Name: Eksozom Yüklü Kollajen Yaması ve Off-pump Koroner Arter Baypas Grefti ile Tedavi Edilen Kronik Miyokard İskeminin Cerrahi Domuz Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-15T13:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 25 s
Description: Keşfedin, kronik miyokard iskemisinin cerrahi domuz modelinde eksozom yüklü kollajen yama ve off-pump koroner arter baypas grefti ile kalp fonksiyonunun iyileştirilmesini. Bu yöntem, mitokondriyal restorasyon ve inflamasyon azaltma mekanizmalarını araştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Amerika Birleşik Devletleri'nden (ABD) VA Merit Review #I01 BX000760 (RFK) tarafından desteklenmiştir. Gazi İşleri Bakanlığı BLR&D ve ABD Gazi İşleri Bakanlığı #I01 BX004146 (TAB) hibe ediyor. Ayrıca Minnesota Üniversitesi Lillehei Kalp Enstitüsü'nün desteğini de minnetle kabul ediyoruz. Bu çalışmanın içeriği, Amerika Birleşik Devletleri Hükümeti'nin ABD Gazi İşleri Bakanlığı'nın görüşlerini temsil etmemektedir.

Minneapolis VA Tıp Merkezi ve Minnesota Üniversitesi'nin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komiteleri (IACUC) tüm hayvan çalışmalarını onayladı. Laboratuvar hayvanlarının kullanımı ve bakımı için mevcut Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) kılavuzlarına uyuldu.
1. Mezenkimal kök hücrelerin izolasyonu ve eksozomların hazırlanması ve karakterizasyonu
<ol><li>Kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (MSC'ler) izolasyonu<ol><li>20 haftalık bir dişi Yorkshire-Landrace domuzunun sternum veya tibiasından 30-50 mL steril kemik iliği elde edin. Bunu yapmak için, sternuma veya tibiaya 25 mm'lik 15G interosseöz bir iğne sokun ve numuneyi 10 mL heparin içeren 60 mL'lik bir şırıngaya çekin. NOT: Kemik iliğinin toplanması hakkında daha fazla ayrıntı için Pittenger ve ark. ve Hocum-Stone ve ark.12,16.</li>
		<li>Kısaca, kemik iliği örneğini 1800 x g'da 30 dakika boyunca heparinli bir Vacutainer CPT tüpünden geçirin.</li>
		<li>Mononükleer hücreleri içeren buffy kaplamayı çıkarın ve Hank'in dengeli tuz solüsyonu ile yıkayın. Santrifüjleme ile pelet mononükleer hücreler ve büyüme ortamında yeniden süspansiyon (% 10 fetal sığır serumu [FBS]).</li>
		<li>Yapışık büyüme için mononükleer hücreleri hücre kültürü şişelerine aktarın. MSC'leri mononükleer fraksiyondan yapışkan doğaları ile izole edin.</li>
		<li>Tüm MSC olmayanları 24 saat içinde yıkayın ve doku kültürü şişesinde tek bir MSC tabakası bırakın. MSC fenotipini akış sitometrisi ile doğrulayın, hematopoietik bir belirteç olan CD45 için negatiflik ve MSC'lerin belirteçleri olan CD90 ve CD105 için pozitiflik sağlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Domuz mezenkimal kök hücrelerinden eksozomların hazırlanması ve karakterizasyonu<ol><li>Tohum: 1 x 10,4 H9C2 sıçan kardiyomiyositleri ve kültürü, 1x DMEM+% 10 FBS ve 1x Pen / strep. Gelişmiş DMEM'de 2 x 104 domuz MSC'si + %5 FBS ve 1x Pen/strep tohumu.</li>
		<li>Her iki hücre hattı da en az %80 birleştiğinde, ortamı eksozomu tükenmiş H9C2 ve MSC ortamıyla değiştirin.</li>
		<li>H9C2 kardiyomiyositlerini hafif hipoksiye maruz bırakın (24 saat boyunca% 1O2 ). 24 saat sonra şişeleri hipoksiden çıkarın ve H9C2 ortamını pipetleyin.</li>
		<li>MSC ortamını MSC şişesinden çıkarın ve atın. Saflaştırılmış H9C2 ortamını MSC şişesine ekleyin. Şişeyi normoksik koşullarda (%5CO2, %20O2 ve 37 °C) 6 saat inkübe edin.</li>
		<li>Eksozomları, üreticinin talimatlarını izleyerek toplam eksozom izolasyon reaktifini kullanarak birlikte kültürlenmiş şartlandırılmış ortamdan çıkarın.</li>
		<li>CD-63'e (1:1000)17 karşı antikorlarla ortak ekzozomal proteinlerin western blot tespiti ile eksozomların tanımlanmasını doğrulayın.</li>
		<li>Eksozomları ölçmek ve nanopartikül boyutunun ve dağılımının değerlendirilmesini sağlamak için nanopartikül izleme analizi (NTA) gerçekleştirin. Bunu yapmak için, nanopartikül izleme analizörü kullanarak eksozomların konsantrasyonunu ve boyut dağılımını belirlemek için eksozomların toplam proteinini (50 μg) 500 μL PBS'de çözün.</li>
		<li>Nanoparçacık izleme yazılımı kullanarak verileri analiz edin.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Kapalı pompa koroner arter baypas greft cerrahisi
<ol><li>Hayvan hazırlama<ol><li>Ameliyat için planlanan 3 gün önce hayvanı (16 haftalık dişi Yorkshire-Landrace domuzları) tartın. Oruç sırasında suya erişimi varken hayvanı ameliyattan önce 12 saat aç bırakın.</li>
		<li>Ameliyattan 2-4 saat önce kas içi yolla buprenorfin 0.18 mg/kg verin.</li>
	</ol></li>
	<li>Hayvanın indüksiyonu<ol><li>Kas içine 6.6 mg / kg tiletamin-zolazepam / ksilazin enjeksiyonu vererek hayvanı sakinleştirin.</li>
		<li>Çene tonusunu değerlendirerek yeterli sedasyon sağlamak için 15 dakika bekleyin ve ardından merkezi kulak damarına 22G kateter yerleştirilsin. NOT: Kulak damarı yetersizse başka bir periferik damar (yani sefalik damar) düşünülebilir.</li>
		<li>Oftalmik merhemi her göze topikal olarak uygulayın. Genel anesteziyi indüklemek için intravenöz yolla 1-2 mg / kg propofol uygulayın. Çene tonu, anestezi derinliğini en güvenilir şekilde yansıtır ve prosedür boyunca değerlendirilmelidir.</li>
		<li>Hayvanı uygun büyüklükte bir endotrakeal tüp ile entübe edin.</li>
	</ol></li>
	<li>Ameliyat<ol><li>Cerrahi işleme hazırlanırken hayvanın sternumunu ve kasıklarını tıraş edin.</li>
		<li>Ameliyat için derin anesteziyi sürdürmek için mekanik ventilasyonu dakikada 10-15 nefes, oksijen 1-4 L / dak ve izofluran% 1.0-3.0 olarak ayarlayın. Derin anesteziyi doğrulamak için göz veya çene refleksinin olup olmadığını kontrol edin.</li>
		<li>Hayvan üzerinde konum izleme ekipmanı (Elektrokardiyogram, gelgit sonu CO2, kalp atış hızı, Oksijen doygunluğu, kan basıncı ve sıcaklık).</li>
		<li>Bakım sıvılarını sürekli olarak uygulamak için IV kateteri bir normal salin veya laktat halkaları solüsyonu torbasına bağlayın.</li>
		<li>Yeterli sterilite ve cerrahi alan enfeksiyonu riskini en aza indirmek için povidon İyot ovma ve solüsyon 3x ile aseptik teknik kullanarak cildi hazırlayın.</li>
		<li>Aritmileri önlemek için intravasküler yolla (2 mg / kg yükleme dozu veya 50 mcg / kg / dak dozunda sürekli infüzyon) Lidokain verin.</li>
		<li>Hayvanı sırtına yerleştirin ve steril havlularla örtün.</li>
		<li>Seldinger tekniği ile arteriyel hat yerleşimi için sol veya sağ femoral arter kesimi yapın ve ardından ameliyat sırasında sürekli kan basıncı izleme için kateteri dönüştürücüye bağlayın.</li>
		<li>Monopolar elektrokoter kullanarak sternal çentikten proksimal olarak distal olarak ksifoit sürecine kadar uzanan 20 cm'lik bir kesi yapmak ve sternuma kadar kas, deri altı yağ ve bağ dokusu katmanlarını kesmektir.</li>
		<li>Salınımlı testere kullanarak medyan sternotomi yapın. NOT: LAD konstriktörünü yerleştirmek için yapılan sol torakotomi prosedüründen önceki perikardiyal yapışıklıklardan kaynaklanan miyokardiyal yaralanma riski daha yüksek olduğundan, tekrar sternotomi için standart testereden kaçınılır.</li>
		<li>Arka sternal plakayı bir makas kullanarak bölün. Mediastenin yeterli görselleştirilmesi için özel bir göğüs ekartörü kullanın.</li>
		<li>Monopolar elektrokoter veya Metzenbaum makası kullanarak yapışıklıkları inceleyin. Sol iç meme arterini (LIMA) ortaya çıkarmak için peristernal kas ve yağı dikkatlice inceleyin.</li>
