated Chinese herbs with headspace gas chromatography.</a> Acta Pharmaceutica Sinica. 49 (2), 277-281 (2014).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Hayvansal kaynaklı ilaçlar tüm vücuttan, organ veya dokulardan, fizyolojik veya patolojik ürünlerden, dışkılardan veya salgılardan ve hayvanların işlenmiş ürünlerinden gelir. TMA, hayvansal kaynaklı ilaçlarda önemli bir balık kokusu kaynağıdır; çok düşük koku alma eşiği (0.000032 × 10-6 V/V) ve güçlü balık kokusu13 olan tipik bir kötü kokulu maddedir. Şu anda, yaygın olarak kullanılan HS-GC-MS yöntemi, hayvansal kaynaklı ilaçlarda TMA'yı stabil ve doğru bir şekilde tespit edememektedir....

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65291">An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry</a>. The Authors section was updated from:
Hui Ye1 
Xuemei Liu1 
Haozhou Huang2 
Lin Huang1 
Yang Bao1 
Hongyan Ma1 
Junzhi Lin3 
Xiaoming Bao4 
Dingkun Zhang1 
Runchun Xu1 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
3TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
4Shimadzu (China) Co., Ltd
to:
Hui Ye1 
Xuemei Liu1 
JiaBao Liao2 
Haozhou Huang3 
Lin Huang1 
Yang Bao1 
Hongyan Ma1 
Junzhi Lin4 
Xiaoming Bao5 
Dingkun Zhang1 
Runchun Xu1 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
2China Resources Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd 
3Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
4TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
5Shimadzu (China) Co., Ltd

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65291">An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry</a>. The Authors section was updated.

Erratum: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry

Hayvan parçalarından ve/veya bunların yan ürünlerinden (burada hayvansal kaynaklı ilaçlar olarak anılacaktır) elde edilen ürünleri kullanarak insan hastalıklarının tedavisi giderek daha fazla ilgi görmektedir. Kanser, kardiyovasküler hastalık, karaciğer sirozu, mastitis ve diğer hastalıkların tedavisinde güçlü bir etki, küçük dozaj ve önemli ve spesifik klinik etkinlik avantajları ile önemli bir rol oynarlar. Bununla birlikte, hayvansal kaynaklı ilaçlar genellikle belirgin bir balık kokusuna sahiptir, bu da hastaların uyumunu büyük ölçüde etkiler ve özellikle çocuklar için elverişsizdir 1,2. Balık kokusu esas olarak, yağ asidi oksidasyonu, amino asit bozunması ve balık kokusu 2,3,4 ile çeşitli maddeler üretmenin diğer yolları yoluyla ayrışan ilaçta bulunan proteinlerden, amino asitlerden, yağlardan ve diğer maddelerden gelir. Bunlar arasında trimetilamin (TMA), çürüyen veya çürümüş hayvansal kaynaklı gıdalarda yaygın olarak bulunan balık kokusuna sahip uçucu bir gazdır5.
Şimdiye kadar, gaz kromatografisi (GC), sıvı kromatografisi (LC), iyon kromatografisi, spektrofotometri, sıvı kromatografisi-kütle spektrometrisi (LC-MS) ve sensör yöntemleri, ortamda, yiyeceklerde ve idrarda TMA'yı tespit etmek için yaygın olarak kullanılmıştır 6,7,8,9. GC kolonu ve enjeksiyon sisteminin düşük kontaminasyonunun yanı sıra yüksek hassasiyet, tekrarlanabilirlik ve düşük tespit limiti (0.1-1 mg/kg) göz önüne alındığında, gıda ve biyolojik analizler için tepe boşluğu gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi (HS-GC-MS) yöntemi tercih edilmiştir8. Şu anda, yalnızca Çin gıdada TMA için ulusal bir standart oluşturmuştur ve HS-GC-MS, GB5009.179-2016 standardı10'daki ilk yöntemdir. Bu nedenle, hayvansal kaynaklı tıpta TMA'yı tespit etmek için yukarıdaki HS-GC-MS yöntemi seçilmiştir. Erken aşamada, araştırma grubumuz, gıdalardaki TMA için HS-GC-MS tespit standardının çeşitli hayvan kaynaklı ilaçlardaki balık kokusunu tespit edebildiğini buldu. Çalışmaların sonuçları11,12 ile birleştiğinde, TMA'nın hayvansal kaynaklı ilaçlarda balık kokusunun ortak anahtar maddesi olduğu kanıtlanabilir. Bununla birlikte, deneysel sonuçların tekrarlanabilirliğinin zayıf olduğu ve metodoloji ile doğrulanamayan TMA kaçışı ve zayıf stabilite gibi problemlerin olduğu bulunmuştur. Bunun nedeni, kostiğin üst boşluk şişesine enjekte edilmesi ve hızlı asit-baz reaksiyonunun şişede artan basınca yol açması olabilir, böylece TMA enjeksiyon gözeneğinden kaçarak TMA'nın kararlı ve doğru bir şekilde tespit edilmesini engelleyebilir. Bu nedenle, bu çalışma, bu sorunları ele almak için geliştirilmiş bir üst boşluk gaz kromatografisi-tandem dört kutuplu kütle spektrometrisi (HS-GC-MS/MS) algılama yöntemi önermiştir.
Protokol, iyi bir katı-sıvı faz değişim malzemesi olan katı parafin yardımıyla ön işlemdeki asit-baz reaktanları ayırarak numune ön işlemini iyileştirir. Parafin, termostatik fırının sıcaklık artışıyla yavaşça sıvılaştırıldıkça, şiddetli ve hızlı asit-baz reaksiyonunun neden olduğu basınç artışını önleyerek ve kararlı ve doğru TMA tespiti sağlayarak, kapalı üst boşluk şişesinde TMA da yavaşça salındı. Ayrıca, GC-MS/MS'de çoklu reaksiyon izleme (MRM) modlarıyla birleştirilmiş üst boşluk enjeksiyonu, matris kimyasal girişimini etkili bir şekilde bastırdı ve sonuçların güvenilirliğini sağladı. Metodolojik doğrulamanın sonuçları, geliştirilmiş algılama yönteminin doğrusallığının, hassasiyet testinin ve geri kazanım hızının, iyi tekrarlanabilirlik ve yüksek hassasiyetle gereksinimleri karşılayabileceğini kanıtladı.

