Name: İn Vivo B Hücre Aktivasyonunu İnhibe Ederek ve Galaktoz Eksikliği Olan IgA1 Üretimini In Vitro Azaltarak Diosin Aracılı IgA Nefropatisinin Hafifletilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T14:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 18 s
Description: Keşfedin, dioscin'in IgA nefropatisindeki tedavi potansiyelini fare modelleri ve DAKIKI hücreleri kullanarak. Bu yöntem, bitkisel ilaçların kronik böbrek hastalığı tedavisindeki mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>İmmünoglobulin A Nefropatisinin (IgAN) Bir Murin Modelinde Diosin ile Tedavisi

<ol><li>Knoppova, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+and+activities+of+IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The origin and activities of IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy.</a> Frontiers in Immunology. 7, 117(2016).</li>
<li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+The+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of IgA nephropathy.</a> Journal of The American Society of Nephrology. 22 (10), 1795-1803 (2011).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+double-stranded+RNA+poly%28I%3AC%29+aggravates+IgA+nephropathy+by+triggering+IgA+class+switching+recombination+through+the+TLR3-BAFF+axis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Synthetic double-stranded RNA poly(I:C) aggravates IgA nephropathy by triggering IgA class switching recombination through the TLR3-BAFF axis.</a> American Journal of Nephrology. 42 (3), 185-197 (2015).</li>
<li>Zhao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+level+of+galactose-deficient+IgA1+in+the+sera+of+patients+with+IgA+nephropathy+is+associated+with+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">The level of galactose-deficient IgA1 in the sera of patients with IgA nephropathy is associated with disease progression.</a> Kidney International. 82 (7), 790-796 (2012).</li>
<li>Xing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C1GALT1+expression+is+associated+with+galactosylation+of+IgA1+in+peripheral+B+lymphocyte+in+immunoglobulin+a+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrology%22%5BJournal%5D)">C1GALT1 expression is associated with galactosylation of IgA1 in peripheral B lymphocyte in immunoglobulin a nephropathy.</a> BMC Nephrology. 21 (1), 18(2020).</li>
<li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+suppression+causes+the+low+expression+of+the+Cosmc+gene+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">External suppression causes the low expression of the Cosmc gene in IgA nephropathy.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 23 (5), 1608-1614 (2008).</li>
<li>Sakai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactobacillus+gasseri+SBT2055+induces+TGF-%CE%B2+expression+in+dendritic+cells+and+activates+TLR2+signal+to+produce+IgA+in+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lactobacillus gasseri SBT2055 induces TGF-β expression in dendritic cells and activates TLR2 signal to produce IgA in the small intestine.</a> PLoS One. 9 (8), 105370(2014).</li>
<li>Gutzeit, C., Magri, G., Cerutti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+IgA+production+and+its+role+in+host-microbe+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Intestinal IgA production and its role in host-microbe interaction.</a> Immunological Reviews. 260 (1), 76-85 (2014).</li>
<li>Serino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+a+retrospective+international+study%2C+circulating+miR-148b+and+let-7b+were+found+to+be+serum+markers+for+detecting+primary+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">In a retrospective international study, circulating miR-148b and let-7b were found to be serum markers for detecting primary IgA nephropathy.</a> Kidney International. 89 (3), 683-692 (2016).</li>
<li>Lu, F., et al. Therapeutic effect of Rhizoma Dioscoreae Nipponicae on gouty arthritis based on the SDF-1/CXCR 4 and p38 MAPK pathway: an in vivo and in vitro study. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLu%2C+F+%22Phytotherapy+research%3A+PTR%22">Phytotherapy research: PTR</a>. 28 (2), 280-288 (2014).</li>