		<li>LIMA sternal kenara lateral olarak maruz kaldığında, elektrokoter ucu ile künt diseksiyon kullanarak göğüs duvarından nazikçe ayırın. LIMA'yı iskeletleştirilmiş bir greft olarak kullanın.</li>
		<li>Diseksiyona 3. interkostal aralık seviyesinde başlayın. Optimum görselleştirme için sol sternal sınırı yavaşça kaldırın.</li>
		<li>LIMA'nın arteriyel ve venöz dallarını ortaya çıkarmak için adventitia'da hafif çekiş kullanın. Dalların LIMA tarafını hemoklips kullanarak klipsleyin ve dalların göğüs duvarı tarafını koterize edin. NOT: LIMA üzerindeki klipsin dağlanmamasına dikkat edilmelidir, çünkü bu kanal daralmasına neden olabilir.</li>
		<li>LIMA'nın ilk segmenti mobilize edildikten sonra, diseksiyona proksimalde subklavyen ven seviyesine doğru ve distal olarak LIMA bifurkasyonuna kadar devam edin.</li>
		<li>Diseksiyon bittikten sonra, 100-300 U / kg'lık bir dozda intravenöz yolla heparin uygulayın. Heparin uygulandıktan sonra 3 dakika bekleyin.</li>
		<li>3 dakika sonra, LIMA'nın distal ucunu, LIMA çatallanma seviyesinden hemen önce kırpın ve kanalı bölün. Distal ucu serbest 2-0 ipek dikiş bağı ile dikin.</li>
		<li>Greftleme için proksimal ucu hazırlayın. Greftin birkaç saniye kanamasına izin vererek akış kalitesini görsel olarak inceleyin.</li>
		<li>Kanamayı önlemek için LIMA kanalının distal ucunu atravmatik bir bulldog kelepçesi ile nazikçe kelepçeleyin. Yaklaşık 5-6 cm'lik bir kesi yaparak perikardın ters T ile açılmasını sağlayın. Yarığın her iki tarafında traksiyon için perikard üzerine 3-0 boyutunda dikişler yerleştirin.</li>
		<li>LAD'yi silikon retraksiyon bantları ve sternal ekartöre sabitlenmiş doku stabilizatörü ile stabilize edin. Darlığın distalindeki LAD arterde (konstriktör bandın neden olduğu) 11 bıçakla bir arteriyotomi yapın ve bir iris makası ile uzatın.</li>
		<li>LAD'ye uygun boyutta bir koroner şant yerleştirin. LIMA'dan LAD'ye anastomozu, pompa dışı baypas tekniği kullanarak 7-0 çalışan emilmeyen sütür ile gerçekleştirin. LIMA üzerindeki bulldog tıkayıcıyı serbest bırakın ve hemostazı onaylayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Mezenkimal Kök Hücre (MSC) kaynaklı eksozom yamasının hazırlanması<ol><li>Eksozomların MSC'lerden başarılı bir şekilde izole edilmesinin ardından, 3 mL normal salin içinde kabaca 3 x 108 eksozomu askıya alın ve kollajen süngere ekleyin.</li>
		<li>3 mL eksozom süspansiyonunu 10 dakika boyunca yaklaşık 22 °C'de oda sıcaklığına getirin. 2 adet emilebilir kolaj süngeri (her biri 1,27 cm x 2,54 cm) orta boy bir Petri kabına yerleştirin.</li>
		<li>Eksozom süspansiyonunu nazikçe karıştırmak için 18G iğneli 5 mL'lik bir şırınga kullanın. Her bir kollajen süngerin üzerine 1,5 mL süspansiyonu yavaşça pipetleyin ve tam emilim için 5 dakika bekleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Eksozom yamasının yerleştirilmesi<ol><li>Eksozom yüklü süngeri, LAD'nin dağılımında anterior septal bölgenin epikardısı olan kalbin kış uykusuna yatan bölgesine baş aşağı yerleştirin.</li>
		<li>Kalbin kış uykusuna yatan bölgeyi örtmek için iki süngeri nazikçe yerleştirin. Her bir kollajen süngeri kaplamak için bir adet 3,5 cm x 1,0 cm poliglaktin ağ kullanın.</li>
		<li>Mesh'i ince 7-0 kesintili dikişlerle epikardiyuma dikin.</li>
	</ol></li>
	<li>Göğüs tüpü yerleştirme<ol><li>Sternotomi insizyonunun alt yönüne yakın ayrı bir bıçak kesisinden bir göğüs tüpü yerleştirin. Göğüs tüpünü kalbin ön yüzüne dikkatlice yerleştirin.</li>
		<li>Tüp yerleştirildikten sonra, tüpün çıkarılmasından sonra yaranın kapanmasını sağlamak için yatay bir şilte dikişi kullanarak 3-0 dikişli bir çanta ipi sütürü yerleştirin.</li>
		<li>Göğüs tüpü, göğüs tamamen kapanana kadar korunur.</li>
	</ol></li>
	<li>Göğüs kapanması<ol><li>Sternumu, sekiz rakamlı bir desen kullanarak emilmeyen sütürlerle yaklaştırın. İnsizyonun tüm uzunluğu boyunca intramüsküler yolla 1 mg / kg bupivakain uygulayın. NOT: MR görüntülemeye karışmaması için teller yerine dikiş kullanılır.</li>
		<li>Sırasıyla 2-0 ve 3-0 emilebilir sütür kullanarak kas ve cilt katmanlarını standart şekilde kapatın.</li>
		<li>Göğüs boşluğundaki tüm havayı boşaltmak için bir nefes tutma ve emme işlemi gerçekleştirin. Ventilatördeki hava yolu basıncını dikkatli bir şekilde izleyin ve basıncı 15-22 mmHg arasında tutun ve tamamlandığında bırakın.</li>
		<li>Tüm hava boşaltıldıktan sonra, çanta ipi sütürünü kullanarak yarayı kapatırken göğüs tüpünü çıkarın. Sternal insizyonu kapatmak için yapışkan yapıştırıcıyı topikal olarak uygulayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Ameliyat sonrası ameliyat sonrası bakım<ol><li>Deri kesisi kapatılırken hayvanı yavaş yavaş ventilatörden ayırın. Hayvanı anestezi ekipmanından ayırmadan önce hayvanın kendiliğinden nefes alabildiğinden ve refleksleri koruyabildiğinden emin olun.</li>
		<li>Hayvanın hava yolunu koruyabildiğini doğruladıktan sonra endotrakeal tüpü çıkarın. Cerrahi alan enfeksiyonunu en aza indirmek için cilt kesisini antibiyotikli merhem ile gömülü steril ve yapışmayan pansuman ile örtün.</li>
		<li>Hayvan yardım almadan pozisyonunu koruyana kadar her 15 dakikada bir kalp atış hızı, solunum hızı, vücut ısısı gibi hayati belirtileri izlemeye devam edin.</li>
		<li>Hayvanın başını kaldırıp tutana ve yardım almadan ayakta durabilene kadar gözetimsiz bırakılmadığından emin olun. Hayvanı kurtarma ünitesine taşımadan önce deri altı yolla 0.2 mg / kg'lık bir dozda meloksikam uygulayın.</li>
		<li>Hayvan stabil olduğunda hayvanı kurtarma ünitesine taşıyın. Ameliyat sonrası 3. güne kadar ameliyat bölgesi pansumanını kesi üzerinde tutun. Kirlenirse pansumanı değiştirin.</li>
		<li>Ameliyattan sonraki ilk 5 gün boyunca hayvanın ağrı seviyesini, cilt kesisini ve genel refahını izlemeye devam edin. Atılım ağrısı için günde bir kez gerektiği gibi yarım doz meloksikam (0.1 mg / kg) uygulayın.</li>
		<li>Ameliyattan sonraki ilk 5 gün boyunca hayvanı tek başına barındırırken, insizyon (lar) başka bir hayvan tarafından cerrahi alan enfeksiyonu riskini azaltmak için iyileşir. Hayvanı 5 gün sonra grup konutuna iade edin.</li>
		<li>Hayvanın durumundaki herhangi bir komplikasyonu veya değişikliği (ateş, asit, kilo kaybı, iştahsızlık vb.) veteriner hekime veya uygun personele bildirin.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Femoral erişim kullanılarak koroner anjiyografi
<ol><li>Hayvanı sırt yaslığında ameliyat masasına sabitleyin. Dakikada 10-15 nefeste mekanik ventilasyonu başlatın. Derin bir anestezi düzlemini korumak için gerektiğinde oksijeni 2-4 L / dak'ya, izofluranı% 1 ve% 4'e ayarlayın.</li>
	<li>Kalp ritmini izlemek için EKG kablolarını hayvanın uzvuna yerleştirin. Hayvanı anestezi derinliği açısından değerlendirin. Göz veya çene refleksi olmadığında hayvanın derin anestezi aldığını düşünün.</li>
	<li>Göğüs ve boyun bölgesini povidon iyot peelingi ile temizleyin ve ardından hayvanı havluyla örtün.</li>
	<li>Femoral artere cerrahi kesi yoluyla erişin ve femoral arteri ve veni ortaya çıkarın. Femoral arterde 11 numaralı bıçakla 1-2 mm'lik uzunlamasına bir kesi yapın ve damar lümeninde 11 Fr indükleyici kılıf kullanarak arteri kanüle edin.</li>
	<li>Erişim sağladıktan sonra, LIMA-LAD greftinin anatomik açıklığını değerlendirmek için koroner anjiyografi yapmak için kateteri ilerletin.</li>
</ol>

