Name: Naif ve Efektör CD8 T Hücrelerinin Mitokondriyal Fonksiyonunun Ölçülmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 7 s
Description: Keşfedin Mito Stress Test ile CD8 T hücrelerinin mitokondriyal fonksiyonunu ve biyoenerjetik profilini. Lizofosfatidik asidin metabolik esnekliği nasıl etkilediğini öğrenin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>Antimisin A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8674</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD28</td><td>Biyoefsane</td><td>102116</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD3 / CD28 Dynabeads</td><td>ThermoFisher</td><td>11456D</td><td></td></tr><tr><td>Biyotinile anti-CD3</td><td>Biolegend</td><td>317320</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu</td><td>Albümini Sigma-Aldrich</td><td>108321-42-2</td><td></td></tr><tr><td>CD8a + T hücre izolasyon kiti</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-104-075</td><td></td></tr><tr><td>Hücre Süzgeçleri (100 & mikro; m)</td> <td>HÜCRE TEDAVİSİ</td><td>229485</td><td></td></tr><tr><td>Etilendiamintetraasetik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E8008</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>26873-85-8</td><td>yoğunluk gradyan ortamı&nbsp;</td></tr><tr><td>FCCP ((4- (triflorometoksi) fenil) karbonhidrazonoil disiyanür)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>C2920</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-6152</td><td></td></tr><tr><td>Glutamin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G7513</td><td></td></tr><tr><td>LS Sütunları</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-401</td><td>Pozitif seçim sütunları</td></tr><tr><td>Manyetik hücre ayırma sütunu</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-301</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka</td><td>Agilent</td><td>102601-100</td><td></td></tr><tr><td>Oligomisin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>75351</td><td></td></tr><tr><td>Piruvat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>113-24-6</td><td></td></tr><tr><td>Rekobinant IL-2</td><td>PeproTech</td><td>200-02</td><td></td></tr><tr><td>Rotenone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R8875</td><td></td></tr><tr><td>Denizatı ortamı</td><td>Agilent</td><td>103576-100</td><td></td></tr><tr><td>Sensör kartuşu</td><td>Agilent</td><td>102601-100</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9275</td><td></td></tr><tr><td>Steril 6 oyuklu plaka</td><td>HÜCRE TEDAVİSİ</td><td>230601</td><td></td></tr><tr><td>Steril 24 oyuklu plaka</td><td>HÜCRE TEDAVİSİ</td><td>229524</td><td></td></tr><tr><td>XF Kalibrant</td><td>Agilent</td><td>102601-100</td><td></td></tr></tbody></table>

naif ve efektör cd8 t hücrelerinin mitokondriyal fonksiyonunun Ölçülmesi

Measuring Mitochondrial Function of Na&#239;ve and Effector CD8 T Cells

Glikolitik ve oksidatif metabolik kapasiteler, belirli zaman noktalarında elektron taşıma zincirinin bileşenlerini hedefleyerek kapasiteleri değerlendiren bir mitokondriyal fonksiyonel test kullanılarak ölçülebilir (Şekil 2A). Geleneksel testi değiştirmek ve akut TCR stimülasyonunu değerlendirmek için sensör kartuşu portlarına farklı enjeksiyon şemaları yüklenebilir (Şekil 2B,C). Çeşitli hücre tipleri için hücre sayısı ve ilaç konsantrasyonu, so...

Naif ve Efektör CD8 T Hücrelerinin Mitokondriyal Fonksiyonunun Ölçülmesi

Understanding how immunometabolism impacts the function, differentiation, and fate of lymphocytes has garnered significant interest and attention. ...

measuring-mitochondrial-function-of-nave-and-effector-cd8-t-cells

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Hücre-aracılı lenfositotoksisite (KML) deneyleri, in vitro otoreaktif yanıtları ve hücre ölümü çalışma mekanizmaları test etmek için kullanılabilir. Ancak, canlı hücre floresan boyalar, tipi ve hücre ölümü gibi kullanılan yollar kinetiği konfokal mikroskopik görüntüleme teknikleri kullanılarak daha ayrıntılı olarak incelenebilir.

Sitotoksik T Lenfositler Beta Hücre Ölümü aracılığı ile değerlendirin yöntemleri

Bu video, hücre dışı akı testi kullanılarak serebral vasküler endotelyal (CVE) hücrelerin mitokondriyal işlevinin değerlendirmesini göstermektedir. CVE hücreleri, hücre dışı bir akı hücre kültürü plakasında kaplanır. Hücre dışı akı sensörleri, biyoanalizöre yüklenmeden ve kalibrasyondan önce hidratlanır. Hücreleri içeren plaka daha sonra analiz için yüklenir.