<li>Wang, W., Xu, L., Zhou, L., Wan, S., Jiang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Network+pharmacology+approach+to+reveal+the+underlying+mechanisms+of+Rhizoma+Dioscoreae+Nipponicae+in+the+treatment+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%3A+eCAM%22%5BJournal%5D)">A Network pharmacology approach to reveal the underlying mechanisms of Rhizoma Dioscoreae Nipponicae in the treatment of asthma.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2022, 4749613(2022).</li>
<li>Tian, W. W., Wei, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Professor+TONG+Xiaolin+used+the+experience+of+Dioscoreae+Nipponicae%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Professor TONG Xiaolin used the experience of Dioscoreae Nipponicae.</a> Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (05), 589-592 (2020).</li>
<li>Rao, X. R., Bai, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Das+Xiwen%27s+experience+in+treating+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Beijing+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Das Xiwen's experience in treating IgA nephropathy.</a> Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. 9, 691-693 (2008).</li>
<li>Si, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+data+mining+study+on+the+pattern+of+medication+use+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy+by+Professor+Zhang+Yu%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chinese+Physician%22%5BJournal%5D)">A data mining study on the pattern of medication use in the treatment of IgA nephropathy by Professor Zhang Yu.</a> Journal of Chinese Physician. 20 (01), 109-111 (2018).</li>
<li>Jiang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+enzymatic+extraction+technology+of+Diosgenin+from+Dioscorea+nipponica%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Traditional+Patent+Medicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of the enzymatic extraction technology of Diosgenin from Dioscorea nipponica.</a> Chinese Traditional Patent Medicine. 39 (03), 621-624 (2017).</li>
<li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dioscin+alleviates+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+kidney+injury+via+the+microRNA+let-7i%2FTLR4%2FMyD88+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Dioscin alleviates lipopolysaccharide-induced inflammatory kidney injury via the microRNA let-7i/TLR4/MyD88 signaling pathway.</a> Pharmacological Research. 111, 509-522 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pharmacological+activities+of+Dioscin%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pharmacological activities of Dioscin.</a> BioMed Research International. 2019, 5763602(2019).</li>
<li>Nal Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4+signaling+pathway+in+the+protective+effect+of+Pioglitazone+on+experimental+immunoglobulin+A+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4 signaling pathway in the protective effect of Pioglitazone on experimental immunoglobulin A nephropathy.</a> Chinese Medical Journal. 130 (8), 906-913 (2017).</li>
<li>Xu, S. Y., Bian, R. L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+experiments+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Pharmacological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pharmacological experiments methodology.</a> Chinese Pharmacological Bulletin. 1, 19(1992).</li>
<li>Shen, J. C., Ren, Y., Rao, X. R., You, Y., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+pharmacology%2C+molecular+docking%2C+and+in+vitro+experiments+to+explore+the+molecular+mechanism+of+Dioscorea+Nipponica+Makion+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Network pharmacology, molecular docking, and in vitro experiments to explore the molecular mechanism of Dioscorea Nipponica Makion in the treatment of IgA nephropathy.</a> World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 16 (12), 2246-2254 (2021).</li>
<li>Mestecky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA+nephropathy%3A+molecular+mechanisms+of+the+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">IgA nephropathy: molecular mechanisms of the disease.</a> Annual Review of Pathology. 8, 217-240 (2013).</li>