Yardımcı Eksozom Tedavisi: CABG Cerrahisi Sonrası Miyokardiyal İyileşmenin Arttırılması

<ol><li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global%2C+regional%2C+and+burden+of+ischaemic+heart+disease+and+its+attributable+risk+factors%2C+1990-2017%3A+results+from+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2017%5BTitle%5D)+AND+%22European+heart+journal.+Quality+of+care+%26+clinical+outcomes%22%5BJournal%5D)">Global, regional, and burden of ischaemic heart disease and its attributable risk factors, 1990-2017: results from the Global Burden of Disease Study 2017.</a> European heart journal. Quality of care & clinical outcomes. 8 (1), 50-60 (2022).</li>
<li>Tsao, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2022+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics-2022 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).</li>
<li>Rahimtoola, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hibernating+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">The hibernating myocardium.</a> American Heart Journal. 117 (1), 211-221 (1989).</li>
<li>Canty, J. M. Jr, Fallavollita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hibernating+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Hibernating myocardium.</a> Journal of Nuclear Cardiology. 12 (1), 104-119 (2005).</li>
<li>Page, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revascularization+of+chronic+hibernating+myocardium+stimulates+myocyte+proliferation+and+partially+reverses+chronic+adaptations+to+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Revascularization of chronic hibernating myocardium stimulates myocyte proliferation and partially reverses chronic adaptations to ischemia.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (7), 684-697 (2015).</li>
<li>Aggarwal, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+diastolic+dysfunction+in+chronically+ischemic+hearts+following+coronary+artery+bypass+graft%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Persistent diastolic dysfunction in chronically ischemic hearts following coronary artery bypass graft.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 165 (6), e269-e279 (2023).</li>
<li>Olsen, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+Value+and+Interplay+Between+Myocardial+Tissue+Velocities+in+Patients+Undergoing+Coronary+Artery+Bypass+Grafting%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Prognostic Value and Interplay Between Myocardial Tissue Velocities in Patients Undergoing Coronary Artery Bypass Grafting.</a> The American Journal of Cardiology. 144, 37-45 (2021).</li>
<li>Virani, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2021+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics-2021 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), e254-e743 (2021).</li>
<li>Hocum Stone, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Swine+Model+of+Chronic+Cardiac+Ischemia+Treated+by+Off-Pump+Coronary+Artery+Bypass+Graft+Surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3AJoVE%22%5BJournal%5D)">Surgical Swine Model of Chronic Cardiac Ischemia Treated by Off-Pump Coronary Artery Bypass Graft Surgery.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (133), e57229(2018).</li>
<li>White, F. C., Carroll, S. M., Magnet, A., Bloor, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+collateral+development+in+swine+after+coronary+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Coronary collateral development in swine after coronary artery occlusion.</a> Circulation Research. 71 (6), 1490-1500 (1992).</li>
<li>Righetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interventricular+septal+motion+and+left+ventricular+function+after+coronary+bypass+surgery%3A+evaluation+with+echocardiography+and+radionuclide+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Interventricular septal motion and left ventricular function after coronary bypass surgery: evaluation with echocardiography and radionuclide angiography.</a> The American Journal of Cardiology. 39 (3), 372-377 (1977).</li>
<li>Hocum Stone, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+hibernating+myocardium+using+stem+cell+patch+with+coronary+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Recovery of hibernating myocardium using stem cell patch with coronary bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 62 (1), e3-e16 (2021).</li>
<li>Puigserver, P., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisome+proliferator-activated+receptor-gamma+coactivator+1+alpha+%28PGC-1+alpha%29%3A+transcriptional+coactivator+and+metabolic+regulator%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrine+Reviews%22%5BJournal%5D)">Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator 1 alpha (PGC-1 alpha): transcriptional coactivator and metabolic regulator.</a> Endocrine Reviews. 24 (1), 78-90 (2003).</li>
<li>Henning, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+Exosomes+and+MicroRNAs+in+Cardiovascular+Physiology+and+Pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular Exosomes and MicroRNAs in Cardiovascular Physiology and Pathophysiology.</a> Journal of Cardiovascular Translational Research. 14 (2), 195-212 (2021).</li>
<li>Chen, Y., Liu, Y., Dorn, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2nd.+Mitochondrial+fusion+is+essential+for+organelle+function+and+cardiac+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">2nd. Mitochondrial fusion is essential for organelle function and cardiac homeostasis.</a> Circulation Research. 109 (12), 1327-1331 (2011).</li>
<li>Pittenger, M. F., Martin, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+and+their+potential+as+cardiac+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells and their potential as cardiac therapeutics.</a> Circulation Research. 95 (1), 9-20 (2004).</li>
<li>Campos-Silva, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+sensitivity+detection+of+extracellular+vesicles+immune-captured+from+urine+by+conventional+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">High sensitivity detection of extracellular vesicles immune-captured from urine by conventional flow cytometry.</a> Scientific Reports. 9 (1), 2042(2019).</li>
<li>Hocum Stone, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+assessment+of+cardiac+function+in+a+swine+model+of+hibernating+myocardium+3+months+following+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 153 (3), 582-590 (2017).</li>
<li>Stone, L. L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+Respiratory+Capacity+is+Restored+in+Hibernating+Cardiomyocytes+Following+Co-Culture+with+Mesenchymal+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial Respiratory Capacity is Restored in Hibernating Cardiomyocytes Following Co-Culture with Mesenchymal Stem Cells.</a> Cell Medicine. 11, 2155179019834938(2019).</li>
<li>Lamy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletonized+vs+Pedicled+Internal+Mammary+Artery+Graft+Harvesting+in+Coronary+Artery+Bypass+Surgery%3A+A+Post+Hoc+Analysis+From+the+COMPASS+Trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Skeletonized vs Pedicled Internal Mammary Artery Graft Harvesting in Coronary Artery Bypass Surgery: A Post Hoc Analysis From the COMPASS Trial.</a> JAMA Cardiology. 6 (9), 1042-1049 (2021).</li>
<li>Shim, J. K., Choi, Y. S., Yoo, K. J., Kwak, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+dioxide+embolism+induced+right+coronary+artery+ischaemia+during+off-pump+obtuse+marginalis+artery+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Carbon dioxide embolism induced right coronary artery ischaemia during off-pump obtuse marginalis artery grafting.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 36 (3), 598-599 (2009).</li>
<li>Aklog, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Future+technology+for+off-pump+coronary+artery+bypass+%28OPCAB%29%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Future technology for off-pump coronary artery bypass (OPCAB).</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. 15 (1), 92-102 (2003).</li>
<li>Hou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiolabeled+cell+distribution+after+intramyocardial%2C+intracoronary%2C+and+interstitial+retrograde+coronary+venous+delivery%3A+implications+for+current+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials.</a> Circulation. 112 (9 Suppl), I150-I156 (2005).</li>
<li>Gallet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosomes+secreted+by+cardiosphere-derived+cells+reduce+scarring%2C+attenuate+adverse+remodelling%2C+and+improve+function+in+acute+and+chronic+porcine+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Exosomes secreted by cardiosphere-derived cells reduce scarring, attenuate adverse remodelling, and improve function in acute and chronic porcine myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 38 (3), 201-211 (2017).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Bu çalışma, cerrahi revaskülarizasyon sırasında MSC'den türetilmiş eksozom yüklü kollajen yaması ile tedavinin, potansiyel olarak mitokondriyal iyileşmeyi hedefleyerek inotropik stimülasyon üzerine diyastolik ve sistolik fonksiyonu iyileştirdiğinin gösterildiği kronik iskemik miyokardın ilk domuz modelini sunmaktadır. Daha önce, HIB'nin büyük bir hayvan modelinde, kardiyak MRG ile ölçülen diyastolik ve sistolik fonksiyonun bozulduğu ve tam iyileşme olmadan revaskülarizasyon ile sadece biraz iyileştiği gösterilmiştir<sup ...

