Name: Farelerde Miyokardiyal İskemi Reperfüzyonu Sonrası Koroner Akış Rezervinin Dinamik Değerlendirmeleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-08-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Keşfedin farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyon sonrası koroner akış rezervinin dinamik değerlendirmesini. Bu modifiye parasternal uzun eksen görüntüleme yöntemi, sol ön inen arterin hızlı lokalizasyonunu sağlar ve kardiyovasküler araştırmalarda erken izlemeyi kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe No. 82270352), Pekin Araştırma Koğuşu İnşaatı Klinik Araştırma Projesi (2022-YJXBF-04-03), Ulusal Üst Düzey Hastane Klinik Araştırma Fonu (2022-NHLHCRF-YSPY-01), Capital's Founds for Health Improvement and Research (No. 2022-1-4062), Ulusal Anahtar Klinik Uzmanlık Disiplini İnşaat Programı (Hibe No. 2020-QTL-009) ve Çin Kardiyoloji Derneği Vakfı (No. CSCF2021B02).

Tüm deneyler Pekin Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Bu çalışma için 8-12 haftalık erkek C57 fareleri kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bkz.
1. Hayvan hazırlama
<ol><li>Tüy dökücü krem kullanarak prekordiyal bölgedeki tüyleri alın (bkz. Malzeme Tablosu). Ardından, 2. adımı izleyerek ultrason görüntülerini almaya devam edin.</li>
</ol>2. IR ameliyatı öncesi ultrason görüntüleme
<ol><li>Fareyi izofluran indüksiyon odasına yerleştirerek uyuşturun (Malzeme Tablosuna bakınız) ve 1.5-2.0 L / dak O2 akışı ile% 1.5'lik bir konsantrasyonda izofluran dağıtımını başlatın.</li>
	<li>Anestezi uygulanmış fareyi fizyolojik izleme platformu (ultrason sisteminin görüntüleme platformu, bkz . Malzeme Tablosu) üzerinde sırtüstü pozisyonda konumlandırın. Fizyolojik izleme masasının bakır tabakasına az miktarda iletken jel uygulayın ve EKG ve solunum hakkında fizyolojik bilgi elde etmek için fare pençelerini üzerine düşük yapışkan bantla sabitleyin. Yerleşik ısıtma platformunu kullanarak vücut ısısını 37-38 °C'de tutun. NOT: Gaz anestezi makinesinin kontrol anahtarını hazneden maskeye geçirin ve bu süre zarfında anestezik dozu %1.5'te sabit tutun. Bu noktada farelerin kalp atış hızı yaklaşık 350-450 atım/dk olmalıdır.</li>
	<li>Kuruluğu önlemek için görüntülemeden önce gözlere oftalmik veteriner merhemi sürün.</li>
	<li>40 MHz lineer prob9 (örneğin, fareler için MS550 probu) kullanarak transtorasik ekokardiyografi yapın (Şekil 1A). NOT: Ultrason makinesi MS550 probu ile donatılmıştır.</li>
	<li>Optimum görüntü kalitesini sağlamak için ultrason iletim jelini bolca uygulayın ( Malzeme Tablosuna bakın).</li>
	<li>B modunda sol ön inen arteri (LAD) incelemek için modifiye edilmiş bir parasternal uzun eksen (PLAX) görünümü9 (Şekil 1A) oluşturmak için probun ve platformun konumunu ayarlayın. Kısaca, platform yanal olarak hizalanmış ve prob ile platform arasında küçük bir açıyla konumlandırılmış bir parasternal uzun eksen görünümü kullanarak kalbi görüntüleyin.</li>
	<li>B modunda uygun kalp bölümünü bulun ve dokunmatik ekranda Renkli Doppler'ı etkinleştirin (Şekil 1B). LAD (beyaz ok) sol ventrikül duvarı içinde tanımlanabilir (Şekil 1B). Gerçek zamanlı kırmızı renk, kan akışının yönünü gösterir (yani, kan akışı proba doğrudur). NOT: X eksenini ayarlayarak, Renkli Doppler, bu görüntü penceresi içinde tüm LAD'ın (aort sinüsünden distal dal bölgesine kadar) görselleştirilmesine izin verir.</li>
	<li>Doğru pozisyonu bulmak ve pulmoner ven kan akışının etkisini azaltmak için probu hafifçe hareket ettirin. NOT: Pulmoner ven kan akışının etkisini azaltmak için, probu hafifçe ayarlayın ve LAD'yi pulmoner venden ayırt edin. LAD sol ventrikül duvarında ilerlerken, pulmoner ven sol atriyuma drene olur. Renkli Doppler'ı kullanarak LAD'yi bulun ve uygun bölümü seçmek için B-Modunu kullanın.</li>
	<li>LAD'yi Renkli Doppler modunda görselleştirdikten sonra, Darbe Dalgası (PW) düğmesine basın ve PW moduna geçin. Sarı gösterge çizgisini koroner arter üzerine yerleştirin ve akış yönüne paralel olduğundan emin olun. Ardından Klibi Kaydet Temel verileri kaydetmek için düğmesine basın.</li>
	<li>İzofluran konsantrasyonunu% 3'e yükseltin ve 30 saniye bekleyin. Akış hızının zamanla kademeli olarak arttığından emin olun. En yüksek kan akış hızını yakalamak için Klibi Kaydet düğmesine sık sık basın. NOT: İzofluran uyaranı kalbin daha fazla çalışmasına neden olarak kalbin ve LAD'nin olası hareketine yol açar. PW modundaki görüntü yakalandıktan veya saklandıktan sonra, sarı gösterge çizgisinin LAD üzerinde olduğundan emin olmak için PW moduna tıklayın. Yer değiştirme meydana gelirse, sarı gösterge çizgisini kan akış noktasına hafifçe ayarlayın ve kayda devam edin. Bu süreç hızlı ustalık ve geçiş gerektirir.</li>
	<li>Koroner kan akışı görüntülerini topladıktan sonra, anesteziyi kapatın ve probu normal PLAX görünümüne ayarlayın. Fare kalp atış hızının yavaşça yaklaşık 500 bpm'ye yükselmesini bekleyin, ardından probu parasternal kısa eksen bölümüne (PSAX) geçirerek fare kalbi işlevini ölçün.</li>
	<li>Ekokardiyografik görüntülemeyi tamamladıktan sonra, hayvanı platformdan çıkarın ve ev kafesinde iyileşmesine izin verin. Jeli çıkarın ve hipotermiyi önlemek için hayvanın kurumasını bekleyin.</li>
	<li>Görüntülerden sırasıyla tepe diyastolik hızları ve kalp sistolik fonksiyonunu elde etmek için Peak Vel ve LV fonksiyon araçlarını kullanın.</li>
	<li>CFR'yi, maksimum akışta diyastolik tepe koroner akış hızının (CFV) başlangıçta diyastolik tepe CFV'ye oranı olarak hesaplayın.</li>
</ol>3. Miyokardiyal iskemi-reperfüzyon prosedürü
NOT: İlk ölçüm başlangıç seviyesindeydi ve daha sonra aynı hayvan üzerinde ameliyat yapıldı.

