İki Cinsiyette Multipl Sklerozun Modellenmesi: MOG35-55 ile İndüklenen Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit
13 Ekim 2023
Deneysel otoimmün ensefalomiyelit, multipl sklerozun en yaygın kullanılan murin modellerinden biridir. Mevcut protokolde, her iki cinsiyetten C57BL / 6J fareleri, miyelin oligodendrosit glikoprotein peptidi ile aşılanır ve bu da esas olarak kuyruk ve uzuvların artan parezi ile sonuçlanır. Burada EAE indüksiyonu ve değerlendirme protokolünü tartışıyoruz.
Araştırmamız, periferik immün aracılı mekanizmanın anlaşılmasını önemli ölçüde duyurabilen ve nöroinflamatuar ve kısmen tanımlayıcı süreçleri değerlendirebilen deneysel otoimmün ensefalomiyelit veya EAE modeline odaklanmaktadır. Bu model aynı zamanda çok çeşitli terapötik ilaçları geliştirmek ve test etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Multipl sklerozun etiyolojisinin bilinmemesi ve karmaşıklığı nedeniyle, şu anda hiçbir hayvan modeli insanlarda görülen tüm klinik ve radyolojik özellikleri özetlememektedir.
Bu nedenle, araştırmacıların belirli bir deneysel soru için en uygun hayvan modelini seçmeleri oldukça zordur. EAE, multipl sklerozun yaygın olarak kullanılan bir modelidir. Bununla birlikte, birkaç konu yapmak için, sadece bu modeli uygulayan bazı çalışmalar her iki cinsiyeti de dikkate aldı.
Protokolümüzle, bu modelde yapılan çalışmaya her iki cinsiyeti de dahil etme olasılığının hafif olmasını istiyoruz. Spesifik olarak, protokolümüz iki yönteme dayalı bir klinik değerlendirme önerdi: klinik skor değerlendirmesi ve rotator testi, hastalık seyrinin daha nicel, daha az öznel ve daha kesin bir klinik değerlendirmesine yol açtı. Bu model multipl sklerozun cinsel dimorfizmini tamamen yeniden üretmese de, potansiyel avantajları vardır.
İndüksiyonun diğer olası risk faktörleriyle, özellikle çevresel olanlarla kombinasyonu, bu faktörlerin spesifik etkilerinin anlaşılmasında ve hastalığın bazı cinsel olarak dimorfik yönlerinde spesifik rolün belirlenmesinde sona erebilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, multipl sklerozun yaygın olarak kullanılan bir fare modeli olan deneysel otoimmün ensefalomiyelite (EAE) odaklanmaktadır. Her iki cinsiyetten C57BL/6J fareleri, miyelin oligodendrosit glikoprotein peptidi ile immünize edilerek nöroinflamatuar süreçlerin incelenmesine ve terapötik ilaçların test edilmesine olanak sağlanır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- İmmünoloji
- Nöroenflamasyon
Arka Plan
- Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE), multipl sklerozun anlaşılması için bir model görevi görür.
- Model, immün aracılı mekanizmaların ve terapötik seçeneklerin değerlendirilmesine yardımcı olur.
- Hastalık seyirindeki cinsiyet farklılıklarının araştırılmasına olanak tanır.
- Bu model, insan hastalığı özelliklerini tamamen taklit etme konusunda sınırlılıklara sahiptir.
Çalışmanın Amacı
- Araştırmalarda her iki cinsiyeti de kapsayan bir EAE indüksiyonu protokolü sağlamak.
- Klinik skor değerlendirmesi ve rotarod testleri kullanarak klinik değerlendirmelerin doğruluğunu artırmak.
- Hastalık ilerlemesinde çevresel risk faktörlerinin rolünü araştırmak.
Kullanılan Yöntemler
- Ana platform, C57BL/6J farelerinin MOG 35-55 peptidi ile immünize edilmesini içerir.
- EAE'deki cinsiyet farklarının değerlendirilmesi için her iki cins fare de çalışmaya dahil edilir.
- İmmünizasyon sonrası günlük klinik skorlama ve rotarod performans değerlendirmeleri gerçekleştirilir.
- Motor fonksiyonu zaman içinde değerlendirmek için rotarod seanslarının zorluğu artırılır.
- Körleme yöntemi kullanan araştırmacılar, klinik seyri 0 ile 5 arasındaki bir ölçekte skorlar.
Ana Sonuçlar
- Her iki cinsiyette de klinik skorlar zamanla artış göstermiş; dişiler daha yüksek skorlar almış olsa da bu fark anlamlı bulunmamıştır.
- Rotarod testlerinde erkekler, özellikle hastalığın kronik evresinde, dişilere göre daha iyi performans göstermiştir.
- Veriler, dişilerin hastalığın daha erken evrelerinde belirtiler gösterebileceğini desteklemektedir.
- Bulgular, cinsiyetler arasında hastalık seyri açısından potansiyel farklılıkların olduğunu vurgulamaktadır.
Sonuçlar
- Bu çalışma, her iki cinsiyeti de kapsayan bir EAE inceleme yöntemi sunarak multipl sklerozla ilgili anlayışı geliştirmektedir.