Küresel olarak, şiddetli CAD yüz milyondan fazla hastayı etkilemektedir ve ölüm oranı azalmış olmasına rağmen, önde gelen ölüm nedenlerinden biri olmaya devam etmektedir 1,2. KAH, miyokard infarktüsünden (MI) canlılığı korunmuş iskemiye kadar geniş bir klinik spektruma sahiptir. Klinik öncesi araştırmaların çoğu, küçük ve büyük hayvan modellerinde çalışmak mümkün olduğu için enfarktüslü dokunun varlığı ile karakterize edilen MI'ya odaklanır. Bununla birlikte, bu model, canlılığı korunmuş ve revaskülarizasyona uygun olan hastalara hitap etmemektedir. KABG geçiren hastaların çoğunda, kasılma rezervi ve canlılığındaki değişkenliği korurken kan akışında azalma ve sınırlı fonksiyon vardır3. Tedavi edilmezse, bu hastalar özellikle artaniş yükü sırasında ileri kalp yetmezliğine ve ani ölüme ilerleyebilir4. Bu hastalar arasında koroner arter baypas grefti (KABG) etkili bir tedavidir ancak tam fonksiyonel iyileşme ile sonuçlanmayabilir5. Daha da önemlisi, daha kötü klinik sonuçlar için bir belirteç olan diyastolik disfonksiyon, revaskülarizasyondan sonra düzelmez ve bu da KABG6,7 sırasında yeni adjuvan tedavilere ihtiyaç olduğunu düşündürür. Şu anda, kardiyomiyositleri tam fonksiyonel kapasiteye geri döndürmek için KABG ile kullanılan klinik olarak mevcut adjuvan girişimler yoktur. Bu, birçok hastanın uygun revaskülarizasyona rağmen ileri kalp yetmezliğine ilerlediği göz önüne alındığında önemli bir terapötik boşluktur8.
Klinik CAD deneyimini taklit etmek için CABG'ye uygun yenilikçi bir kronik miyokard iskemisi modeli oluşturuldu9. Domuzlar, epikardiyal köprüleme kollaterallerine sahip olmadıkları için diğer büyük hayvanlara göre iyi bir kalp hastalığı modeli sağlar, bu nedenle tek başına LAD'nin darlığı bölgesel iskemiile sonuçlanır 10. Bu çalışmada 16 haftalık dişi Yorkshire-Landrace domuzları kullanıldı. Bu modelde LAD, sol internal meme arteri (LIMA) grefti kullanılarak off-pump KABG ile revaskülarize edildi (Ek Tablo 1). Perkütan koroner girişim (PKG) ile darlığın açılması mümkün değildir, çünkü konstriktör sert bir cihazdır. Kardiyak manyetik rezonans görüntüleme (MRG), global ve bölgesel fonksiyon, koroner anatomi ve doku canlılığını değerlendirmek için kullanılır. Kardiyak MRG analizi, pik dolum hızı (PFR) ile karakterize diyastolik fonksiyonun KABG6'ya rağmen bozulmaya devam ettiğini gösterdi. Diyastolik disfonksiyonun mekanizması muhtemelen CABG11'den sonra devam eden HIB'de bozulmuş mitokondriyal biyoenerjetik ve kollajen oluşumu ile ilgilidir.
Mezenkimal kök hücreler (MSC), KABG sırasında uygulandığında miyokardiyal iyileşmeyi iyileştirmek için eksozomlar aracılığıyla terapötik sinyal sağlar. Bu domuz modelinde ve paralel in vitro çalışmalarda, CABG sırasında bir epikardiyal MSC vicryl yamasının yerleştirilmesinin, mitokondriyal enerji metabolizmasının önemli bir düzenleyicisi olan PGC-1α12 gibi anahtar mitokondriyal proteinlerde artışla kasılma fonksiyonunu geri kazandığı gösterilmiştir13. İn vitro model, MSC'lerin bozulmuş mitokondriyal fonksiyon üzerindeki sinyal mekanizmasını araştırmamıza izin verdi. Eksozomlar, mikroRNA (miRNA) dahil olmak üzere protein veya nükleik asitler içeren kararlı mikro-parçacıklar (50-150 nm) salgılanır14. Son in vitro veriler, MSC'den türetilen eksozomların mitokondriyal solunumun geri kazanılması için gerekli olan önemli bir sinyal mekanizması olduğunu göstermektedir.
Kök hücre kaynaklı eksozomlar, kolayca erişilebilir oldukları, ticari olarak üretilebildikleri ve etik çatışmalardan yoksun oldukları için umut verici yardımcı terapötiklerdir. Klinik translasyon göz önüne alındığında, miyokardın kış uykusuna yatan bölgesine cerrahi olarak dikilebilen MSC'den türetilmiş eksozomlarla gömülü bir kollajen yama oluşturuldu. Bu yama kullanılarak eksozomların sürekli olarak verildiği ve mitokondriyal iyileşmeyi hedefleyen ve mitokondriyal biyogenezi artıran parakrin sinyal mekanizması ile hücresiz bir rejeneratif tedavi sağladığı gösterilmiştir15. Bu prosedür, mitokondriyal fonksiyonu arttırmak ve revaskülarizasyon sırasında inflamasyonu azaltmak ve kronik iskemiye miyosit adaptasyonlarını tersine çevirmek yoluyla kardiyak fonksiyonu iyileştirmek için MSC'den türetilen tedavilerin etkisini incelemek için klinik öncesi model sağlar.
Bu çalışmada, KAH hastaları için standart tedaviyi taklit eden proksimal LAD darlığı alanını atlamak için LIMA'dan LAD'ye anastomoz kullanan pompa dışı KABG'nin cerrahi bir yöntemi gösterilmiştir. KABG ile yardımcı bir tedavi olarak, miyokardın iskemik bölgesine MSC'den türetilmiş eksozom gömülü kollajen yamanın cerrahi uygulaması gösterilmiştir. Bu cerrahi model, bir eksozom yaması kullanılarak görülen parakrin etkisine verilen fizyolojik yanıtları ve iyileşmenin moleküler mekanizmalarını incelemek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>5 Ethibond</td><td>Ethicon</td><td>MG46G</td><td>Sütür</td></tr> <tr><td># 40 kesme bıçağı</td><td>Oster</td><td>078919-016-701</td><td>Ameliyat bölgelerinden saçları alın</td></tr><tr><td>0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J208H</td><td></td></tr><tr><td>Sütür 1 mL Şırınga</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>1188100777</td><td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>1" tıbbi bant Medline</td><td></td><td>MMM15271Z</td><td>Güvenli yara pansuman ve IV kateterler</td></tr><tr><td>1000 mL% 0.9 Sodyum klorür</td><td>Baxter</td><td>2B1324X</td><td>IV yedek sıvı</td></tr><tr><td>12 mL Şırınga</td><td>Medtronic / Covidien</td><td>8881512878</td><td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>18 ga iğneler</td><td>BD</td><td>305185</td><td>Enjekte edilebilir ajanların uygulanması</td></tr><tr><td>20 ga iğneler</td><td>BD</td><td>305175</td><td>Enjekte edilebilir ajanların