<li>Novak, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy+differentially+affect+proliferation+of+mesangial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy differentially affect proliferation of mesangial cells.</a> Kidney International. 67 (2), 504-513 (2005).</li>
<li>Nihei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+IgA+autoantibodies+targeting+mesangial+cells+redefines+the+pathogenesis+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Identification of IgA autoantibodies targeting mesangial cells redefines the pathogenesis of IgA nephropathy.</a> Science Advances. 9 (12), (2023).</li>
<li>Raska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+CMP-NeuAc%3A+GalNAc-IgA1+alpha2%2C6-sialyltransferase+in+IgA1-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of CMP-NeuAc: GalNAc-IgA1 alpha2,6-sialyltransferase in IgA1-producing cells.</a> Journal of Molecular Biology. 369 (1), 69-78 (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-CD20/MS4A1 Antikoru</td><td>Boster Biyoteknoloji Şirketi</td><td>A03780-3</td><td></td></tr><tr><td>Antifade montaj ortamı</td><td>Beyotime, Şangay, Çin</td><td>P0128S</td><td></td></tr><tr><td>Balb/c fareleri</td><td>Pekin Weitong Lihua Laboratuvar Hayvanları Teknolojisi Co., Ltd.</td><td></td><td></td>110322220101424000</tr><tr><td>bloke edici serum</td><td>Solarbio, Pekin, Çin</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>Sığır gama globulini</td><td>ShangHai YuanYe Biyoteknoloji Şirketi</td><td>S12031</td><td></td></tr><tr><td>C1GALT1 poliklonal antikor</td><td>Proteintech Group, Inc, ABD</td><td>27569-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Sitrat antijen alma çözeltisi (50 kez;)</td><td>Figene Biyoteknoloji Şirketi</td><td>PH0422</td><td></td></tr><tr><td>COSMC poliklonal antikor</td><td>Proteintech Group, Inc, ABD</td><td>19254-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Sitotoksiy tespit kiti</td><td>Roche Company</td><td>4744926001</td><td></td></tr><tr><td>Dako REAL EnVision algılama sistemi, Peroksidaz/DAB+</td><td>Dako</td><td>K5007</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dioscin</td><td>Ulusal Gıda ve İlaç Kontrol Enstitüsü</td><td>111707-201703</td><td></td></tr><tr><td>DIO tabletleri</td><td>Chengdu No 1 Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td></td><td></td>H51023866</tr><tr><td>ECL çalışma çözümü</td><td>Merck Biotechnology, Inc</td><td>WBKLS0100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Gelişmiş hücre sayma kiti-8</td><td>Beyotime, Şangay, Çin</td><td>C0043</td><td></td></tr><tr><td>Maskeleme geninin tek adımda çıkarılması cDNA birinci iplikli sentez premiksi</td><td>TIANGEN, Pekin, Çin</td><td>KR118-02</td><td></td></tr><tr><td>Glikojen Periyodik asit Schiff (PAS) boyama kiti ve nbsp;</td><td>BaSO Biyoteknoloji Şirketi</td><td>BA4080A</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti-fare IgA-AF488</td><td>SouthernBiotech</td><td>1040-30</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan IgG antikoru (H + L), HRP konjuge</td><td>Pekin Bioss Biyoteknoloji Şirketi</td><td>BS-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>İnsan Gd-IgA1 ELISA kiti</td><td>IBL</td><td>27600</td><td></td></tr><tr><td>İnsan IgA ELISA kiti</td><td>MultiSciences (LiankeBio)</td><td>70-EK174-96</td><td></td></tr><tr><td>Pierce BCA protein test kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>PMSF çözeltisi</td><td>Beyotime, Şangay, Çin</td><td>ST507</td><td></td></tr><tr><td>Proteinaz K&nbsp;</td><td>Figene Biyoteknoloji Şirketi</td><td>PH1521</td><td></td></tr><tr><td>Tavşan anti-CXCR5 poliklonal antikoru&nbsp;</td><td>Pekin Bioss Biyoteknoloji Şirketi</td><td>bs-23570R</td><td></td></tr><tr><td>RIPA lizis tamponu</td><td>Beyotime, Şanghay, Çin</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>RNAsimple toplam RNA ekstraksiyon kiti</td><td>TIANGEN, Pekin, Çin</td><td>DP419</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Orta 1640</td><td>Solarbio, Pekin, Çin</td><td>31800</td><td></td></tr><tr><td>Süper Bradford protein test kiti</td><td>CWBIO, Pekin, Çin</td><td>CW0013</td><td></td></tr><tr><td>Triton&nbsp; X-100</td><td>Beyotime, Şangay, Çin</td><td>ST795</td><td></td></tr> <tr><td>ve beta; -Aktin Tavşan mAb</td><td>Abclonal, Wuhan, Çin</td><td>AC026</td><td></td></tr></tbody></table>

