Cilt Biyopsilerinden Hasta Kaynaklı Podositlerin Üretimi

Bu makalede, dermal fibroblastlardan hastaya özgü podositlerin epizomal yeniden programlanması yoluyla insan kaynaklı pluripotent kök hücrelere (hiPSC'ler) ve ardından podositlere farklılaşması için iki aşamalı bir protokol açıklanmaktadır.

Dermal fibroblastları insan kaynaklı pluripotent kök hücrelere epizomal olarak yeniden programlayarak insan podositleri üretmek için bir protokol tanımladık. Bu hücreler, podosit gıda süreçleri ve podosit spesifik belirteçlerinin ekspresyonu açısından in vivo podositlere ölümsüzleştirilmiş podositlerden çok daha iyi benzemektedir. Podositler terminal olarak farklılaşmış hücrelerdir.

Bu nedenle, bu hücreler artık çoğalmaz ve hücre kültüründe primer podosit analizi sınırlıdır. Sınırlı hücre sayısı sorunu, şartlı olarak ölümsüzleştirilmiş podositler kullanılarak aşılmasına rağmen, bu podositler, temel araştırmalarda kullanımlarını sorgulayan farklılaşmamış bir fenotip ve davranış sunar. İndüklenmiş pluripotent kök hücrelerin yardımıyla, podositler, farklı gıda süreçleri ve podosit spesifik belirtecinin ekspresyonunu içeren tipik podosit morfolojisi ile neredeyse sınırsız sayıda in vitro olarak üretilebilir.

Podositlere farklılaşmak için hastaya özgü kök hücreleri kullanırken, hücrenin hastalığa özgü değişikliklerini ex vivo olarak incelemek mümkündür. Olguda, ilk deri biyopsisi genetik podosit hastalığı olan bir hastadan alındı. Protokolümüzle üretilen podositler, hastanın mutasyonunu taşıyan kişiselleştirilmiş hastalıklı hücrelerdir.

Bu nedenle, bu hücreler podosit hastalıklarını ve potansiyel terapötik maddeleri bireyselleştirilmiş bir yaklaşımla incelemek için geliştirilmiş bir ex vivo modeli temsil eder.