uygulanması</td></tr><tr><td>20 mL Şırınga</td><td>Medtronic / Covidien</td><td>8881520657</td><td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>2-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J317H</td><td>Sütür</td></tr><tr><td>250 mL% 0.9 salin</td><td>Baxter</td><td>&nbsp; UE1322D</td><td>Replasman IV Sıvısı</td></tr><tr><td>3 mL Syinge</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>1180300555</td><td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>3-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>VCP824G</td><td>Sütür</td></tr><tr><td>36" Basınç izleme borusu</td><td>Smith' s Medikal</td><td>MX563</td><td>Bağlantı sanatı. Çizgi&nbsp; dönüştürücüye</td></tr><tr><td>4.0 mm ID endotrakeal tüp</td><td>Medline</td><td>DYND43040</td><td>Hazırda Bekletme</td></tr><tr><td>4-0 için hava yolu oluşturun Tevdek II Teller</td><td>Deknatel</td><td>7-922</td><td>LAD 48" çevresinde konstriktörü sabitlemek için sütür</td></tr><tr><td> Basınç izleme borusu</td><td>Smith' s Tıbbi</td><td>MX564</td><td>Bağlantı sanatı. Çizgi&nbsp; dönüştürücüye</td></tr><tr><td>500mL% 0.9 Sodyum klorür</td><td>Baxter</td><td>2B1323Q</td><td>İlaç dağıtımı, Blower Mister</td></tr><tr><td>6 &nbsp; mL Şırınga</td><td>Medtronic / Covidien</td><td>1180600777</td> için sis sağlayın <td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>6.0 mm ID endotrakeal tüp</td><td>Mallinckrodt</td><td>86049</td><td>Revasc, MRI ve Sonlandırma için hava yolu oluşturun</td></tr><tr><td>6.5 mm ID endotrakeal tüp</td><td>Medline</td><td>DYND43065</td><td>Revasc, MRI ve Sonlandırma için hava yolu oluşturun</td></tr><tr><td>6 "basınçlı boru hattı</td><td>Smith ' s Medical</td><td>MX560</td><td>Kemik iliği toplayın</td></tr><tr><td>60 mL Şırınga</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>8881560125</td><td>Enjekte edilebilir ajanları uygulayın</td></tr><tr><td>7.0 mm ID endotrakeal tüp</td><td>Medline</td><td>DYND43070</td><td>Revasc, MRI ve Sonlandırma için hava yolu oluşturun</td></tr><tr><td>7-0 Prolene</td><td>Ethicon</td><td>M8702</td><td>Sütür</td></tr><tr><td>Gelişmiş DMEM (1X)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12491023</td><td></td></tr><tr><td>Alkol Hazırlama pedleri</td><td>MedSource</td><td>MS-17402</td><td>Cilt dezenfektanı</td></tr><tr><td>Amicon Ultra-15 Santrifüj Filtre Ünitesi</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>Anestezi Makinesi</td><td>Dräger</td><td>Fabious Trio</td><td>genel anestezi bakımı</td></tr><tr><td>yapar Anestezi Makinesi + ventilatör</td><td>DRE Dräger- Fabius Tiro</td><td>DRE0603FT</td><td>Hastaya</td></tr> <tr>oksijen ve inhalan verin<td>Anestezi Monitörü</td><td>Phillips&nbsp; Intellivue</td><td>MP70</td><td>Hasta güvenliği için çok parametreli</td></tr><tr><td>Arteriyel Hat Kiti</td><td>Ok</td><td>ASK-04510-HF</td><td>Kan basıncı izleme için femoral kateter</td></tr><tr><td>Yapay Gözyaşı</td><td>Rugby</td><td>0536-1086-91</td><td>Kornea kurumasını önlemek için gözleri yağlayın</td></tr><tr><td>Bair Hugger</td><td>3M</td><td>Model 505</td><td>Hasta Isıtma sistemi</td></tr><tr><td>Temel paket</td><td>Medline</td><td>DYNJP1000</td><td>Steril perdeler ve masa örtüsü</td></tr><tr><td>Kan Alma Tüpleri - yeşil üst</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-689-7</td><td>Mikroküre kan örneklerini toplayın</td></tr><tr><td>Blower Mister Kit</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>22120</td><td>Damar anastomozu için cerrahi alanı temizler</td></tr><tr><td>BODIPY TR Seramid</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>D7540</td><td></td></tr><tr><td>Kemik iliği iğnesi - 25mm 15 ga IO iğnesi</td><td>Vidacare</td><td>9001- VC-005</td><td>Kemik iliği toplayın</td></tr><tr><td>Kemik Balmumu</td><td>Medline</td><td>ETHW31G</td><td>Kesilmiş kemik</td></tr><tr><td>Bovie Koterinin hemostazı el aleti</td><td>Covidien</td><td>E2516</td><td>Hemostaz</td></tr><tr><td>Bupivicaine</td><td>Pfizer</td><td>00409-1161-01</td><td>Lokal Anestezik</td></tr><tr><td>Buprenorfin 0.3 mg / mL</td><td>Sigma Aldrich</td><td>B9275</td><td>Sağkalım prosedürleri için Pre operatif Analjezik</td></tr><tr><td>Hücre Sıyırıcılar</td><td>Corning</td><td>353085</td><td></td></tr><tr><td>Cephazolin 1 gr</td><td>Pfizer</td><td>00409-0805-01</td><td>Antibiyotik</td></tr><tr><td>Göğüs Tüpü</td><td>Covidien</td><td>8888561043</td><td>Göğüs boşluğundaki havayı tahliye eder</td></tr><tr><td>Cloroprep</td><td>Becton Dickenson</td><td>260815</td><td>Cerrahi cilt hazırlığı</td></tr><tr><td>CPT tüpü</td><td>BD</td><td>362753</td><td>Kemik iliğinden MSC izolasyonu</td></tr><tr><td>Delrin Yılanı</td><td>U of MN</td><td>Özel yapım</td><td>LAD</td></tr><tr><td>Dermabond</td><td>Ethicon</td><td>DNX12</td><td>Darlık oluşturur Cilt yapıştırıcısı</td></tr><tr><td>DMEM (1X) Dulbecco'nun Modifiye Eagle Medium, HEPES</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12430062</td><td></td></tr><tr><td>Dobutamin 12.5 mg / mL</td><td>Pfizer</td><td>00409-2344-01</td><td>İkinci mikroküre kan alma sırasında kan basıncını ve kalp atış hızını artırır</td></tr><tr><td>EKG Pedleri</td><td>DRE</td><td>1496</td><td>Kalp ritmini izleyin</td></tr><tr><td>Eksozom Tükenmiş FBS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A2720801</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Tek Kullanımlık Polistiren Serolojik Pipetler, Steril, 10 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-675-20</td><td></td></tr><tr><td>Femoral ve karotis tanıtıcı</td><td>Cordis- J& J</td><td>504606P</td><td>femoral ve karotis kanülleri</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu, Isı İnaktive Edilmiş, Gibco FBS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>16140089</td><td></td></tr><tr><td>Flo-thru 