<ol><li>Fareleri sodyum pentobarbital (60 mg / kg) ile uyuşturun ve analjezik karprofen (5 mg / kg, deri altı enjeksiyon) uygulayın. Cerrahi prosedür boyunca önceden ısıtılmış bir ısıtma yastığı (37 °C) kullanın. Ayak parmağını kıstırma ve göz kırpma reflekslerine geri çekilme refleksi olmadan uygun anestezi derinliğini sağlayın. Fareyi sırt üstü ısıtma yastığının üzerine yerleştirin ve kurumasını önlemek için gözlere oftalmik merhem sürün. Mekanik ventilasyon için endotrakeal entübasyon yapın: Boyun kıllarını çıkarmadan önce ve sonra alanı 3 alternatif betadin veya klorheksidin ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. Trakeayı bulun ve kateteri yavaşça yerleştirin. Ardından, fareleri ventilatöre bağlayın (120 nefes/dk'da 250 μL'lik inspiratuar tidal hacim) ( bkz.</li>
	<li>Prekordiyal bölgenin cildini 3 alternatif betadin veya klorheksidin ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. Dördüncü interkostal boşlukta sol torakotomi10 yaparak kalbi açığa çıkarın.</li>
	<li>Sol ön inen arteri (LAD) 5-0 ipek sütür kullanarak bir slipknot ile bağlayın (bkz. Malzeme Tablosu), sol atriyal apendiksin kökünün 1-2 mm altına yerleştirin. Dikiş yönünün sol atriyal apendiksin alt kenarına paralel olduğundan emin olun. İskemik miyokardın lokal renk koyulaşması ile tüm farelerde iskemiyi görsel olarak doğrulayın.</li>
	<li>LAD arterini 30 dakika boyunca tıkayın11. 30 dakika sonra, bağı serbest bırakın ve 1-2 dakika boyunca kalp kasının daha önce renksiz olan bölgesinin kızarmasını gözlemleyerek reperfüzyonu doğrulayın.</li>
	<li>Koroner oklüzyon/reperfüzyondan sonra göğsü katmanlar halinde kapatın ve farelerin yaklaşık yarım saat iyileşmesine izin verin11.</li>
</ol>4. IR ameliyatı sonrası ultrason görüntüleme
<ol><li>CFR'yi reperfüzyondan sırasıyla 1 saat, 3 saat, 5 saat, 8 saat, 24 saat ve 48 saat sonra, bölüm 2'de belirtilen adımları izleyerek tekrar ölçün. Bu ölçümleri iskemi-reperfüzyon (IR) prosedüründen önce elde edilen CFR değerleriyle karşılaştırın.</li>
</ol>5. İstatistiksel analiz
<ol><li>Uygun istatistiksel analiz yazılımını kullanarak istatistiksel analizler yapın (bkz. Malzeme Tablosu). NOT: Eşleştirilmiş örnekler arasındaki sürekli değişkenlerin karşılaştırılması için, veriler normal olarak dağılmışsa eşleştirilmiş t-testlerini kullanın. Normal olarak dağıtılmayan veriler için veya normallik varsayımları karşılanmadığında, Friedman'ın ANOVA'sını kullanın. p < 0.05'i istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edin.</li>
</ol>