<table><tbody><tr><td>Santrifüj</td><td>Beckman Coulter Trading (Çin) Co.</td><td>SSC-2-0213</td><td></td></tr><tr><td>Çin bitkisel ilaç öğütücü</td><td>Zhejiang Yongkang Xi'an Donanım ve İlaç Fabrikası</td><td>HX-200K</td><td></td></tr><tr><td>Konveksiyonlu fırın</td><td>Sanyo Electric Co., Ltd</td><td>MOV-112F</td><td></td></tr><tr><td>20 mm Alüminyum kapaklar için Decapper</td><td>ANPEL Laboratuvar Teknolojileri (Şangay) Inc</td><td>V1750004</td><td></td></tr><tr><td>Elektronik denge</td><td>Shimadzu Corporation Japonya</td><td></td><td></td>AUW220D</tr><tr><td>Gaz kromatografisi kütle spektrometresi</td><td>Shimadzu Corporation Japonya</td><td>TQ-8050 NX</td><td></td></tr><tr><td>Headspace Flakon</td><td>ANPEL Laboratuvar Teknolojileri (Shanghai) Inc</td><td>25760200</td><td></td></tr><tr><td>Homojenizatör</td><td>Şanghay biaomo Fabrikası</td><td>FJ200-SH</td><td></td></tr><tr><td>Önceden Monte Edilmiş Kapak</td><td>ANPEL Laboratuvar Teknolojileri (Şangay) Inc</td><td>L4150050</td><td></td></tr><tr><td>Örneği elek</td><td>Zhenxing Elek Fabrikası</td> <td>/</td><td></td></tr> <tr><td>SH-Uçucu Amin</td><td>Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd</td><td>227-3626-01</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit</td><td>Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd</td><td>2022101401</td><td></td></tr><tr><td>Katı parafin mumu</td><td>Şangay Hualing Kangfu aparatı fabrikası</td><td>20221112</td><td></td></tr><tr><td>Trikloroasetik asit</td><td>Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd</td><td></td><td></td>2022102001</tr><tr><td>Trimetilamin hidroklorür</td><td>Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd</td><td>AF22022108</td><td></td></tr><tr><td>Ultra saf su sistemi</td><td>Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd</td><td>UPR-11-5T</td><td></td></tr></tbody></table>

headspace gaz kromatografisi-tandem dört kutuplu kütle spektrometrisi ile hayvan kaynaklı tıpta trimetilamin tayini için geliştirilmiş bir teknik

An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry

Hayvansal kaynaklı ilaçların ayırt edici özellikleri ve önemli iyileştirici etkileri vardır, ancak çoğunun belirgin bir balık kokusu vardır ve bu da klinik hastaların zayıf uyumuna neden olur. Trimetilamin (TMA), hayvansal kaynaklı tıptaki en önemli balık kokusu bileşenlerinden biridir. Kostik ilavesinden sonra hızlı asit-baz reaksiyonunun neden olduğu üst boşluk şişesindeki artan basınç nedeniyle mevcut tespit yöntemini kullanarak TMA'yı doğru bir şekilde tanımlamak zordur, bu da TMA'nın üst boşluk şişesinden kaçmasına neden olur ve hayvansal kaynaklı ilaçların balık kokusunun araştırma ilerlemesini durdurur. Bu çalışmada, asit ve kostik arasında bir izolasyon tabakası olarak bir parafin tabakası ekleyen kontrollü bir tespit yöntemi önerdik. TMA üretim hızı, parafin tabakasının termostatik fırın ısıtması yoluyla yavaşça sıvılaştırılmasıyla etkin bir şekilde kontrol edilebilir. Bu yöntem, iyi tekrarlanabilirlik ve yüksek hassasiyet ile tatmin edici doğrusallık, hassas deneyler ve geri kazanımlar gösterdi. Hayvansal kaynaklı ilaçların koku giderme konusunda teknik destek sağladı.