1.0</td><td>Baxter</td><td>FT-12100</td>, <td>LIMA'yı L Flo-thru 1.25'e anastomoz yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Baxter</td><td>FT-12125</td><td>FT-12125</td><td>Flo-thru</td></tr><tr><td>1.5</td><td>Baxter</td><td>FT-12150</td><td>FT-12150</td></tr><tr><td>Flo-thru 2.0</td><td>Baxter</td><td>FT-12200</td><td>FT-12200</td></tr><tr><td>GlutaMAX Takviyesi</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Saç Kesme Makinesi</td><td>Oster</td><td>078566-011-002</td><td>Ameliyat bölgelerinden tüyleri alın</td></tr><tr><td>Helistat kollajen sünger</td><td>McKesson</td><td>570973 1690ZZ</td><td>Eksozomları gömmek için</td></tr><tr><td>sünger Heparin</td><td>Pfizer</td><td>&nbsp; 0409-2720-03</td><td>Antikoagülan</td></tr><tr><td>Histoloji Kavanozları</td><td>Fisher Scientific</td><td>316-154</td><td>Doku örnekleri için formalin</td></tr><tr><td>HyClone Karakterli Fetal Sığır Serumu (FBS)</td> <td>Cytiva</td><td>SH30071.03</td><td></td></tr><tr><td>Hypafix</td><td>BSN Medical</td><td>4210</td><td>Güvenli yara örtüsü ve IV kateterler</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>CDS019936</td><td>Genel Anestezik-Uçucu</td></tr><tr><td>Üfleyici için IV Boru Mister</td><td>Carefusion</td><td>42493E</td>, <td>Blower / Mister</td></tr><tr><td>Jelco 18 ga IV kateter</td> için IV Sıvılara Uyum Sağlar <td>Smiths medical</td><td>4054</td><td>Revasc, MRI ve Term</td></tr><tr><td>Lidokain'de IV erişimi %2</td> <td>Pfizer</td><td>00409-4277-01</td><td>Lokal Anestezik / antiarritmik</td></tr><tr><td>Ligaclips</td><td>Ethicon</td><td>MSC20</td><td>LIMA yayından kaldırma için Cerrahi Zımbalar</td></tr><tr><td>Uzun bıçak laringoskop</td><td>DRE</td><td>12521</td><td>Entübasyon için trakeanın görüntülenmesine izin verir</td></tr><tr><td>Meloksikam 5 mg/mL</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-219</td><td>Ameliyat sonrası Analjezik</td></tr><tr><td>Mikroküre pompası</td><td></td><td></td><td>Femoral tanıtıcı</td></tr><tr><td>Monopolar Koterden</td> kan örnekleri toplayın <td>Covidien</td><td>Valleylab & trade; FT10</td><td>Hemostaz</td></tr><tr><td>Nanosight NS 300</td><td>Malvern Panalytical</td><td>MAN0541-03-EN</td><td></td></tr><tr><td>NTA 3.1.54 yazılımı</td><td>Malvern Panalytical</td><td>MAN0520-01-EN-00</td><td></td></tr><tr><td>OPVAC Synergy II</td><td>Terumo Kardiyovasküler Sistem</td><td>401-230</td><td>Kalp konumlandırıcı ve Sabitleyici</td></tr><tr><td>Oksijen Tankı E silindiri</td><td>çeşitli</td><td>çeşitli</td><td>Anestezi makinesinde yardımcı akış ölçer</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.2</td> yoksa Blower Mister için kullanılır <td>ThermoFisher Scientific</td><td>20012050</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin-Neomisin (PSN) Antibiyotik Karışımı</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15640055</td><td></td></tr><tr><td>Pigtail 145 kateter 6 Fransız</td><td>Boston Scientific</td><td>08641-41</td><td>AG basınçlarını ölçün</td></tr><tr><td>Basınç Dönüştürücü</td><td>çeşitli</td><td>Anestezi monitörüne uyum sağlamalıdır</td><td>Direkt arter basınçlarını izleyin</td></tr><tr><td>Propofol</td><td>Diprivan</td><td>269-29</td><td>İndüksiyon ajanı</td></tr><tr><td>Roncuronium</td><td>Mylan</td><td>67457-228-05</td><td>Nöromüsküler bloke edici ajan</td></tr><tr><td>SR Buprenorfin 10 mg/mL</td><td>Abbott Labs</td><td>NADA 141-434</td><td>Ameliyat Sonrası Analjezik</td></tr><tr><td>Steril Salin 20 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>20T700220</td><td>IV kateterler için yıkama</td></tr><tr><td>Sternal Testere / Nekropsi Testere</td><td>Thermo Fisher</td><td>812822</td><td>Göğüs boşluğunu açmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Durdurma Horozları</td><td>Smith Medical</td><td>MX5311L</td><td>2 domuz kuyruğuna bağlanmak için</td></tr><tr><td>Süksinilkolin 20 mg / mL</td><td>Pfizer</td><td>00409-6629-02</td><td>Nöromüsküler bloke edici ajan</td></tr><tr><td>Emme ve nbsp; hortum</td><td>Medline</td><td>DYND50223</td><td></td></tr><tr><td>Emme Kabı</td><td>Medline</td><td></td><td></td>DYNDCL03000</tr><tr><td>Göğüs ekartörlü cerrahi paketi</td><td>çeşitli</td><td>Paket listesine bakın</td><td>Femoral kesim ve medyan sternotomi</td></tr><tr><td>Cerrahi Aletler</td><td>çeşitli</td> Paket <td>listesine bakın</td><td>Femoral ve karotis kesikleri ve sternotomi</td></tr><tr><td>Cerrahi Yaylı Klips</td><td>Uygulamalı Tıbbi</td><td>A1801</td><td>Sökme işleminden sonra LIMA'nın kelepçe ucu</td></tr><tr><td>Şırınga pompası</td><td>Harvard</td><td></td><td>IV Teslim Ediyor Dobutamin infüzyonu</td></tr><tr><td>SYTO RNASelect Yeşil Floresan hücre Lekesi - DMSO</td><td>Millipore Sigma</td><td>S32703'te</td><td></td>5 mM Çözelti</tr><tr><td>Telazol 100 mg / mL</td><td>Fort Dodge</td><td>01L60030</td><td>Ameliyat öncesi Yatıştırıcı Telpha</td></tr><tr><td>pedi</td><td>Covidien</td><td>2132</td><td>Steril yara örtüsü</td></tr><tr><td>Zamanlayıcı</td><td></td><td></td><td>Zaman kan örneklerinin toplanması</td></tr><tr><td>Toplam Eksozom İzolasyon Reaktifi ( hücre kültürü ortamından)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4478359</td><td></td></tr><tr><td>TPP Doku Kültürü Şişesi, T75, Filtre Kapağı w/ 0.22uM PTFE</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>TP90076</td><td></td></tr><tr><td>Üçlü Antibiyotik Merhem</td><td>Johnson & Johnson</td><td>23734</td><td>Topikal yara üzerinde</td></tr><tr><td>Vicryl mesh</td><td>Epikardiyal hücre uygulaması için</td><td>Ethicon</td><td>VKML</td> Yaması</tr><tr><td>Vorteks</td><td></td><td></td><td>Karışımı mikroküreler</td></tr><tr><td>Ksilazin 100 mg / mL</td><td>Vedco</td><td>468RX</td><td>Ameliyat öncesi Yatıştırıcı / analjezik</td></tr></tbody></table>