İn vivo b hücre aktivasyonunu İnhibe ederek ve galaktoz eksikliği olan iga1 Üretimini in vitro azaltarak diosin aracılı iga nefropatisinin hafifletilmesi

Dioscin Mediated IgA Nephropathy Alleviation by Inhibiting B Cell Activation In Vivo and Decreasing Galactose-Deficient IgA1 Production In Vitro

IgAN fare modelinde DIO'nun böbrek dokusu üzerindeki etkisi
Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, mukozal immün kaynaklı IgAN fare modeli (model grubu) proteinüride önemli bir artışa sahipti (Ek Şekil 2), mezanjiyal bölgede IgA birikimi görüldü, floresan tüm mezanjiyal bölge boyunca kümeler halinde eşit olarak dağıldı (Şekil 1A), böbrek dokusunun PAS boyaması mezanjiyal hücrelerin proliferasyonu ve stromal hiperplazi gösterdi (Şekil 1B), DIO gavaj grubunda (DIO grubu) azaltıldı.
DIO'nun Peyer yamasında B lenfositleri üzerindeki etkisi
Peyer yaması, B lenfositlerinin IgA salgılayan hücrelere dönüşümünün önde gelen bölgesidir. B hücre belirteçleri CD20 ve CXCR5'in ekspresyonunu tespit ederek DIO'nun B lenfositleri üzerindeki etkisini gözlemlemek için Peyer'in yamasını araştırma nesnesi olarak aldık. İmmünohistokimyasal sonuçlar, CD20 ve CXCR5 ekspresyonunun model grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha yüksek olduğunu gösterdi. DIO, yukarıdaki moleküler belirteçlerin ekspresyonunu inhibe edebilir (Şekil 2A, B).
DIO'nun DAKIKI hücreleri üzerindeki güvenli konsantrasyon aralığı
LDH, plazma zarı bütünlüğünün bir belirteci ve hücre ölümünün bir göstergesidir, daha yüksek LDH salınım oranları daha ciddi hücre hasarını gösterir. LDH salınım testi, DIO'nun güvenli konsantrasyon aralığını belirlemek için kullanıldı. Maksimum güvenli DIO konsantrasyonu, 'un altında bir LDH salınım oranı ile belirlendi. Sonuçlar (Şekil 3), 0.25 ila 1.0 μg / mL konsantrasyonlarda DIO tarafından indüklenen önemli bir sitotoksisite göstermedi. Bu nedenle, aşağıdaki çalışmada dozlama seviyesi olarak 0.25, 0.5 ve 1.0 μg/mL DIO kullanılmıştır.
DIO'nun DAKIKI hücre proliferasyonu üzerindeki etkileri
Deneysel sonuçlar (Şekil 4), model grubu (LPS ile uyarılan grup) ile karşılaştırıldığında, DIO'nun LPS ile indüklenen DAKIKI hücre proliferasyonunu konsantrasyona bağlı bir şekilde inhibe ettiğini göstermiştir. 0.5 ve 1.0 μg / mL konsantrasyonlarında DIO, LPS'nin neden olduğu DAKIKI hücre proliferasyonunu önemli ölçüde inhibe etti (P &lt; 0.01).
DIO'nun DAKIKI hücrelerinin salgılama fonksiyonu üzerindeki etkileri
Gd-IgA1 düzeyleri IgAN'ın patolojik süreci ile yakından ilişkilidir ve total IgA, hücresel sekretuar fonksiyonun bir göstergesi olarak birlikte test edilir. DAKIKI hücre kültürünün süpernatantındaki IgA ve Gd-IgA1 içeriğini tespit etmek için bir ELISA testi kullanıldı. Sonuçlar (Şekil 5A,B) LPS tarafından uyarılan DAKIKI hücrelerinin kontrol grubuna kıyasla daha fazla IgA salgıladığını gösterdi (P &lt; 0.01). Buna karşılık, DIO, DAKIKI hücrelerinin konsantrasyona bağlı bir şekilde IgA (P &lt; 0.01) salgılamasını önemli ölçüde inhibe etti. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, LPS tarafından uyarılan DAKIKI hücreleri, istatistiksel bir eğilimle daha fazla Gd-IgA1 salgıladı (P &lt; 0.10) ve DIO, LPS ile uyarılan DAKIKI hücrelerinden konsantrasyona bağlı bir şekilde Gd-IgA1 sekresyonunu inhibe etti (P &lt; 0.05 ve P &lt; 0.01), bunların arasında 1.0 μg / mL'de DIO, Gd-IgA1'in salgılanmasını %'lik inhibe oranı ile önemli ölçüde inhibe etti.
DIO mekanizması, DAKIKI hücreleri tarafından Gd-IgA1 sekresyonunu inhibe eder
DIO'nun DAKIKI hücreleri tarafından aşırı Gd-IgA1 sekresyonunu inhibe etmesinin olası mekanizmasını daha fazla araştırmak için, DAKIKI hücrelerinde glikosile transferaz C1GALT1 ve şaperon proteini Cosmc mRNA seviyeleri qRT-PCR ile tespit edildi ve sonuçlar (Şekil 6A,B) C1GALT1 ve Cosmc'nin nispi mRNA ekspresyonunun model grubundaki DAKIKI hücrelerinde kontrol grubuna kıyasla aşağı regüle olduğunu gösterdi (P &lt; 0.01). DIO, C1GALT1 ve Ccosmc'nin nispi mRNA ekspresyonunu model grubuna kıyasla farklı derecelerde yukarı regüle etti, DIO 1.0 μg /mL ile C1GALT1 ve Cosmc'nin nispi mRNA ekspresyonunu önemli ölçüde yukarı regüle etti (P &lt; 0.05).