Serebral vasküler endotel hücrelerinde mitokondriyal fonksiyonun değerlendirilmesi

Bu protokol, hassas, hücre bazlı bir sitotoksisite testini tanımlar. Artan sayıda efektör CD8 + T hücresinin varlığında canlı hedef CD4 + T hücrelerinin frekansındaki azalmayı numaralandırarak, bu test antijene özgü CD8 + T hücrelerinin sitolitik aktivitesinin doğrudan değerlendirilmesine izin verir.

Sitotoksik Aktiviteyi Ölçmek için Hücre Bazlı Akış Sitometrisi Testi

Burada açıklanan tespit ve akış sitometrisi ile analiz kemirgen doku ve izole mitokondri immün ile mitokondriyal dış membran proteinleri ölçmek için bir yöntemdir. Bu yöntem, mitokondriyal alt popülasyonlarının fonksiyonel özelliklerini değerlendirmek için genişletilebilir.

İzole Mitokondri Akış Sitometrisi ile Dış Zar Proteinleri imüno

Bu makalede mitokondri veya canlı hücrelerde organellerin ölçmek için güçlü bir yöntem gösterilmektedir. Primer hücre kullanarak doku örnekleri, hasat gibi karma hücre nüfus bu organelleri miktar lysosome veya mitokondri özel boyalar yüzey işaretleyicileri karşı fluorescently konjuge antikorlar ile kombinasyonu sağlar çok renkli akış sitometresi.

Çok renkli akış sitometresi tabanlı Quantification mitokondri ve T hücrelerde organellerin

Burada, sitotoksisik T lenfosit (CTL) yanıt olarak bir model tümör antijeni için immundominance muayene sağlayan bir akış sitometri tabanlı in vivo öldürme tahlil tarif. Biz bu zarif tahlil mekanik çalışmalar için ve ilaç etkinliği test için istihdam olabilir nasıl örnekler sunuyoruz.

Tümör-spesifik CD8+ T hücre tepkiler Immunodominance çalışması Için In vivo sitotoksisite assays terzilik

Burada ex vivo kültürlü hematopoetik kök hücreler ve T hücrelerinde mitokondriyal kitle ve membran potansiyelini ölçmek için güvenilir bir yöntem açıklanmaktadır.

Hematopoetik Kök Hücrelerde ve T-Hücrelerinde Mitokondriyal Kitle ve Membran Potansiyelinin Akış Sitometrisi ile Ölçülmesi

Metabolik adaptasyon, farklılaşmayı, kalıcılığı ve sitotoksisiteyi belirlediği için T hücreleri için temeldir. Burada, ex vivo sitokin farklılaşmış insan primer T hücrelerinde mitokondriyal solunumu izlemek için optimize edilmiş bir protokol sunulmaktadır.

Sitokin Diferansiye İnsan Primer T Hücrelerinde Mitokondriyal Solunumun Gerçek Zamanlı İzlenmesi

mtDNA sentezini ve dağılımını tespit etmek ve ölçmek için çok kuyucuklu bir plaka formatı ve otomatik immünofloresan görüntüleme kullanarak hücrelerdeki mitokondriyal DNA (mtDNA) metabolizmasının dinamiklerini incelemek için bir prosedür açıklanmaktadır. Bu, çeşitli inhibitörlerin, hücresel streslerin ve gen susturmanın mtDNA metabolizması üzerindeki etkilerini araştırmak için de kullanılabilir.

Mitokondriyal DNA Sentezi ve Dağılımının Yüksek Verimli Görüntü Tabanlı Nicelleştirilmesi

Bu teknik, floresan tabanlı canlı görüntüleme kullanarak HeLa hücrelerindeki mitokondriyal membran potansiyelini ve süperoksit seviyelerini görselleştirmek ve nicel olarak ölçmek için etkili bir iş akışını tanımlar.

HeLa hücrelerinde canlı görüntüleme kullanılarak mitokondriyal membran potansiyelinin ve süperoksit seviyelerinin floresan bazlı ölçümü

Bağışıklık hücrelerinde fizyolojik olarak ilgili substrat konsantrasyonları altında mitokondriyal biyoenerjetik çalışma yöntemleri sınırlıdır. İnsan T hücrelerinde, monositlerde ve periferik mononükleer hücrelerde mitokondriyal membran potansiyelinin enerji talebine tepkisindeki değişiklikleri değerlendirmek için yüksek çözünürlüklü florespirometri kullanan ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

İnsan bağışıklık hücrelerinde mitokondriyal membran potansiyelindeki dinamik değişiklikleri değerlendirmek için yüksek çözünürlüklü florespirometri

Keşfedin Mito Stress Test ile CD8 T hücrelerinin mitokondriyal fonksiyonunu ve biyoenerjetik profilini. Lizofosfatidik asidin metabolik esnekliği nasıl etkilediğini öğrenin.

Naif ve Efektör CD8 T Hücrelerinin Mitokondriyal Fonksiyonunun Ölçülmesi

Daha fazla video keşfet