eksozom yüklü kollajen yaması ve off-pump koroner arter baypas grefti ile tedavi edilen kronik miyokard İskeminin cerrahi domuz modeli

Surgical Porcine Model of Chronic Myocardial Ischemia Treated by Exosome-laden Collagen Patch and Off-pump Coronary Artery Bypass Graft

Progresif koroner arter stenozundan kaynaklanan kronik miyokardiyal iskemi, metabolik aktiviteyi azaltarak azalmış oksijen mevcudiyetine uyum sağlayan ve böylece geri dönüşümsüz kardiyomiyosit hasarını ve enfarktüsü önleyen miyokard olarak tanımlanan kış uykusuna yatan miyokarda (HIB) yol açar. Bu, miyokard enfarktüsünden farklıdır, çünkü HIB revaskülarizasyon ile iyileşme potansiyeline sahiptir. Önemli koroner arter hastalığı (KAH) olan hastalar, onları kalp yetmezliği ve ani ölüm riskine sokan kronik iskemi yaşarlar. Şiddetli KAH için standart cerrahi girişim koroner arter baypas greft cerrahisidir (KABG), ancak kusurlu bir tedavi olduğu gösterilmiştir, ancak kronik iskemiye adapte olmuş miyositleri kurtarmak için yardımcı tedaviler yoktur. Bu boşluğu gidermek için, CABG'ye uygun ve klinik senaryoyu taklit eden domuz kullanan bir cerrahi HIB modeli kullanıldı. Model iki ameliyat içerir. İlk operasyon, sol ön inen (LAD) artere 1,5 mm'lik sert bir konstriktör implante edilmesini içerir. Hayvan büyüdükçe, yılan yavaş yavaş bölgesel sistolik fonksiyonun azalmasına neden olan önemli darlıklara neden olur. Darlık% 80'e ulaştığında, miyokardiyal akış ve fonksiyon bozulur ve HIB oluşturur. Daha sonra iskemik bölgeyi revaskülarize etmek için sol internal meme arteri (LIMA) ile bir off-pump KABG gerçekleştirilir. Hayvan, kurban edilmeden önce optimal miyokardiyal iyileşmeye izin vermek için bir ay boyunca iyileşir. Bu, farklı tedavi gruplarının fizyolojik ve doku çalışmalarına izin verir. Bu hayvan modeli, KABG'ye rağmen kardiyak fonksiyonun bozulmaya devam ettiğini göstermekte ve bu da yeni yardımcı müdahalelere ihtiyaç olduğunu göstermektedir. Bu çalışmada, mezenkimal kök hücre (MSC) türevi eksozomlarla gömülü bir kollajen yama geliştirildi ve bu yama, LIMA anastomozunun distalindeki epikardiyal yüzeye cerrahi olarak uygulandı. Malzeme epikardiyuma uygundur, emilebilir ve sinyal faktörlerinin sürekli salınımı için iskele sağlar. Bu rejeneratif tedavi, tek başına revaskülarizasyona yanıt vermeyen miyokardiyal iyileşmeyi uyarabilir. Bu model, HİB'de iyileşme ile ilgili fizyolojik ve mekanik keşifler sağlayarak klinik arenaya tercüme edilir.