Aynı zamanda, DIO'nun DAKIKI hücrelerinde C1GALT1 ve Cosmc'nin protein ekspresyonu üzerindeki etkisini tespit etmek için WB yöntemi kullanılmıştır. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki DAKIKI hücrelerinde C1GALT1 ve Cosmc protein ekspresyonu belirgin bir şekilde azalmıştır (P &lt; 0.05). Model grubu ile karşılaştırıldığında, DIO müdahalesinden sonra C1GALT1 ve Cosmo'nun protein ekspresyonu yukarı regüle edildi. C1GALT1 ve Cosmc'nin protein ekspresyonu, 1.0 μg / mL'lik bir konsantrasyonda DIO tarafından önemli ölçüde yukarı regüle edildi (P &lt; 0.05) (Şekil 7A-C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig1.jpg"> Şekil 1: Böbreklerin histopatolojisi. (A) İmmünofloresan mikroskobu. Her gruptaki farelerin böbrek bölümleri anti-IgA (yeşil) ve DAPI (mavi) ile boyandı. Yukarıdaki resim ölçek çubuğu = 200 μm. Aşağıdaki resim ölçek çubuğu = 50 μm. n = grup başına 6. (B) Kontrol, Model ve DIO gruplarındaki farelerden böbrek dokusunun PAS boyamasının temsili resimleri. Ölçek çubuğu = 30 μm. Aşağı ok mezanjiyal hücreleri gösterir ve yukarı ok stroma'yı gösterir. Ölçek çubuğu = 30 μm. n = grup başına 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig2.jpg"> Şekil 2: DIO'nun B lenfosit belirteçleri üzerindeki etkisi. (A) Peyer yamasında CD20'nin ekspresyonu. Ölçek çubuğu = 200 μm. n = grup başına 6. (B) Peyer'in yamasında CXCR5'in ifadesi. Ölçek çubukları görüntünün sağ alt köşesindedir. Ölçek çubuğu = 200 μm. n = grup başına 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig3.jpg"> Şekil 3. DAKIKI hücreleri üzerindeki güvenli DIO konsantrasyonunun taranması. İstatistiksel değerler, üç bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± SD olarak ifade edilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig4.jpg"> Şekil 4. Farklı DIO konsantrasyonları DAKIKI hücrelerinin proliferasyonunu etkiler. Veriler ortalama ±SD. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, **P &lt; 0.01; model grubuyla karşılaştırıldığında, #P &lt; 0.05' ##P &lt; 0.01; Tüm deneylerin sonuçları üç kez tekrarlandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig5.jpg"> Şekil 5. DIO, DAKIKI hücreleri tarafından IgA ve Gd-IgA1 sekresyonunu inhibe eder. (A) ELISA yöntemi her grupta IgA ekspresyonunu tespit etti. (B) ELISA yöntemi her grupta Gd-IgA1 ekspresyonunu tespit etti. Veriler ortalama ± SD olarak ifade edildi. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, **P &lt; 0.01; model grubu ile karşılaştırıldığında, #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01; Tüm deneysel sonuçlar üç kez tekrarlandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig6.jpg"> Şekil 6. DIO mekanizması, DAKIKI hücreleri tarafından aşırı Gd-IgA1 salgılanmasını inhibe eder. (A) QRT-PCR, C1GALT1'ın mRNA ekspresyonunu tespit etti. (B) QRT-PCR, Cosmc'nin mRNA ekspresyonunu tespit etti. Veriler ortalama ± SD olarak ifade edildi. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, **P&lt;0.01; model grubuyla karşılaştırıldığında, #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01; Tüm deneysel sonuçlar üç kez tekrarlandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig7.jpg"> Şekil 7. DIO, DAKIKI hücrelerinde C1GALT1 ve Cosmc'nin protein ekspresyonunu etkiler. (A) WB, C1GALT1 ve Cosmo'nun protein ekspresyonunun DIO tarafından yukarı regülasyonunu doğruladı. (B) C1GALT1 ifadesinin yarı kantitatif analizi Resim J kullanılarak gerçekleştirilmiştir. (C) Cosmc ekspresyonunun yarı kantitatif analizi Resim J kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Veriler ortalama ±SD. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında,*P &lt; 0.05; model grubu ile karşılaştırıldığında, #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01, tüm deneysel sonuçlar üç kez tekrarlandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Ek Şekil 1. İn vivo modelin şeması. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_1.pdf" target="_blank">Bu rakamı indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Ek Şekil 2. Proteinürideki değişiklikler. Veriler ortalama ± SD olarak ifade edildi; n = grup başına 6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_2.jpg" target="_blank">Bu rakamı indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>