İskemi Sonrası CFR Değişiklikleri: Mikrovasküler Disfonksiyon için Çıkarımlar

<ol><li>O'Farrell, F. M., Mastitskaya, S., Hammond-Haley, M., Freitas, F., Wah, W. R., Attwell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+pericytes+mediate+coronary+no-reflow+after+myocardial+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Capillary pericytes mediate coronary no-reflow after myocardial ischaemia.</a> Elife. 6, e29280(2017).</li>
<li>Dimitrow, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transthoracic+Doppler+echocardiography-noninvasive+diagnostic+window+for+coronary+flow+reserve+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+ultrasound%22%5BJournal%5D)">Transthoracic Doppler echocardiography-noninvasive diagnostic window for coronary flow reserve assessment.</a> Cardiovascular ultrasound. 1, 4(2003).</li>
<li>Picano, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+echocardiography%3A+a+historical+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Stress echocardiography: a historical perspective.</a> The American Journal of Medicine. 114 (2), 126-130 (2003).</li>
<li>Lim, D. S., Kim, Y. H., Lee, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+is+reflective+of+myocardial+perfusion+status+in+acute+anterior+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Catheterization+and+Cardiovascular+Interventions%3A+Official+Journal+of+The+Society+For+Cardiac+Angiography+%26+Interventions%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve is reflective of myocardial perfusion status in acute anterior myocardial infarction.</a> Catheterization and Cardiovascular Interventions: Official Journal of The Society For Cardiac Angiography & Interventions. 51 (3), 281-286 (2000).</li>
<li>Feldman, L. J., Himbert, D., Juliard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reperfusion+syndrome%3A+relationship+of+coronary+blood+flow+reserve+to+left+ventricular+function+and+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Reperfusion syndrome: relationship of coronary blood flow reserve to left ventricular function and infarct size.</a> Journal of the American College of Cardiology. 35 (5), 1162-1169 (2000).</li>
<li>Cortigiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+during+dipyridamole+stress+echocardiography+predicts+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovascular+imaging%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve during dipyridamole stress echocardiography predicts mortality.</a> JACC Cardiovascular imaging. 5 (11), 1079-1085 (2012).</li>
<li>Han, B., Wei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+coronary+hemodynamic+changes+evaluated+by+intracardiac+echocardiography+during+myocardial+ischemia+and+reperfusion+in+a+canine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Echocardiography+%28Mount+Kisco%2C+NY%29%22%5BJournal%5D)">Proximal coronary hemodynamic changes evaluated by intracardiac echocardiography during myocardial ischemia and reperfusion in a canine model.</a> Echocardiography (Mount Kisco, NY). 25 (3), 312-320 (2008).</li>
<li>Kelm, N. Q., Beare, J. E., LeBlanc, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+coronary+flow+reserve+after+myocardial+ischemia+reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Evaluation of coronary flow reserve after myocardial ischemia reperfusion in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. 148, e59406(2019).</li>
<li>Batra, A., Warren, C. M., Ke, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+P21-activated+kinase-1+induces+age-dependent+increased+visceral+adiposity+and+cardiac+dysfunction+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Deletion of P21-activated kinase-1 induces age-dependent increased visceral adiposity and cardiac dysfunction in female mice.</a> Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (3), 1337-1349 (2021).</li>
<li>Lv, B., Zhou, J., He, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarction+and+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. 179, e63257(2022).</li>
<li>Huang, G., Lu, X., Duan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PCSK9+knockdown+can+improve+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury+by+inhibiting+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Toxicology%22%5BJournal%5D)">PCSK9 knockdown can improve myocardial ischemia/reperfusion injury by inhibiting autophagy.</a> Cardiovascular Toxicology. 22 (12), 951-961 (2022).</li>
<li>Lenzarini, F., Di Lascio, N., Stea, F., Kusmic, C., Faita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+isoflurane-induced+vasodilation%3A+a+Doppler+ultrasound+study+of+the+left+coronary+artery+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Time course of isoflurane-induced vasodilation: a Doppler ultrasound study of the left coronary artery in mice.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 42 (4), 999-1009 (2016).</li>
<li>Chowdhury, S. A. K., Rosas, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+characterization+of+left+ventricular+structure%2C+function%2C+and+coronary+flow+in+neonate+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic characterization of left ventricular structure, function, and coronary flow in neonate mice.</a> Journal of Visualized Experiments. 182, e63539(2022).</li>
<li>Sadauskiene, E., Zakarkaite, D., Ryliskyte, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+evaluation+of+myocardial+reperfusion+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+and+single-photon+emission+computed+tomography+in+patients+with+anterior+acute+myocardial+infarction+%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Non-invasive evaluation of myocardial reperfusion by transthoracic Doppler echocardiography and single-photon emission computed tomography in patients with anterior acute myocardial infarction .</a> Cardiovascular Ultrasound. 9, 16(2011).</li>
<li>Bax, M., de Winter, R. J., Schotborgh, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-+and+long-term+recovery+of+left+ventricular+function+predicted+at+the+time+of+primary+percutaneous+coronary+intervention+in+anterior+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Short- and long-term recovery of left ventricular function predicted at the time of primary percutaneous coronary intervention in anterior myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 43 (4), 534-541 (2004).</li>
<li>Lee, S., Otsuji, Y., Minagoe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+evaluation+of+coronary+reperfusion+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+in+patients+with+anterior+acute+myocardial+infarction+before+coronary+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Noninvasive evaluation of coronary reperfusion by transthoracic Doppler echocardiography in patients with anterior acute myocardial infarction before coronary intervention.</a> Circulation. 108 (22), 2763-2768 (2003).</li>
<li>Kelshiker, M. A., Seligman, H., Howard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+and+cardiovascular+outcomes%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve and cardiovascular outcomes: a systematic review and meta-analysis.</a> European Heart Journal. 43 (16), 1582-1593 (2022).</li>
<li>Taqueti, V. R., Di Carli, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+disease+pathogenic+mechanisms+and+therapeutic+options%3A+JACC+state-of-the-art+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular disease pathogenic mechanisms and therapeutic options: JACC state-of-the-art review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2625-2641 (2018).</li>
<li>Wikström, J., Grönros, J., Gan, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine+induces+dilation+of+epicardial+coronary+arteries+in+mice%3A+relationship+between+coronary+flow+velocity+reserve+and+coronary+flow+reserve+in+vivo+using+transthoracic+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Adenosine induces dilation of epicardial coronary arteries in mice: relationship between coronary flow velocity reserve and coronary flow reserve in vivo using transthoracic echocardiography.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 34 (7), 1053-1062 (2008).</li>
</ol>