Bu protokolün ön işleme prensibinin ve çalışmasının şematik diyagramları sırasıyla Şekil 1 ve Şekil 2'de gösterilmektedir. TMA'nın pik süresi 2.3 dakika idi, keskin bir tepe şekli vardı ve diğer safsızlıklardan etkilenmedi (Şekil 3). 0.1-10 μg/mL TMA standart çözeltisinin doğrusal aralığı, apsis olarak TMA konsantrasyonu ve ordinat olarak tepe alanı ile standart bir eğri çizildi. Doğrusal regresyon denklemi y = 2522482x + 24255 olar...

Burada, hayvansal kaynaklı ilaçlarda trimetilamin (TMA) tayini için uygun bir headspace gaz kromatografisi-tandem dört kutuplu kütle spektrometrisi (HS-GC-MS/MS) yöntemi açıklanmaktadır. Protokol, numune ön işlemini, üst boşluk tedavisini, analiz koşullarını, metodolojik doğrulamayı ve hayvansal kaynaklı ilaçlarda TMA'nın belirlenmesini içerir.

Headspace Gaz Kromatografisi-Tandem Dört Kutuplu Kütle Spektrometrisi ile Hayvan Kaynaklı Tıpta Trimetilamin Tayini için Geliştirilmiş Bir Teknik

Animal-derived medicines have distinctive characteristics and significant curative effects, but most of them have an obvious fishy odor, resulting in the ...

Araştırmamızın kapsamı, hayvan tıbbında balık kokusunun çeşitliliğinde önemli bir temeldir. Bu protokol, basit bir ön tedavi yöntemi ve hayvan ilaçlarında trimetilaminin doğru bir şekilde tespit edilmesini sağlar. Basit ön işlem yöntemleri ve bu protokolün HS-GC kütlesinin/kütlesinin programlanmış parametrelerinin daha da optimize edilmesi gerekiyor ve daha yapacak çok işimiz var.Protokolümüz, yalnızca trimetilamin analizi için ilk ön işlem değil, aynı zamanda kullanılacak ilk analitik mod olan benzersiz, basit bir ön işlemle birlikte GC kütlesi/kütlesinin çok yönlü izleme modunu benimser.

an-improved-technique-for-trimethylamine-detection-animal-derived

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Biz, glukozamin ve toprak ekstrakte muramic asit aldonitrile asetat türevlerinin GC-bazlı analizi için bir yöntem tarif protokolü. Kimyasal mekanizmasının aydınlatılması için, biz de türev ve elektron iyonizasyon halinde oluşan iyon parçalarının yapısını onaylamak için bir strateji sunmak.

Toprak Mikrobiyal Kalıntı Tayini için Aldononitrile Asetat türevlendirilmiş Glukozamin ve Muramic Asit GC tabanlı Algılama

İndirgeyici olarak 13C-metillenmiş N-terminal lizinin α- ve ε-dimetilamin nükleer manyetik rezonans sinyallerini atamak için iki yöntem açıklanmıştır. Bir yöntem, indirgeyici metilasyon reaksiyonunun pH ile indüklenen seçiciliğini kullanır ve diğeri, N-terminal lizini seçici olarak uzaklaştırmak için aminopeptidaz kullanır.

İndirgeyici Olarak Metillenmiş Proteinler Üzerindeki 13C-Dimetil N-terminal Amin'in NMR Rezonanslarını Belirleme Yöntemleri

Proton Transfer Reaksiyon Süresi Uçuş Kütle Spektrometresi, uçucu organik bileşiklerin yüksek hassasiyetli, hızlı ve invaziv olmayan analizine izin verir. Potansiyelini göstermek için üç örnek veriyoruz: yoğurdun laktik asit fermantasyonu (on-line biyoproses izleme), farklı elma genotipleri (büyük ölçekli tarama) ve kahve içtikten sonra retronazal boşluk (burun boşluğu analizi).