&amp;<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65553/65553fig01.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65553/65553fig01lar...

Bu çalışma, ilerleyici koroner arter darlığına bağlı kronik miyokard iskemisi olan ve enfarktüs olmaksızın bozulmuş kardiyak fonksiyon ile sonuçlanan cerrahi domuz modelini sunmaktadır. İskemiyi takiben, hayvanlara kök hücrelerden türetilen eksozom yüklü kollajen yamasının epikardiyal yerleşimi ile pompa dışı koroner arter baypas grefti uygulanır. Bu yardımcı tedavi miyokardiyal fonksiyonu ve iyileşmeyi iyileştirir.

Eksozom Yüklü Kollajen Yaması ve Off-pump Koroner Arter Baypas Grefti ile Tedavi Edilen Kronik Miyokard İskeminin Cerrahi Domuz Modeli

Chronic myocardial ischemia resulting from progressive coronary artery stenosis leads to hibernating myocardium (HIB), defined as myocardium that adapts ...

Bu cerrahi prosedürün genel amacı, LIMA'dan LAD'ye baypas kullanarak koroner arter revaskülarizasyonunun cerrahi bir modelini oluşturmak ve kardiyak fonksiyonda fizyolojik iyileşmeyi göstermek için ek olarak eksozom yüklü kollajen yama kullanmaktır. İn vivo modelimiz, çok damar hastalığı tedavisi gören hastalar için tipik klinik durumu temsil etmeyen, herhangi bir komorbidite içermeyen tek damarlı bir modeldir. Bununla birlikte, bu sınırlamaya rağmen, modelimiz sürekli olarak güvenilir sonuçlar vermiş ve düşük ölüm oranlarını korumuştur.Bu çalışmada kronik miyokard iskemisinde miyokardiyal fonksiyonel iyileşmeyi yönlendiren hücresel mekanizmaları anlamayı amaçladık. İskemik dokunun tamamen iyileşmesi, mitokondriyal yeteneklerin restorasyonuna ve inflamasyonun azalmasına bağlı görünmektedir; yeni bir çalışma alanını temsil ediyor.

surgical-porcine-model-chronic-myocardial-ischemia-treated-exosome

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu iletişim kuralı bölgesel anormallikleri neden olur, ancak enfarktüsü, hazırda bekleme Miyokardiyum bilinen oluşturmaz kronik, tek damar iskemi cerrahi büyük hayvan modeli sunar. Kronik iskemi kurulması, hayvanlar iskemik doku revascularize için "off-pump" LIMA-delikanlı koroner arter bypass greft cerrahisi ile tedavi edilir.

Kronik kalp iskemi "Off-Pump" koroner arter Bypass greft cerrahisi ile tedavi cerrahi domuz modeli

Burada, yeni kardiyokoruyucu stratejileri araştırmak için sıkı bir şekilde kurulan ve kullanılan ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi büyük hayvan (porcine) modelini tarif ediyoruz.

Ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi porcine modeli

Bu protokolde kardiyopulmoner bypass yapılmadan sol göğüs duvarında küçük bir kesiden yeni domuz ven baypas greftleme yapıldı. İntimal kalınlaşma gösteren postoperatif patoloji çalışması yapıldı.

Domuz Damarı Greft Hastalığı Modelinin Kurulması ve Değerlendirilmesi

Bu protokol, bir domuz modelinde kardiyoaktif terapötik ajanların uygulanmasının üç yöntemini açıklamaktadır. Dişi kara ırkı domuzları, (1) torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, (2) kateter bazlı transendokardiyal enjeksiyon veya (3) juguler ven ozmotik mini pompa yoluyla intravenöz infüzyon yoluyla tedavi gördü.

Domuz Miyokard Enfarktüsü Modelinde Kardiyoaktif Terapötiklerin Verilmesi

Cerrahi travma inflamatuvar yanıt indükler. Sitokinler ve endojen ligand iskemi ve reperfüzyon sonrası miyokard infarkt modüle bilinmektedir. Biz torakotomi etkilerini en aza indirmek için asılı ağırlıklar kullanılarak murin iskemi ve reperfüzyon değiştirilmiş bir kapalı göğüs modeli sunuyoruz.

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Biz tekrar elde edilebilirliğini arttırmak için, sol ön inen arter (LAD) üzerine ligasyon konumlandırma daha fazla netlik sağlar fare modellerinde miyokard infarktüsü (MI) simüle etmek için deneysel iskemi / reperfüzyon (I / R) hasarı ikna etmek için bir cerrahi yöntemi tanıtmak Farelerde MI deneyler.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Bu makale, domuz dışı pompa koroner arter baypas (OPCAB) modelinde yeni bir tıkayıcı olmayan koroner anastomoz konektörünü tanımlamaktadır. Bu kullanımı kolay koroner konektör, minimal invaziv OPCAB cerrahisini kolaylaştırmak için içsel bir potansiyele sahiptir.

Trinity Clip - - Roman Lazer destekli Koroner Anastomoz Connector Değerlendirilmesi Domuz Off-pompa Bypass Modeli

Kalp yetersizliği hastaneye yatışların önde gelen nedeni ve mortalitenin önemli bir nedenidir. Miyokard enfarktüsü sonrası ventriküler yeniden şekillenme ve kardiyak disfonksiyonu araştırmak için farelerde sol ön inen koroner arterin kalıcı ligasyonu modeli uygulanır. Farelerde invaziv hemodinamik ölçüm tekniği sunulmuştur.

Farelerde Sol Ön İnen Koroner Arter Daimi ligasyonu: Post-miyokard Enfarktüs Remodelling ve Kalp Yetmezliği Bir Model

Bu video, sıçanlarda venöz interpozisyon cerrahisi sonrası miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için bir model göstermektedir.

Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model

Bir fare modelinde sol ön inen arter (LAD) ligasyonu için güvenilir bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, endotrakeal entübasyon, sol taraflı torakotomi yaklaşımı ve torasentezi içeren diğer yöntemlere göre nispeten daha az invazivdir. Bu yöntem hem akut hem de kronik miyokard enfarktüsü (MI) için bir model olarak kullanılabilir.

Kemirgen Sol Ön İnen (LAD) koroner arter ligasyonu: Miyokard İnfarktüsü Yönelik Gelişmiş ve Basitleştirilmiş Modeli

Keşfedin, kronik miyokard iskemisinin cerrahi domuz modelinde eksozom yüklü kollajen yama ve off-pump koroner arter baypas grefti ile kalp fonksiyonunun iyileştirilmesini. Bu yöntem, mitokondriyal restorasyon ve inflamasyon azaltma mekanizmalarını araştırır.

Eksozom Yüklü Kollajen Yaması ve Off-pump Koroner Arter Baypas Grefti ile Tedavi Edilen Kronik Miyokard İskeminin Cerrahi Domuz Modeli (Video) | JoVE Journal

Eksozom Yüklü Kollajen Yaması ve Off-pump Koroner Arter Baypas Grefti ile Tedavi Edilen Kronik Miyokard İskeminin Cerrahi Domuz Modeli

Daha fazla video keşfet