Yazarlar, bu yazıda rapor edilen çalışmayı etkilemiş gibi görünebilecek, bilinen hiçbir rekabet eden ticari veya finansal ilişkiye sahip olmadıklarını beyan ederler.

Bu çalışma, iskemi-reperfüzyon sonrası CFR'yi dinamik olarak değerlendirmek için modifiye edilmiş bir parasternal uzun eksen görünümü kullanan bir protokol sunmaktadır. Başlıca bulgular, IR farelerinde CFR'de önemli bir azalmaya işaret etmektedir ve en belirgin azalma reperfüzyondan 1 saat sonra gözlenmektedir. Bununla birlikte, kardiyak fonksiyon 48 saat içinde etkilenmedi.
CFR, miyokardiyal kan akımının bir göstergesi olarak hizmet eder ve hem koroner arter darlığını hem de koroner mikrovasküler dolaşımı değerlendirmek için noninvaziv bir yaklaşım sunar. Klinik çalışmalar, düşük CFR değerlerinin daha kötü prognozlarlailişkili olduğunu göstermiştir 14,15,16 ve 1.75'lik bir CFR kesme değeri risk sınıflandırması için optimal olarak belirlenmiştir 14. Yakın zamanda yapılan bir meta-analiz ayrıca, CFR'deki her 0.1 birimlik azalma için ölüm riskinin %16 arttığını gösterdi, bu da CFR'nin bir risk sürekliliğini temsil ettiğini ve daha düşük seviyelerin hastaları daha kötü klinik sonuçlara yatkın hale getirdiğini gösterdi17. Bu çalışmada, CFR, reperfüzyon süresinin uzamasıyla birlikte artma eğilimi göstermiş, ancak işlem öncesine göre daha düşük kalmıştır ve hastaların sadece suçlu damarı PCI ile açıldıktan hemen sonra değil, aynı zamanda 48. saatte de izlenmesinin önemini vurgulamıştır. Ayrıca, CFR, fokal, diffüz ve küçük damar hastalığının miyokard dokusu perfüzyonu üzerindeki hemodinamik etkilerini entegre ederek koroner mikrovasküler disfonksiyonun bir ölçüsü olarak hizmet eder18. Bu nedenle CFR, koroner mikrovasküler hastalıkların teşhisi için çok önemli bir noninvaziv tekniktir. LAD üzerinde CFR, mortaliteningüçlü ve bağımsız bir göstergesi 6,7 olduğundan, bu çalışma klinik kararlar için referans değerler sağlamayı amaçlamaktadır. Ayrıca, ultrason makinelerinin kullanımı, sağlık hizmetleri maliyet sınırlama ortamında koroner anjiyografi ihtiyacını potansiyel olarak azaltabilir. Uygun şekilde eğitim ve teknoloji geliştirilerek, risk sınıflandırması bireysel hasta ihtiyaçlarına göre uyarlanabilir.
Değiştirilmiş PLAX görünümü, bilimsel araştırmacılar için daha fazla kolaylık ve zaman tasarrufu sağlar. Bu teknolojinin sürekli iyileştirilmesi, diğer koroner mikrovasküler hastalıklarda daha geniş uygulamasını kolaylaştıracaktır. Bu protokoldeki temel adımlar, koroner arterin görselleştirilmesini ve yüksek kaliteli PW hızı görüntülerinin elde edilmesini içerir. Kan akış hızı, artan anestezik konsantrasyon ile kademeli olarak artar, bu nedenle maksimum kan akış hızını kaçırmamak için sürekli yakalama önerilir. Artan anestezik konsantrasyonu kalp atış hızını değiştirebileceğinden, ölçümden önce ve sonra tutarlı konumlandırma sağlamak için ölçüm sırasında kısa bir süre Renkli Doppler moduna dönülmesi önerilir.