İn Vivo B Hücre Aktivasyonunu İnhibe Ederek ve Galaktoz Eksikliği Olan IgA1 Üretimini In Vitro Azaltarak Diosin Aracılı IgA Nefropatisinin Hafifletilmesi

The increase of circulating galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1) is caused by excessive activation of IgA-positive secretory cells in the process of mucosal ...

dioscin-mediated-iga-nephropathy-alleviation-inhibiting-b-cell

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu protokol, CD4+ T hücreleri ve sitokinlerde insan romatoid artritine daha yakın romatoid artrit modelleri oluşturmak için G6PI karışık peptidler kullanır. Yüksek saflıkta değişmez doğal katil T hücreleri (özellikle iNKT2) belirli fenotip ler ve fonksiyonlar ile in vivo indüksiyon ve in vitro saflaştırma ile benimseyici immünoterapi elde edildi.

Glukoz-6-Fosfat İzomazlarında (G6PI)-Indüklenen RA Farelerde iNKT Hücrelerinin Benimseyici İmmünoterapisi

Burada bağırsak-homing düzenleyici T hücre indüksiyon invivo büyütme için bir protokol sıyoruz. Bu protokolde, dendritik hücreler lokal olarak aktif D vitamini (1,25-dihidroksivitamin D veya 1,25[OH]2D) ve aktif A vitamini (retinoik asit veya RA) de novo yüksek konsantrasyonlarda üretmek için tasarlanır.