- Bulgular, EAE'de hastalık seyri ve motor performans açısından cinsiyete bağlı önemli farklılıklar olduğunu göstermektedir.
- Bu çalışma, multipl skleroz modelleriyle ilişkili karmaşıklıkların anlaşılmasına katkıda bulunmaktadır.
Sıkça Sorulan Sorular
Yürütücü Endüstriyel Uygunluk
Her iki cinsiyette de MOG35-55-indüklenmiş deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) kullanarak multipl sklerozun (MS) modellenmesi, biyofarma ekiplerinin cinsiyete özgü hastalık mekanizmalarını ve nöroinflamatuar yolakları incelemesine olanak tanır. Bu yaklaşım, erken keşif aşamasında öngörüye dayalı güveni destekler ve heterojen otoimmün MSS bozukluklarında terapötik hedefleme için riskle uyumlu kararlar alınmasına yardımcı olur. Hem erkek hem de dişi modellerin dahil edilmesi, MS ilaç keşfi için translasyonel uygunluğu ve portföy uyumunu artırır.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Her iki cinsiyette MS patogenezinin altında yatan immün aracılı mekanizmaların sorgulanmasına olanak tanır.
- Nöroinflamatuar ve demiyelinize süreçleri niceliklendirerek fonksiyonel hedef doğrulamasını destekler.
- Cinsiyete özgü hastalık ilerlemesinin karşılaştırmalı analizi yoluyla mekanistik risk azaltmayı kolaylaştırır.
- Otoimmün MSS endikasyonlarında aday seçiminin öngörülebilir güvenilirliğini artırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Nöroinflamasyonu hedefleyen terapötik müdahaleleri değerlendirmek için valide edilmiş bir in vivo sistem sağlar.
- Tekrarlanabilir kantitatif çıktılar için klinik skorlama ve motor performans analizlerini standartlaştırır.
- Güçlü bileşik değerlendirmelerini desteklemek amacıyla, hastalık seyrinin körleme ve objektif değerlendirmesine olanak tanır.
- MS ile ilgili modellerde immünomodülatör ajanların taranması için ölçeklenebilir bir platform hazırlar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Cinsiyeti biyolojik bir değişken olarak dahil ederek preklinik modelleri insan hastalıklarının heterojenliği ile uyumlu hale getirir.
- MS ve ilgili nöroinflamatuar bozukluklar için keşif aşamasından preklinik doğrulamaya kadar olan sürekliliği destekler.
- Cinsiyete özgü etkinlik ve güvenlik profillerine dayalı, riske göre ayarlanmış ilerleme kararlarına olanak tanır.
- Kantitatif davranışsal ve histolojik son noktalar aracılığıyla translasyonel biyobelirteç geliştirmeyi kolaylaştırır.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu EAE modeli, hedef doğrulama, öncü bileşik belirleme ve MS terapötikleri için translasyonel araştırmaları destekleyerek, erken keşif ile preklinik evreler arasındaki süreklilikte yer alır.
- Keşif Biyolojisi: Her iki cinsiyette de immün ve nöroinflamatuar yolakların hipotez testlerini mümkün kılar.
- Tarama: Bileşik değerlendirmesi için tekrarlanabilir klinik ve motor performans verileri sağlar.
- Analitikler: Karşılaştırmalı analiz için kantitatif klinik skorlar ve rotarod latans ölçümleri sunar.
- Translasyonel Araştırma: Cinsiyete özgü hastalık özelliklerini modelleyerek keşif bulgularını preklinik doğrulamaya taşır.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: MS ve diğer otoimmün MSS hastalık programları için yeniden kullanılabilir bir in vivo platform oluşturur.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: MS hedef doğrulamasında öngörüsel güveni artırır ve mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: İn vivo nöroinflamatuar modellerin standardizasyonunu, tekrarlanabilirliğini ve ölçeklenebilirliğini geliştirir.
- Stratejik Değer: Hastalık heterojenliğini modelleyerek karar alma (devam/durdur) süreçlerine ve sermaye tahsisine ışık tutar.
- Portföy Etkisi: MS ve nöroinflamasyon varlıklarının riskten arındırılmış önceliklendirilmesini ve ilerletilmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Nöroimmünoloji ve in vivo davranışsal değerlendirme konularında uzmanlık gerektirir.
- Hayvan tesislerine, rotarod cihazına ve körleme puanlama protokollerine erişim gerektirir.
- Klinik ve motor performans analizlerinin ekipler arası standartlaştırılmasını gerektirir.
- Farklı fare soylarına veya çevresel risk faktörlerine yapılan adaptasyonlar model sadakatini etkileyebilir.
- Model, tüm insan MS özelliklerini tam olarak yansıtmadığından doğrudan klinik çeviri imkanları sınırlıdır.
Biyofarma SSS
Chapters in this video
0:00
Introduction
2:05
Preparation of MOG35‐55 Emulsion for Immunization of Mouse
3:02
Immunization of Mouse with MOG35‐55 to Induce Experimental Autoimmune Encephalomyelitis
3:53
Clinical Score and Motor Performance Evaluation of Mouse Induced with ExperimentalAutoimmune Encephalomyelitis