CFR'nin ultrason ölçümüne özgü sınırlamalar da dahil olmak üzere sınırlamaları kabul etmek önemlidir. Koroner arterin eğriliği nedeniyle, tüm arteri tam olarak görüntülemek mümkün değildir, bu da sadece bir segmentte ölçüme yol açar. Operatörler, maksimum koroner kan akış hızı noktasını mümkün olduğunca doğru bir şekilde belirlemek için koroner arterin başlangıcını ölçmeyi hedeflemelidir. Ek olarak, CFR ideal olarak koroner kan akış hacmindeki değişikliklere dayanarak belirlenmelidir, ancak bu çalışma damar çapının etkisini göz ardı ederek kan akış hacmi yerine kan akış hızını kullanır. Bununla birlikte, önceki çalışmalar CFR ve CFVR (koroner akış hızı rezervi) arasında güçlü bir korelasyon olduğunu göstermiştir19. Koroner mikrovasküler fonksiyon üzerine daha fazla araştırma, iskemideki karmaşık değişikliklerin anlaşılmasına yardımcı olabilir ve koroner mikrovasküler disfonksiyonu daha iyi anlamamızı sağlayabilir.

Koroner kalp hastalığı, dünya çapında önde gelen ölüm nedenlerinden biri olarak durmaktadır1. Kardiyak iskemi sonrası suçlu koroner arter primer perkütan koroner girişim (PCI) ile tekrar açılsa bile, koroner mikrovasküler perfüzyon sıklıkla azalmış kalır. Ek olarak, miyokard1'i besleyen aşağı akış kılcal damarlarında reperfüzyon garantisi yoktur. "Yeniden akış yok fenomeni" olarak bilinen bu fenomen, klinik ilerleme ve kötü prognoz ile bağlantılıdır. Sonuç olarak, başarılı reperfüzyon tedavisinden sonra yeterli mikrovasküler reflowun elde edilmesi miyokardiyal kurtarma için kritik hale gelir. Bu nedenle, revaskülarizasyonu takiben mikrovasküler fonksiyonun erken değerlendirilmesi klinik uygulamalar için çok önemlidir.
Mikrovasküler fonksiyonu değerlendirmek için mikrodolaşım direnci (IMR) ve hiperemik mikrovasküler direnç (HMR) indeksine invaziv intrakoroner sıcaklık/basınç kılavuz teli, non-invaziv kardiyovasküler manyetik rezonans (CMR), tek foton emisyon bilgisayarlı tomografi (SPECT) ve Pozitron emisyon tomografisi (PET) gibi çeşitli teknikler kullanılabilir2. Bununla birlikte, bu yöntemler ya invaziv ya da yarı invazivdir, pahalıdır ve çoğu zaman kolayca bulunamaz, bu da klinik yararlılıklarını sınırlar. Öte yandan, transtorasik Doppler ekokardiyografi ile koroner akım rezervinin (CFR) değerlendirilmesi, diğer yöntemlerde görüldüğü gibi hastaları iyonlaştırıcı radyasyona maruz bırakmadan, invaziv olmayan, nispeten basit ve uygun maliyetli bir yaklaşım sunmaktadır3.
Önceki çalışmalarda farelerde ve sıçanlarda CFR'yi ölçmek için transtorasik Doppler ekokardiyografi kullanılmış olsa da, operatörlerin platform, fareler ve prob arasındaki karmaşık açıları bulmaları için zorluklar devam etmektedir. Bu protokol, sol ön inen arter (LAD) koroner arterini bulmak ve modifiye parasternal uzun eksen (PLAX) görünümünü kullanarak CFR'yi hızlı bir şekilde ölçmek için daha kolay bir yöntem sağlayarak bu sorunun üstesinden gelir.
Ayrıca, suçlu lezyonun distalindeki enfarktüs ilişkili arterde (IRA) elde edilen CFR, miyokardiyal kontrast ekokardiyografi (MCE) ile değerlendirilen perfüzyon durumu ile güçlü bir korelasyon göstermiştir4. Ayrıca, akut miyokard enfarktüsünden () sonra canlılık ve sol ventrikül (LV) fonksiyonunun iyileşmesi için öngörücü bir belirteç olarak tanımlanmıştır5. Ek olarak, CFR, tüm nedenlere bağlı mortalite ve olumsuz kardiyovasküler sonuçlar için güvenilir bir belirteç olarak belirlenmiştir 6,7. Önceki raporlar, miyokard enfarktüsünün sıçan modellerinde CFR'yi değerlendirmek için ekokardiyografinin kullanımını tanımlamıştır8. Bununla birlikte, iskemi-reperfüzyonun erken evresindeki CFR tam olarak çalışılmamıştır. Bu nedenle, bu çalışma, reperfüzyonun erken evresindeki IR farelerinde dinamik testler yoluyla mikrovasküler disfonksiyonun teşhisi ve iskemi-reperfüzyonun terapötik etkisinin değerlendirilmesi için bir referans değer sağlar.