Bağırsak-Homing Düzenleyici T Hücre İndüksiyon In Vivo Augmentation

mikroRNA'lar IgA nefropatisinin patogenezinde rol oynarlar. Bir IgA nefropati fare modelinin (HIGA fareleri) böbreklerindeki mikroRNA ekspresyon seviyelerini tespit etmek için güvenilir bir yöntem geliştirdik. Bu yeni yöntem, IgA nefropatisinde miRNA tutulumunu kontrol etmeyi kolaylaştıracaktır.

İmmünoglobulin A Nefropatik Farelerin Böbreklerinde MikroRNA Ekspresyonunun Tespiti

Oküler yüzey iltihabı oküler yüzey dokularına zarar verir ve gözün hayati fonksiyonlarını tehlikeye atar. Mevcut protokol, oküler inflamasyonu indüklemek ve Meibomian bezi disfonksiyonunun (MGD) bir fare modelinde tehlikeye atılmış dokuları toplamak için bir yöntemi açıklamaktadır.

Oküler Yüzey Enflamasyonunun İndüklenmesi ve Tutulan Dokuların Toplanması

Burada, diyabetik nefropati tedavisinde Jiawei Shengjiang San'ın (JWSJS) etki mekanizmasını keşfetmek için ağ farmakolojisi ve moleküler yerleştirme tekniklerini tanımlayan bir protokol sunuyoruz.

Jiawei Shengjiang San'ın Diyabetik Nefropatinin Sıçan Modeli Üzerindeki Antagonistik Etkisi: EGFR / MAPK3 / 1 Sinyal Yolu ile İlgili

Mevcut protokol, bir membranöz nefropati (MN) hayvan modelinin kurulmasını ve Kemeng Fang'ın inhibisyonunun PI3K / AKT sinyal yolunu aktive ederek MN sıçan podosit apoptozunu nasıl azalttığını açıklamaktadır.

Kemeng Fang'ın PI3K / AKT Sinyal Yolu ile Membranöz Nefropatili Sıçanlarda Podosit Apoptozunu İnhibisyon Mekanizması

Burada hücreler reaktif oksijen türlerinin varlığını test etmek ve değerlendirmek için basit yöntemler öneriyoruz.

Kanserler Üretim ve reaktif oksijen türlerinin (ROS Algılama)

Ex vivo olarak etiketlenmiş hücreler ile bir fare modelinde, MRI kullanılarak in vivo hücre takibi için genel bir protokol açıklar. Hücre etiketleme, görüntü alma ve işleme ölçümü için tipik bir protokol dahildir.

Hücre Takip için vivo 19 F MRG

Ince bağırsak sık sık kan akışını etkileyen ve olumsuz besin emilimini etkileyebilir toksinler maruz kalmaktadır. , Bileşikleri veya ilgi duyulan bir toksin multimyograph ve mezenterik arter ve damar izole kullanarak vazoaktiviteye için taranabilir.

Bir Biyoassay olarak Sığır Mezenterik Arter ve Ven Bölüm yalıtma ve kullanma İnce Barsak vazoaktiviteye için Test

Bu el yazması, hamilelik sırasında rahim içi basınçları ölçmek amacıyla fareye telemetre yerleştirmek için bir protokol sağlar.

Rahim içi Telemetri Fare Kontraktil Basıncını Ölçmek<em&gt; İn Vivo</em

Keşfedin, dioscin'in IgA nefropatisindeki tedavi potansiyelini fare modelleri ve DAKIKI hücreleri kullanarak. Bu yöntem, bitkisel ilaçların kronik böbrek hastalığı tedavisindeki mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

İn Vivo B Hücre Aktivasyonunu İnhibe Ederek ve Galaktoz Eksikliği Olan IgA1 Üretimini In Vitro Azaltarak Diosin Aracılı IgA Nefropatisinin Hafifletilmesi (Video) | JoVE Journal

İn Vivo B Hücre Aktivasyonunu İnhibe Ederek ve Galaktoz Eksikliği Olan IgA1 Üretimini In Vitro Azaltarak Diosin Aracılı IgA Nefropatisinin Hafifletilmesi

Daha fazla video keşfet