Gıda Örneklerinde Otomatik Örnekleme Sistemi ve Özelleştirilmiş Veri Analizi ile Birleştirilen PTR-ToF-MS: Biyolojik İşlem İzleme, Tarama ve Burun Uzayı Analizi

Benzer proteinlere sahip türlerin karışımlarındaki bileşenlerin tanımlanması ve miktarının belirlenmesi için bir protokol sunuyoruz. Kütle spektrometresi, tanımlama için peptitleri tespit eder ve tepe alanlarının oranlarına göre nispi nicelik verir. Dolandırıcılık tespiti için bir araç gıda olarak, yöntem sığır etinde% 1 at tespit edebilir.

Et kimlik doğrulaması için peptidler Uygulanan MRM Kütle Spektrometresi kullanarak karışımlar türlerin belirlenmesi ve miktar tayini

Bu iletişim kuralı metabolizma birden çok besin kaynaklarının nicelik ve kapsamlı bir şekilde araştırmak için deneysel bir işlem açıklanır. İzotopik izleyici deneyleri ve analitik bir yordam, bir kombinasyonuna göre bu iş akışı, tüketilen besin kaderi ve molekülleri synthetized metabolik kökenli mikroorganizmalar tarafından belirlenecek sağlar.

Birden çok besin kaynaklarının mikrobiyal metabolizma araştırmaya izotopik izleyici deneyler kombinasyonuna göre iş akışı

Koku sinyallerinin hayvan iletişiminde nasıl kullanılabileceğini anlamak için örnekleme ve analiz için etkili bir metodoloji geliştirdik. Özellikle, hayvan kokularının ve koku işaretlerinin uçucu bileşenlerini analiz etmek için gaz kromatografisi-kütle spektrometresi ile birleştiğinde kafa boşluğu katı faz mikrokstrasyonu kullanıyoruz.

Hayvan Kokusu Sinyallerinin Örneklemesi ve Analizi

Toplam Buharlaşma Katı Faz Mikroextraction (TV-SPME), bir SPME fiber üzerine analiz edilirken sıvı bir numuneyi tamamen buharlaştırır. Bu, analitenin sadece çözücü buharı ve SPME fiber kaplama arasında bölünmesine izin verir.

Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometresi, Adli Bir Araç Olarak Toplam Buharlaşma Katı Fazlı Mikroextraction ile Eşleştirilmiştir

Burada, Tibet tıbbındaki karmaşık doğal ürün formülasyonlarındaki (matrisler) eser miktarları ve küçük bileşenleri tanımlamak için uygulanabilecek genel bir protokol ve tasarımı açıklıyoruz.

Tibet Tıbbında İyon Tuzağı Kütle Spektrometrisi ve Çok Aşamalı Parçalanma Analizi Kullanılarak Bileşik Yapının Standartlaştırılmış Tanımlanması

Geleneksel Çin tıbbı araştırmalarında yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi analizini ve moleküler yerleştirmeyi entegre eden genel bir protokolü açıklıyoruz.

Gynura bicolor DC'nin Kimyasal Bileşenlerini İncelemek için Yüksek Çözünürlüklü Tandem Kütle Spektrometresi

Hızlı kütle spektrometresi (MS)/kütle spektrometresi (MS) tabanlı tropan alkaloidlerinin açıklanması ve sınıflandırılması için hem tropan içeren numunelerin ön replikasyonu hem de izolasyon için yeni alkaloidlerin keşfi için yararlı bir yöntem sunuyoruz.

Doğal Ürün Araştırmalarında Sıvı Kromatografi Tandem Kütle Spektrometresinin Uygulamaları: Bir Vaka Çalışması Olarak Tropan Alkaloidleri

Bu çalışma, Anisodus tanguticus'ta tropan alkaloidleri (hyoscyamin, aniisodamin, skopolamin) tanımlamak ve nicelendirmek için üçlü quadrupol kütle spektrometrisi (HPLC-QQQ-MS) yöntemiyle birleşen yüksek performanslı sıvı kromatografi geliştirmiştir. Yöntem, tıbbi bitkilerin yüksek verimli analizinde hızlı, doğru ve güvenilir olduğunu kanıtladı.

Tıbbi Bitkilerde Tropan Alkaloidlerin Nicelenmesi İçin Verimli ve Hızlı Bir HPLC-QQQ-MS yöntemi

Öğrenin hayvansal ilaçlarda trimetilamin tayini için HS-GC-MS/MS yöntemiyle basit ön işlem ve doğru analiz tekniklerini. Bu yöntem kalite kontrolü için güvenilir sonuçlar sağlar.

Headspace Gaz Kromatografisi-Tandem Dört Kutuplu Kütle Spektrometrisi ile Hayvan Kaynaklı Tıpta Trimetilamin Tayini için Geliştirilmiş Bir Teknik (Video) | JoVE Journal

Headspace Gaz Kromatografisi-Tandem Dört Kutuplu Kütle Spektrometrisi ile Hayvan Kaynaklı Tıpta Trimetilamin Tayini için Geliştirilmiş Bir Teknik

Daha fazla video keşfet