<table><tbody><tr><td>5-0 ipek sütür</td><td>Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd.</td><td></td><td></td>210322</tr><tr><td>C57 fareler</td><td>Pekin Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi Laboratuvar Hayvanları Bilimi</td><td></td><td></td>Bölümü</tr><tr><td>Tüy dökücü ajan</td><td>Nair</td><td>NAR-255-1</td><td></td></tr><tr><td>Elektrot jeli</td><td>Cofoe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Frekanslı Ultrason</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>Vevo3100</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>REWARD</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>Doğrusal dizi yüksek frekans dönüştürücü</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>MS550</td><td></td></tr><tr><td>Kemirgen Vantilatörü</td><td>Shanghai Alcott Biotech</td><td>ALC-V9</td><td></td></tr><tr><td>Küçük Hayvan Anestezi Makinesi</td><td>ÖDÜL</td><td>R530</td><td></td></tr><tr><td>SPSS</td><td>IBM Corp, Armonk, NY, ABD</td><td>sürüm 23.0&nbsp;</td><td>İstatistiksel Analiz Yazılımı</td></tr><tr><td>Ultrason Jel</td><td>Cofoe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vevo Laboratuvar Yazılımı</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td></td><td>Sürüm 5.7.0</td></tr></tbody></table>

farelerde miyokardiyal İskemi reperfüzyonu sonrası koroner akış rezervinin dinamik değerlendirmeleri

Dynamic Assessments of Coronary Flow Reserve after Myocardial Ischemia Reperfusion in Mice

Kardiyak iskemiden sonra, yukarı akış arterinde akış başarılı ve tamamen restore edilmiş olsa bile, genellikle yetersiz miyokard perfüzyonu vardır. "Yeniden akış olmayan fenomen" olarak bilinen bu fenomen, koroner mikrovasküler disfonksiyona atfedilir ve kötü klinik sonuçlarla ilişkilendirilmiştir. Klinik uygulamada, koroner arter hastalığının bir göstergesi olarak koroner akım rezervinde (CFR) bir azalma sıklıkla kullanılmaktadır. CFR, farmakolojik veya metabolik faktörler tarafından indüklenen tepe akış hızının dinlenme akış hızına oranı olarak tanımlanır.
Bu protokol, nabız dalgası Doppler ölçümleri kullanılarak iskemi-reperfüzyon (IR) öncesi ve sonrası CFR'deki dinamik değişikliklerin değerlendirilmesine odaklanmıştır. Bu çalışmada, normal fareler, izofluran stimülasyonu altında koroner kan akışının tepe hızını dinlenme değerlerinden iki kat daha fazla artırma yeteneğini sergiledi. Bununla birlikte, iskemi-reperfüzyondan sonra, 1 saat sonra CFR, operasyon öncesi taban çizgisine kıyasla önemli ölçüde azaldı. Zamanla, CFR kademeli bir toparlanma gösterdi, ancak normal seviyenin altında kaldı. Sistolik fonksiyonun korunmasına rağmen, mikrovasküler disfonksiyonun erken tespiti çok önemlidir ve pratik bir rehber oluşturmak, doktorlara bu görevde yardımcı olabilirken, aynı zamanda zaman içinde kardiyovasküler hastalık ilerlemesinin incelenmesini de kolaylaştırabilir.

Bu çalışma, CFR'nin dinamik değişimini karakterize etmek için erkek C57 farelerini (BW ~ 18-20 g) kullandı. Modifiye PLAX görüntüsü, LAD'nin koroner arter akım özelliklerini değerlendirmek için kullanıldı (Şekil 1A,B). CFR, %3 izofluran tarafından indüklenen maksimum vazodilatasyon sırasında maksimum akış hızının, %1.5 izofluran konsantrasyonu12,13 taban çizgisinde maksimum akış hızına oranı olarak hesaplandı. Tüm ölçümler ve hesaplamalar, art arda üç kardiyak döngü boyunca tekrarlandı ve ortalaması alındı, temsili sonuçlar Şekil 2'de gösterilmiştir.
IR ameliyatından önce, başlangıç CFR ölçüldü ve farelerin normal CFR değeri 2.14 ± 0.43 civarındaydı. Bununla birlikte, IR cerrahisinden sonra, CFR 1 saat reperfüzyonda IR cerrahisi öncesine göre anlamlı olarak azaldı (1.18 ± 0.14'e karşı 2.14 ± 0.43) (Şekil 3A). Bu azalma, suçlu damar açıldıktan sonra bile mikrosirkülasyonun hemen geri yüklenmediğini gösterdi. Reperfüzyon süresi uzadıkça, CFR değerleri sürekli olarak düşük bir seviyede kaldı, 3 saatte 1.21 ± 0.20, 5 saatte 1.39 ± 0.33, 8 saatte 1.44 ± 0.38, 24 saatte 1.34 ± 0.36 ve reperfüzyondan 48 saat sonra 1.48 ± 0.47 değerleri, hipoperfüzyonun en az iki gün devam edebileceğini düşündürmektedir (Şekil 3A). Ayrıca, 1 saat, 3 saat, 5 saat, 8 saat, 24 saat ve 48 saat CFR değerleri arasında istatistiksel bir anlamlılık yoktu.
Fareler ayrıca kardiyak fonksiyon açısından da izlendi ve farelerde CFR önemli ölçüde azaldığında sol ventrikül kardiyak fonksiyonunda önemli bir değişiklik olmadığı gözlendi (Şekil 3B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65391/65391fig01.jpg"> Şekil 1: Değiştirilmiş parasternal uzun eksen görünümü. (A), LAD'nin koroner arter hızını elde ederken prob ve platformun konumunu göstermektedir. (B) Nabız Dalgası hız sensörünün LAD koroner arter üzerindeki yerleşimini gösterir. Mavi renk ultrason probundan uzaklaşmayı gösterirken, turuncu renk ultrason probuna doğru hareketi gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65391/65391fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65391/65391fig02.jpg"> Şekil 2: LAD'nin Nabız Dalga Hızı görüntülemesinin görselleştirilmesi ve kaydedilmesi. (A) LAD koroner arterin dinlenme durumu sırasında Nabız Dalgası görüntüsü. (B) LAD koroner arterin maksimum hiperemik koroner Nabız Dalgası görüntüsü. Mavi renk, ultrason probundan uzaklaşmayı gösterirken, turuncu renk ultrason probuna doğru hareketi gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65391/65391fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65391/65391fig03.jpg"> Şekil 3: Koroner akım rezervi ve ejeksiyon fraksiyonunun ölçümü. (A) İskemi öncesi ve reperfüzyondan 1 saat, 3 saat, 5 saat, 8 saat, 24 saat ve 48 saat sonra hayvanlarda CFR'nin istatistiksel analizi (n = 9). (B) Her zaman noktasında her gruptan ejeksiyon fraksiyonunun değerlendirilmesi (n = 9). *p &lt; 0.05; ortalama ± SD olarak sunulan veriler, eşleştirilmiş t-testleri ve Friedman'ın ANOVA'sı ile analiz edildi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65391/65391fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Bu protokol, sol ön inen arterin hızlı ve kesin lokalizasyonu için modifiye edilmiş bir parasternal uzun eksen görünümünü tanımlamaktadır. Bu yaklaşım, farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyonu takiben koroner akış rezervindeki dinamik değişikliklerin incelenmesini kolaylaştırırken daha basit ve daha kullanıcı dostu olacak şekilde tasarlanmıştır.

Farelerde Miyokardiyal İskemi Reperfüzyonu Sonrası Koroner Akış Rezervinin Dinamik Değerlendirmeleri

After cardiac ischemia, there is often insufficient myocardial perfusion, even if flow has been successfully and completely restored in an upstream ...

Protokolümüz, sol ön inen arterin hızlı ve kesin lokalizasyonu için modifiye edilmiş bir parasternal uzun eksen görünümünü tanımlar. Bu yaklaşımı kullanarak, farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyonu takiben koroner akış rezervindeki dinamik değişiklikleri inceledik. Bu çalışma, zamandan tasarruf sağlayan ve bilimsel araştırmacılar için kolaylık sağlayan değiştirilmiş bir PLAX görünümü sunmaktadır.Ek olarak, çalışma, CFR'nin baz reperfüzyon süresi uzamasını arttırdığını, ancak prosedür öncesinden daha düşük kaldığını ve PCI sonrası erken izlemenin önemini vurguladığını buldu. Protokolümüz, platform, fareler, prob ve murin CFR arasındaki karmaşık açıların bulunmasını basitleştirir.

dynamic-assessments-coronary-flow-reserve-after-myocardial-ischemia

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz tekrar elde edilebilirliğini arttırmak için, sol ön inen arter (LAD) üzerine ligasyon konumlandırma daha fazla netlik sağlar fare modellerinde miyokard infarktüsü (MI) simüle etmek için deneysel iskemi / reperfüzyon (I / R) hasarı ikna etmek için bir cerrahi yöntemi tanıtmak Farelerde MI deneyler.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Koroner akım rezervi (CFR), miyokardiyal oksijen ihtiyacının değerlendirilmesi ve kardiyovasküler riskin değerlendirilmesi için yararlıdır. Bu çalışma, aort bantlamasının deneysel aşırı basınç yükü altında, farelerde koroner arterden ölçüldüğü şekliyle CFR'deki değişikliklerin uzunlamasına izlenmesi için adım adım transtorasik Doppler ekokardiyografik (TTDE) bir yöntem oluşturmaktadır.

Farelerde Basınç Aşırı Modeli Koroner Arter Akış ve Koroner Akım Rezervi Ultrason Dayalı Değerlendirme

Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu, perfüzyonu, metabolizmayı ve iyotlu kontrast madde ile canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MikroBT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, insan kalbi hastalığının çeşitli hayvan modellerinin tahribatsız, yüksek verimli uzunlamasına in vivo görüntülenmesi için uygulanabilir.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

Akut miyokard infarktüsünde farelerde sol ventrikül (LV) fonksiyonları akut ama eksik olarak karakterize değişimler neden olmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet vermektedir.

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Koroner akış rezervi (CFR), maksimum koroner kan akışının istirahat koroner kan akışına oranı olarak tanımlanır. Biz obstrüktif koroner hastalığın yokluğunda kardiyovasküler risk faktörleri tahmin etmek için fırsat sunan ultrason yoluyla fareler CFR değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

Farelerde miyokardiyal Iskemi reperfüzyon sonrası koroner akış rezervi değerlendirilmesi

Bu raporda, ışıkla sertleşen diş reçine elektrotlar veya kronik deneylerde mikrodiyaliz probları montaj tabanı için yeni bir uygulama öneriyorum. Bu malzeme, kafatası doğrudan yapıştırma sağlar.

Kronik Deneyleri Montaj Elektrotlar veya mikrodiyaliz Problar Işık tedavi Diş Yapıştırıcı Reçine Uygulama

VE Dik Görüntüleme Drosophila Embriyolar

Genom ve fenotipik varyasyon bir alt kümesi içinde genomik değişimi besin stres altında bazı keten çeşitleri Büyüyen. Belirli bir yerinde karmaşık bir ekleme çeşitli besin rejimler altında büyüme ile bu sitede çevresinde gen ekspresyonu değişiklikleri ile ilişkilidir.

Keten içinde değişiklikler Kalıtsal Çevre İndüklenmiş

Floresan aktif hücre sıralama (FACS) ile rafine bir hücre disosiasyon protokolü birleştirir fare testis yüksek derecede saflaştırılmış yaşayabilir mayotik kesirler elde etmek için etkili bir yöntem açıklanmıştır. Bu yöntem, DNA içeriği ve ayrık mayotik kesirler nükleer yoğunluğu farklılıkları yararlanır.

Fare Mayotik Hücreler Sitometrisi Arıtma

Akış Sitometri tabanlı Arıtma<em&gt; S. cerevisiae</em&gt; Zigot

Keşfedin farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyon sonrası koroner akış rezervinin dinamik değerlendirmesini. Bu modifiye parasternal uzun eksen görüntüleme yöntemi, sol ön inen arterin hızlı lokalizasyonunu sağlar ve kardiyovasküler araştırmalarda erken izlemeyi kolaylaştırır.

Farelerde Miyokardiyal İskemi Reperfüzyonu Sonrası Koroner Akış Rezervinin Dinamik Değerlendirmeleri

Daha fazla video keşfet